Аденовирусный гидроперикардит у кур
Обновлено: 18.04.2024
Таймасуков А.А. ОАО "Компания Кубаньптицепром"
Аденовирусный гидроперикардит бройлеров - остропротекающее и высоко контагиозное вирусное заболевание преимущественно бройлеров 3-5-тинедельного возраста, характеризующееся накоплением в перикарде транссудата, гепатитом, асцитом и нефрозо-нефритом. Степень тяжести болезни в естественных условиях зависит от влияния некоторых иммунодепрессивных инфекций, таких как инфекционная бурсальная болезнь (болезнь Гамборо), болезнь Марека и инфекционная анемия цыплят.
В настоящее время, во многих хозяйствах аденовирусный гидроперикардит начинает проявляться у 24-28 - дневных, а иногда у более молодых бройлеров, в свою очередь, провоцируя болезнь Гамборо или ухудшая формирование поствакцинального иммунитета против данного заболевания, а также Ньюкаслской болезни, инфекционного бронхита кур и других болезней. Источником инфекции является больная и переболевшая птица. Вирус передается аэрогенно, алиментарно и трансовариально. Возбудитель распространяется с воздухом, водой, кормом, предметами ухода, контактно, "с помощью" обслуживающего персонала. Переносчиками возбудителя инфекции могут быть дикие и синантропные птицы, насекомые и иксодовые клещи, а также простейшие микроорганизмы, в том числе кокцидии. Птицы родительского стада могут быть инфицированы аденовирусом перед началом или в процессе яйцекладки, что обуславливает интенсивную трансовариальную передачу возбудителя.
Аденовирусы птиц, по данным профессора В.А.Бакулина, условно дифференцированы на 3 группы. В первую группу входят 12 серотипов аденовирусов кур и других птиц, которые имеют общий группоспецифический преципитирующий антиген, например возбудители "CELO - инфекции", бронхита перепелов, панкреатита цесарок гепатита с включениями - гидроперикардита кур. Ко второй группе относятся аденовирусы, обладающие гемаглютинирующим антигеном и имеющие общий с первой группой преципитирующий антиген, в том числе аденовирус "Синдрома снижения яйценоскости-76 (ССЯ-76)". В третью группу включены аденовирусы с группоспецифическим преципитирующим антигеном, отличающимся от таковых первых двух групп - аденовирусы геморрагического энтерита индеек и болезни "мраморной селезенки" фазанов. В промышленных птицеводческих хозяйствах аденовирусы распространены повсеместно. Любые из имеющихся 13 серотипов аденовирусов в различных сочетаниях могут циркулировать в одном хозяйстве, а также в организме одной внешне здоровой птицы [3].
Инкубационный период при заражении аденовирусом составляет 24-72 часа. Наиболее часто аденовирусный гидроперикардит бройлеров связан с застойными явлениями в сердце и с гидремией, приводящих к анемии. При экспериментальном заражении цыплята угнетены, взъерошены, "не держат крылья", возможна анемия, диарея с выделением фекалий с примесью уратов, отсутствие реакции на внешние раздражители. Максимальная смертность птиц на 2-4 день после заражения. Общая смертность цыплят-бройлеров может достигать до 75-85%. При хроническом или субклиническом течении клинические признаки незначительные или отсутствуют. Смертность составляет 1-7%.
При вскрытии трупов павших бройлеров обнаруживают желтоватое окрашивание подкожной клетчатки и внутреннего жира, очаговые кровоизлияния в мышцах, скопления в сердечной сорочке от 5 до 20 мл. серозного транссудата соломенно-желтого цвета водянистой или желеподобной консистенции. У экспериментально зараженных цыплят иногда наблюдается появление небольшого количества асцитной жидкости.
Сердце деформированное и дряблое, с точечными кровоизлияниями в миокарде, особенно на верхушке сердца и в ушках предсердий. Легкие уплотнены и отечны, в некоторых случаях с наличием серозной жидкости. Печень увеличена, с очагами некроза. Почки увеличены, с точечными кровоизлияниями, мозаичные, иногда с канальцами и мочеточниками заполненными уратами. Селезенка может быть увеличена, мраморная, отмечается атрофия фабрициевой бурсы.
Диагноз на аденовирусный гидроперикардит бройлеров ставят на основании эпизоотологических, клинических и патологоанатоми-ческих данных, результатов выделения вируса (из печени) на развивающихся эмбрионах кур, в культуре клеток печени, почек, фиброблас-тов эмбрионов кур, а также результатов заражения восприимчивых цыплят 10 дневного возраста [1]. Завершающим этапом в постановке диагноза является идентификация выделенного вируса в реакции нейтрализации, диффузиозной преципитации в агаровом геле (РДП), ПЦР. Ретроспективная диагностика проводится на основании выявления антител к возбудителю в РДП, РН и ИФА.
В настоящее время РНГА считается более предпочтительной, чем тест диффузной преципитации в агаровом геле, так как дает меньше неспецифических реакций.
Аденовирусный гидроперикардит бройлеров необходимо прежде всего дифференцировать от гидроперикардитов другой этиологии. Так, при пастереллезе, стафиллококкозе и стрептококкозе иногда возникает серозный перикардит. Решающим фактором при постановке диагноза служит выделение чистой культуры бактерий, вызывающих эти заболевания, путем посева материала из внутренних органов больных птиц на искусственные питательные среды. Аденовирусный гидроперикардит бройлеров от гидроперикардита, возникшего при острой форме болезни Марека, дифференцируют по наличию при болезни Марека в начальной стадии единичных, а позднее множественных опухолей в мышцах и во внутренних органах. Необходимо исключить инфекционную бурсальную болезнь (болезнь Гамборо), так как она часто сопутствует аденовирусной инфекции. При инфекционном бурсите поражения фабрициевой сумки постоянны и сопровождаются некрозом и псевдоэозинофильной инфильтрацией лимфоидных фолликулов. Для аденовирусной инфекции изменения фабрициевой сумки не характерны. Точечные кровоизлияния размером со спичечную головку по тонкому отделу кишечника, а особенно в двенадцатиперстной кишке необходимо дифференцировать от Ньюкаслской болезни [4].
Парвовирусную анемию цыплят и геморрагический синдром, обусловленные микотоксинами и применением сульфаниламидов также необходимо дифференцировать от аденовирусного гидроперикардита бройлеров. При парвовирусной анемии цыплят внутриядерные тельца-включения в гепатоцитах отсутствуют. При исключении геморрагического синдрома и апластической анемии принимают во внимание анамнестические сведения и результаты анализа кормов и гистологических исследований печени [2].
Для предотвращения возникновения эпизоотии по аденовирусному гидроперикардиту бройлеров необходимо использовать все доступные методы профилактики, в том числе и организационно-хозяйственного и социально-экономического характера. Они включают в себя раздельное кормление и содержание разновозрастных групп птиц, привлечение к работе не контактирующего с птицей в личных подсобных хозяйствах обслуживающего персонала и многие другие вопросы, направленные на охрану птицеводческих хозяйств от заноса инфекции. Защита птицеводческих предприятий должна осуществляться посредством использования програмных мер безопасности, с обязательным соблюдением принципа "все пусто - все занято".
Распространение инфекции может произойти при диагностических исследованиях птицы, поэтому участники проведения вакцинации и диагностических исследований, особенно при работе с вирусвакци-нами, должны строго соблюдать все меры санитарной профилактики.
Аденовирус весьма устойчив к условиям внешней среды и может длительное время сохраняться в помете и подстилке. В качестве более эффективных дезинфектантов рекомендуются йодсодержащие препараты и гипохлорид натрия.
В регионах, неблагополучных по аденовирусному гидроперикардиту, применение только санитарных мер было малоэффективным и в связи с этим возникла необходимость разработки специфических мер профилактики.
В настоящее время в неблагополучных хозяйствах для специфической профилактики аденовирусного гидроперикардита цыплят используются инактивированные гидроокисьалюминиевые или эмульсионные вакцины. Цыплят-бройлеров вакцинируют однократно в 10-17 дневном возрасте, внутримышечно или подкожно. Ремонтный молодняк и кур яйценоских пород вакцинируют дважды: в 10-17 дней и затем при переводе, в удвоенной дозе, не позднее чем за 30 дней до начала яйцекладки. В некоторых хозяйствах, ремонтный молодняк предназначенный для формирования родительских стад, в раннем возрасте вакцинируют дважды с 2-недельным интервалом, а затем третий раз в удвоенной дозе при переводе. Иногда вакцину применяют в суточном возрасте, одновременно с вакциной против болезни Марека. Иммунитет, регистрируемый в РДП, наступает через 14-21 день.
Эффективного специфического лечения и профилактики лекарственными препаратами при аденовирусном гидроперикардите не разработано [1].
Конкретную схему специфической профилактики для каждого птицеводческого хозяйства необходимо выбирать индивидуально, в зависимости от его эпизоотической ситуации.
ДНК- содержащий вирус семейства Adenoviridae. Представлен тремя различными в антигеном отношении вирусами.
В настоящее время насчитывается 12 серотипов аденовирусов, относящихся к группам Celo, Gal и 1 тип EDS - 76. Наиболее патогенными является серотип 5 (Celo), который поражает молодняк.
Вирусы небольшие в размерах, не содержат оболочки. Размножаются в ядрах клеток, образуя при этом кристаллические эозинофильные включения.
Устойчивость.
Аденовирусы птиц обладают высокой термостабильностью. При температуре 56°С - активны свыше 1 часа, при температуре 80°С в течение 30 минут. Его репродукцию не нарушает пребывание в среде с рН 3-8. Нечувствителен к 0,25% трипсину, 2% фенолу, 50% спирту. Лучшим дезосредством является 1% раствор формальдегид. болеют: куры, индейки, утки, фазаны, перепела, цесарки, голуби, а также дикие птицы. Распространено во многих странах с промышленным птицеводством. В естественных условиях болезнь чаще наблюдают у цыплят-бройлеров в возрасте 4-10 недель. Однако регистрируют болезнь и у ремонтного молодняка, и у более взрослой птицы. Основным источником распространения аденовирусных инфекций являются больные и переболевшие птицы, которые имеют высокие титры антител, как правило, сохраняющиеся всю жизнь. Вирус из организма больных птиц выделяется с фекалиями, с секретами изо рта, носовых отверстий и с яйцами. Вирусовыделение обычно наблюдают в возрасте от 5-14 недель, но так же можно выделить вирус и в возрасте 4-5 лет. Возбудитель передается алиментарно - через инфицированный помет это основной источник заражения, зараженную воду или корм. Аэрогенный путь заражения происходит тогда, когда заболевание проявляется респираторной инфекцией в комплексе с микоплазмами и инфекционным бронхитом кур. Так же может передаваться и вертикально - через яйцо. В распространении вируса в птицеводческих хозяйствах участвуют птицы-переносчики, в основном дикие, которые являются природным резервуаром данного заболевания. Контагиозность аденовирусов птиц не очень высокая. Заражение стада протекает относительно медленно. Но поскольку эти вирусы в окружающей среде сохраняют активность долгое время, имеется возможность частых и повторных заражений восприимчивого поголовья. Смертность может варьировать от 2 до 10% и обычно наблюдается впервые 4 дня болезни.
Патогенез.
Вирус проникает в кровь или лимфу и с током разносится по всему организму. В первые 14 дней отмечается виремия. В этот период вирус выделяют из крови, трахеи, легких, почек, печени и селезенки. Однако с повышением титра антител уровень виремии постепенно снижается. Механизм воздействия аденовирусов на изменение яичной скорлупы пока недостаточно ясен.
Клинические признаки аденовируса птицы.
Поскольку аденовирусная инфекция птиц может быть вызвана тремя различными в антигеном отношении вирусами, то клинические признаки инфекции неодинаковые. Болезнь, вызываемая кишечным сиротским вирусом Celo - чаще серотип 5. Заболевание может протекать остро или латентно.
Больные цыплята угнетенные, сонливы, перья взъерошены, гребешки анемичные, отмечают пожелтение кожикровоизлияния под нижней частью клюва. У отдельных цыплят регистрируют нервные подергивания головы, слабость ног. Иногда хорошо упитанные цыплята погибают внезапно без проявления признаков болезни. Болезнь, вызываемая аденоподобным вирусом Gal. У кур проявляется затрудненным дыханием, истечениями из клюва, ринитами и слабостью лап. Более ремонтный молодняк и взрослые. У индеек часто протекает бессимптомно, но они все равно являются вирусоносителями.
Патологические изменения при аденовирусе птиц.
При Celo и Gal - печень увеличена, окрашена от светло-желтого до коричнево-желтого цвета. Геморрагии отмечают в паренхиме и на поверхности печени. Подкожная соединительная ткань окрашена в желтый цвет. Кровоизлияния наблюдают и в других паренхиматозных органах, а также на слизистой оболочке и в мышечном слое стенки кишечника. Желчный пузырь переполнен желчью, почки бледные, набухшие, с мелкими точечными кровоизлияниями. У взрослой птицы, атрофия фабрициевой сумки. Признаки некроза отмечены в печени и трахее. Обе инфекции птиц, вызываемые вирусами Celo и Gal не оказывают в промышленном производстве большого экономического ущерба в отличие от аденовирусной инфекции, вызванной утиным аденовирусом и проявляющееся синдромом снижения яйценоскости и литья яиц.
Коровин Владимир Иванович. Патогенез, диагностика аденовирусного гидроперикардита кур и его ассоциированного течения с другими инфекционными болезнями птиц : Дис. . канд. вет. наук : 16.00.03, 16.00.02 СПб., 2005 126 с. РГБ ОД, 61:05-16/155
Содержание к диссертации
1. Обзор литературы 8
1.1. Аденовирусный гепатит с включениями-гидроперикардит 8
1.1.1. Характеристика вируса: морфология, химический состав и устойчивость 10
1.1.2. Выделение, репродукция вируса и экспериментальная инфекция 10
1.1.3. Эпизоотология 14
1.1.4. Клинические признаки 17
1.1.5. Патогенез 19
1.1.6. Патоморфологические изменения 22
1.1.7. Диагностика 25
1.1.8. Профилактика аденовирусного гепатита-гидроперикардита 29
1.2. Ассоциированное течение гепатита с включениями -гидроперикардита с другими инфекционными болезнями птиц 31
1.3. Инфекционный бронхит кур (ИБК). Классификация и биологические свойства вируса 32
1.3.1. Выделение, репродукция вируса ИБК и экспериментальная инфекция 34
1.3.2. Эпизоотология 35
1.3.3. Клинические признаки 35
1.3.4. Патогенез 37
1.3.5. Патоморфологические изменения 37
1.3.6. Диагностика, профилактика ИБК 3 8
1.4. Колибактериоз 40
1.5. Противовирусные препараты 44
2. Собственные исследования 46
2.1. Материалы и методы 46
2.2. Результаты собственных исследований 54
2.2.1. Результаты эпизоотологического обследования птицеводческих хозяйств 54
2.2.2. Восприимчивость птиц различных кроссов к аденовирусной инфекции и патоморфология экспериментальной формы аденовирусного гепатита с тельцами включениями - гидроперикардита 69
2.2.3. Патоморфология спонтанной формы аденовирусного гепатита с тельцами включениями - гидроперикардита 71
2.2.4. Влияние аденовирусного гепатита с тельцами включениями -гидроперикардита на развитие ИБК 75
2.2.5. Влияние аденовирусного гепатита с тельцами включениями -гидроперикардита на восприимчивость цыплят к инфицированию Е.соИ 83
2.2.6. Лечебно-профилактическая и терапевтическая активность бонафтона при экспериментальном аденовирусном гепатите с тельцами включениями - гидроперикардите кур 84
2.2.7. Влияние бонафтона на естественную резистентность цыплят и устойчивость к аденовирусной инфекции 90
5. Практические предложения список литературы 107
Введение к работе
В современных условиях ведения промышленного птицеводства наибольшую опасность представляют инфекционные заболевания птиц, в том числе аденовирусная инфекция кур. Аденовирусный гепатит с вклю-чениями-гидроперикардит (ГТВ) - высококонтагиозное вирусное заболевание птиц, основными признаками которого являются: гепатит, нефрозонефрит, скопление серозной жидкости в перикарде, нарушение свертываемости крови.
Заболевание получило широкое распространение и наносит значительный ущерб птицеводству не только при остром течении в виде "гепатита-гидроперикардита" со смертностью птиц от 20 до 70%, но и при субклиническом проявлении болезни, также сопроводжающимся поражением печени, поджелудочной железы, селезенки и других внутренних органов (Ибрагимов А.А., Горюнова Т.А., 1987; Бакулин В.А., 1991; Лагуткин Н.А. с сотр., 1992; Алиев А.С. с сотр., 1996; Бакулин В.А. с сотр., 1998; Борисов В.В. с сотр., 2003; Крон Н.В., 2003; Khawaja D.A. et al, 1988; Saifuddin M. D., Wilks C.R., 1990; Cowen B.S., 1992; Ahmad Mansur-Ud-Din, Graham W. Burgess, 2001; Shivaprasad H.L. et al., 2001, Raue R.B. et al., 2002). При комплексной диагностике аденовирусного гепатита с включениями-гидроперикардита, большое значение имеют патоморфологические исследования, которые позволяют понять сущность патологичесого процесса, протекаемого в организме зараженных цыплят, выяснить сопутствующую ему иммунологическую перестройку и объяснить многие функциональные изменения во внутренних органах птиц и обусловленные ими клинические признаки заболевания.
В настоящее время остаются недостаточно изученными вопросы патогенеза и диагностики ассоциированного течения аденовирусного гепатита с включениями-гидроперикардита с другими инфекционными и неза разными болезнями птиц. Отсутствуют сведения об эффективности хими-опрепаратов при гепатите-гидроперикардите.
Цель и задачи исследований.
Целью настоящих исследований явилось изучение эпизоотологии и патогенеза аденовирусного гепатита с тельцами включениями - гидроперикардита, характера его ассоциированного течения с некоторыми инфекционными болезнями птиц, выбор наиболее достоверных методов диагностики аденовирусного гепатита с тельцами включениями - гидроперикардита и изучение профилактического действия против возбудителя данного заболевания некоторых антивирусных препаратов.
В соответствии с поставленной целью в задачи наших исследований входило:
1. Провести эпизоотический мониторинг по аденовирусному гепатиту с включениями - гидроперикардиту кур в различных птицеводческих хозяйствах России.
2. Изучить патогенез аденовирусного гепатита с включениями - гидроперикардита у кур различных кроссов.
3. Исследовать характер ассоциированного течения аденовирусного гепатита с включениями - гидроперикардита с инфекционным бронхитом у птиц различного возраста.
4. Испытать антивирусное действие некоторых химических препаратов с целью неспецифической профилактики аденовирусного гепатита с включениями - гидроперикардита.
Проведено эпизоотологическое обследование птицефабрик различных природно-климатических зон страны на птице различных кроссов и направлений продуктивности. Разработана комплексная система диагностики ГТВ, ИБК, ассоциированного течения аденовирусного гепатита с включениями - гидроперикардита с инфекционным бронхитом кур.
Впервые получены сведения о патогенезе и влиянии аденовирусного гепатита с тельцами включениями-гидроперикардита на характер течения инфекционного бронхита кур. Впервые испытан противовирусный препарат в качестве средства неспецифической профилактики аденовирусной инфекции и предложен для применения в промышленном птицеводстве.
Изучено ассоциированное течение аденовирусной инфекции (ГТВ) и короновирусной инфекции (ИБК), что имеет большое значение в ретроспективной диагностике этих инфекций. Доработанная комплексная система диагностики позволяет в кратчайшие сроки ставить диагноз на ГТВ, ИБК и на их ассоциированное течение, своевременно применять средства специфической и неспецифической профилактики этих заболеваний. Для химиопрофилактики аденовирусной инфекции впервые с положительным эффектом в лабораторных и производственных условиях апробирован противовирусный препарат - бонафтон и предложен для применения в промышленном птицеводстве.
По основным положениям диссертации опубликованы 4 научные работы, в которых изложены основные направления исследований по диссертационной теме.
Структура и объем работы.
Диссертация изложена на 127 страницах машинописного текста и включает: введение, обзор литературы, материалы и методы исследований, результаты собственных исследований, обсуждение, выводы, практические предложения, список литературы и приложение.
Работа иллюстрирована 24 таблицами и 11 рисунками. Список литературы включает 165 источников, в том числе 115 иностранных.
Выделение, репродукция вируса и экспериментальная инфекция
Выделение возбудителя проводят от птиц с характерными клиническими признаками аденовирусного гепатита с тельцами включениями -гидроперикардита, с патологоанатомическими изменениями в печени в виде увеличения органа, с наличием точечных кровоизлияний и очагами некроза, аплазией костного мозга, атрофией тимуса и бурсы. Взятые для вирусологического исследования пробы печени проверяют гистологическими исследованиями на присутствие в гепатоцитах характерных для болезни внутриядерных телец-включений. Выделение вируса проводят на культуре клеток, эмбрионах кур и восприимчивых цыплятах (Kefford В.A., Borland R.C, 1979; Recce R.L. et al., 1986; Christensen N.H., Saifuddin M.D., 1989; Saifuddin M.D., Wilks C.R., 1990).
При вскрытии трупов вынужденно убитых и павших птиц в 1 опыте отмечалось увеличение и желтовато-глинистое окрашивание печени, с единичными точечными кровоизлияниями под капсулой органа. У птиц, павших в период максимального клинического проявления заболевания, находили незначительное уменьшение в размере лимфоидных органов.
При заражении 5-дневных птиц наблюдались увеличение и желтовато-глинистое окрашивание печени, точечные кровоизлияния под капсулой органа. В отдельных случаях выявлялись некротические очаги желтовато-белого цвета, округлой и неправильной формы, размером от 1,5 мм шириной, до 3-5 мм длиной, локализовавшиеся чаще по краям долек печени. Фабрициева сумка, тимус и селезенка были несколько меньше по размеру, чем у контрольных птиц. У отдельных цыплят в селезенке отмечались некротические очаги округлой формы, желтовато-белого цвета, величиной около 1 мм.
При гистологическом исследовании было установлено, что характер и динамика патоморфологических изменений во внутренних органах цыплят одинаковы, как при внутрибрюшинном, так и при интраназальном заражении. У птиц, инфицированных внутрибрюшинно, в начальные сроки несколько интенсивней были поражения печени.
Ассоциированное течение гепатита с включениями -гидроперикардита с другими инфекционными болезнями птиц
Инфекционный бронхит кур (ИБК) - остро протекающая высококонтагиозная болезнь вирусной этиологии. Восприимчивы куры всех возрастов. У цыплят она проявляется респираторным и уремическим синдромами, у кур - поражением репродуктивных органов, что ведет к длительному снижению яйценоскости. Болезнь наносит значительный экономический ущерб, обусловленный снижением привесов у молодняка и яйценоскости у кур, плохой окупаемостью кормов, увеличением выбраковки птицы.
Возбудитель ИБК - вирус из семейства Coronaviridae. Вирус инфекционного бронхита кур (ИБК) выделили Бич и Шалк в США в 1936 году.
Вирус ИБК имеет много серотипов (антигенных вариантов): Массачусетс, Коннектикут, Айова 97, Айова 609, Грей, JMK Армилайнд, Брис-бери, Холт, Индиана, В/Е (Д207/Д3896), С (Д212), Арканзас, Менн, Флорида и другие.
В нашей стране ИБК регистрируется с 1968 г. Есть предположения, что на территории России циркулируют несколько генетически различных групп изолятов вируса ИБК. Первую составляют изоляты, имеющие высокое генетическое сходство со штаммами из серотипа Массачусетс, который является географически наиболее широко распространенным (Song C.S. etal., 1998).
Штаммы вируса, изолированные в нашей стране, имеют в большинстве случаев тесное антигенное родство с серотипом Массачусетс.
Изоляты IBV-6/98, IBV-7/98 и IBV-9/98 значительно отличаются от всех имеющихся в банке данных штаммов. На основе этого можно предположить, что эти изоляты имеют оригинальные антигенные свойства, а низкая степень их гомологии между собой указывает на то, что они могут образовывать свои антигенные группы. Профилактика ИБК затруднена тем, что возбудитель заболевания имеет множество серотипов, отличающихся в антигенном отношении.
В связи с высокой генетической изменчивостью вируса ИБК, не исключается возможность появления новых "вариантных" изолятов.
Вирус передается алиментарно, аэрогенно и при контакте к ИБК восприимчивы куры и цыплята всех возрастов (Сюрин В.Н. и др., 1973). Переболевшие птицы приобретают пожизненный иммунитет. Показана антигенная и иммуногенная вариабельность полевых штаммов ИБК. Большинство штаммов вируса размножаются в культуре клеток почки КЭ, фибробластов КЭ и ВНК-21.
Устойчивость вируса к физико-химическим факторам.
Вирус обладает незначительной устойчивостью к различным физико-химическим воздействиям. Большинство штаммов ИБК инактивируется при 56С за 10 минут. Вирус более устойчив в кислой среде, чем в щелочной. Он сравнительно легко разрушается под действием УФ- лучей. Солнечные лучи инактивируют его при 36-38 С за 3 часа: 1%-ные растворы фенола, формалина, крезола, 70%-ный этиловый спирт и раствор соды обезвреживает в течение 3 минут (Лурия С.С. и др., 1981). Хранение и консервирование вируссодержащего материала. Вирус-сод ержащий тканевой материал в 50%-ном глицерине при 4С сохраняет активность свыше 400 дней, при минус 25С - 530 дней. В качестве стабилизатора при лиофилизации используют 10%-ный раствор глюкозы, лактозу, маннит, сухое молоко и др. Вирус хорошо сохраняется в лиофилизиро-ванном состоянии (Al Tarcha В. et al., 1990).
Выделение, репродукция вируса и экспериментальная инфекция Выделяют вирус на куриных эмбрионах. Идентификация выделенного вируса проводится с помощью серологических реакций: РН и РЗГА -типоспецифические реакции, используются для определения серологического типа вируса; РДП и РНГА - идентифицируют вирус без учета его типовой принадлежности; РСК - позволяет установить штаммоспецифич-ность вируса в пределах одного типа. Для диагностики также применяется иммуноферментный метод и МФА. (Bhattacharjee P.S. et al., 1994; Cavanagh D.K., 1999).
Культивировать вирус удается на развивающихся куриных эмбрионах при заражении в аллантоисную полость, амнион или на ХАО. Инфицированные эмбрионы шарообразной формы, мумифицированы, мельче, чем здоровые. При вскрытии карликовых эмбрионов наблюдается гиперемия и отечность оболочек. Амниотическая оболочка помутневшая, плотно облегает тело эмбриона и препятствует его движению. Тело эмбриона скручено по продольной оси и представляет форму шара, конечности деформированы. На вскрытии эмбрионов наблюдается недоразвитие паренхиматозных органов. Кожа сухая и чаще желтушна, оперение развито слабо. Желточный мешок сморщенный, а его содержимое уплотнено. На вскрытии наблюдается недоразвитие паренхиматозных органов; отмечают отек в области затылка и конечностей, а также застойную гиперемию печени, почек, ХАО, головного мозга и кожи.
Результаты эпизоотологического обследования птицеводческих хозяйств
Результаты исследований проб сывороток цыплят в РДП на наличие антител к возбудителю аденовирусного гепатита с включениями гидроперикардита, представлены в табл.6.
Во всех исследованных пробах отмечена дистрофия и/или воспаление печени с одновременным наличием во многих случаях характерных для аденовирусной инфекции интрануклеарных включений в гепатоцитах, однако, характерные поражения печени с наличием внутриядерных включений могли быть в большем количестве проб, поскольку процесс разрушения был очень интенсивным, вероятно, клетки некротизировались и терялась их специфическая структура. Кроме того, отбор проб печени проводился методом случайной выборки и органы с характерными изменениями могли не попасть в число исследуемых.
По результатам комплексного эпизоотологического анализа, проведенного в АОЗТ "Птицефабрика Пермская" Пермской области на день обследования хозяйства клинического и достаточно хорошо выраженного па-тологоанатомически "гепатита-гидроперикардита" не отмечено. Однако последующие лабораторные исследования во ВНИВИП материала взятого в процессе эпизоотологического обследования показало, что в птицехозяй-стве циркулирует возбудитель данного заболевания, вызывающий в основном субклиническое течение аденовирусного гепатита с включениями-гидроперикардита.
Влияние аденовирусного гепатита с тельцами включениями -гидроперикардита на восприимчивость цыплят к инфицированию Е.соИ
При вскрытии трупов вынужденно убитых и павших птиц в 1 группе отмечали гидроперикардит, отек легких, увеличение и желтовато-глинистое окрашивание печени, с единичными точечными кровоизлияниями под капсулой органа. В отдельных случаях выявлялись некротиче ские очаги желтовато-белого цвета, округлой и неправильной формы, размером от 1,5 мм шириной до 3-5 мм длиной, локализовавшиеся чаще по краям долек печени. У птиц, павших в период максимального клинического проявления заболевания, находили незначительное уменьшение в размере лимфоидных органов. Фабрициева сумка, тимус и селезенка были несколько меньше по размеру, чем у контрольных птиц.
На 3-е сутки у птиц всех возрастных групп в печени наблюдались гиперемия, очаговые кровоизлияния, наиболее выраженные в области капсулы органа, вакуолизация цитоплазмы гепатоцитов и формирование микронекрозов, часто выявлялись очаговые лимфоидногистиоцитарные про-лифераты, формирующиеся периваскулярно в непосредственной близости от некротических очагов. В ядрах гепатоцитов встречались включения двух типов: эозинофильные и, несколько реже, базофильные. Первые были гомогенные, розового цвета, округлой, овальной, реже неправильной формы с ободком просветления по периферии включения. Ядерный хроматин в виде глыбок был оттеснен к оболочке ядра. Базофильные включения были интенсивно-синего цвета и, сливаясь с ядерным хроматином, полностью заполняли ядро, которое по размерам было в 2-3 раза больше, чем ядра гепатоцитов, не содержащие включения. Отмечались также дистрофические изменения и десквамация эпителия желчных протоков печени.
В тимусе находили обеднение мозгового и особенно коркового слоя долек лимфоцитами, в селезенке - уменьшение клеточных элементов лим-фоидной ткани, в фабрициевой сумке у цыплят 10-дневного возраста - гипоплазию лимфоидных фолликулов.
На 6-е сутки после заражения изменения в печени наблюдались у цыплят 10-,60- и 120-дневного возраста, но у 10-дневных в печени встречались очаговые кровоизлияния, чаще локализованные около капсулы органа, активизация клеток Купфера, иногда содержавших фагоцитированный материал, вакуолизация цитоплазмы гепатитов и микронекрозы. В селезенке у цыплят 10-,60- и 120-дневного возраста на 6-е сутки наблюдали сильное обеднение лимфоцитами белой пульпы, гиперплазию ретикулярных клеток, гиперемию красной пульпы. В отдельных случаях встречались внутриядерные тельца-включения в ретикулярных клетках.
У птиц, имевших одновременно высокоинтенсивные поражения печени и селезенки, выявлены изменения в поджелудочной железе. При этом наблюдались гиперемия, отек и единичные очаговые кровоизлияния в междольковой и межацинарной ткани, очаговые лимфоидногистиоцитар-ные пролифераты. Встречались дистрофические изменения в железистых клетках и формирование одиночных микро-некрозов. В ядрах некоторых железистых клеток отмечались тельца-включения. Базофильные включения были округлой или неправильной формы, с ободком просветления по периферии, занимали половину либо большую часть ядра, хроматин которого был оттеснен к ядерной оболочке, располагаясь вдоль нее в виде глы-бок. Сами ядра при этом выглядели более светлыми и прозрачными, чем ядра непораженных клеток. Эозинофильные включения могли занимать третью часть ядра либо заполнять его полностью, в отдельных случаях представляли собой эозинофильную, гомогенную, округлую, розового цвета структуру, размер которой в 2-3 раза превышал размер непораженных ядер. Наличие внутриядерных включений часто сочеталось с дистрофическими изменениями в железистых клетках. Тимус был несколько гипопла-зирован, обеднен лимфоцитами, с истонченным корковым и гиперемиро-ванным мозговым слоем долек.
Читайте также: