Алгоритм взятия мазков из зева и носа на дифтерию

Обновлено: 19.04.2024

Сбор материала для культуральных исследований и микроскопии необходимо проводить до назначения специфической противомикробной терапии. Несоблюдение данного условия может привести к ложноотрицательному результату исследования. материал берут натощак или через 3-4 ч после еды. Для более полного открытия глоточного отверстия рекомендуется по время забора материала надавливать шпателем на корень языка. Важно, чтобы при извлечении тампона он не касался зубов, щек, языка. Для сбора мазков из носоглотки и ротоглотки используются стерильные зонды, которые после сбора материала погружают в контейнеры с транспортной средой, обеспечивающей стабильность и сохранение ростовых свойств микроорганизмов. Тип зондов, состав транспортных сред, методику сбора, а также условия хранения и транспортирования клинического материала следует уточнить в инструкции к используемым реагентам.

Хранение образцов

Для культуральных исследований и микроскопии – при температуре 2–8°С не более 24 ч.
Для выявления РНК/ДНК:
при температуре 2–8°С – в течение 3 сут.;
при температуре минус 16–20°С – до 3 мес.;
длительно при температуре не выше минус 68°С.

Допускается лишь однократное замораживание–оттаивание материала.

Мазки со слизистой носоглотки и ротоглотки для выявления РНК/ДНК – рекомендуется совмещать мазки со слизистой носоглотки и ротоглотки в одной пробирке. Для этого сначала берут мазки разными зондами со слизистой нижнего носового хода, а затем из ротоглотки, при этом рабочие концы зондов после взятия мазков у пациента помещаются в одну пробирку с 500 мкл транспортной среды для хранения и транспортировки респираторных мазков, и исследуются как один образец. Материал берется после полоскания полости ротоглотки кипяченой водой комнатной температуры. Если полость носа заполнена слизью, перед процедурой рекомендуется провести высмаркивание. В течение шести часов перед процедурой нельзя использовать медикаменты, орошающие носоглотку или ротоглотку и препараты для рассасывания во рту. Мазки со слизистой носоглотки берут сухим стерильным назофарингеальным велюр-тампоном на пластиковом аппликаторе. Зонд вводят легким движением по наружной стенке носа на глубину 2–3 см до нижней раковины, слегка опускают книзу, вводят в нижний носовой ход под нижнюю носовую раковину до носоглотки, делают вращательное движение и удаляют вдоль наружной стенки носа. Общая глубина введения зонда должна составлять примерно половину расстояния от ноздри до ушного отверстия (3–4 см для детей и 5–6 см для взрослых). После забора материала конец зонда с тампоном опускают в стерильную одноразовую пробирку с 500 мкл транспортной среды для хранения и транспортировки респираторных мазков до места слома, при этом гибкая часть зонда сворачивается спиралью, далее, прикрывая сверху пробирку крышкой, рукоятку зонда опускают вниз, добиваясь полного отламывания верхней части зонда. Пробирку герметично закрывают. Мазки из ротоглотки берут сухими стерильными зондами из полистирола с вискозными тампонами вращательными движениями с поверхности миндалин, небных дужек и задней стенки ротоглотки, аккуратно прижимая язык пациента шпателем. После забора материала рабочую часть зонда с тампоном помещают в стерильную одноразовую пробирку с 500 мкл транспортной среды и зондом с мазком из носоглотки. Конец зонда с тампоном отламывают, придерживая крышкой пробирки с расчетом, чтобы он позволил плотно закрыть пробирку.

Смыв из ротоглотки для диагностики эпидемического паротита (выделение РНК). Перед взятием смывов из ротоглотки проводят предварительное полоскание полости рта водой. После этого проводят тщательное полоскание ротоглотки (в течение 10-15 с) 25-40 мл изотонического раствора натрия хлорида. Жидкость собирают через стерильную воронку в стерильный флакон на 50 мл.

Хранение образцов

при комнатной температуре – в течение 6 ч.
при температуре от 2°С до 8°С – в течение 3 суток
при температуре минус 20°С – в течение 1 недели
при температуре минус 70°С – длительно

Мазки из ротоглотки и носа для диагностики дифтерии, пневмококковой, стафилококковой, стрептококковой инфекции (культуральные исследования) – для взятия материала используется сухой стерильный ватный тампон, вмонтированный в пробку пробирки или готовые транспортные среды, отдельным тампоном из ротоглотки и из носа. Взятие мазков осуществляют натощак или не ранее двух часов после еды, не касаясь тампоном языка, внутренних поверхностей щек и зубов.

Мазки из ротоглотки и носа для диагностики менингококковой инфекции (культуральные исследования) – тампон вводят через ротовую полость ватным концом кверху за мягкое небо в носоглотку и проводят 2–3 раза по задней стенке. При извлечении из ротоглотки тампон не должен касаться окружающих тканей (зубы, слизистая щек, язык, небный язычок). После извлечения тампона содержащуюся на нем слизь засевают на чашки (сывороточный агар и сывороточный агар с линкомицином) или помещают в транспортную среду для немедленной доставки в лабораторию. Допускается применение коммерческих питательных транспортных сред разрешенных к применению в Российской Федерации в установленном порядке.

Мазки из носоглотки для диагностики гриппа (культуральные исследования) собирают стерильными зондами с вискозными тампонами из нижнего носового хода. Зонд с тампоном вводят легким движением по наружной стенке носа на глубину 2–3 см до нижней раковины, слегка опускают книзу, вводят в нижний носовой ход глубоко, делают вращательное движение и удаляют вдоль наружной стенки носа. Общая глубина введения зонда должна составлять примерно половину расстояния от ноздри до ушного отверстия (3–4 см для детей и 5–6 см для взрослых). После взятия материала тампон, не нарушая стерильности, помещают в пробирку с 2,0–5,0 мл вирусологической транспортной среды. Материал хранят в течение 24 ч при температуре 2–8°С, более длительно – при температуре не выше минус 16°С.

Мазки из носоглотки для диагностики коклюша (культуральные исследования) собирают стерильными зонд-тампонами с вискозным наконечником на алюминиевой основе, вмонтированный в пробку и пробирку с транспортной средой AMIES с активированным углем. Зонд извлекают из упаковки, вводят через носовые ходы и удерживают в носоглотке в течение 10 сек, чтобы он пропитался отделяемым слизистой носоглотки. После этого тампон извлекают, делая упор на боковую стенку носа, и немедленно помещают в пробирку с транспортной средой AMIES с активированным углем. Собранный материал необходимо исследовать в день получения (в исключительных случаях – хранить в холодильнике при температуре 2–8°С не более 12 ч).

Заднеглоточные мазки для диагностики коклюша (культуральные исследования) собирают стерильным зонд-тампоном с вискозным наконечником на алюминиевой основе, вмонтированным в пробку, вносят в пробирку с транспортной средой AMIES с активированным углем. Целесообразно использовать готовые комплекты. Зонд извлекают из упаковки, пробирку со средой вскрывают, конец зонда (на расстоянии 2 см от конца с тампоном) помещают в пробирку и изгибают под углом 135°, делая упор на внутренний край пробирки, и извлекают из пробирки. Аккуратно прижимая язык пациента шпателем, вводят изогнутый тампон в ротовую полость ниже язычка и собирают материал с задней стенки глотки, не задевая язык, слизистую оболочку щек и миндалины. Зонд с биоматериалом помещают в пробирку со средой AMIES, следя за тем, чтобы пробка, в которую вмонтирован тампон, плотно закрывала пробирку. Пробирки с транспортной средой AMIES до использования хранят при комнатной температуре. После взятия материала тампон, не нарушая стерильности, помещают в пробирку с 2,0–5,0 мл вирусологической транспортной среды. Собранный материал необходимо исследовать в день получения (в исключительных случаях – хранить в холодильнике при температуре 2–8°С не более 12 ч).

Мазки со слизистой носоглотки для диагностики кори (культуральные и исследования, выделение РНК) – для взятия материала используют стерильный ватный тампон, которым протирают слизистую оболочку носоглотки с достаточным усилием, чтобы снять часть эпителиальных клеток. Тампоны помещают в маркированные стерильные пробирки с завинчивающимися крышками, в которых содержится 2–3 мл транспортной среды для вирусов. Если образец не может быть доставлен в вирусологическую лабораторию в течение 48 часов при температуре 4–8°С, пробирку с тампоном следует энергично встряхнуть так, чтобы смыть клетки, а затем извлечь тампон. Смывы центрифугируют при температуре 4°С при 500g (1500 об./мин) в течение 5 минут, затем осадок ресуспендируют в 2 мл питательной среды для клеточных культур.

Ресуспендированный осадок и надосадочную жидкость хранят раздельно при температуре –70°С и транспортируют в лабораторию на сухом льду в герметично закрытых флаконах, чтобы избежать попадания в них углекислоты.

Мазки из носоглотки для обнаружения антигенов внутриклеточных патогенов собирают стерильными зондами с вискозными тампонами из нижнего носового хода. Зонд с тампоном вводят легким движением по наружной стенке носа на глубину 2–3 см до нижней раковины. Затем зонд слегка опускают книзу, вводят в нижний носовой ход под нижнюю носовую раковину глубоко (вплоть до слез у пациента), делают вращательное движение и удаляют вдоль наружной стенки носа. После взятия материала тампон помещают в пробирку с 3 мл 0,1 моль/л фосфатно-солевого буферного раствора. Для получения суспензии клеток тампон в пробирке тщательно отжимают о стенки пробирки, тампон удаляют, пробирку закрывают. Проводят центрифугирование в течение 5 мин при 3000 об/мин для осаждения клеток. Надосадочную жидкость осторожно удаляют, а осадок клеток ресуспендируют в нескольких каплях фосфатно-солевого буферного раствора и наносят на предметные стекла (не менее 3 шт.) раздельными каплями. Препарат высушивают и фиксируют 10 мин в охлажденном до 2–8°С химически чистом ацетоне. Фиксированные предметные стекла хранят при температуре 2–8°С не более 6–7 дней.

Показания: подозрение на дифтерию, ангину; контактным с больным дифтерией; обследование декретированных групп.

Противопоказания: нет.

Оснащение:

2. Стерильные прямые ватные тампоны в комплекте с пробирками или в отдельной упаковке

3. Шпатель стерильный в крафт-пакете

4. Штатив для пробирок

4. Термоконтейнер для транспортировки

4. Стерильные перчатки, маска

5. Лоток для использованного материала.

6. Емкость с дез.раствором

Подготовка пациента:

1.Установить доброжелательное отношение с пациентом.

2. Проинформировать пациента о предстоящей манипуляции и ходе ее выполнения, получить информированное согласие.

3. Помочь пациенту занять нужное положение, лицом к источнику света.

Техника выполнения:

I. Забор мазка из носа:

1. Повести гигиеническую обработку рук, надеть перчатки.

3. Первым пальцем левой руки слегка приподнять кончик носа пациента, правой - осторожно, стараясь не касаться наружной поверхности носа, легким вращательным движением ввести тампон в нижний носовой ход с одной, а затем с другой стороны.

4. Извлечь тампон из полости носа и осторожно опустить в пробирку, не касаясь стенок пробирки.

5. Поставить пробирку в штатив.

II. Забор мазка из зева:

1. Попросить пациента запрокинуть голову, широко открыть рот.

3. Осторожно провести тампоном сначала по правой дужке, правой миндалине, далее - по левой миндалине и левой дужке, при наличии фибринозных налетов, материал собирают на границе здоровой и пораженной ткани.

4. Извлечь тампон из полости рта, не касаясь слизистой оболочки рта и языка,

и осторожно опустить его в стерильную пробирку, не касаясь стенок пробирки.

5. Поставить пробирку с тампоном в штатив.

6. Штатив с пробирками поместить в термоконтейнер для транспортировки.

7. Обработать перчатки и использованный материал в соответствии с требованиями санэпидрежима.

8. Провести гигиеническую обработку рук.

9. Доставить материал в бактериологическую лабораторию.

Возможные осложнения: травма слизистой оболочки.

Примечание: забор материала производить натощак, или через 2 часа после еды, питья, полоскания ротовой полости; материал отправляется в лабораторию не позднее 2-х часов после забора; в инфекционных отделениях, возможно выполнение посева сразу на питательную среду на чашку Петри, сразу отправив посев в термостат.

Дифтерия относится к инфекционным болезням, развитие которых обусловлено заражением организма бактериями. Для патологии характерно появление пленочного налета на поверхности пораженных органов, например, в ротоглотке, носовых ходах, глазах или ушной раковины. Для постановки диагноза при подозрении на инфекционное заболевание врач направляет пациента на мазок на дифтерию из носа и зева.

Содержание статьи

Заподозрить активацию палочки Леффлера (инициатора развития дифтерии) можно на основании некоторых симптомов:

острое начало;
фебрильная гипертермия, когда температура превышает 38 градусов;
цефалгия (головные боли);
недомогание;
учащенное сердцебиение;
лимфаденит, при котором близко расположенные с воспалительном очагу лимфоузлы увеличиваются в диаметре, при прощупывании становятся болезненными, уплотненными.

Через 3 суток от начала болезни температура снижается до субфебрильных показателей, а фибринозные пленки уплотняются, приобретают перламутровый окрас.

Не пытайтесь самостоятельно удалить пленки с миндалин, носа. Это приводит к обнажению раневой поверхности и появлению кровоточивости.

Акцентируем внимание, что существует токсическая форма болезни. Для нее характерна гектическая лихорадка, выраженная слабость. Признаком прогрессирования дыхательной, кардиальной недостаточности является появление акроцианоза (посинение ушей, носа, носогубной зоны, пальцев), а также снижение артериального давление и нарастание тахикардии.

При этом пациента могут беспокоить галлюцинации, как проявление интоксикации, гипоксического поражения структур головного мозга. Также наблюдается возбуждение, тошнота, гнусавость голоса, затрудненное дыхание, одышка и отечность шеи.

Дифтерийный токсин приводит к развитию крупа, когда поражается трахея и бронхиальное дерево. Симптоматически патология проявляется лающим кашлем, который постепенно становится беззвучным и развивается асфиксия.

В связи с высокой токсичностью возбудителя в детском возрасте проводится вакцинация с последующей ревакцинацией. Несвоевременное лечение болезни приводит к развитию:

инфекционно-токсического шока;
асфиксии;
почечной дисфункции (нефроз, ренальная недостаточность);
поражению нервов;
миокардита;
полиорганной недостаточности (при токсической и гипертоксической формах).

Показания для анализа

В ряде случаев мазок на дифтерию и другую патогенную флору проводится при подозрении на развитие заболевания. Однако с профилактической целью исследование показано:

при трудоустройстве в лечебные, детские учреждения, в пищевую сферу;
перед посещением учебных учреждений;
беременным для определения риска возможных осложнений;
после контакта с больным человеком;
для подбора лекарственной терапии.

Таким образом, профилактическое исследование дает возможность предупредить развитие эпидемий, связанных с распространение инфекционных возбудителей.

Особенности диагностики

Различают несколько штаммов палочки Леффлера. Они отличаются по культуральным, структурным и ферментативным свойствам. Для подтверждения диагноза врач бактериальный анализ на дифтерию. Исследуя материал, специалист обнаруживает бациллу Леффлера, что в сочетании с клинической картиной является достоверным фактором болезни.

Для обнаружения инфекционного агента может потребоваться до полусуток, при условии, если пациент не принимал лекарственные препараты.

Когда мазок из зева берется на фоне антибактериальной терапии, рост бактерий значительно замедляется, а результаты диагностики не считаются достоверными. В таком случае целесообразно использовать серологические методы исследований.

Чаще всего для этого назначается РПГА, которая проводится в течение первых 3 суток и спустя неделю постановки диагноза. Диагностический метод дает возможность выявить антитела к токсину дифтерийной бактерии. Положительный результат отмечается при увеличении антител в 4 и более раз. Таким образом, можно найти людей с низким уровнем иммунной защиты против дифтерийного токсина.

При отсутствии антител на дифтерийный токсин проводится вакцинация с помощью АКДС.

Подготовка к сдаче мазков

Когда требуется мазок на дифтерию, как сдавать анализ разберем несколько позже. Сейчас остановимся на подготовительном этапе. Он включает:

прекращение приема антибактериальных средств за 10 дней до диагностики;
использование растворов для полоскания ротовой полости, ротоглотки с антисептическими компонентами запрещается за 5 суток до исследования;
анализ сдается натощак;
в день диагностики не рекомендуется чистить зубы.

Забор материала

Необходимый материал для диагностики берется из зева и носа. Вначале пациент наклоняет назад голову, максимально широко открывает ротовую полость. Специалист фиксирует язык металлическим или деревянным пластырем, принимая его ко дну полости рта.

Стерильным тампоном на удлиненной петле специалист проводит по слизистой оболочке ротоглотки. В процессе введения и выведения из ротовой полости тампона он не должен соприкасаться с другими поверхностями. Материал на тампоне опускается в пробирку, благодаря которой он транспортируется в лабораторию без повреждений и гибели микробов.

Набранный материал следует посеять в первые 2 часа. В процессе забора материала человек может испытывать неприятные ощущения или позыв на рвоту (особенно те пациенты, у которых повышен рвотный рефлекс).

Далее врач приступает к взятию мазка из носового хода. Для этого пациент также наклоняет голову назад, очищается носовой ход от слизи, а кожные покровы обрабатываются спиртом.

Стерильный тампон на удлиненной петле необходимо вводить поочередно в носовые ходы, плотно соприкасаясь с поверхностью слизистой оболочки. После этого тампон опускается в стерильную пробирку, и отправляют ее в лабораторию.

Микроскопическое исследование

Взятый из ротоглотки материал подвергается микроскопии. Для этого врач наносит его на предметное стекло, окрашивает специальными красителями и изучает клеточный состав.

Морфологические признаки дифтерийной палочки настолько различны, что микроскопия используется, как предварительное исследование перед посевом. Оно дает возможность проанализировать состав флоры. Окраска может проводится по Граму, Леффлеру (наиболее информативный, часто используемый) и Нейссера.

В мазках дифтерийные палочки расположены, как римская цифра 5.

Посев материала

Для обеспечения оптимальных условий для роста и размножения бактерий необходимо подобрать специальную питательную среду. Посев на дифтерию осуществляется в стерильном боксе на свернутую сыворотку Ру, теллуритовые дифсреды, сывороточно-/кровяно-теллуритовый агар или среду Клауберга.

Материал помещают в среду, затем рассеивают по поверхности. Для этого применяется чашка Петри. Инкубация посевов осуществляется в условиях термостата. Ежедневно контролируется рост и характер вырастающих колоний. С целью выделения чистой культуры пересеиваются колонии на селективные питательные среды.

Благодаря бакпосеву и дополнительной диагностике удается подтвердить диагноз инфекционного заболевания и своевременно принять меры по лечению больного человека и предупреждению распространения инфекции среди его окружения.

Для проведения бак-исследования требуется мазок из зева и носа. Он позволяет оценить качественные, а также количественные характеристики микрофлоры, живущей на слизистой рото- и носоглотки. Выявив патогенные микроорганизмы при диагностике, врач имеет возможность подтвердить инфекционное заболевания, а также определить чувствительность микробов на действие некоторых антибиотиков.

Содержание статьи

Среди показаний, когда назначается анализ из зева на микрофлору, стоит выделить:

тонзиллит, обусловленный активацией стрептококка;
фурункулез, развивающийся вследствие размножения стафилококков;
подозрение на дифтерию, когда необходимо выявить бациллы Леффлера;
наличие симптомов, указывающих на менингококковую или коклюшную инфекцию;
простудные заболевания;
подозрение на стенозирующий ларингит или мононуклеоз.

Кроме того, диагностика проводится с профилактической целью для выявления людей с бактерионосительством после контакта с больным человеком, при трудоустройстве в детские, лечебные учреждения, заведения для питания, перед посещением учебных заведений. Зачастую назначается мазок из зева и носа на стафилококк.

Также обследованию подвергаются беременные женщины для установления риска развития заболевания и тяжелых последствий.

Микрофлора носоглотки

На поверхности слизистой оболочки рото- и носоглотки живет множество микробов, которые относятся как к полезным, так и болезнетворным микробам. В норме даже болезнетворные микроорганизмы могут входить в состав флоры, однако не вызывать развитие заболевания. Все зависит от их количества.

При определенных условиях, например, снижении иммунитета на фоне ОРВИ, общего переохлаждения, обострения хронической патологии, происходит активация патогенных бактерий, и они начинают интенсивно размножаться.

В мазках при отсутствии заболевания присутствуют такие виды микроорганизмов, как кишечная палочка, стрептококки, менингококки, эпидермальный стафилококк, непатогенные нейссерии, бакте-, дифтероиды, псевдомонады, клебсиеллы пневмонии, актиномицеты, грибки и другие микроорганизмы.

Приблизительно 20% населения Земли являются носителями золотистого стафилококка, однако развития заболевания у них не наблюдается.

При благоприятных для бактерий условиях условно-патогенные микробы способны вызывать заболевания. Также болезни могут развиваться при первичном инфицировании организма, оседая на слизистые оболочки верхних респираторных путей.

Среди микроорганизмов, способных провоцировать развитие патологии, следует отметить гемолитический стрептококк, пневмо-, менингококк, золотистый стафилококк, бациллы Леффлера, гемофильная палочка, бранхамеллы, листерия, бордетелла, грибки и множество других микробов.

Подготовительный этап

Для получения максимально точных результатов исследования необходимо соблюдать следующие рекомендации:

за неделю до сбора материала прекращается прием антибактериальных препаратов;
полоскание, использование спрея с противомикробным действием запрещается за 2 суток до диагностики;
анализ проводится натощак;
перед исследованием не следует чистить зубы, использовать жвачку, пить воду.

Только придерживаясь перечисленных правил, мазок на флору из зева покажет достоверный результат.

Техника проведения

Чтобы взятие мазка из зева несколько облегчить, необходимо пациенту наклонить голову назад и максимально широко раскрыть ротовую полость. Материал из носа и зева берется стерильным тампоном, фиксированным на удлиненной петле.

Вначале специалист прижимает язык металлическим или деревянным шпателем ко дну полости рта, чтобы четко визуализировать место забора материала. Затем тампон опускается в стерильную пробирку, что предупреждает гибель микроорганизмов при транспортировке. Материал следует отвезти в лабораторию за 90 минут.

Во время введения и извлечения тампона изо рта, он не должен соприкасаться с другими поверхностями. Если техника взятия мазка из зева и носа не будет соблюдаться, результаты считаются недостоверными.

Стоит заметить, что процесс забора материала не вызывает болезненности, однако провоцирует рвотный позыв, особенно у людей с повышенным рвотным рефлексом.

Алгоритм выполнения мазка из носа практически не отличается:

пациент наклоняет голову назад;
носовой ход с обеих сторон очищается от слизи;
кожные покровы вокруг ноздрей необходимо обработать антисептиком;
стерильный тампон вводится в ходы носа, плотно соприкасаясь с поверхностью слизистой оболочки;
тампон помещают в стерильную пробирку и отправляют в лабораторию.

Микроскопический анализ

Перед посевом материала необходимо провести микроскопическое исследование. Для этого набранный материал располагается на предметном стекле, которое фиксируется над пламенем горелки. Окраска проводится по методу Грама, что дает возможность визуализировать клеточный состав.

В мазках могут обнаруживаться коккобацилы, грамположительные, грамотрицательные микробы и кокки, а также исследуется их морфология. В зависимости от расположения бактерий удается различить их по видовым принадлежностям:

грамположительные кокки, располагающиеся группами в виде виноградной грозди, являются стафилококками;
грамположительные кокки, напоминающие цепочку, или располагаются попарно, считаются стрептококками;
нейсерии окрашиваются по Граму отрицательно, также являются кокками;
клебсиеллы визуализируются в виде грамотрицательных палочек с округлыми концами, а также капсулой со светлой окраской;
синегнойные палочки обнаруживаются как небольшие грамотрицательные палочки.

На основании результатов микроскопической диагностики врачу удается предположить, какие колонии могут вырасти на питательной среде.

Посев материала

Для каждого микроорганизма необходимы определенные питательные среды с учетом pH и уровня влажности. Основная задача питательной среды заключается в обеспечении микроорганизмов питания, дыхания для ростового ускорения и размножения.

Посев осуществляется в стерильном боксе, соблюдая правила асептики. Специалист, работающий в лаборатории, должен помнить о средствах защиты, так как биологический материал может быть инфекционно опасным.

Мазок из носа сеют на среду, после чего выращивают в условиях термостата. Ежедневно необходимо оценивать рост и форму вырастающих колоний. Через 5 суток анализируется конечный результат. Различают несколько наиболее распространенных сред для получения колоний бактерий:

кровяной агар относится к высокочувствительному типу сред, обеспечивает благоприятные условия для роста сапрофитных, а также патогенных микробов. Патогенность пневмококка, а также стафилококка оценивается путем анализа характера роста, окраски и площади гемолизированного участка. Гемолитическая активность бактерий считается основным патогенным фактором.
среда Сабуро - оптимальная для размножения множества видов микробов.
Желточно-солевой агар используется для получения колоний стафилококковых микробов.
Шоколадный агар относится к неселективным, обогащенным средам, получается путем добавления нагретой крови. Применяется для размножения патогенных микроорганизмов. Эта питательная среда хорошо подходит для менинго-, конококков и гемофильной палочки.
Из сред для энтеробактерий применяется среда Эндо.
Культивирование энтерококков осуществляется на энтерококкагаре.

Результаты диагностики

После оценки формы, окраски и других особенностей колоний бактерий, специалист предоставляет окончательный результат:

отрицательный – означает отсутствие бактериальной и грибковой флоры в материале. В таком случае причиной развития болезни может стать вирусный возбудитель.
положительный – указывает на наличие патогенных/условно-патогенных микробов, которые способны вызвать заболевание. Активизация и стремительное размножение условно-патогенных микробов происходит при снижении иммунитета. При наличии грибковой флоры, в частности, дрожжеподобных грибов Candida, может развиваться кандидоз ротовой полости.

Врач направляет пациента сделать мазки из зева и носовых полостей при подозрении на инфекционное происхождение болезни. Благодаря комплексной диагностике врач имеет возможность определить состав микрофлоры слизистой оболочки. Это позволяет поставить точный диагноз и определить дальнейшую лечебную тактику.

Взятие мазка из зева и носа проводится с целью бактериологического и вирусологического исследования для определения возбудителя заболевания. Мазок берут при подозрении на дифтерию, менингококковую инфекцию и новую коронавирусную инфекцию COVID-19 (SARS-CoV-2). Диагностика проводится разными методами: бактериологическими и ПРЦ (метод полимеразной цепной реакции). Для медицинской сестры важно правильно взять мазок, чтобы результат исследования был достоверным.

Взятие мазка из зева и носа: показания и противопоказания

Цели взятия мазков из зева и носа следующие:

выявление возбудителя заболевания
выявление бактерионосительства
определение чувствительности микрофлоры ротоглотки и носоглотки к антибиотикам

Показания для манипуляции:

ангина, в особенности — при наличии патологического выпота на миндалинах
паратонзиллит
паратонзилляный (заглоточный) абсцесс
инфекционный мононуклеоз
стенозирующий ларингит, ларинготрахеит
подозрение на носительство стрептококковой и стафилококковой инфекции
подозрение на дифтерию
контакт с больным дифтерией
подозрение на коклюш
контакт с больным коклюшем
подозрение на менингит
контакт с больным менингитом
подозрение на коронавирусную инфекцию
контакт с больным COVID-19

Противопоказания:

абсолютных — нет. Относительные:

невозможность открыть рот
травмы, ожоги лица
анатомический дефект костей черепа
геморрагический диатез в тяжелой форме

Оснащение для проведения манипуляции

Для взятия мазка из зева и носа необходимо подготовить:

средства индивидуальной защиты (СИЗ) для медицинского работника — одноразовый дополнительный халат, шапочка, маска или респиратор, защитные очки или щиток, двойные перчатки
бланк направления на исследование
штатив для пробирок
стерильные зонды-тампоны
пробирки с транспортной средой
стерильный шпатель
стеклограф или нестираемый маркер
емкости с дезинфицирующими растворами

Набор для взятия мазка

Перед выполнением процедуры следует подготовить набор для забора мазка. Тип микроорганизма и планируемый тест определяют тип зонда-тампона и субстрата.
Для забора материала для исследования методом ПЦР следует использовать только зонды-тампоны с синтетическим волокном, намотанным на пластиковый стержень (другие могут вызвать ингибирование ПЦР). Нельзя использовать зонды-тампоны из органическим материалов (напр. хлопка, дерева) или с альгината кальция, поскольку они могут ингибировать ПЦР.

Кроме того, при взятии мазка в направлении коклюша не следует использовать хлопковые тампоны или тампоны из искусственного шелка (района). Полиэстеровые, дакроновые или нейлоновые тампоны на пластиковом стержне, вероятно, являются универсальными. На стержне зонда-тампона имеется: заводская отметка глубины, на которую он должен быть вставлен, и сужение, на котором его следует сломать после опускания в пробирку.
В случае диагностики на наличие SARS-CoV-2 можно использовать:

коммерческие наборы — содержат гибкий флокированный пластиковый зонд и пробирку с вирусологической средой
наборы home made (для мазков из горла и носа), содержащие:

стерильные флокированные или стандартные пластиковые зонды-тампоны с тампонами из дакрона, вискозы или искусственного шелка
пробирки со стерильным забуференным 0,9 % раствором NaCl в объеме, позволяющем погрузить конец зонда-тампона (рис. 1).

Рисунок 1. A — оборудование, необходимое для приготовления набора home made: 1 — игла для набирания 0,9 % раствора NaCl, 2 — шприц, 3 —небольшая упаковка с 0,9 % раствором NaCl (следует использовать небольшие упаковки, чтобы избежать контаминации раствора при его многократном использовании), 4 — зонд-тампон, 5 — пробирка. Б — 0,9 % раствор NaCl должен быть набран в шприц в асептических условиях. В — примерно 1 мл раствора следует налить в пробирку, в которую после взятия мазка будет помещен зонд-тампон

Перед взятием мазка следует описать пробирку, в которую будет помещен зонд-тампон, и наклеить на нее код (если требуется; рис. 2).

Рисунок 2. Описание и приклеивание кода на пробирку. На пробирке должна быть указана следующая информация: имя и фамилия пациента, дата рождения, дата и время взятия мазка

Взятие мазка из зева и носа: алгоритм

При заборе материала важно! правильно держать зонд — между большим пальцем и остальными пальцами кисти, взяв его в руку, как писчее перо:

Надеть средства индивидуальной защиты
Представиться пациенту
Идентифицировать личность пациента
Убедиться в наличии информированного согласия на проведение процедуры
Объяснить пациенту цель и ход процедуры
Заполнить бланк направления на исследование
Промаркировать пробирки
Предложить пациенту удобно сесть лицом к источнику света

Взятие мазка из зева

Материал из зева и ротоглотки на дифтерию, коклюш, коронавирус, менингит, стафилло- и стрептококки следует забирать натощак и до приема лекарств либо не ранее, чем через 2 часа после приема пищи. Методика следующая:

Попросить пациента слегка запрокинуть голову
Взять в левую руку пробирку со стерильным влажным зондом и стерильный шпатель
Попросить пациента открыть рот
Левой рукой надавить на корень языка, правой — извлечь из пробирки стерильный зонд
Не касаясь зубов, слизистой языка и щёк, вращательными движениями провести зондом по дужкам и миндалинам, при необходимости — задней стенке ротоглотки. При взятии мазка на коклюш, коронавирус, менингит, носительство стрептококковой и стафилококковой инфекций — обязательно с задней стенки ротоглотки! Если имеются налёты — провести по границе здоровой и пораженной ткани, слегка нажимая на них зондом
Извлечь зонд и сразу поместить его в пробирку, не касаясь её стенок

Взятие мазка из носа

Попросить пациента очистить носовые ходы и слегка запрокинуть голову
Взять в левую руку пробирку с сухим зондом, правой — извлечь сухой зонд из пробирки
Передний назальный мазок. Легким вращательным движением ввести зонд в левый носовой ход по наружной стенке носа на глубину 1-3 см до нижней носовой раковины. Не касаться кожи крыльев носа!
Назальный мазок с задней стенки глотки. Применяется при заборе материала на SARS-CoV-2 (возбудитель коронавирусной инфекции). Техника меняется. После введения зонда на 1-3 см зонд слегка опустить книзу, аккуратно ввести под нижнюю носовую раковину до задней стенки носоглотки (на 3-4 см у детей и 5-6 см у взрослых). Извлечь зонд также вращательными движениями.
Не касаясь краёв пробирки, поместить в нее зонд.

Взятие мазков из зева и носа на SARS-CoV-2 осуществляется специальными зондами. После забора материала конец каждого зонда отламывают и помещают в микропробирку типа эппендорф. Важно! Оба зонда — с материалом как из ротоглотки, так и из носоглотки — помещают в одну пробирку с крышкой для большей концентрации вирусов.

Отправка материала в лабораторию

Пробирки помещают в термос или термоконтейнер с хладоэлементами. Температура хранения материала — от +2ºC до +8ºC, время хранения — до 24 часов.

Пробирка должна быть правильно упакована. Правила упаковки образцов должны соответствовать 2-му уровню биологической безопасности ( BSL2 ), а контейнеры должны быть упакованы и описаны в соответствии с принципами для агентов, вызывающих заболевания у людей. Применяется принцип тройной упаковки (1 — основной контейнер, 2 — вторичная упаковка, 3 — внешняя упаковка).

Наружная поверхность основного контейнера должна рассматриваться как контаминированная, поэтому ее следует помещать во вторичную упаковку таким образом, чтобы минимизировать риск контаминации вторичной упаковки. В зависимости от процедур, используемых в данном учреждении, и количества людей, принимающих участие в заборе мазка и упаковке образцов, отдельные этапы процедуры могут отличаться. Например, если образцы берут в доме пациента и всю процедуру выполняет только один человек, то перед тем, как поместить основной контейнер во вторичную упаковку, он должен покинуть дом пациента, деконтаминировать руки, снять внешние перчатки и внешний халат, снова деконтаминировать руки, надеть новую пару перчаток, продезинфицировать их, поместить основной контейнер во вторичную упаковку, плотно закрыть ее, продезинфицировать руки, а затем внешнюю поверхность вторичной упаковки.

Вторичная упаковка должна содержать абсорбирующий слой, который будет абсорбировать жидкость при разгерметизации пробирки.

Направления, прикрепленные к образцам, не могут быть помещены во вторичную упаковку, но они должны быть помещены в запечатанный конверт, прикрепленный к внешней упаковке.

Надеемся, взятие мазка из зева и носа не вызовет у вас трудностей, а станет легко выполняемым навыком, которым должна владеть каждая медицинская сестра.