Анализ на менингококковую инфекцию в инвитро

Обновлено: 28.03.2024

Анализ для определения носительства микроорганизмов, вызывающих поражение мозговых оболочек и внебольничную пневмонию (Neisseria meningitidis, Haemophilus influenzae, Streptococcus pneumoniae), и комплексной диагностики этих заболеваний. Исследование осуществляется с помощью ПЦР — высокочувствительного метода, позволяющего выявить даже минимальное количество генетического материала возбудителя в исследуемом образце.

Приём и исследование биоматериала

Когда нужно сдавать анализ Менингококк, гемофильная палочка, стрептококк (Neisseria meningitidis, haemophilus influenzae, streptococcus pneumoniae, ПЦР) соскоб, кач.?

  1. Проведение дифференциальной диагностики респираторных бактериальных инфекций;
  2. Проведение исследования по эпидемиологическим показаниям;
  3. Дифференциальная диагностика причин внебольничной пневмонии;
  4. Дифференциальная диагностика патологий с клинической картиной менингита.

Подробное описание исследования

Среди инфекций, передающихся воздушно-капельным путем, есть несколько наиболее опасных. Им уделяют повышенное внимание по нескольким причинам:

  1. Высокая контагиозность, которая обеспечивает быстрое распространение инфекции, особенно в закрытых коллективах (детские сады, школы, воинские части, общежития);
  2. Тяжелое течение, высокий риск развития молниеносных форм, оканчивающихся летальным исходом, и осложнений. В патологический процесс могут быть вовлечены многие органы и системы органов (нервная система, сердечно-сосудистая система, кожа, суставы), очень часто наблюдается развитие токсико-аллергических реакций;
  3. Повышенная восприимчивость детей до 5 лет к этим болезням, при этом болезнь протекает у них намного тяжелее, чем у взрослых;
  4. Трудность диагностики заболевания на ранних стадиях.

Neisseria meningitidis (менингококк) — бактерия, известная как возбудитель менингококковой инфекции. Это заболевание связано с воспалительным поражением головного мозга, точнее его оболочек и субарахноидального пространства. Передается с частицами слюны по воздуху при разговоре, чихании, кашле от носителя инфекции или болеющего человека. Вспышки заболевания обусловлены нахождением в больших коллективах и возникают в 90% случаев в детских садах и школах, реже в студенческих общежитиях и солдатских казармах.

У заболевания есть несколько форм:

  1. Локализованная: воспаление ограничивается верхними дыхательными путями — назофарингит, бессимптомное носительство;
  2. Генерализованная: с воспалительным поражением только мозговых оболочек (менингит) или также и головного мозга (менингоэнцефалит), попаданием бактерии в кровь (менингококцемия);
  3. Атипичная: наблюдается попадание возбудителя в другие органы — легкие, сердце, суставы.

Насколько выражены клинические проявления заболевания, связано с формой его течения. Так, генерализованная форма протекает менее благоприятно. Начало обычно внезапное: резко поднимается температура, появляется выраженное недомогание, рвота, у маленьких детей могут возникнуть судороги. При менингококцемии выявляется красно-фиолетовая мелкоточечная сыпь на нижних конечностях, распространяющаяся затем на все тело. На фоне бледной кожи она напоминает картину звездного неба. Инфицированный человек сначала отмечает тревогу, учащение сердечных сокращений, лихорадку. На смену психическому возбуждению приходит заторможенность, вялость, нарушение сознания. Температура несколько снижается, а частота сердечных сокращений возрастает. Наряду с указанными симптомами отмечается нарушение свертывания крови и множественные кровоизлияния в органы, что вызывает инфекционно-токсический шок. Тяжесть заболевания объясняет связанную с ним высокую летальность, до 10-15 %, при менингококцемии до 60%.

В некоторых случаях изменения в органах после пренесенной менингококковой инфекции носят необратимый характер. Отмечаются нарушения слуха, зрения, неврологические и психические расстройства. Без срочной терапии прогноз неблагоприятный.

Haemophilus influenza (гемофильная палочка) — возбудитель гемофильной инфекции, вызывающей воспаление дыхательных путей и центральной нервной системы. Попадание гемофильной палочки в кровь может привести к возникновению сепсиса с развитием множественных гнойный очагов в разных тканях и органах.

Гемофильная палочка относится к представителям условно-патогенной микрофлоры слизистой оболочки верхних дыхательных путей человека. Поэтому заразиться можно не только от человека, имеющего признаки болезни, но и от бессимптомного носителя. Инфекция передается воздушно-капельным путем. Самая высокая восприимчивость к гемофильной инфекции наблюдается среди детей до 3-х лет. Половина случаев инфицирования патологическими типами гемофильной палочки происходит в детских учреждениях.

У гемофильной инфекции нет специфичных симптомов, особенно на ранних стадиях

Болезнь может протекать в неинвазивной или инвазивной форме, а также в виде сепсиса. К неинвазивным формам гемофильной инфекции относят воспаление среднего уха (отит), слизистых оболочек глаз (конъюнктивит) и дыхательных путей (бронхит). Если бактерия проникла в кровь (бактериемия) или в органы и ткани (менингит, эпиглоттит, остеомиелит и другие), то речь идет об инвазивной форме.

У людей со скомпрометированным иммунитетом и детей ввиду незрелости иммунной системы риск тяжелого течения инфекции выше.

Streptococcus pneumoniae (пневмококк) — бактерия, способная вызвать воспаление верхних и нижних дыхательных путей (бронхит, пневмония), также является причиной развития менингита, эндокардита, острого среднего отита, гайморита.

Заражение часто происходит воздушно-капельным путем и при близком контакте с инфицированными людьми. Реже можно заразиться через использование ингалятора после больного человека, при введении в трахею инородных тел (интубация трахеи, бронхоскопия). В группе риска находятся дети, люди пожилого возраста, лица с ослабленным иммунитетом, хроническими заболеваниями или удаленной селезенкой.

В основном пневмококк поражает органы дыхательной системы, но лица из группы риска более восприимчивы к развитию инвазивных пневмококковых инфекций в виде сепсиса и менингита.

Вышеперечисленные болезни имеют схожие проявления. Все они представляют трудность для диагностики на ранних стадиях, однако требуют незамедлительного начала лечения. Для подтверждения окончательного диагноза бактериальной инфекции требуется проведение лабораторной диагностики. Среди них выделяют культуральные (посев) и некультуральные методы (ПЦР-анализ, серологические исследования).

Важным методом диагностики менингококковой, гемофильной и стрептококковой инфекции служит ПЦР-исследование. В его основе выделение ДНК микроорганизмов из полученного биологического образца. Забор материала для исследования проводится соскобом в лаборатории. Метод обладает высокой чувствительностью, позволяет быстро подтвердить инфицирование и назначить оптимальное лечение.

Диагностика менингококковой инфекции

Менингококковая инфекция — это группа острых антропонозных заболеваний, возбудителем которых является грам-трицательные парные бактерии Neisseria meningitidise (менингококк).

В зависимости от серотипа поражает различные органы и системы с разными клиническими проявлениями. Объединяет заболевания форма передачи ― воздушно-капельная при тесном контакте с носителем (менее 1 метра). Бактерии не устойчивы во внешней среде, быстро погибают вне организма. Заболевание считается опасным за счет всеобщей восприимчивости населения к инфекции, скоротечности болезни, высокой вероятности развития осложнений и летального исхода.

Классификация

По клиническим проявлениям менингококковую инфекцию делятся на следующие типы:

Локализованная ― менингококконосительство (бессимптомное пребывание менингококка на слизистой носоглотки), назофарингит.

Генерализованная ― менингит, менингоэнцефалит, острая, типичная, хроническая формы менингококкемии, а также смешанная генерализованная форма (менингит и менингококкемия).

Редкие формы ― менингококковый артрит (синовит), полиартрит, пневмония, эндокардит, иридоциклит.

Симптомы

Менингококковые инфекции имеют ярко выраженную симптоматику за исключением легких форм назофарингит и менингококконосительства. В последнем случае человека можно назвать условно здоровым, поскольку нет жалоб и клинических признаков. Носитель, как правило взрослых человек, представляет угрозу для своего окружения, особенно для детей, тяжело переносящих инфекцию. В среднем, согласно статистике, период носительства составляет от 15 до 20 дней.

менин6.jpg

Симптоматика острого назофарингита

Заложенность носа, вызывающая гнусавость речи.

Першение в горле, отечность, боль при сглатывании.

Бледность кожных покровов.

Упадок сил, снижение аппетита, головная боль.

Иногда болезнь проявляется вестибулярными нарушениями, выражающимися в головокружение, шуме в ушах, тошноте. Чихание и кашель отсутствуют, иногда могут быть слизисто-гнойные выделения из носа. В целом симптомы напоминают ОРЗ, поэтому важно провести дифференциальную диагностику. На 5 - 7 день наступает выздоровление либо переход заболевания в генерализованную форму.

Менингококкемия (менингококковый сепсис)

Внезапное начало заболевания, сопровождающееся повышением температуры до +40 С.

Сильные головные боли, светобоязнь, судороги, рвота.

Розовая или розово-красная сыпь папулезного типа появляется на 1 - 2 день. Пятна различного размера от 5 до 20 мм.

Ригидность мышц затылка ― невозможно прижать подбородок к груди.

Симптом Брудзинского. При попытке притянуть голову к груди больной непроизвольное сгибает и подтягивает ноги к животу.

Симптом Кернига. Поочередно ноги лежащего на спине пациента поднимают и сгибают под углом 90° в коленном суставе. Попытка вернуть их в первоначальное положение не удается, так как повышается тонус мышц.

Из всех перечисленных признаков наиболее наглядны геморрагические высыпания. Через 2 дня после появления они пигментируются, образуя язвы и некрозы. В тяжелых ситуациях патологические изменения могут привести к сухой гангрене и последующей ампутации.

менин4.jpg

Менингококковый менингит

Быстрый подъем температуры тела до +40 °C.

Сильная головная боль, приступы которой вызваны движением, прикосновением, ярким светом и громкими звуками.

Неоднократная рвота, не зависимая от приема пищи, не несущая облегчения.

Низкое артериальное давление, учащенный пульс, одышка.

Больной часто принимает позу эмбриона ― лежит на боку с подобранными руками, ноги сжимает в коленях. Характерные симптомы, такие как ригидность затылочных мышц, симптомы Брудзинского и Кернига могут присутствовать, а могут не наблюдаться. Болезнь характеризуется высоким показателем смертности, без должного лечения он достигает 50%. У выживших могут проявиться последствия перенесенной инфекции: парезы, глухота, интеллектуальные нарушения, гидроцефалия.

Гипертоксическая (молниеносная) форма менингококковой инфекции

Внезапный подъем температуры до +40 С и более.

Кожа холодная, липкая от пота. Больного лихорадит, могут быть судороги.

Многочисленные геморрагические высыпания, появляющиеся на глазах. Мелкие пятна быстро сливаются в большие геморрагии багрово-цианотичного цвета. Кожные изменения похожи на трупные пятна.

Артериальное давление пониженное.

Гипертоксическая форма развивается крайне быстро, в течение нескольких часов. Возникает отек головного мозга, сопровождающийся сильнейшими головными болями, головокружением, рвотой, потерей сознания. Это ведет к инфекционно-токсическому шоку ― состоянию требующему немедленной реанимационной помощи. Без своевременного лечения больной может умереть.

Диагностика менингококковой инфекции

Выбор лабораторного материала для анализа зависит от формы заболевания, это может быть кровь, носоглоточная слизь, ликвор, соскоб с геморрагической сыпи, гнойные выделения с мозговых оболочек.

При назофарингите и у бессимптомных носителей берут носоглоточные выделения, используя специальный тампон. Материал необходимо взять с задней стенки глотки за мягким нёбом.

При цереброспинальном менингите осуществляют забор ликвора (спинномозговой жидкости). Его собирают пункцией в количестве 2 - 5 мл в стерильную пробирку. Сразу сеют на питательную среду либо срочно, соблюдая температурный режим, отправляют в лабораторию. В момент сбора спинномозговой жидкости можно визуально определить наличие гноя, в этом случае ликвор будет мутным. В отдельных случаях обнаружить бактерии можно только под микроскопом.

При заборе биоматериала посмертно, наиболее часто для анализа берут гной с оболочек мозга. Исследование необходимо для уточнения диагноза. Если менингококковое заболевание подтвердится, следует выявить круг контактирующих лиц, чтобы не допустить распространение инфекции.

менин7.jpg

Анализ крови и сыворотки крови является дополнительным. Он позволяет оценить степень тяжести состояния, а также обнаружить антитела к менингококку. Основываясь на данных исследования мочи можно определить работу почек. Для постановки диагноза и оценки степени поражения организма используются такие методы инструментальной диагностики, как эхокардиография, рентгенограмма, УЗИ головного мозга и органов брюшной полости, допплерографическое исследование сосудов, офтальмоскопия, магнитно-резонансная томография.

Виды лабораторной диагностики инфекции менингококка

Бактериоскопическое исследование (РА, ПЦР). Определяет наличие менингококков, серогруппу и их концентрацию. Позволяет проводить дифференциацию от других бактерий, вызывающих воспаление головного и спинного мозга. Посев культуры выводят от 18 до 24 часов в термостате при +37 С, повышенном содержании CO2 (до 10%). Определяют принадлежность к Neisseria meningitidis путем выявления выработки уксусной кислоты в результате ферментации глюкозы и мальтозы.

Серологический метод (ИФА, РИА) основывается на выявлении и определении концентрации антител IgM. Титр значительно повышается в начале менингококковой инфекции при генерализованных формах. Концентрация снижается в период ремиссии, антитела IgG начинают преобладать над иммуноглобулинами IgM. У переболевших в сыворотке крови обнаруживают специфические бактерицидные антитела: агглютинины и гемагглютинины.

Вне зависимости от типа биоматериала, он требует срочного проведения анализа поскольку возбудитель погибает вне тела человека. Лабораторная диагностика включает микроскопию, биологический посев, требует проведения не только идентификации возбудителя, но и определения антибиотикочувствительности.

Лечение

При терапии менингококковой инфекции, независимо от степени проявления заболевания и его формы, врач рассматривает состояние пациента, как смертельно опасное. Особенно это касается детей, ведь более половины из них проходят через реанимацию. Больного госпитализируют для проведения экстренной диагностики. Назначить антибиотики можно только после проведения лабораторных анализов.

менин5.jpg

В зависимости от серотипа основой лечения могут стать такие препараты, как пенициллин, ампициллин, хлорамфеникол. В эпидемиологических условиях при ограниченных ресурсах предпочтение отдают цефтриаксону. Антибиотики являются основой лечения, однако, вместе с ними используют жаропонижающие, противосудорожные и противоотечные препараты, медикаменты инфузионной, детоксикационной и оксигенотерапии. Таким образом проводится комплексное лечение менингококковой инфекции с индивидуальным подбором препаратов, под постоянным контролем врача. Терапия осложненных генерализованных форм может длиться в течение месяца, а реабилитация занимать несколько лет.

Осложнения и последствия

Во время болезни могут возникнуть следующие осложнения:

отек головного мозга;

геморрагический церебральный инсульт;

острая почечная недостаточность;

паралич и другие дисфункции.

На фоне инфекции менингококка может развиться герпес, отит, менингококковая пневмония. Тяжелое течение заболевания может стать причиной развития астенического синдрома, выражающегося в общей слабости и периодических головных болях. Привести к артериальной гипертензии, снижению слуха, эпилепсии и гемипарезу (паралитическому поражению одной стороны тела). У пациентов перенесших менингококковую инфекцию часто возникают апатии и депрессии.

Профилактика заболеваний

Постинфекционный иммунитет. После перенесенного заболевания возникает стойкий иммунитет, защищающий от повторного инфицирования. Однако, он возникает только к той серогруппе бактерий, которые вызвали заболевание. Всего же существует 12 видов менингококковых групп.

Вакцинация. Разработано 3 вида вакцин:

Поливалентные полисахаридные (изобретены 30 лет назад).

Вакцины моно- и поливалентные конъюгированные (применяются с 1999 года).

Новая моновалентная конъюгированная вакцина MenA (разработана в 2010—2011 гг.).

Максимально препарат может охватить только 4 серогруппы: А, С, Y и W. К сожалению, такой вакцины, чтобы защитила от всех видов инфекции пока не разработано.

Менингококковая прививка не входит в календарь детских прививок. Пройти вакцинацию можно только самостоятельно. Проводить ее стоит перед поездкой в страны, входящие в зону риска, и по эпидемиологическим показаниями, т.е. в период эпидемии, когда известен серотип.

Преимущества АО "СЗДЦМ"

Лабораторные исследования имеют крайне важное значение в лечении, особенно таких серьезных заболеваний. Важно получить не только быстрый, но и наиболее точный и развернутый результат.

К вашим услугам:

Лаборатория с технологичным оборудованием.

Квалифицированный и доброжелательный персонал.

Быстрое проведение анализов и несколько вариантов получения результатов.

Медицинские центры и терминалы находятся в местах с удобной транспортной развязкой в Санкт-петербурге, Ленинградской области, Великом Новгороде, Старой Руссе, Окуловке и Пскове.

Подтверждение этиологии менингита, этиологии суперинфекции при вирусных заболеваниях и бацилоносительстве.

Neisseria meningitides - грамотрицательный диплококк (менингококк) - может вызвать у человека менингит (примерно 60% этой патологии) и сепсис. Тяжесть этих заболеваний варьирует от небольшой лихорадки до молниеносного сепсиса, приводящего к летальному исходу в течение нескольких часов.

Главный резервуар носоглотка (почти у 5% всех людей!). Менингококк распространяется воздушно-капельным путём. Чаще всего менингококковым менингитом заболевают дети первого года жизни. Заболевание начинается с лихорадки, головной боли, рвоты, ригидности шейных мышц, нарушения сознания. Менингококк может быть причиной суперинфекции у больных гриппом и, особенно, у больных с иммунодефицитом.

Выделяемые возбудители: Neisseria meningitidis.

Обратите внимание! Стоимость анализа указана для каждой отдельно взятой локализации. Для микробиологических исследований возможна дополнительная оплата стоимости взятия биоматериала или транспортной среды.

Просим уточнять информацию в Федеральной справочной службе ИНВИТРО по тел. (495) 363-0-363.

Литература

  1. Приказ МЗ РФ от 23 декабря 1998 г. № 375 О мерах по усилению эпидемиологического надзора и профилактики менингококковой инфекции и гнойных бактериальных менингитов.
  2. Руководство по медицине (ред. Р. Беркоу) М. Мир, Т1. сс. 1000 - 1005.
  3. Яковлев С.В. Бактериальные менингиты в отделении интенсивной терапии.// Consilium Medicum. - 2001. - Т. 3., - №11.
  4. Wallach J. Interpretation of diagnostic tests/ Lippincott, Williams & Wilkins/2000/ 1026 ps.

Литература

  1. Приказ МЗ РФ от 23 декабря 1998 г. № 375 О мерах по усилению эпидемиологического надзора и профилактики менингококковой инфекции и гнойных бактериальных менингитов.
  2. Руководство по медицине (ред. Р. Беркоу) М. Мир, Т1. сс. 1000 - 1005.
  3. Яковлев С.В. Бактериальные менингиты в отделении интенсивной терапии.// Consilium Medicum. - 2001. - Т. 3., - №11.
  4. Wallach J. Interpretation of diagnostic tests/ Lippincott, Williams & Wilkins/2000/ 1026 ps.

Литература

  1. Приказ МЗ РФ от 23 декабря 1998 г. № 375 О мерах по усилению эпидемиологического надзора и профилактики менингококковой инфекции и гнойных бактериальных менингитов.
  2. Руководство по медицине (ред. Р. Беркоу) М. Мир, Т1. сс. 1000 - 1005.
  3. Яковлев С.В. Бактериальные менингиты в отделении интенсивной терапии.// Consilium Medicum. - 2001. - Т. 3., - №11.
  4. Wallach J. Interpretation of diagnostic tests/ Lippincott, Williams & Wilkins/2000/ 1026 ps.

Интерпретация результатов исследования содержит информацию для лечащего врача и не является диагнозом. Информацию из этого раздела нельзя использовать для самодиагностики и самолечения. Точный диагноз ставит врач, используя как результаты данного обследования, так и нужную информацию из других источников: анамнеза, результатов других обследований и т.д.

  • об отсутствии или наличии роста менингококка;
  • о чувствительности возбудителей к антибиотикам.

При исследовании ликвора указываются другие возбудители бактериального менингита, если получен их рост, а также чувствительность их к антибиотикам.

Этот анализ принимается по сокращённому графику. Это связано с тем, что биоматериал должен попасть в лабораторию в очень короткий срок. Проверьте расписание сокращённого графика приёма на странице вашего отделения. При сдаче вне графика срок выполнения исследования может быть увеличен на 1-3 дня.

Приём и исследование биоматериала

Когда нужно сдавать анализ Менингококк, гемофильная палочка, стрептококк (Neisseria meningitidis, haemophilus influenzae, streptococcus pneumoniae, ПЦР) плазма, кач.?

  • Дифференциальная диагностика менингококковой инфекции.
  • Проведение обследования в эпидемиологических очагах менингита.
  • Дифференциальная диагностика внебольничной пневмонии.
  • Выявление бессимптомного бактерионосительства.
  • Дифференциальная диагностика патологий с клинической картиной, сходной с менингитом: болезнью Фабри, нейролейкемией, системной красной волчанкой, субарахноидальным кровоизлиянием, саркоидозом, субдуральной эмпиемией, васкулитами, карциномой, мигренью.
  • Диагностика Hib-инфекции при пневмонии, эпиглотите, менингите, септицемии, отитах, синуситах, гнойных артритах, остеомиелите.
  • Дифференциальная диагностика с инфекциями, вызванными другими возбудителями (S. Pyogenes, S. aureus, C. diphtheriae, различные вирусы и др.).

Подробное описание исследования

Исследование качественное, проводится методом полимеразной цепной реакции (ПЦР) и позволяет обнаружить ДНК Neisseria meningitidis, Haemophilus influenzae, Streptococcus pneumoniae. Используется для диагностики менингита, внебольничной пневмонии и обследования контактных лиц в очагах инфекции.

Neisseria meningitidis (нейссерия менингитидис) — возбудитель менингита и менингококкового сепсиса.

Путь передачи: воздушно-капельный.

Источник инфекции: носители возбудителя и больные люди.
Инкубационный период: 2–6 дней.

Заболевание протекает в одной из форм:

  • локализованно (острый назофарингит, носительство);
  • генерализованно (менингоэнцефалит, менингококцемия, менингит);
  • атипично (пневмония, эндокардит, полиартрит).

Выраженность симптомов зависит от формы заболевания. При отсутствии адекватного лечения возможен летальный исход.

Haemophilus influenza (гемофилус инфлюенца) — гемофильная палочка, возбудитель инфекционного заболевания, поражающего центральную нервную систему и легкие.

Источник инфекции: носители возбудителя и больные люди.

Путь передачи: воздушно-капельный.

Наиболее восприимчивы к инфекции дети до 3 лет.

Заболевание протекает в одной из форм:

  • ринофарингит — насморк;
  • пневмония — чаще у детей до 2 лет, с высокой температурой и яркими катаральными явлениями;
  • менингит — стойкое повышение температуры, увеличение в размерах селезенки и печени, симптомы ринофарингита, на 2–4-е сутки – менингиальные симптомы;
  • эпиглотит — воспаление надгортанника, есть риск развития асфиксии;
  • редкие формы: целлюлит (воспаление подкожной жировой клетчатки), конъюнктивит, отит, гнойный артрит, флегмона, сепсис.

Streptococcus pneumoniae (стрептококкус пневмонии) — возбудитель пневмонии, отитов, бронхитов и гайморитов.
Пути передачи:

  1. Бронхогенный: из-за интубации трахеи или бронхоскопии, ингаляции с использованием обсемененных приборов.
  2. Гематогенный: при внутриутробном заражении или сепсисе.
  3. Лимфогенный: с током лимфы.

Чаще всего болеют дети, ВИЧ-инфицированные, пожилые люди, потребители психоактивных веществ и больные алкоголизмом.

ПЦР-диагностика используется для раннего выявления ДНК бактерий и определения вида возбудителя. Она позволяет своевременно подобрать адекватное лечение.

Возбудителем менингококковой инфекции является Neisseria meningitidis (менингококк). Менингококк колонизирует заднюю стенку носоглотки человека и в зависимости от вирулентности штамма и резистентности зараженного лица вызывает инфекционный процесс с широким спектром клинических проявлений: бессимптомное носительство, назофарингит и генерализованную форму – менингококцемию и/ или менингит. Менингококковая инфекция поражает лиц всех возрастов, но чаще (70%) болеют дети. Показатель летальности составляет в среднем 10%, что определяет высокую социальную значимость заболевания. Капсульные штаммы менингококка в зависимости от химического строения капсульного полисахарида делятся на ряд серологических групп: А, В, С, X, Y, Z, W-135, 29-E, H, I, K, L. Более чем 90% случаев генерализованных форм менингококковой инфекции обусловлены штаммами серогрупп А, В и С, значительно реже – штаммами серогрупп X, Y и W-135, остальные серогруппы не представляют эпидемиологического интереса. Определение серогруппы – важнейшая процедура для выбора адекватного вакцинного препарата. Все менингококки экспрессируют на своей поверхности один из аллельных вариантов белков наружной мембраны 2 или 3 класса (PorB). Большинство менингококков экспрессируют белки 1 класса (PorA). Антигенная структура белка PorB определяет серотип штамма, белка PorA – серосубтип. На основании химической структуры капсульного липополисахарида определяют иммунотип. Антигенная характеристика может включать и некоторые другие АГ: Ора и Орс (белки наружной мембраны 5 класса), пили, поверхностный белок FetA.

Показания к обследованию

  • Диагностические исследования проводят в условиях стационара при подозрении на гнойный менингит и/или генерализованную форму менингококковой инфекции;
  • исследования по эпидемическим показаниям проводят в очаге генерализованной формы менингококковой инфекции среди контактировавших с больным и имеющих клинические проявления назофарингита.

Материал для исследования

  • Кровь – микроскопическое исследование, культуральное исследование;
  • СМЖ – микроскопическое исследование, культуральное исследование, выявление ДНК, выявление АГ;
  • мазки из ротоглотки и носа – культуральное исследование;
  • сыворотка крови – выявление АГ, определение специфических АТ

Дифференциальная диагностика

  • Возбудители гнойных менингитов другой этиологии: Streptococcus pneumonia, Haemophilus influenza, Staphylococcus aureus и др.;
  • при исследовании носоглотки – пигментирующие нейссерии Neisseria subflava, Neisseria flavescens, Neisseria mucosa, Neisseria sicca, Neisseria lactamica.

Лабораторная диагностика генерализованной формы менингококковой инфекции включает микроскопию биологического материала, посев биологического материала с дальнейшей культуральной и биохимической идентификацией возбудителя, определением антибиотикочувствительности; обнаружение специфических генетических фрагментов менингококка и его АГ, обнаружение специфических АТ.

Посев СМЖ и крови на питательные среды при дальнейшей инкубации в течение 24 ч при 37 оС в атмосфере с 5–10% СО2 и повышенной влажностью позволяет выявить характерные тинкториальные свойства патогена. Исследование рекомендуется проводить в активной фазе заболевания (первые два дня после поступления в стационар) до начала интенсивной антибактериальной терапии.

При определении сахаролитической активности проводят учет результатов посева чистой культуры на плотные питательные среды с углеводами. Метод дает возможность дифференцировать различные виды нейссерий и некоторые другие виды микроорганизмов (таблица 16). Иногда наблюдается вариабельность сахаролитической активности у различных штаммов одного и того же вида.

Уточнение биохимических свойств менингококков проводят с использованием наборов реагентов для расширенного изучения ферментативной и метаболической их активности, что в течение 2-х часов позволяет определить видовую принадлежность возбудителя.

Определение серогруппы менингококков проводят в реакции агглютинации на стекле с набором агглютинирующих серогрупповых антисывороток (серогруппы А,В,С,X,Y,Z,W-135,29E). Реакцию проводят только с чистой культурой менингококков, прошедшей все этапы идентификации. Менингококки серогрупп А, В и С наиболее часто являются причиной возникновения генерализованных форм менингококковой инфекции, реакцию агглютинации проводят в первую очередь с антисыворотками к менингококкам этих серогрупп. Отсутствие реакции с одной из основных серогрупповых АТ, указывает на необходимость продолжения проведения аналогичных исследований с другими специфическими антисыворотками (X, Y, Z, W-135, 29E). Только в том случае, если подтвержденный всеми тестами штамм менингококка не показал положительного результата в реакции агглютинации с полным набором агглютинирующих антисывороток, его следует отнести к категории неаггютинирующегося штамма (НА).

Для обнаружения АГ в СМЖ и/или сыворотке крови используют реакцию латекс- агглютинации. Исследование нативного ликвора (экспресс-метод) проводится при наличии в нем признаков гнойного воспаления и/или при микроскопическом обнаружении возбудителей. Использование реакции позволяет в кратчайшие сроки (15–20 мин) выявить специфические АГ менингококков самых распространенных серогрупп (А, В, С, У, W-135). Рекомендуется проводить исследование в активной фазе заболевания (первые два дня после поступления в стационар).

Для выявления ДНК патогена используется СМЖ и/или свежая чистая культура Neisseria meningitidis, выросших на чашки Петри. Обнаружение специфических генетических фрагментов микроорганизма выполняют с использованием ПЦР. Метод обладает высокой диагностической чувствительностью и специфичностью, позволяет выявлять в клиническом образце микроорганизмы, содержащиеся в единичных количествах или в нежизнеспособном состоянии, характеризуется высокой воспроизводимостью и сжатыми сроками выполнения исследования (в течение нескольких часов).

Показаниями к проведению исследований для выявления ДНК при диагностике бактериальных менингитов являются:

  • отрицательные результаты диагностики иными методами, особенно в случае исследования образцов СМЖ после проведения массивной антибиотикотерапии или на поздних сроках болезни;
  • необходимость получения срочного ответа об этиологии возбудителя;
  • исследование образцов материала, доставленных в замороженном состоянии или фиксированных этанолом.

Детекция специфических АТ в сыворотке крови при диагностике менингококковой инфекции проводят с использованием РНГА. Рекомендуется проводить исследование дважды: в активной фазе заболевания (первые два дня после поступления в стационар) и на 12–14 день заболевания. Диагноз считается подтвержденным при нарастании титров АТ в четыре и более раза в пределах указанного периода.

Читайте также: