Бак посев на микобактерии туберкулеза

Обновлено: 23.04.2024

Бактериологический метод диагностики туберкулеза. Влияние химиотерапии на диагностику туберкулеза.

Наилучшие результаты получают при одновременном использовании двух различных плотных сред. При этом не следует ограничиваться однократным или даже повторным исследованием, а необходимо последовательно, через известные интервалы производить посевы мокроты или промывных вод бронхов. Целесообразность такой диагностической тактики подтверждается повседневным опытом и, в частности, наблюдениями, проведенными в Институте туберкулеза в Будапеште. При троекратном исследовании методом посева мокроты у значительной группы больных туберкулезом легких микобактерии были обнаружены у 70,3% из них, после 5 анализов — у 80,7%, а после 10 — у 97,9%.

При бактериологическом способе исследования удается не только выявить и подсчитать количество выросших колоний микобактерии туберкулеза, но и изучить их различные свойства, дифференцировать от кислотоупорных сапрофитов и атипичных штаммов, определить типовую принадлежность, ферментативную активность, лекарственную чувствительность и др.

Успехи различных способов культивирования микобактерии, естественно, ограничили сферу применения биологического метода исследования, т. е. заражения животных исследуемым материалом. Но они ни в какой мере пе исключают его. Путем заражения высокочувствительных к туберкулезу лабораторных животных, главным образом морских свинок, можно обнаружить микобактерий, даже если они содержатся в исследуемом материале в небольшом количестве. Это обстоятельство приобретает, конечно, весьма важное диагностическое значение. Тем же способом удается лучше дифференцировать вирулентные и атипичные штаммы от сапрофитов, определить тип микробов, к которым одни виды животных чувствительны, а другие устойчивы, а также установить патогенность и вирулентность микобактерий туберкулеза.

Следует подчеркнуть, что при специфической химиотерапии затрудняется обнаружение микобактерий в различных выделениях, жидкостях и тканях организма больного. Это явление связано с тем, что под влиянием антибактериальных препаратов, особенно при длительной терапии, понижается жизнеспособность микобактерий и изменяются их морфологические свойства и химический состав, что отражается на тинкториальной способности, так как может вести к снижению или утрате присущей микобактериям кислотоустойчивости. Мертвые микобактерий по Цилю—Нельсену окрашиваются так же, как и живые. Для их дифференциации применяют специальные методы окраски. Так, живые микобактерий, в которых содержится нативная дезоксирибонуклеиновая кислота, окрашиваются метиловым зеленым. Погибшие микробы лучше окрашиваются пиронином в розовый цвет, а сафранином — в красный. При докраске карболовым фуксином живые микобактерий окрашиваются в зеленый цвет, а погибшие — в красный.

Распознавание таких биологически и морфологически измененных форм возбудителя туберкулеза, особенно в условиях повседневной практики, естественно, встречает затруднения. Этим отчасти можно объяснить, что у некоторых больных даже деструктивным туберкулезом легких не находят микобактерий туберкулеза в мокроте уже вскоре после начатой химиотерапии. Нет сомнения, что только у части из них произошло стойкое и полное морфологическое и биологическое оздоровление стенок туберкулезных каверн. У остальных имеет место мнимая абациллярность, что подтверждается возможностью обострения процесса при динамическом наблюдении, а также обнаружением микобактерий в полости или стенках каверны при специальном исследовании. В этом можно убедиться, если произвести пункцию, казалось бы, излеченной каверны и исследовать ее содержимое после промывания физиологическим раствором. Пользуясь таким методом, Neef (1966) из 49 больных с остаточными, большей частью небольшими (до 0,5 см в диаметре), посттуберкулезными полостями в легких у 11 больных, т. е. почти в 1/4 случаев, обнаружил микобактерий, которые не удавалось найти в мокроте или в промывных водах бронхов всеми доступными способами.

Таким образом, в условиях современной химиотерапии возникает необходимость дальнейшего усовершенствования методов обнаружения микобактерий туберкулеза. В то же время обязательным условием является одновременное динамическое комплексное применение различных лабораторных способов исследования патологического материала: бактериоскопии, посева, по возможности заражения лабораторных животных. Необходимо, кроме того, использование ряда специальных методов для выявления не только классических, но и других вариантов возбудителя.

Так, применяя новые питательные среды, а также пенициллин и дигидрострептомицин, можно выделить из мокроты, спинномозговой жидкости, мочи и тканей больных туберкулезом L-формы микобактерий в виде мелких зерен и шаровидных тел.

При дифференциации типичных и атипичных микобактерий используют комплекс многих методов исследования: определяют кислотно- и спиртоустойчивость микобактерий; изучают особенности их роста при различной температуре, на отдельных питательных средах, при наличии и отсутствии солнечного света; исследуют морфологию культур и способность образовывать пигмент; устанавливают степень чувствительности к туберкулостатическим препаратам. Существенное диагностическое значение имеют некоторые биохимические тесты: амидазный и ниациновый, определение каталазной, дегидрогеназной, пероксидазной, уреазной и липазной активности и реакция восстановления нитратов. О вирулентности тех или иных штаммов микробов судят по результатам определения корд-фактора и цитохимическим тестам. Их патогенность устанавливают при заражении морских свинок, белых мышей, кроликов, кур. Эти исследования дополняются изучением антигенных структур, а также аллергическими пробами с туберкулином и сенситинами, серологическими реакциями у больных.

Определенную роль в клинике туберкулеза органов дыхания играет вторичная — смешанная — инфекция, что связано прежде всего с тем что при нем нередко отмечаются хронический бронхит и пневмония, пневмосклероз, бронхоэктазы. Эти изменения могут сопутствовать туберкулезу или становятся его осложнением, особенно при длительном течении. В том и другом случае, отмечают Н. В. Татарский и А. Я. Цигельник (1968), создаются условия для проявления активности вторичной флоры и развития ряда клинических симптомов: повышения температуры, увеличения количества мокроты, нарастания катаральных явлений в легких, амилоидоза и т. д. При бактериологическом исследовании при этом обнаруживают различного вида стрептококки и стафилококки, грамположительные и грамотрицательные кокки, кишечную палочку и т. д. Все они имеют различную степень чувствительности к отдельным антибиотикам. При этом обязательным является выделение чистых культур и определение их патогенности.

При дифференциальной диагностике туберкулеза и глубоких микозов— аспергиллеза, гистоплазмоза, актиномикоза, кокцидиомикоза, нокаридиоза, кандидомикоза и т. д. — важно не только тщательно исследовать нативные и окрашенные препараты мокроты на присутствие дрожжеподобных грибов рода Candida, Coccidoides immitis, Histoplasma capsulatum, Aspergillus fumigatus и т. д., но и производить посевы на специальные питательные среды, главным образом на среду Сабуро с агаром или без него. Положительные результаты приобретают большее диагностическое значение, если одновременно у больных выявляются кожные реакции на кокцидиоидин, гистоплазмин, аспергиллин, бластомицин и др., а также серологические реакции с соответствующими антигенами (реакция преципитации, связывания комплемента).

Анализ проводится в Москве и регионах, вся информация — по телефону единой справочной службы. Сдавать его можно не только в лаборатории: доступно взятие материала на дому (уточняйте у администратора клиники). Стерильная емкость приобретается заранее.

Этот анализ принимается по сокращённому графику. Это связано с тем, что биоматериал должен попасть в лабораторию в очень короткий срок. Проверьте расписание сокращённого графика приёма на странице вашего отделения. При сдаче вне графика срок выполнения исследования может быть увеличен на 1-3 дня.

Приём и исследование биоматериала

Когда нужно сдавать анализ Посев на туберкулез (Mycobacterium tuberculosis)?

Симптомы, связанные с поражением легких и бронхов;
подтвержденный контакт с инфицированным лицом, в том числе совместное пребывание в закрытом сообществе;
дифференциальная диагностика между заболеваниями, проявляющихся лихорадкой и поражением легких.

Подробное описание исследования

Посев на туберкулез относится к бактериологическим методам исследования. Данный вид диагностики дает возможность наиболее точно подтвердить наличие заболевания.

Микобактерии туберкулеза (mycobacterium tuberculosis) представляют собой прямые или изогнутые палочки, не имеющие жгутиков (неподвижные) и не образующие спор. Достаточно устойчивы к воздействию внешних факторов: в воде сохраняются до полугода, при обработке дезинфектантами жизнеспособны несколько часов. Тем не менее чувствительны к ультрафиолету и высоким температурам.

После поглощения особыми иммунными клетками, макрофагами, могут бессимптомно персистировать внутри них на протяжении нескольких лет. Способны к образованию L-форм — бактерий, у которых полностью или частично отсутствует клеточная мембрана. Благодаря такой особенности они не провоцируют выраженный иммунный ответ, длительно сохраняясь в организме и вызывая повторное инфицирование после завершения лечения.

Заболевание, которое вызывают mycobacterium tuberculosis, — одна из наиболее распространенных инфекционных болезней в мире. Всего в настоящее время в мире инфицировано — без клинических признаков заболевания — примерно 25-30 % населения. Путь передачи — воздушно-капельный, иногда контактно-бытовой, при использовании общих предметов обихода.

Туберкулез поражает в первую очередь легкие, хотя может затрагивать и прочие внутренние органы: кости и суставы, кишечник, почки, структуры центральной нервной системы, кожу. На долю легочной формы приходится примерно 80-90 % от всех случаев заражения. Проявления внелегочного туберкулеза разнообразны и зависят от локализации патологического процесса.

Симптомы при туберкулезе неспецифические, заболевание может быть заподозрено при наличии следующих симптомов:

Прогрессирующее снижение массы тела;
Проявления умеренной интоксикации: субфебрильная температура, утомляемость при привычных нагрузках, ночная потливость, отсутствие аппетита;
Упорный кашель (с мокротой или без) различной интенсивности;
Дискомфорт в грудной клетке, заложенность, тупая боль.

Лица с иммунодефицитом, врожденным или приобретенным, в том числе носители ВИЧ;
Люди, находящиеся в ежедневном контакте с больным (коллеги, члены семьи, участники закрытых групп);
Дети младшего возраста, проживающие в неблагоприятных социально-бытовых условиях.

Важным механизмом защиты от инфекций является иммунный ответ организма. При туберкулезе легких он проявляется развитием воспаления с формированием специфической гранулемы. Это позволяет ограничить распространение инфекции.

Важным при диагностике туберкулеза является проведение посева мочи. Внелегочные формы заболевания могут поражать мочеполовую систему и долго протекать бессимптомно или с признаками воспалительного процесса, мочекаменной болезни.

Исследование наличия микобактерий туберкулеза в мокроте для подтверждения диагноза и оценки эффективности лечения.

Приём и исследование биоматериала

Когда нужно сдавать анализ Анализ мокроты на микобактерии туберкулеза?

Комплексная диагностика туберкулеза легких;
Скрининг заболевания туберкулезом у людей, которым не может быть выполнено лучевое исследование грудной клетки;
Оценка эффективности лечения туберкулеза легких.

Подробное описание исследования

Туберкулез представляет собой хроническое заболевание, вызываемое микобактериями (Mycobacteriumtuberculosis, Mycobacteriumbovis и др.), которое приводит к поражению легких и некоторых других органов. Заражение туберкулезом наиболее часто осуществляется воздушно-капельным путем при распространении микроскопических частиц слюны, например, при кашле или чихании человека с активной формой заболевания. Менее распространённЫй контактный путь (через общие предметы быта в отсутствие их обработки дезинфицирующими средствами) и пищевой (при употреблении зараженных продуктов).

Инфицирование наиболее вероятно при длительном тесном контакте с больным. Любой человек может заразиться туберкулезом, но определенные факторы увеличивают риск. В первую очередь, к ним относят ослабленный иммунитет. Здоровая иммунная система способна успешно бороться с инфицированием организма микобактериями, однако ослабление иммунитета снижает сопротивляемость заражению. Ряд заболеваний и воздействий на организм могут повлиять на снижение иммунной защиты, в том числе:

ВИЧ / СПИД;
Сахарный диабет;
Тяжелые заболевания почек;
Онкологические заболевания;
Химиотерапия;
Препараты для предотвращения отторжения пересаженных органов, иммуносупрессия;
Недоедание, анорексия;
Злоупотребление алкоголем;
Употребление психоактивных веществ.

Риск заражения туберкулезом выше для людей, которые живут или путешествуют в регионы с высоким уровнем заболеваемости туберкулезом. Согласно данным Всемирной организации здравоохранения, Россия также относится к странам с высоким риском заражения туберкулезом. Внутри страны выделяют регионы с наиболее высокой, умеренной и низкой заболеваемостью.

Низкий социально-экономический статус также увеличивает риск инфицирования микобактериями туберкулеза.

К людям с повышенным риском заражения туберкулезом относятся также медицинские работники, сотрудники приютов для бездомных, домов престарелых, заключенные вследствие большей вероятности контакта с инфицированным данным заболеванием человеком.

Попадание в организм микробактерии туберкулеза не всегда приводит к развитию заболевания. Первичная инфекция часто протекает незаметно, лишь у взрослых людей со сниженным иммунитетом и маленьких детей отмечается значительное увеличение лимфатических узлов, вероятен внелегочный туберкулезный процесс. Далее в 95% случаев микобактерии погибают. Примерно у 5% людей данный микроорганизм выживает в легких, что называется латентным, то есть скрытым туберкулезом. В таком виде инфекция может существовать в организме длительное время, в том числе пожизненно. Однако у части людей туберкулез из латентной формы превратится в активную. Это может произойти в первые несколько месяцев после заражения микобактериями или спустя годы.

Признаки активного туберкулеза заметны не сразу и могут включать:

Длительный кашель;
Выделение мокроты с прожилками крови;
Боли в грудной клетке, усиливающиеся при кашле;
Непреднамеренная потеря веса;
Патологическая утомляемость;
Длительное повышение температуры тела без видимых причин;
Ночная потливость;
Эпизоды ознобов;
Снижение аппетита.

Туберкулез также может поражать другие органы, включая почки, костную ткань, в т.ч. позвоночник и нервную ткань. Соответственно проявления внелегочной формы туберкулеза зависят от локализации поражения. Например, туберкулез позвоночника может провоцировать боли в спине, а поражение почек — появление крови в моче. Попадание микобактерий в головной мозг приводит к нарушению сознания, воспалению мозговых оболочек (менингиту). Возможны также психические изменения.

Для профилактики распространения туберкулеза проводится его выявление у населения из групп риска. Своевременная диагностика и лечение заболевания необходима для сохранения здоровья. Одним из методов выявления туберкулеза служит анализ мокроты для выявления микобактерий. Мокрота представляет собой вязкое отделяемое из легких и дыхательных путей, которое выделяется при отхаркивании.

Микроскопия мазка мокроты представляет собой достаточно легкий метод выявления микобактерий туберкулеза при соблюдении правил сбора образца для бактериологического исследования.

Приём и исследование биоматериала

Когда нужно сдавать анализ Посев на туберкулез (Mycobacterium tuberculosis)?

Симптомы, связанные с поражением легких и бронхов;
подтвержденный контакт с инфицированным лицом, в том числе совместное пребывание в закрытом сообществе;
дифференциальная диагностика между заболеваниями, проявляющихся лихорадкой и поражением легких.

Подробное описание исследования

Прогрессирующее снижение массы тела;
Проявления умеренной интоксикации: субфебрильная температура, утомляемость при привычных нагрузках, ночная потливость, отсутствие аппетита;
Упорный кашель (с мокротой или без) различной интенсивности;
Дискомфорт в грудной клетке, заложенность, тупая боль.

Лица с иммунодефицитом, врожденным или приобретенным, в том числе носители ВИЧ;
Люди, находящиеся в ежедневном контакте с больным (коллеги, члены семьи, участники закрытых групп);
Дети младшего возраста, проживающие в неблагоприятных социально-бытовых условиях.

Определение ДНК возбудителей туберкулеза: комплекса микобактерий: M. tuberculosis, M. bovis, M. bovis BCG, M. microti, M. africanum в мокроте, смывах с бронхов, лаважной жидкости методом полимеразной цепной реакции (ПЦР) с детекцией в режиме «реального времени.

Туберкулёз (от лат. tuberculum — бугорок) – распространённое, социально зависимое заболевание человека. Болеют им и животные. Возбудитель туберкулёза открыт Р. Кохом в 1882 г. Это кислотоустойчивые аэробные бактерии (74 вида) рода mycobacterium, широко распространённые в почве, воде и у животных. У человека чаще всего возбудителем является Mycobacterium tuberculosis. Второй по частоте является Mycobacterium bovis. Оба вида очень очень устойчивы ко многим факторам внешней среды, а в организме очень долго остаются жизнеспособными и могут вызвать заболевание через многие годы после заражения. Очень важно, что микобактерии туберкулёза могут образовывать так называемые L-формы. Сохраняясь в организме, они создают противотуберкулёзный иммунитет. Длительное время туберкулёз может протекать скрыто и обнаруживаться случайно, хотя нередко уже проявляются такие симптомы, как слабость, быстрая утомляемость, субфебрильная температура, ночная потливость, а в крови – анемия и лейкопения.

В настоящее время, несмотря на все достижения антимикробной терапии, туберкулёз угрожает будущему нации. Поэтому все методы диагностики, особенно его латентных форм являются крайне важными.

Существует много методов лабораторной диагностики туберкулёза: микроскопия мазка (чаще всего для этого используют мокроту), классический культуральный метод, ИФА. Всем им присущи достоинства, но и определённые недостатки, в частности, обнаружение микобактерий только в случае их достаточного количества.

В последние годы для диагностики используют полимеразную цепную реакцию (ПЦР). Её высокая чувствительность позволяет обнаружить в исследуемом материале единичные клетки и даже их фрагменты ДНК. Метод исключает перекрёстные реакции и специфичность достигает 100%. ПЦР позволяет дифференцировать ограниченные и диссеминированные формы туберкулёза, особенно у детей даже при отрицательных результатах микробиологических исследований.

определяемый фрагмент - специфические участки ДНК микобактерий;
специфичность определения - 100%;
чувствительность определения - 100 копий ДНК микобактерий в образце.

Желательно взятие материала проводить до диагностических и лечебных процедур и до приема химиопрепаратов. Мокроту можно собирать в любое время суток, когда она выделяется у больного. Необходимо следить, чтобы пробу не попадала носоглоточная слизь. Лаважную жидкость и смывы собирает врач в условиях стационара. Материал собирают в стерильную емкость с плотно закручивающейся крышкой.

Читайте также: