Бактериологическое исследование на иерсиниоз

Обновлено: 25.04.2024

Метод определения РПГА (реакция пассивной гемагглютинации с эритроцитарным диагностикумом, содержащим полисахаридные антигены кишечноиерсиниозных бактерий серовара О3).

Исследование антител к Yersinia Enterocolitica серотип О:3 методом РПГА (реакция непрямой гемагглютинации). Кишечный иерсиниоз - острое инфекционное заболевание, характеризующееся преимущественным поражением желудочно-кишечного тракта, с тенденцией к генерализованному поражению различных органов и систем. Возбудителем иерсиниоза чаще всего является мелкая грамотрицательная палочка Yersinia Enterocolitica серотипов О3, О8, О9. Y. enterocolitica распространены в природе широко. Они могут присутствовать в органах и фекалиях многих видов млекопитающих, птиц, земноводных, членистоногих, а также на овощах, корнеплодах, в почве, пыли, воде. Частый путь передачи инфекции – алиментарный (с заражённой пищей, молоком, водой). Человек, как правило, источником заражения не является. Частота выявление этого возбудителя в кале больных с поносом, по данным разных исследований, составляет 1-3%. Клинические формы иерсиниоза разнообразны и до некоторой степени обусловлены возрастом и физическим состоянием больного. У детей старшего возраста и подростков клиническая картина часто напоминает аппендицит, симптомы включают лихорадку и разлитую боль в животе. У взрослых иерсиниоз часто проявляется двумя синдромами – реактивным артритом и узловатой эритемой. Сначала наблюдается понос с лихорадкой и болью в животе, а через 1-2 недели развивается артрит, который обычно проходит через 1-4 месяца. Узловатая эритема как постинфекционный синдром отмечается преимущественно у женщин среднего возраста. Иерсиниоз в грудном возрасте опасен осложнением в виде сепсиса. Другие предрасполагающие факторы бактериемии включают заболевания печени, гемохроматоз, сахарный диабет, истощение, иммуносупрессивная терапия, передозировка препаратов железа. Более редкие формы иерсиниоза (атипичная клиника обычно обусловлена серотипами, отличными от Y. enterocolitica О3, О8, О9) – ангина на фоне кишечной симптоматики или без неё, пневмония, абсцесс лёгкого, инфекционный эндокардит, инфекции мочевых путей, абсцессы мягких тканей и конъюнктивит. Для лабораторного подтверждения иерсиниоза используют микробиологические тесты (см.тест №460 - Посев на иерсинии и определение чувствительности к антибиотикам), серологические исследования - в том числе, РПГА с Y.enterocolitica, выявление антител к факторам вирулентности Y.enterocolitica методом ИФА (см. тесты №№ 238, 239). Титр антител возрастает через 1 неделю заболевания и достигает пика на 2 неделе. Рекомендовано обследовать больного не менее 2 раз – в начале заболевания и с интервалом в 10-15 дней, диагностически достоверным считают 4-кратный и более прирост титров антител. При отсутствии возможности получения парных сывороток (обследование в боле поздние сроки) допускают использование условно-диагностических титров – при кишечном иерсиниозе для взрослых 1:200-1:400, для детей до 10 лет 1:100-1:200. В сомнительных случаях целесообразно проводить исследование параллельно с постановкой РПГА с Y.pseudotubercelosis, проявляющими иммунологическую общность с Y.enterocolitica. Ценность серодиагностики методом РПГА снижают потенциально возможные перекрёстные реакции (Brucella abortus, Rickettsia spp., Salmonella spp., Morganella morganii).

Специальная подготовка не требуется. Рекомендуется взятие крови не ранее чем через 4 часа после последнего приема пищи.

Для подтверждения клинического диагноза при получении отрицательного результата бактериологического обследования.
В целях ретроспективного подтверждения диагноза.
При позднем обращении больного, назначении антибактериальной терапии.

Интерпретация результатов исследований содержит информацию для лечащего врача и не является диагнозом. Информацию из этого раздела нельзя использовать для самодиагностики и самолечения. Точный диагноз ставит врач, используя как результаты данного обследования, так и нужную информацию из других источников: анамнеза, результатов других обследований и т.д.

Условно-диагностический титр: взрослые – 1:200 – 1:400; дети до 10 лет – 1:100-1:200. Достоверным диагностическим признаком считают прирост титров в 4 раза и более в динамике за 7-10 дней.

Микробиологическое исследование, позволяющее выявить в исследуемом биоматериале возбудителей иерсиниозов (Yersinia spp.) – инфекционных заболеваний с поражением желудочно-кишечного тракта.

Синонимы русские

Посев на иерсиниоз.

Синонимы английские

Yersinia spp., culture, Yersinia species, culture.

Метод исследования

Какой биоматериал можно использовать для исследования?

Кал, разовую порцию мочи.

Как правильно подготовиться к исследованию?

Исследование рекомендуется проводить до начала приема антибиотиков и других антибактериальных химиотерапевтических препаратов.
Исключить прием мочегонных препаратов в течение 48 часов до сбора мочи (по согласованию с врачом).
Исключить прием слабительных препаратов, введение ректальных свечей, масел, ограничить прием медикаментов, влияющих на перистальтику кишечника (белладонны, пилокарпина и др.) и на окраску кала (железа, висмута, сернокислого бария), в течение 72 часов до сбора кала.
Женщинам следует сдавать мочу до менструации или через 2-3 дня после ее окончания.

Общая информация об исследовании

Иерсиниозы – это острые зоонозные инфекции, вызываемые бактериями рода Yersinia (Yersinia spp.), из которых болезнетворными для человека являются Yersinia pestis, Yersinia enterocolitica и Yersinia pseudotuberculosis.

Yersinia pestis – возбудитель чумы – особо опасной инфекции, наиболее распространенной формой которой является острый лимфаденит с лихорадкой (бубонная чума). Однако чаще встречаются Y. enterocolitica и Y. Pseudotuberculosis.

"Резервуаром" инфекции служат теплокровные животные. Путь передачи – фекально-оральный через зараженную воду и пищу. Эти возбудители обычно вызывают острый энтерит, мезентериальный лимфаденит, терминальный илеит. Типичные симптомы острого иерсиниоза: диарея, боль в животе и лихорадка. Различают кишечную, псевдоаппендикулярную и септицемическую (генерализованную) формы заболевания. Болеют как взрослые, так и дети. Пик заболеваемости наблюдается в октябре-ноябре. Заболевание иногда осложняется реактивным артритом, острым гломерулонефритом, миокардитом и узловатой эритемой. Кишечный иерсиниоз может напоминать острый аппендицит и в серьезных случаях быть причиной перфорации кишки или ректального кровотечения. Возможны поражения опорно-двигательного аппарата и других органов.

Важным и информативным способом диагностики иерсиниоза является микробиологический метод, который позволяет выявить в исследуемом биоматериале бактерии рода Yersinia.

Для чего используется исследование?

Для подтверждения диагноза "иерсиниоз" и выявления бактерионосителей.
Для оценки эффективности проводимой антибактериальной терапии.

Когда назначается исследование?

При подозрении на иерсиниоз у пациентов с острыми кишечными инфекциями.
При обследовании выздоравливающих пациентов (контроль эффективности проводимой терапии и выявление бактерионосительства).
При обследовании контактных лиц (по эпидемическим показаниям), а также работников пищевой промышленности (выявление бактерионосителей).
При заболеваниях, протекающих со сходными симптомами (наряду с другими тестами): аппендицит, вирусные гепатиты, пищевые отравления, сальмонеллез, тифо-паратифозные заболевания, дизентерия, сепсис.

Что означают результаты?

Референсные значения: нет роста.

Выявление бактерий рода Yersinia в исследуемом биоматериале подтверждает диагноз "иерсиниоз" или при отсутствии симптомов заболевания свидетельствует о бактерионосительстве. При отрицательном результате посева наличие иерсиниоза или его носительства маловероятно.

Комплексное исследование для выявления возбудителя иерсиниоза (Yersinia enterocolitica) и псевдотуберкулеза (Yersinia pseudotuberculosis), включающее серологические тесты и полимеразную цепную реакцию (ПЦР).

Синонимы русские

Анализы на иерсиниоз и псевдотуберкулез.

Синонимы английские

Laboratory Diagnostics of Yersiniosis, Enteropathogenic Yersiniae Lab Panel.

Какой биоматериал можно использовать для исследования?

Венозную кровь, кал.

Как правильно подготовиться к исследованию?

Исследование рекомендуется проводить до начала приема антибиотиков и других антибактериальных химиотерапевтических препаратов.
Исключить прием слабительных препаратов, введение ректальных свечей, масел, ограничить (по согласованию с врачом) прием медикаментов, влияющих на перистальтику кишечника (белладонна, пилокарпин и др.), и препаратов, влияющих на окраску кала (железо, висмут, сернокислый барий), в течение 72 часов до сбора кала.
Не курить в течение 30 минут до исследования.

Общая информация об исследовании

Иерсинии - это грамотрицательные, факультативно-анаэробные палочки, относящиеся к семейству Enterobacteriaceae. Известно 11 видов иерсиний, три из которых являются возбудителями заболеваний человека: Yersinia pestis – это возбудитель чумы, Yersinia enterocolitica (Y. enterocolitica) и Yersinia pseudotuberculosis (Y. pseudotuberculosis) – кишечные патогены. Хотя Y. enterocolitica и Y. pseudotuberculosis относятся к разным видам, они имеют много общего, особенно в плане клинической картины и диагностики.

Основной "резервуар" иерсиний - дикие и домашние животные (свиньи, грызуны, овцы, козы, коровы, собаки, кошки и птицы). Считается, что человек не участвует в естественном жизненном цикле этих патогенов ни в качестве промежуточного, ни окончательного хозяина и его заражение, таким образом, носит случайный характер. Как правило, заражение кишечными иерсиниями происходит фекально-оральным путем при употреблении контаминированных продуктов питания (молочные продукты, сырое или плохо приготовленное мясо, особенно свинина). Как Y. enterocolitica, так и Y. pseudotuberculosis сохраняют жизнеспособность в условиях пониженных температур. Случаи передачи инфекции от человека к человеку или при переливании инфицированной крови описаны, но очень редки.

Следует отметить, что не все кишечные иерсинии являются патогенами. Так, к развитию заболевания у человека приводят серотипы Y. enterocolitica O:3, O:8, O:9 и O:5,27 и Y. pseudotuberculosis O:1 и O:2. Только указанные серотипы являются истинно энетропатогенными иерсиниями.

Особенностью энтеропатогенных иерсиний является их тропность к лимфатичекой ткани. Проникая через слизистую оболочку кишечника, эти микроорганизмы попадают в мезентериальные лимфатические узлы. Развивающийся воспалительный ответ сопровождается болью в области живота и диареей, а также мезентериальным лимфаденитом. У иммунокомпетентных лиц заражение энтеропатогенными иерсиниями чаще ограничивается гастроэнтеритом и регионарным лимфаденитом. Если возбудителем заболевания является Y. enterocolitica, говорят об иерсиниозе, если Y. pseudotuberculosis – о псевдотуберкулезе. Иерсиниоз встречается чаще, чем псевдотуберкулез. Как при иерсиниозе, так и при псевдотуберкулезе могут наблюдаться иммунопатологические феномены в виде реактивного артрита и узловатой эритемы. У лиц с иммунодефицитом, а также маленьких детей могут наблюдаться тяжелые формы иерсиниоза и псевдотуберкулеза с диссеминацией бактерий и сепсисом.

Диагностика иерсиниоза и псевдотуберкулеза достаточно сложна. Хотя бактериологический посев кала (крови или других биологических материалов) считается "золотым стандартом" диагностики, он трудноосуществим. Это связано с тем, что энтеропатогенные иерсинии сложно отличить от других кишечных микроорганизмов, которые в норме преобладают в кишечной флоре. После выявлении роста иерсиний проводят дополнительные биохимические тесты, устанавливающие их энтеропатогенность. Кроме того, метод бактериологического посева характеризуется достаточно низкой чувствительностью (для получения результата необходимо 10 3 -10 6 КОЕ в грамме образца биоматериала). Учитывая эти особенности, диагностика иерсиниоза и псевдотуберкулеза носит комплексный характер и включает следующие дополнительные тесты:

Полимеразная цепная реакция (ПЦР) – один из методов молекулярной диагностики, в ходе которого определяется генетический материал (ДНК) микроорганизма в образце биоматериала (в кале). Основными преимуществами ПЦР являются быстрота получения результата, высокая чувствительность и специфичность. В данное комплексное исследование входит анализ ПЦР на Y. pseudotuberculosis.
Серологические тесты. Антитела к энтеропатогенным иерсиниям обычно могут быть определены в первые 2-4 недели болезни (IgM-антитела). Следует отметить, что из-за определенного антигенного сходства Yersinia с бактериями других родов (Salmonella, Morganella, Brucella) серологические тесты могут давать ложноположительные результаты. Еще одним недостатком серологических тестов является то, что антитела к иерсиниям (IgG-антитела) сохраняются в течение нескольких лет после инфицирования, что может препятствовать интерпретации результата. Следует помнить, что результат серологических тестов зависит от иммунного статуса организма.

Точность ПЦР и серологических тестов в меньшей степени, чем бактериологического метода, подвержена влиянию антибактериальных препаратов. Однако максимально точный результат теста будет получен при анализе биоматериала, полученного до начала лечения.

Гастроэнтерит, возникающий при инфицировании энтеропатогенными иерсиниями, сложно отличить от сальмонеллеза, кампилобактериоза и других кишечных инфекций. По этой причине часто требуются дополнительные лабораторные анализы.

Клиника иерсиниоза. Признаки иерсиниоза. Клинические проявления иерсиниоза. Микробиологическая диагностика при иерсиниозе. Выявление возбудителя иерсиниоза.

В клинической картине иерсиниоза доминирует симптоматика гастроэнтерита. Сопутствующая регионарная лимфаденопатия при иерсиниозе имитирует острый аппендицит.

Диарея при иерсиниозе обусловлена действием термостабильного энтеротоксина, стимулирующего синтез гуанилатциклазы.

Реактивный артрит при иерсиниозе. Кишечная инфекция может привести к септицемии с поражением внутренних органов и тяжёлыми артритами; поражения обычно возникают через 7-14 сут от начала болезни.

Анкилозирующий спондилит при иерсиниозе. В связи со способностью вызывать реактивные артриты многие авторы рассматривают У. enterocolitica как причину некоторых форм анкилозирующего спондилита, тем более что бактерии часто выделяют от подобных больных.

Микробиологическая диагностика при иерсиниозе. Выявление возбудителя иерсиниоза.

Материалом для исследований при иерсиниозе служат кровь, испражнения, продукты питания и вода. Материал засевают на среды Эндо, Плоскирева и жидкую среду обогащения.

Наиболее благоприятная температура для выделения возбудителя иерсиниоза 22-29 С. На средах для изучения подвижности (например, содержащих индол и орнитин) Y. enterocoiltica неподвижны или малоподвижны при 35 "С и подвижны при 25 °С.

После выделения чистой культуры возбудителя иерсиниоза проводят определение основных биохимических свойств возбудителя иерсиниоза.

Дополнительным признаком служит реакция Фогеса-Проскауэра, положительная при 22-28"С. Окончательное типирование возбудителя иерсиниоза осуществляют с помощью агглютинирующих О-антисывороток. Для выявления AT в сыворотке больных используют развёрнутую РА с диагностикумом или РПГА с эритроцитарным диагностикумом. Результат считают положительным при титрах AT 1:400 и выше.

Информация на сайте подлежит консультации лечащим врачом и не заменяет очной консультации с ним.
См. подробнее в пользовательском соглашении.

Диагностика и лечение иерсиниоза

В плане дифференциального диагноза вирусный гепатит А можно исключить на основании динамики клинических синдромов — при вирусном гепатите с появлением желтухи улучшается самочувствие ребенка, при иерсиниозах желтуха появляется на фоне ухудшения состояния и служит признаком генерализации процесса.

Для вирусных гепатитов не характерны длительная высокая лихорадка, выраженный абдоминальный синдром, артралгии, артриты, миалгии, экзантема, лимфадениты, катаральные явления, изменения со стороны периферигеской крови — лейкоцитоз, нейтрофилез, палочкоядерный сдвиг, умеренная эозинофилия, ускорение СОЭ.
Методы специфической диагностики — бактериологический и серологический. Материалом для бактериологического исследования служат кровь, кал, моча, в случаях хирургического вмешательства — аппендикс, лимфатические узлы.

Для подтверждения клинического диагноза иерсиниозов основное значение приобрела серологическая диагностика с помощью реакции агглютинации (РА) и реакции непрямой агглютинации (РНГА) парных сывороток, которые забирают при поступлении ребенка в стационар и спустя 2 недели. Диагностическое значение имеет в РА титр антител не ниже 1:80, в РНГА — 1:160 и не менее, чем двукратное нарастание титров в динамике.
В последнее время применяются методы иммуноферментного анализа, полимеразной цепной реакции.

Нам приходилось диагностировать иерсиниозы в периодах обострения и рецидивов у детей, ранее находившихся на стационарном лечении с другими диагнозами. Поэтому с учетом анамнеза, эпидемиологических и клинических данных у детей с рецидивирующей лихорадкой и другими клиническими проявлениями, встречающихся при иерсиниозах, необходимо лабораторное подтверждение или исключение этиологической роли иерсений, что определяет адекватную терапию и прогноз.
Лечение иерсиниозов определяется клинической формой. В качестве этиотропных назначают антибиотики, сульфаниламиды и химиопрепараты.

К препаратам выбора при генерализованной форме относят фторхинолоны, к препаратам резерва — цефалоспорины, левомицетин. При лечении больных с иерсиниозным гепатитом показаны аминогликозиды. В детской практике рекомендованы левомицетин-сукцинат внутримышечно, при тяжелой форме —два антибиотика в комбинированной терапии парентерально и внутрь.

Патогенетическая терапия обеспечивает дезинтоксикацию, регидратацию, купирование гипертермического синдрома. Показаны иммуноориентированные, десенсибилизирующие средства в возрастных дозировках по схемам, соответствующим динамике состояния ребенка. Лечение гепатита проводится по обычной программе.

Читайте также: