Что такое арбитраж вич анализа

Обновлено: 24.04.2024

МИНИСТЕРСТВО ЗДРАВООХРАНЕНИЯ УДМУРТСКОЙ РЕСПУБЛИКИ

ПРИКАЗ
от 11 апреля 2001 года № 118

Об упорядочении проведения арбитражных исследований на ВИЧ

В последнее время в Удмуртской Республике значительно ухудшилась эпидемическая ситуация по ВИЧ - инфекции. С начала регистрации (1993 г.) выявлено 503 ВИЧ - инфицированных (показатель пораженности на 100 тысяч населения по УР - 30,8; по РФ - 76,0). Соответственно этому резко возросло количество арбитражных исследований сывороток крови на ВИЧ в реакции иммуноблота: 1102 в 2000 году против 675 в 1999 году. Увеличение объема арбитражных исследований требует более оперативных сроков их проведения, а также осуществления неотложных мер по предотвращению передачи ВИЧ при переливании крови и ее компонентов.

На основании вышеизложенного утверждаю:

1. Инструкцию по тактике арбитражного исследования сыворотки крови на ВИЧ (приложение № 1).

2. Направление на исследование крови на СПИД в реакции иммуноблота (приложение № 2).

1. Начальникам Управлений здравоохранения гг. Ижевска, Глазова, Сарапула, начальнику Отдела здравоохранения Администрации г. Воткинска, главным врачам республиканских лечебно-профилактических учреждений и центральных районных больниц:

1.1. Обеспечить забор и доставку второй сыворотки крови от лица, на которого подано оперативное донесение, в течение 14 дней по запросу Республиканского центра по профилактике и борьбе со СПИДом и инфекционными заболеваниями и зональных центров СПИД в диагностическую лабораторию зонального центра СПИД по месту закрепления.

2. Главному врачу Государственного учреждения здравоохранения "Удмуртский республиканский центр по профилактике и борьбе со СПИДом и инфекционными заболеваниями" Е.Г.Кузьмину:

2.1. Обеспечить подачу информации о всех лицах, имеющих положительный результат на ВИЧ методом ИФА, в день выявления в Республиканскую станцию переливания крови (станции переливания крови, отделения переливания крови).

2.2. Обеспечить контроль за направлением сывороток крови на арбитражные исследования по утвержденной форме (приложение № 2).

2.3. Осуществлять контроль за проведением арбитражных исследований сывороток крови на ВИЧ согласно "Инструкции по тактике арбитражного исследования" (приложение № 1).

3. Контроль за исполнением приказа возложить на первого заместителя министра Блохина Ю.Г.

Приложение № 1
к приказу МЗ УР
от 11 апреля 2001 г. № 118

ИНСТРУКЦИЯ
ПО ТАКТИКЕ АРБИТРАЖНОГО ИССЛЕДОВАНИЯ СЫВОРОТКИ КРОВИ НА ВИЧ

1. В случае получения в диагностической лаборатории положительного результата при исследовании сыворотки крови на ВИЧ методом ИФА, исследование повторяется с данной порцией сыворотки на следующий день в другой тест - системе дважды. При получении двух положительных результатов из трех сыворотка направляется на арбитражные исследования в референс - лабораторию РЦ СПИД и ИЗ. Заполняется направление утвержденной формы, где обязательно указывается:

- "первично положительная в ИФА",

- "повторно на исследование в иммуноблоте", дата и результат в сомнительном иммуноблоте,

- "вторая кровь на ИФА", дата положительного иммуноблота и оперативного донесения.

Флакон закрывается крышкой, на нем подписывается фамилия и инициалы исследуемого. Материал с направлением помещают в термоконтейнер и доставляют в референс - лабораторию РЦ СПИД и ИЗ.

2. Прием сывороток крови на арбитражные исследования ведет врач референс - лаборатории РЦ СПИД и ИЗ и проверяет все поступающие сыворотки в базе данных компьютера, определяя тактику арбитража. При дефектах взятия материала и заполнения направлений, делается запись в дефектурный журнал под роспись доставившего сыворотку. Материал утилизируется, направление с указанием дефекта отправляется обратно.

3. Флаконы с подписанной фамилией и направлением помещаются в отдельную коробку в морозильную камеру и обследуются в ИФА дважды в различных типах и сериях тест - систем. Заполняется весь протокол в компьютерной программе "Иммуноблот" с указанием всех типов и серий тест - систем и с датой в ИФА. При двух отрицательных результатах в направлении ЛПУ делается отметка "ИФА на ВИЧ отрицательный" и оно отправляется обратно. Сыворотка утилизируется.

4. При получении хотя бы одного положительного результата в ИФА сыворотка направляется на иммуноблот вместе с сыворотками из лаборатории РЦ СПИД и ИЗ, которые в арбитраж ИФА не берутся. Врач, проводящий исследование в иммуноблоте, проверяет каждую сыворотку в базе данных компьютера. Продолжается заполнение протокола исследования в компьютерной программе "Иммуноблот" с указанием Ф.И.О. врача, второй даты анализа, серии тест - системы и результата анализа. Сыворотки, направленные повторно на иммуноблот, при получении сомнительных результатов, в арбитраж на ИФА не ставятся, а сразу берутся на иммуноблот.

5. При получении в иммуноблоте:

- отрицательного результата - делается отметка "Иммуноблот отрицательный" в направлениях от всех ЛПУ, они отсылаются обратно, сыворотка утилизируется;

- сомнительного результата - указывается весь перечень полученных белков в направлении учреждения и протоколе иммуноблота и срок, через который необходимо повторить забор сыворотки для повторного иммуноблота, сыворотка утилизируется;

- положительного результата - направляется запрос на повторный образец сыворотки, сыворотка остается в морозильной камере вместе с направлением, подписывается - № 1, выписывается оперативное донесение (автоматически из компьютерной программы). Если положительный результат иммуноблота получен в динамике из сомнительного, второй образец для ИФА не запрашивают, в ЛПУ результат не выдается.

6. Второй образец сыворотки крови при получении оперативного донесения ставится в ИФА в диагностической лаборатории зонального центра СПИД. При получении положительного результата данные передаются в референс - лабораторию РЦ СПИД и ИЗ, делается отметка в протоколе и компьютерной программе против фамилии данного лица, результат второй сыворотки в ИФА передается в отделение эпидемиологии РЦ СПИД и ИЗ. Если получен отрицательный результат в ИФА во второй сыворотке, исследуется вновь сыворотка № 1 и № 2, запрашивается третий образец сыворотки от данного лица. При получении отрицательных результатов в сыворотках № 2 и № 3 дается отмена по оперативному донесению на данное лицо.

7. Делается распечатка всего арбитража за неделю (от первой даты в ИФА) в двух экземплярах: в лабораторию и отделение эпидемиологии РЦ СПИД и ИЗ. В направлениях всех ЛПУ делается отметка результата (кроме положительных развернутых иммуноблотов) с указанием типа, серии тест - системы, даты анализа и Ф.И.О. врача, проводившего иммуноблот. Сыворотка утилизируется.

8. Стрипы с результатами иммуноблотов наклеиваются на белый лист бумаги скотчем. Сбоку указывается соответственно номеру стрипа Ф.И.О. сыворотки исследуемого лица. Внизу ставится подпись врача, дата анализа, серия тест - системы, подшивается в отдельную папку.

10. Данные о поступлении вторых образцов сывороток от лиц, на которых поданы оперативные донесения, направляются заведующей лабораторией еженедельно главному врачу РЦ СПИД и ИЗ и ежемесячно заведующим зональными центрами СПИД.

Главный врач ГУЗ РЦ СПИД и ИЗ
Е.Г.Кузьмин

Приложение № 2
к приказу МЗ УР
от 11 апреля 2001 г. № 118

НАПРАВЛЕНИЕ № _____
НА ИССЛЕДОВАНИЕ КРОВИ НА СПИД В РЕАКЦИИ ИММУНОБЛОТА

Имя ______________________ Отчество _______________________________________________________________________

Пол ____ Дата рождения _________ Гражданство _______________________________________________________________

Почтовый адрес ____________________________________________________________________________________________

Место работы или учебы _____________________________________________________________________________________

Код контингента ____________________________________________________________________________________________

Дата последнего положительного анализа:

в ИФА ________ тип тест - системы ________ № серии ___________________________________________________________

в Иммуноблоте ________ тип тест - системы _______ № серии _____________________________________________________

Адрес учреждения направившего сыворотку _____________________________________________________________________

Телефон учреждения ________________________________________________________________________________________

акс и электронный адрес ____________________________________________________________________________________

Должность, фамилия, подпись лица, направившего материал ______________________________________________________

"___" __________________ 200 г.

Примечания. 1. В графу "код контингента" заносятся все коды из списка, к которым относится обследуемый.

2. В графе "в Иммуноблоте" указывается результат последнего иммуноблота (отрицательный, положительный, сомнительный).

Информацию из данного раздела нельзя использовать для самодиагностики и самолечения. В случае боли или иного обострения заболевания диагностические исследования должен назначать только лечащий врач. Для постановки диагноза и правильного назначения лечения следует обращаться к Вашему лечащему врачу.

Напоминаем вам, что самостоятельная интерпретация результатов недопустима, приведенная ниже информация носит исключительно справочный характер.

Антитела к ВИЧ-1/2 и антиген ВИЧ-1/2 (HIV Ag/Ab Combo): показания к назначению, правила подготовки к сдаче анализа, расшифровка результатов и показатели нормы.

ВИЧ-инфекция - инфекционная болезнь, развивающаяся в результате многолетнего персистирования (постоянного пребывания) в лимфоцитах, макрофагах и клетках нервной ткани вируса иммунодефицита человека (далее - ВИЧ), характеризующаяся медленно прогрессирующим дефектом иммунной системы, который приводит к гибели больного от вторичных поражений, описанных как синдром приобретенного иммунодефицита (далее - СПИД).

ВИЧ (Вирус Иммунодефицита Человека) – вирус, относящийся к семейству ретровирусов (семейство РНК-содержащих вирусов, заражающих преимущественно позвоночных), который поражает клетки иммунной системы человека. Через несколько недель с момента заражения начинают вырабатываться антитела к ВИЧ.

Показания на проведение исследования

Показаниями для назначения анализа является подготовка к госпитализации и плановому оперативному вмешательству. В профилактических целях следует провести исследование при подозрении на заражение при половом контакте. В первую очередь это касается лиц групп риска: употребляющих наркотики, вводимые внутривенно, часто меняющих половых партнеров и не использующих средств защиты.

Вирус иммунодефицита человека размножается в организме человека достаточно медленно, и количественный результат в отношении антигенов и антител к вирусу можно получить, как правило, не ранее чем через 3-6 недель после инфицирования. При этом клинические симптомы заболевания еще отсутствуют.

Через три месяца антигены ВИЧ и антитела к вирусу определяются практически у всех заболевших. Благодаря появлению новых комбинированных тест-систем четвертого поколения получение точного результата качественного анализа на ВИЧ-инфекцию возможно уже через две недели с момента попадания вируса в организм. При этом исследовании выявляют антиген р24 ВИЧ – белок вирусного капсида (внешней оболочки вируса).

Анализ на антитела к ВИЧ 1/2 и антиген ВИЧ 1/2 назначают на этапе планирования и при ведении беременности, когда возможна передача вируса плоду. Анализ проводят и после родов, поскольку ребенок ВИЧ-положительной матери может быть инфицирован во время прохождения через родовые пути и при кормлении грудью.

Лихорадка, потеря веса без объективных причин, повышенная утомляемость, увеличение регионарных лимфатических узлов, потливость, особенно в ночное время, длительный кашель, диарея – эти устойчивые клинические симптомы неясного происхождения, отмечаемые в течение 2-3 недель, также служат показанием к проведению исследования на антитела к ВИЧ 1/2 и антиген ВИЧ 1/2.

Кожные проявления также могут быть симптомом ВИЧ-инфекции, поскольку развиваются на фоне ослабления иммунитета. К их числу относится рецидивирующая герпетическая сыпь, поражающая обширные участки кожи, полость рта, половые органы. Герпес поражает и глубокие слои кожи с развитием язвенно-некротической формы. Образуются язвы и эрозии с последующим образованием рубцов, которых не бывает при обычном герпесе.

Еще один характерный симптом ВИЧ-инфекции – волосатая лейкоплакия, которая связана с активацией латентной инфекции, вызванной вирусом Эпштейна-Барр (что свидетельствует об иммуносупрессии). Заболевание проявляется нитевидными образованиями белого цвета с дальнейшим ороговением пораженных участков языка и слизистой оболочки рта.

Обширные грибковые поражения (в первую очередь дрожжевыми грибками рода Candida) также служат типичным признаком, сопровождающим ВИЧ-инфекцию. Сначала кандидоз поражает слизистую оболочку рта и пищевода, затем распространяется на слизистые желудочно-кишечного и мочеполового тракта. При этом формируются обширные очаги, характеризующиеся болезненностью и склонностью к изъязвлению.

ВИЧ-инфекция может сопровождаться развитием обширного папилломатоза. У ВИЧ-инфицированных женщин папилломы цервикального канала склонны быстро вызывать рак шейки матки.

СПИД-индикаторным заболеванием служит саркома Капоши – многоочаговая сосудистая опухоль, которая поражает кожные покровы и слизистые оболочки. Ее очаги в виде красноватых или буроватых узелков и бляшек сливаются, быстро распространяясь по всему телу. Со временем они образуют опухолевые поля, которые изъязвляются и нагнаиваются.

К числу патологических состояний, которые почти у всех пациентов сопровождают ВИЧ-инфекцию, относят полиаденопатию (увеличение лимфатических узлов). Как правило, в первую очередь увеличиваются под- и надключичные, подбородочные, околоушные и шейные лимфоузлы. В дальнейшем к ним может присоединяться увеличение паховых и бедренных лимфатических узлов. Они могут быть мягкими или плотными на ощупь, безболезненными и подвижными. Иногда несколько лимфоузлов сливаются, образуя своеобразный конгломерат. Воспаление двух и более групп лимфоузлов считают признаком генерализованной лимфаденопатии. Поражение лимфатических узлов может наблюдаться в течение нескольких лет, при этом периоды обострения сменяются ремиссией.

К легочным заболеваниям, сопровождающим ВИЧ-инфекцию, относят туберкулез и пневмонию.

Анализ на антигены и антитела к ВИЧ рекомендуют сделать, если у пациента выявлены заболевания, передаваемые половым путем (сифилис, хламидиоз, гонорея, генитальный герпес, бактериальный вагиноз).

19513 04 Сентября

ВИЧ: причины появления, симптомы, диагностика и способы лечения.

Определение

ВИЧ (вирус иммунодефицита человека) – инфекционное хроническое заболевание, передающееся контактным путем, медленно прогрессирующее и характеризующееся поражением иммунной системы с развитием синдрома приобретенного иммунодефицита (СПИДа). СПИД – это финальная стадия ВИЧ-инфекции, когда из-за ослабленной иммунной системы человек становится беззащитным перед любыми инфекциями и некоторыми видами рака. Опасность представляют так называемые оппортунистические инфекции – заболевания, вызываемые условно-патогенной или непатогенной флорой: вирусами, бактериями, грибами, которые у здоровых людей не приводят к серьезным последствиям или протекают легко и излечиваются самостоятельно. При СПИДе они наслаиваются друг на друга, имеют затяжное течение, плохо поддаются терапии и могут стать причиной летального исхода.

Причины появления ВИЧ

Источником инфекции является человек, инфицированный ВИЧ, на любых стадиях заболевания. Вирус передается через кровь, сперму, секрет влагалища, грудное молоко.

Половой путь (незащищенный секс с инфицированным партнером) – доминирующий фактор распространения ВИЧ-инфекции.

Передача ВИЧ от матери ребенку может произойти на любом сроке беременности (через плаценту), во время родов (при прохождении через родовые пути) и грудного вскармливания (при наличии язвочек, трещин на сосках матери и во рту ребенка).

Высокий риск инфицирования существует при внутривенном введении наркотических веществ нестерильными шприцами, при переливании ВИЧ-инфицированной крови и ее препаратов, использовании медицинского и немедицинского инструментария, загрязненного биологическими жидкостями человека, инфицированного ВИЧ. Кроме того, опасность могут представлять органы и ткани доноров, используемые для трансплантации.

Попадая в кровоток, вирус проникает в Т-лимфоциты хелперы, или CD-4 клетки (рановидность лейкоцитов), которые помогают организму бороться с инфекциями. Т-хелперы имеют на поверхности так называемые CD4-рецепторы. ВИЧ связывается с этими рецепторами, проникает в клетку, размножается в ней и в конечном счете уничтожает ее. Со временем вирусная нагрузка увеличивается, а количество Т-хелперов снижается.

При отсутствии лечения через несколько лет из-за значительного снижения числа Т-хелперов появляются связанные со СПИДом состояния и симптомы.

Классификация заболевания

Стадия инкубации - от момента заражения до появления реакции организма в виде клинических проявлений острой инфекции и/или выработки антител (специфических белков, продуцируемых в ответ на проникновение антигена, в данном случае – вируса).
Стадия первичных проявлений клинических симптомов:

В дальнейшем продолжается активное размножение вируса и разрушение Т-лимфоцитов, развивается стадия вторичных изменений, для которой характерно прогрессирующее снижение веса, общая слабость, стойкое повышение температуры, озноб, выраженная потливость. Клинические проявления оппортунистических заболеваний обусловливают клиническую картину этой стадии: пациентов беспокоят кашель и одышка, тошнота, рвота, боли в животе, тяжелая диарея, кожные высыпания, сильные головные боли, снижение памяти и внимания и др.

Диагностика ВИЧ

Лабораторные методы исследования:

Скрининг (обследование здоровых людей) на ВИЧ должен быть проведен любому человеку, который считает, что может быть заражен, а также перед любой госпитализацией и операцией, всем беременным женщинам и их половым партнерам.

Обследование целесообразно проходить людям с высоким риском заражения ВИЧ, например, при наличии заболеваний, имеющих одинаковый с ВИЧ-инфекцией механизм передачи (вирусные гепатиты В и С, заболевания, передающиеся половым путем), лицам, имеющим регулярные незащищенные половые контакты, инъекционным наркоманам, детям, рожденным от матерей с ВИЧ-инфекцией, медицинским работникам, напрямую контактирующим с кровью на работе и др.

Существуют экспресс-тесты для скрининга ВИЧ, которые можно делать в домашних условиях. Для определения специфических антител/антигенов к ВИЧ (ВИЧ-1, 2, антиген p24) используют кровь, слюну или мочу. Точность любого экспресс-теста ниже, чем теста, проводимого в лаборатории.

Для стандартного скринингового обследования определяют антитела к ВИЧ 1 и 2 и антиген ВИЧ 1 и 2 (HIV Ag/Ab Combo) в крови с помощью иммуноферментного анализа (ИФА).

Внимание. При положительных и сомнительных реакциях, срок выдачи результата может быть увеличен до 10 рабочих дней. Синонимы: Анализ крови на антитела к ВИЧ1 и 2 и антиген ВИЧ1 и 2; ВИЧ-1 p24; ВИЧ-1-антиген, p24-антиген; ВИЧ 1 и 2 антитела и антиген p24/25, ВИЧ тест-системы 4-г.

Ложноположительным результатом является положительный результат анализа на ВИЧ у человека, не инфицированного вирусом иммунодефицита. Получение такого результата анализа может привести к серьезным последствиям для пациента и ошибочным рекомендациям со стороны врача. Именно поэтому процесс диагностики ВИЧ-инфекции и постановка непосредственно диагноза подчинены очень строгому алгоритму, который не допускает ошибок.

Исследовать кровь на ВИЧ можно исключительно с помощью тестов, сертифицированных для применения в конкретной стране.
Двумя важными характеристиками всех тестов являются специфичность и чувствительность. Чувствительность теста отражает долю положительных результатов, которые определяет тест у пациентов, инфицированных ВИЧ. Специфичность же, наоборот, отражает долю отрицательных результатов теста у здоровых людей. Как правило, тесты на ВИЧ-инфекцию обладают высокой специфичностью – это значит, что может присутствовать очень малое количество ложноположительных результатов, и подавляющее большинство неинфицированных пациентов все же имеет отрицательный результата анализа. К примеру, если провести тестирование 1000 неинфицированных людей и будет получено 4 положительных результата, это говорит о специфичности теста 99,6% (996 достоверно негативных результата на 1000 протестированных человек).

Причиной ложноположительного результата могут быть технические проблемы, связанные с самим тестом или с биологическим материалом.
Технические проблемы включают в себя перепутывание образцов, неправильную маркировку, неправильное обращение и интерпретацию визуально считываемого результата экспресс-тестов.

К биологическим причинам можно отнести участие в исследовании вакцины против ВИЧ и такие медицинские состояния, как:
• инфекция, вызванная вирусом Эпштейна-Барр (ВЭБ);
• беременность;
• получение иммуноглобулина;
• гипербилирубинемия;
• аутоимунные заболевания;
• недавняя вакцинация.

В основе механизма формирования реактивного результата теста при данных состояниях, как правило, лежит неверное распознавание тестами антител, которые не связаны с ВИЧ и появились в нашем организме в ответ на внедрение других антигенов, а распознаются как антитела к вирусу иммунодефицита.

Надлежащей практикой, рекомендованной ВОЗ, является проведение повторного тестирования всех людей с первоначально положительным результатом для исключения каких-либо потенциальных ошибок в тестировании или отчетности.

Когда при скрининге получен положительный результат анализа на ВИЧ (такой результат называют реактивным), необходимо проведение дополнительного обследования для того, чтобы установить, является ли положительный результат истинным или ложным.

Если положительный результат получен при выполнении экспресс-теста, то требуется соблюдение рекомендованного ВОЗ алгоритма исследования–последовательное использование нескольких тест-систем разных производителей.
Если при последовательном проведении разных экспресс-тестов первоначальный результат положительный, а последующий нет, необходимо лабораторное до обследование для исключения ранней инфекции. Прогностическая ценность проведения дополнительно 2-3 тестов подряд стремится к 100%.

После того, как диагноз ВИЧ-инфекции был установлен, и начато лечение, тестирование на антитела повторять не стоит.

При проведении скрининговых исследований следует учитывать, что распространенность ВИЧ-инфекции в отдельных регионах так же может влиять на количество ложноположительных результатов.

Распространенность ВИЧ отображает долю людей, живущих с ВИЧ-инфекцией (ЛЖВ) на конкретной территории, и влияет на количество ложноположительных результатов в зависимости от достоверно положительных.

При высокой распространенности (2%), если протестировать 10000 человек, то 200 образцов будет получено от ЛЖВ (истинно-положительные) и 9800 от неинфицированных людей. Учитывая специфичность теста 99,8%, около 20 образцов будет ложноположительными. В этом случае из 220 положительных результатов 91% людей фактически инфицированы ВИЧ. Количество достоверно положительных результатов значительно превышает количество ложных.
При низкой распространенности (0,1%) только 10 образцов из 10000 будут истинно-положительными, в то время как 9990 образцов будут от неинфицированных людей. Учитывая специфичность теста (99,8%) – 20 образцов будет ложнопозитивными. В этом случае из 30 положительных результатов только 33% людей будут инфицированы и количество ложноположительных результатов превысит количество истинных. При проведении скрининговых программ в популяциях с низкой распространенностью ВИЧ-инфекции следует ожидать, что количество ложнопозитивных результатов будет преобладать над истинно положительными.

Не стоит забывать о методах профилактики инфицирования ВИЧ после получения отрицательного результата. К ним относятся:
- использование презерватива во время сексуальных контактов (избегать использования лубрикантов на масляной основе);
- регулярное тестирование на ВИЧ;
- при употреблении инъекционных наркотиков использовать стерильные шприцы/иглы и отказ от совместного использования их с другими потребителями;
- прием препаратов доконтактной профилактики (ДКП) в группах высокого риска и препаратов постконтактной профилактики (ПКП) после аварийной ситуации (начать прием ПКП необходимо как можно раньше, насколько это возможно, и не позднее 72часов после контакта);
- мужское обрезание (ВОЗ указывает на снижение риска получения ВИЧ при гетеросексуальных контактах до 60%);
- обследование беременных и начало АРТ при получении положительного результата.

Автор: врач Университетской клиники H-Clinic Коновалова Анастасия Александровна

Медицинский редактор: руководитель Университетской клиники, к.м.н., врач-инфекционист Коннов Данила Сергеевич

Читайте также: