Что такое кум при диагностике на туберкулез

Обновлено: 22.04.2024

Диагностика туберкулеза. Принципы микробиологической диагностики туберкулеза. Выделение возбудителя туберкулеза.

Для диагностики туберкулёза применяют бактериоскопические, бактериологические, биологические, серологические и аллергологические методы, входящие в обязательный диагностический минимум. Материалом для исследований служат мокрота, отделяемое свищей, моча, СМЖ, испражнения.

Микроскопия возбудителя туберкулеза в патологическом материале. В мазках, окрашенных по Цилю-Нильсену, обнаруживают кислотоустойчивые палочки возбудителя туберкулеза.

Нередко материал содержит мало бактерий туберкулеза и для повышения вероятности их обнаружения используют методы обогащения: центрифугирование и флотацию. В первом случае исследуемый материал обрабатывают смесью растворов NaCl и NaOH, центрифугируют и микроскопируют осадок. Второй метод включает обработку материала смесью NaOH, дистиллированной воды и ксилола (или бензола). Образец энергично встряхивают; образующаяся пена всплывает и захватывает микобактерии. Пену отсасывают и готовят мазки.

Наиболее результативна люминесцентная микросколия возбудителя туберкулеза. Материал обрабатывают аурамин-родамином и бактерии окрашиваются в бело-жёлтый цвет. Для выявления L-форм применяют AT, меченные флюорохромами.

Выделение возбудителя туберкулеза

Достоинство метода — возможность получения чистой культуры туберкулеза, позволяющая её идентифицировать, оценить вирулентные свойства и определить чувствительность к ЛС. Материал засевают, тщательно втирая, на твёрдые питательные среды.

Для повышения эффективности выделения возбудителя туберкулеза и уничтожения контаминирующей микрофлоры применяют методы обогащения или обрабатывают материал 6-12% серной кислотой. Основной недостаток бактериологического метода — длительность получения результата (от 2 до 12 нед). В связи с этим разработаны ускоренные микрометоды выделения возбудителя туберкулеза.

Один из распространённых методов выделения возбудителя туберкулеза, метод Прайса, заключается в следующем. Материал помещают на предметное стекло, обрабатывают серной кислотой, отмывают физиологическим раствором и вносят в питательную среду, дополненную цитратной лизированной кровью.

Стекло вынимают через 3-4 сут и окрашивают но Цилю-Нильсену. При микроскопии обнаруживают микроколонии микобактерии возбудителя туберкулеза. Вирулентные бактерии образуют змеевидные (рис. 22-2), а невирулентные — аморфные микроколонии. Культуры L-форм выделяют посевом в столбик полужидкой среды и инкубируют при 37 °С 1-2 мес.

Рост проявляется в виде облачка помутнения с мелкими вкраплениями. Вирулентность выделенной культуры возбудителя туберкулеза определяют заражением лабораторных животных и по наличию корд-фактора. Последний легко идентифицируют по способности микобактерии связывать нейтральный красный и нильский голубой и удерживать их после добавления щелочи. Вирулентные штаммы возбудителя туберкулеза удерживают красители, авирулентные — нет.

О туберкулезе редко говорят за пределами медицинского сообщества. Вокруг этого заболевания сложилось множество мифов. Главный из них – что туберкулез крайне редкая, практически исчезнувшая инфекция. На самом деле, во многих странах, включая Россию, сейчас наблюдается эпидемия туберкулеза, а носитель скрытой инфекции – каждый четвертый. В любой момент латентная форма может перейти в открытую, и человек станет опасен для окружающих. При этом в скрытой форме туберкулез может оставаться незамеченным долгие годы, он не вызывает симптомов и не влияет на самочувствие.

Большинство методов диагностики туберкулеза не позволяют обнаружить инфекцию в латентной форме. Мы проводим самый прогрессивный и точный анализ, который выявляет скрытый и активный туберкулез одновременно!

Современная диагностика туберкулеза, в отличие от подкожных проб Манту и Диаскинтеста, в методе диагностики исключен контакт пациента с туберкулином и антигенами микобактерий туберкулеза, нет необходимости провоцировать иммунный ответ. Все, что нужно для проведения анализа на туберкулез, - стандартная проба крови.

Преимущества диагностики

Высокая точность, чувствительность и специфичность исследования
Определяет как открытую, так и латентную форму заболевания
Безопасен, побочные реакции отсутствуют
Нет противопоказаний – применяется для всех групп населения, включая младенцев и беременных женщин
Нет ограничений после анализа – можно заниматься спортом, принимать горячий душ
Определяет как открытую, так и латентную форму заболевания
Выявляет заражение уже через 3 недели после инфицирования
Количественное выражение результата – выявляет не только сенсибилизацию, но и степень инфицированности палочкой Коха
На результат не влияют применяемые пациентом препараты, индивидуальные особенности, аллергические реакции и т.п
Быстрый результат – не нужно ждать иммунного ответа несколько дней, как с Манту

Кому нужна диагностика

Тест служит для проверки диагноза
Ослабленный иммунитет
Наличие ВИЧ-инфекции, онкологических и аутоиммунных заболеваний
Имеющиеся в прошлом ложноположительные или ложноотрицательные результаты Манту и/или Диаскинтеста
Наличие противопоказаний для проведения кожных проб
Подозрение на внелегочные формы туберкулеза
Диагностика беременных
Недавние контакты с пациентами с подтвержденным туберкулезом
Обострение аллергии или других хронических заболеваний
Прибытие из зоны с высоким уровнем распространенности туберкулеза

Преимущества

Диагностика не требует специальной подготовки
Анализ можно сдавать в любое время суток, не обязательно натощак.
Перед сдачей теста рекомендуется отказаться от тяжелой жирной пищи
Нет необходимости отменять принимаемые лекарства, они не повлияют на результат.

Инновационный метод диагностики туберкулеза считается наиболее современным и точным. Специфичность и чувствительность методики составляет 99%.

Симптомы туберкулеза часто смазаны или неспецифичны – то есть, схожи с проявлениями других заболеваний органов дыхания, например признаками пневмонии или бронхита. Поэтому качественная диагностика туберкулеза состоит из целого ряда инструментальных и лабораторных исследований. Чтобы отличить пневмонию и рак от туберкулеза, наряду с другими анализами проводят микроскопическое исследование мокроты, выделяемой при отхаркивании. Выявление КУМ в мокроте является важным признаком туберкулеза, данный анализ всегда проводится при наличии первых симптомов заболевания или же при положительной реакции на туберкулиновую пробу.

Что такое КУМ

Исследование мокроты на КУМ – это бактериологическое и общеклиническое исследование мокроты для выявления кислотоустойчивых микобактерий (КУМ). Проводится анализ в несколько этапов, сбор материала проводится трижды.

Важно! Результатов одного такого исследования будет недостаточно для постановки диагноза туберкулеза, так как в природе существует большое количество кислотоустойчивых микроорганизмов, которые по своей структуре схожи с микобактериями туберкулеза (МБТ).

Обычная микроскопия мокроты при туберкулезе выявит наличие бактерий как возбудителей инфекции. Но не покажет их видовую принадлежность и устойчивость к антибактериальным препаратам.

Виды исследования мокроты на КУМ

Туберкулезные палочки в мокроте при отхаркивании обнаруживают, используя различные методы исследования мокроты.

Бактериоскопическое исследование мокроты

Этот вид исследования называют также методом окраски по Цилю-Нильсену, он является основным при постановке диагноза туберкулезной инфекции. Проводится анализ следующим образом:

мокрота обрабатывается карболовым фуксином;
далее биоматериал обесцвечивается раствором серной кислоты 5% или раствором солянокислого спирта 3%;
докрашивание осуществляется раствором метиленового синего 0,25%.

Для оценки окрашенных материалов используется прибор, оснащенный иммерсионной системой. Кислотоустойчивые микобактерии будут приобретать красный цвет, а фон вокруг них – синий.

Осматриваются стандартно 100 полей зрения: если КУМ присутствуют в мокроте, то этого достаточно, чтобы заметить их. Если же КУМ не обнаружены, просматриваются 200 полей зрения. Для получения точных результатов достаточно 1 часа. Но, как правило, пациенты их получают у лечащего врача спустя сутки, то есть, на следующий день.

Преимущества этого метода: доступность, часто проводится бесплатно, оперативность – результаты при желании можно получить сразу же. К недостаткам относится сравнительно невысокая чувствительность.

Люминесцентная микроскопия

Этот метод в сравнении с предыдущим считается на 15-30% эффективнее. Для окрашивания мокроты применяются флюорохромы. Это красители органического происхождения, которые начинают светиться при подсвечивании ультрафиолетовыми, фиолетовыми или синими лучами. Обычно используются аурамин 00 или родамин С.

Для проведения исследования используется люминесцентный прибор. При выявлении кислотоустойчивые микобактерии туберкулеза будут отсвечивать золотистым на темном поле. При таком виде микроскопии можно выявить не только наличие, но и количество КУМ. Это очень важный критерий для того, чтобы определить насколько высокую эпидемическую опасность представляет больной, то есть насколько он заразен, и на какой стадии находится болезнь.

Существует специальная таблица для расшифровки результатов окрашивания и подсвечивания мокрот по этому методу.

Интерпретация результатов

КУМ не выявлены в 300 полях зрения – отрицательный.
От 1 до 9 КУМ в 100 полях зрения – положительный.
От 10 до 99 КУМ в 100 полях зрения – положительный +.
1-10 КУМ в 1 поле зрения – положительный ++.
Более 10 КУМ в поле зрения – положительный +++.

Бактериологический (культуральный) метод выявления

Этот метод заключается в посеве полученного биоматериала и еще одного патологического материала на питательную среду. Чтобы выявить активные МБТ, достаточно наличия нескольких жизнеспособных клеток в мокротах. Для регистрации роста культуры потребуется от 21 до 90 суток.

Для этого анализа используются три группы питательных сред:

Плотные питательные на основе яйца.
Полужидкие питательные на агаровой основе.
Жидкие синтетические и полусинтетические питательные среды.

На территории РФ используется преимущественно среда Левенштейна-Йенсена. Во всем мире это также стандартная питательная среда для выявления первичного возбудителя туберкулеза и определения его чувствительности к лекарственным препаратам.

Оценка интенсивность роста выявленных МБТ

От 1 до 20 колоний – это + или скудное выделение МБТ.
От 21 до 100 колоний – это ++ или умеренное бактериовыделение.
Свыше 100 колоний – это +++ или обильное бактериовыделение.

Устойчивость микобактерий к лекарственным препаратам устанавливают методом абсолютных концентраций. По их результатам осуществляют подбор антибиотиков для лечения. Это важная особенность метода, позволяющая выбрать для каждого больного индивидуальную и эффективную антибиотикотерапию.

Кроме вышесказанного преимущество метода в чувствительности к возбудителю. Можно обнаружить не только наличие микобактерии, но также посчитать их количество, установить активность, устойчивость к лекарствам. Большой минус – длительность исследования. С появлением компьютерных технологий обработка результата ускорилась до 3-4 суток.

Как подготовиться к сдаче анализа на КУМ

Чтобы получить достоверный результат анализа мокроты на КУМ, нужно правильно подготовиться к нему.

Подготовительные мероприятия перед процедурой

Анализ сдается преимущественно по утрам натощак – это значит, что последний прием пищи должен быть за 12 часов до сдачи.
Непосредственно перед сбором мокроты следует тщательно прополоскать рот чистой водой.
Желательно почистить зубы – остатки пищи в материале для анализа недопустимы. Но чистить зубы лучше просто влажной зубной щеткой без зубной пасты или порошка, чтобы их частички не исказили результат.

Приобретать заранее контейнер для сбора мокроты не нужно – емкости выдаются врачом.

Как правильно собрать биоматериал

Корректность результатов и эффективность дальнейшего лечения зависят не только от правильности проведения исследования, но и от корректного сбора материалов для него.

Основные правила по сбору мокроты для исследования

Откашливать нужно не слюну и слизь из носоглотки, а содержимое нижних отделов органов дыхания.
Чтобы получить продуктивный кашель, следует предварительно сделать 2-3 глубоких вдоха, стараясь дышать так, чтобы легкие полностью наполнялись воздухом и раскрывались.
Контейнер для сбора материала обследуемый должен держать как можно ближе ко рту и сразу же сплевывать в него то, что откашлялось.
Если не получается получить мокроту, то выполняются следующие манипуляции: обследуемый должен несколько раз постучать себя по груди, глубоко подышать, каждый раз задерживая дыхание на несколько секунд. В крайнем случае предлагается подышать над емкостью с горячей водой с добавлением пищевой соды.

К контейнеру для сбора материалов для анализа тоже предъявляются особые требования. Посуда не обязательно должна стерилизоваться. Но она должна быть чистой, сухой, из пластика или стекла, с плотно завинчивающейся крышкой.

Где сдают анализ на кислотоустойчивые микроорганизмы, кто на него направляет

Направление для анализа на наличие кислотоустойчивых микобактерий КУМ можно получить у врача-фтизиатра или пульмонолога. В некоторых случаях его может выписать и участковый доктор. Сдавать анализ следует в ближайшем туберкулезном диспансере.

Для укрепления здоровья

На сегодняшний день монастырский чай стал весьма популярным травяным напитком, который пользуется значительным спросом и популярностью. Его покупают охотно, и на то есть свои причины – подобные травяные сборы, а составы монастырских чаев могут несколько разниться, обладают мощным общеукрепляющим действием. подробнее >>

Лабораторная диагностика туберкулеза. Выявление бактерий туберкулеза.

В распознавании и дифференциальной диагностике туберкулеза, а также в определении эффективности проводимого лечения важную роль играют лабораторные методы исследования. Среди них большое значение имеют прежде всего способы обнаружения микобактерии туберкулеза в различных выделениях, воспалительных экссудатах, жидкостях и тканях организма больного.

При туберкулезе легких микобактерии находят прежде всего в мокроте. Частота, массивность и постоянство бацилловыделения зависят от формы процесса. Оно часто имеет место при инфильтративном и особенно деструктивном туберкулезе легких. Реже или периодически выделяют микобактерии больные очаговыми, диссеминированными и цирротическими формами туберкулеза без явного распада легочной ткани. Существенное значение имеет при этом состояние бронхов. При их специфическом поражении, но сохраненной дренажной функции микобактерии выявляются с мокротой сравнительно чаще и с большим постоянством, чем при нормальном состоянии бронхов или при их стенозе, вызывающем блокаду каверны.

Микобактерии туберкулеза находят в большом количестве в обильно выделяющейся мокроте, а в скудном отделяемом, наоборот, они встречаются реже и в виде единичных экземпляров. У больных, не выделяющих мокроту, лучшие результаты дает применение раздражающих аэрозольных ингаля пий 10—15% раствора поваренной соли в 1% растворе питьевой соды Н. М. Рудой и соавт. (1971) применяют с этой целью смесь, состоящую из 5 мл 10% раствора хлорида натрия, 1 мл химопсина, растворенного в физиологическом растворе, и 20 капель солутана.

Второе место по эффективности выявления бацилловыделения у больных, не выделяющих мокроту, занимает исследование промывных вод трахеи и бронхов, которое предложил Я. С. Зобин (1939). В настоящее время для анестезии гортани у взрослых применяют 0,25% раствор дикаина, разведенный в 10% растворе новокаина. Этот раствор наливают во время фонации на голосовые связки в количестве 0,5—1 мл. У больных с повышенным глоточным рефлексом этим раствором смазывают заднюю стенку глотки. Затем в трахею шприцем с напаянной канюлей вводят 10—20 мл физиологического раствора комнатной температуры.

При этом в результате раздражения слизистой оболочки бронхов возникает кашель, при котором из глубоких дыхательных путей вместе с введенной жидкостью выделяются слизь и мокрота. Это отделяемое исследуют на присутствие микобактерии туберкулеза или другой микробной флоры.

Исследование промывных вод бронхов редко сопровождается серьезными осложнениями. Только при сильном, длительном и приступообразном кашле иногда появляется кровохарканье, может аспирироваться инфекционный материал в здоровые участки легочной ткани, нарастает сердечная недостаточность. Такие явления отмечаются главным образом у больных с сопутствующей бронхиальной астмой, пороком сердца, гипертонией. В подобных случаях, очевидно, не следует прибегать к данному методу исследования. При отсутствии таких противопоказаний, особенно у больных с ограниченными формами процесса, у которых чаще всего и возникает необходимость в исследовании промывных вод бронхов, обычно не наблюдается каких-либо осложнений, и поэтому его можно производить не только в клинических, но и в амбулаторных условиях.

Менее эффективно производимое натощак исследование промывных вод желудка, в которых может содержаться бациллярная мокрота или бронхиальная слизь, чаще заглатываемая детьми, а иногда и взрослыми (Аrmand-Dellille, 1927). Кроме того, микобактерии могут проникать в желудок через его слизистую оболочку при гематогенном распространении инфекции в организме, а также при забрасывании бациоллосодержащей желчи (М. Д. Розанова, 1950). Пользоваться этим методом рекомендуется в тех случаях, когда не удается получить мокроту при раздражающих ингаляциях, при противопоказаниях к применению промывания бронхов или при невозможности их проведения по другим причинам.

Наименее информативно определение бацилловыделения с помощью исследований мазков слизи из гортани, а также промывания только верхних отделов дыхательных путей.

У части больных можно выделить микобактерии из крови. По наблюдениям 49 авторов, обобщенным в 1954 г. Dalencour, бациллемия отмечалась в среднем у 5,3% больных различными формами туберкулеза. П. И. Беневоленский (1945) установил ее у 3,7% больных туберкулезом легких (исключая страдающих гематогенным процессом). Чаще обнаруживают микобактерии в крови при туберкулезе кожи, обширных гематогенных диссеминациях в легких, при менингите. Однако, по сводным данным Kallos (1937). основанным на изучении гемокультур, выделенных от 14 502 больных, туберкулезная бациллемия имела место всего лишь у 1,13% из них.

Частота выявления микобактерии зависит не только от формы заболевания, метода получения материала, но и от способа его исследования (бактериоскопия, посев, заражение животных). Микобактерии туберкулеза обнаруживают при прямой бактериоскопии мазков мокроты, окрашенных по Цилю—Нельсену, при микроскопии с использованием метода обогащения — флотации и люминесцентного способа исследования. Методы обогащения повышают частоту обнаружения микобактерии туберкулеза в мокроте, промывных водах желудка и бронхов, в экссудате, спинномозговой жидкости, в каловых массах на 10—20% по сравнению с результатами прямой бактериоскопии.

Среди бактериоскопических методов выявления бацилловыделения наиболее чувствительным является люминесцентная микроскопия, повышающая возможность обнаружения в мокроте микобактерии на 15—20% по сравнению с обычной бактериоскопией, а при исследовании мазков из флотационных колец — на 8—10%. При этом облегчается изучение некоторых биологических свойств возбудителя — старения культур, аутолиза клеток и др.

Некоторые авторы утверждают, что при флюоресцентной (люминесцентной) микроскопии микобактерии туберкулеза можно выявить даже чаще, чем при посевах мокроты и других материалов на различные питательные среды. Kolbel (1955) обнаружил их при простой бактериоскопии у 39,7% больных, при бактериологическом методе — у 52,1%, а при люминесцентной микроскопии — у 73,6%. На преимущество последнего метода указывают Т. Н. Ященко и И. С. Мечева (1973), Н. С. Страхов и соавт. (1973).

Для суждения об эффективности проводимой антибактериальной терапии придают прогностическое значение уменьшению (или сохранению) в динамике массивности бацилловыделения. Поэтому целесообразно не только констатировать бацилловыделение, но и оценивать его количественный показатель. При этом при бактериоскопии бацилловыделение оценивается как обильное, если находят микобактерии в каждом поле зрения, умеренное — при наличии «единичных микробов в 40—50 полях зрения и скудное — при нахождении их единичных экземпляров в препарате.

Читайте также: