Что такое вирусологический метод диагностики кори
Обновлено: 19.04.2024
Вирус кори относится к роду MorbillivirusсемействаParamyxoviridae. Вызывает острую инфекцию с высокой общей интоксикацией, характерной сыпью, типичным поражением слизистых оболочек (пятна Филатова-Коплика) и конъюнктивитом. Вирус от больного можно выделить в течение очень короткого промежутка времени (последние дни инкубационного периода и 1-2 дня после появления сыпи). В современных условиях лабораторное подтверждение кори является обязательным диагностическим мероприятием, особенно в случаях атипичного или осложненного течения кори, при вспышках кори в организованных коллективах и при расследовании причин смерти от кори.
Экспресс-метод(прямая РИФ) направлен на выявление антигена в клетках соскоба кожи или в клетках слизистой оболочки носоглотки.
Вирусологический метод – выделение вируса кори на культуре клеток (L-41,Vero, культуре лимфобластов обезьян мармазетов В-95ф, трансформированных вирусом Эпштейн-Барра), вызывающего образование гигантских многоядерных клеток и синцития с включениями в цитоплазме. При развитии осложнения при кори в виде подострого склерозирующего энцефалита (ПСПЭ), вызывамого дефектным вирусом кори, обычные методы выделения вируса на культуре клеток оказываются неэффективными. Поэтому при ПСПЭ разработан метод совместного культивирования клеток мозга больного, полученных путем прижизненной биопсии, или лимфоцитов пациента с чувстительной культурой клеток. Идентификацию вируса проводят с помощью РН, РИФ, РТГА.
Серологический метод применяется наиболее часто с целью определения нарастания титра антител в парных сыворотках больных с помощью ИФА (с дифференциацией антител по классам иммуноглобулиновM–маркера текущей инфекции иG) или РТГА. Реже применяются РН, РСК, РНГА.
Генодиагностика.Разработаны методы молекулярной гибридизации и ПЦР для выявления специфических фрагментов РНК вируса кори.
Вирусологическая диагностика краснухи.
Вирус краснухи относится к роду RubivirusсемействаRubiviridaeи вызывает у детей инфекцию с пятнисто-папулезной сыпью, катаральным воспалением верхних дыхательных путей, увеличением шейных и затылочных лимфатических узлов. В некоторых случаях возникают тяжелые осложнения (серозный менингит, энцефалит, полиневрит, тромбоцитопения). У взрослых краснуха протекает более тяжело; вирус обладает тератогенным действием и у беременных женщин (особенно в первом триместре) вызывает врожденную краснуху с развитием пороков сердца, органов зрения (катаракта, глаукома и т.д.), органов слуха (глухонемота и т.д.). Лабораторная диагностика проводится только при осложнениях краснухи, при подозрении на инфекцию у беременных женщин и при расследовании причин гибели плода или новорожденного ребенка. Исследованию подвергают слизь из носоглотки, кровь, мочу, кал, органы трупа (селезенка, лимфатических узлы, костный мозг, головной мозг). Применяются следующие методы.
Вирусологический метод- заражение культур клеток (Vero,PK-13 и др.) с последующей идентификацией вируса с помощью РТГА или реакции интерференции (сначала культуру клеток заражают вирусом краснухи, не вызывающим цитопатогенного действия, а затем цитопатогенным вирусом везикулярного стоматита (ВВС); при наличии искомого вируса краснухи возникает интерференция обоих вирусов и цитопатическое действие ВВС не проявляется).
Серологический метод– обнаружение антител классаIgMк вирусу краснухи (показатель свежего инфицирования) в парных сыворотках больных с помощью метода ИФА; применяется также РТГА.
Генодиагностика.Разработана ПЦР для выявления специфических фрагментов РНК вируса краснухи, оправданный для применения при диагностике краснухи у женщин.
Корь – высококонтагиозное антропонозное острое инфекционное заболевание с воздушно-капельным путем передачи. Возбудитель кори – РНК содержащий вирус (семейство Paramyxoviridae, род Morbillivirus). Только 1% восприимчивых лиц не заболевает корью при первом тесном контакте с больным.
Корь начинается с продромального периода, для которого характерны повышение температуры тела до 38°С и выше, кашель, насморк, чихание, покраснение глаз и светобоязнь, энантема в полости рта (пятна Филатова-Коплика). С 4-5 дня болезни наблюдается поэтапное высыпание пятнисто-папулезной сыпи (на первый день сыпь появляется на лице и шее, на второй день – на туловище, на третий день – на ногах и руках), на месте сыпи остается пигментация и отрубевидное шелушение. Инкубационный период длится в среднем около 10 дней (от 7 до 18 дней) с момента инфицирования дыхательных путей и до повышения температуры.
Вирус кори присутствует в крови, носоглоточных выделениях и моче во время продромального периода и в течение 3-4 дней с момента появления сыпи. АТ к вирусу кори впервые можно обнаружить в крови с момента появления сыпи. Максимальный уровень содержания АТ IgM в крови приходится на 4-7 дни после появления сыпи, они сохраняются в течение 28 дней, в редких случаях их можно обнаружить спустя 8 недель с момента появлении сыпи. АТ IgG начинают вырабатываться с момента появления сыпи и достигают максимального уровня через 2 недели; их можно выявить в течение долгих лет после перенесенной инфекции.
Дифференциальная диагностика. Заболевания, протекающие с мелкопятнистой экзантемой (краснуха, скарлатина, инфекционный мононуклеоз, лекарственные и аллергические экзантемы, протекающие с повышением температуры тела).
Этиологическая лабораторная диагностика включает выделение вируса кори, выявление РНК вируса кори, обнаружение АТ к вирусу кори.
Материал для исследования
- Сыворотка крови – выявление АТ;
- моча, назофарингиальные смывы, лимфоциты периферической крови – выделение вируса кори;
- мазки из носоглотки и ротоглотки – выявление РНК вируса.
Сравнительная характеристика методов лабораторной диагностики. Лабораторная диагностика коревой инфекции в рамках Программы элиминации кори в РФ проводится только в вирусологических лабораториях Региональных центров по эпидемиологическому надзору за корью с помощью тест-систем, рекомендованных ВОЗ. Для лабораторной диагностики кори применяют главным образом выявление АТ к вирусу (серологическая диагностика). Для диагностики кори используют как обнаружение АТ отдельных классов (IgM и IgG), так и количественное определение специфических АТ в крови для установления их значимого прироста при одновременном исследовании двух проб, полученных от больного в остром периоде и в период реконвалесценции (парные сыворотки).
Для выявления вирусоспецифических АТ IgM и IgG в настоящее время используется преимущественно метод ИФА. Благодаря высокой чувствительности и специфичности, простоте и скорости выполнения, возможности автоматизации исследования, метод доступен любой лаборатории. Для получения корректных результатов и облегчения их интерпретации большое значение имеет правильно выбранное по отношению к появлению клинических симптомов кори время забора образца.
Для выявления изменения уровня суммарных АТ с использованием реакции нейтрализации (РН) цитопатического действия вируса кори, требуется наличие двух образцов сыворотки крови, взятых у больного в остром периоде заболевания и на стадии реконвалесценции. Метод обладает 100% чувствительностью по отношению к клинически подтвержденным случаям. Этот тест не является легким в применении, потому что он требует наличия высококвалифицированного персонала, имеющего опыт работы с культурами клеток. Результаты анализа могут быть получены через 10 дней после получения сыворотки реконвалесцента.
Оценка изменения содержания специфических АТ с использованием метода РТГА также требует наличия двух образцов сыворотки крови, полученных у больного в остром периоде и на стадии реконвалесценции. У вакцинированных лиц метод демонстрирует 98% чувствительность. Этот тест также не является легким в применении, потому что требует высококвалифицированного персонала, а также наличие свежих эритроцитов обезьян. Результаты анализа могут быть получены через 2 дня после получения сыворотки реконвалесцента.
Выделение вируса кори выполняют на культуре клеток Vero. Обнаружение и идентификация вируса кори на культуре клеток может занять несколько недель, поэтому не рекомендуется использовать этот метод для первичной диагностики инфекции, изоляция вируса кори проводится в специализированных лабораториях.
Выявление РНК вируса методом ПЦР с обратной транскрипцией не получило пока широкого распространения. Секвенирование генома вируса кори применяется в целях определения генотипа возбудителя кори. Генетический анализ позволяет сравнивать штаммы, полученные из различных мест в разные годы, что позволяет получить информацию о происхождении вирусов и проследить пути их передачи.
Показания к применению различных лабораторных исследований. Для диагностики кори ВОЗ рекомендует использовать обнаружение вирус-специфических IgM методом ИФА в образце сыворотки крови, взятом после четвертого дня от момента появления сыпи. Взятие крови для исследований осуществляется на 4-7 день с момента появления сыпи.
Для определения напряженности иммунитета к вирусу кори ВОЗ рекомендует применять выявление АТ IgG в сыворотке крови методом ИФА.
Для выявления вируса кори и его РНК используют биоматериалы, взятые в продромальный период заболевания и в первые три дня после появления сыпи. При взятии образцов следует учитывать, что интенсивность экскреции вируса быстро падает.
Особенности интерпретации результатов лабораторных исследований. Вирусоспецифические АТ IgM появляются в течение первых дней с момента высыпания, спустя месяц их уровень начинает быстро снижаться. Их наличие в крови пациента достоверно свидетельствует об острой свежей инфекции. АТ IgM также вырабатываются при первичной вакцинации и, хотя их уровень снижается быстрее, чем уровень АТ IgM, вырабатывающихся в ответ на инфицирование диким вирусом, специфические АТ IgM к дикому или вакцинному вирусу не могут быть разделены используемыми в рутинной диагностике методами. В этом случае для интерпретации полученных результатов следует обратиться к истории вакцинации конкретного пациента.
Что такое корь? Причины возникновения, диагностику и методы лечения разберем в статье доктора Александрова Павла Андреевича, инфекциониста со стажем в 14 лет.
Над статьей доктора Александрова Павла Андреевича работали литературный редактор Маргарита Тихонова , научный редактор Сергей Федосов
Определение болезни. Причины заболевания
Корь (Measles) — острое инфекционное заболевание, вызываемое вирусом кори, который поражает эпителий верхних дыхательных путей и кожные покровы. Клинически характеризуется выраженным синдромом общей инфекционной интоксикации, патогномоничной энантемой, макуло-папулёзной сыпью, конъюнктивитом и синдромом поражения респираторного тракта (дыхательных путей).
Этиология
вид — возбудитель кори (Polinosa morbillarum)
Синдромально заболевание было описано в 1890 году доктором Бельским (Псков), в 1895 году детским доктором Филатовым и в 1898 году доктором Копликом (США).
Оболочка вируса имеет 3 слоя: белковую мембрану, липидный слой и наружные гликопротеидные комплексы, образующие своеобразные выступы. Штаммы вирусов идентичны в антигенном отношении, обладают комплементсвязывающими, гемагглютинирующими, гемолизирующими свойствами и симпластообразующей активностью. СД-46 является рецептором у человека к вирусу кори.
Вирус неустойчив во внешней среде – чувствителен к ультрафиолету, в каплях слюны погибает за 30 минут, при высыхании и действии дезинфицирующих средств — мгновенно. Хорошо переносит пониженные температуры. Вирус можно выделить из различных сред организма (кровь, моча, кал, смывы со слизистых ротоглотки, конъюнктив, цереброспинальной жидкости). [2] [5]
Эпидемиология
Антропоноз. Источник заболевания – исключительно заражённый человек, также с атипичной формой заболевания кори. Инфицированный заразен с последних 2-х дней инкубации и до 4-го дня с момента появления высыпаний включительно — с 5 дня заразность пропадает.
Передача заболевания
Механизм передачи: воздушно-капельный (путь аэрозольный), редко трансплацентарный (при заболевании женщины в конце беременности). Теоретически возможно заражение от недавно привитых (но на практике такое случается чрезвычайно редко).
Существует весенне-зимняя сезонность. После перенесённой инфекции, полного курса вакцинации развивается стойкий пожизненный иммунитет.
Корь — одна из основных причин смерти среди детей раннего возраста.
В 2015 году в глобальных масштабах произошло 134 200 случаев смерти от кори. [1] [3]
Кто подвергается риску
Заразиться корью может любой человек, не имеющий иммунитета — тот, кто не был вакцинирован или тот, у кого не выработался иммунитет после вакцинации.
Самому высокому риску заболевания корью и развития осложнений, включая смертельный исход, подвергаются невакцинированные дети раннего возраста. Корь — одна из основных причин смерти среди них.
При обнаружении схожих симптомов проконсультируйтесь у врача. Не занимайтесь самолечением - это опасно для вашего здоровья!
Симптомы кори
Инкубационный период
Инкубационный период при типичной форме — от 9 до 11 суток (в некоторых случая до 13).
Симптомы кори у взрослых
Начало заболевания подострое (т.е. основной синдром появляется на 2-3 сутки от начала заболевания), однако при должной подготовке врача (выявлении патогномоничной энантемы — сыпи на слизистых оболочках) можно определить острое начало (в течении первых суток). Во взрослом возрасте из-за особенностей иммунной системы эти критерии могут не соблюдаться.
- синдром выраженной общей инфекционной интоксикации;
- синдром патогномоничной энантемы (пятна Бельского-Филатова-Коплика);
- синдром макуло-папулёзной экзантемы;
- синдром конъюнктивита (выраженный);
- синдром поражения респираторного тракта (фарингит, трахеобронхит);
- синдром генерализованной лимфаденопатии (ГЛАП);
- гепатолиенальный синдром.
Описана так называемая ранняя диагностика кори, включающая:
- затруднение носового дыхания;
- покраснение правого века;
- субфебрилитет (лихорадка постоянного типа).
Объективно: можно отметить возникновение макуло-папулёзной сыпи, появляющейся в типичных случаях на 3-4 день болезни, с выраженной этапностью (лицо, шея; после туловище, руки, бёдра; затем олени и стопы, а на лице в этот момент бледнеет). Высыпания представляют собой папулы, окруженные красным пятном, предрасположенные к слиянию (но при наличии чистых участков), иногда появляются петехии. Спустя 3-4 дня сыпь становятся бледной и оставляет после себя бурые пятна и отрубевидное шелушение. Увеличиваются и приобретают чувствительность периферические лимфоузлы (затылочные, заднешейные и подмышечные). Ярко выражен конъюнктивит (конъюнктивы масштабно гиперемированы, отёчны, быстро присоединяется гнойное отделяемое). Характерным является вид больного: одутловатое лицо, красные (как у кролика) глаза, отёчность носа и век, сухие потрескавшиеся губы. При аускультации в лёгких прослушиваются сухие хрипы. Выражена тахикардия, снижение артериального давления. Увеличиваются размеры печени и селезёнки (генерализация инфекции).
При фарингоскопии в ротоглотке визуализируется гиперемия мягкого нёба, на слизистой поверхности щёк в начале заболевания пятна Бельского — Филатова — Коплика (мелкие белесоватые пятнышки с узкой красноватой каёмкой), которые пропадают при появлении экзантемы. Иногда появляется пятнистая энантема на слизистой мягкого нёба.
Описана митигированная корь (у людей, получивших специфический противокоревой иммуноглобулин в период инкубации), характеризующаяся удлинением инкубационного периода до 21 дня, лёгким течением.
При абортивной форме заболевания характерно типичное начало, но спустя 1-2 суток клинические проявления исчезают.
Существует понятие — реакция на прививку (при первичном введении живой противокоревой вакцины), характеризующееся повышением температуры тела, катаральными явлениями (воспалениями) со стороны верхних дыхательных путей, скудной малозаметной сыпью (чаще развивается у детей и лиц с иммунодефицитом).
У больных с наличием тяжелого иммунодефицита – СПИДа (ВИЧ, онкологические больные, лица, получающие системные цитостатики после трансплантации органов) — течение заболевания крайне тяжёлое (летальность до 80%). [4] [5]
Вирус кори относится к роду Morbillivirus семейства Paramyxoviridae. Вызывает острую инфекцию с высокой общей интоксикацией, характерной сыпью, типичным поражением слизистых оболочек (пятна Филатова-Коплика) и конъюнктивитом. Вирус от больного можно выделить в течение очень короткого промежутка времени (последние дни инкубационного периода и 1-2 дня после появления сыпи). В современных условиях лабораторное подтверждение кори является обязательным диагностическим мероприятием, особенно в случаях атипичного или осложненного течения кори, при вспышках кори в организованных коллективах и при расследовании причин смерти от кори.
Экспресс-метод (прямая РИФ) направлен на выявление антигена в клетках соскоба кожи или в клетках слизистой оболочки носоглотки.
Вирусологический метод – выделение вируса кори на культуре клеток (L-41, Vero, культуре лимфобластов обезьян мармазетов В-95ф, трансформированных вирусом Эпштейн-Барра), вызывающего образование гигантских многоядерных клеток и синцития с включениями в цитоплазме. При развитии осложнения при кори в виде подострого склерозирующего энцефалита (ПСПЭ), вызывамого дефектным вирусом кори, обычные методы выделения вируса на культуре клеток оказываются неэффективными. Поэтому при ПСПЭ разработан метод совместного культивирования клеток мозга больного, полученных путем прижизненной биопсии, или лимфоцитов пациента с чувстительной культурой клеток. Идентификацию вируса проводят с помощью РН, РИФ, РТГА.
Серологический метод применяется наиболее часто с целью определения нарастания титра антител в парных сыворотках больных с помощью ИФА (с дифференциацией антител по классам иммуноглобулинов M –маркера текущей инфекции и G) или РТГА. Реже применяются РН, РСК, РНГА.
Генодиагностика. Разработаны методы молекулярной гибридизации и ПЦР для выявления специфических фрагментов РНК вируса кори.
Вирусологическая диагностика краснухи.
Вирус краснухи относится к роду Rubivirus семейства Rubiviridae и вызывает у детей инфекцию с пятнисто-папулезной сыпью, катаральным воспалением верхних дыхательных путей, увеличением шейных и затылочных лимфатических узлов. В некоторых случаях возникают тяжелые осложнения (серозный менингит, энцефалит, полиневрит, тромбоцитопения). У взрослых краснуха протекает более тяжело; вирус обладает тератогенным действием и у беременных женщин (особенно в первом триместре) вызывает врожденную краснуху с развитием пороков сердца, органов зрения (катаракта, глаукома и т.д.), органов слуха (глухонемота и т.д.). Лабораторная диагностика проводится только при осложнениях краснухи, при подозрении на инфекцию у беременных женщин и при расследовании причин гибели плода или новорожденного ребенка. Исследованию подвергают слизь из носоглотки, кровь, мочу, кал, органы трупа (селезенка, лимфатических узлы, костный мозг, головной мозг). Применяются следующие методы.
Вирусологический метод - заражение культур клеток (Vero, PK-13 и др.) с последующей идентификацией вируса с помощью РТГА или реакции интерференции (сначала культуру клеток заражают вирусом краснухи, не вызывающим цитопатогенного действия, а затем цитопатогенным вирусом везикулярного стоматита (ВВС); при наличии искомого вируса краснухи возникает интерференция обоих вирусов и цитопатическое действие ВВС не проявляется).
Серологический метод – обнаружение антител класса IgM к вирусу краснухи (показатель свежего инфицирования) в парных сыворотках больных с помощью метода ИФА; применяется также РТГА.
Генодиагностика. Разработана ПЦР для выявления специфических фрагментов РНК вируса краснухи, оправданный для применения при диагностике краснухи у женщин.
Читайте также: