Цмд анаплазмоз эрлихиоз по крови

Обновлено: 18.04.2024

Гранулоцитарный анаплазмоз человека относится к острым лихорадочным заболеваниям с трансмиссивным путем передачи, вектором при котором являются иксодовые клещи. Возбудителем заболевания является Anaplasma phagocytophillum, относящаяся к роду Anaplasma, семейства Anaplasmataceae; названный микроорганизм обнаруживается в тех же очагах, что и патогенные для человека виды боррелий и эрлихий.

Попадая со слюной клеща в организм человека, анаплазмы инфицируют зрелые нейтрофилы, вызывая воспалительные процессы во внутренних органах. Размножение анаплазм в нейтрофилах приводит к ослаблению иммунных защитных реакций организма и как следствие – возникновению оппортунистических бактериальных, вирусных и грибковых инфекций. Для данного заболевания характерно острое начало с высокой лихорадкой, слабостью, головной и мышечными болями. У пациентов отмечают брадикардию и понижение АД, примерно в 80% случаев развивается безжелтушный гепатит с повышением активности трансаминаз. Острый период характеризуется поражением почек – развиваются гипоизостенурия, протеинурия и эритроцитурия, уровень креатинина и мочевины в крови повышен. В редких случаях заболевание осложняется инфекционно-токсическим шоком и острой почечной недостаточностью. Менее чем в одном проценте случаев развивается менингоэнцефалит.

Показания к обследованию

Лихорадка, головная боль, слабость, мышечные боли, при наличии эпидемиологического анамнеза: присасывание клеща или посещение территории, где могло произойти нападение иксодовых клещей (лес, лесопарк, садовый участок, кладбище) в эпидемический сезон с апреля до конца ноября с учетом инкубационного периода.

Дифференциальная диагностика: Другие инфекции, передаваемые иксодовыми клещами.

Материал для исследований

Цельная кровь – изоляция A. рhagocytophillum культуральным методом, выделение ДНК патогена, микроскопические исследования;
лейкоцитарная фракция – выявление ДНК, микроскопические исследования;
сыворотка крови – выявление АТ;
СМЖ – выявление АТ (при развитии серозных менингитов), изоляция патогена культуральным методом, выявление ДНК A.рhagocytophillum, микроскопические исследования.

Этиологическая лабораторная диагностика включает микроскопические исследования для обнаружения морулы (скопление элементарных телец внутри нейтрофилов); изоляция A.phagocytophillum культуральным методом, выявление ДНК микроорганизма, обнаружение АТ IgM и IgG к A.рhagocytophillum.

Сравнительная характеристика методов

Наиболее широко используемым методом лабораторной диагностики гранулоцитарного анаплазмоза человека является выявление специфических АТ IgM и IgG в пробах крови пациента, собранных с интервалом 3–6 недель (парные сыворотки). АТ-IgM появляются к концу второй недели, концентрация АТ-IgG достигают максимума через 5–6 недель от начала заболевания. При использовании метода НРИФ диагностическим титром является разведение 1:80, при исследовании образцов крови в динамике учитывается 4-кратное нарастание титра АТ или получение положительного результата для второй сыворотки и отрицательного для первой (наличие сероконверсии).

В острый период заболевания могут использоваться прямые методы обнаружения возбудителя. При микроскопии мазков цельной крови или лейкоцитарной фракции крови, окрашенных по Гимзе, в нейтрофилах обнаруживаются морулы. Диагностическая чувствительность метода колеблется от 25 до 75%. Изоляция анаплазм при использовании культурального метода редко используется как метод лабораторного подтверждения анаплазмоза в связи с длительностью и трудоемкостью исследования.

Выявление ДНК A.phagocytophillum отмечено в 70–90% случаев (относительно лабораторного подтверждения наличия сероконверсии в парных сыворотках крови) по зарубежным данным, пока не нашедшим аналогичного подтверждения в России. Выявление ДНК целесообразно проводить на первой неделе заболевания до начала антибиотикотерапии.

Особенности интерпретации результатов

Обнаружение ДНК A.phagocytophillum в крови или СМЖ пациента является основанием для предварительной постановки диагноза гранулоцитарного анаплазмоза человека, выявление нарастания титров АТ к патогену в образцах крови, взятых в динамике (парные сыворотки) служит подтверждением этиологии заболевания.

Группа иксодовых клещевых инфекций, возбудители которых передаются клещами рода Ixodes, включает в себя клещевой энцефалит (вирус клещевого энцефалита), иксодовые клещевые боррелиозы (Borrelia burgdorferi sensu lato), гранулоцитарный анаплазмоз человека (Anaplasma phagocytophilum), моноцитарный эрлихиоз человека (Ehrlihia chaffeensis, Ehrlihia muris) и др. Сезон активности иксодовых клещей начинается в последней декаде апреля и продолжается в средней полосе России до октября, а в Приморье – до ноября. Исследование позволяет экстренно провести диагностику наличия опасных возбудителей в клеще и при получении положительного результата обратиться в специализированные учреждения.

Клещевой энцефалит. Возбудитель - Tick-borne encephalitis Virus, TBEV. Около 70% всех случаев клещевого энцефалита в РФ приходится на Урал и Сибирь. В преобладающей части случаев клещевой энцефалит протекает в инаппарантной форме, в остальных случаях развиваются различные по степени тяжести варианты течения заболевания: лихорадка, вирусные менингит и энцефалит. В большинстве случаев после очаговой энцефалитической формы развиваются стойкие нарушения деятельности ЦНС.

Лайм-боррелиоз, болезнь Лайма или иксодовый клещевой боррелиоз (ИКБ) – трансмиссивное полисистемное заболевание, приводящее к поражению опорно-двигательного аппарата, нервной и сердечно-сосудистой систем, кожи. Занимает по широте распространения и уровню заболеваемости одно из ведущих мест среди природно-очаговых заболеваний. В группу иксодовых клещевых боррелиозов (ИКБ) входят заболевания, вызываемые в большинстве случаев тремя представителями комплекса Borrelia burgdorferi sensu lato: B.burgdorferi, B.garinii и B.afzelii. В результате попадания боррелий в кожу у больных отмечается местное кожное воспаление – клещевая мигрирующая эритема. Но почти у 50% пациентов эритема отсутствует в начале заболевания, это так называемая безэритемная форма.

Гранулоцитарный анаплазмоз человека относится к острым лихорадочным заболеваниям. Возбудителем заболевания является Anaplasma phagocytophillum. Размножение анаплазм в нейтрофилах приводит к ослаблению иммунных защитных реакций организма. Для данного заболевания характерно острое начало с высокой лихорадкой, слабостью, головной и мышечными болями.

Показания к обследованию

Лихорадка, головная боль, слабость, мышечные боли при наличии эпидемиологического анамнеза: присасывание клеща или посещение территории, где могло произойти нападение иксодовых клещей (лес, лесопарк, садовый участок, кладбище) в эпидемический сезон с апреля до конца ноября с учетом инкубационного периода.

Дифференциальная диагностика

Другие инфекции, передаваемыми иксодовыми клещами.

Материал для исследований

Цельная кровь – изоляция эрлихий культуральным методом, выделение ДНК, микроскопические исследования;
лейкоцитарная фракция – выявление ДНК, микроскопические исследования;
сыворотка крови – выявление специфических АТ;
СМЖ – выявление специфических АТ (при развитии серозных менингитов), изоляция патогена культуральным методом, выявление ДНК, микроскопические исследования.

Этиологическая лабораторная диагностика включает микроскопические исследования для обнаружения морулы (скопление элементарных телец внутри нейтрофилов), иммуногистохимические исследования для обнаружения возбудителя в биоптатах костного мозга, изоляция эрлихий культуральным методом, выявление ДНК патогенных эрлихий, обнаружение специфических АТ IgM и IgG.

Сравнительная характеристика методов лабораторной диагностики

Наиболее широко используемым методом лабораторной диагностики моноцитарного эрлихиоза человека является выявление специфических АТ IgM и IgG в пробах крови, собранных с интервалом 3–6 недель (парные сыворотки) методом ИФА. Исследования проводят начиная с конца второй недели заболевания. При использовании метода РНИФ диагностическим титром является разведение 1:80, при исследовании образцов крови в динамике учитывается 4-кратное нарастание титра АТ или получение положительного результата для второй сыворотки и отрицательного для первой (наличие сероконверсии).

В острый период заболевания могут использоваться прямые методы обнаружения возбудителя. При микроскопии мазков крови или СМЖ (при развитии серозного менингита), окрашенных по Гимзе, в моноцитах обнаруживают морулы. Диагностическая чувствительность данного метода колеблется от 3 до 60%. В большем проценте случаев выявляются морулы в моноцитах в случае заболевания людей со сниженным иммунитетом.

Выявление ДНК эрлихий при использовании ПЦР является высокоспецифичным методом, обладающим достаточно высокой диагностической чувствительностью (60–80%) по зарубежным данным и пока не нашедшим аналогичного подтверждения в России. Возможно, это связано с недостаточно высокой чувствительностью используемых тестов. По данным литературы в крови находят от 0,2 до 10% инфицированных эрлихиями моноцитов. Учитывая, что при моноцитарном эрлихиозе человека наблюдается лейкопения, концентрация клеток, содержащих морулы, колеблется в диапазоне 500–50000 клеток/мл. Выявление ДНК методом ПЦР применяется на первой неделе заболевания, до начала антибиотикотерапии.

Изоляция эрлихий в культуре клеток гистоцитомы собак (линия ДН8Е) занимает несколько недель, обладает более низкой диагностической чувствительностью по сравнению с обнаружением ДНК патогена методом ПЦР, в рутинной диагностической практике не используется.

Особенности интерпретации результатов лабораторных исследований

Обнаружение ДНК патогенных видов эрлихий в крови или СМЖ пациента является основанием для предварительной постановки диагноза моноцитарного эрлихиоза человека, выявление нарастания титров АТ к патогену в образцах крови, взятых в динамике (парные сыворотки), служит подтверждением этиологии заболевания.

Для данного исследования лаборатория принимает следующий биоматериал:

Подготовка к исследованию

Клеща (живого или мёртвого, снятого с человека) поместить в прозрачную ёмкость (контейнер пластиковый универсальный, сухую пробирку, пенициллиновый флакон, баночку из-под детского питания и т.д.). Клещей (не более 3 особей), снятых с одного человека, допускается помещать в одну тару и оформлять как одно исследование. Недопустимо помещать клещей, снятых с нескольких человек, в одну тару и оформлять как одно исследование.

Поместить тару с клещом в Zip-пакетик, тщательно закрыть пакетик на застежку, завернуть край несколько раз и прошить с помощью степлера или тщательно заклеить скотчем.

Внимание: подготовка пациента не требуется!

Метод исследования

Исследование позволяет экстренно провести диагностику наличия возбудителя моноцитарного эрлихиоза человека (МЭЧ) в клеще и при получении положительного результата обратиться к врачу-инфекционисту.

Также возможно комплексное исследование клеща на инфекции (клещевой вирусный энцефалит, иксодовый клещевой боррелиоз, Borrelia miyamotoi боррелиоз, гранулоцитарный анаплазмоз человека, моноцитарный эрлихиоз человека, риккетсиозы группы пятнистых лихорадок) – услуга 170400.

Показания к исследованию:

Исследование клеща в случае присасывания с целью принятия мер экстренной профилактики
Эпидемиологические исследования

Интерпретация результатов:

Пример результата (вариант нормы):

Параметр	Результат	Референсные значения
ДНК/РНК Ehrlichia chaffeensis/muris (МЭЧ), качественное определение	Не обнаружено	Не обнаружено

В случае отрицательного результата и наличия факта присасывания внимательно наблюдать за возможными клиническими признаками проявления заболеваний, передающихся иксодовыми клещами. При появлении клинических симптомов обратиться к врачу-инфекционисту.

Рекомендуется обратиться к врачу-инфекционисту для проведения специфической антибиотикопрофилактики.