Culture salmonella and shigella

Обновлено: 23.04.2024

Определение этиологии ОКИЗ (острого кишечного инфекционного заболевания) и выбор рациональной антибиотикотерапии.

Рациональная терапия дизентерии основана на идентификации её возбудителя - бактерий рода Shigella.

Шигеллы (по имени японского учёного К. Шиги) грамотрицательные неподвижные неспороносные палочки длиной 23 мкм, шириной 0,6 мкм. По типу обмена аэробы и факультативные анаэробы.Они выделяют токсины, повреждающие эпителий кишечника, усиливают секрецию жидкости и солей в просвет кишки. Шигеллы быстро изменяют свою чувствительность к различным антибактериальным препаратам.

Заражение происходит фекально-оральным путём. Для возникновения заболевания достаточно инфицирование менее чем 100 микробными клетками шигелл. Инкубационный период от одних до 7 суток (в среднем 2 - 3 суток), но может сокращаться до 12 и даже до 2 часов. Заболевание начинается остро. Возникает общая интоксикация, повышается температура тела, появляются схваткообразные боли в животе (тенезмы), усиливающиеся перед дефекацией. В последние годы отмечается резкое увеличение количества больных тяжёлой дизентерией и её хроническими формами. Диагноз хронической дизентерии устанавливается в случае, если заболевание продолжается более 3 месяцев.

Лабораторное подтверждение дизентерии проводится бактериологическим и серологическим методами. Бактериологический метод (высев шигелл из испражнений) при 3-кратном исследовании обеспечивает подтверждение диагноза у большинства больных. Это обеспечивает дифференциальную диагностику с другими острыми диарейными заболеваниями - сальмонеллёзом, эшерихиозом, кишечным иерсиниозом, холерой, амёбиазом.

Сальмонеллы (по имени американского исследователя D. Salmon) – возбудители энтероколитов или пищевой токсикоинфекции, а также генерализованных тифопаратифозных инфекций. Мелкие грамотрицательные палочки, подвижны за счет жгутиков. По типу метаболизма – факультативные анаэробы. Факторы патогенности – термостабильные эндотоксины, термолабильный энтеротоксин, микрокапсулы, белки наружной мембраны клеточной стенки (способствуют адгезии на энтероцитах тонкой кишки). Сальмонеллезы – зоонозно-антропонозные инфекции, могут быть причиной внутрибольничных инфекций. Сальмонеллы могут размножаться при 4-6 град. С и длительно сохраняться в замороженных продуктах. Брюшной тиф и др. сальмонеллезы являются инфекциями с фекально-оральным механизмом передачи, основной путь передачи - пищевой, главным образом через продукты животного происхождения. Заболевание протекает в форме гастроэнтерита, гастроэнтероколита, гастрита (без диареи), тифоподобной форме и септической форме. После перенесенного заболевания в 20% случаев возникает бактерионосительство, которое может продолжаться пожизненно. Лабораторная диагностика сальмонеллеза основана на выделении возбудителя при посеве различных видов биоматериала от больного (фекалии, рвотные массы, желчь, кровь при септических формах) при микробиологическом исследовании.

Выделяемые возбудители: шигеллы, сальмонеллы.

Обращаем внимание на необходимость предварительного приобретения стерильной пробирки с питательной средой, используемой при взятии биоматериала, в любом медицинском офисе ИНВИТРО.

Рациональная терапия дизентерии основана на идентификации её возбудителя - бактерий рода Shigella.

Выделяемые возбудители: шигеллы, сальмонеллы.

Что такое сальмонеллез? Причины возникновения, диагностику и методы лечения разберем в статье доктора Александрова Павла Андреевича, инфекциониста со стажем в 14 лет.

Над статьей доктора Александрова Павла Андреевича работали литературный редактор Маргарита Тихонова , научный редактор Сергей Федосов и шеф-редактор Лада Родчанина

Определение болезни. Причины заболевания

Сальмонеллёз — это острое инфекционное заболевание желудочно-кишечного тракта с возможностью дальнейшей генерализации процесса (распространением заболевания по всему организму). Причина развития сальмонеллёза — различные серотипы бактерий рода Salmonella. К клиническим характеристикам сальмонеллёза относят синдром общей инфекционной интоксикации, синдром поражения желудочно-кишечного тракта (гастрит, энтерит), синдром обезвоживания, гепатолиенальный синдром (увелечение печени и/или селезёнки) и иногда синдром экзантемы (высыпания).

Возбудитель

семейство — кишечные бактерии (Enterobacteriaceae)

род — Сальмонелла (Salmonella)

Существует 7 подвидов (более 2500 сероваров). Наиболее актуальные серовары: typhimurium, enteritidis, panama, london.

Представлены следующей антигенной структурой:

О-антиген (соматический, термостабильный);
H-антиген (жгутиковый, термолабильный);
К-антиген (поверхностный, капсульный);
Vi-антиген (антиген вирулентности — степень способности штамма вызвать заболевание; является компонентом О антигена);
М-антиген (слизистый).

К факторам патогенности (механизмам приспособления бактерий) относятся:

холероподобный энтротоксин — интенсивная секреция жидкости в просвет кишки;
эндотоксин (липополисахарид) — общее проявление интоксикации;
инвазия — заражение.

Тинкториальные свойства: разлагают глюкозу и маннит, образовывая кислоту и газ, продуцируют сероводород. Грамм-отрицательные палочки подвижны, спор и капсул не образуют. Растут на обычных питательных средах, образуя прозрачные колонии, на мясо-пептонном агаре с образованием колоний голубоватого цвета, на среде Эндо образуют прозрачные розовые колонии, на среде Плоскирева — бесцветные мутные, на висмут-сульфитном агаре — чёрные с металлическим блеском.

Высокоустойчивы во внешней среде (без агрессивных воздействий), активно размножаются в мясе и молоке (до 20 суток), в воде сохраняют жизнесособность до 5 мес., в почве — до 9 мес., в комнатной пыли — до 6 мес., в колбасе — до 1 мес., в яйцах — до 3 мес., в фекалиях сохраняются до 4 лет. При 56 °C погибают через 3 минуты, при кипячении мгновенно. Сальмонеллы, которые находятся в куске мяса массой 400 гр и толщиной до 9 см, погибают при его варке за 3,5 часа. Соление и копчение оставляет сальмонелл в живых. Воздействие кислот и хлорсодержащих дезинфицирующих средств вызывает их гибель. В последнее десятилетие появились штаммы сальмонелл, устойчивые ко многим антимикробным препаратам. [2] [5]

Эпидемиология

Зооантропоноз, распространённый повсеместно.

Источники инфекции: домашние животные (сами не болеют), птицы, человек (больной и носитель).

Резервуары инфекции и причина эпидемических вспышек сальмонеллеза: грызуны, дикие птицы, тараканы, улитки, лягушки, змеи.

Механизм передачи: фекально-оральный (пути — алиментарный, т. е. через органы ЖКТ, водный, контактно-бытовой). В основном источниками заражения являются птицы, яйца и молочные продукты. Инфицирующая доза 10*5-10*8 микробных тел.

Факторы риска

детский возраст до 5 лет;
возраст до 12 месяцев, особенно высока вероятность заболеть без грудного вскармливания;
иммунодефицит (в основном у младенцев и лиц старше 65 лет, а так же у пациентов с ВИЧ в стадии СПИДа, принимающих иммунодепрессивные препараты);
регулярный приём препаратов, снижающих кислотность желудка;
употребление сырого и недостаточно термически обработанного мяса, молочных продуктов и яиц;
частый контакт с животными с несоблюдением правил гигиены;
посещение стран с низким уровнем жизни.

В России в 2016 г. заболеваемость была – 26 на 100 тыс. населения, у детей в до 14 лет – 71 на 100 тыс. Для сравнения в США среднегодовая заболеваемость — 15 на 100 тыс. (1,35 миллиона заболеваний, 26 500 госпитализаций и 420 смертей ежегодно). Иммунитет строго типоспецифичен (возможно многократное инфицирование различными штаммами) и непродолжителен [2] [6] [9] [10] .

При обнаружении схожих симптомов проконсультируйтесь у врача. Не занимайтесь самолечением - это опасно для вашего здоровья!

Симптомы сальмонеллеза

Инкубационный период — от 6 часов (при алиментарном заражении) до 3 суток. При внутрибрюшном заражении (искусственно) — до 8 дней.

Начало заболевания острое (т. е. развитие основных синдромов происходит в первые сутки заболевания).

report this ad

Salmonella-Shigella (SS) agar is used for selective isolation and differentiation of Salmonella and Shigella. It is used for the isolation, cultivation and differentiation of gram-negative enteric microorganisms from both clinical and non-clinical specimens such as from feces, urine, and suspected food items (fresh and canned foods). This medium is not recommended for the primary isolation of Shigella as some Shigella strains may not grow on SS agar due to relatively high level of selectivity.

Eosin Methylene Blue (EMB) Agar,
Xylose Lysine Deoxycholate (XLD Agar), and

Despite its name, Salmonella-Shigella (SS) agar is not suitable for isolating shigellae as it is inhibitory to most strains.

Table of Contents

Composition of Salmonella-Shigella (SS) Agar and their function:

Lactose: fermentable carbohydrate
Beef extract, proteose peptone: provides the nitrogen, vitamins, and amino acids in SS Agar
Ferric citrate: Sodium Thiosulfate is also a sulfur source, and acts with Ferric Citrate as an indicator to detect hydrogen sulfide production.
Sodium thiosulphate &Sodium citrate: selective agents, providing an alkaline pH to inhibit Gram-positive organisms and suppress coliforms
Bile salts : The bile salts inhibit growth of gram-positive microorganisms
Brilliant Green/Neutral Red: pH indicator.
Agar: Solidifying agent.

Final pH: 7.0 +/- 0.2 at 25ºC

Principle

The presence of bile salts mixture and dyes (brilliant green) inhibits the growth of gram-positive species to a varying degree. Differentiation of enteric organisms is achieved by the incorporation of lactose in the medium. Organisms which ferment lactose produce acid which, in the presence of the neutral red indicator, results in the formation of red/pink colonies. Lactose non-fermenters form colorless colonies. The latter group contains the majority of the intestinal pathogens, including Salmonella and Shigella.

The sodium thiosulfate and ferric citrate enable the detection of hydrogen sulfide production as evidenced by colonies with black centers.

Colony morphology of E.coli, Salmonella and Shigella in Salmonella-Shigella Agar

Preparation of the media

Suspend 60 g of the medium in one liter of deionized or distilled water.
Mix well.
Heat with frequent agitation and boil for one minute.
Sterilization in autoclave is not necessary.
Pour into plates
Let the agar solidify and store in the refrigerator (avoid freezing). Prepared culture media can be kept for at least a week in refrigeration.
Note: Various commercial suppliers now supplies ready-to-use culture plates.

Culturing the sample

Results

Lactose fermenter: If lactose fermentation occurs, the medium will turn red due to the acidic pH. e.g. Escherichia coli, Klebsiella pneumoniae gives red colonies.
Non-Lactose fermenter: Salmonella, Shigella, and other non-lactose fermenters appear as transparent or translucent colorless colonies. Colonies of Salmonella spp. may appear with or without black centers (depending on the species isolated).

Precautions:

As SS Agar media contains components of animal origin (absence of transmissible pathogenic agents cannot be ruled out) so treat it as potentially infectious, and handle observing the usual universal blood precautions. Do not ingest, inhale, or allow the media to come into contact with skin.

Acharya Tankeshwar

Keep Reading

Eosin Methylene Blue Agar (EMB Agar)

Eosin methylene blue (EMB) agar is a selective and differential medium used to isolate fecal coliforms.

MacConkey Agar: Composition, Uses, Colony Characteristics

Selective (against gram-positive bacteria) and differential culture medium (LF and NLF), commonly used for the isolation of enterics.

Mannitol Salt Agar: Uses, Results

Mannitol Salt Agar selects and differentiates Staphylococcus species. Staphylococcus aureus ferments mannitol and gives yellow colonies.

Читайте также: