Диагностика катаральной лихорадки овец
Обновлено: 23.04.2024
Прикрепленные файлы: 1 файл
Инфекционная катаральная лихорадка овец.doc
Инфекционная катаральная лихорадка овец
Впервые болезнь изучил и описал Хатчин (1881), а вирусную природу установил Тейлер (1906). Шпреуелл (1901) предложил способ иммунизации овец вирулентной кровью и иммунной сывороткой, а Тейлер (1907) первым изготовил атенуированных живую вакцину. В 1947 г. Александер изолировал вирус в куриных эмбрионах.
Вирус довольно устойчив во внешней среде. В тушах овец при рН не ниже 6,3 и при температуре 4 ° С вирус сохраняется до ЗО суток, в инфицированной крови, консервированной жидкостью Едингтона, при комнатной температуре остается жизнеспособным в течение 25 лет. Устойчив против гниения и низких температур, долго сохраняется в замороженной до - 70 ° С сперме. Нагревание до 60 ° С разрушает вирус через 5 мин, при 37 ° С и рН
Эпизоотология болезни. К возбудителя инфекционной катаральной лихорадки в естественных условиях восприимчивы овцы и меньше - крупный рогатый скот, козы, антилопы, лоси, американские белохвостые олени, снежные овцы. Особенно чувствительны отлучены ягнята. В стационарно неблагополучных пунктах ягнята-сосальщики приобретают пассивного иммунитета и не болеют. Источником возбудителя инфекции являются больные и переболевшие овцы, становятся вирусоносителями в течение 3 - 4 мес. Перенос вируса от больных животных к здоровым осуществляют мокрецы Culicoides, характеризующиеся широким распространением и большой численностью, а также комары Aedes и вовноиды Melophagus ovinus. Наиболее значительным резервуаром вируса в природе считают крупный рогатый скот, в организме которой вирус сохраняется до следующего активного периода цикла развития жалящих насекомых. Промежуточным звеном, через которое также возможно передачи вируса восприимчивым овцам, могут быть дикие жвачные животные и грызуны. Контактным путем возбудитель не передается.
Инфекционная катаральная лихорадка овец характеризуется сезонностью, что совпадает с периодом дождей и наибольшей активностью насекомых-переносчиков. Эпизоотии болезни наблюдаются в низменных местностях, по течению медленных рек, по берегам стоячих водоемов. Животные заражаются при выпас их ночью или рано утром. В засушливые годы, сухой сезон, жаркие часы дня, при содержании овец в помещениях, а также в горных зонах заболевания не наблюдается. Инфекционная катаральная лихорадка проходит в виде значительных эпизоотий, с большим охватом поголовья (50 - 60%), характеризуется тяжелым течением и высокой летальностью, достигающей в свежих очагах 90%, в стационарных - 30%.
Патогенез изучен недостаточно. После проникновения в организм вирус размножается в крови и обусловливает длительную лихорадку. С развитием клинической картины вирус появляется в селезенке, лимфоузлах, печени, впоследствии локализуется в слизистой оболочке кишок, епиталиальний и мышечной тканях. Репродукция вируса в различных органах и тканях приводит к нарушению обмена веществ, повышение проницаемости сосудов, развитие воспалительно-дегенеративных и некротических явлений, эрозий и язв. Поражение плода и эмбрионов вызывает аборты, рождение нежизнеспособного молодняка. У больных животных резко снижается общая резистентность организма, развивается секундарных бактериальная инфекция, которая приводит к значительному усложнению патологического процесса и гибели животных. Особенностью инфекционного процесса при инфекционной катаральной лихорадке овец является длительное (в течение месяцев) персистенция вируса в крови животных, несмотря на наличие в довольно высоких титрах ви-руснейтрализуючих антител.
Во время подострого течения наблюдаются такие же клинические признаки, как и при остром, но тяжесть их выражена значительно меньше. Продолжительность болезни - 12 - 25 суток, летальность составляет 20 - 60%. Абортивная форма болезни проявляется лишь кратковременной лихорадкой, вялостью, поверхностным катаральным воспалением слизистых оболочек ротовой и носовой полостей, конъюнктивитом. Выздоровление наступает сравнительно быстро. При этом выявляют анорексию, саливацию, гиперемию слизистых оболочек ротовой и носовой полостей. На носовом зеркальце, губах, деснах, вымени, вульве находят язвы, кровоизлияния. Язык сильно опухает, выдвигается изо рта, что сильно затрудняет глотание, и скот гибнет от жажды. Иногда наблюдаются аборты, рождение нежизнеспособного безобразного приплода. В эндемичных очагах течение этой болезни у крупного рогатого скота часто бывает бессимптомным, с длительным вирусоноситель-ством.
Патологоанатомические изменения. Трупы истощены, на коже наблюдаются экзематозные поражения. Подкожная клетчатка и межмышечной соединительной ткани в области головы, шеи, спины набухшие, инфильтрированы желтоватой жидкостью. Отеки находят также в области межчелюстном пространства, глотки, гортани, языка и губ. На языке, губах, внутренней поверхности щек обнаруживают язвы и кровоизлияния.
Селезенка значительно увеличена в объеме. Лимфоузлы, особенно заглоточные, пидщелепови, шейные и мезентериальные, увеличены, гипер-мийовани, отечные. В грудной и брюшной полостях наблюдается накопление студенистого экссудата с примесью крови. На поверхности легких, слизистых оболочек пищеварительного тракта и дыхательных путей, под капсулой печени и селезенки, под эпикардом и эндокардом обнаруживаются многочисленные кровоизлияния.
Диагноз устанавливают на основании эпизоотологических данных, клинических признаков болезни, патологоанатомических изменений и результатов лабораторных исследований.
Лабораторная диагностика. Предусматривает изоляцию из патологического материала вируса, его идентификацию с помощью реакции нейтрализации (на куриных эмбрионах и культуре клеток) за РИФ, РСК, РДП, исследование парных сывороток крови овец по РСК, РЗГА, РН и РДП с целью выявления специфических антител. В сомнительных случаях проводят биопробу на ягнята.
При использовании для выделения вируса клеточных культур необходимо осуществить 2 - 4 слепых пассажи, прежде чем вирус начнет вызывать характерные цитопатогенность изменения в монослое. Идентификацию выделенного вируса осуществляют с помощью реакции нейтрализации в клеточной культуре или куриных эмбрионах из неразведенной специфической сывороткой, а также с помощью РИФ, РСК и РДП. Серотипов принадлежность вируса определяют по РН на бляшках и методом ингибирования бляшек на агаровом монослое зараженной вирусом культуры Vero. Биопробу проводят на 1 - 4-дневных белых мышата, которых заражают интрацеребральным, а также на ягнята 3 - 6-месячного возраста, которым патологический материал вводят внутривенно, внутрикожно или подкожно. Характерные клинические признаки болезни появляются через 6 - 8 суток и проявляются лихорадкой, гиперемией слизистых оболочек рта и носа, опуханием губ и языка. В экспериментально инфицированных ягнят до заражения и через 21-30 суток после заражения отбирают кровь и исследуют с РСК. Появление специфических комплемент-связующих антител свидетельствует о наличии в исследуемом материале вируса. Серодиагностики и ретроспективную диагностику инфекционной катаральной лихорадки овец проводят с помощью РСК, РДП, РЗГА, РН, а в случае необходимости также РРГ, РИФ и ELISA-методом. Чаще сыворотки реконвалесцентов исследуют с РСК, по которой можно выявить групоспецифични антитела против всех серотипов возбудителя болезни. Комплементзвьязувальни антитела появляются в крови через 2 недели после заражения в титрах 1: 4 - 1: 16 и достигают максимальных показателей (1: 60 - 1: 256) на 30-е сутки.
Дифференциальная диагностика. Предусматривает необходимость исключения ящуру, контагиозной эктима овец и коз, везикулярного стоматита, оспы, некробактериоза, болезни Найроби, лихорадки долины Рифт. Ящур, контагиозная эктима овец и коз, оспа овец характеризуются высокой контагиозностью, их появление не связано с временем года и массового лета кровососущих насекомых. Для ящура характерные афтозные поражения ротовой полости, вымени, конечностей; важные результаты вирусологических исследований. При контагиозный эктима обнаруживают специфические пустулезные поражения слизистых оболочек полости рта и кожного покрова в области путы, венчика, мижратицевои щели. При микроскопических исследований нефиксированных мазков и сухих неконсервированных струпьев обнаруживают возбудителя болезни. Ящур и везикулярный стоматит дифференцируют на основании результатов РСК с антигеном из стенок везикул больных животных. Проводят биопробу на кроликах и ягнята. Оспу определяют по данным микроскопических исследований окрашенных по Морозову мазков с внутренней поверхности свежих папул и обнаружением на желтом фоне препарата одиночных и расположенных группами элементарных телец, окрашенных в темно-коричневый цвет. При некробактериоз поражаются преимущественно конечности, в патологическом материале обнаруживают возбудитель болезни Fusobacterium necrophorum. ХворобаНайроби сопровождается явлениями геморрагического диатеза и тяжелого гастроэнтерита. Для лихорадки долины Рифт характерны дистрофия печени и очаговые некрозы. Окончательный диагноз устанавливают по результатам лабораторных исследований.
Лечение не разработано.
Иммунитет. Переболевшие животные приобретают иммунитет только против того типа вируса, вызвавшего болезнь. Возможна реинфекция другим типом вируса в течение того же сезона или в следующем году. Активный иммунитет у реконвалесцентов сопровождается образованием нейтрализующих и комплементзвьязувальних антител, которые пассивно передаются молодняка с молозивом. В неблагополучных странах для специфической профилактики инфекционной катаральной лихорадки овец используют живые и инактивированные вакцины. Иммунитет и специфические антитела в высоких титрах сохраняются после вакцинации не менее одного года.
Диагноз на КЛО ставят на основании эпизоотологических, клинических, патологоморфологических данных и результатов лабораторных исследований.
Из эпизоотологических данных имеют значение появление болезни в жаркий дождливый период, одновременное увеличение численности кровососущих насекомых, характер местности (низины, заболоченные территории, долины реки т.д.), наличие завозного контингента (из благополучных зон) животных.
Из клинических симптомов имеют значение лихорадка, угнетение, цианоз языка, губ, десен, отек морды, искривление шеи, хромота. Степень их выраженности может варьировать в очень широких пределах.
Из патологоанатомических изменений заслуживают внимания. истощение, отек подкожной и межмышечной соединительной ткани, дегенеративные изменения скелетных мышц, некрозы слизистых оболочек рта, языка, губ и др.
Наличие этих признаков и обнаружение с помощью РСК антител в крови животных к вирусу КЛО позволяют поставить предварительный диагноз на катаральную лихорадку овец.
Окончательный диагноз основывается на результатах экспериментального заражения овец, выделения и идентификации вируса. Вирус можно выделить:
1) из цельной крови, полученной во время лихорадки;
Для дифференциации выделенного вируса от других вирусов используют РСК, а для типизации - реакцию нейтрализации. РСК при КЛО группоспецифическая и может быть использована для обнаружения антител к любому штамму вируса КЛО. РСК используется для серологической разведки местности на циркуляцию в ней вируса КЛО. Реакция нейтрализации используется для изучения иммунного статуса животного и для типирования выделенного вируса. Лучшие результаты получают при длительном (24 ч) контакте вируса с сывороткой при температуре +37°.
Быстрый результат дает использование метода флуоресцирующих антител с культурой зараженных клеток. Специфическое свечение Обнаруживается уже в 1-м пассаже вируса на культуре клеток, когда еще нет ЦПД. Кроме того, в зараженной культуре клеток уже в 1-м пассаже можно обнаруживать специфические тельца-включения.
В США довольно широко используется РДП для выявления преципитирующих антител в крови переболевших животных. Антигеном служит очищенный и концентрированный культуральный вирус. Достоинства РДП - простота и быстрота. Недостаток - недостаточная специфичность (поэтому метод пригоден лишь для ориентировочной диагностики).
Инфекционную катаральную лихорадку необходимо отличать от ящура (высокая контагиозность, характерные ящурные поражения ротовой полости, вымени, конечностей, результаты вирусологических исследований), контагиозной эктимы овец (контагиозность, пустулезные поражения слизистых оболочек и кожного покрова, микроскопия мазков из патологического материала, биопроба на ягнятах и кроликах), злокачественной катаральной горячки (овцы болеют редко, заболевание в основ-ном спорадическое, характерны поражения глаз и верхних дыхательных путей), некробактериоза (кроме овец болеют лошади, свиньи и другие животные, хроническое течение, выделение возбудителя), болезни Ибараки (болеет крупный рогатый скот, результаты вирусологических и серологических исследований), эпизоотической гемморагической болезни оленей (вирусологические и серологические исследования).
КЛО необходимо дифференцировать от следующих болезней:
Гидроперикардит. (Крайне опасное неконтагиозное заболевание овец, вызываемое Ricketsia ruminantum и передающееся клещами р. Amblioma Характеризуется лихорадкой и нервными симптомами. Распространено в тех же районах Африки, что и КЛО. При КЛО нет нервных явлений, лихорадка более длительна, течение более медленное, не поддается антибиотикотерапии.
Лихорадка долины Рифт. Смертность у овец до 100%, телят - 70-100%, аборты. На вскрытии некрозы и дегенерации в печени, ацидофильные включения в клетках печени.
Дифференциация от КЛО по РА, МФА, РСК, РЗГА.
Оспа овец. Поражения кожи и слизистых оболочек рта,
респираторных путей, желудочно-кишечного тракта. При К. ЛО - поражения только в (ротовой и носовой полостях, отсутствие контагиозности.
Контагиозная эктима овец. Образование папул и везикул на губах и ноздрях, иногда вокруг глаз. Они сменяются пустулами и толстой коркой, не сопровождаются отёком и гиперемией слизистых, что характерно для КЛО. Отличие от КЛО и по эпизоотологии.
Ящур. Поражения развиваются быстро, охватывают большой процент животных, болезнь высококонтагиозна, в наличии афты. Ничего этого нет при КЛО.
"Мокнущая болезнь". Это заболевание встречается у телят в возрасте от 1 недели до 6 месяцев, передается клещами, характеризуется стоматитом, гиперемией слизистых оболочек и кожи с развитием мокрой экземы. Во рту и глотке часто развивается дифтеретическое воспаление. Болезнь не передается с кровью овцам отличается тяжелым течением и летальностью.
Везикулярный стоматит. Может быть дифференцирован от КЛО по эпизоотологии. Заболевают и лошади.
Трехдневная болезнь крупного рогатого скота. (Stiffsickness - скованность движений). Проявляется хромотой, скованностью движений, парезами (быстро проходят), высокой лихорадкой (быстро проходит). Гиперемия отсутствует, овцам не передается (как КЛО).
1. БОЛЕЗНИ, ОБЩИЕ ДЛЯ ВСЕХ ИЛИ НЕСКОЛЬКИХ ВИДОВ ЖИВОТНЫХ
КАТАРАЛЬНАЯ ЛИХОРАДКА КРУПНОГО РОГАТОГО СКОТА, ОВЕЦ И КОЗ
1.7. МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ ПО ЛАБОРАТОРНОЙ ДИАГНОСТИКЕ КАТАРАЛЬНОЙ ЛИХОРАДКИ КРУПНОГО РОГАТОГО СКОТА, ОВЕЦ И КОЗ
УТВЕРЖДЕНЫ 11 июня 1986 г., N 432-5
1. Общие положения
1.1. Лабораторные методы исследования на катаральную лихорадку крупного рогатого скота, овец и коз включают в себя следующие:
- выделение вируса на культуре клеток и куриных эмбрионах с последующей идентификацией в реакции иммунофлуоресценции (ИФ);
- выявление группоспецифических антител в сыворотках крови больных или переболевших животных в РДСК, РДП;
- постановку биологической пробы на овцах (в сомнительных случаях).
Выделение и идентификацию вируса, исследования сывороток крови животных ветеринарные лаборатории проводят группоспецифическими методами. Окончательное титрование вируса по 23 серологическим вариантам в реакции нейтрализации проводят во Всесоюзном научно-исследовательском институте ветеринарной вирусологии и микробиологии (ВНИИВВиМ).
1.2. В лабораторию для исследования на катаральную лихорадку направляют:
- кусочки селезенки и лимфатические узлы от павших или убитых животных в свежем виде или консервированные 30%-ным раствором глицерина, приготовленным на фосфатно-буферном растворе (рН 7,2. 7,4);
- пробы крови от больных животных, взятые в период температурной реакции во флаконы в количестве 10 мл, пробы стабилизируют равным объемом антикоагулянта - раствором Эдингтона следующего состава: щавелевокислый калий - 5 г, карболовая кислота - 5 г, глицерин - 500 мл, дистиллированная вода - 500 мл;
- кусочки скелетных мышц, сердца, языка, губ, стенок книжки и рубца, фиксированные 10%-ным раствором формалина для патологогистологического исследования, а также нефиксированные кусочки лимфатических узлов, селезенки, легких, печени и почек с надпочечниками;
- сыворотку крови для серологических исследований от больных или переболевших животных в количестве 2. 3 мл.
Патологический материал для вирусологических исследований отбирают не позднее, чем через два часа после гибели животных, в стерильные флаконы или пробирки и доставляют в лабораторию в термосе со льдом.
Сыворотку крови для серологических исследований можно сохранять при температуре -20°С и ниже. Консервирование сывороток химическими реактивами не допускается.
2. Патологогистологическое исследование
2.1. Для гистологического исследования готовят парафиновые срезы из фиксированных 10%-ным раствором формалина кусочков скелетных мышц, сердца, языка, губ, стенок книжки и рубца и окрашивают гематоксилин-эозином.
Для выявления внутриклеточных цитоплазматических включений берут кусочки лимфатических узлов, селезенки, легких и почек с надпочечниками, фиксируют их в жидкости Карнуа (спирт этиловый - 60 мл, хлороформ - 30 мл, ледяная уксусная кислота - 10 мл) и заливают в парафин. Срезы окрашивают метиловым зеленым - пиронином или ШИК-реакцией.
При исследовании гистологических препаратов необходимо иметь в виду, что в случае заболевания животных катаральной лихорадкой обнаруживают резко выраженные поражения микроциркуляторного русла в скелетных мышцах и мышечных волокнах сердца, языка, губ - колбовидное набухание, гомогенизацию, губчатый распад, лизис и некроз; в межмышечной соединительной ткани - сильный отек, кровоизлияния и лимфоидно-гистиоцитарный инфильтрат; в стенках книжки и рубца - некроз покровного эпителия и основы слизистой оболочки, а также отек, диффузные кровоизлияния и лимфоидный инфильтрат в соединительной ткани подслизистого слоя.
При окраске специальными методами срезы просматривают под микроскопом с иммерсионной системой, причем в цитоплазме ретикулярных клеток и макрофагов лимфатических узлов и селезенки, в клетках легких, печени, почках и надпочечников могут быть найдены цитоплазматические включения округлой или овальной формы красного цвета (метод Браше), пурпурного или лилово-красного (ШИК-реакция). Часто обнаруживают значительное уменьшение количества лимфоцитов в селезенке и лимфатических узлах (опустошение).
2.2. По обнаруженным характерным патологогистологическим изменениям и тельцам-включениям ставят предварительный диагноз на катаральную лихорадку овец.
3. Вирусологическое исследование
3.1. Подготовка материала к исследованию
3.1.1. Для проведения исследований из патологического материала (селезенки, лимфатических узлов) готовят 10%-ную суспензию на фосфатном буферном растворе (рН 7,4. 7,6) или на питательной среде с 0,5% гидролизата лактальбумина, к которой добавляют 1000 ЕД пенициллина и 500 мкг стрептомицина на 1 мл. Патологический материал, консервированный глицерином, предварительно отмывают в фосфатном буферном растворе (рН 7,4. 7,6).
Приготовленную суспензию центрифугируют 30 мин при 2000. 3000 об/мин. Надосадочную жидкость сливают в стерильную пробирку, помещают в холодильник и выдерживают при 2. 4°С в течение 3. 4 ч. Затем делают высевы на питательные среды (МПБ, МПА) для исключения бактериального загрязнения.
Через сутки, при отсутствии роста микрофлоры на питательных средах, надосадочную жидкость используют для заражения клеточных культур и куриных эмбрионов.
3.1.2. Пробы крови с антикоагулянтом центрифугируют 10 мин при 1000 об/мин. Осадок эритроцитов трижды промывают стерильным физиологическим раствором (рН 7,2. 7,4), затем готовят 20%-ную суспензию эритроцитов на фосфатном буферном растворе (рН 7,4. 7,6) для заражения культур клеток и куриных эмбрионов.
3.2. Выделение вируса на культуре клеток
3.2.1. Выделяют вирус на первично-трипсинизированной культуре клеток почки ягнят (ПЯ) или перевиваемой линии клеток ВНК-21.
3.2.2. В матрасы на 100 мл (не менее 5) с культурой клеток ПЯ или ВНК-21 после удаления ростовой среды вносят 2. 3 мл суспензии исследуемого материала и равномерно распределяют ее по монослою клеток.
Матрасы помещают в термостат на 1 ч при 37°С, после чего вносят поддерживающую среду в количестве 10. 15 мл (для культуры клеток ВНК-21 - среду Игла с двойной концентрацией аминокислот; для ПЯ - 0,5%-ный раствор гидролизата лактальбумина без сыворотки).
Контролем служат матрасы с незараженной культурой клеток, в которых ростовая среда заменена поддерживающей.
3.2.3. Матрасы, зараженные исследуемым материалом, и контрольные помещают в термостат при 37°С. Для учета цитопатического действия вируса (ЦПД) проводят ежедневно микроскопическое исследование клеточных культур в течение 7 дней.
3.2.4. Цитопатическое действие вируса в культуре клеток ВНК-21 можно обнаружить через 36. 40 ч по наличию округлых клеток, с последующим разрушением всего монослоя. ЦПД вируса в культуре клеток ПЯ проявляется на 6. 7-й день зернистостью, округлением клеток, образованием тяжей, отслоением клеток от стекла.
В контрольных незараженных культурах цитопатические изменения должны отсутствовать.
3.2.5. При выявлении в культурах ЦПД отбирают из матрасов культуральную жидкость в объеме 0,4 мл для заражения монослоя клеток аналогичной культуры, выращенных на стеклянных пластинках (стеклышках), в пробирках или пенициллиновых флаконах. После выдерживания зараженных культур в термостате при 37°С в течение 72 ч стеклышки извлекают, высушивают на воздухе, фиксируют 10 мин в охлажденном при температуре -20°С ацетоне и используют для идентификации вируса в иммунофлуоресценции.
3.2.6. При отсутствии цитопатического действия вируса (ЦПД) проводят два последовательных пассажа в аналогичной клеточной культуре.
3.3. Выделение вируса на куриных эмбрионах
3.3.1. Для выделения вируса на куриных эмбрионах (КЭ) суспензию исследуемого материала (см. п.3.1) вводят 8. 9-дневным КЭ в желточный мешок в дозе 0,2. 0,3 мл или 13. 14-дневным КЭ внутривенно в дозе 0,1. 0,2 мл. Каждым материалом заражают не менее 5 эмбрионов.
3.3.2. Зараженные куриные эмбрионы помещают в термостат при 33,5°С и выдерживают в течение 5 дней. В этот период эмбрионы овоскопируют два раза в сутки. Куриные эмбрионы, погибшие в течение первых 24 ч, уничтожают (неспецифическая гибель), остальные эмбрионы после гибели и все оставшиеся живыми на 5-е сутки после заражения охлаждают в холодильнике 2. 4 ч при 2. 4°С, затем их вскрывают и исследуют зародыш на наличие макроскопических изменений. Характерными для возбудителя катаральной лихорадки является вишнево-красная окраска погибших куриных эмбрионов с многочисленными кровоизлияниями на голове и туловище.
3.3.3. Для идентификации выделенного вируса готовят 10%-ную суспензию из эмбрионов (без головы) и заражают клеточные культуры (см. п.3.2.5).
3.3.4. При сохранении жизнеспособности эмбрионов или отсутствии характерных изменений у погибших проводят два последовательных пассажа на КЭ, используя 10%-ную суспензию (см. п.3.3.3).
3.4. Идентификация вируса
3.4.1. Для идентификации вируса пользуются прямым и непрямым методом иммунофлуоресценции.
3.4.2. При прямом методе на стеклянные пластинки (стеклышки) с зараженной культурой клеток наносят специфическую флуоресцирующую сыворотку в рабочем разведении. Препараты помещают во влажную камеру на 30 мин при 37°С, затем их промывают в двух сменах фосфатного буферного раствора по 10 мин.
В качестве контроля окрашивают стеклышки с незараженной культурой клеток.
3.4.3. При непрямом методе на стеклышки с зараженной культурой клеток наносят специфическую (немеченую) сыворотку катаральной лихорадки в рабочем разведении. Для контроля на часть препаратов наносят нормальную сыворотку овцы.
Препараты помещают во влажную камеру и выдерживают в термостате 30 мин при 37°С, затем дважды их промывают физиологическим раствором (рН 7,2. 7,4) по 10 мин и после подсушивания наносят антивидовую флуоресцирующую сыворотку в рабочем разведении. Окрашивают их во влажной камере 30 мин при 37°С. После промывания препаратов в двух сменах фосфатного буферного раствора (рН 7,2. 7,4) их подсушивают и просматривают в люминесцентном микроскопе.
3.4.4. При положительном результате в препаратах обнаруживают ярко светящиеся зелено-желтым цветом гранулы, конгломераты в цитоплазме и перинуклеарной зоне или такой же интенсивности диффузное свечение всей или большей части цитоплазмы.
Содержание статьи
Историческая справка
В последнее время, в основном в связи с импортом животных и продуктов овцеводства, получила широкое распространение. Регистрируется во многих странах, в Российской Федерации относится к карантинным болезням.
Сведения о вспышках заболевания периодически поступают с территории Франции, Германии, Нидерландов, Бельгии и других стран Европы.
При поступлении сведений об эпизоотии импорт животных и соответствующих животноводческих продуктов с территории неблагополучных стран ограничивают.
Частое бессимптомное течение заболевания дает ученым основания предположить более широкое распространение блютанга, чем принято считать. Проводимые исследования по выявлению специфических антител у животных во многих странах подтверждают эту догадку. В частности серологические доказательства циркуляции возбудителя болезни получены в Канаде, Мексике, Бразилии, Иране и ряде других, ранее считавшихся благополучными в отношении катаральной лихорадки овец, государствах.
Возбудитель и эпизоотологические данные
Причиной болезни овец является мелкий РНК-содержащий микроорганизм, относящийся к роду орбивирусов семейства реовирусов. Характерной для них является гексогональная форма и наличие рыхлой, нестойкой наружной оболочки. Накопление болезнетворного агента происходит в крови, внутренних органах зараженного животного. Отмечена передача вируса трансплацентарным путем.
Лабораторно вирус реплицируется в куриных зародышах, некоторых культурах клеток. Возможно искусственное заражение мышей и хомяков. К естественному заражению восприимчивы овцы, козы, меньше – КРС. Из диких животных болезнь отмечается у:
- лосей;
- оленей;
- диких баранов;
- антилоп.
Основным путем передачи вируса считается трансмиссивный. Переносчиками вируса являются мелкие кровососущие семейства мокрецов, относящихся к компонентам гнуса. Именно этот факт определяет природно-очаговый характер заболевания, а также наличие необходимых условий для возникновения вспышки. К ним относят высокую температуру окружающей среды и повышенную влажность. Именно при наличии данных условий происходит массовый лет насекомых и заражение восприимчивых животных.
В холодное время года при отсутствии естественных переносчиков заболевание не возникает.
Вместе с тем в 1965 году была доказана возможность заражения овец большими дозами вируса алиментарным путем. Однако такие случаи если и возникают естественным путем, то носят единичный характер, не принимают форму эпизоотии.
К вирусу катаральной лихорадки восприимчивы овцы всех возрастов и пород вне зависимости от пола. Доказанным фактом является повышенная заражаемость мериносных пород и большая восприимчивость молодняка. У взрослых животных болезнь зачастую принимает атипичные формы, не вызывающие подозрения в развитии именно данного недуга.
У КРС болезнь протекает легко, чаще всего скрытно. Согласно данным ветеринаров США клинически заболевание проявляется менее чем у 5% зараженных коров. Скрытное течение болезни у крупного рогатого скота приводит к возникновению очага болезни, быстрому ее распростанению среди овец, находящихся в пределах данной местности. Кроме крупных жвачных естественным резервуаром возбудителя являются дикие животные. Отсутствие клиники и длительное (порядка 3 лет) существование возбудителя в их крови помогает микроорганизму пережить межэпизоотический интервал.
![]()
Симптоматика
Период инкубации при естественном заражении длится порядка недели. При искусственном заражении составляет 2-18 дней. После окончания периода инкубации проявляются клинические признаки недуга. В зависимости от количества вирусов, попавших в кровь овцы, состояния ее иммунитета, заболевание способно развиться в одной из возможных форм:
- острой;
- подострой;
- хронической;
- абортивной.
Острая форма является наиболее показательной в плане проявления клинических признаков. Прежде всего, отмечается резкое повышение температуры до значений 41-42°С (при норме 38,5-40°С у взрослых животных). В течение 1-2 суток развивается катаральное воспаление слизистых ротовой и носовой полости, характеризующееся гиперемией слизистых, слюнотечением, истечениями из носа, затрудненным дыханием, сопровождающимся сопением и фырканьем.
Вслед за этим развиваются отеки губ, языка, области ушей. В ротовой полости на губах возникают кровоизлияния и изъязвления. Присоединение секундарной микрофлоры приводит к развитию гнойного воспаления, заметному неприятному запаху из ротовой полости животного. Губы отвисают, отекший язык багрово-синюшного цвета высовывается изо рта.
Отмечаются расстройства пищеварительного тракта, резкое исхудание, иногда выпадение шерсти.
Смерть наступает на фоне общей слабости и истощения.
Подострая и хроническая формы развиваются сходным образом, при меньшей выраженности симптомов, более медленном их развитии. Абортивная форма характеризуется бессимптомным течением, удовлетворительным общим состоянием и зачастую заканчивается самоизлечением.
Выздоровевшие некоторое время остаются вирусоносителями, в дальнейшем возбудитель элиминируется из крови, развивается стойкий иммунитет к тому типу возбудителя, которым животное было заражено.
Лечение и профилактика
Специфическое лечение при блютанге не разработано. Больных овец отправляют на убой. В случае высокой продуктивной либо племенной ценности и целесообразности сохранения животных с клиническими признаками располагают в отдельном помещении, улучшают условия содержания и кормления. Применяют симптоматическую терапию, направленную на улучшение общего состояния. Выпас больных животных запрещают, поскольку ультрафиолетовое облучение провоцирует усугубление патологического процесса. Определенной терапевтической активностью при блютанге обладают препараты, имеющие в своем составе соединения мышьяка.
Основой борьбы с недугом является строгое соблюдение карантинных мер при ввозе животных. Вновь прибывших карантинируют в течение 30 суток. Запрещается ввоз поголовья и отдельных особей из неблагополучных регионов.
При возникновении вспышки запрещается выпас в вечернее время (в период массового лета гнуса).
Проводятся мероприятия по осушению заболоченных местностей в непосредственной близости от выпасов, а также борьба с насекомыми с помощью инсектицидов и защите мелкого рогатого скота с применением репеллентов.
Восприимчивое поголовье подвергают активной иммунизации с применением живых и инактивированных вакцин против блютанга. Вакцинацию производят один раз в год перед выгоном на пастбище. Ягнята до трехмесячного возраста, полученные от переболевших и иммунизированных матерей, имеют колостральный иммунитет.
Читайте также: