Диагностика паразитарных заболеваний у животных

Обновлено: 27.03.2024

Миф №1. Беременным нельзя держать кошек и собак, так как можно заразиться токсоплазмозом

На самом деле: НЕ СОВСЕМ ТАК

Обычно токсоплазмоз протекает у человека без осложнений. Однако для людей с ослабленным иммунитетом и беременных болезнь может стать угрозой. Инфекция проникает через плаценту и может спровоцировать у плода гидроцефалию, тяжелые поражения нервной системы, конечностей, внутриутробную смерть или вызвать самопроизвольный аборт.

Заразиться токсоплазмозом при контакте с загрязненными кошачьими испражнениями действительно можно. Но для чтобы стать опасной для человека, токсоплазма должна из ооцисты превратиться в личинку — период занимает 4-5 дней. А это значит, что ежедневная уборка кошачьего лотка, ветеринарный контроль животного и регулярная антигельминтная обработка уберегут от паразита. А вот бездомных животных гладить все-таки не рекомендуется.

Миф №2. Симптомы токсоплазмоза схожи с симптомами гриппа

На самом деле: ДА

Инфицирование токсоплазмозом может протекать бессимптомно, но довольно часто на ранних стадиях вызывает симптомы, схожие с гриппом (озноб, резкое повышение температуры). Острый период может закончиться за несколько дней, а может растянуться до нескольких месяцев. Поэтому, если вам кажется, что вы заболели и никак не вылечитесь, пройдите исследование на токсоплазмоз, чтобы исключить риск инфицирования.

Хроническая стадия токсоплазмоза протекает скрыто и наиболее опасна для людей с ослабленным иммунитетом (беременные, ВИЧ, гепатит, хроническое воспаление), так как может вызвать токсоплазменный энцефалит, приводящий к летальному исходу.

Миф №3. Обычные мухи переносят возбудителей амебиаза

На самом деле: ДА

Заразиться амебиазом можно через грязные руки, а также при непосредственном контакте с носителем цист (особая форма возбудителя). В распространении цист также участвуют обычные мухи, они являются механическими переносчиками.

Место обитания в теле человека — просвет толстого кишечника и его стенки. Однако с током крови амебы могут разноситься по всему организму и локализоваться в легких, головном мозге и даже в коже.

  • мойте руки и дезинфицируйте их;
  • ешьте очищенные овощи и фрукты, без кожицы;
  • пейте только (!) бутилированную воду.

Миф №4. Лямблиоз поражает желчный пузырь

На самом деле: ДА

Как и цисты амеб, цисты лямблий могут длительно сохранять свою активность на плохо промытых овощах, фруктах, зелени, в воде (до 70 суток) и даже в пыли. Переносчиком лямблиоза также могут быть мухи: поэтому летом, на даче или на отдыхе, не оставляйте еду неприкрытой.

Основная мишень лямблий — желчный пузырь, двенадцатиперстная кишка и тонкий кишечник. Блокируя слизистую оболочку, простейшие буквально тормозят нормальный процесс пищеварения. Пища не переваривается, начинаются процессы гниения и размножения бактерий и дрожжевых грибков.

В результате чего нарастают симптомы интоксикации, нарушается всасывание питательных веществ — белков, жиров, углеводов, что может привести к истощению.

Миф №5. При паразитарной инфекции человек стремительно худеет

На самом деле: НЕ СОВСЕМ ТАК

  • тошноты;
  • поноса;
  • боли в животе;
  • общего состояния слабости;
  • частого отсутствия аппетита.

При заражении ленточными червями часто возникают аллергические реакции (высыпания, зуд кожи), повышение температуры тела, проблемы неврологического характера, такие как судороги.

При нематодной инфекции (аскариды, власоглав, трихостронгилида, кривоголовка двенадцатиперстная, томинкс, некатор) появляются кожная сыпь, зуд, усталость, состояние, характерное для анемии. При трихинеллезе нередко заметен отек лица, ощущаются мышечные боли, повышенная светочувствительность, может возникнуть конъюнктивит.

Миф №6. При употреблении суши, сашими и роллов со свежей рыбой можно заразиться паразитическими червями

На самом деле: ДА

Миф №7. Для диагностики паразитов можно сдать только кровь

На самом деле: НЕТ

Для диагностики паразитарной инфекции используют кровь (для выявления антител к возбудителю) и кал — для микроскопического исследования на яйца глист и простейшие. Его проводят обычным способом и методом обогащения (система ПАРАСЕП). Анализ кала методом обогащения (система ПАРАСЕП) более чувствителен, что позволяет выявить наиболее сложных в плане диагностики паразитов — например, описторхов (очень мелкие яйца) и простейших (амебы).

Кровь сдается натощак или не ранее чем через 8 часов после приема пищи. Перед взятием крови за полчаса не рекомендуется курить, не употреблять кофе. Можно пить негазированную воду.

За 72 часа до сдачи кала на исследование исключить прием слабительных, ректальных свечей, масел, медикаментов, оказывающих влияние на перистальтику кишечника (белладонна, пилокарпин) и окраску кала (железо, висмут, сернокислый барий).

Приготовление тонкого мазка крови. Кровь у животных обычно берут из периферических сосудов ушной раковины или кончика хвоста, у птиц – из гребня или сережек. Мазок для исследования простейших готовят из первых капель крови, содержащих большее число паразитов. Техника приготовления мазка обычная. Полученный тонкий мазок высушивают на воздухе. От каждого животного берут не менее 3 – 4 мазков и на каждом пишут простым карандашом или кончиком иглы от шприца вид животного, его номер и дату взятия.

Во время приготовления мазков их необходимо беречь от мух. В холодное время года мазки следует предохранять от действия паров влаги, которые осаждаются на поверхности мазка и гемолизуют эритроциты. Поэтому стекла предварительно рекомендуют подогревать на крышке стерилизатора или другой посуды с горячей водой.; готовый мазок также высушивают на теплой поверхности, после чего его завертывают в бумагу и помещают в тепло.Гемолиз может произойти и в тех случаях, если приготовленные мазки зажимают в руке.

Исследование материала из лимфатических узлов. Данный метод применяют у крупного рогатого скота при подозрении на тейлериоз. Для пункции обычно используют поверхностный лимфатический узел. Его фиксируют, операционное поле выстригают, обрабатывают, дезинфицируют. После этого в глубь узла вводят стерильную иглу, надетую на шприц. Поршень шприца оттягивают и всасывают в иглу лимфу. Из добытого пунктата делают обычные тонкие мазки, которые высушивают, фиксируют, красят и исследуют под иммерсионной системой микроскопа.

Фиксация мазков. Высушенные мазки фиксируют 5 мин в чистом метиловом или 15 мин в этиловом спирте (90–95%), а также в смеси спирта и эфира в равных частях в течение 10–15 мин. Фиксаж наливают в стеклянную кювету ил в широкогорлую банку, мазки погружают в спирт таким образом, чтобы каждые два стекла соприкасались свободной от мазка поверхностью.

Окраска тонких мазков. При микроскопической диагностике возбудителей протозойных болезней обычно пользуются окраской по методу Романовского. Достоинство его заключается в том, что цитоплазма, ядро, жгутики воспринимают окраску дифференцированно, то есть окрашиваются различно.

Метод Романовского. В настоящее время в заводском масштабе изготавливается краска "азур–эозин по Романовскому" (краска Гимза). Для рабочего раствора берут 1–3 капли краски на 1 мл воды, причем приготавливают его непосредственно перед употреблением. Для разведения основного раствора краски используют дистилированную воду, а также прокипяченную и профильтрованную снеговую, дождевую и проточную, только нейтральной или слабощелочной реакции, которую проверяют гематоксилином. В пробирку наливают 4–5 мл воды и кладут в нее несколько кристалликов гематоксилина. Если фиолетовое окрашивание проявится раньше 1 мин - вода щелочная, а если через 6 мин – вода кислая. Щелочную воду усредняют 1%-ным раствором уксусной кислоты, а кислую – 1%-ным раствором углекислой соды.

Краску разводят всегда в одной и той же чистой посуде (мензурке, градуированном цилиндре). Основной раствор вносят в определенный объем воды только каплями, при беспрерывном легком вращении жидкости в сосуде: грубое встряхивание раствора и приливание сразу большой порции краски ведет к выпадению ее в осадок. Поэтому и при окрашивании раствор краски наносят не на препарат, а подслаивают под него, для чего препараты укладывают в плоскую лабораторную посуду на специальные стеклянные палочки мазком вниз. Длительность окраски варьирует от 20 мин до 1 ч и зависит от качества краски, температуры ее раствора и свежести мазков. После окрашивания мазки хорошо промывают водой (лучше дистилированной), высушивают и просматривают под микроскопом. При отсутствии краски Романовского можно пользоваться другими.

Приготовление и окраска толстой капли. Каплю крови из сосудов ушной раковины или из яремной вены животного помещают на обезжиренное предметное стекло и другим стеклом размазывают ее толстым слоем, затем препарат высушивают под стеклянным колпаком или в термостате.

На нефиксированный мазок наносят краску (4 части 1%-ного раствора метиленовой сини, 1 часть 1%-ного раствора фуксина на 50%-ном спирте, 4 части 1%-ной уксусной кислоты, 40 частей дистилированной воды) и держат 15 мин. Затем краску осторожно смывают водой, а мазок сушат. При данном методе окраски эритроциты растворяются, а паразиты остаются на стекле.

Приготовление раздавленной капли. Этим методом пользуются для просмотра простейших в живом состоянии (трипаносом, трихомонад, балантидий и др.). При трипаносомозе каплю крови исследуемого животного наносят на чистое прелметное стекло и накрывают покровным. Кровь должна распределяться тонким равномерным слоем, но не выходить за край покровного стекла. Подобным же образом готовят раздавленную каплю из истечения половых путей коров, околоплодной жидкости, содержимого желудка и других полостей плода, у быков – смыва секрета пузырьковидных желез, препуция и спермы, а также капли из культуры, в которой выращивали трихомонад, при диагностике трихомоноза крупного рогатого скота. Для обнаружения балантидий материалом для исследования служат свежие фекалии.

При продолжительном исследовании края покровного стекла целесообразно обводить вазелином, чтобы предотвратить испарение жидкости и высыхание исследуемого объекта. Раздавленную каплю просматривают без окраски и под сухой системой микроскопа, в затемненном поле.

Своевременная и точная диагностика является той основой, на которой зиждется эффективная система терапии и профилактики паразитарных болезней животных. Основными методами диагностики в ветеринарной паразитологии являются лабораторные методы исследований, многие из которых предполагают обнаружение и дифференциацию возбудителя болезни, изучение его свойств и чувствительности к тем или иным препаратам.

Существуют прижизненные и посмертные методы диагностики паразитозов.

При различных паразитарных болезнях применяют разные методы диагностики, основанные на современных научных достижениях и накопленном опыте практических специалистов. Определение возбудителя может проводиться или прямым путем (при осмотре животных, путем микроскопирования мазков крови, просмотра под микроскопом проб фекалий, соскобов с кожи и т. д.), или косвенным путем (при аллергической диагностике с известным антигеном и др.). При всех известных способах диагностики паразитарных болезней ставится совершенно определенная цель — установить возбудителя и определить степень пораженности им животного.

В настоящее время при постановке диагноза на паразитозы важным является выяснить не только экстенс-, но и интенсинвазированность животных паразитами. Не менее важным является также определение состава паразитоценоза, в том числе гельминтов, клещей, насекомых, простейших и других организмов.

Известно, что человек, животные и окружающая их среда экологически взаимосвязаны. Поэтому происходит циркуляция возбудителей паразитарных болезней в природе и обществе. Вот почему важным является изучение зараженности паразитами человека и животных (особенно зоонозами), распространения возбудителей этих болезней в окружающей среде.

В условиях индустриализации и урбанизации нашей планеты важно изучить закономерности распространения паразитозов, выяснить пути сохранения организмов в постоянно меняющихся условиях среды.

Все это определяет методологические подходы к диагностике паразитарных болезней, в связи с чем, в последнее время все больше внимания уделяется применению современных методов и средств диагностики: электронной микроскопии, внедрению иммуноферментных методов исследований, использованию радиодиагностических наборов и др.

ДИАГНОСТИКА ПРОТОЗООЗОВ ЖИВОТНЫХ

Перед обследованием животных с целью обнаружения в их организме патогенных простейших необходимо провести работы по подготовке материалов.

Для этой цели готовят предметные и покровные стекла. Лучше использовать новые, не бывшие в употреблении, которые тщательно моют в теплой воде с мылом. После этого их промывают чистой водой, насухо вытирают и помещают в банку с притертой пробкой, в которую перед этим наливают абсолютный спирт или смесь равных объемов спирта и эфира (смесь Никифорова). Перед употреблением стекла насухо вытирают чистой салфеткой.

В полевых условиях для обезжиривания предметных стекол применяют следующий способ. Сначала их протирают чистой салфеткой и после этого хорошо покрывают хозяйственным мылом. Затем стекла повторно протирают сухой чистой салфеткой или полотенцем до полного удаления мыла.

Взятие крови у животных. Пробы крови у животных берут в тех случаях, когда необходимо заразить ею подопытных животных, для серологического исследования или для приготовления препаратов.

Для биопробы или серологических исследований кровь у крупного рогатого скота, лошадей и мелких жвачных берут из яремной вены, у птиц — из подкрыльцовой вены. Для обнаружения простейших кровь у млекопитающих берут из сосудов кончика уха, у птиц — из гребня или подкрыльцовой вены.

Приготовление мазков крови и пунктата органов. На чистое предметное стекло наносят первую каплю крови, взятой у животного (в ней находится больше паразитов) и специально отшлифованным стеклом делают мазок. Во избежание загрязнения пылевыми частицами воздуха предметное стекло поворачивают сразу же мазком книзу. Через 10—15 с инъекционной иглой или карандашом ставят на предметном стекле номер или кличку животного и дату приготовления препарата. После этого мазок просушивают 10—12 мин.

Если препараты готовятся в зимнее время, предметные стекла перед нанесением на них капли крови следует подогревать до температуры 20—25 °С.

Для приготовления препарата толстой капли кровь наносят на предметное стекло, размазывают круговым движением толстым круглым слоем и помещают в термостат на 5—10 мин для высыхания. После этого на препарат наносят несколько капель дистиллированной воды (для гемолиза эритроцитов), осторожно сливают ее после того как препарат станет прозрачным. Препарат подсушивают и красят. Для фиксации мазков крови применяют различные химические вещества, среди которых — метиловый спирт, этиловый спирт, денатурированный спирт, реже применяют смесь Никифорова и др.

Для этой же цели можно применять и жидкость Завесина и Белокура (1950). Для ее получения необходимо на физиологическом растворе (рН 6,8—7,0) приготовить 4%-ный раствор чистой карболовой кислоты. Готовый раствор фильтруют и хранят в темном месте в течение 10—15 дней в банке из темного стекла с притертой пробкой. Длительность фиксации мазков крови — 5с. Мазок вынимают из фиксирующей жидкости пинцетом, ставят вертикально на полоску фильтровальной бумаги на 8—10 мин для сушки и потом окрашивают.

Окраска простейших. Осуществляется различными методами, однако наиболее приемлемыми являются следующие:

Окраска мазков крови и пунктатов из органов по Романовскому-Гимза. Поступающие в ветеринарные лаборатории основные растворы краски Романовского-Гимза не всегда бывают одинаковыми по своим красящим свойствам. Поэтому необходимо предварительно подбирать наилучшие сочетания количества вещества и сроков окрашивания при определенном объеме и рН воды.

Обычно для окрашивания препаратов основной раствор краски разбавляют из расчета 1 капля на 1 мл воды. Но иногда на 1 мл воды приходится расходовать 2—3 капли краски, но не более, так как в более концентрированных растворах она выпадает в осадок. Рабочий раствор готовится перед употреблением. Для получения хорошего качества рабочего раствора краски маточный раствор необходимо разводить дистиллированной водой (рН 7,0-7,2). В крайнем случае можно использовать прокипяченную профильтрованную проточную воду указанной реакции. Для разведения краски необходимо пользоваться одной и той же чистой посудой из стекла нейтральной реакции. При приготовлении рабочего раствора в сосуд с водой необходимо вносить по каплям требуемое количество краски и постоянно слегка помешивать, так как большое количество маточного раствора и грубое встряхивание могут привести к выпадению осадка. Маточный раствор краски хранят в темном сухом месте с постоянной температурой (20—22 °С). Если красящая способность раствора снизилась, ее необходимо подогреть в водяной бане до 60 °С в течение 15 мин.

Для окрашивания препаратов их помещают на дно чашки Петри мазком вниз на тонкие плоские стекла, чтобы расстояние между дном чашки и предметным стеклом составляло 0,3—0,5 см. После этого под предметные стекла осторожно подслаивают свежеприготовленную краску. Продолжительность окраски может быть от 15—20 мин до часа, но в среднем 30—40 мин. Свежие препараты окрашиваются быстрее и лучше. Нефиксированные мазки крови можно сохранять не более 1—2 недель, так как через месяц они теряют способность окрашиваться. Фиксированные препараты (мазки крови, пунктаты органов и т. д.) можно сохранять до окраски 1—2 мес. Перед применением краску нужно подогреть в термостате до 37 °С. После окраски мазки крови промывают дистиллированной водой и ставят в вертикальном положении на полоски фильтровальной бумаги. Хорошо промытое предметное стекло с мазком крови не должно оставлять на фильтровальной бумаге следов краски.

При хорошей окраске препараты имеют розово-фиолетовый цвет, эритроциты в тонких мазках крови окрашиваются в красный или розовый цвет, протоплазма паразитов и лейкоциты — в синий, ядра простейших и зернистость эозинофилов — в красный, а ядра лейкоцитов — в фиолетовый цвет. В перекрашенных мазках крови эритроциты имеют синий цвет и в них трудно различать паразитов.

Если мазки крови перекрашены, их погружают на 1—2 с в 80°-ный этиловый спирт, слегка подкисленный уксусной кислотой, или в подкисленную дистиллированную воду (на 100 мл спирта или воды добавляют 2 капли ледяной уксусной кислоты). После того как предметные стекла с мазками вынут из подкисленной воды или спирта, их немедленно промывают дистиллированной водой, высушивают и микроскопируют или оставляют на хранение.

Ускоренная окраска мазков крови по Романовскому-Гимза. Нефиксированный мазок помещают в чашку Петри и подслаивают смесь из неразведенной краски Романовского-Гимза и ацетона в равных количествах. Через минуту в чашку Петри в расчете на каждый миллилитр смеси краски и ацетона добавляют 10 мл дистиллированной воды и смешивают их легким покачиванием чашки. Через 10 мин мазок промывают водой, сушат и микроскопируют.

Окраска мазков крови по Филипсону. Одну часть рабочего раствора краски Романовского-Гимза смешивают с тремя частями этилового спирта и 1 мл приготовленной смеси наносят на нефиксированный мазок крови. Через 1—1,5 мин к краске добавляют 1 мл дистиллированной воды, перемешивают и оставляют на 30 мин для окрашивания. После этого краску смывают водой, мазок просушивают и микроскопируют.

Окраска мазков крови по Мансону. Берут 5 г буры и 2 г метиленового синего и растворяют их в дистиллированной воде (80 °С), выдерживают 2 ч в кипящей водяной бане, охлаждают и фильтруют. После этого для созревания помещают в термостат при температуре 37 °С. Для приготовления рабочего раствора берут каплю краски на 3—4 мл воды. Окраску мазков крови проводят в течение 1 мин. Затем препарат высушивают и микроскопируют. Окрашенный препарат имеет матово-зеленый цвет, эритроциты окрашиваются в светло- или сине-зеленый цвет, ядра лейкоцитов — в темно-синий, протоплазма — в светло-зеленый цвет. Паразиты имеют темно-синее ядро и светло-синюю протоплазму.

Окраска мазков крови по Ш. Д. Мошковскому. Готовят основной раствор метиленовой сини: на 100 мл дистиллированной воды берут 1 г метиленовой сини и 2,5 г буры. Раствор кипятят, охлаждают и фильтруют. Фиксированный мазок крови помещают на 10—20 с в разбавленный дистиллированной водой (1 : 10) основной раствор метиленовой сини. После этого мазок промывают водой, затем погружают на 5 с в 8—10%-ный раствор танина, повторно промывают, подсушивают и микроскопируют.

Окраска мазков крови по Нохту. Готовят растворы: азур II разводят дистиллированной водой в соотношении 1 :1000, аналогично готовят раствор эозина ВА. Краски хранят в склянках из оранжевого стекла в темном сухом месте. Перед окраской готовят рабочие растворы. Для этого в 4 мл дистиллированной воды (рН 7,0) разводят 2 мл 0,1 %-ного раствора эозина и к 4 мл воды добавляют 2 мл 0,1 %-ного раствора азура. Краски смешивают. Мазки крови помещают в чашку Петри, подслаивают краску и выдерживают 30—40 мин. После этого мазки подсушивают и микроскопируют.

Окраска мазков крови по Шуренковой и Межанской. Вначале готовят раствор А. Для этого берут 1 г метиленового синего и растворяют в 75 мл кипяченой воды; 1,5 г марганцово-кислого калия также растворяют в 75 мл кипяченой воды. Оба раствора сливают в колбу (вследствие этого образуется осадок), помещают ее в водяную баню и выдерживают при 100°С 40 мин, считая с начала кипения воды. После этого дают раствору остынуть и фильтруют.

Затем готовят раствор Б. Для этого берут 1 часть раствора А и добавляют 2 части подкисленной кипяченой воды (ее готовят путем добавления на 200 мл дистиллированной воды 15 капель разведенной соляной кислоты). При этом получают раствор № 1. После растворения в 200 мл кипяченой воды 0,2 г эозина водорастворимого получают раствор № 2.

При скоростном способе окрашивания фиксированный мазок погружают на 15—20 с в раствор № 2, прополаскивают водой и на 45 с погружают в раствор № 1, повторно промывают водой, подсушивают мазок на фильтровальной бумаге и микроскопируют.

Для массовой окраски мазков применяют длительный способ. Фиксированный мазок помещают на 5—10 мин в краску Б, разведенную 1 : 10 дистиллированной водой. После этого мазки промывают водой и заливают на 15— 20 мин краской А, также разведенной 1 : 10 водой. Мазки повторно промывают водой, подсушивают и микроскопируют. Обычно хорошо окрашенный мазок имеет сиреневый цвет. Ядра лейкоцитов окрашиваются в фиолетовый цвет, протоплазма простейших — в голубой, а ядро — в вишнево-красный цвет. Если мазки перекрашены эозином и имеют ярко-красную окраску, их на несколько секунд погружают в раствор № 1, слишком синие мазки погружают на несколько секунд в раствор № 2.

Окраска трихомонад: а) метод Романовского. Мазки фиксируют метиловым спиртом в течение 10 мин. После этого их окрашивают 45 мин краской Романовского-Гимза, разведенной 1: 15 нейтральной или слабощелочной дистиллированной водой; б) метод Шуренковой и Межанской. Мазки фиксируют в течение 10 мин метиловым спиртом. После этого их окрашивают 2 мин в растворе № 2, а затем в течение 1 мин — в растворе А; в) метод Милорадовича. Вначале готовят раствор № 1. Для этого 1 г основного фуксина смешивают с 10 мл 95°-ного этилового спирта и ставят в термостат при температуре 37 °С на 48 ч. После растворения фуксина к нему добавляют 100 мл 5%-ного раствора карболовой кислоты, смешивают и фильтруют. Полученный раствор разводят 1 : 50 дистиллированной водой. Перед употреблением на каждый миллилитр рабочего раствора добавляют по капле насыщенного раствора танина.

Раствор № 2 получают путем смешивания равных объемов 1%-ного раствора ауранция и 0,5%-ного раствора эозина.

Оба раствора готовят на 2%-ной карболовой кислоте. После фиксации и ополаскивания мазка на него наносят раствор № 1. Через минуту его сливают и сразу же наносят раствор № 2. Через 20 с препарат прополаскивают водой, просушивают и микроскопируют.

Окраска толстых капель крови: а) метод Шуренковой и Межанской. При скоростном способе окраски препарат в течение 15—20 с несколько раз погружают в раствор А. После того как капля крови на предметном стекле окрасится из зеленого в прозрачно-голубой цвет, препарат промывают водой, погружают в раствор № 2 и сразу же ополаскивают, высушивают и микроскопируют.

Если проводят массовую окраску, тогда применяют длительный способ: на 10-15 мин заливают разведенной (1:10) водой краской А. Затем ее сливают, препарат промывают водой и покрывают на 1-2 мин краской № 2, также разведенной (1:10) водой. После этого препарат промывают водой, просушивают и микроскопируют;

б) метод Иоффе. Готовят краску: берут 4 мл 1%-ного раствора метиленовой сини, 1 мл 1%-ного раствора фуксина на 50%-ном этиловом спирте, сюда же добавляют 4 мл 1 %-ной уксусной кислоты и 40 мл дистиллированной воды.

На нефиксированный препарат наносят краску. Через 15 мин ее осторожно смывают водой, препарат подсушивают и микроскопируют. При этом методе окраски эритроциты растворяются.

Методы исследования патогенных простейших. Методы исследования простейших, изучение их морфологии и биологии, а также диагностика вызываемых ими болезней животных предполагают использование микроскопических, серологических, аллергических, культуральных и других исследований в ветеринарной протозоологии. В связи с тем, что все указанные методы исследований имеют свои достоинства и недостатки, только проведение комплексных исследований дает наиболее высокую эффективность при постановке диагноза на данное заболевание или следует провести дифференциальную диагностику.

Диагностика эймериозов

Для эффективной диагностики эймериозов необходимо правильно отобрать материал для исследований. Так как для эймерий характерным является видовая специфичность возбудителя и они имеют свои определенные места обитания в организме, важным является исследование определенных органов при постановке диагноза на эймериоз.

Для обнаружения ооцист эймерий исследуют фекалии животных, для выявления неполовозрелых форм шизогонии и гаметогонии исследуют кусочки пораженных органов.

Прижизненная диагностика эймериозов. Прижизненная диагностика предполагает обнаружение в фекалиях больных животных ооцист эймерий. Их обнаруживают путем исследования фекалий животных методом нативного мазка или флотационными методами.

Метод нативного мазка состоит в том, что на чистое предметное стекло помещают около 0,5 г фекалий и тщательно размешивают стеклянной палочкой с небольшим количеством смеси воды и глицерина в равных частях. После этого крупные частицы фекалий снимают пинцетом или препаровальной иглой, а оставшуюся массу покрывают стеклом и микроскопируют.

Флотационные методы являются более эффективными, чем метод нативного мазка. Для диагностики эймериозов применяются методы Г. А. Котельникова и В. М. Хренова (1974) с использованием растворов аммиачной или натриевой селитры, методы Фюллеборна, Дарлинга и др.

Культивирование эймерий проводится с целью изучения спорогонии у них. Для этого берут пробу фекалий, помещают в чашки Петри и смешивают их с мелкоистолоченным древесным углем и с 5%-ным раствором двухромово-кислого калия с целью предохранения фекалий от плесени. Чашки Петри с фекалиями помещают в теплое место и периодически перемешивают для лучшей аэрации. При необходимости пробы фекалий микроскопируют для определения сроков развития эймерий.

Посмертная диагностика эймериозов. Для исследования берут содержимое кишечника, соскоб слизистой оболочки кишки в местах с наибольшим поражением, кусочки пораженных паренхиматозных органов. Из отобранного материала готовят препараты (раздавленные капли, нативные мазки) для исследования живых эймерий, а также мазки или кляч-препараты для окраски паразитов.

Для обнаружения живых эймерий на различных стадиях берут кусочек содержимого из эймериозного узелка, помещают на предметное стекло в каплю физиологического раствора в смеси с белком куриного яйца. Содержимое узелка препаровальными иглами расчленяют на мелкие части, покрывают покровным стеклом и микроскопируют. Мерозоиты и шизонты хорошо заметны в затемненном поле зрения. При этом учитывают, что внедрившиеся в эпителиальную клетку спорозоиты имеют округлую форму с ядром в центре, а более зрелые макрогаметы – зернистость, они овальной формы и покрыты однослойной оболочкой , на одном из полюсов которой находится микропиле (табл.3-7).

Таблица 3. Эймерии крупного рогатого скота (по И. И. Вершинину, 1982)

Читайте также: