Диагностика туберкулеза методом t-spot tb в петербурге

Обновлено: 19.04.2024

Метод определения T-SPOT.TB (Oxford Immunotec) с применением специально подобранных антигенов ESAT-6 и CFP-10, входящих в состав микобактерий комплекса M. tuberculosis. Используется технология ELISPOT (Enzyme-Linked ImmunoSpot), позволяющая выявлять в образце крови присутствие реактивных (специфически сенсибилизированных) Т-эффекторных клеток, продуцирующих интерферон в ответ на воздействие указанных антигенов.

Исследование крови, допустимое в качестве альтернативы кожному тесту (проба Манту) для выявления туберкулезной инфекции.

Туберкулез – инфекционное хроническое заболевание, вызываемое микобактериями туберкулеза (Mycobacterium tuberculosis complex). Варианты развития ситуации после проникновения возбудителя туберкулеза в организм человека следующие:

полная элиминация (удаление) микобактерий туберкулеза из организма;
развитие первичного туберкулеза (при быстром росте и размножении бактерий);
латентная инфекция (микобактерии персистируют в организме в неактивном состоянии, обуславливая стойкий иммунный ответ на антигены возбудителя при отсутствии клинических проявлений активной формы заболевания). Это состояние у многих инфицированных может сохраняться на протяжении всей жизни. Такие лица не распространяют инфекцию, но у части пациентов латентная инфекция в течение жизни может перейти в клинически манифестированное заболевание. Риск прогрессии латентной инфекции в активное заболевание увеличивается при ослаблении иммунной системы.

Активная туберкулезная инфекция диагностируется по комплексу клинических симптомов, медицинской истории пациента, данным рентгенологических исследований и результатам прямых методов лабораторного выявления Mycobacterium tuberculosis в мокроте или мазках (микробиологические культуральные методы, выявление ДНК возбудителя с применением ПЦР).

Диагностика латентной инфекции затруднена отсутствием клинических и рентгенологических признаков заболевания, а также отсутствием возбудителя в пробах доступного биоматериала. Однако ее выявление важно для определения лиц, нуждающихся в контроле и превентивной терапии.

В настоящее время существуют два подхода к выявлению вероятной латентной инфекции:

in vivo: внутрикожные тесты с очищенным или рекомбинантным туберкулезным аллергеном (проба Манту, Диаскинтест);
in vitro: оценка ответа иммунных клеток обследуемого на антигены микобактерий туберкулеза по высвобождению гамма-интерферона (IGRA-тесты).

Оба подхода основаны на оценке характера иммунной реакции человека на антигены возбудителя, т. е. не являются методами прямого выявления инфекционного агента.

В связи с достаточно высокой распространенностью туберкулеза в нашей стране, Министерство здравоохранения РФ рекомендует ежегодно проводить скрининговое обследование детей в возрасте от 1-го года до 17-ти лет на наличие туберкулезной инфекции (в том числе при поступлении в детские сады и школы). Профилактическое скрининговое обследование обычно проводят с использованием внутрикожных проб. При наличии определенных противопоказаний или информированном отказе родителей от применения внутрикожных проб ребенку допускается назначение альтернативных методов обследования. Они включают исследование крови, основанное на выявлении высвобождения гамма-интерферона специфически сенсибилизированными лимфоцитами. На данный момент имеются два коммерческих диагностических теста этого направления: 1) QuantiFERON®-TB Gold; и 2) T-SPOT.TB.

Тест T-SPOT.TB допускается к использованию клиническими рекомендациями МЗ РФ и Российского общества фтизиатров по выявлению и диагностике туберкулеза у детей (2017). В соответствии с рекомендациями, при проведении скринингового обследования детей отрицательный результат T-SPOT.TB при отсутствии клинических симптомов заболевания (респираторного и интоксикационного характера, других локальных патологических проявлений) позволяет врачу-фтизиатру выдать справку об отсутствии у ребенка в настоящий момент активного туберкулеза.

К достоинствам этого метода можно отнести то, что подбор специфических антигенов исключает ложноположительные реакции, связанные с предшествующей вакцинацией БЦЖ (такие антигены отсутствуют на линиях Bacillus Calmette-Guerin, BCG) и перекрестными реакциями с большинством нетуберкулезных микобактерий окружающей среды (за исключением M. kansasii, M. szulgai и M. marinum). Напротив, лица, инфицированные микобактериями туберкулезного комплекса (M. tuberculosis, M. bovis, M. africanum, M. microti, M. canetti) обычно имеют в крови Т-клетки, распознающие эти и другие антигены таких бактерий.

T-SPOT.TB тест не позволяет различать латентную инфекцию и активное заболевание.

Следует учитывать, что чувствительность и специфичность подобных методов в целях скрининга туберкулезной инфекции не достигают 100%. Поэтому такие тесты следует применять с учетом общей оценки индивидуального риска в комплексе со стандартными методами диагностики.

Материал для исследования: цельная кровь (с литий гепарином) – 2 пробирки, 4 мл.

Приём биоматериала в медицинских офисах Москвы и области (кроме медицинского офиса Нагатинская) принимают биоматериал ежедневно до 12:30. МО Нагатинская - принимают биоматериал ежедневно круглосуточно.

предварительно уточнить допустимое время, день недели и медицинский офис, где можно сдать пробу крови для проведения данного исследования. Специальной подготовки не требуется. Применение T-SPOT.TB теста не оценивали у лиц, получавших более одного месяца противотуберкулезную терапию.

в качестве альтернативы кожным пробам (Манту, Диаскин) в целях скринингового обследования детей на наличие туберкулезной инфекции;
как часть комплексной оценки риска наличия латентной туберкулезной инфекции (в том числе у лиц, вакцинированных БЦЖ или получавших БЦЖ-терапию);
для диагностики активной туберкулезной инфекции в совокупности с оценками риска, клиническими, рентгенологическими и другими лабораторными показателями (в качестве дополнительного метода обследования).

Интерпретация результатов исследований содержит информацию для лечащего врача и не является диагнозом. Информацию из этого раздела нельзя использовать для самодиагностики и самолечения. Точный диагноз ставит врач, используя как результаты данного обследования, так и нужную информацию из других источников: анамнеза, результатов других обследований и т.д.

В ответе указывается количество спотов (специфически сенсибилизированных Т-лимфоцитов) после инкубации по антигенам А (ESAT-6) и B (CFP-10). Приводится общая оценка результата теста в качественной форме.

≤ 4 – отрицательный;
5-7 – сомнительный;
≥ 8 – положительный.

Для использования в целях установления диагноза или исключения туберкулеза, а также для оценки вероятности наличия латентной туберкулезной инфекции, при интерпретации результатов T-SPOT.TB необходимо принимать во внимание весь комплекс эпидемиологических, анамнестических и клинических данных и результаты других проведенных диагностических исследований.

Примечание. Отрицательный результат не исключает возможности экспозиции к M. tuberculosis или текущей инфекции. При получении отрицательного результата T-SPOT.TB теста лицам, имевшим недавний контакт с инфицированными и отрицательный результат T-SPOT.TB теста, а также при наличии значимых клинических признаков возможной инфекции следует повторить тестирование через шесть недель. По оценкам, приведенным производителем, чувствительность метода при исследовании лиц с подтвержденным культуральным методом туберкулезом составила 95,6%.

Положительный результат не позволяет различить латентную инфекцию и активное заболевание. Для подтверждения активной формы туберкулеза следует применить другие тесты (ПЦР или культуральное исследование мокроты, рентгенографию грудной клетки). Хотя применяемые в данном тесте антигены отсутствуют в вакцине БЦЖ и у большинства других микобактерий, ложноположительный результат может отмечаться у лиц с инфекцией M. kansasii, M. szulgai, M. gordonae или M. marinum. При подозрении на такие инфекции могут потребоваться альтернативные тесты. Применение T-SPOT.TB теста не оценивали у лиц, получавших более одного месяца противотуберкулезную терапию. По оценкам, приведенным производителем, специфичность метода в группе лиц с низким риском туберкулеза составила 97,1%.

Универсальный альтернативный вариант иммунологического исследования in vitro диагностики туберкулезного процесса путем количественного определения мононуклеарных клеток периферической крови, продуцирующих ИФН-γ в ответ на присутствие белков CFP-10 и ESAT-6 M. tuberculosis.

Синонимы русские

Иммунологический тест на туберкулез

Синонимы английские

Testing for tuberculosis infection

Метод исследования

Прямая оценка функции T-клеток энзим-связывающий иммуноспотингом (ELISPOT).

Какой биоматериал можно использовать для исследования?

Как правильно подготовиться к исследованию?

Не принимать пищу в течение 2-3 часов до исследования, можно пить чистую негазированную воду.

Общая информация об исследовании

Возбудителем туберкулёза является микобактерия туберкулеза (МБТ, палочка Коха, Mycobacterium tuberculosis) – высокоустойчивый микроорганизм. В настоящее время описано около 150 видов микобактерий, но клинически значимыми признаны М. tuberculosis (более 90 % всех случаев туберкулезной инфекции), М. bovis (5 %) и М. africanum (около 3 % – главным образом среди населения стран тропической Африки).

Источником инфекции являются больные люди и животные. Наиболее распространен воздушно-капельный путь заражения, при котором возбудитель проникает в организм через верхние дыхательные пути, иногда через слизистые оболочки пищеварительного тракта или через поврежденную кожу.

Попадая в окружающую среду, возбудитель способен длительно сохраняться: в высохшей мокроте он выживают до 10 месяцев, на предметах, окружающих больного (белье, книги), – более 3 месяцев, в воде – более года, в почве – до 6 месяцев.

В настоящее время описаны следующие варианты развития ситуации после проникновения МБТ в организм человека: [1]

полная элиминация (удаление) возбудителя из организма;
развитие первичного туберкулеза (при быстром росте и размножении МБТ);
инфицирование, или "латентная туберкулезная инфекция" (ЛТИ), [2] – состояние стойкого иммунного ответа на антигены МБТ при отсутствии клинических проявлений активной формы туберкулеза.

Присутствующий в организме возбудитель способен не только длительно бессимптомно персистировать в организме, но при определенных обстоятельствах (интенсивное размножение МБТ на фоне малоэффективного иммунитета и т.д.) реактивироваться и вызвать развитие заболевания. В настоящее время установлено, что с момента инфицирования МБТ в течение первого года заболевание развивается у 5 % инфицированных людей, в течение всей оставшейся жизни туберкулез развивается еще у 5 %, то есть пожизненный риск заболевания туберкулезом среди инфицированных составляет 10 %.

Вместе с тем наличие различных факторов может способствовать повышению риска развития локального туберкулеза: так, при ВИЧ-инфицировании ежегодный риск заболевания туберкулезом на фоне ЛТИ составляет 10 %, а пожизненный риск – 50 %.

Диагностика туберкулеза является комплексной и включает, согласно регламентирующим документам, [3] аллергические внутрикожные пробы (реакция Манту и "Диаскинтест"), инструментальное обследование (ФЛГ, рентген) и лабораторные – направленные как на выявление и идентификацию возбудителя с определением спектра его чувствительности к препаратам этиотропной терапии, так и на изучение выраженности иммунологической реакции на патоген.

Одним из современных и высокоинформативных методов определения специфической иммунной реакции на МБТ, особенно при отсутствии или минимальных клинико-инструментальных признаках инфекции и сомнительных результатах общепринятых методов лабораторной диагностики туберкулеза, является тест T-SPOT.

Исследование иммунного Т-клеточно-опосредованного ответа: количественное определение в крови эффекторных Т-клеток (CD4 и CD8), вырабатывающих ИФН-ɣ (гамма-интерферон), который продуцируется в ответ на стимуляцию специально подобранными антигенами ESAT-6 и CFP10. Эти белки входят в состав клинически значимых МБТ (М. tuberculosis, М. bovis, М. africanum) и отсутствуют у бактерий, используемых при производстве вакцины БЦЖ и у непатогенных для человека микобактерий.

Исследование T-SPOT №1321ВЗР, ( №1321ДЕТ ) доступно только в следующих МО:

г. Санкт-Петербург, ул. Днепропетровская, д. 57, лит. А. пом. 7Н. Взятие проб биоматериала осуществляется с понедельника по четверг до 10.45.
г. Санкт-Петербург, улица Звездная, д. 9, корпус 1, литера А, помещение 43-Н. Взятие проб биоматериала осуществляется с понедельника по четверг до 11.00.

В настоящее время существуют два подхода к выявлению вероятной латентной инфекции:

in vivo: внутрикожные тесты с очищенным или рекомбинантным туберкулезным аллергеном (проба Манту, Диаскинтест);
in vitro: оценка ответа иммунных клеток обследуемого на антигены микобактерий туберкулеза по высвобождению гамма-интерферона (IGRA-тесты).

T-SPOT.TB тест не позволяет различать латентную инфекцию и активное заболевание.

Материал для исследования: цельная кровь (с литий гепарином) – 2 пробирки, 4 мл.

в качестве альтернативы кожным пробам (Манту, Диаскин) в целях скринингового обследования детей на наличие туберкулезной инфекции;
как часть комплексной оценки риска наличия латентной туберкулезной инфекции (в том числе у лиц, вакцинированных БЦЖ или получавших БЦЖ-терапию);
для диагностики активной туберкулезной инфекции в совокупности с оценками риска, клиническими, рентгенологическими и другими лабораторными показателями (в качестве дополнительного метода обследования).

≤ 4 – отрицательный;
5-7 – сомнительный;
≥ 8 – положительный.

Исследование T-SPOT №1321ДЕТ ( №1321ВЗР ) доступно только в следующих МО:

г. Санкт-Петербург, ул. Днепропетровская, д. 57, лит. А. пом. 7Н. Взятие проб биоматериала осуществляется с понедельника по четверг до 10.45.
г. Санкт-Петербург, улица Звездная, д. 9, корпус 1, литера А, помещение 43-Н. Взятие проб биоматериала осуществляется с понедельника по четверг до 11.00.

В настоящее время существуют два подхода к выявлению вероятной латентной инфекции:

in vivo: внутрикожные тесты с очищенным или рекомбинантным туберкулезным аллергеном (проба Манту, Диаскинтест);
in vitro: оценка ответа иммунных клеток обследуемого на антигены микобактерий туберкулеза по высвобождению гамма-интерферона (IGRA-тесты).

T-SPOT.TB тест не позволяет различать латентную инфекцию и активное заболевание.

Материал для исследования: цельная кровь (с литий гепарином) – 2 пробирки, 4 мл.

в качестве альтернативы кожным пробам (Манту, Диаскин) в целях скринингового обследования детей на наличие туберкулезной инфекции;
как часть комплексной оценки риска наличия латентной туберкулезной инфекции (в том числе у лиц, вакцинированных БЦЖ или получавших БЦЖ-терапию);
для диагностики активной туберкулезной инфекции в совокупности с оценками риска, клиническими, рентгенологическими и другими лабораторными показателями (в качестве дополнительного метода обследования).

≤ 4 – отрицательный;
5-7 – сомнительный;
≥ 8 – положительный.

T СПОТ тб - диагностика туберкулеза методом t-spot.tb в СПб

T-SPOT.TB это иммунологический способ диагностики туберкулеза. Способ во многом похож на квантифероновый тест, он занимает 3-4 дня. Для его проведения нужна кровь исследуемого.

Внимание! Забор анализа на Т-СПОТ во время карантинных мероприятий будет осуществляться только по средам.

Также сообщаем, что в связи проведением "дефектуры" тест-систем T-SPOT.tb в ближайшее время усложнится проведение этого анализа. К качестве альтернативы мы предлагаем проведение Квантиферонового теста, который по всем параметрам, включая стоимость исследования, не уступает T-СПОТ. Метод основан на количественном определении интерферона, высвобождаемого Т-клетками крови в ответ на внедрение туберкулезной палочки.

Название T-SPOT.TB расшифровывается так:

литера T обозначает T-лимфоциты, клетки крови, на основе ответа которых производится исследование;
Слово SPOT это перевод с английского языка, означающий "пятно". В результате лабораторного опыта в лунке образуются пятна, каждое из которых маркирует Т-лимфоцит;
.TB это сокращенное международное обозначение туберкулеза.

В России использование методики Т-СПОТ утверждено в 2012 году ФЗ - 2012/648.

Этот способ определения носительства туберкулеза очень чувствителен и информативен, он позволяет исключить ложноположительные реакции на носительство микобактерии туберкулеза в случаях, когда большинство тестов ошибаются или неточны. По разным оценкам и в разных регионах земного шара чувствительность Т-СПОТ оценивается от 87 до 97%, информативность также доходит до 97%. Как вы знаете, диагностика туберкулеза у ВИЧ-инфицированных осложнена, а Т-СПОТ в этих случаях весьма информативен и надежен. Есть и другие случаи, в которых использование этого теста предпочтительно.

СЛУЧАИ ПРЕДПОЧТИТЕЛЬНОГО ИСПОЛЬЗОВАНИЯ Т-СПОТ

у детей, привитых БЦЖ, у которых выявлено ложноположительная реакция Манту. В этом случае ценно сделать это малоинвазивное исследование до рентгенографии легких.
у лиц с аллергическими и аутоимунными заболеваниями;
у медицинских работников, людей, которые много путешествуют, военных, беременных;
у заключенных или прибывших из мест заключения;
у больных наркоманиями;
у лиц, контактирующих с туберкулезными больными;
у пациентов, проходящих терапию подавляющую иммунитет, как например, глюкостероидная или лучевая терапия, лечение с замещением функции почек;
при наличии хронических заболеваний, сопровождающихся снижением или истощением иммунитета, как например, сахарный диабет, уже упоминавшийся ВИЧ, или пневмокониозы;
при подозрении на внелегочные формы туберкулеза.

Внимание! Вакцинация БЦЖ не влияет на результаты теста T-SPOT.

Важно помнить, что Т-СПОТ является способом количественной диагностики наличия в организме туберкулеза, но не дает возможности отличить активную форму туберкулеза от латентной.

T-SPOT ПРИ ВИЧ. ДОПОЛНИТЕЛЬНЫЕ ДИАГНОСТИЧЕСКИЕ ВОЗМОЖНОСТИ

Этот тест у носителей ВИЧ имеет особое значение в диагностике туберкулеза. Вирус иммунодефицита поражает как раз те клетки, которые используются для диагностики в любом из IGRA-тестов, к которым относится и T-SPOT, т.е. клетки CD4. В ходе исследований обнаружилось, что даже на поздних стадиях развития ВИЧ, когда количество лимфоцитов CD4 уже не превышает ста на мм 3 , выявляемость туберкулеза при помощи Т-СПОТ остается очень высокой.

ОПЫТ ДРУГИХ СТРАН

T-SPOT разрабатывался в Оксфордском Университете и первой на вооружение его приняла Европа, в 2004 году он официально включен в стандарты диагностики туберкулеза в Евросоюзе. США и Канада включили Т-СПОТ в официальную диагностику в 2005 году, Южная Корея в 2006, Тайвань в 2009, Китайская Народная Республика в 2010, Российская Федерация и Япония в 2012 году.

ОТЛИЧИЯ Т-СПОТ ОТ ИССЛЕДОВАНИЯ ПЦР

ЧЕМ ОТЛИЧАЕТСЯ Т-СПОТ ОТ ДИАСКИН-ТЕСТА И КВАНТИФЕРОНОВОГО ТЕСТА

C квантифероновым тестом T-SPOT во многом сходен, а вот с диаскин-тестом отличий много. Например, Диаскин-тест противопоказан лицам с аллергическими и аутоиммунными заболеваниями, он лишен количественных параметров оценки, чаще бывает ложноотрицательным. Диагностика при помощи диаскин-теста невозможна при отсутствии у пациента иммунного ответа на туберкулин.

Квантифероновый тест также хорош и точен как T-SPOT, главное различие в том, что квантифероновый тест определяет гамма-интерферон, вырабатываемый в ответ на внедрение туберкулезной палочки, а Т-СПОТ определяет сами Т-клетки, которые вырабатывают гамма-интерферон на присутствие микобактерии туберкулеза.

СРАВНЕНИЕ МАНТУ С ДИАСКИН-ТЕСТОМ И Т-СПОТ.ТБ

Что сравниваем	Манту	Диаскин-тест	Т-СПОТ.TB
Оценка данных	субъективная	субъективная	объективная, количественная
специфичность	низкоспецифичный	высокоспецифичный	высокоспецифичный
Противопоказания	много	есть	нет
Возможность ложного результата после БЦЖ	высокая	низкая	отсутствует
Как скоро после вакцинации можно проводить	через месяц и более	через месяц и более	сразу
Побочные реакции	есть	редко	нет
Способ исследования	внутрикожный тест	внутрикожный тест	забор крови
Ограничения в период ожидания реакции	много	есть	нет
Достоверность при иммунодефиците	низкая	низкая	высокая
Достоверность при латентной форме	низкая	низкая	высокая

ЧТО ЛУЧШЕ, КВАНТИФЕРОНОВЫЙ ТЕСТ ИЛИ Т-СПОТ

Нас часто спрашивают, какой тест лучше, квантифероновый или Т-СПОТ. Разницы никакой, они одинаково чувствительны и информативны, потому что в одном случае мы определяем количество Т-клеток, а в другом количество гамма-интерферона, который они выделяют. Стоимость и сроки их проведения также очень похожи.

КАК ДОСТИГАЕТСЯ ВЫСОКАЯ СПЕЦИФИЧНОСТЬ T-SPOT

Интересно, что вирусологи нашли у вирулентной Микобактерии туберкулеза фрагмент генома, который отсутствует в БЦЖ, используемой для прививки. Этот фрагмент, называемый RD1, был утрачен в процессе создания вакцины где то между 1908 и 1931 годами. Антигены к RD1 — ESAT-6 и CFP10 избирательно взаимодействуют только с теми Т-клетками, которые "знакомы" с фрагментом RD1. А мы помним, что этого фрагмента нет в обычной прививке. Выяснилось также, что его нет и у микобактерий, которые любят провоцировать ложно-положительную реакцию на туберкулез в здоровом организме, таких как Micobacterium kanzasii, M.marinum, M.szulgai и проч.

Все это позволило Т-СПОТ стать надежным и высокоинформативным методом диагностики как латентного, так и активного туберкулеза. Высокая точность диагностики позволяет избежать ненужных и, зачастую, вредных лечебных курсов и исследований.

Стоимость Т-СПОТ при этом не превышает стоимости квантиферонового теста, и записаться на него можно прямо здесь.

КАК ПОДГОТОВИТЬСЯ К СДАЧЕ АНАЛИЗА

Кровь на Т-СПОТ можно сдать без записи в любом из девяти медицинских центров Лабтест в Санкт-Петербурге или даже вызвать медсестру для забора крови на дом. За два часа до исследования нельзя есть. Кровь забирают из вены. Актуальную стоимость исследования можно посмотреть на странице с прайс-листом.

ТРАКТОВКА РЕЗУЛЬТАТА АНАЛИЗА Т-СПОТ.ТБ

Результатом исследования могут быть три варианта ответа. Чтобы понять, что значит каждый из них мы приводим расшифровку анализа Т-СПОТ:

Отрицательный - организм не инфицирован туберкулёзом
Положительный - организм инфицирован туберкулёзом
Сомнительный - довольно редкий вариант ответа. Необходимо наблюдение в динамике, понадобится повторная сдача анализа или дополнительные методы обследования, например, ПЦР или антитела к туберкулёзу с консультацией фтизиатра.

В лунках нулевого контроля пятна должны отсутствовать. При наличии пятен результат может быть расценен как сомнительный. Большее число пятен трактуется как сомнительный результат, если в лунках с антигеном А и антигеном В от 8 до 100 – как положительный. При этом учитывается количество в нулевом контроле, но это уже лишние подробности. Однако, фтизиатры, руководствуясь собственным опытом, могут трактовать результат Т-СПОТ.тб по-своему, опираясь на весь комплекс симптомов и анамнеза болезни. Такой подход можно и нужно считать более корректным и справедливым в интересах пациента.

Обратите внимание, в Лабтест можно заказать услугу забора крови для теста T-SPOT.tb на дому. Записаться на прием анализа можно через форму по этой ссылке.

Осторожно, мошенники!

Если желаете поделиться этой статьей, опубликуйте её на своей странице, выбрав кнопку нужной соцсети:

Читайте также: