Дифференциальная диагностика рожи свиней от листериоза
Обновлено: 17.04.2024
Сальмонеллёзы – группа инфекционных болезней преимущественно молодняка с.х. животных, мелких домашних, промысловых животных, грызунов, птиц, характеризующихся при остром течении лихорадкой и профузным поносом, при хроническом – воспалением легких, плевритами, артритами. Восприимчив человек. У взрослых животных и птиц болезнь может протекать бессимптомно (сальмонеллоносительство), у беременных самок возможны аборты. У людей при употреблении продуктов, содержащих сальмонеллы, могут возникать пищевые инфекции. При оценке пищевых продуктов, в кот. обнаружены сальмонеллы, важно знать, что эти микроорганизмы довольно устойчивы к нагреванию, при 60 о С погибают в течение часа, при 80 о С – за 5-10 мин (то есть могут сохраняться, например, при изготовлении варёной колбасы)
КЛАССИФИКАЦИЯ ВОЗБУДИТЕЛЕЙ:Сем. Enterobacteriaceae, Род: Salmonella; вид Salmonella enterica, включает более 2 500 серовариантов:
· S. enteritidis, S.dublin – у телят (+ возбудитель пищев. инфекции у людей)
· S. choleraesuis, S. typhisuis - у свиней.
· S. typhimurium – у водоплавающ. птицы (+ возб. пищ.инфекции у людей)
· S. abortus equi– у лошадей (аборт у кобыл).
· S. abortus ovis – у овец (аборт у овец).
· S.pullorum, S. gallinarum – пуллороз-тиф у птиц.
ПАТОГЕНЕЗ И ФАКТОРЫ ВИРУЛЕНТНОСТИ: основные пути заражения – алиментарный, аэрогенный, возможно внутриутробное и трансовариальное. Возбудители размножаются в тонком кишечнике и гематогенным и лимфогенными путями разносятся в паренхиматозные органы, где вновь размножаются. При распаде их высвобождаются эндотоксины, которые вызывают патологические процессы. Сальмонеллы образуют два вида токсинов: экзо- и эндотоксины.
Методы диагностики:
БАКТЕРИОЛОГИЧЕСКИЙ МЕТОД:
Материал для исследования: при жизни – кал, сыворотка крови; посмертно – трупы мелких животных и птиц, паренхиматозные органы, мезентериальные лимфатические узлы, отрезок кишечника, аборт. плод.
Микроскопия:мелкие короткие палочки с закругленными концами, располагаются одиночно или попарно, беспорядочно; Гр - , спор не образуют; капсулу не образуют; подвижны (за исключением S.pullorum).
Культуральные свойства:Все энтеробактерии, в т.ч.сальмонеллы имеют сходные культуральные признаки: на МПБ – интенсивное помутнение, образование легко разбивающегося осадка, на МПА – сочные, круглые с ровными краями серо-белого цвета колонии.
· на среде Эндо(среда розового цвета с лактозой и фуксином) – мелкие и средние, нежные. прозрачные бледно-розовые колонии,
· на среде Плоскирева(высокоселектив. среде коньячного цвета с лактозой нейтральным красным и бриллиант. зелёным) – серо-желтые колонии;
· на среде висмут-сульфит-агар (высокоселективная среда молочно-зеленоватого цвета) – блестящие антрацитово-чёрные колонии.
Биохимические свойства:Сальмонеллы обладают пониженной сахаролитической активностью: ферментируют глюкозу и маннит с образованием кислоты и газа, Важным дифференцирующим биохимическим свойством сальмонелл является отсутствие способности ферментировать лактозу. Не разжижают желатин, Н2S+, индол - ; реакция с метиловым красным +: (среда окрашивается в розово-красный цвет), реакция Фогеса-Проскауэра отрицательная – (желтое окрашивание среды). Растет на среде Симмонса с цитратом, изменяя её цвет с зелёного на синий.
Биопроба:в необходим. случаях заражают п/кожно белых мышей (гибель).
СЕРОЛОГИЧЕСКИЙ МЕТОД:
1. Экспресс-метод диагностики – постановка РИФ (МФА)с флюоресцирующей диагностической сывороткой.
2. РА с исследуемой сывороткой крови (или кровекапельная) при диагностике паратифозного аборта кобыл, пуллороза у кур (т.е. ищут Ат в исследуемой сыворотке крови животных с помощью антигена-диагностикума).
3. РА с исследуемой живой культурой с агаровой среды с целью определения вида и сероварианта Salm (т.е. определяют Аг полученной культуры бактерий с помощью диагност. сывороток).
Антигенное строение сальмонелл очень сложно. На основе общего для нескольких серовариантов сальмонелл антигена они подразделяются на серологич. группы по схеме Кауфмана-Уайта, обозначаемые заглавными буквами латинского алфавита (серогруппы A, B, C, D и т.д.). Кроме того, разные сероварианты сальмонелл различаются по набору соматических О-антигенов и жгутиковых Н-антигенов Поэтому идентификацию исследуемых культур проводят в 3 этапа. Сначала культуру проверяют с групповыми (поливалентными) сальмонеллезными агглютинирующими сыворотками в РА на стекле для подтверждения принадлежности к роду Salmonella. При положительном результате с групповой сывороткой проводят испытания той же куль-туры с отдельными монорецепторными сыворотками, входящими в смесь поливален-тной сыворотки и определяют серологич. группу по Кауфману. Затем эти же культуры испытывают с монорецепторными сыворотками, 1-й и 2-й фазы, обозначенными цифрами и малыми буквами и устанавливают серовариант, то есть идентифицируют mi.
ФАГОДИАГНОСТИКА –с набором сальмонеллёзных бактериофагов
Биопрепараты:
Диагностические – наборы агглютинирующих сывороток для постановки РА; флюоресцирующая сыворотка для РИФ; бактериофаги.
лечебные – сыворотки и гамма-глобулины.
Разнообразные вакцины, такие как:
· Концентрированная формолвакцина для стельных коров;
· Живая или инактивированная в-на для телят от вакцинированных коров;
· Формолвакцина против паратифа поросят – для супоросных свиноматок за 1,5 мес. до опороса.
· Сухая живая вакцина против паратифа свиней из аттенуированного штамма S. cholerae suis ТС-177 – для поросят с 2-х недельного возраста
· Поливалентная формолтиомерсаловая вакцина против сальмонеллёза овец.
· Ассоциированная вакцина против паратифа, пастереллёза и диплококковой септицемии поросят – в неблагополучных хозяйствах.
Рожа свиней — инфекционная болезнь, характеризующаяся при остром течении септицемией и воспалительной эритемой кожи, при хроническом — эндокардитом и артритами. Спорадически может встречаться у лошадей, крупного рогатого скота, овец, северных оленей, собак, диких млекопитающих, птиц, восприимчив человек.
Возбудитель болезни — грамположительная палочковидная бактерия Erysipelothrix rhusiopathiae, относящаяся к роду Erysipelothrix.
Лабораторная диагностика болезни основана на результатах бактериологического серологического исследования.
Бактериологическое исследование.В лабораторию направляют труп животного целиком или сердце (при хроническом течении - обязательно), печень, селезенку, почку, трубчатую кость. При артритах берут синовиальную жидкость. При необходимости материал консервируют 30%-ным стерильным водным раствором глицерина.
Микроскопическое исследование исходного материала.Из материала готовят мазки, окрашивают по Граму, а также люминесцирующими рожистыми сыворотками. При хроническом течении обязательно делают мазки с поверхности измененных клапанов сердца. В мазках, окрашенных по Граму, в положительных случаях обнаруживают грамположительные, прямые или слегка изогнутые тонкие палочки размером 0,2-0,3 мкм шириной, 2,5 мкм длиной с закругленными концами, без спор и капсул. Клетки располагаются единично, группами, в виде коротких цепочек, некоторые под углом друг к другу.
В препаратах из пораженных клапанов сердца свиней (хроническое течение) возбудитель имеет нитевидную форму с тенденцией клеток к обесцвечиванию.
Выделение и идентификация культуры возбудителя. Культивирование. Возбудитель болезни — E. rhusiopathiae является факультативным анаэробом, в первой генерации ведет себя как микроаэрофил. Температурный оптимум 36-37° С, оптимум рН 7,4-7,8. Культуры в S-форме лучше растут при 33° С и рН 7,6-8,2; R-формы — при 37° С и рН — менее 7.Посев исследуемого материала может быть произведен на МПА, МПБ, оптимальными средами являются кровяной агар, среды с 5-10% сыворотки крови и 0,2-0,5% глюкозы.
Контаминированный материал, особенно при исследовании миндалин на носительство возбудителя, высевают на селективные среды: среда ESB, среда МВА, среды, содержащие 0,1% азида натрия и 0,001% кристаллвиолета. Рекомендуется в этом случае делать посев на среду ESB с последующей пересевом на среду МВА. Жидкий материал рекомендуется центрифугировать, а седимент ресуспендировать в среде ESB. Если время не является лимитирующим фактором, рекомендуется инкубировать образцы тканей в флаконах с бульоном при 4-5° С в течение 4-5 недель, субкультуры засеять на среду МВА. Этот метод особенно подходит для выделения возбудителя из миндалин и кишечных лимфатических узлов. Прямой посев материала на плотные среды обычно менее эффективен и дает удовлетворительные результаты при использовании плотных селективных сред с кровью или сывороткой крови.
Морфология Е. rhusiopathiae в культуре.В мазках из колоний
S-формы преимущественно находят палочковидные клетки (прямые или слегка изогнутые) размером 0,2-0,4 х 0,5-2,5 мкм, не обладающие подвижностью; из колоний R-формы — клетки типичной морфологии, а также цепочки из клеток и нити, которые могут достигать 4-15 мкм. Для выявления жгутиков культуру высевают уколом в полужидкий агар и инкубируют посевы 24 часа при 37° С. При обнаружении в первичных посевах культур с типичными для эризипелотриксов культуральными, морфологическими и тинкториальными свойствами их отвивают для дальнейшего изучения.
У выделенных культур определяют способность образовывать каталазу, оксидазу, сероводород, уреазу, гидролизовать эскулин, ферментировать углеводы. Для выяснения сахаролитической активности применяют 1%-ную пептонную воду с добавлением 5-10% стерильной сыворотки крови лошади или кролика. Образование сероводорода целесообразно проводить посевом на среду Клиглер с учетом результата через 24 часа, хотя можно использовать и бумажки, пропитанные уксуснокислым свинцом.
Возбудитель не вырабатывает каталазу, оксидазу, уреазу, не гидролизует эскулин, образует сероводород.
Е. rhusiopathiae расщепляет с образованием кислоты без газа глюкозу, лактозу, декстрин, левулезу, галактозу, фруктозу, мальтозу; слабое образование кислоты регистрируется в средах с маннозой, иногда сахарозой. Обычно возбудитель не образует кислоту из сорбита, маннита, инозита, дульцита, рамнозы, сорбозы, глицерина, эритрита, амигдалина, салицина, трегалозы, инулина, мелицитозы, раффинозы, гликогена, ксилита, эскулина, целлобиозы. Индол не образует и не редуцирует нитраты. Желатин не разжижает, не утилизирует цитраты, тест Фогес-Проскауера — отрицательный. Негидролизует гиппурат натрия, твин-20, 40, 80. Вирулентные штаммы Е. rhusiopathiae образуют гиалуронидазу, но обычно этот тест в диагностической практике не используют.
Серологическая идентификация эризипелотриксов.Ранее вид дифференцировали на серотипы от А до О. Штаммы типа А считали ответственными за острое и сверхострое течение эризипелоида; штаммы типа В обычно ассоциируются с хроническим течением эризипелоида. Типы А и В подразделяют на подтипы, причем у здоровых свиней чаще находят G и Н, но могут быть типы А и В; у крупного рогатого скота — С и Д; у рыб — С, Д, Е. Штаммы, не имеющие типового антигена, обычно относили к типу N. В настоящее время на основании антигенных вариаций соматического (термостабильного) антигена Е. rhusiopathiae подразделяют на 22 серовара, причем до 80% всех изолятов составляют штаммы сероваров 1 и 2.
В повседневной лабораторной практике проводят видовую серологическую идентификацию Е. rhusiopathiae в РА на стекле. С указанной целью испытуемую культуру выращивают 24 часа при 37° С на плотной питательной среде. На предметное стекло наносят каплю лечебной противорожистой иммунной сыворотки в разведении 1:50, в ней бактериологической петлей суспендируют выросшую бактериальную массу и учитывают результат. Серологическую идентификацию Е. rhusiopathiae можно проводить на различных стадиях изучения культуры при помощи прямого метода флуоресцирующих антител с применением рожистых люминесцирующих сывороток
Питательные среды.Для выделения культур лучше всего использовать питательные среды с 5-10% сыворотки крови и 0,2-0,5% глюкозы. При исследовании материала контаминированного посторонней микрофлорой, целесообразно пользоваться селективными средами.
Селективная среда ESB. В 1000 мл стерильного питательного бульона вносят 50 мл сыворотки крови лошади, 400 мг канамицина, 50 мг неомицина, 25 мг ванкомицина. Среда пригодна для использования в течение 12- 14 дней хранения при 4° С.
Селективная среда МВА. В 1000 мл питательного агара добавляют
0,4 г азида натрия. Стерилизуют при 121° С 15 минут и асептически вносят 50 мл сыворотки крови и 20 мл крови лошади.
Рожу свиней следует дифференцировать от классической и африканской чумы свиней, пастереллеза, сальмонеллеза, листериоза, сибирской язвы, солнечного и теплового ударов.
Классической чумой свиней, в отличие от рожи, заболевают свиньи всех возрастов и в любое время года, она отличается высокой контагиозностью и большой летальностью, сопровождается лихорадкой постоянного типа, катарально-гнойным конъюнктивитом. При чуме, в коже, особенно в области живота, подчелюстного пространства и паха, появляются точечные кровоизлияния, которые образуют темно-багровые пятна. Эти пятна, в отличии от таковых при роже, не исчезают при надавливании. Важное значение в дифференциальной диагностике рожи и чумы свиней имеют результаты патологоанатомического вскрытия. При вскрытии свиней, павших от классической чумы, обнаруживают: общую анемию, геморрагический диатез, геморрагический лимфаденит с мраморным рисунком, инфаркты в селезенке; при осложнении сальмонеллезом - в ободочной кишке струпья (чумные бутоны), а при осложнении пастереллезом - крупозную или крупозно-геморрагическую пневмонию и серозно-фибринозный плеврит и перикардит. при гистоисследовании устанавливают негнойный лимфоцитарный энцефаломиелит (во всех отделах головного и спинного мозга). При исследовании крови обнаруживают: при классической чуме - лейкопению, а при роже - лейкоцитоз. Окончательная дифференциация указанных болезней осуществляется на основании бактериологического и вирусологического исследований. Африканская чума свиней протекает всегда остро, отмечается 100%-ная гибель свиней, в большей степени выражена картина геморрагического диатеза, чем при роже. При африканской чуме свиней резче выражены геморрагический диатез, геморрагический лимфаденит, селезенка увеличена в несколько раз, пульпа ее сильно размягчена. Ярко выражены серозно-геморрагический гастроэнтерит и конъюнктивит, печень, почки, легкие и кожа застойно-полнокровны. Пастереллезом болеют поросята с месячного возраста, заболевание регистрируется круглый год, но чаще - в летне-осеннее время. У больных животных клинически отмечаются признаки пневмонии, острого катарального ринита. При вскрытии трупов животных устанавливают лобарную крупозную пневмонию с некрозами, серозно-фибринозный плеврит и перикардит, острый катаральный гастроэнтерит, неизмененную селезенку, серозные отеки подкожной клетчатки. Решающим в дифференциальной диагностике пастереллеза и рожи является проведение бактериологического исследования с постановкой биопробы на белых мышах.
К сальмонеллезу восприимчивы поросята с первых дней жизни до 4 месячного возраста, особенно в период отъема в 2-х месячном возрасте. Строгая сезонность не выражена. при вскрытии трупов отмечают острый катаральный гастроэнтерит, гиперплазию пейеровых бляшек тонкого отдела кишечника и брыжеечных лимфоузлов, зернистую дистрофию печени, почек, миокарда, милиарные гранулемы и некрозы в печени. Решающим в дифференциальной диагностике является лабораторное исследование. Листериоз регистрируют в форме ограниченных вспышек среди поросят-сосунов и отъемышей. Протекает болезнь остро с явлениями лихорадки, отказа от корма, слабости, учащенного дыхания или в форме менингоэнцефалита. У супоросных свиноматок болезнь может проявляться абортами или рождением мертвых поросят. Решающим является бактериологическое исследование.
Сибирская язва проявляется симптомами тяжелой ангины, сопровождающейся воспалительным отеком подкожной клетчатки межчелюстного пространства и верхней части шеи. Проведение бактериологического исследования обеспечивает постановку окончательного диагноза.
Солнечный и тепловой удары дифференцируют от рожи свиней на основании учета условий, способствующих появлению этих факторов, а также клинических признаков: резкая слабость, учащение дыхания, расстройство сердечной деятельности, повышение температуры тела до 42-43 0 С, судорожное сокращение мышц, гибель больных в течение первых часов клинического проявления солнечного или теплового ударов. При вскрытии животных, павших по причине солнечного или теплового ударов, устанавливают только венозную гиперемию и отек вещества головного мозга и мозговых оболочек, переполнение мозговых желудочков ликвором, общую гиперемию и отек легких. Других характерных патологоанатомических изменений не обнаруживают.
Сальмонеллёзы– группа инфекционных болезней преимущественно молодняка с.х. животных, мелких домашних, промысловых животных, грызунов, птиц, характеризующихся при остром течениилихорадкой и профузным поносом, при хроническом –воспалением легких, плевритами, артритами. Восприимчив человек. У взрослых животных и птиц болезнь может протекать бессимптомно (сальмонеллоносительство), у беременных самок возможныаборты.У людей при употреблении продуктов, содержащих сальмонеллы, могут возникатьпищевые инфекции. При оценке пищевых продуктов, в кот. обнаружены сальмонеллы, важно знать, что эти микроорганизмы довольно устойчивы к нагреванию, при 60 о С погибают в течение часа, при 80 о С – за 5-10 мин (то есть могут сохраняться, например, при изготовлении варёной колбасы)
КЛАССИФИКАЦИЯ ВОЗБУДИТЕЛЕЙ: Сем. Enterobacteriaceae, Род:Salmonella; видSalmonella enterica, включает более 2 500 серовариантов:
S. enteritidis, S.dublin – у телят (+ возбудитель пищев. инфекции у людей)
S. choleraesuis, S. typhisuis - у свиней.
S. typhimurium – у водоплавающ. птицы (+ возб. пищ.инфекции у людей)
S. abortus equi– у лошадей (аборт у кобыл).
S. abortus ovis – у овец (аборт у овец).
S.pullorum, S. gallinarum – пуллороз-тиф у птиц.
ПАТОГЕНЕЗ И ФАКТОРЫ ВИРУЛЕНТНОСТИ: основные пути заражения – алиментарный, аэрогенный, возможно внутриутробное и трансовариальное. Возбудители размножаются в тонком кишечнике и гематогенным и лимфогенными путями разносятся в паренхиматозные органы, где вновь размножаются. При распаде их высвобождаются эндотоксины, которые вызывают патологические процессы. Сальмонеллы образуют два вида токсинов: экзо- и эндотоксины.
Методы диагностики:
БАКТЕРИОЛОГИЧЕСКИЙ МЕТОД:
Материал для исследования:при жизни – кал, сыворотка крови; посмертно – трупы мелких животных и птиц, паренхиматозные органы, мезентериальные лимфатические узлы, отрезок кишечника, аборт. плод.
Микроскопия: мелкие короткие палочки с закругленными концами, располагаются одиночно или попарно, беспорядочно; Гр - , спор не образуют; капсулу не образуют; подвижны (за исключением S.pullorum).
Культуральные свойства: Все энтеробактерии, в т.ч.сальмонеллы имеют сходные культуральные признаки: на МПБ – интенсивное помутнение, образование легко разбивающегося осадка, на МПА – сочные, круглые с ровными краями серо-белого цвета колонии.
на среде Эндо(среда розового цвета с лактозой и фуксином) – мелкие и средние, нежные. прозрачные бледно-розовые колонии,
на среде Плоскирева(высокоселектив. среде коньячного цвета с лактозой нейтральным красным и бриллиант. зелёным) – серо-желтые колонии;
на среде висмут-сульфит-агар (высокоселективная среда молочно-зеленоватого цвета) –блестящие антрацитово-чёрные колонии.
Биохимические свойства: Сальмонеллы обладают пониженной сахаролитической активностью: ферментируют глюкозу и маннит с образованием кислоты и газа,Важным дифференцирующим биохимическим свойством сальмонелл является отсутствие способности ферментировать лактозу. Не разжижают желатин,Н2S+, индол -; реакция с метиловым красным+: (среда окрашивается в розово-красный цвет), реакция Фогеса-Проскауэра отрицательная–(желтое окрашивание среды). Растет на среде Симмонса с цитратом, изменяя её цвет с зелёного на синий.
Биопроба: в необходим. случаях заражают п/кожно белых мышей (гибель).
СЕРОЛОГИЧЕСКИЙ МЕТОД:
1.Экспресс-метод диагностики –постановка РИФ (МФА) с флюоресцирующей диагностической сывороткой.
2.РА с исследуемой сывороткой крови(иликровекапельная) при диагностике паратифозного аборта кобыл, пуллороза у кур (т.е. ищутАтв исследуемой сыворотке крови животных с помощью антигена-диагностикума).
3.РА с исследуемой живой культурой с агаровой средыс целью определения вида и серовариантаSalm(т.е. определяютАгполученной культуры бактерий с помощью диагност. сывороток).
Антигенное строение сальмонелл очень сложно. На основе общего для нескольких серовариантов сальмонелл антигена они подразделяются на серологич. группы по схеме Кауфмана-Уайта, обозначаемые заглавными буквами латинского алфавита (серогруппыA, B, C, D и т.д.). Кроме того, разные сероварианты сальмонелл различаются по набору соматических О-антигенов и жгутиковых Н-антигенов Поэтому идентификацию исследуемых культур проводят в 3 этапа. Сначала культуру проверяют с групповыми (поливалентными) сальмонеллезными агглютинирующими сыворотками в РА на стекле для подтвержденияпринадлежности к роду Salmonella. При положительном результате с групповой сывороткой проводят испытания той же куль-туры с отдельными монорецепторными сыворотками, входящими в смесь поливален-тной сыворотки и определяют серологич. группу по Кауфману. Затем эти же культуры испытывают с монорецепторными сыворотками, 1-й и 2-й фазы, обозначенными цифрами и малыми буквами и устанавливают серовариант, то есть идентифицируютmi.
ФАГОДИАГНОСТИКА – с набором сальмонеллёзных бактериофагов
Биопрепараты:
Диагностические– наборы агглютинирующих сывороток для постановки РА; флюоресцирующая сыворотка для РИФ; бактериофаги.
лечебные– сыворотки и гамма-глобулины.
Разнообразные вакцины, такие как:
Концентрированная формолвакцина для стельных коров;
Живая или инактивированная в-на для телят от вакцинированных коров;
Формолвакцина против паратифа поросят – для супоросных свиноматок за 1,5 мес. до опороса.
Поливалентная формолтиомерсаловая вакцина против сальмонеллёза овец.
Ассоциированная вакцина против паратифа, пастереллёза и диплококковой септицемии поросят – в неблагополучных хозяйствах.
Читайте также: