Днк риккетсий методом пцр
Обновлено: 19.04.2024
ПЦР с детекцией в режиме реального времени. Метод основан на амплификации искомых фрагментов ДНК Rickettsia sibirica/Rickettsia heilongjiangensis с детекцией в режиме реального времени.
Тест предназначен для качественного дифференциального определения ДНК Rickettsia sibirica/Rickettsia heilongjiangensis в гомогенизате клеща.
Краткая характеристика исследования клеща для выявления ДНК возбудителей клещевых риккетсиозов
Кровососущие иксодовые клещи являются переносчиками возбудителей многих заболеваний. Любое заболевание, возникшее в результате укуса клеща, следует рассматривать как потенциальную микст-инфекцию. Ранняя диагностика микст-инфекций важна для выбора правильной стратегии лечения.
Клещевой риккетсиоз (КР) наряду с клещевым энцефалитом (КЭ) и иксодовыми клещевыми боррелиозами (ИКБ) входит в тройку наиболее распространенных трансмиссивных инфекций, передаваемых через присасывание иксодовых клещей в России. Клещевой риккетсиоз – облигатно-трансмиссивная природно-очаговая инфекция.
Пути заражения и симптомы риккетсиоза
Заражение людей риккетсиями обусловлено присасыванием клещей – переносчиков риккетсий. Во входных воротах (на месте присасывания) происходит размножение возбудителя в эпителиальных клетках с формированием первичного аффекта. Далее риккетсии распространяются лимфогенно, что может сопровождаться лимфангоитом и регионарным лимфаденитом. Дальнейшее гематогенное распространение возбудителя сопровождается генерализованным поражением эндотелия сосудов, в том числе формированием различной выраженности эндоваскулитов и тромбангиитов в сосочковом слое кожи (сыпь). Патологический процесс при риккетсиозах обусловлен размножением риккетсий в клетках-мишенях (главным образом в эндотелиальных клетках кровеносных сосудов, особенно мелких) и сосудорасширяющим действием токсических субстанций, что вызывает значительные изменения центральной нервной системы и расстройства кровообращения. Имеет место поражение сосудистого аппарата, преимущественно прекапилляров, капилляров и артериол с развитием десквамативно-пролиферативного тромбоваскулита и образованием специфических гранулем в местах паразитирования риккетсий. Этот процесс проявляется постепенным, по мере внутриклеточного размножения риккетсий и гибели инфицированных клеток, развитием инфекционно-токсического синдрома.
Инкубационный период колеблется от 2 до 7 дней, большей частью равен 3-6 дням. В месте присасывания клеща развивается болезненность, гиперемия и небольшой инфильтрат с некротической корочкой в центре, увеличение регионарных лимфатических узлов. Могут отмечаться небольшая слабость, озноб, ломота в суставах, снижение аппетита. Начало заболевания острое, у части больных наблюдают продромальный период, в котором описаны общая слабость и разбитость, боль и ломота в мышцах, костях, суставах, пояснице, небольшое повышение температуры, катаральные изменения в глотке и верхних дыхательных путях. В этом периоде уже выражено специфическое поражение кожи в месте внедрения возбудителя.
На 2-3-й день продромы развивается клиническая картина болезни: повышение температуры тела до 40 ºС, лихорадка, головная боль, бессонница, озноб, ломота и боли во всем теле, могут быть тошнота и рвота. Продолжительность лихорадки 3-18 дней, в среднем 8 дней. На 2-4-й день болезни появляется сыпь. Она является характерным признаком клещевого риккетсиоза и ее раннее появление облегчает клиническую диагностику. Гистология сыпи сходна с сыпнотифозной. Высыпания начинаются с конечностей, характерно наличие сыпи на ладонях и подошвах. Сыпь в течение 1,5-2 суток распространяется на туловище, иногда и на лицо. Имеет вид крупных розеол и папул ярко-розового цвета. Размеры варьируют от мелких элементов величиной с булавочную головку до крупных, размером в 2-3 мм в поперечнике. Иногда сыпь переходит в петехиальную. Типичны локализация сыпи на разгибательных поверхностях и ее обилие на нижних конечностях. Наблюдают медленное угасание сыпи и наличие пигментации на месте ее исчезновения. Наиболее характерны изменения со стороны сердечно-сосудистой системы, выражающиеся в брадикардии и понижении артериального давления. Изменения нервной системы заключаются в резкой головной боли, миалгиях, артралгиях, нарушении сна и аппетита.
Во время лихорадочного периода наблюдается снижение гемоглобина на 15%, уменьшение количества эритроцитов и тромбоцитов.
Особенности течения риккетсиоза у детей
У детей болезнь протекает в более острой форме, но сравнительно легче, чем у взрослых. Особенно тяжело переносят клещевой риккетсиоз пожилые люди. По степени тяжести заболевания различают: тяжелую, среднюю и легкую форму. Тяжелую форму характеризует более длительный лихорадочный период, значительная интоксикация организма, температурные величины, достигающие 41 градуса, более выраженная симптоматика со стороны сердечно-сосудистой и нервной системы, могут быть осложнения в виде неврита, миокардита, бронхита, пиелонефрита и др. Общая клиническая картина клещевого риккетсиоза, из-за многообразия его форм, может различаться и течением болезни, и симптоматикой. Для назначения эффективного лечения очень важна верная диагностика заболевания.
С какой целью проводят исследование клеща для выявления ДНК возбудителей клещевых риккетсиозов
Тест проводится с целью определения наличия в клеще специфических фрагментов ДНК риккетсий (Rickettsia sibirica/Rickettsia heilongjiangensis) – возбудителей риккетсиоза, переносчиком которой являются клещи.
Исследование предназначено для диагностики и профилактики заболеваний, вызванных группой клещевых пятнистых лихорадок (КПЛ), Rickettsia Spotted fever group (SFG), путем качественного определения ДНК Rickettsia spp.
Если удалось снять клеща – в лаборатории можно провести его комплексное исследование. Установлено, что один клещ рода Ixodes может быть носителем одновременно 7 патогенных агентов вирусной и бактериальной этиологии. Множественное заражение клещей — скорее правило, а не исключение. Наличие одного механизма передачи и общих переносчиков возбудителей определяют возможность существования сочетанных очагов трансмиссивных природноочаговых инфекций: клещевого энцефалита (КЭ), иксодовых клещевых боррелиозов (ИКБ), моноцитарного эрлихиоза человека (МЭЧ) и анаплазмоз (ГАЧ), риккетсиоза. Присасывание мультизараженного вредителя может вызвать развитие у человека микстинфекции, которая протекает более тяжело, вплоть до летальных исходов. ПЦР диагностика позволяет в короткие сроки выявить бактериальных и вирусных возбудителей инфекции и подобрать специфическую терапию для профилактики развития заболевания.
В настоящее время среди риккетсиозов группы клещевых пятнистых лихорадок (КПЛ) для России эпидемиологическое значение имеют:
Астраханская пятнистая лихорадка (R. conori var. сaspii);
Клещевой сыпной тиф Северной Азии (R. Sibirica);
Дальневосточный клещевой риккетсиоз (R. Heilongjiangensis)
Астраханская пятнистая лихорадка (астраханская риккетсиозная лихорадка). Возбудитель - R. conori var. сaspii. Переносчик - клещи рода Rhipicephalus pumilio. Эндемичным районом является Астраханская область. Важным фактором в очагах астраханской пятнистой лихорадки является высокая пораженность собак клещом Rhipicephalus pumilio. С собак клещ переползает на человека. Заболеваемость отмечается с апреля по октябрь, пик заболеваемости приходится на июль – август. Инкубационный период составляет от 2 дней до 1 месяца. Начало заболевания острое, проявляется лихорадкой. Первый признак заболевания – первичный аффект в месте присасывания клеща (на нижних конечностях, туловище). В последующем - распространенная папулезно-розеолезная сыпь (на туловище, верхних и нижних конечностях).
Клещевой сыпной тиф Северной Азии (североазиатский клещевой риккетсиоз, клещевой сыпной тиф Азии, клещевой риккетсиоз Сибири), вызван R. Sibirica. Природные очаги этого заболевания распространены в Сибири и на Дальнем Востоке России (Красноярский, Алтайский, Хабаровский, Приморский края; Амурская область, Тыва, Хакассия), в Казахстане, Монголии и Китае. Более 80% заболеваний отмечается в Алтайском и Красноярском краях. Резервуаром возбудителя в природе являются клещи и различные мелкие грызуны. Переносчиками R. sibirica служат клещи рода Dermacentor (D. nuttalli, D. sitvarum, D. marginatus, D. reticulates) и Haemophysalis (H. concinna). В отсутствие переносчика болезнь не является контагиозной. Механизм передачи возбудителя – трансмиссивный. Инкубационный период составляет 3-7 дней. Заболевание проявляется триадой признаков: первичный аффект на месте укуса клеща, сыпь и лихорадка. Заболевание продолжается от 7 до 12 дней. Осложнения редки. Рецидивы болезни не описаны.
Дальневосточный клещевой риккетсиоз, вызываемый R. heilongjiangensis чаще всего встречается предгорной зоне Республики Алтай: в Майминском районе, городе Горно-Алтайске и Чойском районе. Переносчиком служат иксодовые клещеи Haemaphysalis concinna и Ixodes persulcatus. Заболеваемость отмечается с апреля по июль. Характерен короткий инкубационный период (1–8 дней), температура (37,5–39,5°С), слабость, выраженная интоксикация, первичный аффект с очагом некроза, регионарный лимфаденит и сыпь. Экзантема при клещевом риккетсиозе, вызываемом R. Heilongjiangensis проявляется редко.
Заболевание характеризуется острым началом, длительной лихорадкой, с повышением температуры до 39,5-40С, появлением в разгар заболевания розеолезной сыпи, резкими изменениями нервной и сердечно-сосудистой систем, тифозным статусом и наличием осложнений.
Подготовка
1. Спинномозговая жидкость: условия подготовки определяются лечащим врачом.
2. Смывы с первичного аффекта: условия подготовки определяются лечащим врачом.
Исследование предназначено для диагностики и профилактики заболеваний, вызванных группой клещевых пятнистых лихорадок (КПЛ), Rickettsia Spotted fever group (SFG), путем качественного определения ДНК Rickettsia spp.
Если удалось снять клеща – в лаборатории можно провести его комплексное исследование. Установлено, что один клещ рода Ixodes может быть носителем одновременно 7 патогенных агентов вирусной и бактериальной этиологии. Множественное заражение клещей — скорее правило, а не исключение. Наличие одного механизма передачи и общих переносчиков возбудителей определяют возможность существования сочетанных очагов трансмиссивных природноочаговых инфекций: клещевого энцефалита (КЭ), иксодовых клещевых боррелиозов (ИКБ), моноцитарного эрлихиоза человека (МЭЧ) и анаплазмоз (ГАЧ), риккетсиоза. Присасывание мультизараженного вредителя может вызвать развитие у человека микстинфекции, которая протекает более тяжело, вплоть до летальных исходов. ПЦР диагностика позволяет в короткие сроки выявить бактериальных и вирусных возбудителей инфекции и подобрать специфическую терапию для профилактики развития заболевания.
В настоящее время среди риккетсиозов группы клещевых пятнистых лихорадок (КПЛ) для России эпидемиологическое значение имеют:
Астраханская пятнистая лихорадка (R. conori var. сaspii);
Клещевой сыпной тиф Северной Азии (R. Sibirica);
Дальневосточный клещевой риккетсиоз (R. Heilongjiangensis)
Астраханская пятнистая лихорадка (астраханская риккетсиозная лихорадка). Возбудитель - R. conori var. сaspii. Переносчик - клещи рода Rhipicephalus pumilio. Эндемичным районом является Астраханская область. Важным фактором в очагах астраханской пятнистой лихорадки является высокая пораженность собак клещом Rhipicephalus pumilio. С собак клещ переползает на человека. Заболеваемость отмечается с апреля по октябрь, пик заболеваемости приходится на июль – август. Инкубационный период составляет от 2 дней до 1 месяца. Начало заболевания острое, проявляется лихорадкой. Первый признак заболевания – первичный аффект в месте присасывания клеща (на нижних конечностях, туловище). В последующем - распространенная папулезно-розеолезная сыпь (на туловище, верхних и нижних конечностях).
Клещевой сыпной тиф Северной Азии (североазиатский клещевой риккетсиоз, клещевой сыпной тиф Азии, клещевой риккетсиоз Сибири), вызван R. Sibirica. Природные очаги этого заболевания распространены в Сибири и на Дальнем Востоке России (Красноярский, Алтайский, Хабаровский, Приморский края; Амурская область, Тыва, Хакассия), в Казахстане, Монголии и Китае. Более 80% заболеваний отмечается в Алтайском и Красноярском краях. Резервуаром возбудителя в природе являются клещи и различные мелкие грызуны. Переносчиками R. sibirica служат клещи рода Dermacentor (D. nuttalli, D. sitvarum, D. marginatus, D. reticulates) и Haemophysalis (H. concinna). В отсутствие переносчика болезнь не является контагиозной. Механизм передачи возбудителя – трансмиссивный. Инкубационный период составляет 3-7 дней. Заболевание проявляется триадой признаков: первичный аффект на месте укуса клеща, сыпь и лихорадка. Заболевание продолжается от 7 до 12 дней. Осложнения редки. Рецидивы болезни не описаны.
Дальневосточный клещевой риккетсиоз, вызываемый R. heilongjiangensis чаще всего встречается предгорной зоне Республики Алтай: в Майминском районе, городе Горно-Алтайске и Чойском районе. Переносчиком служат иксодовые клещеи Haemaphysalis concinna и Ixodes persulcatus. Заболеваемость отмечается с апреля по июль. Характерен короткий инкубационный период (1–8 дней), температура (37,5–39,5°С), слабость, выраженная интоксикация, первичный аффект с очагом некроза, регионарный лимфаденит и сыпь. Экзантема при клещевом риккетсиозе, вызываемом R. Heilongjiangensis проявляется редко.
Заболевание характеризуется острым началом, длительной лихорадкой, с повышением температуры до 39,5-40С, появлением в разгар заболевания розеолезной сыпи, резкими изменениями нервной и сердечно-сосудистой систем, тифозным статусом и наличием осложнений.
Подготовка
1. Спинномозговая жидкость: условия подготовки определяются лечащим врачом.
2. Смывы с первичного аффекта: условия подготовки определяются лечащим врачом.
Исследование предназначено для диагностики и профилактики заболеваний, вызванных группой клещевых пятнистых лихорадок (КПЛ), Rickettsia Spotted fever group (SFG), путем качественного определения ДНК Rickettsia spp.
Риккетсиозы – это группа острых инфекционных заболеваний, вызванных внутриклеточными паразитами, занимающими промежуточное положение между вирусами и бактериями, с преимущественным трансмиссивным механизмом передачи. Распространение риккетсий среди людей происходит кровососущими членистоногими (вшами, блохами, клещами). Возможно заражение от других теплокровных (грызуны, ежи, собаки). Реже, при употреблении сырого козьего молока. Заболеваемость отмечается в весенне-летне-осенний период. Очаги распространения на территории Приморского края, Восточной и Западной Сибири, Дальнего Востока, в Астраханской области и Крыму, а также на сопредельных с ней государствах (в Казахстане, Монголии и Китае.).
В настоящее время среди риккетсиозов группы клещевых пятнистых лихорадок (КПЛ) для России эпидемиологическое значение имеют:
Астраханская пятнистая лихорадка (R. conori var. сaspii);
Клещевой сыпной тиф Северной Азии (R. Sibirica);
Дальневосточный клещевой риккетсиоз (R. Heilongjiangensis).
Астраханская пятнистая лихорадка (астраханская риккетсиозная лихорадка). Возбудитель - R. conori var. сaspii. Переносчик - клещи рода Rhipicephalus pumilio. Эндемичным районом является Астраханская область. Важным фактором в очагах астраханской пятнистой лихорадки является высокая пораженность собак клещом Rhipicephalus pumilio. С собак клещ переползает на человека. Заболеваемость отмечается с апреля по октябрь, пик заболеваемости приходится на июль – август. Инкубационный период составляет от 2 дней до 1 месяца. Начало заболевания острое, проявляется лихорадкой. Первый признак заболевания – первичный аффект в месте присасывания клеща (на нижних конечностях, туловище). В последующем - распространенная папулезно-розеолезная сыпь (на туловище, верхних и нижних конечностях).
Клещевой сыпной тиф Северной Азии (североазиатский клещевой риккетсиоз, клещевой сыпной тиф Азии, клещевой риккетсиоз Сибири), вызван R. Sibirica. Природные очаги этого заболевания распространены в Сибири и на Дальнем Востоке России (Красноярский, Алтайский, Хабаровский, Приморский края; Амурская область, Тыва, Хакассия), в Казахстане, Монголии и Китае. Более 80% заболеваний отмечается в Алтайском и Красноярском краях. Резервуаром возбудителя в природе являются клещи и различные мелкие грызуны. Переносчиками R. sibirica служат клещи рода Dermacentor (D. nuttalli, D. sitvarum, D. marginatus, D. reticulates) и Haemophysalis (H. concinna). В отсутствие переносчика болезнь не является контагиозной. Механизм передачи возбудителя – трансмиссивный. Инкубационный период составляет 3-7 дней. Заболевание проявляется триадой признаков: первичный аффект на месте укуса клеща, сыпь и лихорадка. Заболевание продолжается от 7 до 12 дней. Осложнения редки. Рецидивы болезни не описаны.
Дальневосточный клещевой риккетсиоз, вызываемый R. heilongjiangensis чаще всего встречается предгорной зоне Республики Алтай: в Майминском районе, городе Горно-Алтайске и Чойском районе. Переносчиком служат иксодовые клещеи Haemaphysalis concinna и Ixodes persulcatus. Заболеваемость отмечается с апреля по июль. Характерен короткий инкубационный период (1–8 дней), температура (37,5–39,5°С), слабость, выраженная интоксикация, первичный аффект с очагом некроза, регионарный лимфаденит и сыпь. Экзантема при клещевом риккетсиозе, вызываемом R. Heilongjiangensis проявляется редко.
Заболевание характеризуется острым началом, длительной лихорадкой, с повышением температуры до 39,5-40С, появлением в разгар заболевания розеолезной сыпи, резкими изменениями нервной и сердечно-сосудистой систем, тифозным статусом и наличием осложнений.
Подготовка
Кровь венозная: забор крови для исследования производят не менее чем через 3 часа после последнего приема пищи. За сутки до взятия крови следует исключить прием алкоголя, занятия спортом, посещение бани, сауны. Если вы принимаете лекарства, обязательно проконсультируйтесь с врачом по поводу целесообразности выполнения анализа либо временной отмены приема препарата. Если отменить прием лекарств невозможно, необходимо проинформировать лабораторию.
ПЦР с детекцией в режиме реального времени. Метод основан на амплификации искомых фрагментов ДНК Rickettsia sibirica/Rickettsia heilongjiangensis с детекцией в режиме реального времени.
Тест предназначен для качественного дифференциального определения ДНК Rickettsia sibirica/Rickettsia heilongjiangensis в гомогенизате клеща.
Краткая характеристика исследования клеща для выявления ДНК возбудителей клещевых риккетсиозов
Кровососущие иксодовые клещи являются переносчиками возбудителей многих заболеваний. Любое заболевание, возникшее в результате укуса клеща, следует рассматривать как потенциальную микст-инфекцию. Ранняя диагностика микст-инфекций важна для выбора правильной стратегии лечения.
Клещевой риккетсиоз (КР) наряду с клещевым энцефалитом (КЭ) и иксодовыми клещевыми боррелиозами (ИКБ) входит в тройку наиболее распространенных трансмиссивных инфекций, передаваемых через присасывание иксодовых клещей в России. Клещевой риккетсиоз – облигатно-трансмиссивная природно-очаговая инфекция.
Пути заражения и симптомы риккетсиоза
Заражение людей риккетсиями обусловлено присасыванием клещей – переносчиков риккетсий. Во входных воротах (на месте присасывания) происходит размножение возбудителя в эпителиальных клетках с формированием первичного аффекта. Далее риккетсии распространяются лимфогенно, что может сопровождаться лимфангоитом и регионарным лимфаденитом. Дальнейшее гематогенное распространение возбудителя сопровождается генерализованным поражением эндотелия сосудов, в том числе формированием различной выраженности эндоваскулитов и тромбангиитов в сосочковом слое кожи (сыпь). Патологический процесс при риккетсиозах обусловлен размножением риккетсий в клетках-мишенях (главным образом в эндотелиальных клетках кровеносных сосудов, особенно мелких) и сосудорасширяющим действием токсических субстанций, что вызывает значительные изменения центральной нервной системы и расстройства кровообращения. Имеет место поражение сосудистого аппарата, преимущественно прекапилляров, капилляров и артериол с развитием десквамативно-пролиферативного тромбоваскулита и образованием специфических гранулем в местах паразитирования риккетсий. Этот процесс проявляется постепенным, по мере внутриклеточного размножения риккетсий и гибели инфицированных клеток, развитием инфекционно-токсического синдрома.
Инкубационный период колеблется от 2 до 7 дней, большей частью равен 3-6 дням. В месте присасывания клеща развивается болезненность, гиперемия и небольшой инфильтрат с некротической корочкой в центре, увеличение регионарных лимфатических узлов. Могут отмечаться небольшая слабость, озноб, ломота в суставах, снижение аппетита. Начало заболевания острое, у части больных наблюдают продромальный период, в котором описаны общая слабость и разбитость, боль и ломота в мышцах, костях, суставах, пояснице, небольшое повышение температуры, катаральные изменения в глотке и верхних дыхательных путях. В этом периоде уже выражено специфическое поражение кожи в месте внедрения возбудителя.
На 2-3-й день продромы развивается клиническая картина болезни: повышение температуры тела до 40 ºС, лихорадка, головная боль, бессонница, озноб, ломота и боли во всем теле, могут быть тошнота и рвота. Продолжительность лихорадки 3-18 дней, в среднем 8 дней. На 2-4-й день болезни появляется сыпь. Она является характерным признаком клещевого риккетсиоза и ее раннее появление облегчает клиническую диагностику. Гистология сыпи сходна с сыпнотифозной. Высыпания начинаются с конечностей, характерно наличие сыпи на ладонях и подошвах. Сыпь в течение 1,5-2 суток распространяется на туловище, иногда и на лицо. Имеет вид крупных розеол и папул ярко-розового цвета. Размеры варьируют от мелких элементов величиной с булавочную головку до крупных, размером в 2-3 мм в поперечнике. Иногда сыпь переходит в петехиальную. Типичны локализация сыпи на разгибательных поверхностях и ее обилие на нижних конечностях. Наблюдают медленное угасание сыпи и наличие пигментации на месте ее исчезновения. Наиболее характерны изменения со стороны сердечно-сосудистой системы, выражающиеся в брадикардии и понижении артериального давления. Изменения нервной системы заключаются в резкой головной боли, миалгиях, артралгиях, нарушении сна и аппетита.
Во время лихорадочного периода наблюдается снижение гемоглобина на 15%, уменьшение количества эритроцитов и тромбоцитов.
Особенности течения риккетсиоза у детей
У детей болезнь протекает в более острой форме, но сравнительно легче, чем у взрослых. Особенно тяжело переносят клещевой риккетсиоз пожилые люди. По степени тяжести заболевания различают: тяжелую, среднюю и легкую форму. Тяжелую форму характеризует более длительный лихорадочный период, значительная интоксикация организма, температурные величины, достигающие 41 градуса, более выраженная симптоматика со стороны сердечно-сосудистой и нервной системы, могут быть осложнения в виде неврита, миокардита, бронхита, пиелонефрита и др. Общая клиническая картина клещевого риккетсиоза, из-за многообразия его форм, может различаться и течением болезни, и симптоматикой. Для назначения эффективного лечения очень важна верная диагностика заболевания.
С какой целью проводят исследование клеща для выявления ДНК возбудителей клещевых риккетсиозов
Тест проводится с целью определения наличия в клеще специфических фрагментов ДНК риккетсий (Rickettsia sibirica/Rickettsia heilongjiangensis) – возбудителей риккетсиоза, переносчиком которой являются клещи.
Читайте также: