Экспресс тест на пироплазмоз у собаки

Обновлено: 27.03.2024

Пироплазмоз собак является значимым заболеванием, передающимся клещами и вызываемый различными видами простейших рода Babesia. Хотя это заболевание встречается во всем мире, данные, относящиеся к заболеванию в Европе, собирались на протяжении многих лет. Эти данные привели к росту публикаций и увеличили наше знание об этих простейших паразитах. Как большие, так и малые формы видов Babesia (B. canis, B. vogeli, B. gibsoni, и B. microti-like изоляты, также называемые "B. vulpes" и "Theileria annae") инфицируют собак в Европе и их географическое распределение, передача, клинические симптомы, лечение и прогноз широко варьируют для каждого вида. Целью этого обзора является обеспечение практикующих ветеринаров практическими рекомендациями по диагностике, лечению и предотвращению пироплазмоза собак в Европе. Мы надеемся, что эти рекомендации ответят на наиболее часто задаваемые вопросы, задаваемые практикующими ветеринарами.

Введение

В конце 19 века румынский врач Виктор Бабеш, наблюдал микроорганизмы в эритроцитах коров и овец с гемоглобинурией. Эти микроорганизмы были позднее названы Babesia bovis и Babesia ovis, соответственно, а род был назван Babesia , в честь первооткрывателя [1]. Вскоре после этих наблюдений у жвачных появились первые описания бабезиозной инфекции у собак, в Италии (1895) [2]. В настоящее время эти протозойные заболевания встречаются по всему миру[3, 4]. Паразиты этого рода первично передаются через укусы клещей и как таковые могут заражать многие виды домашних и диких животных, а также человека [5]. Эта ассоциация возникла как побочный продукт адаптации клещей к питанию кровью. Неудивительно, что собаки являются одной из мишеней Babesia с различными видами Babesia, инфицирующих собак и вызывающих бабезиоз собак (первично названный пироплазмозом собак).

Клещи с твердым покровом являются основными переносчиками видов Babesia ; в теле клеща виды Babesia подвергаются половой коньюгации и спорогонии, как части их жизненных циклов. Эти стадии происходят в просвете кишечника, а затем в пределах haemocoel клеща. Питание кровью будет, в конечном итоге, приводить к передаче спорозоидов из слюнных желез клеща их новому позвоночному хозяину, после чего протозойный жизненный цикл завершается бесполой репликацией (мерогонией) в красных кровяных клетках, где паразиты находятся в виде мерозоитов.

Обзор

Традиционно, морфология простейших (мерозоитов пироплазм) внутри эритроцитов был использована как главный таксономический признак. Эта оценка, сделанная при помощи микроскопическрго исследования мазка крови, может быть использована для классификации этих простейших на крупные (например, Babesia canis) и малые формы (например, Babesia gibsoni). Впоследствии, молекулярных методы позволили выявить несколько видов Babesia, которые могут заражать собак.

Большие виды Babesia , ранее рассматриваемые как B. Canis, в настоящее время включают B. canis, Babesia rossi и Babesia vogeli в качестве отдельных видов [6]. Их идентичная морфология привела к тому, что B. rossi и B. vogeli рассматривались как подвиды B. canis, хотя значительные различия в клинических проявлениях, географическом распределении и специфичности переносчиков заставляют нас сейчас считать иначе [4, 7, 8, 9, 10]. Вдобавок, большая форма Babesia , называемая Babesia bigemina, описана в Северной Каролине в США [11].

До сих пор, описаны только три мелких вида Babesia с клиническим значением: B. gibsoni, Babesia conradae [12, 13], а также недавно сообщалось о "Babesia vulpes" [14] предложенной Baneth et al. [14] для ранее названной Babesia "Spanish dog isolate", Babesia "microti-like", "Babesia (Theileria) annae", и Babesia cf. microti [15, 16], на основании их природных хозяев и на очевидном отсутствии какой -либо преэритроцитарной стадии инфекции в лимфоцитах.В данном обзоре мы будем использовать Babesia microti-like для описания этой инфекции.

Табл 1 Географическое распределение, основные переносчики и приблизительный размер видов Babesia в мазках крови.

Распостранен на большей части Европы (от Португалии до северо-восточной и Восточной Европы), и особенно распространен в холодных и влажных климатических условиях. Преобладание в Центральной Европе и уменьшение распостраненности в средиземноморском бассейне

Всё о ваших питомцах

Уход и содержание

Кастрация и стерилизация

Для начинающих собаководов

Уход и содержание

Анализы и диагностика

Выбор и покупка

Уход и содержание

Клетки и аксессуары

Интересное о хомяках

Окрасы и породы

Уход и содержание

Интересное о шиншиллах

Уход и содержание

Интересное о крысах

Уход и содержание

Уход и содержание

Интересное о мышах

Виды и породы попугаев

Выбор и покупка

Уход и содержание

Клетки и аксессуары

Интересное о попугаях

Уход и содержание

Интересное о совах

Оборудование для аквариума

Уход за аквариумом

Анатомия и физиология



Как проходит диагностика на пироплазмоз у собак, анализы крови

Многие заболевания собак не только ухудшают их общее самочувствие, но и могут стать причиной летального исхода, поэтому при появлении первых же признаков неблагополучия, стоит показать домашнего любимца ветеринарному врачу. Одним из самых коварных недугов является пироплазмоз, запущенность которого грозит смертью животного в течение одной недели. Что же из себя представляет болезнь, на какие её симптомы нужно обращать внимание и что стоит знать об основных анализах — об этом далее.

Что такое пироплазмоз

Пироплазмоз (или бабезиоз) — тяжёлое заболевание собак, вызванное укусом иксодового клеща рода Derrnacentor. Сам возбудитель недуга принадлежит к ряду простейших кровепаразитов рода Babesia, которые переносятся вместе с указанными насекомыми. В большинстве случаев иксодовые клещи встречаются в средней полосе Европейской части России, в Западной Сибири, на Урале, в Украине, на Кавказе, где являются основными переносчиками недуга.

Заражение собаки происходит трансовариальным путём, преимущественно в тёплое время года, с появлением первой растительности. Весной больных животных больше всего, а летом и зимой их практически нет. К осени численность поражённых особей существенно снижается, а из подтверждённых случаев большинство диагностировано у представителей охотничьих и служебных пород.

Как проявляются симптомы

Первый симптом интоксикации организма после укуса клеща — повышение температуры тела животного и связанные с этим апатия и отказ от пищи. Эти признаки проявляются практически сразу после отпадания насекомого.

Однако не стоит забывать о двух возможных вариантах течения болезни: остром и хроническом, для каждого из которых характерными будут свои симптомы. В первом случае это:

  • резкое повышение температуры тела до +41…+42 °C, с её сохранением в течение 2-3 суток;
  • учащённое, тяжёлое дыхание;
  • гиперемирование слизистых оболочек, с их постепенным пожелтением и анемией (в особо тяжёлых случаях желтеют даже зубы);
  • ослабление пульса, его нитевидность (до 36–48 ударов в минуту);
  • развитие гемоглобинурии (развивается на 2–5 день после укуса насекомого);
  • затруднение передвижения животного, с последующим развитием пареза и паралича;
  • развитие атонии кишечника (в течение 3–7 суток), с постепенным снижением температуры до +36…+35 °C;
  • потемнение мочи.

Симптомы пироплазмоза у собаки

Хроническое течение заболевания характеризуется повышенной резистентностью организма, преимущественно у дворовых и уже переболевших ранее животных. При очередной интоксикации, температуры тела повышается до +40…+41 °C, сохраняется только в первые 2-3 дня после заражения, а потом стабилизируется. При любых физических нагрузках больное животное быстро утомляется, теряет аппетит, а периоды улучшения сменяются депрессией. Расстройства наблюдаются и со стороны желудочно-кишечного тракта: запоры чередуются с поносами. Наиболее характерными симптомами хронического пироплазмоза называют прогрессирующую анемию и кахесию. В отличие от острой формы, её течение растянуто на 3–6 недель, а восстановительный период занимает до трёх месяцев.

Знаете ли вы? Собаки способны определить онкологию человека по одному лишь запаху от него. Впервые подобные исследования были проведены в 1989 году, а среди участвующих собак присутствовали 2 немецкие и 1 австралийская овчарки, лабрадор-ретривер.

Как проходит диагностика пироплазмоза у собак

Диагностика пироплазмоза у собак часто проводится только путём осмотра животного и оценки имеющихся симптомов недуга, но крупные ветеринарные клиники предлагают владельцам более информативное обследование, включающее общий и биохимический анализ крови и даже экспресс-тест на наличие в ней возбудителя бабезиоза. Основная задача дифференциальной диагностики отличить пироплазмоз от похожих по симптомам чумы, лептоспироза, инфекционного гепатита, а сделать это проще всего путём лабораторной оценки взятых биообразцов.

Диагностика заболевания

Общий анализ крови

Основным показателем наличия болезни при оценке результатов общего (клинического) анализа крови является снижение численности тромбоцитов, хотя не менее информативными будут и другие маркеры:

  • лейкоциты — обычно повышены в 2 раза и больше;
  • лимфоциты — всегда снижены;
  • эритроциты — понижены;
  • гемоглобин — ниже нормы;
  • гематокрит — низкий.

Резкое понижение эритроцитов напрямую связано с появлением симптомов гемоглобинурии. При хроническом течение болезни и сразу после рецидива также отмечается пониженное содержание эритроцитов.

Экспресс тест на определение пироплазмоза (мазок крови на обнаружение пироплазм) проводится в основном в крупных ветеринарных клиниках и далеко не всегда предоставляет достоверные результаты. При возможности лучше перепроверить данные с помощью ПЦР-анализа, как более чувствительного и точного метода исследования.

Важно! Положительный результат диагностики при отсутствии ярко выраженной клинической картины недуга не указывает на развитие бабезиоза в его острой форме. Скорее всего, болезнь находится в хронической форме или животное является его носителем, с уже выработанным ранее иммунитетом к возбудителю.

Биохимический анализ крови

Биохимические показатели крови, у больных пироплазмозом собак указывают на повышение щелочной фосфатазы и билирубина больше чем в 2 раза, снижение коэффициента де Ритисса, повышение показателей АСТ и АТЛ. Если заразилось животное с почечной недостаточностью, все указанные маркеры будут выше нормы в 3-4 раза, что существенно ухудшает самочувствие питомца и усложняет процесс его лечения.

Анализ крови при пироплазмозе

Помимо крови, на лабораторный анализ часто отправляют образцы мочи больной собаки. Результаты, подтверждающие наличие упомянутой проблемы будут следующими:

  • незначительное присутствие белка (возможно, до 0,01 г/л при его полном отсутствии в норме);
  • наличие билирубина и гемоглобина;
  • повышение лейкоцитов, в 3-4 раза по сравнению с нормой;
  • наличие эритроцитов, которых в моче здоровой собаки быть не должно.

Кроме того, в норме уровень рН всегда свидетельствует о кислой среде, но при воздействии на организм токсинов клеща она становится щелочной, что так же будет заметно во время оценки результатов анализов.

Знаете ли вы? Собаки практически не потеют. Небольшие частицы пота выделяются только через подушечки лап и кожу на отдельных участках морды, а вот основную функцию охлаждения организма в сильную жару берёт на себя язык.

Чтобы избежать заражения домашнего любимца пироплазмозом желательно не выгуливать его в высокой траве и каждый раз перед прогулкой обрабатывать специальным спреем или же использовать другие инсектицидные препараты. Если же избежать неприятных последствий не удалось — важно своевременно начать лечение, обратившись к ветеринарному врачу. Так вы не только сохраните здоровье собаке, но и спасёте ей жизнь.


Несмотря на большое количество клинических случаев и неконтролируемых экспериментальных исследований, доступно мало надежных научных данных о лечении пироплазмоза собак; Таблица 3 отображает те, которые используются в настоящее время у собак. Имидокарба дипропионат является препаратом выбора при пироплазмозе собак, вызванном большими видами Babesia. Для лечения рекомендуется одна доза 6,6 мг/кг внутримышечно (IM) или подкожно (SC). Хотя некоторые авторы рекомендуют дополнительную дозу имидокарба (через 15 дней для B. canis и . B vogeli), если собака не отвечает на первую дозу адекватно, может быть более разумным пересмотреть диагноз. Кроме того, этот подход не является методом выбора для лечения мелких видов бабезий ( B.. gibsoni и B. microti-like .). Наиболее часто описанными побочными эффектами, связанными с этим препаратом, являются боли в месте инъекции и признаки холинергические симптомы (анорексия, гиперсаливация, слезотечение, боли в животе, рвота и диарея), которые обычно исчезают довольно быстро, хотя эти холинэргические эффекты могут быть смягчены путем премедикации атропином или гликопиролатом [12, 16, 105, 106, 107]. Токсический эффектом от передозировки имидокарба дипропионата является нефротоксичность.

Табл 3

Сочетание atovaquone и азитромицина является единственным методом лечения, которое,как было доказано, уменьшает паразитемию B. gibsoni ниже предела обнаружения методом ПЦР. Atovaquone является противопаразитарным препаратом, который ингибирует действие цитохрома b. Наиболее часто используемая доза atovaquone составляет 13,5 мг/кг, вводимая перорально (PO) каждые 8 ч с жирной пищей (для максимального всасывания лекарственного средства) и в сочетании с азитромицином (в дозе 10 мг/кг, РО) в течение десяти дней. Эта комбинация также может быть эффективной при лечении инфекций,вызываемых другими мелкими видами бабезий. типа B. conradae [108] и, вероятно, может быть полезна при лечении инфекции, вызываемой B. microti-like Тем не менее, в некоторых случаях сообщается о более низкой эффективности лечения atovaquone [102, 108, 109, 110, 111, 112]. В последнее время, использование двух доз внутримышечно введенных доз buparvaquone по 5 мг/к с интервалом 48 ч продемонстрировало хорошую клиническую эффективность у собак, естественно инфицированных B. microti-like в Испании, с результатами превосходящими те, которые были достигнуты при применении atovaquone [113].

Диминазен также представляется эффективным против B. canis, когда назначается внутримышечно в однократной дозе 3,5 мг/кг. Однако, он не имеет такую же эффективность против B. gibsoni, хотя он снижает паразитемию, заболеваемость и смертность. Побочные эффекты включают неврологические нарушения, которые могут быть тяжелыми при передозировке. Его использование в настоящее время ограничивается клиническими случаями, рефрактерными к другим методам лечения [114, 115], и он обычно не используется в Европе. Использование сочетания клиндамицина, диминазена и дипропионата имидокарба может быть перспективным при лечении B. gibsoni, по сравнению с комбинацией atovaquone и азитромицин [116]

Антибиотики не является методом выбора при лечении пироплазмоза. Тем не менее, доксициклин был описан как уменьшающий тяжесть клинических признаков и ассоциирован со снижением заболеваемости и смертности от инфекций, вызываемых B. сanis и B. gibsoni [117, 118]. Наиболее часто используемой дозой является 10 мг/кг/день, назначаемая перорально или (изредка) внутривенно . В случае рвоты, рекомендуется разделить суточную дозу на 5 мг/кг каждые 12 ч [117].

Клиндамицин использовался в лечении инфекции, вызываемой B. gibsoni. в дозе 25 мг/кг, назначаемой перорально каждые 12 ч в течение 14 дней, что вызывало ослабление клинических признаков и лабораторных аномалий [119]. Важно помнить, что одни антибиотики не ликвидируют инфекцию. Однако комбинации различных антибиотиков имеют некоторую эффективность в лечении собак, зараженных B. gibsoni. Примеры включают в себя сочетание клиндамицина (11 мг/кг каждые 12 ч. перорально, метронидазола (15 мг/кг каждые 12 ч. перорально), и доксициклина (5 мг/кг каждые 12 ч. перорально); или энрофлоксацина (2,5 мг/кг каждые 12 ч. перорально)), метронидазола (5-15 мг/кг каждые 12 ч. перорально)), и доксициклина (7-10 мг/кг каждые 12 ч. перорально)) [118, 120]. В целом, из-за скудных научных доказательств эффективности антибиотиков при лечении бабезиоза собак, их использование при этих заболеваниях следует ограничить.


Другие методы лечения, использовавшиеся с переменным успехом для лечения пироплазмоза у собак, включают сульфат quinuronium, раствор трипановой сини и пентамидин; экспериментальные методы лечения включают artesunate, растительные экстракты или клещевые пептиды [114, 121, 122, 123, 124, 125].

Существуют ли другие поддерживающие методы лечения, которые можно использовать при пироплазмозе собак?

Поддерживающее лечение необходимо только для собак, поступивших для стационарного лечения. Поддерживающая терапия обязательна при умеренной или тяжелой формах пироплазмоза собак. Трудно охарактеризовать процент случаев, когда нужна поддерживающая терапия, который варьируется в зависимости от вида бабезий, вызвавших заболевание у собаки. У обезвоженных или гиповолемичных собак показано использование внутривенных кристаллоидных жидкостей, вместе с коррекцией электролитных и кислотно–основных нарушений. Инфузионная терапия также имеет важное значение для поддержания объема циркулирующей крови и достаточной перфузии органов, диуреза и профилактики внутрисосудистой агглютинации эритроцитов в капиллярах [10, 126]. У собак с клиническими признаками, связаными с анемией, должны проводиться переливания эритроцитарной массы ; альтернативно, может применяться синтетический гемоглобин. Собакамс синдромом диссеминированного внутрисосудистого свертывания или нарушениями свертываемости крови могут потребоваться переливания плазмы.

. Однако, поскольку нет лабораторных тестов или гематологических параметров, позволяющих врачу решить, действительно ли необходимо иммуносупрессирующее лечение, в большинстве таких случаев достаточен короткий курс лечения (десять или менее дней) для лечения вторичной IMHA или тромбоцитопении. Более того, уменьшение дозы может быть осуществлено более быстрыми темпами, чем обычно, когда существуют первичные иммуннообусловленные нарушения. Другие иммуносупрессивные препараты не показали такой же эффективности и поэтому не рекомендуются.Собаки, ранее получавшие иммуносупрессирующие препараты в течение определенного периода времени до лечения пироплазмоза собак не имеют такой хороший клинический ответ и могут быть предрасположены к другим инфекциям и/или рецидивам заболевания [4, 10, 126]. Тромбоэмболия легочной артерии является частой причиной смерти у собак с IMHA. Следовательно, гепарин, ацетилсалициловая кислота или клопидогрель могут использоваться для профилактики тромбозов у собак с IMHA [129].


Многие другие вспомогательные методы лечения могут быть полезны в зависимости от клинических симптомов и/или лабораторных нарушений, как вызванных пироплазмозом собак, так и возникшими в результате применения антипротозойных средств. Например, противорвотные средства должны быть использованы для борьбы с рвотой или кислородная терапия должна быть использована при наличии дыхательной недостаточности [126, 130].

Каков ожидаемый клинический ответ после лечения пироплазмоза собак ?

Большинство собак, зараженных большими бабезиями,(B. canis и B. vogeli) имеют клиническое улучшение в течение 1-7 дней после определенного антипротозойное лечение, хотя некоторые собаки не будут реагировать, пока не прошло более 15 дней. Собаки, зараженныеB. canis и B. Vogeli, как правило, демонстрируют полное восстановление после лечения [90, 131]. В целом, клинический ответ хороший и более быстрый (24-48 ч) у собак, инфицированных большими видами Babesia, чем малыми [4, 10]. Однако, в недавнем исследовании сообщалось о высокой смертности (53 %, 8 из 15) у собак с пироплазмозом, вызванным B. canis , в течение первых 24-48 ч после первых клинических проявлений и лечения [89]. При инфекции, вызванной B. canis , неблагоприятный исход и смертность, были ассоциированы с умеренной анемией, выраженной тромбоцитопенией, слабой до умеренной лейкопенией, гиперлактатемией, умереным повышением фосфатов в сыворотке крови и концентрации триглицеридов и умеренном снижением уровня общего белка сыворотки крови [89].

Некоторые собаки, инфицированные B. gibsoni и лечившиеся atovaquone и азитромицином не демонстрируют рецидив заболевания, а некоторые остаются ПЦР-негативными в течение нескольких лет. Однако, собаки, которые оставались инфицированными B. gibsoni после лечения, могут демонстрировать разную клиническую картину. Они могут демонстрировать полное ичезновение анемии, без клинических рецидивов после стресса, хотя иногда, слабая тромбоцитопения или гипергаммаглобулинемия сохраняется. Для некоторых собак, клинические признаки могут полностью исчезать, но умеренная анемия, тромбоцитопения или гипергаммаглобулинемия будет сохраняться. Наконец, у некоторых собак, клиникопатологические аномалии могут исчезать, но могут повторно появляться в стрессовых ситуациях, что особенно распространено у собак со спленэктомией [102, 132].

В общем, имеется мало информации о клиническом ответе у собак, зараженных B. microti-like. Можно предположить, что их клинический ответ будет аналогичен описанному для собак, инфицированных B. gibsoni, вероятно, из-за отсутствия каких-либо действительно эффективного лечения [16]. Однако азотемия, как сообщается, является основной причиной смерти для собак, зараженных B. microti-like с уровнем смертности 22 % [86], хотя преренальная азотемия не была полностью исключена. Кроме того, недавнее исследование, проведенное в том же регионе, не дало те же результаты [35]. В общем, эти собаки имеют очень плохой ответ на протоколы с использованием имидокарба дипропионата [113].Рассматриваются другие терапевтические альтернативы, например, комбинации atovaquone или buparvaquone с азитромицином. У большинства собаки, леченных этой комбинацией, наблюдается тенденция к благоприятному начальному клиническому ответу [113], но необходимы дальнейшие исследования для оценки и сравнения интервалов рецидивов по различным протоколам. Таким образом, последующие анализы крови (клинический анализ крови и биохимический профиль) необходимы до нормализации гематокрита, концентрации тромбоцитов и состояния печени/почек.. Это особенно важно для спленэктомированных собак или собак, инфицированных B. gibsoni или B. microti-like

Исследование мазка крови является полезным диагностическим методом клинической диагностики пироплазмоза собак. Микроскопическая оценка продолжает быть самым простым и наиболее доступным диагностическим тестом для большинства ветеринаров. Однако чувствительность этого метода ниже, чем методов молекулярной диагностики для постановки диагноза на пироплазмоз и в большей степени зависит от вида бабезий, вызвавших заражение собаки. Две формы бабезий, большие (Рис. 2) и малые (Рис. 3, 4), можно дифференцировать с помощью мазка крови. Хотя световая микроскопия высокоспецифична и может быть использована для диагностики большинства больных собак, зараженных большими формами бабезий (например, B. canis) [4,84], она реже выявляет инфекции, вызываемые B. vogeli [84]. Для диагностики этой инфекции более чувствительны молекулярные , основанные на ПЦР-методы, [93]. Мелкие пироплазмы (В. gibsoni, В. microti-СП.) трудно наблюдать с помощью световой микроскопии, которая имеет относительно плохую до умеренной чувствительность [35], и необходима экспертиза.

Фото 2 . Микрофотография, демонстрирующая большую форму бабезий (B. Canis) в эритроцитах собаки.Scale-bar: 10 μm

Фото 3 . Микрофотография, демонстрирующая малую форму бабезий (B. gibsoni, стрелка) в эритроцитах собаки.Scale-bar: 10 μm

Фото 4 . Микрофотография, демонстрирующая малую форму бабезий ((B. microti-like, стрелка) в эритроцитах собаки.Scale-bar: 10 μm

Поэтому наблюдение мазка должно быть “первым шагом” диагностической оценки , с отрицательными результатами, требующими переоценку методом ПЦР, используя кровь или ткань селезенки (Изобр. 5). Кроме того, чтобы определить вид пироплазмморфологического наблюдения недостаточно, и необходимы молекулярные методы, такие как ПЦР и секвенирование. Свежая кровь всегда рекомендуется для мазков.

Кроме того, наблюдение за большими бабезиями в капиллярных мазках крови , таких, как полученные из уха или когтя, по видимому, более информативно, благодаря большей численности паразитов в этом типе образцов.[10, 88]. Предел обнаружения паразитов в тонком мазке крови , по видомому, соответствует паразитемии 0,5 % [88].

Собаки с клиническими симптомами и клиникопатологическими нарушениями, совместимыми с пироплазмозом собак.

1 Важно различить большие и малые формы, вследтствие того факта, что клинический подход, лечение и прогноз сильно различаются.

Какие серологические методы могут быть использованы для диагностики бабезиоза?

Как мы должны интерпретировать положительный серологический результат при диагностике пироплазмоза собак? Существуют ли серологические перекрестные реакции между различными видами пироплазм?

Интерпретация положительного результата при диагностике пироплазмоза собакс использованием серологического метода осложняется перекрестной реактивностью между различными видами. В целом, существует значительная перекрестная реактивность между различными видами пироплазм, особенно более филогенетически родственных видов. Например, перекрестная реактивность для больших видов пироплазм (B. canis и B. vogeli)) может привести к совпадению уровня антител для разных видов. Перекрестные реакции также могут существовать между мелкими видами пироплазм (В. gibsoni) и крупными видами (B. canis) [96] , а также между мелкими видами пироплазм (B. gibsoni и B. microti-like) или между крупными пироплазмами.( B. canis, B. vogeli и B. rossi) [28]. По этой причине положительный результат будет свидетельствовать о контакте с пироплазмами,но не может точно указать на разновидность пироплазм. Положительный серологический результат тоже может свидетельствовать о прошлой или текущей инфекции. Несмотря на нечастое использование в клинической практике, молекулярные методы обеспечивают более информативную диагностику.

Может ли серонегативная собака быть инфицированной пироплазмами?

Вполне возможно для собаки быть серонегативной и зараженной пироплазмозом, поскольку инфекции видов, таких как B. canis, проявляются остро [4, 97]. Следовательно, трех- четырехнедельное отставание в постинфекционном антителообразовании будет создавать серологически негативное окно. Поэтому, сероконверсия может быть использована в качестве скринингового метода для подтверждения острой инфекции, вызываемой пироплазмами.. В этих случаях исходные количественные серологические тесты должны быть выполнены при первичном приеме пациентас клиническими признаами и/или лабораторными нарушениями. Впоследствии, количественная серологии должна быть выполнена еще раз через 4-8 недель (см. изобр 5). Средне-высокий положительный уровень антител во время фазы выздоровления (минимум 3-4 недели после заражения) может подтвердить заражение пироплазмозом на момент первичного приема [35]. Однако имеющиеся данные о пользе сероконверсия при пироплазмозе собак ограничены. Сероконверсия нечасто используется в клинической практике.

Почему амплификация ДНК с помощью ПЦР полезна при диагностике пироплазмоза собак? Какие биологические образцы следует выбирать для проведения молекулярной диагностики пироплазмоза собак?

В целом, ПЦР является очень полезной при диагностике пироплазмоза. Во-первых, ПЦР диагностика пироплазмоза более чувствительна, чем прямое исследование мазка крови. Во-вторых, обнаружение ДНК конкретного возбудителя в клинических условиях можно рассматривать как доказательство активной - и, следовательно, продолжающейся - инфекции. Кроме того, в отличие от прямого обнаружения с помощью световой микроскопии или серологического исследования, ПЦР позволяет более надежного идентифицировать вид пироплазм, вызывающий инфекцию у собаки [4]. "ПЦР с генотипированием по методу обратного линейного блоттинга [99, 100] и ПЦР -анализ полиморфизма длины рестрикционных фрагментов[101].

Кроме того, различные гены часто используются для дифференциации между различными видамиBabesia. Как правило, сюда относятся ядерные гены рибосомной РНК [7, 8] и два внутренних транскрибируемых спейсера (ITS1 и ITS2) [7]. Эти молекулярные технологии позволяют нам уточнить диагноз на видовом уровне и тем самым обеспечить более точный прогноз. Наконец, ПЦР-амплификация ДНК может быть полезным методом для мониторинга лечения [102]. В идеале, для проведения молекулярного анализа с использованием ПЦР должна использоваться периферическая кровь, буферизированная этилендиаминтетрауксусной кислотой (ЭДТА. Кроме того, ткань селезенки также может быть полезной, хотя, как указано ниже, этот вид образцов обычно не используется, потому что он предполагает более инвазивную процедуру [4].

Как часто встречаются сопутствующие инфекции у собак, зараженных пироплазмозом ? Какова клиническая значимость сопутствующей инфекции для прогрессирования заболевания?

Сопутствующие инфекции при пироплазмозе не подтверждены документально и редко встречаются у собак. Однако секвенирование и филогенетический анализ наводят на мысль о том, что разнообразие видов пироплазм, которые сопутствующе заражают собак, может быть большим, чем считалось ранее [15, 21]. Исследование, проведенное с 120 испанскими собаками из Галисии и Астурии, с клиническими признаками, совместимыми с пироплазмозом, продемонстрировало наличие B. microti-like у 75 собак (62.5 %), с 15 собаками, положительным на наличие других видов (12 с B. canis и 3 с B. gibsoni) [35]. [35]. Сопутствующие инфекции с другими агентами не были обнаружены, возможно, указывая, что сопутствующие инфекции с другими патогенами не распространены [35]. Кроме того, интересное исследование показало высокий процент сопутствующих инфекций с различными штаммами B. canis у собак из Франции [39].

Как уровень антител меняется после лечения?

В целом, уровень антител к пироплазмам . начинает уменьшаться через три недели после начала лечения и постепенно снижается примерно в течение 160 дней [133]. Результаты титров антител всегда следует интерпретировать с осторожностью, поскольку повышенные уровни антител постоянно коррелируют с персистирующей инфекцией. [134]. Для некоторых видов пироплазм (например, B. gibsoni),), нормально обнаруживать положительные уровни антител после лечения, что затрудняет интерпретацию положительных результатов [111]. Взятые вместе, эти ограничения, наряду с уже описанными для серологических анализов, делают нецелесообразным использование этих методов приемы при последующем наблюдении за болезнью.

Почему применение ПЦР полезно после лечения?

ПЦР является полезной стратегией скрининга учитывая, что многие собаки остаются хронически инфицированы пироплазмами. Их статус хронически инфицированного животного предрасполагает этих собак к рецидиву или к сохранению хронически ненормального - а значит вредного - клинического состояния. При таких обстоятельствах, ПЦР может быть использована для того, чтобы установить, сохраняется ли инфекция или скорее всего устранена. [4, 10]. ПЦР следует проводить до прерывания лечения и приблизительно через 2 мес после завершения лечения, особенно при наличии мелких видов бабезий. Кроме того, поскольку чувствительность ПЦР по выявлению пироплазм в цельной крови менее 100 %, может быть целесообразным выполнение двух последовательных ПЦР-тестов, разделенных, по меньшей мере, 15 днями [102, 111]. Кроме того, паразитарное очищение может быть строго продемонстрировано только если ПЦР проводится с использованием нескольких аспиратов тканей, например, из селезенки, а не только периферической крови [10]. Высокая стоимость несколько тестов селезеночной ПЦР, как правило, ограничивает ее использование в научно-исследовательской сфере и в качестве доказательства в исследованиях терапевтического ответа.

Можно ли вылечить пироплазмоз собак ?

Клиническое излечение и хороший терапевтический ответ с большей вероятностью достигается при наличии бабезий большого размера, чем при наличии мелких видов, последние, как правило, более устойчивы к классическим методам лечения [4]. Используются несколько терапевтических протоколов, направленных на лечение инфекций, вызванных мелкими видами бабезий, хотя паразитологическое выздоровление считается редким. Сохранение B. gibsoni у собак после лечения различными протоколами с использованием клиндамицина, метронидазола, доксициклина, диминазена, имидокарба дипропионата, atovaquone и азитромицина является свидетельством устойчивости этот паразита [111, 112,116, 119].

Могут ли собаки повторно заражаться пироплазмозом ?

Одна и та же собакаможет быть повторнозаражена идентичным видом бабезий или одновременно вторым видом. Хотя клинические последствия повторной инфекции достаточно не определены, в эндемических регионах это возможно у хронически инфицированных собак, всостоянии премуниции, безклинических последствий; это состояние может быть даже полезным в плане защиты от инфекции в будущем[133].

Какую меры контроля клещей могут быть реализованы, чтобы предотвратить пироплазмоз у собак?

Преобладающий акцент в профилактикепироплазмоза собак сделан на контроле клещей. Однако такой подход осложняется экологической природой, связанной с человеком, по крайней мере, некоторых из клещей, участвовующих в передаче пироплазм. Эффективная трансовариальная передача пироплазм в клещах означает, что популяции клещей в эндемичных районах могут оставаться зараженными в течение длительного времени и что собаки в зонах с клещами будут часто становиться повторно инвазированными и в геометрической прогрессии увеличивать популяцию клещей.
Клещевая профилактика должна охватывать весь период, в течение которого клещи активны, в зависимости от уровня риска и образа жизни собак. Эта профилактика может состоять из регулярной проверки собак на наличие клещей владельцами и ветеринарами и регулярного применения акарицидных обработок.

поэтому важно использовать подходящие акарициды,чтобы убивать клещей как можно быстрее, прежде чем выпускаются возбудители заболевания. Для пироплазмоза, даже лучше предотвратить клещей от прикрепления (отпугивание клещей в узком смысле) [137].

Табл 5. Акарициды с доказанной профилактической эффективность против трансмиссии видов Babesia клещами D. reticulatus и R. sanguineus у собак.

a Диагнозом, поставленным молекулярным методом, был пироплазмоз собак .Идентификация на видовом уровне не была проведена. Однако, исследования были выполнены в Южной Италии, поэтому, наиболее вероятным видом Babesia , заразившем собак была B. vogeli

Согласно регистрации этих препаратов в Европе, все они могут убивать уже питающихся клещей до оценки спорогонии видов Babesia в течение 48 часов [138], необходимой для трансмиссии пироплазм собакам, которая начинается после того, как клещ начинает питаться. Различные отчеты документировали эффективность и скорость гибели клещей при естественной инфестации или после экспериметальной инфестации, когда собаки лечились различными доступными эктопаразицидами. В общем, все они полезны, и ветеринар должен делать наилучший выбор для каждой индивидуальной собаки ( стиль жизни, активность вне помещения, работающие собаки, связь собака – человек).

Существуют ли вакцины для профилактики бабезиоза у собак?

Существует несколько коммерчески доступных вариантов вакцин для профилактики пироплазмоза у различных видов животных. Для европейского рынка, вакцина для защиты собак против B. canis доступна и называется Pirodog® (Мериал). Эта вакцина, в состав которой входят растворимые антигены паразита, полученные из супернатанта культуры [140, 141, 142,143, 144], индуцирует частичную защиту для собак, первично вступивших в контакт с B. canis, которая как сокращает продолжительность болезни, так и и уменьшает выраженность клинических признаков. Вакцинация не предотвращает инфицирование, но, по видимому, блокирует начало многих патологических процессов, вовлеченных при этом заболевании; более того, ее применение может привести к более низкой паразитемии. Эту вакцину можно вводить с 5-месячного возраста и требуется ежегодная ревакцинация, но она не защищает перекрестно от других видов пироплазм. В настоящее время вакцины против других видов пироплазм, таких как B. gibsoni, разрабатываются [145, 146].

Имеются ли другие доступные способы предотвращения пироплазмоза собак ?

Заключение

Количество информации о пироплазмозе собак в Европе значительно возросло в последние годы. Настоящее руководство призвано ответить на наиболее распространенные вопросы об этиологии, эпидемиологии и путях передачи, клинических признаках, лабораторных исследованиях, диагностике, лечении и профилактике инфекций, вызванных различными видам пироплазм. Мы также надеемся, что данный обзор будет способствовать пониманию текущего статуса этих заболеваний в Европе. Важно подчеркнуть, что пироплазмоз собак представляет собой группу заболеваний и что многие виды могут заражать собак в Европе. Таким образом, точное обнаружение и распознавание видов имеет решающее значение для выбора правильного лечения и определения наиболее точного прогноза.

Читайте также: