Где сделать квантифероновый тест на туберкулез в инвитро

Обновлено: 24.04.2024

Туберкулёз — одна из самых распространённых инфекционных болезней в мире. Диагностика и лечение данной инфекции, особенно у детей и подростков, сопряжены с определенными трудностями, что приводит к несвоевременному выявлению, бессимптомному течению и прогрессированию инфекции, а также развитию осложнений. Квантифероновый тест является высокочувствительной и высокоспецифичной альтернативой внутрикожных проб (реакция Манту), предназначен для выявления скрытой (латентной) и активной туберкулёзной инфекции посредством определения в крови специфического к инфекции гамма-интерферона.

Этот анализ принимается по сокращённому графику. Это связано с тем, что биоматериал должен попасть в лабораторию в очень короткий срок. Проверьте расписание сокращённого графика приёма на странице вашего отделения. При сдаче вне графика срок выполнения исследования может быть увеличен на 1-3 дня.

Приём и исследование биоматериала

Когда нужно сдавать анализ Квантифероновый тест?

Комплексная диагностика туберкулёзной инфекции в сочетании с данными клинической и рентгенологической картины у детей, лиц из группы риска (медицинские работники, лица с иммунодефицитом или лица, бывшие в контакте с больным ТБ);
Исследование при сомнительном результате внутрикожной пробы Манту (особенно у пациентов, вакцинированных БЦЖ);
При наличии противопоказаний для проведения кожных тестов (кожные заболевания, обострение аллергических или инфекционных патологий).

Подробное описание исследования

Туберкулёз (ТБ, Tb) — хроническое инфекционное заболевание, возбудителем которого является Mycobacterium tuberculosis (микобактерия туберкулёза, МБТ). МБТ может поражать все органы и ткани, но чаще всего туберкулёзная инфекция поражает легкие. Туберкулёз может поражать как взрослых, так и детей.

Трудность диагностики туберкулёза основана на разнообразных вариантах течения инфекции. Выделяют активный туберкулёз (с клиническими проявлениями) и скрытую, или латентную, туберкулёзную инфекцию (ЛТИ). Для ЛТИ характерно присутствие в организме микобактерий туберкулёза, которые можно выявить с помощью специальных лабораторных анализов, однако присутствие МБТ в организме не сопровождаются клиническими и рентгенологическими признаками ТБ-инфекции.

Цель выявления ЛТИ — предотвратить прогрессирование бессимптомной туберкулезной инфекции в активный ТБ и начать лечение на ранних этапах. Самым распространенным методом выявления ЛТИ является туберкулиновая кожная проба (ТКП) или реакция Манту. Благодаря этому тесту определяют инфицирование МБТ, формируют группы риска заболевания ТБ-инфекции и отбирают лица для вакцинации или ревакцинации против туберкулёза. Также с помощью данной пробы диагностируют ТБ у детей. Тем не менее у пробы Манту есть ряд недостатков, к которым относят:

Субъективность при интерпретации результатов;
Отсутствие дифференцировки между активным ТБ и ЛТИ;
Недостаточная диагностическая чувствительность у пациентов с иммунодефицитом;
Вероятность ложноположительных результатов у пациентов, которые вакцинировались БЦЖ (вакцина против туберкулёза) или инфицированы микобактериями, не вызывающих ТБ.

В связи с этим был разработан альтернативный метод диагностики — QuantiFERON-TBtest (QFT), или квантифероновый тест. Он основан на определении в крови специфических белков — гамма-интерферонов (γ-ИФН), которые вырабатываются Т-лимфоцитами в ответ на попадание в организм микобактерий туберкулёза. К преимуществам QFT можно отнести:

Высокую специфичность и чувствительность по сравнению с ТКП;
Результат не зависит от предшествующей вакцинации БЦЖ;
Безопасность: в отличие от реакции Манту исследование не предполагает введение в организм каких-либо веществ.

Данный метод в качестве альтернативы пробе Манту одобрен многими авторитетными медицинскими сообществами, включая Всемирную организацию здравоохранения.

Однако, как и проба Манту, квантифероновый тест не позволяет отличить активный туберкулез от латентной туберкулезной инфекции, поэтому результат данного анализа должен быть сопоставлен с клинической картиной болезни, данными рентгенологической диагностики и другими исследованиями.

Туберкулез – инфекционное хроническое заболевание, вызываемое микобактериями туберкулеза (Mycobacterium tuberculosis complex). Активный туберкулез развивается приблизительно у 10% людей, инфицированных M. tuberculosis. В остальных случаях благодаря иммунной системе происходит элиминация возбудителя из организма или развивается латентная туберкулезная инфекция (ЛТИ). При ЛТИ микобактерии персистируют в организме в неактивном состоянии, обуславливая стойкий иммунный ответ на антигены возбудителя при отсутствии клинических проявлений активной формы заболевания.

Диагностика активного туберкулеза основывается на изучении клинических и радиографических данных в совокупности с результатами прямого микроскопического исследования, выделения культуры Mycobacterium tuberculosis, ПЦР-исследований.

Диагностика латентной инфекции затруднена отсутствием клинических и рентгенологических признаков заболевания, а также отсутствием возбудителя в пробах доступного биоматериала. Однако ее выявление важно для определения лиц, нуждающихся в контроле и превентивной терапии.

in vivo: внутрикожные тесты с очищенным или рекомбинантным туберкулезным аллергеном (проба Манту, Диаскинтест);
in vitro: исследование проб крови для оценки ответа иммунных клеток обследуемого на антигены микобактерий туберкулеза по высвобождению гамма-интерферона (IGRA-тесты).

Оба подхода основаны на оценке характера иммунной реакции человека на антигены возбудителя, т. е. не являются методами прямого выявления инфекционного агента.

В соответствии с клиническими рекомендациями МЗ РФ и Российского общества фтизиатров по выявлению и диагностике туберкулеза у детей, поступающих и обучающихся в образовательных организациях (2017), квантифероновый тест является альтернативным внутрикожным пробам методом обследования на туберкулезную инфекцию.

Квантифероновый тест (QuantiFERON-TB Gold) основан на измерении продукции INF-γ (гамма-интерферона). Выработка гамма-интерферона осуществляется сенсибилизированными Т-клетками крови пациента, стимулированными in vitro специфическими для микобактерий туберкулеза антигенами: кодируемые регионом RD 1 (region of difference) – ESAT-6 (early secreted antigenic target – ранний секретируемый антиген), CFP-10 (culture filtrate protein – белок клеточного фильтрата) и пептид, кодируемый RD 11 – TB7.7 (p4). Указанные антигены отсутствуют в вакцинных штаммах M. bovis BCG и у большинства нетуберкулезных микобактерий (за исключением M. kansasii, M. szulagai, M. marinum), чем достигается высокая специфичность показаний теста.

высокая специфичность и чувствительность;
отсутствие противопоказаний;
отсутствие побочных реакций;
результат не зависит от предшествующей вакцинации BCG.

квантифероновый тест не позволяет дифференцировать латентный и активный туберкулез;
величина уровня гамма-интерферона не коррелирует со стадией и степенью инфицирования, уровнем иммунной реактивности или вероятностью перехода латентного туберкулеза в активный;
не используется для мониторинга ответа на лечение ЛТИ.

Отрицательные результаты тестов in vitro при отсутствии клинических симптомов заболевания (респираторного и интоксикационного характера, других локальных патологических проявлений) позволяют врачу-фтизиатру выдать справку об отсутствии у ребенка в настоящий момент активного туберкулеза. Специфичность и чувствительность данного метода не достигает 100% и может варьировать у пожилых людей, детей младше 5 лет и лиц с иммунодефицитом.

in vivo: внутрикожные тесты с очищенным или рекомбинантным туберкулезным аллергеном (проба Манту, Диаскинтест);
in vitro: исследование проб крови для оценки ответа иммунных клеток обследуемого на антигены микобактерий туберкулеза по высвобождению гамма-интерферона (IGRA-тесты).

высокая специфичность и чувствительность;
отсутствие противопоказаний;
отсутствие побочных реакций;
результат не зависит от предшествующей вакцинации BCG.

квантифероновый тест не позволяет дифференцировать латентный и активный туберкулез;
величина уровня гамма-интерферона не коррелирует со стадией и степенью инфицирования, уровнем иммунной реактивности или вероятностью перехода латентного туберкулеза в активный;
не используется для мониторинга ответа на лечение ЛТИ.

in vivo: внутрикожные тесты с очищенным или рекомбинантным туберкулезным аллергеном (проба Манту, Диаскинтест);
in vitro: исследование проб крови для оценки ответа иммунных клеток обследуемого на антигены микобактерий туберкулеза по высвобождению гамма-интерферона (IGRA-тесты).

высокая специфичность и чувствительность;
отсутствие противопоказаний;
отсутствие побочных реакций;
результат не зависит от предшествующей вакцинации BCG.

квантифероновый тест не позволяет дифференцировать латентный и активный туберкулез;
величина уровня гамма-интерферона не коррелирует со стадией и степенью инфицирования, уровнем иммунной реактивности или вероятностью перехода латентного туберкулеза в активный;
не используется для мониторинга ответа на лечение ЛТИ.

Квантфивероновй тест (QuantiFERON®-ТВ Gold) – современный лабораторный тест для выявления туберкулезной инфекции, альтернатива классическому кожному тесту с туберкулином. В настоящий момент в различных странах разработано и выпущено большое число национальных рекомендаций по применению данного теста.

Квантифероновый тест основан на определении INF-γ (гамма-интерферона), высвобождаемого сенсибилизированными Т-клетками, стимулированными in vitro специфическими протеинами (ESAT-6, CFP-10, TB7.7 (p4)) микобактерий туберкулеза, входящих в комплекс Mycobacterium tuberculosis complex (M. tuberculosis, M. bovis, M. canettii, M. caprae, M. pinnipedii, M. mungi, M. microti, M. africanum и др.). Эти протеины отсутствуют в вакцинных штаммах M. bovis BCG и в большинстве нетуберкулезных микобактерий, за исключением M. kansasii, M. szulagai, M. marinum.

В исследуемой крови пациента (из пробирки с ТВ-антигеном) определяется содержание INFγ, результат анализируется в совокупности с данными, полученными из 2-х других пробирок (выполняющих роль контрольных).

Примерно 1/3 часть населения мира инфицирована МБТ, и только у 5-10% инфицированных лиц развивается заболевание. При наличии неблагоприятных факторов латентная туберкулезаня инфекция (ЛТИ – состояние, когда микобактерии туберкулеза (МБТ) присутствуют в организме человека, но при этом отсутствуют клинические и рентгенологические признаки туберкулеза) может перейти в активную форму с развитием внелегочного туберкулеза (например, туберкулез почек).

К группе высокого риска инфицирования МБТ относятся лица, имевшие контакт с больным туберкулезом, или имеющие высокую вероятность контакта (работники противотуберкулезных диспансеров, приютов, исправительных учреждений и др.), а также лица с сопутствующими заболеваниями (ВИЧ-инфекцией, сахарным диабетом и др.).

Используемые для диагностики ЛТИ кожные тесты – проба Манту и Диаскинтест®, имеют ряд противопоказаний и ограничений к применению.

Противопоказания к проведению пробы Манту и Диаскинтеста:

Индивидуальная непереносимость туберкулина;
Острые и хронические инфекционные заболевания и соматические заболевания в период обострения;
Кожные заболевания и аллергические состояния в период обострения;
Период карантина в детских коллективах.

У пациентов с индивидуальной гиперчувствительностью к туберкулину может наблюдаться ложноположительная реакция.

Сравнение тестов для диагностики туберкулезной инфекции

Параметр	Проба Манту	Диаскинтест®	Квантифероновый тест
Метод исследования	Кожный тест	Кожный тест	Исследование крови
Побочные реакции	Возможны	Возможны	Нет
Противопоказания	Есть	Есть	Нет
Специфичность	Низкая	Высокая	Высокая
Ложноположительные результаты после вакцинации БЦЖ	Да	Нет	Нет
Зависимость от сроков проведения профилактических прививок	Да (не ранее чем через месяц)	Да (не ранее чем через месяц)	Нет
Интерпретация результатов	Субъективна	Субъективна	Объективна

Преимущества квантиферонового теста:

отсутствие противопоказаний и ограничений по времени проведения;
отсутствие ложноположительных результатов в случае вакцинации БЦЖ;
безопасность процедуры и отсутствие побочных реакций;
интерпретация результатов этого теста менее субъективна, чем интерпретация результатов кожных туберкулиновых тестов;
высокая специфичность (99,1%) и высокая чувствительность (89,0%).

Показания к назначению квантиферонового теста:

Выявление ЛТИ в группах высокого риска: работники специализированных противотуберкулезных и других учреждений, где есть высокий риск контакта с возбудителем или больным туберкулезом, пациенты с сопутствующими заболеваниями и др.;
Наличие известных контактов с больным туберкулезом (бактериовыделителем);
Наличие положительной реакции пробы Манту для исключения поствакцинальной реакции;
Наличие противопоказаний к проведению кожных туберкулиновых проб (пробы Манту и Диаскинтеста®);
Дифференциальная диагностика инфекций, вызванных МБТ;
Обследование иммигрантов.

Пример результата исследования и интерпретация:

Примечание: Данный тест не дифференцирует латентный и активный туберкулез. В случае положительного результата необходима консультация врача-фтизиатра для определения дальнейшей тактики. Величина уровня гамма-интерферона не коррелирует со стадией и степенью инфицирования, уровнем иммунной реактивности или вероятностью перехода латентного туберкулеза в активный.

Параметр	Результат	Критерии оценки результатов
Содержание гамма-интерферона в контрольной пробирке (NIL)	0,05	До 8,00
Содержание гамма-интерферона в пробирке с ТВ-антигеном (ТВ Ag)	0,09	Менее 0,35 (или свыше 0,35, но до 25% контрольного значения NIL)
Содержание гамма-интерферона в пробирке с митогеном (Mitogen)	9,56	От 0,50
Квантифероновый тест (диагностика туберкулеза)	Отрицательный	Отрицательный

Интерпретация результата исследования

Инфицирование МБТ;
Инфицирование нетуберкулезными микобактериями (M. kansasii, M. szulgai, M. marinum).

Индивидуальные особенности иммунитета;
Нарушение преаналитических требований.

В этом случае врач принимает решение либо в пользу забора нового образца крови, либо в пользу проведения других медицинских обследований.

Не исключает инфицирования МБТ или туберкулеза.

В ранние сроки инфицирования;
При иммунодефицитных состояниях;
У детей < 5 лет;
При несоблюдении преаналитических требований.

Внимание! Интерпретация результатов должна проводиться с учетом клинико-эпидемиологического анамнеза и результатов других диагностических исследований.

Метод исследования: твердофазный иммуноферментный анализ.

Срок выполнения исследования: 3-10 рабочих дней.

Подготовка к проведению исследования: забор крови производят утром строго натощак (или не ранее, чем через 8 часов после последнего приема пищи).

Читайте также: