Иммуноферментный анализ при ящуре

Обновлено: 15.04.2024

Информацию из данного раздела нельзя использовать для самодиагностики и самолечения. В случае боли или иного обострения заболевания диагностические исследования должен назначать только лечащий врач. Для постановки диагноза и правильного назначения лечения следует обращаться к Вашему лечащему врачу.

Иммуноглобулин Е (IgE) - класс иммуноглобулинов, обнаруживаемый в норме в незначительных количествах в сыворотке крови и секретах. Впервые IgE был изолирован в 1960-х годах из сывороток больных атопией и множественной миеломой. В 1968 г. ВОЗ выделила IgE как самостоятельный класс иммуноглобулинов. Согласно ВОЗ 1 МЕ/мл (МЕ - международная единица) соответствует 2,4 нг. Обычно концентрация IgE выражается в МЕ/мл или кЕ/л (кЕ - килоединица).

В норме IgE составляет менее 0,001% от всех иммуноглобулинов сыворотки крови (см. табл.1).

Таблица 1: Содержание IgE в сыворотке крови здоровых людей

Возрастные группы IgE (кЕ/л)
До 1 года 0 - 15
1 год-6 лет 0 - 60
6 -10 лет 0 - 90
10 -16 лет 0 - 200
Взрослые 0 - 100

Структура IgE подобна структуре других иммуноглобулинов и состоит из двух тяжёлых и двух лёгких полипептидных цепей. Они сгруппированы в комплексы, называемые доменами. Каждый домен содержит приблизительно 110 аминокислот. IgE имеет пять таких доменов в отличие от IgG, который имеет только четыре домена. По физико-химическим свойствам IgE - гликопротеин с молекулярной массой примерно 190000 дальтон, состоящий на 12% из углеводов. IgE имеет самую короткую продолжительность существования (время полувыведения из сыворотки крови 2 - 3 суток), самую высокую скорость катаболизма и наименьшую скорость синтеза из всех иммуноглобулинов (2,3 мкг/кг в сутки). IgE синтезируется главным образом плазматическими клетками, локализующимися в слизистых оболочках. Основная биологическая роль IgE - уникальная способность связываться с поверхностью тучных клеток и базофилов человека. На поверхности одного базофила присутствует примерно 40000 - 100000 рецепторов, которые связывают от 5000 до 40000 молекул IgE.

Помимо участия в аллергических реакциях I (немедленного) типа, IgE принимает участие в защитном противогельминтном иммунитете, что обусловлено существованием перекрёстного связывания между IgE и антигеном гельминтов. Последний проникает через мембрану слизистой и садится на тучные клетки, вызывая их дегрануляцию. Медиаторы воспаления повышают проницаемость капилляров и слизистой, в результате чего IgG и лейкоциты выходят из кровотока. К гельминтам покрытым IgG присоединяются эозинофилы, которые выбрасывают содержимое своих гранул и таким образом убивают гельминтов.

IgE можно обнаружить в организме человека уже на 11-й неделе внутриутробного развития. Содержание IgE в сыворотке крови возрастает постепенно с момента рождения человека до подросткового возраста. В пожилом возрасте уровень IgE может снижаться.

В практике клинико-диагностических лабораторий определение общего и специфического IgE проводится с целью их использования в качестве самостоятельных диагностических показателей. В табл. 2 перечислены основные болезни и состояния, сопровождающиеся изменением содержания общего IgE сыворотки крови.

Таблица 2: Болезни и состояния, сопровождающиеся изменением содержания общего IgE сыворотки крови

Болезни и состояния Возможные причины
I. Повышенное содержание IgE
Аллергические болезни, обусловленные IgE антителами:
а) Атопические болезни
· Аллергический ринит
· Атопическая бронхиальная астма
· Атопический дерматит
· Аллергическая гастроэнтеропатия
б) Анафилактические болезни
· Системная анафилаксия
· Крапивница - ангионевротический отек		 Множественные аллергены:
· пыльцевые
· пылевые
· эпидермальные
· пищевые
· лекарственные препараты
· химические вещества
· металлы
· чужеродный белок
Аллергический бронхопульмональный аспергиллез Неизвестны
Гельминтозы IgE антитела, связанные с защитным иммунитетом
Гипер-IgE синдром (синдром Джоба) Дефект Т-супрессоров
Селективный IgA дефицит Дефект Т-супрессоров
Синдром Вискотт-Олдриджа Неизвестны
Тимусная аплазия (синдром Ди-Джорджи) Неизвестны
IgE - миелома Неоплазия IgE-продуцирующих плазматических клеток
Реакция "трансплантат против хозяина" Дефект Т-супрессоров
II. Сниженное содержание общего IgE
Атаксия - телеангиэктазия Дефекты Т-клеток

Ниже приведены в качестве примеров диапазоны содержания общего IgE сыворотки крови (у взрослых) при некоторых патологических состояниях (табл. 3). Однако, несмотря на первоначально кажущуюся простоту использования определения общего и специфического IgE для диагностики, существуют некоторые сложности в интерпретации результатов. Их перечень приведён ниже.

Таблица 3: Значения общего IgE при некоторых патологических состояниях


Патологические состояния Содержание IgE (кЕ/л)
Аллергический ринит 120 - 1000 кЕ/л
Атопическая бронхиальная астма 120 - 1200 кЕ/л
Атопический дерматит 80 - 14000 кЕ/л
Аллергический бронхолегочный аспергиллез:
- ремиссия
- обострение
80 - 1000 кЕ/л
1000 - 8000 кЕ/л
Гипер - IgE синдром 1000 - 14000 кЕ/л
IgE - миелома 15000 кЕ/л и выше


Особенности интерпретации и диагностические ограничения общего IgE

  • Примерно 30% больных атопическими заболеваниями имеют уровень общего IgE в пределах значений нормы.
  • Некоторые больные бронхиальной астмой могут иметь повышенную чувствительность только к одному аллергену (антигену), в результате чего общий IgE может быть в пределах нормы, в то время как кожная проба и специфический IgE будут положительными.
  • Концентрация общего IgE в сыворотке крови также повышается при неатопических состояниях (особенно при глистной инвазии, некоторых формах иммунодефицитов и бронхопульмональном аспергиллезе) с последующей нормализацией после соответствующего лечения.
  • Хроническая рецидивирующая крапивница и ангионевротический отёк не являются обязательными показаниями для определения общего IgE, так как обычно имеют неиммунную природу.
  • Границы нормы, определённые для европейцев, не могут быть применены для представителей зон, эндемичных по гельминтозам.

Особенности интерпретации и диагностические ограничения специфического IgE

  • Доступность определения специфического IgE не должна преувеличивать его диагностическую роль в обследовании больных с аллергией.
  • Обнаружение аллергенспецифического IgE (к какому-либо аллергену или антигену) не доказывает, что именно этот аллерген ответственен за клиническую симптоматику; окончательное заключение и интерпретация лабораторных данных должны быть сделаны только после сопоставления с клинической картиной и данными развёрнутого аллергологического анамнеза.
  • Отсутствие специфического IgE в сыворотке периферической крови не исключает возможности участия IgE-зависимого механизма, так как местный синтез IgE и сенсибилизация тучных клеток может происходить и в отсутствие специфического IgE в кровотоке (например, аллергический ринит).
  • Антитела других классов, специфичные для данного аллергена, особенно класса IgG (IgG4), могут быть причиной ложноотрицательных результатов.
  • Исключительно высокие концентрации общего IgE, например, у отдельных больных атопическим дерматитом, могут за счёт неспецифического связывания с аллергеном давать ложноположительные результаты.
  • Идентичные результаты для разных аллергенов не означают их одинакового клинического значения, так как способность к связыванию с IgE у разных аллергенов может быть различной.

В заключении, учитывая всё выше изложенное, а также существующие сложности в постановке и интерпретации кожных проб, перечислим основные показания и противопоказания к назначению специфического аллергологического обследования in vitro - определения специфического IgE (табл. 4).

Таблица 4: Показания и противопоказания к определению специфического IgE

Показания
1 Дифференциальная диагностика между IgE-зависимым и не-IgE-зависимым механизмами аллергических реакций
2 Больные, у которых невозможно выявить аллерген анамнестически, при помощи дневника и т. д.
3 Больные с недостаточным эффектом специфической гипосенсибилизации, назначенной по результатам кожных проб
4 Дермографизм и распространённый дерматит
5 Больные детского и пожилого возраста с гипореактивностью кожи
6 Гиперреактивность кожи
7 Больные, которым невозможно отменить симптоматическую терапию препаратами, влияющими на результаты кожных проб
8 Отрицательное отношение больного к кожным пробам
9 В анамнезе системные аллергические реакции на кожные пробы
10 Несоответствие результатов кожных проб данным анамнеза и клинической картине
11 IgE-зависимая пищевая аллергия
12 Необходимость количественной оценки чувствительности и специфичности аллергена
13 Общий IgE сыворотки крови более 100 кЕ/л
Обследование нецелесообразно:
1 При атопических заболеваниях в случаях удовлетворительных результатов специфической терапии по данным кожных проб
2 У больных с не-IgE-зависимым механизмом аллергических реакции

Информацию из данного раздела нельзя использовать для самодиагностики и самолечения. В случае боли или иного обострения заболевания диагностические исследования должен назначать только лечащий врач. Для постановки диагноза и правильного назначения лечения следует обращаться к Вашему лечащему врачу.

Теоретические и практические достижения ве­теринарной науки значительно расширили арсенал методов диагностики и средств специфической профилактики инфекционных болезней крупного рогатого скота. При этом развитие новых подходов к предупреждению инфекционных болезней и изу­чение механизмов иммунологической защиты жи­вотных неразрывно связаны с разработкой и внед­рением новых методов и технологий, основанных на современных представлениях об эффекторных механизмах иммунитета, среди которых главное место занимает взаимодействие анти ген-антитело.

Иммуноферментный анализ (ИФА) к настоя­щему времени прошел путь от новейшей научной разработки до рутинного метода в клинической диагностике. С его помощью можно проводить как массовое обследование стад, так и поставить окончательный диагноз у конкретного животного.

По сравнению с другими методами выявления антигенов и антител профессионально разработан­ные иммуноферментные тест-системы обладают следующими преимуществами:

  • высокой чувствительностью, позволяющей выявлять концентрации белка в диапазоне нг/мл, и специфичностью;
  • воспроизводимостью полученных резуль­татов;
  • стабильностью при хранении всех необходи­мых реагентов (до года и более);
  • простотой проведения реакции и возможнос­тью использования минимальных объемов иссле­дуемого материала;
  • наличием инструментального (в качествен­ном и количественном варианте) учета реакции и возможностью автоматизации всех ее этапов.

При инструментальной оценке результат ИФА может быть качественным (позволяет судить о наличии или отсутствии специфических антител) и полуколичественным (позволяет получить ин­формацию об относительном содержании анти­тел в испытуемых пробах). Оба варианта являются приблизительными, однако они намного точнее методов определения титров антител в реакциях с визуальным учетом.

Специалисты НПО НАРВАК в сотрудничестве с ведущими отечественными и зарубежными учены­ми внедрили в ветеринарную практику нашей стра­ны ИФА-наборы для диагностики лейкоза и ящура, проводят эксперименты по созданию ИФА-набора для диагностики бруцеллеза. Условия применения данных наборов - любые лаборатории, оснащен­ные стандартным оборудованием для ИФА. ИФА - диагностика лейкоза

"Набор для выявления антител к вирусу лей­коза крупного рогатого скота (ВЛКРС методом им-муноферментного анализа (ИфА)", выпускаемый в двух вариантах:

  • И ФА-набор для проведения массовых скри-нинговых исследований - скринирующий тест;
  • ИФА-набор (VeriTest) для подтверждения по­ложительных результатов - подтверждающий (кон­фирмационный или верификационный) тест.

Как и большинство зарубежных аналогов оба варианта ИФА предназначены для выявления анти­тел к поверхностному гликопротеину др51 ВЛКРС в сыворотке крови и молоке животных.

Использование подтверждающего ИфА-набо-ра VeriTest является очень важным моментом при диагностических исследованиях на лейкоз, пос­кольку одним из наиболее важных вопросов при проведении ИФА является вопрос о специфичности результатов. Так при применении только скриниру-ющего теста, некоторые пробы, взятые от животных с различной патологией, могут давать ложнополо-жительные результаты вследствие синтеза пере­крестно-реагирующих антител. Поэтому возмож­ное существование ложнопозитивных результатов ставит перед лабораторным работником задачу их разграничения с истинным выявлением антител к ВЛКРС. Для решения этой задачи и служит ИФА-на­бор VeriTest, который применяется для подтверж­дения положительных результатов скринирующего теста.

Таким образом, алгоритм серологического об­следования на лейкоз при совместном применении РИД и ИФА следующий.

1) Животные положительные в РИД считаются инфицированными, в ИФА не проверяются и под­лежат выбраковке.

2) Отрицательные результаты в РИД, должны быть перепроверены в ИФА и только после этого животные могут считаться серонегативными.

3) Первичное тестирование проб в ИФА про­водится в скринирующем тесте и при отсутствии положительной реакции выдается заключение об отсутствии серологических данных инфицирования ВЛКРС. При положительном результате теста проба подлежит исследованию в подтверждающем тесте. При отрицательном результате подтверждающего теста, проба считается серонегативной по ВЛКРС, положительный результат является основанием для окончательного подтверждения серологического диагноза на лейкоз.

Такая схема проведения диагностических ис­следование за два последних года с успехом апро­бирована в ряде ветеринарных лабораторий нашей страны и показан ее практический эффект.

Если имеется возможность, то вместо скрини­рующего ИФА-набора можно сразу же использо­вать ИФА-набор VeriTest и тем самым упростить алгоритм серологического обследования на лейкоз и сократить число необходимых анализов.

ИФА - диагностика ящура

"Набор для выявления антител к вирусу ящура ЗАВС иммуноферментным методом (ИФА)" пред­назначен для выявления постинфекционных анти­тел в сыворотке крови крупного рогатого скота.

Набор позволяет обнаружить антитела к неструктурному белку вируса ящура - ЗАВС (в систе­ме используется рекомбинантный белок MSP ЗАВС в качестве антигена), который отсутствует (или скрыт для распознавания клетками иммунной системы) в инактивированных вакцинных препаратах. Поэ­тому у здоровых или вакцинированных животных антител к ЗАВС белку нет (реакция отрицательная), а у экспериментально зараженных или спонтанно инфицированных животных (даже ранее вакцини­рованных), в организме которых присутствовал жи­вой вирус ящура - антитела данной специфичности есть (реакция положительная).

Данное заключение демонстрируют резуль­таты, полученные нами при испытании данного набора в профильной лаборатории ФГУ ВНИИЗЖ (табл.1). Для проверки были использованы сыво­ротки крови крупного рогатого скота, полученные от. а) животных, переболевших ящуром (в дина­мике с интервалом 3- 5 суток после заражения); б) от животных, вакцинированных против ящура; в) животных сначала вакцинированных против ящура, затем экспериментально зараженных вирулентным вирусом; г) от клинически здоровых неиммунных животных. Исследования проводили в сравнитель­ном аспекте с набором аналогичной направлен­ности и с параллельным определением активности испытуемых сывороток в реакции микронейтрали­зации и в стандартном варианте непрямого ЙфА, где в качестве антигена используются структурные белки вириона.

Таким образом, отличительной особеннос­тью ИФА-набора для выявления антител к анти­гену ЗАВС вируса ящура является его способность дифференцировать здоровых и вакцинированных животных от инфицированных и вирусоносите-лей, поэтому его использование незаменимо при проведении оздоровительных и мониторинговых мероприятий.

ИФА - диагностика бруцеллеза

В течение последних лет ряд зарубежных ком­паний выпускают ИФА-наборы, предназначенные для выявления антител к возбудителям бруцеллеза крупного рогатого скота, овец и коз (Brucella abortus и Brucella melitensis). В настоящее время в НПО про­водятся подобные исследования.

В лабораторных исследованиях обычно исполь­зуют два варианта ИФА: непрямой и конкурентный. Однако на практике наибольшей ценностью обла­дает конкурентный ИФА, отличительной особенностью которого является возможность дифферен­цировать животных инфицированных бруцеллами от животных, вакцинированных вакциной из штам­ма 19 (и возможно из штамма 82). Метод основан на конкурентном взаимодействии моноклональных антител к о-полисахариду S-LPS антигена В. abortus и сывороточных антител к бруцеллам с S-LPS анти­геном В. abortus. При отсутствии в исследуемой сы­воротке крови антител к В. abortus или В. melitensis, МкА связывается с иммобилизованным S-LPS анти­геном, формируя при этом комплекс антиген-анти­тело. Полученный иммунный комплекс выявляется после взаимодействия с антивидовым конъюгатом, фермент которого после добавления субстрата, вызывает разложение субстрат-индикаторного рас­твора и образование окрашенного продукта. Если исследуемая сыворотка содержит антитела к бру­целлам, то они конкурируют с МкА за связывание с сайтами антигена и препятствуют взаимодействию МкА с о-полисахаридом S-LPS антигена, в результа­те чего интенсивность окраски снижается.

Сыворотка крови животных, вакцинированных вакциной из штамма 19, содержит низкоаффинные антитела, которые не конкурируют с МкА за связы­вание с антигеном, что приводит к отрицательной реакции. Однако в ряде случаев через 6 месяцев после вакцинации животные могут реагировать по­ложительно.

Нами были проведены предварительные испы­тания двух тест-систем с использованием охаракте­ризованных в РА сывороток крови крупного рогато­го, полученных из ФГУ ВГНКИ (табл.2).

Проведенные исследования показали, что по чувствительности оба варианта ИФА превосходят РА, однако для подтверждения диагностической ценности конкурентного метода проводятся более расширенные испытания с хорошо охарактеризо­ванной панелью сывороток крови, полученных от больных и вакцинированных животных. Есть пред­положение, что данная тест-система может быть также использована в медицине для выявления антител к бруцеллам у инфицированных людей.


Федеральная служба по ветеринарному и фитосанитарному надзору (Россельхознадзор)

Диагностикумы ящура


Сыворотка ящурная типо – и штаммоспецифическая для серологических реакций, используемая в диагностических целях (на типы А, О, Азия-1, Sat-1, Sat-2, Sat-3)


подробнее Купить


Антиген ящурный штаммоспецифический сухой для серологических реакций (А, О, Азия-1, Sat-1, Sat-2, Sat-3).


подробнее Купить


Набор для определения противоящурных антител в сыворотках крови животных в иммуноферментном анализе (тип О)


подробнее Купить


Набор для определения противоящурных антител в сыворотках крови животных в иммуноферментном анализе (тип Азия-1)


подробнее Купить


Набор для определения противоящурных антител в сыворотках крови животных в иммуноферментном анализе (тип А)


подробнее Купить



подробнее Купить



подробнее Купить


Набор для обнаружения антител к неструктурным белкам вируса ящура иммуноферментным методом в сыворотках крови крупного и мелкого скота


подробнее Купить

Иммуноферментный анализ (ИФА) — это метод выявления в крови специфических антител, представляющих собой молекулы иммуноглобулинов. Он отличается высокой точностью и чувствительностью, позволяет определить не только качественный, но и количественный состав антигенов и антител в организме. В медицине иммуноферментный анализ применяется для выявления болезней, которые провоцируют микроорганизмы различных классов — от вирусов до паразитов, а также для диагностики аутоиммунных заболеваний.


Особенности анализа ИФА

Иммуноферментный анализ состоит из двух компонентов — иммунной и ферментативной реакции. Иммунная реакция связывает биологические молекулы, элементы клетки или микроорганизма, которые пытаются выявить. Ферментативная реакция позволяет увидеть и измерить результат иммунологической реакции.

ИФА относится к непрямым методам диагностики, так как с ее помощью можно определить наличие антител к патогенному микроорганизму, а не самого возбудителя. Этот анализ рекомендуется выполнять совместно с ПЦР-диагностикой.

Важность иммуноферментного анализа несомненна: его применяют, если требуется определить стадию развития заболевания, провести мониторинг проведенного курса лечения, оценить ответ организма на лечение либо подобрать оптимальную схему терапии.

К преимуществам ИФА относят следующее:

  • высокая чувствительность (до 90%), позволяющая обнаружить микроорганизмы даже в том случае, если они присутствуют в минимальных концентрациях;
  • возможность выявить заболевание еще до проявления симптомов;
  • скорость проведения анализа и получения результатов;
  • возможность определить примерный срок заражения, а также тип течения инфекции (острая или хроническая);
  • выявление с высокой степенью достоверности микроорганизмов, которые невозможно определить путем применения других диагностических методов (посева, микроскопии и т.д.).

Показания к проведению иммуноферментного анализа крови

Методика ИФА позволяет выявить в крови любой антиген — не только собственный, но и чужеродный для организма. Ее назначают при подозрении на скрытую инфекцию. Показаниями для проведения этого анализа являются:

  • выявление различных инфекций (гепатиты, паразитарные инфекции, герпес, хламидии, токсоплазмоз, сальмонеллез, вирус Эпштейн-Барра);
  • определение содержания гормонов для оценки работы органов эндокринной системы — щитовидной железы, гипофиза, половых желез;
  • выявление и отслеживание онкомаркеров (ПСА у мужчин, фактор некроза опухоли и т.д.);
  • диагностика аутоиммунных заболеваний (системный васкулит, ревматоидный артрит, системная красная волчанка, синдром Шегрена).

Также иммуноферментный анализ позволяет определить наличие антител к вирусу у пациента после прививки.

ИФА не оказывает непосредственного воздействия на антиген: этот метод позволяет оценить реакцию организма на присутствие такого антигена.


Чаще всего для проведения иммуноферментного исследования используют сыворотку венозной крови, взятой у пациента натощак. Также для анализа могут использоваться околоплодные воды, спинномозговая жидкость, содержимое стекловидного тела и слизь цервикального канала и уретры.

Подготовка к анализу ИФА

Чтобы снизить риск ошибки при проведении иммуноферментного анализа, пациенту рекомендуют подготовиться к этой процедуре. Речь идет о том, чтобы в течение 7-10 дней до назначенного исследования:

  • прекратить прием антибиотиков, а также противовирусных и антигистаминных препаратов;
  • исключить из рациона продукты-аллергены (шоколад, мед, орехи, яйца);
  • отказаться от жирных, острых, жареных блюд, алкоголя, сладостей;
  • ограничить физические нагрузки;
  • избегать сильных эмоциональных потрясений.

За сутки до забора крови нужно прекратить курение.

Интерпретация результатов анализа

При выполнении иммуноферментного анализа выявляют антитела разных типов – иммуноглобулины классов M, A, G (JgM, JgA, JgG). Они появляются в разные промежутки времени.

IgM указывает на то, что инфекция находится на острой стадии развития. Этот иммуноглобулин появляется в крови на 4-5 день после предполагаемого заражения. Если выявляют IgM, то пациент в данный момент является больным.

IgG характеризует хроническую форму инфекционного процесса, а также свидетельствует о наличии стойкого иммунитета к антигену. Выработка этого иммуноглобулина происходит на 20-28 день с момента заражения. IgG может сохраняться в крови долгое время – несколько месяцев и даже лет.

IgA – иммуноглобулины, выявление которых указывает на переход острой формы инфекционного процесса в хроническую. Они вырабатываются на 14-20 день с момента заражения и сохраняются в крови больного около двух месяцев.

Анализ ИФА может демонстрировать разные комбинации этих иммуноглобулинов. В зависимости от сочетания, они указывают на определенный этап в развитии заболевания:

  • JgM (-), JgG (-), JgA (-). Иммунитет к инфекции отсутствует.
  • JgM (-), JgG (+), JgA (-). У больного имеется иммунитет, приобретенный после введения вакцины или выполнения прививки.
  • JgM (+), JgG (-/+), JgA (-/+). У пациента присутствует острая инфекция.
  • JgM (+), JgG (+), JgA (+). У больного протекает период обострения хронической инфекции.
  • JgM (-), JgG (+/-), JgA (+/-). У пациента имеется хроническая инфекция.
  • JgM (-). Пациент был заражен, но сейчас выздоровел.

Если ИФА направлен на исследование гормонов щитовидной железы, то его допустимые границы находятся в таких пределах:

При диагностике аутоиммунных заболеваний у пациента могут выявляться такие антитела:

  • Антинуклеарные (аутоантитела к антигенам ядра клеток). Они характерны для системных аутоиммунных заболеваний.
  • Антитела к растворимым нуклеарным антигенам. Такие компоненты проявляются при различных системных аутоиммунных процессах.
  • Антикардиолипиновые антитела IgG и IgM. Они характерны для антифосфолипидного синдрома.
  • Антитела к двухспиральной ДНК, которые являются специфичными для системной красной волчанки.
  • Ревматоидный фактор. Антитела такого типа выявляют при ревматоидном артрите, хотя они не специфичны конкретно для этого заболевания и могут обнаруживаться при других отклонениях, а также у абсолютно здоровых пациентов.

Сейчас ИФА-анализ широко используется для выявления антител к коронавирусной инфекции.

Реакция микропреципитации (РМП) – экспресс-метод диагностики сифилиса. Это исследование позволяет определить в крови пациента наличие или отсутствие возбудителей сифилиса. Сейчас оно проводится вместо реакции Вассермана (RW).

Суть анализа заключается в выявлении антител к кардиолипину — компоненту внутренней мембраны бактерий и митохондрий. Такие антитела формируются на стадии первичного сифилиса, в течение 7–10 дней после образования твердого шанкра. РМП может быть положительным и при других заболеваниях, при которых возможно разрушение тканей. Это связано с присутствием кардиолипина в качестве фосфолипида в различных клеточных мембранах.


Особенности анализа

Сифилис у человека вызывает бледная трепонема. Это одноклеточная бактерия, относящаяся к спирохетам. На ранних стадиях развития возбудитель заболевания активно размножается, но, в результате иммунных реакций, а также действия факторов неспецифического иммунитета, часть трепонем погибает.

Гибель клеток бактерии вызывает появление большого количества липоидных молекул из разрушенных клеточных мембран возбудителя сифилиса. Иммунная система формирует по отношению к ним защитные антитела.

Ткани, которые были повреждены действием бледной трепонемы, разрушаются. Клеточные митохондрии, которые при этом повреждаются, высвобождают фосфолипиды, в числе которых – кардиолипин. Последний представляет собой собственный антиген организма липидного происхождения. Он появляется в организме при разрушении клеток. Антиген схож с липидными антигенами бледной трепонемы.

Реакция микропреципитации – микрореакция крови на кардиолипиновый антиген (экстракт бычьей сердечной мышцы), который по своей природе схож с возбудителем сифилиса. Когда в пробу с кровью пациента вводится антиген, проводится проверка на ответную реакцию. Если в организме человека сформировались антитела к вирусу (защитные белки), то они отреагируют на этот реагент.

Качественная оценка реакции определяется по объему выпавшего осадка и величине хлопьев. Образование осадка оценивают в условных единицах, плюсами (+), от одного до четырех.

Результат РМП получают всего через 10-40 минут.

В отличие от RW, анализ РМП более чувствителен. В то же время он уступает первому по специфичности.

Это исследование позволяет не только выявить наличие инфекции в организме, но и проследить динамику течения заболевания.

Реакция микропреципитации – нетрепонемный тест, который позволяет определить заражение сифилисом через 1–2 недели с момента образования первичной сифиломы (твердого шанкра). Сифилома – клиническое проявление защитных процессов, куда входят местные клеточные и гуморальные специфические реакции, направленные на уничтожение бледных трепонем в месте их изначального внедрения в организм.

Показания к проведению

Анализ РМП назначают при обнаружении у пациента симптомов, характерных для сифилиса. Это:

  • повышение температуры до 37–38,5 градусов, ее сохранение в течение длительного времени;
  • общая слабость, сопровождающаяся кашлем и насморком;
  • регулярные суставные и мышечные боли;
  • локальное облысение;
  • образование на месте внедрения шанкра – язвы с твердым основанием и плотными краями;
  • появление багровых пятен на слизистой оболочке горла;
  • появление многочисленных пустул с белыми кончиками;
  • появление бледно-розовых пятен на коже, которые не причиняют боль и дискомфорт;
  • кондиломы багрового или фиолетового цвета.

На поздних стадиях сифилиса на коже образуются инфекционные бугры и гуммы, которые периодически изъязвляются и оставляют рубцы. Это сочетается с поражением головного мозга, сердечно-сосудистой системы, печени, костей, глаз.

РМП обязательно назначают лицам, которые проходят обследование для получения санитарной книжки. Также анализ показан при:

  • срочной госпитализации;
  • подготовке пациента к операции;
  • наличии ВИЧ;
  • беременности;
  • проверке состояния здоровья потенциального донора органов.

Также этот тест назначают пациенту, завершившему курс лечения сифилиса, для оценки его эффективности.

Расшифровка анализа

Качественный анализ на реакцию микропреципитации позволяет получить всего 2 результата: положительный и отрицательный.


Результат РМП может быть ложноположительным. Это бывает у пожилых людей, а также при наличии ряда заболеваний. Это:

  • СПИД;
  • туберкулез;
  • красная волчанка;
  • ревматоидный артрит;
  • хламидиоз;
  • сахарный диабет;
  • подагра;
  • лептоспироз;
  • тиреоидит;
  • мононуклеоз;
  • вирусный гепатит;
  • склеродермия.

При инфаркте миокарда анализ на определение антител к бледной трепонеме также может быть ложноположительным.

Для пациентов со всеми перечисленными заболеваниями и отклонениями РМП не может быть использован в качестве единственного метода определения сифилиса. Дополнительно антитела нужно определять методами ИФА (иммуноферментного анализа) или пассивной гемагглютинации.

Подготовка к анализу

Чтобы получить достоверный результат, к сдаче крови нужно подготовиться. Основные рекомендации:

  • сдавать натощак, после сна;
  • утром перед сдачей не завтракать, не пить кофе и чай, а также другие напитки (можно пить воду);
  • не курить перед анализом в течение двух часов;
  • в течение двух дней перед забором крови соблюдать щадящий режим питания, исключив жареное, жирное, острое, а также отказаться от спиртного;
  • за день до анализа ограничить повышенные физические и психоэмоциональные нагрузки.

Анализ РМП не сдают после физиотерапевтических процедур и инструментальных исследований (УЗИ, рентгенография и т.д.).

Читайте также: