Иммуноглобулины диагностические флуоресцирующие гриппозные сухие
Обновлено: 24.04.2024
Очищенная фракция иммуноглобулинов, выделенных из сыворотки крови животных или кур, иммунизированных очищенными антигенами вирусов гриппа соответствующего типа (субтипа), коньюгированных с флуоресцеинизотиоцианатом (ФИТЦ).
Препарат имеет красящий титр не ниже 1:16, содержит консервант - мертиолат 1:10000.
Препарат имеет вид аморфной массы от желто-оранжевого до оранжевого цвета.
Показания к применению:
Ранняя диагностика гриппозной инфекции по выявлению антигенов вирусов гриппа А и В в клетках цилиндрического эпителия носа от больных с симптомами острого респираторного заболевания (ОРЗ), в секционном материале, а также обнаружение гриппозных антигенов в препаратах клеточных культур.
Методы применения и принцип действия:
1. Подготовка клинических материалов.
а) В качестве материала для исследования служат препараты, содержащие клетки цилиндрического эпителия слизистой оболочки глубоких отделов носовой полости от больных ОРЗ*.
Для этой цели сухим стерильным ватным тампоном, введенным через носовое отверстие в нижний носовой ход, собирают ротационными движениями как можно больше эпителиальных клеток. Затем тампоны помещают в пробирку с 2-3 мл 0,01 моль/л фосфатно-солевого буферного раствора (ФСБ)** рН 7,2-7,5. Для получения суспензии клеток тампоны в пробирке встряхивают, отжимают, клетки осаждают центрифугированием 5-6 мин при 3000 об/мин. Надосадочную жидкость осторожно сливают, а клеточный осадок ресуспендируют в нескольких каплях оставшегося раствора и наносят на предметные стекла раздельными каплями. Полученные мазки (диаметром 5-6 мм) высушивают под вентилятором и фиксируют 10 мин в охлажденном до температуры от 2 до 8 град. С ацетоне (х.ч.).
б) При исследовании секционного материала готовят препараты-отпечатки или криостатные срезы тканей респираторного тракта. Полученные препараты (отпечатки и срезы) высушивают под вентилятором и фиксируют 10 мин в охлажденном до температуры от 2 до 8 град. С ацетоне.
Мазки можно хранить до окрашивания при температуре от 2 до 8 град. С в течение 6-7 дней и до 6 месяцев при температуре не выше минус 20 град. С.
2. Приготовление рабочих растворов флуоресцирующего иммуноглобулина.
Сухой флуоресцирующий иммуноглобулин растворяют в 1 мл дистиллированной воды, разливают по 60 мкл в пробирки для микропроб и хранят при температуре не выше минус 20 град. С не более 6 месяцев.
Для проведения 100 анализов требуется 60 мкл препарата. Непосредственно перед употреблением препарат разводят ФСБ для получения указанного на этикетке рабочего разведения. Препарат в рабочем разведении хранят не более 14 дней при температуре от 2 до 8 град. С.
3. Окраска препаратов.
Предметные стекла с фиксированными мазками помещают во влажную камеру (специальную или чашку Петри с влажной фильтровальной бумагой на дне), на каждый мазок пипеткой наносят по 50 мкл рабочего разведения флуоресцирующего иммуноглобулина. Окраску проводят в течение 30 мин при температуре 16-20 град. С. Затем препараты ополаскивают дистиллированной водой и промывают ФСБ рН 7,2-7,5 двукратно по 10 мин, после чего вновь ополаскивают дистиллированной водой и высушивают с помощью вентилятора. Окрашенные мазки можно хранить при температуре от 2 до 8 град. С в течение 7-10 дней.
Анализ препаратов проводят под люминесцентным микроскопом МЛ-2(или иного типа) с использованием иммерсионного объектива 90x1,25Л, окуляра К5х, сине-фиолетовых светофильтров возбуждения СФ 1-2 или СФ 1-4, и теплозащитных светофильтров, корректирующих свечение фона, СЗС 7-2 и СЗС 14-4. При этом следует пользоваться только нефлуоресцирующимим мерсионным маслом или его заменителями (диметилфталат).
При люминесцентной микроскопии препаратов из материалов от больных выявляются различные эпителиальные клетки, лейкоциты, клеточный детрит. Плоские эпителиальные клетки, характеризуются крупными размерами, неправильной или полигональной формой с относительно малыми ядрами. Клетки цилиндрического эпителия - удлиненные или округлые, с относительно крупными, базально расположенными ядрами. Лейкоциты имеют сравнительно небольшие размеры, характерную форму ядер, обычно в них наблюдается неспецифическое свечение.
При люминесцентной микроскопии секционного материала выявляется как цилиндрический, так и кубический эпителий респираторного тракта, а также лейкоциты.
Диагностика гриппа осуществляется на основании выявления специфической диффузной или гранулярной флуоресценции в цитоплазме или ядрах клеток цилиндрического или кубического эпителия, четко отличающейся по интенсивности свечения от фоновой окраски окружающих интактных клеток. При оценке результатов не следует учитывать свечение клеточного детрита, плоских эпителиальных клеток, слизи и лейкоцитов.
При люминесцентной микроскопии препаратов зараженных вирусом гриппа клеточных культур наблюдаемая картина может сильно варьировать в зависимости от дозы вируса и сроков его репродукции. Обычно выявляется зеленое свечение цитоплазмы или ядер, можно встретить также и тотальную люминесценцию клеток. В препаратах незараженных клеточных культур наблюдают либо только контуры клеток, либо клетки с общей беловато-желтой аутофлуоресценцией.
Оценку интенсивности иммунофлуоресцентной окраски проводят по общепринятой условной четырех крестовой шкале яркостей:
++++ - исключительно яркая, интенсивная флуоресценция;
+++ - выраженная флуоресценция меньшей интенсивности;
++ - отчетливая флуоресценция, умеренной интенсивности;
+ - слабая, неотчетливая флуоресценция;
+/- - соответствует наиболее низкому уровню фонового свечения клеток.
Результат лабораторного анализа считают положительным при обнаружении в исследуемых объектах (или препаратах) 3-х и более клеток цилиндрического или кубического эпителия с интенсивностью люминесценции на 2 креста (++) и более.
Срок годности - 2 года. Препарат с истекшим сроком годности применяться не должен.
Дата актуализации инструкции 13.11.2013
Владелец регистрационного удостоверения: Предприятие по производству диагностических препаратов ООО, Россия
Формы выпуска: лиофилизат [для диагностических целей], ампулы
Данные гос. регистрации: Р N003341/01 от 16.04.2004
Состояние регистрационного удостоверения: дата аннулирования 28.08.2009
Номер фармстатьи: ФСП 42-0321-4044-03
Откройте актуальную версию документа прямо сейчас или получите полный доступ к системе ГАРАНТ на 3 дня бесплатно!
Если вы являетесь пользователем интернет-версии системы ГАРАНТ, вы можете открыть этот документ прямо сейчас или запросить по Горячей линии в системе.
Современные препараты для лабораторной диагностики гриппа и ОРВИ
И. В. Амосова, к.б.н., ведущий научный сотрудник лаборатории биотехнологии диагностических препаратов ФГБУ НИИ гриппа МЗ РФ, “Научно-исследовательский институт гриппа” Минздрава России (ФГБУ “НИИ гриппа” МЗ РФ), ООО “Предприятие по производству диагностических препаратов” (ООО “ППДП”), Санкт-Петербург, Россия
На сегодняшний день грипп и другие острые респираторные вирусные инфекции (ОРВИ) остаются серьезной медицинской и социальной проблемой, о чём свидетельствуют высокие показатели заболеваемости и смертности, особенно среди детей, пожилых людей и пациентов с хроническими заболеваниями. Для организации эффективных процессов лечения, профилактики и надзора за гриппом необходимо своевременное проведение лабораторной диагностики, позволяющей выявить возбудителя инфекции. Всемирная организации здравоохранения (ВОЗ) рекомендует использовать для идентификации возбудителей ОРВИ методы иммунофлуоресценции (ИФ) и реакции торможения гемагглютинации (РТГА) наряду с выделением вирусов в культуре клеток или полимеразной цепной реакцией (ПЦР)1.
ООО “Предприятие по производству диагностических препаратов” (ООО “ППДП”) организовано в 2013 году с целью обеспечения учреждений здравоохранения препаратами для диагностики вирусов гриппа А, В и других ОРВИ: вирусов парагриппа 1, 2 и 3 типов, РС-вируса
и аденовирусов. Основной учредитель Предприятия – ФГБУ “НИИ гриппа” Минздрава России, выполняющий в качестве Федерального центра по гриппу одну из ключевых функций в системе надзора за заболеваемостью гриппом в России и являющийся признанным Национальным центром по гриппу ВОЗ в рамках глобального контроля этой инфекции.
В основе производства – научные разработки и многолетний опыт лаборатории биотехнологии диагностических препаратов НИИ гриппа, а также современные методы накопления, очистки и концентрации вирусов, иммунохроматографии, иммуноблоттинга, иммуноферментного и ИФ- анализа и методы гибридомной технологии, позволяющие создавать новые препараты моноклонального типа.
Предприятие выпускает и реализует следующие диагностические препараты:
Наименование препарата
Кол-во анализов
Иммуноглобулины диагностические флуоресцирующие гриппозные сухие (ИФ-Г):
грипп А (Н1N1)pdm 09
Ранняя диагностика ОРВИ по выявлению антигенов: вирусов гриппа А или В; адено- или РС-вирусов; вирусов парагриппа 1, 2 или 3 типа, вирусов герпеса 1 или 2 типов в клетках цилиндрического эпителия носа от больных с симптомами ОРВИ; обнаружение вирусных антигенов в препаратах клеточных культур, инфицированных материалами от больных.
Материалом для исследования служат мазки из носа, взятые от больных ОРВИ, содержащие клетки цилиндрического эпителия слизистой оболочки глубоких отделов носовой полости.
Иммуноглобулин диагностический флуоресцирующий аденовирусный антигексоновыйсухой (ИДФАГ)
Иммуноглобулины диагностические флуоресцирующие парагриппозные сухие (ИФ-ПГ):
парагрипп 1 типа
парагрипп 2 типа
парагрипп 3 типа
Иммуноглобулины диагностические флуоресцирующие
РС-вирусные сухие (ИФ-РС)
Иммуноглобулины диагностические флуоресцирующие герпетические сухие (ИФ-Герпес):
герпес 2 типа
Диагностикумы гриппозные для реакции торможения гемагглютинации сухие (ДИГ):
грипп А (Н1N1)pdm09
грипп В (Викторианская линия)
грипп В (Ямагатская линия)
Диагностика гриппозной инфекции по выявлению прироста антител в сыворотках реконвалесцентов, оценка коллективного иммунитета, оценка иммуногенности гриппозных вакцин, научные исследования.
Диагностикумы парагриппозные для реакции торможения гемагглютинации сухие (ДИ-ПГ):
парагрипп 1 типa
парагрипп 2 типа
парагрипп 3 типа
Наименование препарата
Кол-во анализов
Сыворотка диагностическая гриппозная для реакции торможения гемагглютинации сухая (СДГ):
грипп А(Н1N1)pdm 09
грипп В (Викторианская линия)
грипп В (Ямагатская линия)
Идентификация типов/ субтипов вирусов гриппа А и В, выделенных из материалов от больных, изучение антигенной структуры вирусного гемагглютинина, контроль специфичности штаммов вирусов гриппа.
Сыворотка диагностическая парагриппозная для реакции торможения гемагглютинации сухая (СД-ПГ):
парагрипп 1 типа
парагрипп 2 типа
парагрипп 3 типа
Иммуноферментная тест-система для определения антител класса IgG
к вирусу гриппа А (H1N1)pdm 09
к вирусу гриппа А (H3N2)
к вирусу гриппа B
к вирусу парагриппа 1 типа
к вирусу парагриппа 3 типа
Определение антител классов IgG в сыворотках людей, переболевших вирусными ОРВИ по приросту уровня специфических антител (IgG).
Материалом для исследования служат парные сыворотки крови от больных ОРВИ, взятые в первые 5 дней болезни и через 14-30 суток от начала заболевания.
Набор реагентов для культивирования клеток и выделения вирусов гриппа в культуре клеток
Выделение вирусов гриппа, надзор и быстрая расшифровки эпидемий гриппа.
Флуоресцирующие иммуноглобулины обеспечивают быструю (в течение 1,5-2-х часов) возможность непосредственной детекции вирусных антигенов в клинических материалах или в клеточных культурах, инфицированных материалами от больных.
Иммуноглобулины диагностические
флуоресцирующие гриппозные сухие
РУ № ФСР 2009/05255 от 09.07.2009 г.
Иммуноглобулин диагностический флуоресцирующий аденовирусный антигексоновый сухой
РУ № ФСР 2008/03940 от 26.12.2008 г.
Иммуноглобулины диагностические
флуоресцирующие парагриппозные сухие
РУ № ФСР 2009/05254 от 09.07.2009 г.
Иммуноглобулины диагностические
флуоресцирующие РС-вирусные сухие
РУ № ФСР 2009/05256 от 09.07.2009 г.
В лаборатории биотехнологии диагностических препаратов ФГБУ “НИИ гриппа” МЗ РФ разработаны и широко используются в практике здравоохранения Иммуноглобулины диагностические флуоресцирующие сухие, которые представляют собой коньюгат очищенных противовирусных антител с флуоресцеинизотиоцианатом (ФИТЦ). Препараты имеют красящий титр не ниже 1:16, содержат консервант – мертиолат 1:10000, лиофилизированы, выпускаются во флаконах по 0,5 или 1 мл. Флаконы упаковывают в коробки. Количество флаконов в коробке от 1 до 5.В коробку вкладывают Инструкцию по применению. Срок годности препаратов – 2 года.
Диагностикумы гриппозные/парагриппозные для реакции торможения гемагглютинации сухие
Гриппозные диагностикумы для реакции торможения гемагглютинации (РТГА) используют в качестве подтверждающего теста при поступлении больных в стационар на 6-10 сутки заболевания, когда другие тесты (ИФЛ, ПЦР, выделение вируса) оказываются уже мало чувствительными.
Диагностикумы предназначены для субтиповой серодиагностики гриппа (по 4-х кратному приросту титров антител в сыворотках реконвалесцентов); контроля популяционного иммунитета населения; оценки иммуногенности живых и инактивированных гриппозных вакцин.
Препараты готовятся по оригинальным технологиям из антигенно актуальных штаммов, в соответствии с рекомендациями ВОЗ, не содержат инфекционного вируса, включают наполнитель, препятствующий сорбции антигенов на полистироловых планшетах. 1 мл препарата достаточно для тестирования 100 сывороток микрометодом РТГА.
Диагностикумы выпускаются в лиофилизированном виде, во флаконах по 1 мл. Флаконы упаковывают в коробки. Количество флаконов в коробке от 1 до 5. В коробку вкладывают Инструкцию по применению. Срок годности препаратов – 2 года.
Диагностикумы гриппозные для реакции торможения гемагглютинации сухие РУ № ФСР 2009/05253 от 09.07.2009 г.
Специфические сыворотки для идентификации возбудителей ОРВИ
Высокоспецифичные диагностические сыворотки предназначены для идентификации вирусов гриппа А (субтипов H1, H2, H3, H5, Н7, H9) и В (обеих современных эволюционных ветвей), а также других возбудителей ОРВИ в ИФА, реакциях торможения гемагглютинации и микронейтрализации.
Сыворотки выпускаются в лиофилизированном виде, во флаконах по 1 мл. Флаконы упаковывают в коробки. Количество флаконов в коробке от 1 до 5. В коробку вкладывают Инструкцию по применению. Срок годности препаратов – 2 года.
Сыворотка диагностическая гриппозная для реакции торможения гемагглютинации сухая РУ № ФСР 2009/05257 от 09.07.2009 г.
Иммуноферментные тест-системы (ИФТС) для определения антител класса IgG к ОРВИ и гриппу
Современные методы иммунодиагностики с определением классов и субклассов IgG открывают новые возможности в исследовании структуры иммунитета и формирования иммунопатологических состояний.
Характерными особенностями разработанных ИФТС являются:
• высокая чувствительность анализа;
• возможность использования микроколичеств сывороток (0,5 – 1 мкл);
• снижение трудоемкости анализа за счет исключения операций титрования сывороток;
• возможность индикации класс-специфических противовирусных антител;
• сокращение сроков проведения анализов.
Иммуноферментные тест-системы представляет собой 13-компонентный набор, основными реагентами которого являются очищенные вирусные антигены, позитивные и негативные контрольные образцы сывороток, а также конъюгаты моноклональных антител к IgG человека.
Тест-системы предназначены для детекции антител классов IgG в сыворотках людей, переболевших вирусными ОРЗ, рассчитаны на проведение 96 анализов, включая контрольные пробы. Предназначены для серодиагностики инфекций по определению достоверного прироста уровня специфических IgG.
Материалом для исследования служат парные сыворотки крови от больных ОРВИ, взятыми в первые 5 дней болезни и через 14-30 суток от начала заболевания.
Парные сыворотки от одного больного исследуют одновременно, в одной постановке реакции. Постановку реакций осуществляют в соответствии с прилагаемыми Инструкциями по применению. Срок годности ИФТС – 6 месяцев.
ООО “ППДП” оказывает информационную поддержку и консультационные услуги по всему ассортименту своей продукции, а также принимает участие в организации и проведении конференций, семинаров, и других научно-практических мероприятий на базе ФГБУ “НИИ гриппа” Минздрава России.
Читайте также: