Иммунохроматографические экспресс-тесты на сифилис

Обновлено: 28.03.2024

ОПЫТ ИСПОЛЬЗОВАНИЯ ИММУНОХЕМИЛЮМИНЕСЦЕНТНОГО АНАЛИЗА ДЛЯ ДИАГНОСТИКИ СИФИЛИСА

Минуллин И.К., Платонова О.В., Низамова Н.Ю.

В современной практике одним из путей качественного улучшения серодиагностики сифилиса является процесс внедрения автоматизированных систем постановки анализа. Одним из преимуществ иммуноферментного анализа является возможность полной его автоматизации. На сегодняшний день, с этой точки зрения, существует наиболее современный и удобный метод диагностики — это иммунохемилюминесцентный анализ (ИХА). В диагностике сифилиса в нашей стране иммунохемилюминесцентный анализ пока не нашел широкого применения. Целью нашего исследования явилось определение места и значимости ИХА в группе серологических тестов для диагностики сифилиса. Изучались сыворотки пациентов с различными модификациями результатов специфических и неспецифических тестов на сифилис. 1-я группа — 20 сывороток пациентов, ранее пролеченных от сифилиса (отрицательный результат МРП; положительный результат ИФА, РПГА, РИФ); 2-я группа — 20 сывороток от пациентов со свежими формами сифилиса (все тесты положительные); 3-я группа — 20 сывороток от пациентов с отрицательными результатами во всех тестах; 4-я группа — 15 сывороток от пациентов, имеющих ложноположительные результаты в нетрепонемном тесте (МРП) и отрицательные — в ИФА, РПГА, РИФ, среди которых 10 образцов сывороток, полученных от беременных женщин, 2 — от онкологических больных, 1 — от больнго с ХПН, 2 — с заболеваниями печени, 5-я группа — 5 сывороток беременных женщин, имеющих отрицательный результат в нетрепонемном тесте (МРП) и расхождение результатов в трепонемных тестах (положительный результат ИФА; отрицательный результат РПГА и РИФ). Исследования показали, что сыворотки пациентов 1 и 2-й групп в ИХА дали так же, как и другие специфические тесты, положительный результат. При исследовании сывороток крови 3,4 и 5-й групп получили отрицательный результат ИХА. Одновременно было проведено обследование 300 сывороток из ежедневной постановки ИФА на сифилис иммунохемилюминесцентным методом. Наблюдалась полная корреляция результатов анализа. Полученные данные свидетельствуют о том, что ИХА может быть рекомендован для диагностики сифилиса как высокочувствительный и специфический метод. Явное преимущество ИХА — это простота использования, минимальное время получения результата, полная автоматизация процесса, высококачественные реагенты. Учитывая сложность иммунного ответа при сифилисе, иногда необходимой является комплексная диагностика с применением нескольких трепонемных тестов. ИХА наряду с другими специфическими тестами является дополнительным надежным подтверждающим методом в решении сложных экспертных ситуаций у больных сифилисом, а также в решении вопроса о ложной позитивности нетрепонемного теста и, особенно, при расхождении результатов трепонемных тестов.

ОПЫТ ПРИМЕНЕНИЯ ИММУНОХРОМАТОГРАФИЧЕСКОГО ЭКСПРЕСС-ТЕСТА ДЛЯ ДИАГНОСТИКИ СИФИЛИСА

Новосёлов В.С., Федосеев А.С.

Несмотря на то что уровень заболеваемости сифилисом в последние годы существенно снизился, эпидемиологическая ситуация в стране остается напряженной в связи с изменением структуры заболеваемости по формам данной инфекции — увеличением доли скрытых форм болезни. При этом важная роль в своевременном выявлении болезни принадлежит скрининговым лабораторным методам, которые не требуют дополнительного лабораторного оборудования и вместе с тем обеспечивают получение адекватных диагностических результатов уже в процессе приема пациента. В связи с этим актуальность поиска новых диагностических методик сохраняет свою актуальность.

Иммунохроматографический анализ проводился на специальной пористой узкой тест-полоске, куда наносилась исследуемая сыворотка крови. Специфические антитела, содержащиеся в образце, связываются с конъюгатом антигенов бледной трепонемы и коллоидным селеном, образуя иммунные комплексы. Продолжая мигрировать вдоль материала тест-полоски, иммунные комплексы достигают зоны учета результатов, где нанесены иммобилизированные лизатные антигены бледной трепонемы. В этом месте происходит вторичное связывание образованных ранее иммунных комплексов за счет свободных валентностей антитрепонемных антител с формированием более сложных комплексов, что проявляется в этой зоне тест-полоски в виде полосы красного цвета различной интенсивности. Компоненты образца при достижении зоны внутреннего контроля теста вступают во взаимодействие с нанесенным в этом участке авидином, что приводит к появлению красной полосы в данной зоне. При отсутствии трепонемных антител образования комплексов в зоне учета результатов исследования не происходит и формируется окрашенная полоса только в зоне учета внутреннего контроля теста, что говорит о правильном проведении процедуры исследования.

Результаты данной работы позволили выявить преимущества скринингового обследования пациентов на сифилис при использовании иммунохроматографического анализа, которые заключались в простоте исполнения анализа, отсутствии необходимости приобретения дополнительного дорогостоящего лабораторного оборудования, быстрой и несложной интерпретации результатов, высокой чувствительности и специфичности метода, невысоких экономических затратах на расходные материалы.

ОПЫТ ИСПОЛЬЗОВАНИЯ ИММУНОХЕМИЛЮМИНЕСЦЕНТНОГО АНАЛИЗА ДЛЯ ДИАГНОСТИКИ СИФИЛИСА

Минуллин И.К., Платонова О.В., Низамова Н.Ю.

В современной практике одним из путей качественного улучшения серодиагностики сифилиса является процесс внедрения автоматизированных систем постановки анализа. Одним из преимуществ иммуноферментного анализа является возможность полной его автоматизации. На сегодняшний день, с этой точки зрения, существует наиболее современный и удобный метод диагностики — это иммунохемилюминесцентный анализ (ИХА). В диагностике сифилиса в нашей стране иммунохемилюминесцентный анализ пока не нашел широкого применения. Целью нашего исследования явилось определение места и значимости ИХА в группе серологических тестов для диагностики сифилиса. Изучались сыворотки пациентов с различными модификациями результатов специфических и неспецифических тестов на сифилис. 1-я группа — 20 сывороток пациентов, ранее пролеченных от сифилиса (отрицательный результат МРП; положительный результат ИФА, РПГА, РИФ); 2-я группа — 20 сывороток от пациентов со свежими формами сифилиса (все тесты положительные); 3-я группа — 20 сывороток от пациентов с отрицательными результатами во всех тестах; 4-я группа — 15 сывороток от пациентов, имеющих ложноположительные результаты в нетрепонемном тесте (МРП) и отрицательные — в ИФА, РПГА, РИФ, среди которых 10 образцов сывороток, полученных от беременных женщин, 2 — от онкологических больных, 1 — от больнго с ХПН, 2 — с заболеваниями печени, 5-я группа — 5 сывороток беременных женщин, имеющих отрицательный результат в нетрепонемном тесте (МРП) и расхождение результатов в трепонемных тестах (положительный результат ИФА; отрицательный результат РПГА и РИФ). Исследования показали, что сыворотки пациентов 1 и 2-й групп в ИХА дали так же, как и другие специфические тесты, положительный результат. При исследовании сывороток крови 3,4 и 5-й групп получили отрицательный результат ИХА. Одновременно было проведено обследование 300 сывороток из ежедневной постановки ИФА на сифилис иммунохемилюминесцентным методом. Наблюдалась полная корреляция результатов анализа. Полученные данные свидетельствуют о том, что ИХА может быть рекомендован для диагностики сифилиса как высокочувствительный и специфический метод. Явное преимущество ИХА — это простота использования, минимальное время получения результата, полная автоматизация процесса, высококачественные реагенты. Учитывая сложность иммунного ответа при сифилисе, иногда необходимой является комплексная диагностика с применением нескольких трепонемных тестов. ИХА наряду с другими специфическими тестами является дополнительным надежным подтверждающим методом в решении сложных экспертных ситуаций у больных сифилисом, а также в решении вопроса о ложной позитивности нетрепонемного теста и, особенно, при расхождении результатов трепонемных тестов.

Информацию из данного раздела нельзя использовать для самодиагностики и самолечения. В случае боли или иного обострения заболевания диагностические исследования должен назначать только лечащий врач. Для постановки диагноза и правильного назначения лечения следует обращаться к Вашему лечащему врачу.

Напоминаем вам, что самостоятельная интерпретация результатов недопустима, и приводимая ниже информация носит исключительно справочный характер.

Сифилис RPR: показания к назначению, правила подготовки к сдаче анализа, расшифровка результатов и показатели нормы.

Определение

Антикардиолипиновый тест RPR (Rapid Plasma Reagin, тест быстрых плазменных реагинов, Nontreponemal test, syphilis screening test, STS) для выявления сифилиса - современный аналог реакции Вассермана (RW).

RPR-тест является самым высокочувствительным тестом среди нетрепонемных тестов (тестов, определяющих антитела к липоидным антигенам тканей хозяина или возбудителя) при первичном, скрытом и позднем сифилисе.

Показания к назначению исследования

Сифилис – инфекционное заболевание, вызываемое бледной трепонемой (Treponema pallidum), характеризуется периодичностью течения и поражением кожи, слизистых оболочек, внутренних органов и опорно-двигательного аппарата.

Трепонема.jpg

Заболевание может передаваться половым путем, трансплацентарным (от больной матери плоду через плаценту), трансфузионным (при переливании крови от донора, больного сифилисом), контактно-бытовым (встречается преимущественно среди детей при бытовом контакте с родителями, имеющими сифилитические высыпания на коже и/или слизистых оболочках), профессиональным (инфицированию подвержены врачи - акушеры-гинекологи, хирурги, стоматологи при выполнении профессиональных обязанностей).

Показаниями для обследования на сифилис являются:

  • скрининговое обследование пациентов стационаров, беременных, доноров, медицинских работников, работников детских учреждений, торговли и общественного питания;
  • обследование лиц, имевших половой или бытовой контакт с больным сифилисом;
  • обследование лиц при подозрении на сифилис (присутствии симптомов, указывающих на возможное наличие заболевания);
  • обследование новорожденных с целью выявления врожденного сифилиса;
  • контроль эффективности терапии.

Подготовка к процедуре


Специальная подготовка к сдаче RPR-теста не требуется. Рекомендуется взятие крови не ранее чем через 4 часа после последнего приема пищи. Кроме того, не следует курить хотя бы 30 минут до исследования.

Синонимы: Анализ крови на сифилис; Неспецифический антифосфолипидный (реагиновый) тест, современный аналог реакции Вассермана (RW). Nontreponemal test; Rapid plasma reagin test; Syphilis screening test; STS. Краткое описание исследования RPR ­тест RPR тест – чувствительный нетрепонемный тес.

Метод определения Флокуляционный (RPR-антиген, использующийся в наборах, является модификацией VDRL антигена).

Синонимы: Анализ крови на сифилис; Неспецифический антифосфолипидный (реагиновый) тест, современный аналог реакции Вассермана (RW). Nontreponemal test; Rapid plasma reagin test; Syphilis screening test; STS.

Краткое описание исследования RPR ­тест

RPR тест – чувствительный нетрепонемный тест, используемый для скрининга и комплексной диагностики сифилиса, современный аналог реакции Вассермана (RW) с кардиолипиновым антигеном, модификация VDRL (Venereal Disease Research Laboratory) теста.

RPR – антитела (реагины) классов IgG и IgM, направленные против антигенов липоидного материала, высвобождающегося из поврежденных клеток больного сифилисом. Поскольку эти антитела не являются специфичными к антигенам Treponema pallidum, RPR-тест относят к группе нетрепонемных тестов лабораторной диагностики сифилиса. Это исследование обладает высокой чувствительностью и позволяет выявить активную инфекцию. Применение RPR-теста рекомендовано приказом МЗ РФ для первичного скрининга и наблюдения за ходом лечения сифилиса. Антифосфолипидные (антикардиолипиновые) антитела, выявляемые в данном тесте, находят у 70-80% лиц с первичным сифилисом и почти у 100% пациентов с вторичным и ранним латентным сифилисом. В большинстве случаев положительный результат RPR-теста отмечается через 7-10 дней после появления первичного шанкра (или через 3-5 недель после инфицирования). Титры снижаются после наступления вторичной стадии сифилиса. Некоторые пациенты на поздних стадиях болезни и пациенты, прошедшие лечение, становятся нереактивными по RPR-тесту (при подозрении на поздние стадии заболевания целесообразно одновременное назначение трепонемного теста (см. тест № 70 )). При применении RPR-теста в целях контроля терапии снижение титра RPR в четыре и более раз в течение одного года после проведенной терапии подтверждает ее эффективность. В 90-98% случаев после лечения сифилиса результат RPR-теста становится отрицательным.

Антикардиолипиновые (антифосфолипидные) антитела могут появляться не только вследствие сифилиса или других трепонемных инфекций, но и при ряде иных заболеваний и состояний (особенно часто при аутоиммунной патологии, например, системная красная волчанка, антифосфолипидный синдром). Такие состояния могут быть причиной ложноположительных результатов RPR-теста при скрининге сифилиса. Поэтому при получении положительного результата в RPR-тесте обязательно проведение дополнительного подтверждающего исследования в специцфическом трепонемном тесте (см. тест № 70 ), отрицательный результат которого позволяет исключить сифилис. Комбинированное назначение этих тестов представляет оптимальный вариант лабораторного исследования для обнаружения или исключения сифилиса на всех стадиях. Результаты лабораторных исследований следует оценивать в комплексе с клинико-анамнестическими данными, применяя в случае сомнений углубленные исследования с применением альтернативных вариантов трепонемных тестов (см. тесты № 1205 , № 1206 ).

С какой целью выполняют исследование RPR ­тест

Чувствительный нетрепонемный тест, современный аналог реакции Вассермана (RW) с кардиолипиновым антигеном, модификация VDRL (Venereal Disease Research Laboratory) теста, используется для скрининга и комплексной диагностики сифилиса.

Что может повлиять на результат исследования RPR ­тест

Тест не является специфическим. Поэтому иногда возможно возникновение ложноположительных реакций. Антилипоидные антитела могут появляться не только вследствие сифилиса или других трепонемных инфекций, но и в ответ на развитие нетрепонемных заболеваний острой или хронической природы, при которых наблюдается повреждение тканей (особенно часто при аутоиммунных заболеваниях).

При получении положительного результата в RPR-тесте, пациент должен обследоваться дерматовенерологом с повторным исследованием крови с помощью специфического трепонемного диагностического теста (в лаборатории ИНВИТРО – тест № 70 сифилис ИФА, антитела к Treponema pallidum IgG/IgM, выявляющий специфические антитела к антигену Treponema pallidum).

Правила подготовки к исследованию RPR ­тест

Специальная подготовка не требуется. Рекомендуется взятие крови не ранее чем через 4 часа после последнего приема пищи.

В каких случаях проводят RPR-­тест

  • Первичное обследование при подозрении на сифилис (с подтверждением положительных реакций в любом трепонемном тесте).
  • Диагностика скрытого сифилиса (с подтверждением положительных реакций в двух трепонемных тестах).
  • Обследование доноров (в сочетании с трепонемным тестом).
  • Скрининговое обследование.

Интерпретация результатов исследований содержит информацию для лечащего врача и не является диагнозом. Информацию из этого раздела нельзя использовать для самодиагностики и самолечения. Точный диагноз ставит врач, используя как результаты данного обследования, так и нужную информацию из других источников: анамнеза, результатов других обследований и т.д.

Трактовка результатов исследования RPR – теста

Читайте также: