Интерпретация тестов на сифилис

Обновлено: 18.04.2024

Выявление в сыворотке крови специфических антител к бледной трепонеме (Treponemapallidum), используемое для подтверждения результатов неспецифических тестов на сифилис, скрининга сифилиса, обследования контактных лиц и доноров крови.

Синонимы русские

Люэс, бледная трепонема.

Синонимы английские

Syphilis, passive hemagglutination test; Syphilis, indirect hemagglutination test; Treponema Pallidum Hemaglutination Assay, TPHA.

Метод исследования

Реакция непрямой гемагглютинации (РНГА).

Какой биоматериал можно использовать для исследования?

Как правильно подготовиться к исследованию?

Не курить в течение 30 минут до сдачи крови.

Общая информация об исследовании

Как правило, результат РПГА остается положительным даже после лечения сифилиса. Исключение составляет ситуация, когда терапия была проведена в самом начале заболевания. Так как результат сохраняется положительным пожизненно, РПГА не предназначена для дифференциальной диагностики раннего и позднего сифилиса. По этой же причине данное исследование не используют, чтобы оценивать эффективность лечения заболевания.

При добавлении сыворотки больных сифилисом к реагенту РПГА происходит агглютинация (склеивание) и выпадение в осадок эритроцитов. Степень агглютинации зависит от концентрации антител в сыворотке, поэтому РПГА позволяет не только выявить присутствие антител, но и определить их количество. Результат анализа представлен в виде титра антител. Любой положительный титр указывает на возможную инфекцию T. pallidum, однако возможны ложноположительные реакции. Значительно повышенные показатели характерны для вторичного и скрытого раннего сифилиса.

Ложноположительные результаты РПГА наблюдаются в 0,05-2,5 % случаев и чаще всего обусловлены наличием в сыворотке пациента аутоантител (при системных заболеваниях соединительной ткани, например при системной красной волчанке), антител к другим возбудителям, схожим по антигенной структуре с T. pallidum (Borrelia burgdorferi, сапрофитные трепонемы полости рта и гениталий), а также другими физиологическими и патологическими состояниями (беременность, онкологические заболевания, острый инфаркт миокарда). Как правило, титр ложноположительной реакции РПГА низкий. Исключение составляют результаты РПГА у пациентов с диффузными заболеваниями соединительной ткани и злокачественными новообразованиями, когда титр антител может достигать очень высоких значений. Ложноположительные реакции негативируются спонтанно и бесследно в течение 4-6 месяцев (острая ложноположительныя реакция, часто на фоне беременности) или более длительного периода (хроническая ложноположительная реакция).

Для чего используется исследование?

Когда назначается исследование?

Что означают результаты?

Референсные значения: отрицательно.

Причины положительного результата:

первичный, вторичный, третичный, а также скрытый сифилис (приобретенный и врожденный);
беременность; ;
гепатиты В и С;
употребление инъекционных наркотиков;
острый инфаркт миокарда;
диффузные заболевания соединительной ткани;
возвратный тиф;
лептоспироз;
клещевой боррелиоз;
тропические трепонематозы (фрамбезия, беджель, пинта);
воспалительные процессы, обусловленные сапрофитными трепонемами полости рта и гениталий;
злокачественные новообразования;
обширная травма и переломы;
бактериальный эндокардит;
туберкулез;
инфекционный мононуклеоз;
поствакцинальная реакция.

Причины отрицательного результата:

отсутствие сифилиса;
первые 2-4 недели после инфекции T. pallidum;
неправильное взятие материала на исследование.

Что может влиять на результат?

Результат анализа может быть ложноотрицательным в течение первых 2-4 (до 6) недель после заражения.

Важные замечания

Исследование не позволяет дифференцировать;

сифилис (T. pallidum) и другие трепонематозы (T. pallidumsubspeciespertenue, endemicum, carateum);
ранний и поздний сифилис.

Также рекомендуется

Кто назначает исследование?

Дерматовенеролог, невролог, врач общей практики, эпидемиолог.

Литература

French P, Gomberg M, Janier M, Schmidt B, van Voorst Vader P, Young H; IUST. IUSTI: 2008 European Guidelines on the Management of Syphilis. Int J STD AIDS. 2009 May;20(5):300-9.
Seña AC, White BL, Sparling PF. Novel Treponema pallidum serologic tests: a paradigm shift in syphilis screening for the 21stcentury. Clin Infect Dis. 2010 Sep 15;51(6):700-8.
Luger A. Diagnosis of syphilis. Bull World Health Organ. 1981;59(5):647-54.
Holmes K.K. Sexually Transmitted Diseases / K.K. Holmes, P.F. Sparling, W.E. Stamm; 4th ed. — McGraw-Hill, 2008.

Чаще всего для диагностики сифилиса применяются серологические исследования.

Клиническим материалом для анализа является кровь.

Расшифровка крови на сифилис отличается, в зависимости от применяемого метода.

Расшифровка результатов RPR на сифилис

Скрининговая диагностика сифилиса часто проводится при помощи нетрепонемных тестов.

Один из часто используемых анализов называется RPR.

В ходе этого исследования в крови определяются антитела к кардиолипину.

Результаты могут быть положительными или отрицательными.

Положительные свидетельствуют о заражении сифилисом.

Но встречаются и ложноположительные реакции – при некоторых вирусных и бактериальных инфекциях, онкозаболеваниях, аутоиммунных патологиях.

Результат может оставаться положительным на протяжении 1 года после лечения сифилиса.

При RPR могут также встречаться ложноотрицательные результаты.

Они в основном наблюдаются в случаях, если:

больной заразился сифилисом меньше 3 месяцев назад;
пациент страдает третичным серогенативным сифилисом.

Положительный результат RPR требует проведения дополнительных тестов.

Обычно это иммуноферментный анализ или реакция прямой гемагглютинации.

О расшифровке крови на сифилис
рассказывает подполковник
медицинской службы, врач
Ленкин Сергей Геннадьевич

Содержание данной статьи проверено и подтверждено на соответствие медицинским
стандартам врачем дерматовенерологом, урологом, к.м.н.

Ленкиным Сергеем Геннадьевичем

Наименование	Срок	Цена
Прием венеролога	900.00 руб.
Сифилис РПГА-тест п/колич.	1 д.	600.00 руб.
Антитела к Treponema pallidum, суммарные	1 д.	600.00 руб.
Микрореакция на сифилис, полуколичественно (RPR)	1 д.	600.00 руб.

Расшифровка анализа крови ИФА на сифилис

ИФА входит в число наиболее востребованных методов диагностики сифилиса.

Это исследование недорогое и эффективное.

Оно может использоваться как подтверждающий метод в случае положительного RPR.

ИФА относится к числу трепонемных тестов.

В ходе исследования определяются антитела к бледной спирохете.

Обнаруживаются иммуноглобулины двух классов: IgG и IgM.

Положительные результаты исследования могут быть не раньше, чем через 20 дней после инфицирования.

Обычно проводится количественный анализ с определением титра антител.

положительно;
отрицательно;
сомнительно.

Положительный анализ не всегда свидетельствует о том, что пациент болен сифилисом.

Возможные причины ложноположительных результатов:

беременность;
аутоиммунные патологии;
рак;
болезни печени;
перенесенный в прошлом сифилис.

В случае подозрения на ложноположительный результат или при сомнительном результате исследования проводятся другие анализы на сифилис.

Это могут быть как трепонемные (РПГА), так и нетрепонемные (RPR) тесты.

Расшифровка РПГА на сифилис

При проведении РПГА используется обычно качественное или полуколичественное определение антител.

При качественном исследовании может быть два вида результатов:

Результаты могут быть положительными только через 2 месяца после инфицирования.

Они в большинстве случаев остаются положительными на протяжении всей жизни после излечения заболевания.

Более информативным является полуколичественное исследование.

Расшифровка анализа крови на сифилис РПГА полуколичественным методом включает указание титра антител.

Возможны три результата:

титр антител выше 1:640 свидетельствует о заражении сифилисом;
титр антител меньше 1:640 говорит о перенесенном в прошлом заболевании;
отсутствие антител свидетельствует о том, что человек здоров.

Диагностическая тактика при подозрении на сифилис может существенно отличаться в разных клинических ситуациях.

Обращайтесь в нашу клинику, если у вас есть симптомы, указывающие на это заболевание.

У нас можно сдать любые анализы на сифилис: скрининговые или подтверждающие.

Опытный врач проведет расшифровку результатов исследований.

При положительном результате вам будет назначено лечение, которое позволит в короткие сроки вылечить сифилис.

При подозрении на сифилис обращайтесь к автору этой статьи – венерологу в Москве с 15 летним опытом работы.

Иммуноблот при сифилисе на Джи и М антитела — высокочувствительное, специфичное исследование. Позволяет опровергнуть/подтвердить диагноз при получении неопределенных или позитивных данных, полученных при помощи классических тестов. Отличается информативностью и 99-100% достоверностью.

Метод рекомендован как референтный (максимально точный) при необходимости выполнения дифференциальной диагностики, для подтверждения диагноза латентного сифилиса.

Лабораторная диагностика сифилиса

Серологические исследования базируются на иммунных связях, которые наблюдаются в сыворотке крови.

Белковые соединения сливаются с антигенами, в результате этого взаимодействия антигены микробов купируются.

После внедрения возбудителя (Treponema pallidum) в организме начинают вырабатываться защитные антитела.

Они атакуют микробы и предотвращают распространение болезни.

Для анализа берется кровь, добавляется в нее суспензия микробов.

Если реакция не произошла — человек здоров, произошла — болен.

Иммуноглобулины при сифилисе (иммуноглобулины к бледной трепонеме) — белки-защитники, продуцируемые для его нейтрализации.

Они выявляют инфекцию в крови, ее остатки после проведенной терапии.

Каждый из антител к Treponema pallidum имеет конкретный информативный статус, назначение и конфигурацию.

Иммуноглобулины А при сифилисе

Осуществляют контроль за местным иммунным ответом — ранней защитой, реагирующей на попадание инфекционного агента в определенный сегмент организма.

Производятся в значительной концентрации на слизистых кишечника, легких, полости рта, в незначительной — в крови.

Являются маркером активной инфекции, считаются неспецифическими, поскольку дают ответ и на другие бактерии.

Иммуноглобулины М при сифилисе

Курируют общий иммунитет.

Отличаются слабой специфичностью.

Способствуют эвакуации антигенов, предупреждают их фиксацию в тканях и запуск патологических процессов.

Их наличие указывает на активную стадию заболевания, после лечения эти белки пропадают.

Иммуноглобулины G при сифилисе

Основные иммуноглобулины вторичного иммунитета.

Обеспечивают высокую напряженность иммунного ответа в течение длительного срока.

Клетки памяти этих белков организм способен продуцировать несколько лет после приема профильных лекарственных препаратов.

Что такое титры иммуноглобулинов и как они падают

Титры иммуноглобулинов — термин, применяемый для определения концентраций белковых молекул.

На 4-5 сутки после заражения в крови определяются IgA.

Но вследствие того, что данный период инфекционного процесса выраженной клиники не дает, анализы на них проводятся крайне редко.

Через 7-8 суток после инфицирования клетки плазмы начинают синтезировать IgM.

Белки вырабатываются в первичном/вторичном периоде сифилиса, в третичном — ликвидируются.

Контролировать, как падает их концентрация, очень важно для оценки качества лечения.

Если на протяжении 2-3 недель после их титры снижаются медленно, можно говорить о микробиологической неэффективности назначенной терапии.

Иммуноглобулины класса G появляются спустя 35-40 дней после заражения

Через 55-60 суток их уже можно увидеть в обычных скрининговых анализах.

Когда исчезают из крови иммуноглобулины при сифилисе?

IgM продуцируются 3-4 года после подтвержденной клинической ремиссии.

У некоторых пациентов белок способен выделяться на протяжении всей жизни, что не гарантирует 100% защиты от повторного заражения.

Иммуноглобулины при сифилисе: кто назначает, когда проводится анализ

Специфические антитела M появляются через одну-две недели после внедрения возбудителя в организм.

Максимальная концентрация трепонемы фиксируется на 40-60 день, пропадает — спустя 3-5 месяцев после лечебного курса, 12-18 месяцев — без бактериальной терапии.

Выявляются у лиц на первой/второй фазе сифилиса.

Позволяют установить точные сроки заражения.

IgG обнаруживаются на 25-30 сутки патологического процесса.

Их титры постоянно растут, максимальная концентрация отмечается через 2 года после инфицирования.

Особой подготовки тест не требует: перед забором крови пациенту нужно воздержаться от еды и курения 4-5 часов.

От употребления спиртосодержащих напитков — 24 часа.

Показания:

наличие явной клинической симптоматики;
сомнительные/положительные результаты, полученные в ходе предыдущих тестов, особенно на фоне онкологии, туберкулеза, алкоголизма, диабета в анамнезе;
подозрение на болезнь при приеме антисептических и антибактериальных препаратов;
врожденная форма;
половой акт с больным человеком;
ВИЧ-инфекция;
выявленные венерические болезни;
язвенные поражения гениталий; .

Интерпретация результатов иммуноблота при сифилисе

Положительный результат указывает на недавнее заражение.

Повторный (+) при проведении исследования через 1-1,5 месяца служит подтверждением диагноза сифилис.

Обнаружение IgM у новорожденных младенцев говорит о наличии сифилитической инфекции.

Поскольку плацентарная передача материнских IgM невозможна.

Отрицательный результат предполагает 2 варианта событий: инфицирования не было, анализ был проведен до выраженной реакции иммунной системы.

В сомнительных случаях через 7 дней проводится еще одно тестирование.

Критерии положительности иммуноблота:

(+): для M — 1 четкая полоса, для G — 2 четких полосы;
(-): для G, M — полосы отсутствуют;
(-/+): для G — 1 четкая полоса, для M — 1 слабая полоса.

Сравнение с другими методами анализов на сифилис

В клинической практике для скринингового (предварительного) обследования на сифилис проводят исследование РМП или улучшенный вариант (РПР).

При положительных данных ставится подтверждающий трепонемный тест — ИФА, РПГА, РИТ (РИБТ), РИФ:

Главное преимущество иммуноблота по сравнению с другими тестами заключается в том, что ответ антиген-антитело не требует дорогих технологий и зависит от массы белка.

Второй плюс — на результат не влияют отсутствие растворимости, нестабильность антигенов.

В анализе есть возможность определить реакцию иммуноглобулинов с несколькими антигенами.

Это имеет большую диагностическую ценность, особенно в сложных случаях.

Тест достаточно прост в исполнении, при необходимости позволяет выявить IgM, IgG изолированно друг от друга.

Ложноположительные и ложноотрицательные анализы на сифилис

Ложные серологические реакции могут быть обусловлены качеством реагентов, погрешностями в ходе выполнения исследования, техническими неточностями.

Ложноотрицательные анализы выдаются при нарушениях сроков хранения приборов для диагностики.

Это влечет за собой снижение чувствительности реакции.

Ложноположительные результаты возникают вследствие ошибок при приготовлении сывороток, неравномерной концентрация антигена, нарушений при заборе крови.

Инфекции/состояния, при которых фиксируются ложноположительные результаты:

беременность;
пневмония;
мононуклеоз;
ВИЧ;
гепатит;
онкологический процесс.

Причины ложноотрицательных реакций:

иммунодефицитные состояния;
наличие конкуренции между G и M иммуноглобулинами;
при ИФА ложный результат может быть обусловлен иммунной недостаточностью, ВИЧ (вторичный сифилис), наличием серонегативной фазы (первичный сифилис).

Если тест вызывает сомнения, целесообразно его повторить через 5-10 дней, пройти дополнительные обследования по назначению врача-венеролога.

Для диагностики сифилиса обращайтесь к автору этой статьи – венерологу в Москве с многолетним опытом работы.

Для диагностики сифилиса применяется множество методов исследования, различающихся по технике проведения и предназначению. Прямые методы направлены на обнаружение возбудителя в исследуемом материале с помощью микроскопии (микроскопия в темном поле и др.) или ПЦР.

Помимо методов прямой детекции бледной трепонемы (T. pallidum), при обследовании на сифилис широкое применение получили непрямые (серологические) методы исследования, выявляющие антитела к возбудителю сифилиса в сыворотке крови и цереброспинальной жидкости. К непрямым методам диагностики сифилиса относятся серологические реакции ИФА, РПГА, КСР, РИФ и РИФ-абс, РИБТ, ПЦР, экспресс-метод, иммуноблот и другие.

Серологические методы диагностики инфекционных заболеваний.

Серологические критерии диагностики основаны на специфических реакциях "антиген-антитело". Реагируют антигены (компоненты клеточных стенок, жгутиков, капсул, ДНК и токсинов) тех микроорганизмов, которые необходимо определить, с антителами, содержащимися в сыворотках. Между антигенами и соответствующими им антителами происходит связывание, что и положено в основу методов серологической диагностики. Серологические реакции применяются для определения неизвестного антигена (источником которого является бактерия, вирус, токсин и др.) с помощью известного антитела или для определения антитела в сыворотке с помощью известного антигена.

Серологические реакции классифицируют в зависимости от состояния антигена и особенностей среды, в которой взаимодействуют антиген и антитело, а также по способу проведения.

Для проведения серологических реакций испольуют множество лабораторных методов, таких, как агглютинация, преципитация, связывание комплемента, иммунофлуоресценция, иммуноферментный и радиоиммунный анализ и другие. Эти реакции позволяют эффективно проводить предварительную идентификацию микроорганизмов.

Сыворотки, которые необходимы для постановки серологических реакций, получают экспериментальным путем, в частности, их производят институты вакцин и сывороток, и предлагают в составе коммерческих диагностических наборов.

Серологические методы являются важным инструментом в диагностике и лечении инфекционных заболеваний человека и животных, поскольку с их помощью можно не только идентифицировать возбудителя заболевания, но и обнаружить в крови больных и переболевших специфические антитела к соответствующим возбудителям. Серологические методы в настоящее время являются самыми эффективными методами диагностики при невозможности или трудностях выделения возбудителя, и сравнительно редко дают ложноположительные и ложноотрицательные результаты.

Использование серологических методов для диагностики сифилиса

В основе серологических лабораторных методов диагностики сифилиса лежит способность организма давать иммунный ответ на появление возбудителя. С помощью серологических реакций в сыворотке (плазме) крови (или цереброспинальной жидкости) выявляют следы иммунного ответа на заражение, а именно антитела к антигенам бледной трепонемы, или же сами антигены.

Для того, чтобы установить специфический характер имеющихся клинических проявлений (т.е. что они являются следствием именно сифилиса) и, в дальнейшем, контролировать динамику патологического процесса, предложено большое количество серологических методов исследований. Эти же методы также широко применяют для скрининга населения.

В соответствии с действующими национальными руководствами и клиническими методическими рекомендациями, во многих странах мира при обследованиях населения с целью выявления больных сифилисом и при установлении клинического диагноза используются передовые серологические методы. Их применяют как при наличии клинических признаков болезни у пациентов, так и в латентные периоды.

Постановка серологических реакций — один из наиболее надежных методов диагностики сифилиса. Стандартизованные серологические реакции с регламентированной методикой постановки называются серологическими тестами на сифилис. Учитывая то, что почти все серологические реакции на сифилис в определенных условиях могут быть ложноположительными или ложноотрицательными, их следует ставить в комплексе и, при необходимости, в динамике.

Серологические реакции, которые используются для определения антител в сыворотке крови больного, отличаются друг от друга чувствительностью, специфичностью, сложностью постановки и стоимостью. Помимо классических методов, для эффективной серодиагностики сифилиса используются иммунологические тесты и технологии, получившие в 21 веке новый импульс к развитию.

Антитела выявляются различными иммунохимическими (серологическими) методами, среди которых осадочные реакции, иммуноферментный, иммунохемилюминесцентный, иммунохроматографический анализы, линейный иммуноблоттинг, исследование с применением проточной флюорометрии, технология иммуночипов и другие.

подтверждения клинического диагноза сифилиса,
постановки диагноза скрытого сифилиса,
контроля за эффективностью лечения, как один из критериев излеченности больных сифилисом,
профилактики сифилиса (скрининговое обследование определенных групп населения с целью выявления патологии).

Важнейшие свойства, необходимые серологическим тестам - чувствительность, специфичность, воспроизводимость

Решающим критерием при выборе метода лабораторной диагностики является его эффективность — чувствительность, специфичность и воспроизводимость.

Чувствительность — это доля положительных результатов у больных. Чувствительность метода определяется процентом положительных результатов исследования проб, заведомо содержащих специфические маркеры возбудителя (нпр., антигены возбудителя или антитела к ним).

Специфичность — доля отрицательных результатов теста у здоровых пациентов. Специфичность метода определяется процентом отрицательных результатов исследования проб, заведомо не содержащих специфические маркеры возбудителя. Таким образом, чем выше чувствительность и специфичность, тем надежнее и достовернее метод исследования.

К важным диагностическим критериям также относится воспроизводимость результатов при повторных исследованиях одних и тех же проб. Следует отметить, что, несмотря на значительные достижения в области высоких технологий, не существует методов, обеспечивающих 100% (абсолютную) чувствительность и специфичность во всех исследуемых биопробах.

В настоящее время в России официально регистрируются тест-системы, наборы, ингредиенты, обладающие при постановке реакции менее 95% чувствительностью и специфичностью. Таким образом, всегда существует возможность получения неадекватного результата.

Классификация тестов по типу применяемого антигена. Трепонемные и нетрепонемные тесты на сифилис

В современной венерологии для диагностических целей используется более десятка вариантов серологических реакций на сифилис, которые можно подразделить по разным критериям на различные категории. Классификацию проводят по методологии проведения исследований, области применения, скорости, дешевизне, требованиям к лабораторной оснащенности и т.д.

По типу используемых антигенов, диагностические тесты традиционно разделяют на две группы— нетрепонемные и трепонемные серологические тесты.

Трепонемные реакции теоретически более специфичны, однако они также дают ложноположительные результаты. Более того, они не позволяют дифференцировать нелеченный и излеченный сифилис. Результаты трепонемных реакций будут положительными в обоих случаях. Нетрепонемные реакции позволяют различать нелеченную или недавно перенесенную и излеченную инфекцию.

При обследовании рекомендуется проводить и трепонемную, и нетрепонемную реакции. Для установки и подтверждения диагноза "сифилис" требуются положительные результаты при проведении тестов обоих типов — трепонемных и нетрепонемных. Поэтому нетрепонемные тесты применяются в комбинации с трепонемными тестами, и проводятся до начала, в процессе и после окончания лечения в определенные временные интервалы.

1. Нетрепонемные тесты

RW — реакция Вассермана с липидными антигенами (реакция связывания комплемента с кардиолипиновым антигеном, РСКк)
реакция Канна (не используется в настоящее время),
цитохолевая реакция Закс-Витебского (не используется в настоящее время),
микрореакция преципитации с плазмой или инактивированной сывороткой (МРП или РМП),
RPR (тест быстрых плазменных реагинов, Rapid Plasma reagin),
TRUST (тест с толуидиновым красным и непрогретой сывороткой, Toluidin Red Unheated Serum Test).

Реактивность в нетрепонемных тестах обычно указывает на повреждение тканей и не всегда специфична в отношении сифилиса. Простота выполнения и низкая стоимость позволяет использовать их как отборочные реакции при установлении предварительного диагноза сифилиса.

2. Трепонемные тесты

В трепонемных тестах используются специфические антигены трепонем. Эти тесты обязательны для подтверждения диагноза (РПГА, РИТ, РИФ и ИФА). Они являются более сложными и дорогостоящими, чем тесты 1-й группы, но и более специфичными и чувствительными. Выявление антител в спинно-мозговой жидкости также производится с помощью трепонемных тестов.

Традиционные трепонемные реакции, подтверждающие диагноз сифилиса, требуют дорогого лабораторного оборудования и опытного персонала, поэтому они редко проводятся вне специализированных лабораторий. Однако сейчас их можно заменить простыми и быстрыми трепонемными реакциями, которые возможно проводить на местах и в которых используется цельная кровь. Проведение этих реакций не требует длительного обучения, специальных условий для хранения реактивов и оборудования.

Сравнительная дешевизна, удобство и практичность трепонемных экспресс- реакций привлекают к ним внимание не только как к методам подтверждения диагноза. Эти реакции могут применяться для скрининга сифилиса в рамках оказания первичной медицинской помощи (их можно проводить на местах, в том же лечебно-профилактическом учреждении) или в районах, где лаборатории не доступны. Однако поскольку антитела к T. pallidum определяются на протяжении ряда лет независимо от того, лечился больной или нет, трепонемные экспресс-реакции нельзя использовать для оценки эффективности лечения и дифференциальной диагностики нелеченного и излеченного сифилиса.

Классификация серологических методов диагностики сифилиса по типу определяемых антител

В современной дерматовенерологии для диагностики используются различные серологические реакции на сифилис. Часть методов, которые были актуальны ещё десять лет назад, перестают применяться из-за сложности или недостаточной специфичности. В зависимости от выявляемых антител, методы серологической диагностики сифилиса подразделяются на три группы:

1) флокуляционные: микрореакция на стекле с липидными антигенами —экспресс-метод диагностики (микрореакции преципитации — МРП), VDRL, CMF (cardiolipin microflocculation test), RPR и др.;

2) реакция связывания комплемента (РСК) с липидными антигенами: реакция Вассермана (РВ), качественная и количественная методика постановки, термостатная и на холоде (реакция Колмера);

3) осадочные реакции, которые в настоящее время не используются: реакция преципитации Кана, цитохолевая реакция Закса — Витебского и др.;

II. Групповые трепонемные реакции — определяются антитела к групповым трепонемным антигенам (входящим в состав микробной клетки как патогенных, так и сапрофитных трепонем):

III. Видоспецифичные протеиновые трепонемные реакции — определяются антитела к специфическим видовым антигенам Treponema pallidum:

Практическое использование серологических реакций на сифилис

За рубежом при массовых обследованиях населения и при необходимости экстренного выявления сифилиса используются нетрепонемные отборочные реакции (VDRL, RPR и др.). Для постановки диагноза требуется подтверждение в трепонемных тестах РИФ-Абс (FTA-ABS), РПГА или TPPA. В настоящее время, рекомендуется использовать ИФА, как замену VDRL в скрининговых тестах. Это связано с тем, что тест ИФА отличается чувствительностью, специфичностью, возможностью автоматизировать исследования, а также с разработкой диагностических тест-наборов. Кроме того, обосновывается реверсивная схема порядка исследования на сифилис, когда первыми используются трепонемные тесты.

С целью контроля за эффективностью терапии и для оценки активности инфекции рекомендуют VDRL в количественном исполнении. В качестве подтвердающего/дополнительного теста используется тест ИФА на противотрепонемные антитела IgM.

В отечественной практике используют комплекс серологических реакций (КСР), включающий реакцию микропреципитации (РМП) с кардиолипиновым антигеном и РСК с кардиолипиновым и трепонемным антигенами. В последнее время рекомендуется в КСР заменять РСК на ИФА или РПГА. Также используются РИФ (и ее модификации — РИФ-Абс и остальные), РИБТ.

Подходы к лабораторной серологической диагностике сифилиса в Российской Федерации

Внедрение в практику унифицированных методов клинических лабораторных исследований в СССР и Российской Федерации позволило ввести более прогрессивные диагностические методы, упорядочить работу клинико-диагностических лабораторий, повысить производительность труда, сократить дублирование лабораторных исследований и стало основой для разработки рациональных форм готовых наборов реактивов.

В 1985 году в СССР, в целях совершенствования диагностики сифилиса, нетрепонемная реакция РСК с неспецифическим (вассермановским) антигеном и осадочные реакции (цитохолевая и Кана) были исключены из диагностического комплекса, как менее чувствительные и не дающие дополнительной информации.

Вместо них, в составе комплекса серологических реакций на сифилис (КСР), было предусмотрено применение реакции связывания комплемента с трепонемным и кардиолипиновым антигенами (РСКт) и микрореакции преципитации с кардиолипиновым антигеном (РМП). Более высокая чувствительность и информативность этого комплекса реакций обеспечивала выявление не только реагинов, но и противотрепонемных антител.

1. РМП с кардиолипиновым антигеном с плазмой крови и инактивированной сывороткой крови. Отборочный тест в случае изолированного применения.

2. РСК с трепонемным и кардиолипидовым антигенами; качественная и количественная методики постановки, термостатная и на холоде;

4. Реакция иммунофлюоресценции (РИФ) в следующих модификациях: РИФ с абсорбцией (РИФ-абс) с сывороткой крови и капиллярной кровью, РИФ-200, РИФ с цельной спинномозговой жидкостью (РИФ-ц); качественные и количественные методики постановки. Диагностика скрытых и поздних форм сифилиса, распознавание ЛПР (ложно-положительных результатов)

5. Комплекс классических серологических реакций (КСР): РСК (реакции Вассермана) с кардиолипиновым и трепонемным антигенами + РМП. Профилактическое обследование населения на сифилис, диагностика всех форм сифилиса, контроль эффективности лечения, обследование лиц, контактных по сифилису.

С целью совершенствования лабораторной диагностики сифилиса, повышения качества работы и предупреждения дальнейшего распространения заболеваемости сифилисом рекомендовано заменить РСК в комплексе серореакций (КСР) при диагностике сифилиса на ИФА и РПГА в качестве отборочных и подтверждающих тестов, т.к. эти тест-системы являются высокочувствительными, специфическими и воспроизводимыми.

1. РМП и зарубежные аналоги (VDRL, RPR и аналогичные микрореакции) в качестве отборочных тестов при обследовании населения на сифилис. Постановка РМП осуществляется с плазмой или инактивированной сывороткой крови.
2. Иммуноферментный анализ (ИФА). Антиген из культуральных или патогенных бледных трепонем. Диагностические реакции, в том числе для ликвородиагностики. В связи с простотой постановки и наличием коммерческих тест-систем могут использоваться как отборочные тесты.
3. Реакция пассивной гемагглютинации (РПГА). Антиген из культуральных или патогенных бледных трепонем. Отборочные и диагностические реакции.
4. Качественный и количественный варианты РИФ (РИФ-абс, РИФ-ц, РИФ с капиллярной кровью из пальца). Антиген - патогенная бледная трепонема штамма Никольса.
5. Комплекс серологических реакций (КСР) на сифилис, состоящий из реакции связывания комплемента (РСК) с трепонемным и кардиолипиновым антигенами, и РМП. Возможно заменить реакцию связывания комплемента на ИФА или РПГА также в сочетании с РМП. КСР относится к диагностическим тестам.
6. Реакция иммобилизации бледных трепонем (РИБТ), в которой в качестве антигена используют патогенные бледные трепонемы штамма Никольса. РИБТ относятся к диагностическим подтверждающим тестам.

Таким образом, последовательность обследования пациентов на сифилис в учреждениях здравоохранения рекомендуется планировать следующим образом:

1. При первичном обследовании производится постановка отборочной (скрининговой) реакции микропреципитации (РМП) или ее модификации (RPR, TRUST, VDRL) в количественном и качественном вариантах и в случае положительного результата - любого специфического подтверждающего трепонемного теста (РПГА, ИФА, КСР, РИФ, РИТ);

2. После окончания терапии ставится РМП или ее модификация и по снижению титра судят о динамике инфекционного процесса и эффективности терапии. Подтверждением эффективности проведенной терапии считается снижение титра в 4 и более раз в течение 1 года.

3. По окончании этого срока осуществляется постановка той же специфической реакции, что и при первичном обследовании. Следует учитывать, что специфические трепонемные тесты могут оставаться положительными (не негативировать) в течение ряда лет, а в отдельных случаях остаются положительными на всю жизнь.

Читайте также: