Интоксикация печени у крысы

Обновлено: 24.04.2024

Печень – один из важнейших органов в организме, она участвует во всех метаболических процессах, происходящих в организме. К ее основным функциям относят:

Обмен белков
Обмен углеводов
Обмен липидов
Обмен витаминов
Обмен гормонов
Обмен пигментов
Обезвреживание токсических веществ
Иммунная защита
Кровообращение
Пищеварительная функция

Поражения печени и желчевыводящих путей составляют значительный процент болезней животных, в том числе грызунов и зайцеобразных, диагностируемых в условиях ветеринарной клиники.

Болезни печени и желчевыводящих путей, встречающиеся у грызунов и кроликов:

Невоспалительные заболевания — гепатозы (жировой, амилоидный)
Воспалительные заболевания — гепатиты (острый и хронический, первичный и вторичный)
Цирроз печени
Новообразования печени
Абсцессы печени
Нарушения кровообращения в печени

Болезни желчевыводящих путей:

Холецистит — воспаление желчного пузыря
Холангит — воспаление желчных протоков
Холелитиаз — образование камней в желчном пузыре

Нередко заболевания могут протекать сочетано.

Наиболее частые причины болезней печени и желчевыводящих путей у грызунов и кроликов:

Действие токсинов, поступающих с пищей (недоброкачественные корма)
Действие токсинов, образующихся при неполном переваривании пищи при заболеваниях кишечника
Паразитарные заболевания (кокцидиоз, лямблиоз, амебиаз, некоторые глистные инвазии)
Отравление гепатотоксическими веществами, в т.ч. лекарственными препаратами
Голодание (например, при патологии прикуса)
Инфекции
Нарушения белкового, углеводного, жирового обменов веществ, сахарный диабет
Действие токсинов, возникающих при почечной недостаточности
Токсические продукты распада белков при больших злокачественных опухолях

Клинические симптомы болезней печени и желчевыводящих путей у грызунов и зайцеобразных:

Диагностику болезней печени проводят комплексно в условиях ветеринарной клиники, включая анамнез, клинические признаки, пальпаторное и перкуторное обследование животного, лабораторные анализы, позволяющие оценить функциональное состояние печени, и дополнительные методы исследования – рентген, УЗИ.

Анамнез жизни — проводится с целью сбора данных о предшествовавшем заболеванию периоде жизни животного.

Владельцам необходимо дать ответы на следующие вопросы:

возраст животного
условия содержания
проведённые вакцинации (для кроликов)
контакты с другими домашними животными или дикими грызунами
подробный состав рациона
имела ли место быть смена рациона и условий содержания

время и характер проявления болезни
течение заболевания (резкое или постепенное ухудшение состояния, течение со спонтанными ремиссиями)
изменение аппетита
изменение жажды
изменение каловых масс и мочи
динамика кондиции животного
увеличение объёма живота
изменение поведения животного
изменение качества шерсти и состояния кожного покрова

При клиническом исследовании обращают внимание на внешний вид животного:

положение тела животного в пространстве
конституция
упитанность

При исследовании слизистых оболочек и кожных покровов особое внимание обращают на:

наличие иктеричности, анемичности
склонность к геморрагиям

При пальпации брюшной стенки животного отмечают:

болезненность
увеличение размеров печени
отёки и асциты
пневматоз ЖКТ

Биохимическое исследование крови (основные показатели, которые оцениваются у грызунов и зайцеобразных при болезнях печени и желчевыводящих путей):

Общий белок
Альбумин
АСТ
АЛТ
ГГТ
ЛДГ
Билирубин
Щелочная фосфатаза

Стандартный набор показателей у грызунов включает первые 5 показателей, остальные по усмотрению, если есть возможность взять достаточный объем биоматериала.

Гематологические исследования позволяют выявлять только неспецифические изменения, возникающие при болезнях печени. Выявляют:

увеличение скорости оседания эритроцитов (СОЭ)
лейкопению
лейкоцитоз (нейтрофилию)
тромбоцитопению
анемию микроцитарную, макроцитарную или гемолитическую
изменение величины гематокрита

Исследование мочи проводят на наличие уробилина и специфических кристаллов.

Уробилин представляет собой желчный пигмент, который является конечным продуктом превращения гемоглобина. Уробилин получается из уробилиногена, который есть в свежей моче.
В норме уробилин попадает в мочу в ничтожно малых количествах. Но если при лабораторных исследованиях уробилина оказывается больше нормы, такая положительная реакция (от слабоположительной + до резкоположительной +++) говорит о возможном наличии заболеваний печени и желчевыводящих путей:
циррозы, гепатиты,
закупорка камнем желчевыводящих путей,
опухоли,
отек тканей печени в результате застойных явлений.
Наличие специфических кристаллов:
Лейцин и тирозин: выраженное расстройство обмена веществ; отравление фосфором; деструктивные заболевания печени.
Цистин: врожденное нарушение цистинового обмена – цистиноз; цирроз печени; вирусный гепатит; состояние печеночной комы.

Рентгенографическое исследование используется для оценки размеров печени и обнаружения асцита.

Опухоли, гипертрофический цирроз, избыточная нагрузка сопровождаются увеличением объёма печени.
Атрофический цирроз приводит к уменьшению границ печени.
Показателем патологии печени может служить повышение рентгеновской контрастности органа.

Ультразвуковое исследование используется для:

определения размера и объёма печени,
очагов эхогенности,
визуализации желчных путей,
определения наличия взвеси или камней в желчном пузыре,
обнаружения асцита, в т.ч. при небольшом скоплении жидкости
контроля проведения биопсии печени, но у грызунов и кроликов используется редко.

Тактика лечения болезней печени

1.Устранение или снижение активности этиологического фактора (причина)

2.Детоксикация организма (энтеросгель, энтеродез)

3.Коррекция водного и электролитного баланса (натрия хлорид, рингер, рингер-локка, регидрон, гидровит)

5.Лактулоза (связывание аммиака, слабительный эффект): Дюфалак, Лактусан, Лактофильтрум

6.Гепатопротекторы (Карсил, Гептрал, Эссенциале, Лив52, Хофитол, Гепатовет)

7.Витамины и аминокислоты (Дюфалайт, Гемобаланс)

Тактика лечения болезней желчевыводящих путей

1.Устранение этиологического фактора или снижение его активности

3.Снятие спазмов желчевыводящих путей (но-шпа, папаверин, атропин, бускопан)

4.Желчегонные препараты (Урсофальк, Хофитол, Холензим, Холосас, Тыквеол, кукурузные рыльца)

5.Желчегонные продукты в рационе (листья одуванчика, укроп, шпинат, сельдерей; капуста, помидоры, морковь, топинамбур, свекла, грейпфрут, апельсин, кислые яблоки, овсяные отруби, плоды шиповника)

Профилактика болезней печени и желчевыводящих путей

Сбалансированное кормление
Отсутствие в рационе потенциально опасных продуктов, способных вызвать отравление — экзотические фрукты и овощи, сочные корма неизвестного происхождения, особенно в зимне-весенний период
Профилактические мероприятия (антигельминтики, кокцидиостатики)
Оптимальные условия содержания, просторная клетка – профилактика ожирения

Высокий процент патологий печени, выявленных в зимнее время, связан с изменением рациона кормления. В данный период в рационе грызунов увеличивается доля концентрированных кормов, а также покупной зелени, овощей и фруктов, которые выращены не в нашей полосе, и в большинстве случаев проходят обработку, чтобы сохранить их свежесть, или выращены с помощью удобрений. Чувствительный пищеварительный тракт грызунов реагирует на подобные изменения. Особенно это видно по обращениям с животными в январе, в период новогодних праздников, когда травоядные животные — морские свинки, кролики, шиншиллы часто становятся жертвами салатов с новогоднего стола – хозяева угощают их шкурками от огурцов, помидорами, зеленью, экзотическими фруктами.

В минимальном количестве патологии печени и желчевыводящих путей выявляются в летнее время, когда преобладает натуральный рацион – свежевысушенное сено, трава, овощи-фрукты с собственного огорода.

У морских свинок патологии, связанные с поражением печени и желчевыводящих путей составляют примерно 20% от общего количества заболеваний, у кроликов около 10%, у крыс и шиншилл около 5% (по данным обращений за 2014 год). У остальных грызунов болезни печени не всегда представляется возможным диагностировать в связи с маленьким размером животного, сложностью взятия анализов крови и проведения УЗИ.

Булекбаева Л.Э. 1 Ерлан А.Е. 1 Рыспекова Ш.О. 2 Джусипбекова Б.А. 2 Алпысбаева К.К. 2 Артыкбаева У.С. 2

Статья посвящена исследованию морфологических свойств крови и лимфы, реогепатографии и уровень кровоснабжении сосудов у крыс. При экспериментальном токсическом гепатите у крыс лимфатическая система вовлекается в патологический процесс. Возрастает уровень тромбогенных процессов не только в крови, но и в лимфе. Изменение реогепатографии обуславливаются нарушением оттока в паренхиме, изменением эластичности сосудов печени и развитием артериовенозных шунтов.

2. Забродский П.Ф., Германчук В.Т. Влияние тетрахлорметана на показатели иммунной системы // Бюлл. экспер. биол. и мед. – 2004. – № 1. – С. 56–57.

3. Камалов Ю.Р., Северов М.В., Олейникова Е.Б. Значение ультразвукового исследования вен портальной системы для выявления синдрома портальной гипертензии у больных циррозом печени.// Тез.1-го съезда Ассоциации специалистов ультразвуковой диагностики в медицине. – М., 1991. – С. 96.

4. Клишина И.М. Влияние гомогената трутеновых личинок на уровень белка и нуклеиновых кислот в условиях токсической гепатопатии // Матер. 55-ой регион. конф. по фармации, фармакологии и подготовка кадров. – Пятигорск, 2000. – С. 195–196.

5. Копылова Л.Е., Саркова Е.В., Асташов В.В. Лимфатический регион печени матери и потомства при беременности, осложненной действием экотоксикантов.// Бюлл. СО РАМН. – 2008. – № 5. – С. 38–43.

6. Кунцевич Г.И., Скуба Н.Д., Белолапотко Е.А. Роль комплексного ультразвукового исследования в дифференциальной диагностике очаговых образований печени. Методические рекомендации. – М., 1997. – C. 45.

7. Юрова Е.Г., Асташов В.В., Казаков О.В. Структура брыжеечных лимфатических узлов у крыс с хроническим токсическим гепатитом и в условиях его коррекции лазерным излучением и фитосорбционными комплексами // В кн.: Проблемы экспериментальной клинической и профилактической лимфологии. – Новосибирск, 2002. – С. 389–391.

8. Raom R., Kuman K.V et. al. Влияние фруктозы на активность синтезы оксид азота под действием CCl4 // Indian J. Exp. Biol. – 2001. – V. 39, № 1. – P. 68–69.

9. Zhang J., Zong Ch., Li D., Zhan R. Взаимосвязь между локальной ренин-ангиотензин-альдестероновой системой и фиброзом печени крыс // Word. Chin. J. Dig. – 2002. – V. 10, № 4. – P. 397–400.

У крыс после введения внутрибрюшинно CCl4 (100 мкг/кг) через 24 часа развивался выраженный гепатит. Отмечено снижение активности синтеза оксида азота в эндотелиальных и гладкомышечных клетках кровеносных сосудов [8]. Острое отравление тетрахлорметаном per os крыс в дозе 0,75 ЛД50 через 4 суток вызывало снижение основных гуморальных и клеточных иммунных реакций [2].

При хроническом токсическом гепатите крыс, вызванном введением 4-х хлористого углерода, наблюдалось увеличение паракортикальной зоны в брыжеечных лимфатических узлах, что свидетельствует, по мнению авторов, об усилении иммунного ответа по гуморальному типу [7].

После трехкратного введения 50 % масляного раствора CCl4 через день крысам отмечено снижение в печени нуклеиновых кислот на 16 % и общего белка на 18 % по сравнению с показателями интактных животных [4].

Хроническая интоксикация животных тетрахлорметаном вызывала выраженные дистрофические и воспалительные изменения в печени и в регионарных лимфатических узлах. При беременности у самок и у потомства эти изменения сохранялись, но были выражены меньше. Авторы считают, что в этих условиях у животных лучше сохранялась дренажно-детоксикационная функция лимфатической системы [5]. Радиоиммунным методом установлено увеличение содержания ренина, ангиотензина I и II, альдестерона и активности ангиотензин-конвертирующего фермента при токсическом гепатите, вызванным введением CCl4 крысам [9].

В последние годы среди неинвазивных методов диагностики хронического гепатита и портальной гипертензии важное место отводится ультразвуковым исследованиям [7, 1].

Материалы и методы исследования

Эксперименты проведены на 102 половозрелых белых лабораторных крысах-самцах линии Вистар, массой 180-250 гр. Для создания модели токсического гепатита использовали 50 % масляный раствор четыреххлористого углерода (CCl4), который вводился внутрибрюшинно (0,3 мг/кг) один раз в течение 3 суток через день. Наличие токсического гепатита у крыс было подтверждено гистологическими и биохимическими исследованиями.

Острые опыты проводились на 2 группах крыс: 1-я группа крыс – контрольная (24 интактных крыс) и 2-я группа – это крысы с моделью токсического гепатита (78 крыс) с соблюдением основных принципов Хельсинской конвенции о гуманном отношении к лабораторным животным. Через 15 суток после интоксикации крыс 4-х хлористым углеродом под эфирным наркозом прижизненно регистрировали лимфоток из грудного и кишечного лимфатического сосуда.

Морфологический состав крови у крыс с токсическим гепатитом изучали на гематологическом анализаторе SYSMEXKX-219 (Япония). Время свертывания крови и лимфы определяли по Сухареву, вязкость – на вискозиметре ВК-4, рН – на анализаторе OSMETECHOPTITMССА (США).

Определение морфологического состава лимфы проводили в камере Горяева с сеткой Бюркера. Определяли число лейкоцитов, лейкоцитарную формулу – в сухих мазках лимфы, окрашенных по методу С.П. Романовского. Для изучения гистологических препаратов использовали световой микроскоп Leica – DМ-1000.

Полученный материал обработан на компьютере вариационно-статистическим методом с использованием критерия Стьюдента.

Результаты исследования и их обсуждение

Результаты реогепатографического исследование у крыс контрольных группы представляли собой чередующие систолические волны достаточной амплитуды, с закругленной вершиной и диастолическим подъемом. Скорость быстрого кровенаполнения составляла в контроле 1,02 ± 0,06 Ом/с, скорость медленного кровенаполнения 0,15 ± 0,02 Ом/с. На фоне токсического гепатита наблюдали, что форма кривой характеризовалась появлением заостренной и зазубренной, а в некоторых случаях платообразной вершины.

Результаты исследований на крысах с токсическим гепатитом показали противоречивые данные, в одних случаях наблюдали увеличение амплитуды систолической волны на 65 %.Скорость быстрого кровенаполнения составляла 6,06 ± 0,5 Ом/с, а медленного кровенаполнения – 4,05 ± 0,02 Ом/с. В других случаях наблюдали уменьшение амплитуды диастолической и систолической волны на 45 %, с одновременным уменьшением скорости быстрого кровенаполнения до 0,70 ± 0,02 Ом/с, но возрастала скорость медленного кровенаполнения (рисунок).

а) реогепатограмма контрольной группыу крыс

б) реогепатограмма на фоне токсического гепатита у крыс

Кривая реогепатограммы у крыс с контрольной группой и на фоне токсического гепатита

По мнению некоторых авторов, изменение кривой реогепатограммы происходит разнонаправлено, но, в основном, зависит от этиологии заболеваниях [9]. При вирусной этиологии происходит снижение амплитуды систолической волны, при токсическом гепатите происходит обратный эффект т.е. идет увеличение амплитуды систолической волны.

Изучение скорости кровотока методом лазерной ультразвуковой доплерографии у крыс на фоне хронической затравки СCl4 показало, что скорость линейного кровотока в воротной вене снижалась, а в печеночной артерии скорость кровотока повышалась по сравнению с контрольной группой. Пульсационный индекс и индекс периферического сопротивления уменьшались в воротной вене и в печеночной артерии на 25 % .Изменение этих показателей указывает на наличие нарушения гемодинамики печени на фоне токсического гепатита у крыс и начальным формированием проявлений портальной гипертензии (таблица).

В результате интоксикации организма экспериментальных животных солями нитритов и нитратов в печени крыс обнаружены ряд морфологических изменения, характеризующихся нарушением балочной структуры, изменениями количества двух и многоядерных гепатоцитов, выраженностью сосудистых изменений. Отмеченные морфологические изменения, несомненно, связаны с усилением образования оксидов азота из нитритов и нитратов.

Ключевые слова: эксперимент, печень, интоксикация, нитраты и нитриты

Актуальность проблемы. Влияние экологической обстановки на организм человека имеет важное прикладное и теоретическое значение. В районах Приаралья отмечается высокая инсоляция воды и почвы. В зоне экологической катастрофы, к которым относятся районы вокруг Аральского моря, отмечаются солевые бури, высокое содержание солей в питьевой воде, что оказывают неблагоприятное влияние на организм человека [2]. Экспериментальные исследования по изучению влияния солей нитритов и нитратов на организм животного, в частности на морфологические параметры печени, позволит выявить новые прогностические критерии по оказанию профилактической помощи, жителям проживающим в зоне экологической катастрофы [1, 5].

Клинические исследования показали важность исследований в данном направлении, так как в результате длительного поступления в организ нитритов и и нитратов образуются высокореакционные соединения азота — его оксиды [3, 6]. Они токсически влияют на все органы и ткани организма. При этом наибольшие функциональные и морфологические нарушения отмечаются в желудочно-кишечном тракте (язвы, эрозии, кровоизлияния), легких (отек, пневмония) и поджелудочной железе (преходящие гипергликемии) и печени. Многими авторами неоднократно подчёркивалось, что в патогенезе раннего периода интоксикации солями существенную роль играют нарушения функций печени [4].

Цель — изучить морфологические особенности состояния печени при интоксикации нитритами и нитратами в эксперименте.

Материалы и методы исследования.

В эксперименте воспроизводилась модель хронического отравления нитрами и нитритами на крысах Концентрация нитритов и нитратов, вводимых внутрижелудочно, соответствовала значениям в 2–3 раза превышавшим предельно допустимые дозы (ПДД).

Все процедуры эксперимента соответствовали требованиям Международных правил гуманного отношения к животным, отраженным в Санитарных правилах по оборудованию и содержанию экспериментально-биологических клиник (вивариев).

Единичные редко расположенные мелкоточечные воспалительные инфильтраты выходят из портальной стромы в периферические отделы дольки без развития некроза гепатоцитов, располагаясь между печёночными клетками — так называемый дискретный инфильтрат, изредка развиваются единичные перипортальные некрозы.

Нередко на ранних сроках экспериментальной интоксикации нитритами и нитратами у крыс обнаруживались очаговые пролиферативные изменения внутри долек: чётко отграниченные инфильтраты из клеток — производных системы мононуклеарных фагоцитов.

Интенсивность гематотканевого обмена в значительной степени зависит от скорости кровотока в синусоидах, что в свою очередь завистило от особенностей их строения. Так, нами отменено, что в норме и первые сутки интоксикации в перипортальных отделах дольки печени встречались главным образом прямые и ветвящиеся синусоиды. В последующем, к седьмым суткам перипортальные тракты до зон примыкания к центральным венам характеризовались преимущественно ветвящимися синусоидами с наблюдением чёткой тенденции к анастомозированию, причём характерной немаловажной особенностью является выявленная нами прямопропорциональная взаимосвязь появления унулиподий от сроков интоксикации солями.

В общей характеристике морфологические проявления после интоксикации проявляются нарушением балочного строения печени, внутридольковыми альтернативными проявлениями с проявлением некрозов единичных гепатоцитов со скоплением в этих участках небольшого количества макрофагов, лимфоцитов, нейтрофилов, очагами жировой дистрофии гепатоцитов, пролиферацией и гипертрофией звёздчатых ретикулоэндотелиоцитов, отёком и расширением портальных трактов с инфильтрацией их лимфогистиоцитарными элементами и нейтрофилами, иногда пролиферацией перипортальных и интралобулярных желчных протоков и формированием лимфоидных фолликулов. Микроскопически обнаруживается полиморфизм гепатоцитов (клетки различных размеров, среди них большое количество двух- и многоядерных, ядра различных размеров), их набухание, вследствие чего нарушается чёткость балочного строения. Белковая (гидропическая, балонная) и жировая дистрофия имеют мелкоочаговый характер, причём выраженность данных изменений трудно определить как характерные, или специфичные в конкретном случае.

В различных отделах печёночных долек встречались мелкие очаги некроза паренхимы с разрушением аргирофильной стромы и очаговые инфильтраты из макрофагов, лимфоцитов, нейтрофилов. Выражены пролиферация и гипертрофии звёздчатых ретикулоэндотелиоцитов (макрофагов печени). Портальные тракты расширены, отёчны, умеренно или слабо инфильтрированы лимфогистиоцитарными элементами с примесью нейтрофилов.

В результате наших исследований подтверждено, что интоксикация солями нитритов и нитратов нарушают морфологический пейзаж печёночных структур, что приводит в последующем к функциональным сдвигам, приводящим к снижению детоксикационной функции печени и развитию эндогенной интоксикации.

Абзалова Ш. Р. Морфофункциональные изменения печени при экспериментальном ишемическом поражении головного мозга //Молодой ученый. — 2015. — №. 90. — С. 375–379.
Ибрагимов У. К. Биоантиоксиданты в клинической медицине.// VIII Международная конференция Биоантиоксидант. Тезисы докладов.-Москва.-4–6 октября 2010.-с.176–177.
Ибрагимов У. К., Хайбуллина З. Р. Биологические мембраны (монография).-Ташкент, 2009, 134 С.
Hammerman C., Kaplan M. Ischemia and reperfusion injury. The ultimate pathophysiologic paradox // Clin. Perinatol. 1998. V. 25. № 3. Р. 757–777.
Smrcka M., Otevrel F., Kuchtickova S., Horky M., Juran V., Duba M., Graterol I.Experimental model of reversible focal ischemia in the rat // Scripta medica (BRNO). 2001. № 74. P. 391–398
Ying I, Saposnik G, Vermeulen MJ, Leung A, Ray JG. Nonalcoholic fatty liver disease and acute ischemic stroke. Epidemiology. — 2011, Jan;22(1):129–130.

Основные термины (генерируются автоматически): изменение, нитрат, балочная структура, главный образ, жировая дистрофия, организм человека, очаговая гиперемия, печень крыс, хроническое отравление, экологическая катастрофа.

В данной серии опытов нами исследовано состояние ПОЛ и активность ферментов АОС в печени, тимусе, селезенке экспериментальных крыс, получавших ксенобиотики.

Важным фактором в патогенезе поражений органов являются изменения, возникающие в структуре и функции органов, усиление интенсивности ПОЛ непредельных жирных кислот ФЛ с образованием токсических метаболитов, которые приводят к повреждению биологических мембран [1, 2,3].

Гидроперекиси, диеновые кетоны, диеновые коньюгаты, малоновый диальдегид являются метаболитами, обладающими цитотоксичностью [4, 62, 5, 6].

В связи с этим представляет интерес изучение состояния окисления липидов в печени и в органах иммунной системы, где происходит метаболизм ксенобиотиков и выработка иммунных тел.

Результаты проведенных исследований показали, что в процессе интоксикации гепатотропными ксенобиотиками происходит усиление интенсивности ПОЛ (рис.1.) не только в печени, но и в органах иммунной системы. Так, в тимусе крыс, получавших гелиотрин на 50-ый день опыта, содержание МДА по сравнению с контролем повышалось в 5 раз, в селезенке- 4,5 раза, в сыворотке крови — в 6 раз, а в печени в 9,5раз. На 70-й день исследования происходило постепенное снижение содержания МДА в исследуемых объектах, кроме сыворотки крови. У крыс, получавших ССl_4, также наблюдалось увеличение количества МДА во всех исследуемых органах и в сыворотке крови. Но в данном случае эти показатели были гораздо больше и составляли: на 50-й день количество МДА в тимусе увеличилось в 8,4, в селезенке в 5,2 раза, в сыворотке крови в 6,3раза, а в печени в 14,6 раза. На 70-й день эти показатели продолжали нарастать и составили в тимусе в 13, а в селезенке в 6,3 раза, в сыворотке крови в 7,5 раза, а в печени в 17,4раза.

Рис. 1. Изменение содержания МДА у крыс при интоксикации гелиотрином

Наибольшее содержание МДА выявлено в печени, что, вероятно, объясняется метаболизмом в ней гелиотрина и CCl₄ (табл.1.).

Содержание МДА (нмоль/мг белка) в органах крыс при введении ССl₄n=8–10

Ганглиозиды, занимая 2,8 % клеточной мембраны, выполняют жизненно важные функции: рецепция, взаимодействие между клетками, перенос ионов, восприятие химических и физических сигналов, поддержание мембранного потенциала [2, 3, 7, 8, 11]. Церамидная часть ганглиозидов погружена в жидкую липидную фазу мембраны, а разветвленная олигосахаридная — ориентирована в межклеточное пространство, где она тянется к соседней клетке [3, 11]. Ганглиозиды, взаимодействуя с ФЛ и белками, влияют на функции мембраносвязанных ферментов [4, 5, 7, 8, 10].

Поэтому любые воздействия на мембрану клетки (ксенобиотики, канцерогены, токсины и т. д.) и функциональные изменения в активности оксидантных и антиоксидантных ферментных систем, приводят к изменению содержания и состава ганглиозидов.

Поэтому в настоящей работе нами исследованы показатели общих и индивидуальных ганглиозидов в гомогенатах печени и иммунокомпетентных органов крыс при интоксикации ССl4 и гелиотрином.

В динамике интоксикации крыс ССl4 в исследуемых органах происходят существенные сдвиги в количественном составе ганглиозидов. В таблице 1. представлены результаты исследования содержания ганглиозидов печени и тимуса экспериментальных крыс, получавших CCl4.

Содержание общих и индивидуальных ганглиозидов в органах крыс (мкг ск/г ткани) при интоксикации CCl4n= 8–10

Ганглиозиды

Интактные (контроль) M±m

Дни исследования

50-й M±m

70-й M±m

Как видно из данных таблицы, содержание общих ганглиозидов в печени и в тимусе во все сроки исследования снижено в различной степени. Они наиболее выражены на 70-й день исследования, где разница в показателях тимуса составляет 4,25 раза, а в печени 2,7 раза относительно контроля. Меньшее снижение содержания ганглиозидов в печени видимо, связано с наличием запаса в ней витамина А, кофактора ферментов участвующих в синтезе ганглиозидов и гликопротеидов.

В составе индивидуальных ганглиозидов печени выявлено значительное снижение GQ фракции в 5,4; GT в 6,0; GD1а в 4,0; GD1b — 3,5; GD3–6,3 раза сравнительно с контрольными показателями.

В остальных фракциях разница в исследуемых показателях составила от 1,7 до 2,0 раз.

В тимусе снижение исследуемых показателей составили: GQ — 9,0; GT — 6,9; GD1a — 7,0; GD1b — 7,3 раза по сравнению с контрольными величинами, остальные фракции колебались от 2,8 до 4,5 раза.

Таким образом, под влиянием CCl4 происходят изменения в составе как сложных, так и простых ганглиозидов. Эти изменения могут привести к нарушению в этих органах ионной проницаемости, рецепции гормонов и нарушению других обменных процессов, происходящих в мембранах исследуемых органов.

Интоксикация крыс CCl4 вызвала изменения и в ганглиозидном спектре селезенки. Выявлено, что наиболее высокое содержание в селезенке из фракции ганглиозидов оказались GQ, GT, GD1a,. Снижение содержания общих и индивидуальных ганглиозидов в исследуемых органах при интоксикации CCl4 наблюдалась во все сроки исследования. На 50-й день исследования разница в этих показателях составила от 1,2 до 2,1 раза, на 70-й день от — 3,2 до 10,0 раз, т. е. эти изменения нарастали на 70-й день исследования (табл.2.).

Содержание общих и индивидуальных ганглиозидов в селезенке крыс (1мкг ск/г ткани) при интоксикации CCl4n=8–10

Ганглиозиды

Интактные (контроль) M±m

Дни исследования

50-й M±m

70-й M±m

В печени экспериментальных крыс отмечается тенденция снижения всех фракций ганглиозидов. Так, на 50-й день опыта в печени GQ снижалось на 47,5 %, на 70-й — 84,7 %. Содержание GD1b снизилось на 38,8 %; 76,5 %, соответственно. Выраженные отличия выявлены также в показателях GD3, его содержание по сравнению с контролем снизилось в печени на 23,4 % и 35 %, соответственно. Определенные изменения претерпевало общее содержание ганглиозидов, при этом его показатели в печени составили 28,4 % и 47,7 %.

В селезенке содержание GQ на 50-й день исследования снизилось на 37,4 %, на 70-й день 85,4 %. В эти же сроки исследования в тимусе содержание GQ снизилось на 60,7 % и 83,8 %. Содержание GD1b в селезенке снизилось на 50-й день на 38 %, на 70-й день на 84,4 % относительно контроля, в тимусе на 50-й день на 46,2 %, на 70-й день на 77,2 %, а содержание GM3 снизилось в селезенке на 50-й день на 41,7 %, на 70-й день на 65 %, в тимусе на 50-й день 67,5 %, на 70-й день на 84,9 % относительно контроля соответственно.

Таким образом, при введении экспериментальным крысам гепатотропных ксенобиотиков (CCl4 и гелиотрина) содержание ганглиозидов в печени, селезенке и тимусе снизилось от 19 до 85 % по сравнению с контрольными величинами.

Анализ динамики изменения содержания ганглиозидов у экспериментальных групп животных выявил определенные закономерности, имеющие значение в разработке патогенеза действия гепатотропных ксенобиотиков.

У крыс получавших CCl4, достоверные изменения в содержании ганглиозидов в сторону снижения наблюдаются во все сроки исследования, но они наиболее выражены на 70-й день исследования. Если эти изменения у крыс получавших CCl4 снизились на 50-й день исследования в 1,8–2,6 раза, а на 70-й день от 1,9 до 6,6 раза, то у крыс получавших гелиотрин эти показатели колебались от 1,8–6,2 на 50-й день; 3,2–8,5 на 70-й день исследования.

Выраженные изменения отмечались в содержании следующих индивидуальных фракции ганглиозидов: GQ, GT, GD1b, GD1a (в печени), GQ, GT, GD1b, GD1a, GM3, (в тимусе), а в гомогенатах селезенки отмечено отсутствие GD3 и значительное снижение GD1b и GD1a.

Таким образом, анализ полученных результатов показал, что в процессе интоксикации гепатотропными ксенобиотиками происходит снижение всех фракций ганглиозидов в исследуемых органах. Это, видимо, связано превалированием процесса катаболизма над процессами анаболизма ганглиозидов, превалированием активности сиалидазгидролаз над активностью сиалилтрансфераз — синтетаз ганглиозидов [15].

При введении ксенобиотиков происходят нарушения в активности ферментов мембран цитозоля, митохондрий и других органелл, что приводит к усилению ПОЛ, увеличивает окислительное фосфорилирование, нарушает цикл Кребса. Все это создает дефицит субстратов синтеза ганглиозидов (глюкозы, АТФ, нуклеиновых кислот, сиаловых кислот). Повреждение печеночных клеток приводит также к нарушению глюконеогенетической функции клеток печени, усиливается расход, замедляется синтез гликогена [1, 9]. Все это сопровождается нарушением рецепции инсулина в мембране клеток и приводит к гиперинсулинемии, нарушению биосинтеза глюкоконьюгатов из углеводов и его субстратов, снижается транспорт углеводов через мембраны клеток, их фосфорилирование и затормаживается биосинтез олигосахаридной части гликолипидов [6, 12, 15].

Таким образом, дефицит субстратов для биосинтеза ганглиозидов на фоне усиления активности сиалидаз-гидролаз и снижения активности сиалилтрансфераз — синтетаз приводит к изменению состава ганглиозидов и нарушению поверхностных функций мембран органов [13, 14].

Сопоставление результатов исследования содержания ганглиозидов с результатами исследования фосфолипидов выявило, что наряду с изменением количественного состава индивидуальных фосфолипидов также изменяется содержание индивидуальных ганглиозидов. Следует при этом отметить, что если в составе индивидуальных фосфолипидов наблюдается тенденция снижения и повышения содержания определенных фракций, то в составе индивидуальных ганглиозидов такого явления не происходит. В этом случае наблюдается одностороннее изменение — снижение содержания всех фракции ганглиозидов. Причем, содержание ди- и олигосиалганглиозидов уменьшается в большей мере, чем содержание моносиалганглиозидов. Вследствие уменьшения содержания индивидуальных ганглиозидов уменьшается содержание общих ганглиозидов в печени на 47,7 %, в селезенке на 70 % и в тимусе на 65 %. Аналогичные отклонения происходили в органах иммунной системы. Отмечалась картина пропорциональности между ЛФХ, ФХ и индивидуальными ганглиозидами. Прогрессивное нарастание содержания ЛФХ приводило к интенсивному снижению ФХ и количества всех фракций ганглиозидов. Эта тенденция сохранялась во всех изученных органах экспериментальных крыс, максимум, которого приходился на 70-й день исследования.

Следовательно, результаты исследования свидетельствуют о том, что введение крысам ксенобиотиков гелиотрина и CCl4 сопровождается существенными сдвигами в составе индивидуальных ганглиозидов не только в печени, но и в органах и клетках иммунной системы, выраженность которых прямо пропорциональна течению патологического процесса. Резкие изменения в содержании индивидуальных ганглиозидов и ФЛ во всех изученных органах, очевидно, и обуславливают нарушения структуры и функциональной активности клетки и способствуют развитию патологического процесса.

Таким образом, интоксикация экспериментальных крыс гепатотропными ксенобиотиками сопровождается изменениями в составе общих и индивидуальных ФЛ и ганглиозидов во всех изученных органах. Выраженность наблюдаемых отклонений в содержании ФЛ и ганглиозидов корректировали при прогрессировании патологического процесса. Независимо от этиологического фактора, природы ксенобиотика, формы патологического процесса, дозы ксенобиотика в печени и в органах иммунной системы происходят структурно-функциональные нарушения, ведущие к нарушениям внутриклеточного метаболизма и усугубляющие патологический процесс.

Основные термины (генерируются автоматически): день, содержание, патологический процесс, печень, изменение, орган, иммунная система, крыса, показатель, раз.

Читайте также: