Как сдать анализы на орнитоз у птиц
Обновлено: 22.04.2024
Метод обнаружения в крови человека специфических антител к бактерии Chlamydia psittaci. Возбудитель способен вызывать болезнь как у птиц (орнитоз), так и у людей (пситтакоз). Исследование проводится с целью подтвердить или опровергнуть диагноз "пситтакоз".
Синонимы русские
Антитела класса IgA к хламидии пситтаци, тест на орнитоз, пситтакоз.
Синонимы английские
Метод исследования
Какой биоматериал можно использовать для исследования?
Как правильно подготовиться к исследованию?
- Не курить в течение 30 минут до исследования.
Общая информация об исследовании
Chlamydia psittaci – инфекция, передающаяся только от птиц. Чаще этой инфекцией заражаются работники птицеферм, продавцы птиц и другие люди, тесно контактирующие с ними. Инфекция попадает в организм человека воздушно-капельным путем и поражает, в первую очередь, дыхательные пути, а затем может получить распространение и в других органах. Также инфекция может проникнуть в организм человека при употреблении зараженной пищи. Развивающееся заболевание носит название орнитоз (пситтакоз). Симптомы заболевания: сухой кашель, субфебрильная температура. Впоследствии может развиться бронхит или пневмония.
Иммуноглобулины типа А (IgA) являются маркерами текущей или недавней инфекции. Они появляются через 4-6 недель после инфицирования.
Анализ проводят при подозрении на наличие орнитоза при вероятности инфицирования за 4-6 недель до проведения исследования.
Для чего используется исследование?
- Для проведения дифференциального диагноза в кругу инфекционных заболеваний, при подозрении на наличие орнитоза.
Когда назначается исследование?
- При подозрении на наличие орнитоза (пситтакоза) при вероятности инфицирования за 4-6 недель до проведения исследования.
Что означают результаты?
диагностический титр - 1:32;
Положительный результат свидетельствует о наличии у пациента орнитоза.
Важные замечания
Чтобы верно интерпретировать изменение в результатах исследования, нужна комплексная оценка результатов остальных анализов, а также других медицинских данных.
Также рекомендуется
- Общий анализ крови
- Лейкоцитарная формула
Кто назначает исследование?
Инфекционист, врач общей практики, терапевт, педиатр.
Используемая литература:
1. Harkinezhad, Taher; Geens, Tom; Vanrompay, Daisy (1 March 2009). "Chlamydophila psittaci infections in birds: A review with emphasis on zoonotic consequences". Veterinary Microbiology 135(1—2): 68—77.
Культуральные методы диагностики для постановки диагноза аспергиллез птиц используются в комплексе с: данными рентгенографических исследований, эндоскопии, цитологических и гистологических данных, анализов крови.
Для этого исследуют мазки из зоба, клоаки, посевы суспензированного помета, посевы с полученного при эндоскопии материала.
Культуральный метод — стадия бактериологических исследований. Для выявления и определения возбудителя инфекционного заболевания проводят посев материала от больной птицы на питательные среды. После выделения культуры (чистых образцов микроорганизмов) проводят дальнейшее лабораторное изучение свойств и определение возбудителя.
Что значит положительный результат бактериологического анализа помета (грибки выделены)
1. Птица больна: обнаруженные плесневые грибки выделяются из дыхательных путей птицы: легких, бронхов и воздушных мешков.
2. Птица живет в неблагоприятных условиях, в которых повышена концентрация спор грибков.
Положительный ответ лаборатории, проводившей анализ помета попугая суринамского амазона в Киеве.
Анализ выполнялся двумя методами: микроскопическим (образец рассматривается под микроскопом) и бактериологическим (производится посев на специальные микробиологические среды для выделения грибков). Дублирование исследования двумя разными методами значительно повышает шансы на обнаружение грибков в помете птиц.
Что значит отрицательный результат бактериологического анализа помета (грибки не выделены)
Бланк ответа лаборатории, выполнявшей бактериологический анализ помета попугая в Москве. В ответе указано: в исследуемом материале патогенных грибов не обнаружено.
Системные микозы у птиц могут вызываться не только грибками рода Aspergillus, но и грибками рода Mucor и другими грибками. Поэтому нельзя списывать на контаминацию материала выделение родов и видов грибков отличных от Aspergillus niger/flavus/fumigatus. Повторное выделение одного и того же вида грибков из исследуемого материала, полученного от птицы, может говорить о системном микозе, а не о случайном транзите грибковых спор через пишеварительный тракт птицы.
Откуда в исследуемых образцах могут появиться случайные споры грибков?
1. Контаминация спорами из окружающего воздуха. Споры грибков всегда находятся в воздухе вокруг нас.
Какие меры необходимо предпринимать для исключения этого фактора:
а. Пользоваться стерильными зондами и транспортными средами. Чем меньше время экспозиции зонда на воздухе, тем меньше вероятность обсеменения спорами грибков.
Предварительно, перед тем как стелить целлофановую пленку под жердочки, надо убраться в клетке, убрать в другое помещение корма. Но, если само помещение содержит большое количество спор грибков, то контаминация спорами из воздуха очень вероятна.
2. Контаминация спорами грибков, находящимися на зерне или на фруктах и овощах. 99% спор грибков в пищеварительном тракте птицы разрушается.
Контаминация — смешение, соединение, загрязнение. В лабораторной терминологии — попадание посторонних организмов в исследуемый материал с дальшейним влиянием на результат исследования.
На практике, чтобы в образец помета, пролежавшего на воздухе 15-20 минут, попало большое количество спор плесневых грибков, нужно чтобы их концентрация в воздухе была очень высокой. При таких концентрациях спор в воздухе помещения вероятность заражения птицы аспергиллезом очень велика. Поясню: если птица живет в помещении с очень высокой концентрацией спор грибков — она заболеет системным микозом с очень большой долей вероятности. Если из помета выделены споры грибков, то это говорит либо о том, что птица больна аспергиллезом, либо о том, что она живет в неблагоприятных условиях и может скоро заболеть.
Напомню! Плесень очень хорошо развивается под полами, под декоративными стеными панелями, между навесным потолком и основным потолочным перекрытием.
Является ли результат бактериологического анализа решающим для постановки диагноза аспергиллез птиц?
В силу своей неоднознаности, однократное выделение плесневых грибков из помета птицы не является основанием для постановки диагноза. Но если плесневые грибки выделяются из помета птицы в серии анализов и другие анализы также косвенно указывают на наличие системной грибковой инфекции — то культуральный метод служит дополнительным подтверждением наличия аспергиллеза у птицы.
Что лучше сдавать для анализа — мазки из зоба и клоаки или помет птицы?
Лучший вариант — посевы на питательные среды незамедлительно сразу после того, как мазок сделан или появился помет. В большинстве случаев посев нативных мазков от птицы — невозможен, поэтому мазок помещается в транспортную среду — контейнер, наполненный гелеобразной питательной средой, поддерживающей жизнедеятельность бактерий и грибков, но не их размножение. Обычно транспортные среды рассчитаны на хранение материала 24 или 48 часов, хотя есть и пролонгированные среды со сроком хранения до 96 часов. Транспортная среда механически разбавляет концентрацию возбудетелей в мазке и поэтому при посеве результат может быть ложноотрицательным. Также результат может быть ложноотрицательным и при превышении сроков хранения материала или при хранении патматериала при слишком высокой или слишком низкой температуре.
Поэтому предпочтительно сдавать свежий помет птицы. Кроме того, надо учитывать такой фактор: в помете всегда большее количество возбудителей, чем в мазке, и, соответвенно, большая вероятность их обнаружения.
Нет таких возбудителей болезней птиц, которые бы выделялись из клоаки и, при этом, не выделялись бы из помета.
Кроме того, это устраняет стресс и возможность травмирования птицы при процедуре взятия мазков. Многие владельцы птиц сталкивались с травмами клоаки их птиц или с перекусыванием птицами зонда во время взятия анализа.
Везти в лабораторию помет птицы нужно не нагревая его выше 36С и не замораживая.
Диагностика цирковируса попугаев безопасна, доступна и легковыполнима, но есть ряд важных особенностей, которые могут повлиять на выявление вируса и постановку диагноза.
Методы диагностики цирковируса у живых попугаев.
Для диагностики цирковирусной инфекции применяется метод гемагглютинации, гистологический метод, электронная микроскопия и ПЦР.
Реакция гемагглютинации.
Цирковирус в крови живой птицы можно обнаружить методом гемагглютинации. Однако этот анализ доступен только во время исследовательских работ лишь в некоторых университетах США и ЕС.
Гистологические исследования.
Вирус можно обнаружить гистологическим методом. Для анализа берется кусочек кожи (биопсия) или растущее перо. Анализ делается 14 дней, и имеет хорошую специфичность (т.е. тельца-включения сложно перепутать с другими вирусами). Однако сложность этого анализа заключается в том, что не каждый гистолог сможет найти характерные вирусные внутрицитоплазматические тельца-включения в таком материале.
Чувствительность у гистологического анализа низкая, т.е. вероятность обнаружения специфических изменений у птиц без клинических признаков болезни довольно мала. Кроме того, специалистов гистологов очень мало, поэтому этот вид диагностики в СНГ почти не применяется.
Метод электронной микроскопии не применяется в СНГ по причине отсутствия электронных микроскопов в ветеринарных лабораториях.
Основным методом диагностики цирковироза является полимеразная цепная реакция (ПЦР). Этот метод легкодоступен. Исследуются: перо, кровь, помет, мазки из клоаки, мазки из зоба. ПЦР высокоспецифична, т.е. вероятность получения ложноположительного результата равна нулю.
Положительный результат анализа — вирус обнаружен. Ошибочного обнаружения вируса быть не может.
Отрицательный результат анализа — вирус не найден в исследованном материале. Возможно вирус у птицы есть, но в предоставленном образце его не обнаружили.
От чего зависит количество вируса?
Разное количество вируса в материале связано с неодинаковым распределением вируса в органах птицы. Количество вируса в тканях меняется в зависимости от стадии заболевания. Максимальное количество цирковируса в крови и в других тканях наблюдается в период активного развития инфекции (стадия виремии). В этот период вирус не только в большом количестве находится в различных органах, но и в большом количестве выделяется с помётом. Клинически этот период совпадает с началом нарушения развития маховых и хвостовых перьев, продолжается несколько месяцев. Это заболевшие птицы.
Почему ПЦР анализ важно делать несколько раз?
Вирус не всегда выделяется в больших количествах и поэтому в исследуемом материале его может быть недостаточно для обнаружения, тогда анализ будет ложноноотрицательным (т.е. вирус был, но его не нашли). В результате проведения большого количества исследований по сравнению разных методов диагностики цирковироза стало известным, что наибольшее количество вируса (как у больных , так и у клинически здоровых попугаев) содержится в пере. Много вируса удается выделить из мазков из клоаки. Помет находится на третьем месте по успешности обнаружения цикровируса. И лишь в части случаев вирус удается обнаружить в крови.
На протяжении 9 месяцев обследовалось группа из 15 волнистых попугайчиков. Стая была помещена в карантинные условия после того, как у некоторых из птиц были обнаружены проблемы развития хвостовых перьев, оперения на крыльях.
У птиц регулярно брали кровь, перо из хвостовой области, мазки из клоаки для исследования методом ПЦР на наличие ДНК цирковируса. Пробы были взяты в день прибытия на карантин, через 10 дней, и далее на 4, 10, 16, 28 и 36 неделе нахождения птиц в карантине. 2 попугая из 15 погибли на 7 и 17 день карантина. При патологоанатомическом исследовании гистологическим методом и методом ПЦР у них была подтверждена цирковирусаная инфекция.
В результате проведенного исследования у всех попугаев в стае обнаружена ДНК цирковируса. Чаще всего вирус удавалось выделить из пера (пробы пера были положительны в 67%; мазки из клоаки — в 45%; и лишь 21% образцов крови содержали ДНК вируса).
Выделение вируса из крови:
У трех молодых попугайчиков ДНК вируса была обнаружена только в первых двух пробах крови (на 0 и 10 день) за 9 месяцев исследования. У двух самых больных попугаев (с наиболее выраженными проблемами с оперением, которые сохранялись почти на всем протяжении карантина) кровь была положительна чаще всего. У 6 птиц без выраженных клинических признаков инфекции кровь ни разу не была положительна. У 4 птиц в первые 10 дней карантина только кровь была положительна (в пере, в мазках из клоаки вирус не обнаруживался); у 3 из этих 4 попугаев клинические признаки заболевания имелись только в начале исследования, а у четвертого клинических признаков болезни не было вообще. Через 9 месяцев наблюдения у всех птиц вирус в крови не обнаруживался.
Таким образом, степень виремии выше при развитых клинических признаках болезни (т.е. чем меньше здоровых перьев, тем больше шанс найти цирковирус в крови попугаев).
Выделение вируса из мазков из клоаки:
За 9 месяцев исследования как минимум один раз ДНК вируса была обнаружена у всех попугаев в мазках из клоаки. У 2 птиц мазки из клоаки были положительны в 85% проб. У 4 — мазок из клоаки был положительный только один раз (14% проб) за все время исследования и это было в первые 10 дней после начала карантина.
Выделение вируса из пера:
У 2 птиц перо было положительно все 9 месяцев исследования (100%). У 2 других птиц перо было положительно в 6 из 7 проб (85%). У 4 птиц перо было положительно в 5 из 7 проб (71%). У 1 птицы положительный результат исследования пера был получен только 1 раз и только в первые 10 дней карантина (14%).
Важно . Цирковирус обнаруживался в уже развившемся пере. Т.е. не обязательно сдавать на анализ только растущие перья. Данный факт является показателем опасности заражения других птиц через перо.
При первом исследовании были положительны: 10 образцов пера (76% проб), 9 мазков из клоаки (69%) и только 6 образцов крови (46%). У 4 птиц вирус обнаруживался в крови на протяжении 10 дней, в дальнейшем виремия была обнаружена только у 3 птиц. Примечательно, что обнаружение вируса в крови сопутствовало явным клиническим признакам.
При этом большинство анализов пера и помёта были положительны даже у птиц без клинических признаков заболевания.
Выводы.
Как видно из исследования, ни один из методов не дал стабильной 100% вероятности обнаружения цирковируса у больных попугаев на всем протяжении карантина. Только комбинация всех трех методик и повторные серии анализов повышали шансы обнаружения вируса.
В других проведенных исследованиях вирус удавалось обнаружить методом ПЦР в пере 39,2% клинически здоровых попугаев, содержащихся у заводчиков в Германии. Также есть данные исследований, в которых авторам удавалось обнаружить цирковирус методом ПЦР в помете 26% больных птиц.
Более высокая частота выявляемости цирковируса из помёта, чем из крови, объясняется эпителиотропной природой вируса. Это подтверждается работой Ramis и соавторов, в которой исследователи обнаруживали ДНК вируса в тканях зоба, мускульного желудка, кишечника. Также, вероятность обнаружения цирковируса в помёте и в мазках из клоаки выше, чем при анализе крови, потому что у больных птиц поражается фабрициева сумка, которая является главным органом, который поражается при цирковирозе попугаев.
На заглавном фото больные цирковирусом ара макао или красные ара (Ara macao).
Тест выявляет титр антител IgM против бактерий Chlamydia psittaci, которые вызывают у человека орнитоз (пситтакоз).
Синонимы русские
Антитела класса IgM к Chlamydia psittaci, иммуноглобулины класса M к возбудителю орнитоза (пситтакоза).
Синонимы английские
Anti-ChlamydiapsittaciIgM, Chlamydiapsittaciantibodies, IgM.
Метод исследования
Иммуноферментный анализ (ИФА).
Какой биоматериал можно использовать для исследования?
Как правильно подготовиться к исследованию?
Не курить в течение 30 минут до исследования.
Общая информация об исследовании
Chlamydia psittaci – бактерии, относящиеся к семейству Chlamydiaceae. Вызывают у человека орнитоз (пситтакоз) - острая инфекционная болезнь, встречающаяся в виде единичных, групповых заболеваний и эпидемических вспышек в результате заражения от птиц и протекающая с различной клинической картиной и тяжестью, нередко с явлениями атипичной (интерстициальной) пневмонии.
Хламидии – мелкие грамотрицательные бактерии, основной характеристикой которых является клеточный паразитизм. Цикл развития хламидий состоит из двух фаз - неинфекционной внутриклеточной и инфекционной внеклеточной стадий.
Источником инфекции, вызванной Chlamydia psittaci, для человека служат птицы. Наиболее часто заражение происходит при контакте с утками, индюшками, попугаями, канарейками и особенно городскими голубями. Механизм заражения людей аэрогенный, путь передачи инфекции воздушно-капельный и контактно-бытовой. Также возможно заражение алиментарным путем при употреблении недостаточно термически обработанных яиц. Заболевают лица, постоянно контактирующие с птицами (работники птицеферм, птицеперерабатывающих предприятий и др.). Чаще всего заражение происходит в конце лета – в начале осени.
Основным отличием хламидийной инфекции является отсутствие собственных клинических симптомов и участие в развитии смешанных инфекций. Первые симптомы появляются через 6-10 дней после заражения. Различают пневмоническую, тифоподобную и менингеальную формы заболевания. При пневмонической форме, заболевание начинается остро. Отмечается повышение температуры тела до фебрильных значений. Заболевание сопровождается кашлем, головной болью, тошнотой, рвотой. Тифоподобная форма характеризуется длительной лихорадкой, сильной интоксикацией, поражением внутренних органов. При менингеальной форме отмечается головная боль, симптомы интоксикации и нарушения сознания.
Диагноз орнитоза ставится на основании эпидемиологических, клинических и лабораторных данных. Лечение проводит врач-инфекционист. В качестве этиологической терапии используются антибактериальные препараты группы тетрациклина, макролиды, респираторные фторхинолоны. Также применяют методы патогенетической терапии.
Прогноз при раннем выявлении и своевременно начатом лечении благоприятный.
Иммуноферментный анализ - наиболее доступными и информативными метод для диагностики инфекции, вызванной Chlamydia psittaci. Иммунологическом ответ начинается с выработки организмом IgМ; Обнаружение в крови IgMк Chlamydia psittaci - показатель острого процесса. IgМ начинает определятся с пятого дня после начала заболевания. Он вырабатывается организмом человека против антигенов Chlamydia psittaci. Пик IgМ приходится на 1—2 неделю заболевания. Затем происходит снижение титра антител. Как правило, IgМ полностью исчезают через 2—3 месяца независимо от проведенного лечения.
Для чего используется исследование?
Для диагностики инфекции, вызванной Chlamydia psittaci.
Для оценки динамики течения заболевания и корректности проводимой терапии.
Когда назначается исследование?
- При атипичном воспалении легких, особенно у лиц с высоким риском генерализации инфекции и лиц, постоянно контактирующих с птицами (работники птицеферм, птицеперера-батывающих предприятий и др.).
- При эпидемических вспышках орнитоза (пситтакоза).
- При пневмонии, устойчивой к антибиотикотерапии.
- При септических состояниях неясной этиологии.
Что означают результаты?
Результаты анализа говорят о наличии или отсутствии острого инфекционного процесса, времени его возникновения/рецидива, а также о том, является ли заболевание следствием первичного инфицирования или обострением хронической патологии.
Читайте также: