Как сдать кровь на лептоспироз собаке

Обновлено: 15.04.2024

Leptospires - подвижные тонкие нитевидные бактерии размером 6,0-25 мм в длину и 0,1-0,2 мм в ширину. Существует более 250 патогенных сероваров лептоспир, основанных на различиях в углеводном компоненте бактериального липополисахарида.

Иммунитет к лептоспирам зависит от серогруппы. Различные серовары адаптированы к различным хозяевам диких или домашних животных. Лептоспироз у собак вызывается в первую очередь патогенными сероварами вида Leptospira interrogans sensu lato. Сообщалось также, что некоторые из этих сероваров вызывают инфекции у кошек. Лептоспиры могут оставаться инфекционными в течение нескольких месяцев при температуре около 25 ° C, влажности и нейтральный pH почвы.

Заражение лептоспирозом может происходить прямым путем через мочу от зараженных животных, половым путем, через трансплацентарный барьер, укусы или при проглатывании тканей инфицированных животных. Собаки чаще заражаются посредством контакта с загрязненной лептоспирами водой, при этом лептоспиры проникают в организм через раны на коже, либо через неповрежденные слизистые оболочки. Кошки в отличие от собак чаще всего заражаются при контакте с грызунами, которые служат естественными резервуарами лептоспироза в природе.

Лептоспироз собак протекает в геморрагической или желтушной формах. Течение может быть острым, подострым, хроническим и латентным. Геморрагическая (безжелтушная) форма лептоспироза отмечается в основном у собак старшего возраста, как правило, в острой или подострой форме. Геморрагическая форма характеризуется кратковременной гипертермией до 40-41,5 °С, вялостью, анорексией, повышенной жаждой, гиперемией слизистых оболочек ротовой и носовой полости, конъюнктивы. Желтушная форма регистрируется у молодняка в возрасте 1-2 лет. Болезнь может протекать остро, подостро и хронически. Основным симптомом является ярко выраженная желтуха (желтушное окрашивание от светло-желтого до темно-желтых слизистых оболочек ротовой, носовой полости, влагалища, а также кожи живота, промежности, внутренней поверхности ушей и других участков).

Лептоспироз кошек проявляется реже, чем у собак, так как протекает субклинически и вызывает полиурию/ полидипсию, легкую диарею и небольшое повышение температуры тела.

Диагноз лептоспироз подтверждают с помощью микроскопии в темном поле, культивированием из мочи, крови и спинномозговой жидкости. Широко используется определение антител к различным серотипам лептоспир. При использовании этого метода важно учитывать вакцинальный анамнез больного животного.

Обнаружение ДНК лептоспир в жидкостях организма, особенно в моче, надежно при ранней диагностике, так как лептоспиры в моче достигают высоких концентраций. При проведении исследования важно учитывать проведение предварительной антибиотикотерапии.

Исследуемый аналит: моча

Метод исследования: ПЦР- РТ

Показания: иктеричность или гиперемия слизистых оболочек, гипертермия, анорексия, угнетение у собак с соответствующим анамнезом; у бездомных кошек в качестве дифференциальной диагностики при неспецифических признаках (гипертермия, полиурия/полидипсия, угнетение и др.).

Противопоказания: не известны

Подготовка пациента: биоматериал отбирается для исследования до применения системных антибактериальных препаратов.

Метод отбора: естественное мочеиспускание, катетеризация мочевого пузыря, цистоцентез

Преаналитика:

провести процедуру взятия мочи (желательно путем цистоцентеза или катетеризацией);
если моча собрана в СКК (стерильный контейнер с красной крышкой), при помощи держателя для взятия мочи перенести биоматериал в транспортную пробирку с желтой крышкой. Если объем мочи не позволяет использовать вакуум в пробирке, для переноса использовать стерильный шприц (путем прокола крышки пробирки);
минимальный объем мочи, необходимый для исследования, – 1 мл;
подписать контейнер с указанием клички животного, фамилии владельца, заполнить все графы направительного бланка с указанием кода клиента;
сохранность образца 2 дня при +2°С …+8°С;
температурный режим транспортировки в лабораторию +2°С …+8°С (синий пакет).

Интерпретация:

Результаты исследования содержат информацию исключительно для врачей. Диагноз ставится на основании комплексной оценки различных показателей, дополнительных сведений и зависит от методов диагностики.

Цель исследования: выявление РНК патогенных спирохет Leptospira interrogans,L.alexanderi L.borgpetersenii, L.kirschneri, L.noguchii, L.santarosai. L. Weiliiв в патологическом материале методом полимеразной цепной реакции

Предназначено для диагностики у:
- собак
- кошек
- лошадей
- МРС, КРС
- свиней

Опасность для человеческого здоровья:
Зооноз. Зараженные собаки являются резервуаром инфекции и выделяют их в окружающую среду. Заражение может происходить при несоблюдении правил гигиены через инфицированную воду, мочу

Спецификация .
Лептоспироз(Leptospirosis) – инфекционная природноочаговая болезнь многих видов животных (болеют свиньи, крупный и мелкий рогатый скот, лошади, собаки, верблюды, пушные звери, мелкие дикие млекопитающие, человек), характеризующаяся кратковременной лихорадкой, анемией, желтухой, гемоглобинурией, некрозами слизистых оболочек и кожи, атонией желудочно-кишечного тракта, абортами, рождением нежизнеспособного потомсства. Инкубационный период от 3-х до 7-ми дней в зависимости от серовара и особенностей специфического иммунитета. Обнаружение лептоспир по крови возможно только в первые 5-7 дней после появления клинических признаков. Выделение лептоспир с мочой начинается на 7-10 день после проявления клинических симптомов и продолжается месяцами. Лептоспиры могут вызывать у собак хроническое поражение почек спустя месяцы и годы после острого повреждения почек.

Механизмы патогенеза лептоспироза у собак:
Лептоспиры проникают в организм собаки через слизистую оболочку или поврежденную кожу. В воротах инфекции обычно не развивается специфических поражений. Из них возбудитель в последующие 4-11дн проникает в кровь, вызывая септицемию. Клинически лептоспиремия проявляется лихорадкой, кратковременной гемолитической анемией, лейкоцитозом, гемоглобинурией и альбуминурией.
Продолжительность бактериемии благодаря усиливающемуся иммунному ответу обычно составляет 4-5 дн. Элиминация бактерий из крови сопровождается прекращением лихорадки. Во время септицемии ЛС разносятся кровью по всему организму, проявляя при этом (в зависимости от серовара) более или менее выраженный тропизм к печени, почкам, плаценте и плодам.
Благодаря высокой подвижности и небольшой толщине они избегают фагоцитоза ретикулоэндотелиальными клетками печени и проникают через эндотелиальную выстилку синусоидов, достигая пространства между клетками паренхимы (70). В печени эти сприрохеты активно размножаются, вызывая паренхиматозное воспаление с последующим включением основных патогенетических механизмов гепатита, в т.ч. характерной для этой формы лептоспироза желтухи. Поражения печени вызваны механическим повреждением гепатоцитов ЛС, а также действием их токсинов. Помимо нарушения динамики оттока из воспаленной печени желчи определенную роль в патогенезе желтухи играет диссеминированный геморрагический процесс, происходящий в результате воздействия на эритроциты гемолизинов возбудителя.
Пути заражения
Заражение собак происходит в основном горизонтальным путем - через пищеварительный тракт при приеме корма и воды, контаминированных ЛС, аэрозольно и, реже половым путем. Возможно также и вертикальное распространение инфекции от инфицированной суки - через плаценту плодам и через молоко подсосным щенкам. ЛС могут проникать в организм не только через слизистые оболочки, но и через поврежденную кожу.
ептоспироз собак может протекать безсимптомно или проявляться клинически в желтушной или безжелтушной формах. Их тяжесть зависит от возраста и иммунного статуса инфицированного животного, вирулентности вызвашего инфекцию серовара ЛС, заражающей дозы и пути заражения.
Симптомы
При типичном течении лептоспироз имеет 2-фазный характер: вначале развивается симптоматика, связанная с бактериемией, а на второй фазе на первый план выступают клинические признаки поражения определенных органов.
В подострых случаях собака может переболевать без появления характерной симптоматики. При таком течении инфекции у заболевшей собаки снижается аппетит, развивается субфебрильная температурная реакция (38,5-40 C), появляются мышечные боли, слабость, угнетение, иногда конъюнктивит, признаки анемии, а также клинические признаки описанных ниже желтушной или безжелтушной форм лептоспироза, но в стертом виде.
При обеих формах болезни у щенных сук инфекция может вызвать аборт.
При лептоспирозе у собак выявляют ряд гематологических изменений: анемию средней тяжести, лейкопению (на лептоспиремийной стадии инфекции), которая сменяется лейкоцитозом со сдвигом влево, тромбоцитопению, гипербиллирубинемию (3-50 мг/дцл), гиперазотемию, гиперкреатинемию (3-20 мг/дцл), гиперфосфатемию, а также повышение концентрации амилазы и липазы. Увеличение активности в сыворотке крови печеночных ферментов (аланинтрансферазы и аспартаттрансферазы ), а также при тяжелом поражении почек и/или печени - повышение концентрации в крови азота мочевины и креатинина свыше 25 и 2 мг/дцл.
Вакцина от лептоспироза относится к необязательным вакцинациям. Кратность ревакцинации 1 год.

Лептоспироз у кошек:
Явная клиническая картина клинического лептоспироза у кошек встречаются РЕДКО.
В организм кошки лептоспиры проникают с грязной водой, пищей, грызунами. Именно грызуны являются очень частыми переносчиками этого заболевания в природе. Основной мерой профилактики лептоспироза у кошек, это борьба с грызунами.
Скрытый период заболевания у кошек длится от двух до десяти суток. Заболевание может проходить в острой, подострой и хронической форме. Под действием возбудителя нарушается работа почек, органов пищеварения, сердца и сосудов. В первые дни заболевания у животного резко увеличивается температура тела, кошка лежит, отказывается от еды, может наблюдаться рвота, лапы подрагивают. Далее на слизистой оболочке рта образуются покраснения, перерастающие в язвы, из ротовой полости исходит неприятный запах, язвы часто кровоточат. Кошка теряет массу, слабеет, у нее хуже работает сердце. Если заболевание протекает не в острой форме, то все симптомы заболевания появляются постепенно, кожные покровы чаще всего не затрагиваются. Изменения в работе органов пищеварения наблюдаются время от времени. Если у домашней кошки появляются симптомы, напоминающие лептоспироз, ее следует обязательно показать ветеринару. Следует всячески предотвращать контакт домашней кошки с животными, зараженными данным заболеванием.

Подготовка к исследованию

Требования к пробе: - Для исследования используют: 1. моча, после 7-10 дней от начала проявления клинических симптомов возможно исследование мочи на лептоспироз методом ПЦР. 2. паренхиматозные органы с очагами поражения (мозг, легкие, почки (обе)), 3. абортированный плод. 4. Кровь с К3ЭДТА В первые 5-7 дней заболевания на фоне лихорадки берется Кровь животного с К3ЭДТА. В остальных случаях, при настоянии и ответственности врача или владельца, с внесением соответствующей записи в комментарии заявки. После 5-7 дней заболевания Кровь животного с К3ЭДТА настоятельно рекомендуется исследовать методом ИФА на наличие АТ к лептоспирозу. - кровь с гепарином не подходит для исследований методом ПЦР! - смешанные пробы запрещены в связи с особенностями технологии проведения анализа! Хранение образцов: Материал для анализов доставляется в лабораторию в день взятия или на следующий день, сохраняя их при +2-+8⁰С. Допускается хранение секционного материала (ткани органов) или мочи в течение 1 мес при температуре не выше -16⁰С.

Требование к биоматериалу

ВАЖНО! 1. Вакцинация инактивированными вакцинами клинически здоровых собак не приводит, как правило, к ложноположительным реакциям. 2. Субклинически инфицированные собаки могут выделять с мочой лептоспиры, значение положительного результата в этиологии заболевания в этом случае определяет ветеринарный врач. ВАЖНО! 1. Чтобы избежать ложноположительных результатов необходимо выдержать 2-3 недели после лечения перед сдачей анализа. 2. Положительный результат при отсутствии клинической картины заболевания может означать бактерио-/вирусоносительство.

возбудителю лептоспироза (серогруппы Pomona, Tarassovi, Hebdomadis, Icterohaemorrhagiae, Grippotyphosa, Sejroe и Canicola) в сыворотке (плазме) крови сельскохозяйственных животных (КРС, МРС, свиньи, лошади) иммуноферментным методом (ИФА)1.

Лептоспироз - зоонозная природноочаговая инфекционная болезнь диких, домашних животных и человека, широко распространенная в различных ландшафтно - географических зонах мира.

2) Источники возбудителей лептоспирозной инфекции подразделяются на две группы.

К первой относятся грызуны и насекомоядные, являющиеся основными хозяевами (резервуаром) возбудителей в природе; ко второй - домашние животные (свиньи, крупный рогатый скот, овцы, козы, лошади, собаки), а также пушные звери клеточного содержания (лисицы, песцы, нутрии), формирующие антропургические (сельскохозяйственные) очаги.

3) Источнники заражения. Животные – лептоспироносители выделяют лептоспир во внешнюю среду с мочой и инфицируют воду, корма, пастбища, почву, подстилку и другие объекты внешней среды, через которые заражаются здоровые животные.

Наиболее благоприятная среда для сохранения лептоспир вне организма – вода открытых водоемов: невысыхающие лужи, пруды, болота, медленно текущие речки, влажная почва с реакцией, близкой к нейтральной.

Водный путь передачи возбудителя инфекции основной.

Заражение возможно при поедании трупов грызунов – лептоспироносителей или кормов, инфицированных мочой этих грызунов. Промысловые животные при клеточном их содержании заражаются в основном при поедании продуктов убоя больных лептоспирозом животных.

Лептоспиры проникают в организм животных и человека через поврежденные участки кожи (царапины, порезы, раны), слизистые оболочки ротовой полости, носа, глаз, половых путей2.

4) Течение. Лептоспироз у сельскохозяйственных животных протекает остро, подостро, хронически и бессимптомно. Это наблюдается в любое время года, но у животных с пастбищным содержанием преимущественно в пастбищный период. Восприимчивы к лептоспирозу животные всех возрастов. Болезнь характеризуется кратковременной лихорадкой, иногда желтушным окрашиванием и некрозами слизистых и отдельных участков кожи, нарушением функции желудочно-кишечного тракта.

У свиней и подсвинков, взрослого крупного рогатого скота, лошадей, овец и коз лептоспироз протекает преимущественно бессимптомно. У не иммунных свиноматок и реже у коров лептоспироз сопровождается абортами в последний месяц беременности или рождением нежизнеспособного потомства. Аборты у свиноматок в ранее благополучных хозяйствах могут быть массовыми.

При вспышке лептоспироза острое течение инфекции с характерными клиническими признаками имеется у небольшого количества животных, а основная масса их переболевает бессимптомно.

Независимо от течения инфекции и вида животного на 5–7-й день после заражения в крови животного выявляются специфические антитела, а через 10–20 дней у ряда животных развивается лептоспироносительство, которое продолжается в течение нескольких месяцев и до 1–2 лет.

Поголовье лептоспироносителей на неблагополучной по лептоспирозу ферме среди крупного и мелкого рогатого скота составляет 1–5%, на отдельных фермах до 10–20%, среди свиней лептоспироносителями могут быть 30–80% животных и более.

Течение болезни не зависит от серогрупповой принадлежности возбудителя. Однако лептоспироз у крупного рогатого скота, вызванный возбудителями группы Hebdomadis, протекает чаще бессимптомно и только в отдельных случаях сопровождается лептоспироносительством.

5) Патологоанатомические изменения у павших от лептоспироза животных характеризуются геморрагическим диатезом и желтушным окрашиванием подкожной клетчатки, увеличением в объеме печени, дряблой ее консистенцией, на разрезе глинистого цвета, увеличением лимфатических узлов, сочных на разрезе и с кровоизлияниями. Мочевой пузырь переполнен мочой часто вишнево-красного цвета. Желтушное окрашивание тканей и кровавая моча не характерны для лептоспироза свиней.

При бессимптомном лептоспироносительстве видимые поражения локализуются преимущественно в почках и проявляются изменениями, характерными для острого или хронического паренхиматозного или интерстициального нефрита и дистрофии (мраморная окраска и изменение цвета поверхности, красные инфаркты, точечные серо-белые некротические очажки, кровоизлияния, сглаженность границы между мозговым и корковым слоями)2.

Подготовка к исследованию

Требование к материалу: - кровь в пробирке с ЭДТА, мин.объем 0,5 мл, или плазма - мин.объем 200 мкл - кровь в пробирке для биохимии (с активатором свертывания или гранулами) или пустой пробирке - мин.объем 0,5 мл, или сыворотка- мин.объем 200 мкл - Вакцинированные и животные с предполагаемым Лептоспирозом: Пробы крови сдаются дважды с интервалом 1-2 недели - Животным без клинической картины возможно однократное определение титра А\Т. При получении положительного результата, необходимо повторное исследовнаие через 1-2 недели. Доставка проб в лабораторию: - цельная проба крови (то есть не центрифугированная и не разделенная на кровь и сыворотку) должна быть доставлена в лабораторный офис в течение 2-х часов после взятия при условии хранения при +15-+25 ⁰С; или в течение 24-ти часов при условии хранения в холодильнике - сыворотку/плазму следует центрифугировать сразу после взятия; в таком виде можно транспортировать пробу до 24 часов при хранении в условиях +2-+8 ⁰С - для увеличения срока хранения пробу сыворотки/плазмы замораживают сразу после центрифугирования

Требование к биоматериалу

Нарастание титра антител в парных сыворотках свидетельствует об инфицировании животного лептоспирами и развитии инфекционного процесса. Отсутствие нарастания титра антител или незначительное увеличение, а также в случае проведения однократного исследования с выявлением какого-либо титра антител, может быть свидетельством контакта животного с возбудителем инфекции.

Лептоспиры (Leptospires)- подвижные тонкие нитевидные бактерии размером 6,0-25 мм в длину и 0,1-0,2 мм в ширину. Существует более 250 патогенных сероваров лептоспир, основанных на различиях в углеводном компоненте бактериального липополисахарида. Иммунитет к лептоспирам зависит от серогруппы. Различные серовары адаптированы к различным хозяевам диких или домашних животных. Лептоспироз у собак вызывается в первую очередь патогенными сероварами вида Leptospira interrogans sensu lato. Сообщалось также, что некоторые из этих сероваров вызывают инфекции у кошек. Лептоспиры могут оставаться инфекционными в течение нескольких месяцев при температуре около 25 ° C, влажности и нейтральный pH почвы.

Противопоказания:

риск кровотечений при биопсии образований с полостью;
риск значительных кровотечений возрастает при наличии у животного выраженной тромбоцитопении или других коагулопатий;
противопоказания перед проведением общей анестезии, согласно степени оценки группы риска животного.

Хотя риски данной процедуры являются минимальными, следует информировать владельца о том, что биопсия ткани сопряжена с возможностью кровотечений или других осложнений в зависимости от области и природы забираемой ткани.

Подготовка пациента: биоматериал отбирается для исследования до применения системных антибактериальных препаратов; стандартная подготовка перед проведением общей анестезии.

перед проведением процедуры животное должно быть выдержано на 10-12 часовой диете;
перед проведением вмешательства необходимо выбрить шерсть и обработать кожу соответствующей области раствором антисептика.

Метод отбора: биопсия ткани.

Преаналитика:

Общие рекомендации для взятия биоптата ткани на ПЦР исследование:

размер ткани, помещенной в микропробирку с транспортной средой, не должен превышать размеры: 0,5х0,5х0,5 см.

Порядок действий:

Провести операционную/аутопсийную вырезку фрагмента ткани.
Размер биоптата не должен превышать 0,5х0,5х0,5 см.
Поместить биоптат в микропробирку с транспортной средой и плотно закрыть ее крышкой до щелчка.
Заморозить микропробирку в вертикальном положении при -17°С…-23°С.
Контейнер маркировать Ф.И.О. владельца и кличкой животного, заполнить направительный бланк, указав код клиента.
Сохранность образца 1 месяц при -17°С…-23°С.
Температурный режим транспортировки в лабораторию -17°С. -23°С (красный пакет).

Интерпретация:

Читайте также: