Как в лаборатории проводят анализ на бешенство

Обновлено: 25.04.2024

p>Бешенство – чрезвычайно опасное заболевание вирусного типа. Оно сильно поражает спинной и головной мозг, нередко приводит к смерти.

Бешенство в природе встречается среди всех млекопитающих, передаваясь с биологическими жидкостями (преимущественно со слюной). Люди могут заразиться им, будучи укушенными инфицированными животными – чаще всего это кошки, собаки, еноты, кролики, лисы, волки, хорьки, летучие мыши и т.д.

На начальной стадии заболевания у пациента начинается усиленное слюноотделение вкупе с боязнью воды. Это сопровождается угнетенным состоянием, сменяемым приступами возбуждения и агрессии. Те люди, которые входят в группу риска развития данного заболевания, нуждаются в прохождении вакцинации.

Симптомы бешенства у человека

Как правило, у зараженных бешенством не появляется никаких симптомов до последней стадии развития заболевания, когда вылечить его уже нельзя. Сам инкубационный период может составлять от недели до года и длится 20-90 дней в среднем. При этом сами признаки бешенства нередко появляются только за несколько дней до смерти больного:

перед тем, как появятся основные симптомы, место укуса может покраснеть, припухнуть, начать зудеть;
лихорадка;
недомогание и головная боль;
потеря аппетита, рвота, понос, тошнота;
депрессия;
нарушения сна, общее беспокойное состояние;
повышается чувствительность к зрительным и слуховым раздражителям;
апатия, тревожность и угнетенное состояние сознания у больного сменяются на приступы агрессии, беспокойства и возбуждения. При приступах возбуждения у человека учащается сердцебиение и дыхание;
расстройства глотания и дыхания;
боязнь воды или же гидрофобия (разговаривая о воде или же пытаясь ее пить, больной испытывает ужас, у него начинаются спазмы гортани и глотки, которые сопровождаются болезненными ощущениями);
интенсивное слюноотделение;
судороги;
частичный паралич;
галлюцинации.

Кто в группе риска?

Люди, которых укусили дикие или домашние животные;
Люди, живущие в сельской местности и держащие дома животных, которые не прошли вакцинацию от бешенства;
Люди, которые путешествуют по развивающимся странам (Юго-Восточной Азии, Африке);
Люди, которые выезжают на природу и контактируют с дикими животными (енотами, лисицами, летучими мышами и т.п.);
Звероловы и охотники;
Ветеринары;
Люди, которые работают в питомниках, зоопарках, приютах для животных;
Люди, которые работают с вирусом бешенства в лаборатории.

Диагностика бешенства

Данный диагноз можно поставить в том случае, когда после укуса животного появляются симптомы заболевания. Бешенство подтверждается при исследовании кожного образца, взятого с затылка, выделении вируса из слезной, спинномозговой жидкости, слюны.

Лабораторные исследования, необходимые для диагностики бешенства:

общий анализ крови (исключающий СОЭ и лейкоцитарную формулу); ;
исследование крови, позволяющее определить антитела к возбудителю бешенства;
определение возбудителя бешенства посредством исследования тканей и биологических жидкостей организма:

- исследование фрагментов тканей кожи на затылке, отпечатков роговицы;

- исследование генетического материала вируса посредством ПЦР;

- исследование мозговых тканей с помощью электронной микроскопии.

Прочие методы исследования, которые применяются для диагностики бешенства:

ЭЭГ или же электроэнцефалография – метод, позволяющий оценить электрические потенциалы головного мозга.

Лечение бешенства у людей

К несчастью, если симптомы данного заболевания все же проявляются, оно чаще всего приводит к смерти. Лечение в большинстве случаев может лишь облегчить состояние больного.

После укуса дикого животного рану необходимо промыть, тщательно осмотреть на предмет наличия тех или иных инородных тел (скажем, сломанных зубов) и хирургически обработать. После этого пациенту немедленно вводятся иммуноглобулины – особые клетки иммунной системы. Две следующие недели пациент проходит вакцинацию (всего 5 уколов). Предотвратить заболевание можно только таким способом.

Если укусило домашнее животное, за ним нужно наблюдать примерно 10 дней и в том случае, если будут замечены симптомы бешенства, немедленно обращаться к врачу, чтобы тот принял меры по иммунизации укушенного человека. Больное животное, ставшее источником бешенства, нужно изолировать.

Лечение бешенства может и облегчать его симптомы – уменьшать боль, снимать судороги. Для этого используются соответствующие лекарственные средства, а больной помещается в особую палату.

Наши братья меньшие иногда оказываются настоящими вампирами

Каждый год несколько тысяч россиян обращаются за медицинской помощью после укусов животных. Самыми злобными, по статистике, оказываются собаки: от них страдают более 70% пациентов. Следом идут кошки и мелкая домашняя живность — хомячки, мыши, крысы. Укусы домашних питомцев менее опасны, так как этих зверей прививают. А вот после встречи с клыками "дикарей" можно ожидать худшего.

Даже если полученная травма не вызвала потери крови, человеку требуется медицинская помощь, так как в раны, оставляемые зубами животных, почти всегда попадает инфекция. Особо опасны укусы в область лица, шеи и кисти рук.

Чем рискуем заболеть

Большинство укусов являются потенциально опасными в плане заражения бешенством, так как в момент нападения животное может не иметь внешних признаков заболевания. Есть вероятность заражения столбняком. От кошки можно подхватить токсоплазмоз, который опасен для беременных: он приводит к нарушению эмбрионального развития, а в острой форме также поражает глаза, суставы и селезенку. Многие животные, включая птиц и хладнокровных, могут распространять бациллы туберкулеза.

Часто укусы сопровождаются аллергической реакцией: повышается температура, травмированное место краснеет и опухает. Аллергия опасна тем, что может проявляться в виде симптомов обычных заболеваний.
Инкубационный период зависит от локализации (наиболее короткий — при укусах в голову, кисти рук; наиболее длинный – в стопы), возраста укушенного (у детей короче, чем у взрослых), вида животного, количества бактерий, размера и глубины раны.

В любом случае при оказании первой помощи не следует стремиться к немедленной остановке кровотечения, так как оно способствует удалению из раны слюны животного. Можно просто прижать ее куском чистой сухой ткани и подержать, пока кровь не перестанет течь. Затем рану нужно тщательно промыть с мылом, обработать и обязательно обратиться за медицинской помощью к специалисту.

Наталья Лютикова, врач-консультант независимой лаборатории "ИНВИТРО":
Дикие и домашние животные могут быть переносчиками множества инфекционных заболеваний. Самое опасное из них — бешенство, которому подвержены почти все теплокровные животные: собаки, кошки, лисы, волки, медведи, летучие мыши, а также крупный рогатый скот и даже лошади. Если вас укусило животное, необходимо поймать его и взять под наблюдение. Вирус бешенства переносится со слюной и вызывает энцефалит (воспаление головного мозга). Для предотвращения заражения место укуса нужно хорошо промыть мыльной водой, кожу вокруг него обработать раствором антисептика и обратиться к врачу. Печальный факт, но заражение бешенством почти всегда приводит к смертельному исходу. Единственной возможностью спасения остается профилактика заболевания — введение пострадавшему специальной вакцины. Делать это необходимо не позднее 14-го дня с момента укуса.

Контакты центральной пресс-службы

Информацию из данного раздела нельзя использовать для самодиагностики и самолечения. В случае боли или иного обострения заболевания диагностические исследования должен назначать только лечащий врач. Для постановки диагноза и правильного назначения лечения следует обращаться к Вашему лечащему врачу.

Бешенство у человека: причины появления, симптомы, диагностика и способы лечения.

Определение

Бешенство – тяжелое вакциноконтролируемое вирусное заболевание нервной системы. Резервуаром для вируса бешенства служат дикие и бродячие животные, преимущественно хищники, некоторые виды грызунов, а также домашний скот.

Наибольшее число случаев заражения регистрируется в весенне-летний период. Стоит отметить, что у детей заболевание развивается быстрее, чем у взрослых.

Причины появления бешенства

Вирус Neuroiyctes rabid передается через биологические жидкости (как правило, через слюну) и попадает в организм преимущественно в результате укуса зараженного животного. Передача инфекции может произойти и в случае непосредственного контакта слюны инфицированного животного со слизистыми оболочками или свежими ранами на коже человека. Причем животное считается заразным уже за 3-7 дней до появления клинических симптомов.

Передача инфекции от человека человеку при укусе или со слюной теоретически возможна, но ни разу не подтверждалась.

Бешенство развивается далеко не в каждом случае: при укусе конечности риск развития заболевания составляет около 23%, а в случае повреждения шеи, лица и кистей рук доходит до 95%.

Проникая в организм человека, вирус распространяется по нервным волокнам, но может разноситься с током крови и лимфы. Он разрушает нервные клетки и на их месте оставляет специфические образования - тельца Бабеша-Негри. Спустя некоторое время вирус достигает спинного и головного мозга, где вызывает воспалительный процесс, характеризующийся тяжелой симптоматикой. Из-за перерождения клеток нервных волокон развиваются функциональные расстройства внутренних органов и систем.

Во внешней среде вирус очень быстро погибает под прямыми солнечными лучами и в течение десяти минут при нагревании до 60°С. Желудочный сок уничтожает его в течение 20 минут, спирт и другие средства дезинфекции – практически мгновенно. При низких температурах вирус может сохраняться в течение нескольких недель, однако при этом теряет вирулентность.

В большинстве случаев причиной болезни становится отсутствие у людей необходимых знаний, а также небрежное отношение к собственному здоровью. Человек часто не придает должного значения тому, что был укушен, относясь к ране как к обыкновенной царапине.

За медицинской помощью нужно обращаться не только после укуса, но даже после попадания слюны на кожу, целостность которой нарушена.

Классификация заболевания

В Международной классификации болезней 10-го пересмотра бешенство имеет код А82:

A82.0 - Лесное бешенство.
A82.1 - Городское бешенство.
A82.9 - Бешенство неуточненное.

Клинические формы бешенства:

бульбарная;
менингоэнцефалитическая;
мозжечковая;
паралитическая.

1-я стадия (от 24 часов до 3 дней) характеризуется болезненностью раны, гиперреактивностью и зудом кожи в месте укуса, отечностью тканей. У больного наблюдается субфебрильная температура (до 37,3оС), головная боль, слабость, может быть тошнота и рвота. Если рана на лице, то у человека развиваются обонятельные и зрительные галлюцинации. Психические отклонения проявляются депрессией, апатией, необъяснимой тревожностью, раздражительностью.

2-я стадия длится 2-4 дня, характеризуясь гипервозбуждением и гидрофобией (человек не может пить из-за спазма глотательной мускулатуры, а по мере прогрессирования болезни этот спазм возникает даже от звука льющейся воды). Урежается частота дыхания, появляются лицевые судороги в ответ на яркий свет, резкие звуки, ветер или сквозняк. Зрачки расширяются, взгляд фиксируется в одной точке. У больного учащается пульс, происходит обильное слюно- и потоотделение.

Развиваются психические нарушения: человек становится буйным, агрессивным и представляет угрозу себе и окружающим. Во время таких приступов больной страдает от преследующих его страшных галлюцинаций, а в промежутках между ними к нему может возвращаться сознание.

Диагностика бешенства

При обращении пациента к врачу после укуса агрессивного животного значение имеет осмотр раневой поверхности для определения предположительной длительности инкубационного периода. Затем врач отмечает наличие визуальных признаков заболевания – изменения поведения, размер зрачков и т.д.

Изменения в клиническом анализе крови у всех заболевших бешенством схожи - повышается уровень лимфоцитов, эозинофилы отсутствуют.

Синонимы: Общий анализ крови, ОАК. Full blood count, FBC, Complete blood count (CBC) with differential white blood cell count (CBC with diff), Hemogram. Краткое описание исследования Клинический анализ крови: общий анализ, лейкоформула, СОЭ См. также: Общий анализ – см. тест № 5, Лейкоцит.

Мазок-отпечаток, взятый с поверхности роговицы, указывает на наличие антител, вырабатываемых к попавшей в организм инфекции.

Кроме того, к основным диагностическим мероприятиям относится определение вирусных антигенов в биоптате кожи затылочной части по методу флуоресцирующих антител, а также ПЦР-тест спинномозговой жидкости.

Дополнительно может потребоваться биохимическое исследование крови:

Материал для исследования Сыворотка или плазма крови. Если нет возможности центрифугировать пробу через 30 минут после взятия для отделения сыворотки/плазмы от клеток, пробу берут в специальную пробирку, содержащую ингибитор гликолиза (флюорид натрия). Синони.

Синонимы: Диамид угольной кислоты; Карбамид; Мочевина в крови; Азот мочевины. Urea nitrogen; Urea; Blood Urea Nitrogen (BUN); Urea; Plasma Urea. Краткая характеристика аналита Мочевина Мочевина является основным азотсодержащим продуктом катаболизма белков и аминокислот в организме человека. .

Синонимы: Анализ крови на креатинин; Сывороточный креатинин; Креатинин сыворотки, оценка СКФ. Сreat; Сre; Blood Creatinine; Serum Creatinine; Serum Creat. Краткая характеристика определяемого вещества Креатинин Креатинин – низкомолекулярное азотсодержащее вещество, продукт метаболизма креа.

Синонимы: Общий белок сыворотки крови; Общий сывороточный белок. Total Protein; Serum Тotal Protein; Total Serum Protein; TProt; ТР. Краткая характеристика определяемого вещества Общий белок Сыворотка крови (плазма крови, лишенная фибриногена) содержит множество белков, выполняющих разнообразны.

Синонимы: Общий билирубин крови; Общий билирубин сыворотки. Totalbilirubin; TBIL. Краткая характеристика определяемого вещества Билирубин общий Билирубин – пигмент коричневато-желтого цвета, основное количество которого образуется в результате метаболизма гемовой части гемоглобина при дест.

Синонимы: Анализ крови на электролиты; Электролиты в сыворотке крови. Electrolyte Panel; Serum electrolyte test; Sodium, Potassium, Chloride; Na/K/Cl. Краткая характеристика определяемых веществ (Калий, Натрий, Хлор) Калий (К+) Основной внутриклеточный катион. Кал.

ЭЭГ — безопасный и безболезненный метод исследования функционального состояния головного мозга.

К каким врачам обращаться

Следует помнить о смертельной опасности вируса бешенства, поэтому к врачу нужно обращаться сразу после контакта с животным, представляющим даже потенциальную опасность. Оказание первой помощи пострадавшему входит в обязанности врача-хирурга или травматолога, работающего в центре антирабической помощи или в травматологическом пункте. Больной получает инъекцию в день обращения.

Затем может потребоваться помощь врача-терапевта для определения необходимого объема диагностических и лечебных мероприятий, консультация невролога, психоневролога - при поражениях ЦНС.

Лечение бешенства

Единственный способ предотвратить бешенство и смерть зараженного им человека – своевременная (во время инкубационного периода) вакцинация с использованием сухой антирабической вакцины и антирабического иммуноглобулина. Место укуса обкалывают раствором антирабического иммуноглобулина (RIG) в дозе 20 МЕ/кг массы тела.

Схема антирабической вакцинации после контакта с животным – 0-й день (день обращения) – 3-й день – 7-й день – 14-й день – 30-й день – 90-й день. Если животное известно и не погибло от бешенства через 10 дней после нанесения укусов, курс вакцинации можно прекратить.

Она состоит в тщательном промывании раны проточной водой и мыльным раствором, обработке краев раны йодом или спиртом. Повязку, как правило, не накладывают.
При прохождении курса вакцинации от бешенства пациентам запрещено употреблять спиртные напитки, не рекомендуются чрезмерные физические нагрузки, нахождение в бане и сауне, переохлаждение.

Если больной получает параллельно лечение иммунодепрессантами или кортикостероидами, необходимо регулярно осуществлять контроль уровня антител к вирусу. Если они продуцируются в недостаточном количестве, то необходима дополнительная терапия.

При выполнении всех перечисленных мер вероятность развития заболевания удается свести практически к нулю.

После появления клинических симптомов заболевания эффективное лечение становится невозможным, усилия медиков направлены лишь на уменьшение страданий пациента. Ему назначают противосудорожные и снотворные препараты, помещают в затемненную палату с хорошей шумоизоляцией, вводят обезболивающие средства (опиоидные анальгетики) и транквилизаторы. Продлить жизнь помогает искусственная вентиляция легких. Однако на текущем уровне развития медицины после появления клинической симптоматики летальный исход наступает во всех случаях.
Показания для экстренной госпитализации:

множественные рваные раны, укусы лица, шеи, кистей и пальцев рук;
инфицирование полученных ран;
отягощенный терапевтический, аллергологический, неврологический или психоневрологический анамнез;
беременность.

От появления симптомов заболевания до момента смерти больного проходит от 3 дней до 7 дней. Иногда бешенство отличается быстрым прогрессированием и стертой клинической картиной. При этом пострадавший может скончаться в первые сутки после манифестации первых симптомов.

Профилактика бешенства

Бешенство – заболевание, предупреждаемое с помощью вакцин. Профилактическая вакцинация рекомендована лицам, имеющим профессиональные риски, например, дрессировщикам, охотникам, ветеринарам. Противопоказания для введения вакцины от бешенства отсутствуют. Инъекции вводят и женщинам, вынашивающим ребенка, и больным с острыми патологиями. Первые антитела к вирусу начинают вырабатываться через 14 дней после вакцинации, их максимальная концентрация достигается через месяц. Иммунитет от бешенства сохраняется на период до 1 года.

В случаях, когда существует риск краткого инкубационного периода, больному вводят антирабический иммуноглобулин.

Побочные эффекты после вакцинации несущественные по сравнению с возможным заболеванием. В некоторых случаях проявляются аллергические реакции, место инъекции может отекать, уплотняться или болеть.

Вакцину не вводят в следующих случаях:

если ранение было нанесено птицей (не хищником!);
если в результате укуса не была повреждена кожа (через плотную ткань);
если был контакт с человеком, зараженным бешенством;
если был укус животного, но животное не погибло спустя 10 дней после контакта (инкубационный период у теплокровных животных составляет до 10 дней, после чего животное погибает в случае заражения бешенством).

Полный медицинский справочник / Пер. с англ. Е. Махияновой и И. Древаль. - М.: АСТ, Астрель, 2006. - 1104 с.
Клинические рекомендации. Бешенство (гидрофобия) у взрослых. Минздрав РФ, 2019, с. 44.
Литвиненко Ю.В. Бешенство. Актуальные вопросы / Ю.В. Литвиненко. — Текст: непосредственный // Молодой ученый. — 2016. — № 22 (126). — С. 104-111 .

Бешенство - особо опасная болезнь теплокровных животных, характеризующаяся тяжелым поражением центральной нервной системы, атипичным поведением, агрессивностью, параличами, ведущая к летальному исходу. Обычно протекает в буйной форме (у большинства животных) или в тихой (не характерно для крупного рогатого скота). Является зооантропонозом, представляя огромную опасность для человека.

Полученные данные свидетельствуют о резком усугублении эпизоотической ситуации по бешенству, что заставляет обратить специалистов ветеринарной медицины усиленное внимание на данную проблему.

Наиболее действенным методом контроля бешенства среди животных является своевременная иммунопрофилактика и диагностика.

Возбудителем заболевания является вирус бешенства Rabies lyssavirus.

Family/ Семейство – Rhabdoviridae;

Genus/ Род – Lyssavirus;

Species/ Вид - Rabies lyssavirus.

Методы лабораторной диагностики бешенства стандартизированы. Приказом Федерального агентства по техническому регулированию и метрологии от 30-09-2013 г. № 1127-ст межгосударственный стандарт ГОСТ 26075-2013 введен в качестве национального стандарта Российской Федерации с 1 января 2015 г.

Настоящий стандарт распространяется на все виды млекопитающих животных и устанавливает следующие методы лабораторной диагностики бешенства: метод флуоресцирующих антител (МФА); метод выделения вируса бешенства в культуре клеток мышиной нейробластомы CCL-131 (или невриномы Гассерова узла крысы - НГУК-1); биопроба на белых мышах; метод иммуноферментного анализа (ИФА); реакция диффузионной преципитации (РДП).

Для диагностики используются:

1. Метод флуоресцирующих антител. Выявление антигена вируса бешенства меченными флуоресцеинизотиоцианатом антирабическими антителами, с образованием характерных светящихся комплексов-включений, обнаруживаемых в поле зрения люминесцентного микроскопа.

2. Метод выделения вируса в культуре клеток мышиной нейробластомы CCL-131. Основан на размножении вируса в культуре клеток и его идентификации методом флуоресцирующих антител.

Суспензированый пат. материал вносят в культуру клеток, оставляя лунки для контроля. Положительный контроль - суспензия мозга мыши со штаммом вируса бешенства CVS, отрицательный - суспензия мозга клинически здоровой мыши. Далее инкубируют во влажном CO₂ инкубаторе с содержанием 5 CO₂% при 37±1°С в течении 42-28ч. Высушивают, фиксируют в холодном ацетоне в течении 30 мин, вновь высушивают. Далее с добавлением ФАГ в рабочем разведении, помещают во влажную чашку Петри и инкубируют при 37±1°С в течении 30 мин. По окончании трехкратно промывают, погружая на 10 мин в сосуд с ФБР, ополаскивают дистиллированной водой и высушивают. Наносят нефлуоресцирующее иммерсионное масло и просматривают в люминесцентном микроскопе. Антиген вируса бешенства выявляется в цитоплазме культуры клеток в виде ярких зеленых гранул различной формы с четкими краями.

3. Метод биопробы. Выделение вируса бешенства на белых мышах путем введения им суспензии патологического материала с последующей идентификацией вируса методом флуоресцирующих антител.

Наиболее пригодными для заражения являются мыши-сосунки. Для постановки биопробы используют 15-20 животных. Заражение проводят под наркозом путем интрацеребрального введения 0,03 мл суспензии исследуемого материала. При наличии в исследуемом материале вируса бешенства у мышей возникает тремор мышц, параличи. В большинстве случаев животные погибают в течение пяти дней. Наличие вируса бешенства в зараженных и погибших мышах необходимо подтвердить с помощью прямой реакции иммунофлуоресценции или обнаружения телец Бабеша-Негри. Идентификацию обнаруженного вируса бешенства проводят также с помощью реакции нейтрализации на белых мышах.

4. Метод иммуноферментного анализа. (ELISA) Основан на специфическом взаимодействии вирусного антигена с антирабическим антителом, иммобилизованном на твердом носителе, с последующим выявлением связавшегося антигена с помощью второго, меченного ферментом, антитела, путем окрашивания продукта реакции хромогеном.

Готовые разведения антирабической сыворотки вносят в приготовленные лунки в агаровом геле. Чашки Петри помещают в термостат при 37±1°С на 48 часов. Реакцию считают положительной при появлении одной или 2-3 линий преципитации любой интенсивности между лунками, содержащими суспензию мозга и антирабический гамма-глобулин. Отрицательный результат подтверждается другими методами.

Принимая во внимание высокую опасность болезни, обусловленную полной летальностью, специалисту ветеринарной медицины нужно знать, что окончательный диагноз может быть поставлен только методами лабораторной диагностики. Поэтому трудно переоценить значимость вышеперечисленных методов для практической ветеринарной медицины.

Библиографический список

Гулюкин, А.М. Значимость современных методов лабораторной диагностики и идентификации возбудителя бешенства для иммунологического мониторинга данного зооноза [Текст] / А.М. Гулюкин // М.:Вопросы вирусологии № 3, 2014 г. - с. 5-10.

Методы лабораторной диагностики бешенства. [Текст] : ГОСТ 26075-2013 - Введ. 2015-01-01. - М.: Госстандарт России, 2013. - 19с.

Методы лабораторной диагностики бешенства

Animals. Methods of Laboratory Diagnostic of Rabies

Дата введения 2015-01-01

Цели, основные принципы и основной порядок проведения работ по межгосударственной стандартизации установлены ГОСТ 1.0-92 "Межгосударственная система стандартизации. Основные положения" и ГОСТ 1.2-2009 "Межгосударственная система стандартизации. Стандарты межгосударственные, правила и рекомендации по межгосударственной стандартизации. Правила разработки, принятия, применения, обновления и отмены"

Сведения о стандарте

1 РАЗРАБОТАН Федеральным государственным бюджетным учреждением "Всероссийский государственный Центр качества и стандартизации лекарственных средств для животных и кормов" (ФГБУ "ВГНКИ")

2 ВНЕСЕН Федеральным агентством по техническому регулированию и метрологии Российской Федерации

3 ПРИНЯТ Межгосударственным советом по стандартизации, метрологии и сертификации (протокол от 27 июня 2013 г. N 57-П)

За принятие проголосовали:

Краткое наименование страны по МК (ИСО 3166) 004-97

Код страны по МК (ИСО 3166) 004-97

Сокращенное наименование национального органа по стандартизации

Минэкономики Республики Армения

Госстандарт Республики Беларусь

4 Приказом Федерального агентства по техническому регулированию и метрологии от 30 сентября 2013 г. N 1127-ст межгосударственный стандарт ГОСТ 26075-2013 введен в действие в качестве национального стандарта Российской Федерации с 1 января 2015 года

Информация об изменениях к настоящему стандарту публикуется в ежегодно издаваемом информационном указателе "Национальные стандарты", а текст изменений и поправок - в ежемесячно издаваемом информационном указателе "Национальные стандарты". В случае пересмотра (замены) или отмены настоящего стандарта соответствующее уведомление будет опубликовано в ежемесячно издаваемом информационном указателе "Национальные стандарты". Соответствующая информация, уведомление и тексты размещаются также в информационной системе общего пользования - на официальном сайте Федерального агентства по техническому регулированию и метрологии в сети Интернет

ВНЕСЕНА поправка, опубликованная в ИУС N 12, 2021 год

Поправка внесена изготовителем базы данных

1 Область применения

Настоящий стандарт распространяется на все виды млекопитающих животных и устанавливает следующие методы лабораторной диагностики бешенства:

- метод флуоресцирующих антител (МФА);

- метод выделения вируса бешенства в культуре клеток мышиной нейробластомы CCL-131 (или невриномы Гассерова узла крысы - НГУК-1);

- биопроба на белых мышах;

- метод иммуноферментного анализа (ИФА);

- реакция диффузионной преципитации (РДП).

1 Данные методы применимы ко всем представителям рода Lyssavirus.

2 Уличный вирус бешенства относится к микроорганизмам 2 класса патогенности (представляет смертельную опасность для человека и животных).

3 При необходимости генотипирования вируса бешенства с помощью готовых тест-систем применяют метод обратно транскриптазной полимеразной цепной реакции (от-ПЦР).

2 Нормативные ссылки

В настоящем стандарте использованы нормативные ссылки на следующие стандарты:

ГОСТ ИСО/МЭК 17025-2009 Общие требования к компетентности испытательных и калибровочных лабораторий

ГОСТ 12.0.004-90 Система стандартов безопасности труда. Организация обучения безопасности труда. Общие положения

ГОСТ 12.1.005-88 Система стандартов безопасности труда. Общие санитарно-гигиенические требования к воздуху рабочей зоны

ГОСТ 12.4.011-89 Система стандартов безопасности труда. Средства защиты работающих. Общие требования и классификация

ГОСТ 17.0.0.01-76 Система стандартов в области охраны природы и улучшения использования природных ресурсов. Основные положения

ГОСТ 177-88 Водорода перекись. Технические условия

ГОСТ 2603-79 Реактивы. Ацетон. Технические условия

ГОСТ 4204-77 Реактивы. Кислота серная. Технические условия

ГОСТ 6709-72 Вода дистиллированная. Технические условия.

ГОСТ 8074-82 Микроскопы инструментальные. Типы, основные параметры и размеры. Технические требования.

ГОСТ 9147-80 Посуда и оборудование лабораторные фарфоровые. Технические условия

ГОСТ 9284-75 Стекла предметные для микропрепаратов. Технические условия

ГОСТ 12026-76 Бумага фильтровальная лабораторная. Технические условия

ГОСТ 13739-78 Масло иммерсионное для микроскопии. Технические требования. Методы испытаний

ГОСТ 16317-87 Приборы холодильные электрические бытовые. Общие технические условия

ГОСТ 21241-89 Пинцеты медицинские. Общие технические условия.

ГОСТ 22967-90 Шприцы медицинские инъекционные многократного применения. Общие технические требования и методы испытаний

ГОСТ 24861-91 (ИСО 7886-84) Шприцы инъекционные однократного применения

ГОСТ 25046-81 (ИСО 7864-81) Иглы инъекционные однократного применения. Основные размеры. Технические требования. Методы испытаний

ГОСТ 25336-82 Посуда и оборудование лабораторные стеклянные. Типы, основные параметры и размеры

ГОСТ 29230-91 (ИСО 835-4-81) Посуда лабораторная стеклянная. Пипетки градуированные. Часть 4. Пипетки выдувные

Примечание - При пользовании настоящим стандартом целесообразно проверить действие ссылочных стандартов в информационной системе общего пользования - на официальном сайте Федерального агентства по техническому регулированию и метрологии в сети Интернет или по ежегодному информационному указателю "Национальные стандарты", который опубликован по состоянию на 1 января текущего года, и по выпускам ежемесячного информационного указателя "Национальные стандарты" за текущий год. Если ссылочный стандарт заменен (изменен), то при пользовании настоящим стандартом следует руководствоваться заменяющим (измененным) стандартом. Если ссылочный стандарт отменен без замены, то положение, в котором дана ссылка на него, применяется в части, не затрагивающей эту ссылку.

3 Термины, определения и сокращения

3.1 В настоящем стандарте применены следующие термины с соответствующими определениями:

3.1.1 бешенство: Инфекционное заболевание человека и животных, вызываемое представителями семейства Rhabdoviridae рода Lyssavirus (рабдовирус), и приводящее к летальному исходу в 100% случаев.

3.1.2 вирус бешенства: Возбудитель инфекционного заболевания человека и животных.

3.1.3 антиген вируса бешенства: Поверхностные белковые структуры вируса бешенства, на которые вырабатываются антитела.

3.1.2* метод флуоресцирующих антител (МФА): Метод выявления антигена вируса бешенства меченными флуоресцеинизотиоцианатом антирабическими антителами, с образованием характерных светящихся комплексов-включений, обнаруживаемых в поле зрения люминесцентного микроскопа.

* Нумерация соответствует оригиналу. - Примечание изготовителя базы данных.

3.1.3 метод выделения вируса бешенства в культуре клеток мышиной нейробластомы CCL-131 (или невриномы Гассерова узла крысы - НГУК-1): Метод выделения антигена вируса бешенства, основанный на размножении вируса в культуре клеток и его идентификации методом флуоресцирующих антител.

3.1.3* биопроба: Метод выделения вируса бешенства на белых мышах путем введения им суспензии патологического материала с последующей идентификацией вируса методом флуоресцирующих антител.

* Нумерация соответствует оригиналу. - Примечание изготовителя базы данных.

3.1.4 метод иммуноферментного анализа (ИФА): Метод выявления антигена вируса бешенства, основанный на его специфическом взаимодействии с антирабическим антителом, иммобилизованном на твердом носителе, с последующим выявлением связавшегося антигена с помощью второго меченного ферментом антитела путем окрашивания продукта реакции хромогеном.

3.1.5 реакция диффузионной преципитации (РДП): Метод выявления вируса бешенства, основанный на способности антител и вирусного антигена бешенства диффундировать в агаровом геле и при специфическом взаимодействии образовывать комплекс "антиген-антитело", наблюдаемый невооруженным глазом в виде линии преципитации.

3.1.6 метод обратно транскриптазной полимеразной цепной реакции (от-ПЦР): Метод выявления генома вируса бешенства путем перевода специфической последовательности РНК вируса в ДНК с последующим многократным копированием полученной ДНК и обнаружением продуктов реакции, осуществляемый in vitro.

Читайте также: