Когда делается анализ иммуноблот на сифилис

Обновлено: 24.04.2024

Что это за анализ? Это выявление суммарных антител класса M и G к возбудителю сифилиса, которое может использоваться как эффективный сверхчувствительный скрининговый тест для диагностики раннего инфицирования сифилисом.

Какой биоматериал можно использовать для исследования? Венозную кровь

Treponema pallidum (бледная трепонема) – бактерии, которая вызывает сифилис – хроническое венерическое инфекционное заболевание, которое чаще всего передается половым путем, например при прямом контакте с сифилитической язвой (твердым шанкром), также возможно внутриутробное заражение.

Источником инфекции является больной человек. Сифилис легкоизлечим, но грозит серьезными проблемами со здоровьем при бездействии. Инфицированная мать способна передавать заболевание своему плоду, у которого могут развиться серьёзные и необратимые изменения.

Сифилис относят к классическим заболеваниям, передающимся половым путем (венерическим болезням). Возбудитель – бледная трепонема (Treponema pallidum). Сифилис характеризуется медленным прогрессирующим течением. На поздних стадиях он может приводить к тяжелым поражениям нервной системы и внутренних органов

Симптомы сифилиса

Симптомы сифилиса очень разнообразны. Они меняются в зависимости от стадии заболевания. Выделяют три стадии сифилиса:

Первичный сифилис возникает после окончания инкубационного периода. В месте проникновения возбудителя в организм (половые органы, слизистая рта или прямой кишки) возникает безболезненная язва с плотным основанием (твердый шанкр). Через 1-2 нед после возникновения язвы увеличиваются ближайшие лимфатические узлы (при локализации язвы во рту увеличиваются подчелюстные, при поражении половых органов – паховые). Язва (твердый шанкр) самостоятельно заживает в течение 3-6 нед. после возникновения.

Вторичный сифилис начинается через 4-10 нед после появления язвы (2-4 мес. после заражения). Он характеризуется симметричной бледной сыпью по всему телу, включая ладони и подошвы. Возникновение сыпи нередко сопровождается головной болью, недомоганием, повышением температуры тела (как при гриппе). Увеличиваются лимфатические узлы по всему телу. Вторичный сифилис протекает в виде чередования обострений и ремиссий (бессимптомных периодов). При этом возможно выпадение волос на голове, а также появление разрастаний телесного цвета на половых органах и в области заднего прохода (широкие кондиломы).

Третичный сифилис возникает в отсутствие лечения через много лет после заражения. При этом поражается нервная система (включая головной и спинной мозг), кости и внутренние органы (включая сердце, печень и т. д.).

При заражении во время беременности у ребенка возможен врожденный сифилис.

Осложнения сифилиса

По результатам научных исследований, в отсутствие лечения примерно у трети больных развивается третичный сифилис. Примерно четверть больных из-за него погибает. Врожденный сифилис может приводить к тяжелым поражениям или смерти ребенка.

Лечение сифилиса

Достаточно сложное и требует дальнейшего длительного наблюдения. Стоит отметить, что лечение сифилиса на ранних стадиях не представляет особенной сложности с точки зрения выбора препаратов. Особенность бледной трепонемы заключается в том, что она все еще сохраняет чувствительность к пенициллину, который является препаратом выбора при сифилисе.

В случае аллергии на пенициллин назначают антибиотики из ряда макролидов (эритромицин,кларитромицин) или цефалоспоринов (цефтриаксон и тд). Препараты назначаются внутримышечно или в таблетках. Лечение активных форм заболевания проходит в стационарных условиях, пациенты с латентной формой могут получать амбулаторную терапию. Длительность лечения зависит от стадии заболевания и может занимать от нескольких недель до нескольких лет.

Антитела к возбудителю сифилиса

Когда происходит контакт человека с T. pallidum, его иммунная система реагирует, вырабатывая антитела к бактерии. В крови могут быть обнаружены два вида антител к бледной трепонеме: IgM и IgG. В ответ на инфицирование T. pallidum антитела IgM к T. pallidum вырабатываются организмом в первую очередь. Они выявляются у большинства пациентов в конце второй недели заболевания и присутствуют у них в первичную и вторичную стадию. Иммуноглобулины класса G к T. pallidum в определяемых количествах появляются в крови через 3-4 недели после инфицирования. Концентрация их нарастает и на 6-й неделе начинает преобладать над концентрацией IgM, достигая максимума, а затем сохраняется на определённом уровне в течение длительного времени. Начиная с 4-й недели в крови нарастает количество обоих видов иммуноглобулинов, что ведет к положительному результату теста на суммарные антитела к T. Pallidum. Это позволяет использовать данное исследование для ранней диагностики инфицирования T. pallidum. После эффективного лечения концентрация иммуноглобулинов постепенно снижается, но происходит это медленно, в отдельных случаях антитела могут обнаруживаться спустя год и более. От сифилиса можно избавиться с помощью антибиотиков, причём предпочтительно применять производные пенициллина. На ранней стадии заболевание лечится легче и быстрее. Более длительная терапия может понадобиться для пациентов, инфицированных больше года.

Зачем проводится анализ?

Повышение и понижение показателей

Для диагностики сифилиса. Для обследования всех беременных с профилактической целью (желательно на первом приеме гинеколога, при постановке на учет).

Когда назначается исследование? При симптомах сифилиса, таких как твердый шанкр на половых органах или в горле. Когда пациент лечится от другого ЗППП, например от гонореи. При ведении беременности, потому что сифилис может передаться развивающемуся плоду и даже убить его. Когда необходимо определить точную причину заболевания, если у пациента неспецифические симптомы, которые схожи с сифилисом (нейросифилисом). Если пациент инфицирован, он должен повторить анализ на сифилис через 3, 6, 12 и 24 месяца, чтобы убедиться, что лечение прошло успешно.

Результаты/Норма/Расшифровка анализа

Референсные значения (значения в норме)

Результат: отрицательно. Отношение S/CO (signall/cutoff): 0 — 0,9.

Положительный результат означает, что у пациента недавно приобретённое инфицирование. Вместе с тем отрицательный результат не всегда означает, что у пациента нет сифилиса.

Положительный результат

Отрицательный результат

Отрицательный результат анализа может свидетельствовать об отсутствии инфицирования или слишком раннем его сроке, когда не выработался иммунный ответ. При этом отсутствие антител у младенца, родившегося от инфицированной матери, не исключает врождённого заболевания, поскольку на момент исследования антитела могут ещё не сформироваться.

Подготовка к сдаче анализа

Не курить в течение 30 минут до сдачи крови

Что может повлиять на результат анализа?

Могут отмечаться ложноположительные результаты при таких заболеваниях, как ВИЧ, болезнь Лайма, малярия, системная красная волчанка, некоторые виды пневмоний, а также при наркомании и беременности. И многие другие соматические заболевания.

Важные замечания

Обследование на сифилис обязательно должно быть комплексным и включать в себя учёт анамнеза, клинической картины и подтверждение диагноза лабораторными данными.
Людям, ведущим активную сексуальную жизнь, необходимо консультироваться с врачом насчёт любых подозрительных высыпаний или болей в области половых органов.
Если у пациента выявлено инфицирование, ему необходимо поставить в известность и своего сексуального партнера (партнершу), чтобы он (она) тоже прошел обследование и при необходимости лечение.
При сифилисе риск заражения другими заболеваниями, передающимися половым путем, повышается, в том числе риск заражения ВИЧ, который ведёт к СПИДу.

• Сифилис может также передаваться при переливании крови через загрязненные медицинские инструменты, поэтому перед госпитализацией в стационар очень важно проводить обследование.

Сифилис, подтверждающий тест (иммуноблот) IgM — современный метод диагностики сифилиса, самый достоверный высокочувствительный метод идентификации белков.

Сифилис — инфекционное заболевание, вызываемое бледной трепонемой (Treponema pallidum), передающееся в основном половым путем, склонное к хроническому течению и поражающее большинство органов и систем организма. Сифилис характеризуется медленным прогрессирующим течением. На поздних стадиях он может приводить к тяжелым поражениям нервной системы и внутренних органов.

Клиническая картина при сифилисе
Клинические проявления сифилиса очень разнообразны и зависят от стадии заболевания. Выделяют несколько стадий сифилиса. Первичная стадия наступает примерно через 2–3 недели после заражения. На этой стадии проявляются одна или иногда несколько язв, называемых шанкром, как правило, на той части тела, которая контактировала с шанкром больного человека, например пенисом или влагалищем. Во многих случаях твердый шанкр безболезненный и остается незамеченным, особенно если он находится в прямой кишке или на шейке матки. Шанкр исчезает через 4–6 недель.

Вторая стадия заболевания начинается через 2–8 недель после возникновения твердого шанкра. Она характеризуется появлением сыпи, чаще на ладонях и подошвах. Иногда встречаются и другие симптомы, к примеру лихорадка, усталость, опухание лимфатических узлов, боль в горле и ломота в теле.

Сифилис способен протекать в скрытой форме, во время которой у инфицированного человека не проявляется никаких симптомов, но в то же время он продолжает оставаться носителем инфекции. Это может длиться годами.

Без лечения примерно у 15% больных развиваются симптомы позднего, или третичного, сифилиса. Эта стадия иногда длится несколько лет и приводит к психическим заболеваниям, слепоте, неврологическим проблемам, болезням сердца и даже к смерти.

От сифилиса можно избавиться с помощью антибиотиков (предпочтительно применять производные пенициллина). Причем на ранней стадии заболевание лечится легче и быстрее.

При контакте человека с Treponema pallidum, его иммунная система вырабатывает антитела к бактерии. В крови могут быть обнаружены два вида таких антител: IgM и IgG.

Антитела класса IgM при сифилисе
Антитела класса IgM вырабатываются организмом в первую очередь. Они выявляются в сыворотке крови в конце второй недели заболевания и исчезают у нелеченых больных примерно через 1–1,5 года, при лечении раннего сифилиса — через 3–6 мес., позднего — через год. Они присутствуют у большей части пациентов с первичным и вторичным сифилисом, поэтому тест на IgM может быть использован для различения давней инфекции от только приобретенной.

Специфических трепонемных антител IgM нет у лечившихся в прошлом пациентов, но их отсутствие само по себе не говорит об эффективности проведенной терапии, поскольку у большинства из тех, кто не лечился, в скрытой стадии сифилиса IgM-антитела тоже отсутствуют.

Исследование IgM антител к антигенам возбудителя сифилиса Treponema pallidum методом иммуноблота используют в качестве дополнительного специфического трепонемного теста при необходимости углубленного исследования при неубедительных результатах скрининговых и подтверждающих тестов диагностики сифилиса.

Тест основан на методе Вестерн-блота. В ходе исследования выявляют наличие в сыворотке пациента антител класса IgG к электрофоретически разделенным и перенесенным на нитроцеллюлозную мембрану избранным антигенам возбудителя сифилиса Treponema pallidum.

Используемые антигены в методе Вестерн-блота:

47 кДа мембранный белок (TpN47) — специфичный;
45 кДа (TmpA) — специфичный;
22 кДа (Р 22) — неспецифичный;
17 кДа мембранный белок (TpN17) — специфичный;
15 кДа мембранный белок (TpN15) — специфичный.

Подготовка
Кровь рекомендуется сдавать утром, в период с 8 до 12 часов. Взятие крови производится натощак, спустя 4–6 часов голодания. Допускается употребление воды без газа и сахара. Накануне сдачи исследования следует избегать пищевых перегрузок.

Интерпретация результатов
Формат выдачи результата исследования — качественный (описание наличия/отсутствия полос, характеризующих выявление антител к каждому из указанных антигенов; общее заключение о результате исследования в форме: положительный/отрицательный/неопределенный).

Референсные значения: отрицательный.

При общей оценке результата учитывают положение окрашенных полос (специфичность антигена) и интенсивность их окрашивания (поскольку иногда возможна неспецифическая слабая ложная реакция с отдельными антигенами):

Отрицательный результат: отсутствуют полосы специфических антигенов;
Неопределенный результат: одна четкая полоса специфического антигена: р15 кДа, р17 кДа, р45 кДа или р47 кДа;
Положительный результат: более одной четкой полосы специфических антигенов: р15 кДа, р17 кДа, р45 кДа или р47 кДа.

Специфичность исследования 98%, чувствительность 100%. Положительная предсказательная значимость 94%.

Сифилис, подтверждающий тест (иммуноблот) IgG — современный методов диагностики сифилиса, самый достоверный высокочувствительный метод идентификации белков.

Сифилис — инфекционное заболевание, вызываемое бледной трепонемой (Treponema pallidum), передающееся в основном половым путем, склонное к хроническому течению и поражающее большинство органов и систем организма. Сифилис характеризуется медленным прогрессирующим течением. На поздних стадиях он может приводить к тяжёлым поражениям нервной системы и внутренних органов.

Клинические проявления сифилиса
Клинические проявления сифилиса очень разнообразны и зависят от стадии заболевания. Выделяют несколько стадий сифилиса. Первичная стадия наступает примерно через 2–3 недели после заражения. На этой стадии проявляются одна или иногда несколько язв, называемых шанкром, как правило, на той части тела, которая контактировала с шанкром больного человека, например пенисом или влагалищем. Во многих случаях твердый шанкр безболезненный и остается незамеченным, особенно если он находится в прямой кишке или на шейке матки. Шанкр исчезает через 4–6 недель.

Без лечения примерно у 15% больных развиваются симптомы позднего, или третичного, сифилиса. Эта стадия иногда длится несколько лет, и приводит к психическим заболеваниям, слепоте, неврологическим проблемам, болезням сердца и даже к смерти.

Антитела класса IgG при сифилисе
Антитела класса IgG появляются в крови через 3–4 недели после инфицирования. Концентрация их нарастает и достигает максимума на 6-й неделе, в этот момент их концентрация преобладает над концентрацией IgM. Иммуноглобулины класса G на определённом уровне сохраняются длительное время, иногда пожизненно.

Исследование IgG антител к антигенам возбудителя сифилиса Treponema pallidum методом иммуноблота используют в качестве дополнительного специфического трепонемного теста при необходимости углубленного исследования при неубедительных результатах скрининговых и подтверждающих тестов диагностики сифилиса.

Используемые антигены в методе Вестерн-блота:

47 кДа мембранный белок (TpN47) — специфичный;
45 кДа (TmpA) — специфичный;
22 кДа (Р 22) — неспецифичный;
17 кДа мембранный белок (TpN17) — специфичный;
15 кДа мембранный белок (TpN15) — специфичный.

Референсные значения: отрицательный.

Какой наиболее точный анализ на сифилис, и, какие анализы сдают на ранних и поздних стадиях сифилиса, вы узнаете в данной статье.

Сифилис - это довольно опасное венерическое заболевание, которое передается половым путем и контактно-бытовым путем.

Анализы, которые сдают на сифилис можно отнести к нескольким категориям.

I. Специфичные анализы, основанные на определении бледных трепонем;
II. Неспецифичные тесты на сифилис;
III. Скрининговые исследования.

Проблема в том, что большинство анализов на сифилис неспецифичны.

Это значит, что данные анализы могут показывать положительный результат, при отсутствии заболевания.

Подобные анализы основываются на определении различных элементов в крови пациента.

Наиболее распространенный скрининговый анализ на сифилис, это реакция Вассермана.

Сокращенно реакция Вассермана называется RW.

Реакция Вассермана использовалась повсеместно, для определения положительного результата на сифилис.

На сегодняшний день этот метод считается устаревшим.

Современный замена анализу RW это - RPR-тестирование.

Тест выявляет антитела к кардиолипину, который входит в состав трепонемы.

Так же кардиолипин образуется при разрушении клеток организма человека бледной трепонемой.

Внедрившись в организм возбудитель сифилиса начинает активно размножаясь разрушать клетки хозяина.

В результате в кровь выделяются фосфолипиды, это составные части клеточной стенки.

Одним из них является кардиолипин.

К этим соединениям и вырабатываются антитела, которые и обнаруживает реакция RPR.

Обнаружение сифилиса данным анализом доступно только после начала, массированного разрушения клеток и выработки антител иммунной системой.

Как правило это происходит не ранее чем через 1,5-2 месяца от момента заражения сифилисом.

Поэтому этот анализ не подходит для диагностики первичного сифилиса или свежего вторичного периода заболевания.

Однако, данная реакция может выполняться в количественном выражении (титрах).

Для этого при положительном результате сыворотку крови пациента разводят водой (физиологическим раствором).

Сначала добавляют к 1 части сыворотки 2 части воды, затем 4, 8 и т. д.

Это делают до тех пор, пока реакция РПР не станет отрицательной.

Этот результат чрезвычайно важен для диагностики после лечения сифилиса.

Когда титры положительной реакции должны постепенно снижаться.

Несомненным минусом данной реакции является так же, и обязательная оценка результата человеком.

Это вносит субъективный фактор в оценку результата анализа.

Именно поэтому для контроля сифилиса рекомендуют сдавать анализы в одной и той же клинике.

RPR тест, как и реакция Вассермана, может давать ложноположительные результаты.

Чаще всего ложные реакции на сифилис проявляются при наличии системных заболеваний, сахарного диабета или у женщин при беременности.

Так же ложно положительные реакции на сифилис могут быть при любых массивных разрушениях клеточных стенок организма.

Это может быть при травмах, операциях, аутоиммунных заболеваниях (красная волчанка, склеродермия).

Читайте также: