Количественный или качественный анализ на инфекции

Обновлено: 28.03.2024

Представляет собой метод, используемый для экспоненциальной амплификации определенной последовательности ДНК-мишени.

Позволяющей изолировать, секвенировать или клонировать одну РНК среди многих.

ПЦР была разработана более 30 лет назад, американским биохимиком Кэри Муллисом.

различные типы ПЦР

Полимеразная реакция имеет широкое использование, применяется не только как анализ на ИППП.

Применение ПЦР практикуется в следующих направлениях: генотипирование:

  • клонирование
  • обнаружение мутаций
  • секвенирование
  • криминалистика
  • тестирование на отцовство

Как правило, ПЦР представляет собой трехступенчатую реакцию.

Образец, содержащий разбавленную концентрацию матричной ДНК, смешивают с термостабильной ДНК-полимеразой.

Такой как Taq-полимераза, праймер, дезоксинуклеотидтрифосфаты (dNTP) и магний.

На первой стадии ПЦР образец нагревают до 95-98 градусов.

На втором этапе температуру снижают до приблизительно 55-65 градусов.

На третьей стадии температуру обычно повышают до 72 градусов.

Эта последовательность денатурации, отжига, и расширения повторяется для множества циклов.

Что и приводит к экспоненциальному усилению матричной ДНК.

ПЦР достаточно сложный, но информативный метод исследования.

Зачастую применяется в диагностике патологий вирусной и инфекционной этиологии.

Анализ позволят практически со 100% точностью выявить и определить разновидность патогенного микроорганизма.

В последнее время, полимеразная реакция приобрела популярность в ранней диагностике туберкулеза.

Позволяет выявить возбудителя с 98% точностью на доклинической стадии.

микобактерии туберкулеза

Преимущества диагностики туберкулеза при помощи ПЦР:

  • Максимально высокая точность обнаружения присутствия в организме Mycobacterium tuberculosis, за счет использования специального фермента, предназначенного для возбудителя туберкулеза.
  • Высокая чувствительность анализа, как следствие, исследование способно обнаружить присутствие даже одной бактерии.
  • Быстрота получения результатов диагностики. Тестирование проводится достаточно быстро, уже спустя 3-5 часов можно получить готовые результаты.

Mycobacterium tuberculosis является внутриклеточным микобактериальным патогеном.

Представляет собой одно из самых распространенных и наиболее серьезных инфекционных заболеваний в мире.

Считается, что более 2 миллиардов людей имеют скрытую инфекцию M. Tuberculosis.

Около 8 миллионов — активную форму туберкулеза.

Кроме того, пациенты с ВИЧ и нарушением работы иммунитета на фоне заболевания чаще подвержены дополнительному инфицированию бактерией M. tuberculosis.

В их случае патология протекает сложнее, с многочисленными осложнениями.

ПЦР при подозрении на туберкулез является наиболее востребованным и точным анализом.

Способен выявить заболевание на самых ранних сроках, а также прибегнуть к своевременному, эффективному лечению.

Качественный ПЦР на гепатит С

В большинстве случаев, качественный ПЦР назначается при выявлении в организме пациента антител к гепатиту С.

возбудитель вирусного гепатита

Полимеразная реакция при подозрении на гепатит С проводится по следующему принципу.

Первое тестирование — на четвертую неделю после обнаружения антител.

Второе — на двенадцатую неделю, третье — на двадцать четвертую.

Далее анализ назначается на постоянной основе, один раз каждые 12 месяцев.

Проведение полимеразной реакции на гепатит Б, А, Ц позволяет получить максимально точные результаты за счет высокой чувствительности теста от 10 до 500 МЕ/мл.

Это дает возможность определять наиболее низкие показатели присутствия в организме вируса и контролировать его дальнейшее развитие.

Расшифровка результатов проводится лечащим врачом.

Положительный анализ говорить о наличии патогенного микроорганизма.

Отрицательный — чаще об отсутствии, но на 100% не исключает НСV.

Взятие анализа на проведение ПЦР НСV проводится в утреннее время, биологическим материалом является венозная кровь.

ПЦР количественный на гепатит С

Задача анализа выявить вирусную нагрузку на организм.

Определить количественное присутствие патогена, а также понять, насколько проводимая терапия эффективна.

Расшифровать результаты диагностического исследования поможет лечащей врач-гепатолог.


Типы ПЦР анализов
рассказывает подполковник
медицинской службы, врач
Ленкин Сергей Геннадьевич

Содержание данной статьи проверено и подтверждено на соответствие медицинским
стандартам врачем дерматовенерологом, урологом, к.м.н.

Ленкиным Сергеем Геннадьевичем

Наименование Срок Цена
Прием венеролога 900.00 руб.
ДНК Mycoplasma hominis 1 д. 300.00 руб.
ДНК Neisseria gonorrhoeae 1 д. 300.00 руб.
ДНК Trichomonas vaginalis 1 д. 300.00 руб.

ПЦР качественный или количественный: что лучше, в чем отличие

Полимеразная реакция основана на обнаружении РНК возбудителя, проводится в двух вариантах — количественный и качественный метод.

Real time PCR

В чем отличие проводимых способов диагностики?

Качественное исследование направлено на обнаружение патогенной микрофлоры в организме человека.

Результаты анализов будут содержать два варианта ответа: положительный, отрицательный.

В положительном случае — инфекция присутствует, в отрицательном — в организме ее нет.

ПЦР количественного типа определяет вирусную нагрузку на организм и количество патогенного микроорганизма на 1 мл крови.

Как правило, количественный ПЦР назначается пациентам, имеющим какое-либо заболевание.

Как мониторинг течения патологии или для определения эффективности терапии.

Разновидности ПЦР

Основные используемые методики и разновидности полимеразной реакции:

Разновидность полимеразной реакции

Описание метода

Вложенная ПЦР представляет собой модификацию ПЦР, которая была разработана для повышения чувствительности и специфичности. Вложенная ПЦР включает использование двух наборов праймеров и двух последовательных реакций ПЦР. Вложенная ПЦР полезна для амплификации генов, присутствующих в малом количестве.

Применяется в случае, когда имеется информация только о небольшом участке внутри необходимой последовательности. Обычная полимеразная реакция требует, чтобы ДНК-последовательности на обоих концах области, подлежащей амплификации, были известны. Инверсная ПЦР (IPCR) и фиксированная данного условия не требует. IPCR усиливает фланкирующие неизвестные последовательности ДНК, используя обратную амплификацию и универсальный праймер.

RT-PCR — это технология, посредством которой молекулы РНК превращаются в их комплементарные последовательности ДНК с помощью обратных транскриптаз, с последующей амплификацией, вновь синтезированной ДНК стандартными процедурами ПЦР. Обратная транскрипция ПЦР (RT-PCR) использует мРНК, а не ДНК в качестве исходного шаблона. Обычно используется для тестирования генетических заболеваний и для характеристики экспрессии генов в различных типах клеток.

Суть метода заключается в использование праймеров с различной концентрацией. Анализ проводится с отжигом на высоких температурах, что позволяет поддерживать эффективность реакции на всех этапах лабораторного тестирования.

(второе название метода:

анализ в реальном времени)

Система ПЦР в реальном времени основана на обнаружении и количественном определении продукта полимеразной реакции (патогена). Метод предусматривает использование ДНК-зондов или флуоресцентный праймер.

Это метод повышения специфичности ПЦР-реакций. При проведении анализа ПЦР использует программу циклирования, где температура отжига постепенно уменьшается. Вначале температура достигает свыше 75 градусов. Затем температуру отжига постепенно уменьшают до тех пор, пока она не достигнет расчетной температуры отжига праймеров или нескольких градусов ниже. Амплификацию затем продолжают с использованием уже достигнутой, оптимальной температуры.

Метод предполагает использование более одной пары праймеров. Цель мультиплексной ПЦР состоит в том, чтобы одновременно амплифицировать несколько сегментов ДНК-мишени, и тем самым, сохранять матричную ДНК, сэкономить время и минимизировать затраты на тестирование. Часто используется для генетического скрининга, где необходимо амплифицировать несколько продуктов за одну реакцию.

Real - time PCR

Real - time PCR (qRT-PCR) или количественная полимеразная реакция.

Это современный метод исследования, направленный на измерение количества ДНК определенного микроорганизма.

В ходе исследования проводится измерение количества уже амплифицированной ДНК в режиме real-time после каждого процесса (цикла) амплификации.

Есть основное преимущество qRT-PCR (rt- pcr) по отношению к другим методикам полимеразной реакции.

проведение ПЦР-диагностики

Real-time PCR позволяет определить начальное количество копий матричной ДНК с максимальной точностью и высокой чувствительностью.

Кроме того, данные qPCR в режиме реального времени могут быть оценены без гель-электрофореза.

Это приводит к сокращению времени работы сканера и увеличению пропускной способности.

Выполняется тестирование в единой, закрытой трубчатой системе qPCR.

Поэтому возможность проникновения постороннего ДНК сведена к нулю.

RAPD-ПЦР: в каких случаях используется

Метод RAPD-ПЦР используется при необходимости идентифицировать конкретный патоген, среди изолятов близкородственных штаммов.

Для проведения исследования требуется тщательная очистка диагностируемого ДНК.

В других методиках ПЦР, которые были упомянуты ранее, предполагается использование нескольких праймеров.

При RAPD- исследовании проводится отжиг только одного, комплементарного, со случайным участком ДНК диагностируемой бактерии.

В ходе анализа подбираются оптимальные условия (отжиг, праймер, температура).

Это позволяет добиться хороших результатов для определения конкретного патогена среди схожих.

ПЦР с обратной транскрипцией

Основные используемые методики полимеразной реакции–вложенная, инвертированная, асимметричная, ступенчатая, виртуальная.

Существует еще один метод диагностики патогенов–RT-PCR.

Для амплификации РНК-мишеней была разработана ПЦР-диагностика с обратной транскрипцией.

Чаще всего исследование применяется с целью выявления патогенной флоры, провоцирующей ВИЧ, грипп и ВПЧ.

Способ влечет за собой начальную стадию транскрибирования части генома РНК в комплементарную ДНК.

Которая затем амплифицируется с помощью ПЦР.

лаборант с ПЦР-амплификатором

Процесс RT-PCR:

  • После того, как РНК выделяется из клеточного материала путем экстракции, к реакционной смеси добавляют специальное вещество, которое содержит фермент обратной транскриптазы, а также праймеры, специфичные для интересующей мишени, и нуклеотиды. Если мишень присутствует, происходит обжигание цепи РНК при помощи праймеров.
  • Фермент обратной транскриптазы синтезирует комплементарную нить ДНК, простирающуюся от праймера.
  • Температуру повышают до 95 градусов и цепи РНК / ДНК отделяются.
  • Затем происходит снижение температуры, что позволяет праймерам отжигать вновь образованную ДНК.

RT-PCR может выполняться как одно- или двухступенчатая процедура.

ПЦР на герпес 6 типа

Вирус герпеса 6 типа относится к роду герпесвирусов, состоит из двух подтипов — HHV6А и 6В.

вирус герпеса

Первый подтип поражает ткани нервной системы.

Нередко является провоцирующим фактором в развитии рассеянного склероза.

Второй часто проявляется сыпью и признаками краснухи.

Для выявления вирусной патологии герпеса 6 типа применяется ПЦР в реальном времени.

В некоторых случаях врач может рекомендовать диагностику герпеса 1 и 2 типа — наиболее распространенных и 16, 18 типа — провоцирующих злокачественные процессы.

Интерпретация анализа, как правило, следующая: положительный или отрицательный результат.

Метод полимеразной цепной реакции (ПЦР) сегодня является одним из самых эффективных диагностических методов.

Он дает наиболее точные и достоверные результаты.

Материалом исследования служат:

С помощью ПЦР осуществляется диагностика даже скрытые инфекции, в частности, передающиеся половым путем.

Количественный анализ ПЦР

Суть такого анализа заключается в обнаружении в исследуемом материале генома возбудителя путем многократного синтеза молекул его ДНК.

С помощью ПЦР можно диагностировать бактериальные, вирусные, протозойные и грибковые инфекции.

Максимальная погрешность при таком исследовании не превышает 5%.

Кроме того, его результаты можно получить уже в день сдачи анализов.

Существуют две разновидности анализа методом ПЦР:

Качественный метод выполняется с целью обнаружения в биоматериале возбудителя болезни.

качественный ПЦР

Количественный анализ ПЦР

Полимеразная цепная реакция - метод лабораторной диагностики.

ПЦР тест широко применим в медицине.

Это связано с его высокой точностью.

В основе методики определение ДНК микроорганизмов.

Проводят ПЦР диагностику, как правило, в условиях лаборатории.

Когда необходим количественный анализ ПЦР мазков и крови

Этот метод применяют в урологии, гинекологии, венерологии.

Чаще всего он необходим для постановки диагноза.

При помощи ПЦР тестировании можно обнаружить такие заболевания как:

  • Гонорея
  • Сифилис
  • Уреаплазмоз
  • Хламидиоз
  • Трихомониаз
  • Вирус папилломы человека.

Данный метод используют и при заготовке донорской крови.

Он позволяет избежать риска переливания инфицированной крови.

Количественный ПЦР является незаменимым методом лабораторной диагностики вирусного гепатита С.

С его помощью определяют содержание в крови больного РНК вируса, выражая его в МЕ (международных единицах) или копий на 1 мл.

В тех случаях, когда гепатит С уже диагностирован, количественный анализ ПЦР выполняют по следующей схеме:

Нужно ли каким-то образом готовиться к количественному ПЦР анализу?

Нет, специальная подготовка в этом случае не нужна.

Единственным условием является воздержание от курения за 30 минут до сдачи крови.

ПЦР количественный: гепатит С

Гепатит С – инфекционное заболевание, поражающее преимущественно печень.

Инфекция проникает через кровь.

Для того чтобы выявить возбудителя этой болезни применяют количественный ПЦР тест.

Он определяет концентрацию возбудителя в крови больного.

Чтобы определить степень заболевания, делают РНК гепатит С количественно.

Чаще всего ПЦР гепатита С делают после того, как обнаружили соответствующие антитела.

После этого тест делают на 4, 12, 24 неделю и далее через год.

Результаты количественного анализа ПЦР при диагностике гепатита С

Сдать правильно материал для анализа ПЦР это важно.

Тем не менее, нужно уметь правильно расшифровать полученные результаты.

Как интерпретируют результаты количественного анализа ПЦР при диагностике гепатита С и определении эффективности его лечения?

Стоит отметить, что вирус гепатита С обладает чрезвычайной разнородностью, устойчивостью во внешней среде.

При его низкой концентрации в крови передача его вертикальным путем или через половой контакт маловероятна.

Инфицирование и заболевание в таких случаях чаще происходит у людей с ослабленным иммунитетом.

Или сопутствующими инфекционными заболеваниями мочеполовых путей (ВИЧ, половые инфекции).

Bенеролога, пройти количественный анализ ПЦР

Помните! Расшифровать полученные данные должен только врач.

Возможно получение ложного результата.

Это зависит от того как материал транспортировался, рабочее место где делался забор крови для исследования, нарушение технологии выполнения анализа.

Поэтому следует уделить максимум внимания при выборе лаборатории.

Мазок ПЦР количественный на хламидии

Перед тем как сдать анализ ПЦР на эту инфекцию следует знать, как правильно подготовится к анализу.

Внимание! У женщин не берут материал во время менструального цикла.

Мазок следует сдавать только при соблюдении определенных правил:

  • Не использовать вагинальные свечи перед исследованием
  • Отказаться на время анализа от половых контактов
  • За две недели до исследований отметить антибиотики

Мазок у женщин берут из влагалища.

Мужчинам делают соскоб с мочеиспускательного канала.

Забор материала осуществляется специальным стерильным зондом, после чего помещается в стерильную пробирку.

Полученный результат может быть:

  • Отрицательный - инфекция в биоматериале отсутствует;
  • Положительный – в мазке присутствуют хламидии.

Количественный ПЦР анализ: ВПЧ 21 тип

С помощью такого метода можно сразу определить тип вируса.

Данный вид ВПЧ относится к распространенным.

ВПЧ существует более 100 видов.

Большая часть из них поражает кожные покровы, остальные слизистые оболочки.

Выделяют виды, которые способны вызывать онкологические заболевания, такие как рак шейки матки.

Для анализа делают забор клеток эпителия с шейки матки.

Результаты могут быть следующими:

  • Риск не обнаружен 0–3 Lg (HPV/105)
  • Возможность появления дисплазии 3–5 Lg (HPV/105)
  • Большая вероятность дисплазии 5 и выше Lg (HPV/105)

ПЦР ДНК: обнаружено

Результат ПЦР анализа положительный – в биологическом материале пациента были обнаружены фрагменты ДНК микроорганизма.

Если вы получили такой результат, как можно скорее начните лечение.

Бывают случаи, что результат получается положительным, но при этом человек себя нормально чувствует, и признаков болезни нет.

Это может означать, что заболевание находится на начальной стадии.

В таком случае следует обратиться к врачу и приступить к лечению.

Внимание! Результат анализа не является диагнозом. Схему лечения должен назначать врач.

При необходимости, специалист назначит пройти повторные исследования,

К какому врачу обращаться для сдачи количественного анализа ПЦР

Для того что бы сделать количественный ПЦР анализ, необходимо обратится в клинику.

Современное лабораторное оборудование обеспечивает точность ПЦР анализа.

Сдать мазок можно при посещении врача венеролога.

Врач проведет осмотр и возьмет материал на исследование.

После получения результата специалист поможет вам расшифровать результат и назначит необходимый курс лечения.

Получить исчерпывающую консультацию опытного венеролога, пройти количественный анализ ПЦР, а также курс эффективной терапии вы сможете, обратившись в наш платный КВД.

пройти количественный анализ ПЦР у венеролога в Москве

Помните, что качественная и своевременная диагностика – залог успешности лечения и ваш шанс на выздоровление.

Современная лабораторная диагностика располагает достаточным количеством способов обнаружения возбудителей половых инфекций в организме человека. Одним из самых высокоточных и эффективных из них является анализ мазка методом ПЦР.


О том как проходит количественный
анализ ПЦР рассказывает
подполковник медицинской службы,
врач Ленкин Сергей Геннадьевич

Содержание данной статьи проверено и подтверждено на соответствие медицинским
стандартам врачем дерматовенерологом, урологом, к.м.н.

Ленкиным Сергеем Геннадьевичем

Наименование Срок Цена
ДНК Ureaplasma species, количественно 3 д. 550.00 руб.

При необходимости любого количественного ПЦР анализа, в том числе на гепатит С, обращайтесь к автору этой статьи – венерологу, урологу в Москве с 15 летним опытом работы.

  • кровь
  • моча
  • сок простаты
  • семенная жидкость
  • качественный и количественный
  • Перед началом его медикаментозного лечения
  • Через 1 неделю после начала терапии
  • На 4-й неделе лечения
  • На 12-й неделе – на этом сроке количественное определение ПЦР позволяет оценить эффективность проводимой терапии заболевания
  • На 24-й неделе терапии – заключительное обследование с целью подтверждения выздоровления

ПЦР анализ на гепатит С

  • Уровень виремии, или вирусной нагрузки (концентрации вируса в крови) 800 000 МЕ/мл считается высоким.

Получение таких результатов означает острую фазу заболевания или реактивацию вируса.

  • Показатель 400 000 МЕ/мл говорит о низком содержании вируса.

Это может наблюдаться при высокой степени резистентности организма.

Вследствие которой размножение и активность вируса подавляются. Или при выздоровлении, благодаря эффективной терапии.

содержание вируса гепатита С в крови

Это означает, что концентрация вируса в крови ничтожно мала.

Но, все же вирус в организме присутствует, что подтверждает качественный ПЦР.

ПЦР-исследования уже долгое время входят в спектр лабораторно-диагностических исследований различных заболеваний.

За несколько десятилетий развития и совершенствования, методика стала для дерматовенерологической службы незаменимой.

В данной статье вы узнаете

Что представляют из себя ПЦР исследования и их результаты.

Полимеразная цепная реакция - это метод диагностики, позволяющий идентифицировать возбудителя того или иного заболевания.

Искомым фактором служат уникальные последовательности генетического материала, которые присутствуют в микробной клетке только одного вида или штамма патогенных микроорганизмов.

Чаще всего целью исследования является ДНК бактерии или вируса, но метод ПЦР предоставляет результаты и по РНК микроорганизмов.

Результаты ПЦР анализов.

Для чего используются различные биологические материалы:

  • слюна
  • биоптат ткани
  • моча
  • спинномозговая жидкость
  • кровь
  • соскобы со слизистых оболочек

Результаты ПЦР диагностики представляют собой

данные о наличии или отсутствии заболевания это – наиболее простая, доступная информация.

Есть такие методики ПЦР, результаты анализов которых кроме установления самого факта инфицирования, позволяют оценить активность инфекции, динамику болезни и отклик на проводимое лечение.

Главное преимущество методики – высочайшая чувствительность и специфичность.

Такие анализы быстро проводятся и очень точны.

Представляя достоверные данные, позволяют начать лечение как можно раньше.

своевременное лечение ЗППП

ПЦР исследование состоит из трех этапов:

  • Подготовка образца после взятия материала.
  • Собственно полимеразная реакция, которая состоит в многократном копировании фрагментов материала.
  • Интерпретация результатов.

Результаты анализов ПЦР положительны, если предполагаемый возбудитель обнаружен.

Если же нет - результат отрицательный.

Как таковой, утвержденной формы бланка результатов анализов нет.

Это связано с тем, что исследование и фиксацию данных проводит компьютер.

Соответственно, графы и данные в бланк вносятся так, как предусматривает программное обеспечение, под управлением которого работает аппарат.

Поэтому расшифровка результатов анализов требует от врача особой подготовки и опыта.

В случае, когда проводится полимеразно-цепная реакция в реальном времени, в бланке результатов анализов еще отдельно указывается количество выявленных копий генетического материала искомого микроорганизма.

Разумеется, если таковые будут выявлены в принципе.

Положительный результат

Все возбудители венерических заболеваний и гемотрансмиссивных инфекций (гепатиты, ВИЧ), попав в организм человека начинают размножаться, но при этом никак себя не проявляют.

Здесь имеет место так называемый инкубационный период или торпидное, скрытое течение инфекции.

В подобных случаях ПЦР все равно находит в диагностическом материале генетические маркеры возбудителей уже через несколько дней от момента заражения.

Для того, чтоб анализ стал положительным, достаточно одной молекулы ДНК или РНК патогенного микроорганизма в собранном диагностическом материале.

Для многих ранних аппаратов существует технологический порог чувствительности в 40 микробных тел.

Но, как правило, если человек действительно заражен той или иной венерической болезнью или ЗППП, то у него возбудителей в пробах бывает больше этого числа и анализ будет положительный.

Отрицательный результат

По большому счету, такой вариант возможен в двух случаях: человек не заражен или неправильно собран диагностический материал.

Конечно, нельзя исключать, что концентрация возбудителей в исследуемой пробе может оказаться ниже, чем порог чувствительности аппарата.

Но такая ситуация встречается крайне редко, и если у доктора есть сомнения, то анализ всегда можно повторить спустя некоторое время.

Если результаты диагностики ПЦР останутся отрицательными, то человек здоров.

В противном случае, при получении вторых анализов положительными, это значит, что пациент заражен и необходимо начинать его лечение.

Расшифровывать результаты ПЦР анализа должен лечащий врач

Расшифровывать результаты ПЦР анализа должен лечащий врач , которому известен ход лечения.

Идеально, чтоб это был тот же специалист, который проводит сбор диагностического материала для проведения исследования, может наблюдать пациента и отслеживать все изменения в здоровье человека.

К сожалению, клиническое течение современных венерических заболеваний и инфекций сильно отличается от классического.

В таких случаях даже результаты анализов ПЦР необходимо подкреплять данными других исследований:

  • микроскопия мазка отделяемого половых органов, из уретры
  • серологические реакции крови на антитела к определенным возбудителям (ИФА, РПГА и другие)
  • культуральный посев

Ситуации, когда данные разных методик противоречат друг другу, встречаются, к счастью, не часто. Например – ПЦР положительно, а ИФА положительно.

Такое бывает в конце лечения пациента, когда патогенные микроорганизмы уже уничтожены и в организме человека их нет.

Но антитела (иммуноглобулины) к антигенам возбудителей инфекции еще циркулируют в крови несколько недель или даже месяцев, лет.

При клиническом выздоровлении, такое несоответствие трактуется в пользу ПЦР, так как его результаты более точные, чем исследования на основании антител.

Культуральный посев считается наиболее чувствительным, но для получения его результатов приходится ждать несколько дней или даже недель.

Поэтому бактериологическое исследование проводится только тогда, когда ПЦР не может предоставить гарантированного точного ответа.

Расшифровывать результаты ПЦР анализа

Важно уметь сопоставлять полученные данные анализов и клинические особенности протекания инфекции.

Так, в некоторых случаях результат ПЦР положителен, хотя возбудитель успешно элиминируется иммунной системой.

Так как пациент только что завершил лечение в его организме еще сохраняются погибшие патогенные микроорганизмы.

Их геном будет обнаружен, но все равно тогда положительный результат не означает наличие заболевания.

Ложноотрицательный результат ПЦР анализа возможен:

  • при неправильном подходе к пациенту
  • взятии материала не из нужной биологической среды

Очень большое значение имеет тщательное выяснение всех деталей и нюансов заболевания.

Особое внимание необходимо уделять тому, что и как применял человек от момента появления первых симптомов до обращения за квалифицированной медицинской помощью.

Например – антибиотики, которые можно купить в любой аптеке.

Самолечение часто приводит к значительному сокращению числа микробов из-за чего может случиться ложноотрицательный результат ПЦР анализа.

То есть роль человека, врача, сводится только к тому, чтоб правильно собрать диагностический материал и затем расшифровать полученные результаты.

Диагностические возможности метода

Этот способ лабораторных исследований очень универсален.

Существует ПЦР диагностика:

инфекций, передаваемых половым путем.

  • инфекций, передаваемых половым путем.
  • Также некоторых возбудителей респираторных заболеваний (коклюш, бронхосептикоз)
  • особо опасных инфекций (ВИЧ), гепатитов
  • возбудителей кишечных инфекций (ротавирусы, сальмонелла, Helicobacter pylori)
  • вирусов гриппа и др

Анализ ПЦР — самый точный анализ на инфекции

Полимеразная цепная реакция (ПЦР) – это современный инструмент диагностики разнообразных инфекций, отличающийся высокой точностью. Анализ ПЦР позволяет определять возбудителей инфекционных заболеваний, опираясь на их генетический материал (РНК или ДНК). Биологическим материалом для исследования может служить кровь, мазок из половых органов, слюна и прочее.

Метод ПЦР был открыт в 1983. Его создатель Кэри Мюллис (США), за это открытие получил Нобелевскую премию в области химии. Уже за первые десять лет методика стала обязательным лабораторным исследованием во всем мире, получив признание ученых и врачей.

Анализ ПЦР в клинике ДИАНА

Медицинский центр Диана предлагает провести исследование по методике полимеразной цепной реакции в кратчайшие сроки и с высочайшим уровнем точности. Наша диагностическая база соответствует всем международным стандартам и требованиям.

Какие инфекции можно диагностировать методом ПЦР

На диагностику отправляют гинеколог, уролог или дерматолог. Анализ ПЦР дает возможность диагностировать большое число разнообразных инфекций. В эту группу попадают и скрытые, бессимптомные заболевания, находящиеся в инкубационном периоде:

С помощью метода ПЦР можно обнаружить:

  • гепатит C, B;
  • уреаплазмоз половых органов;
  • ИППП – уреаплазмоз, трихомониаз, гарднереллез,;
  • хламидиоз половых органов и дыхательных путей;
  • микоплазмоз половых органов и дыхательных путей;
  • бактериальный вагиноз;
  • кандидоз половых органов;
  • инфекционный мононуклеоз;
  • туберкулез;
  • сальмонеллез;
  • туберкулез (легочные и внелегочные формы);
  • листериоз, клещевые энцефалиты, болезнь Лайма;
  • цитомегаловирусную, папилломавирусную, герпесную инфекцию;
  • детские заразные болезни, выявляемые при беременности и до зачатия — краснуху, паротит, дифтерию, корь;
  • ВИЧ.

При каждом из вышеперечисленных заболеваний, обнаруженным другим методом, желательно делать и ПЦР — исследование. Возбудители многих инфекций имеют несколько типов (штаммов), а более точная диагностика делает лечение эффективнее. Поскольку разные типы возбудителей обладают своими способами передачи инфекции, точное определение возбудителя помогает уберечь от заражения окружающих. Например, гепатитом А можно заразиться через общие предметы и посуду (болезнь грязных рук), а гепатитом С — только через кровь, медицинские инструменты и половые контакты. Это важно для тех, кто находится рядом с больным.

Суть метода полимеразной цепной реакции

Метод основан на выявлении возбудителя по участкам ДНК или РНК. ПЦР напоминает криминалистику, когда преступника находят по частичкам кожи или волосам, оставленным на месте преступления. Поскольку каждый живой организм имеет уникальную структуру ДНК или РНК. Метод позволяет безошибочно идентифицировать микроорганизм, даже если он присутствует в исследуемом материале в минимальных количествах.

ПРЦ подходит для выявления скрытого носительства, нетипичных, стертых и прочих форм заразных заболеваний. Диагностика отличается высокой точностью, поэтому практически не дает ошибок и ложных результатов. Анализ часто назначается, как дополнительное обследование, чтобы выявить конкретный тип вируса или микроба.

Достоинства и недостатки метода ПЦР

Анализ ПЦР – результативный диагностический инструмент, позволяющий врачу не только правильно определить тип инфекционного возбудителя в организме больного, но также и количество микробов. Эта особенность позволяет методу ПЦР эффективно обнаруживать и хронические инфекции, к примеру, вирусный гепатит.

Преимущества методики заключаются в следующих особенностях:

Недостатки ПЦР-диагностики – это необходимость в высокотехнологичном оборудовании и высококвалифицированных специалистах. Для анализа нужен специальный бокс-ламинар, где поддерживается необходимая температура и обеспечивается чистота эксперимента.

Как сдать анализ ПЦР правильно: подготовка

Чтобы понять, как именно следует подготовиться к предстоящему анализу ПЦР, пациент должен обязательно уточнить у своего врача, какой именно биологический материал планируется взять. От этого непосредственно зависит подготовка.

  • Выделения из половых органов, мазок из шейки матки или мочеиспускательного канала, моча – посредством исследования данных вариантов материала методом ПЦР эффективно диагностируются инфекции половых органов.
  • Вирусный гепатит C, ВИЧ инфекция требуют взятие крови на анализ ПЦР.
  • С помощью мазка из зева можно подтвердить или опровергнуть факт наличия инфекционного мононуклеоза.

Мазок у женщин

Для диагностики половых инфекций методом ПЦР у женщин, как правило, берут мазок из влагалища . При беременности действуют стандартные правила подготовки к анализу ПЦР.

  • За пару дней до проведения ПЦР нужно отказаться от спринцеваний, средств интимной гигиены.
  • За неделю до анализа на инфекции стоит перестать применять любые виды лекарственных препаратов, разумеется, если они не входят в программу подготовки к анализу ПЦР, прописанную врачом.
  • За пару дней до обследования нужно начать воздерживаться от полового акта.
  • Подмывание в день анализа ПЦР не нужно, гигиена половых органов проводится накануне вечером, используется только теплая вода.
  • За пару часов до сдачи анализа мочиться нельзя.

Мазок у мужчин

Подготовиться к забору мазка из мочеиспускательного канала для проведения ПЦР несложно. Достаточно соблюдать изложенные ниже правила.

  • За 2 суток до ПЦР обследования нужно начать воздерживаться от сексуальных отношений.
  • Прием лекарств прекращается приблизительно за 7 дней до проведения анализа, если, конечно же, они не были специально назначены врачом.
  • Гигиена половых органов должна проводиться накануне вечером, в день анализа ПЦР это делать не стоит.
  • Рекомендуется не мочиться примерно 2-3 часа перед сдачей анализа.

Анализ крови

Если в процессе ПЦР анализа объектом изучения станет кровь пациента, правила подготовки к нему следующие.

  • Оптимальное время для сдачи крови – утро, анализ нужно обязательно сдавать натощак (минимум 8 часов отсутствия пищи). Воду можно пить свободно.
  • Отказ от алкоголя за сутки до ПЦР анализа, отказ от курения за час до него.
  • Если здоровье допускает такой вариант, от приема лекарственных средств рекомендуется на время отказаться.
  • Перед сдачей проб крови в обязательном порядке следует отдохнуть около 20 минут.
  • Накануне ПЦР исследования совершенно исключены эмоциональные и физические перегрузки, они могут сказаться на результатах анализа.

Как проводится тест ПЦР?

Для исследования берется любая среда, в которой может находиться возбудитель, но чаще всего используются:

  • Кровь сыворотка или плазма – для выявления множества возбудителей – вирусов гепатита B, C, D, G, герпеса, ВИЧ, цитомегаловируса;
  • Моча и сок простаты – при диагностике ЗППП;
  • Мокрота, плевральная жидкость, бронхоальвеолярный лаваж – для диагностики легочных и внелёгочных форм туберкулеза;
  • Спинномозговая жидкость – для диагностики инфекций нервной системы;
  • Околоплодная жидкость – для определения внутриутробных заражений;
  • Мазок из зева – для выявления возбудителей инфекционного мононуклеоза и дифтерии;
    соскобы и мазки со слизистых для диагностики ЗППП;
    клетки слизистой желудка и желудочный сок — для выявления бактерии хеликобактер, вызывающей гастрит и язву.

пцр анализ


ПЦР—реакция делает огромное число копий выявленного участка генной информации (репликацию). Важно, что реплицируются только участки ДНК и РНК, необходимые для проведения анализа. Поэтому так важны чистота эксперимента и умение персонала обращаться с аппаратурой и образцами.

Цепная реакция протекает очень быстро, уже через два часа участок ДНК увеличивается в миллионы раз, что позволяет обнаружить и точно идентифицировать инфекцию. Для работы с эталонами пробирки помещают в специальный прибор. При помощи программы задается алгоритм, несколько раз меняющий температуру среды и влияющий на протекание реакции. Результат ПЦР виден сразу после окончания исследования.

Как расшифровать ПЦР анализ

Проведение ПЦР исследования позволяет не просто установить тип инфекции, присутствующий в организме больного, но и оценить его с количественной точки зрения (количество микробов). Расшифровка результатов количественного анализа ПЦР играет важную роль в обнаружении и проверке эффективности лечения большого числа хронических заболеваний, скажем гепатита C.

Результатом анализа ПЦР могут стать положительный и отрицательный ответы.

  • Отрицательный результат. Следы инфекции не были выявлены в биологическом материале, который являлся объектом исследования в процессе анализа ПЦР. Как правило, на основании отрицательного результата можно полагать, что в организме действительно отсутствует инфекция.
  • Положительный результат. Такой результат анализа ПЦР свидетельствует о том, что следы инфекционного заболевания присутствуют в биологическом материале пациента. Положительный результат анализа ПЦР характеризуется большой степенью точности.

Иногда инфицирование выявляется на фоне полного здоровья и отсутствия признаков заболевания. Некоторые больные считают, что анализ сделан неправильно, но реальная ситуация другая. Если ПЦР показала, что возбудитель в организме есть, значит, он там действительно находится. Просто инфекционные болезни никогда не начинаются сразу после заражения, имея инкубационный период различной продолжительности.

Скрытый период может продолжаться очень долго, например, при СПИДе – несколько лет, пока какие-то механизмы не подтолкнут вирусы к размножению. Возбудитель определяется в организме носителей и тех, кто не долечился. Очень часто переходят в скрытую (латентную) форму различные ЗППП. В этом случае может понадобиться дополнительная лабораторная диагностика.

Точность расшифровки результатов ПЦР анализа

Метод ПЦР, позволяющий выявлять достаточно большое число инфекций, характеризуется повышенной точностью, чувствительностью и специфичностью. Эти характеристики говорят о том, что с помощью исследования ПЦР можно:

  • Максимально точно установить отсутствие или присутствие инфекционного возбудителя.
  • Максимально точно определить конкретную разновидность инфекционного возбудителя (специфичность).
  • Выявить инфекцию даже в том случае, когда она имеет скрытый характер. Речь идет о низком уровне присутствия в подвергаемом исследованию биологическом материале пациента ДНК микробов (чувствительность).

Преимущества метода ПЦР над иммуноферментным анализом и прочими иммунологическими инструментами выявления инфекции заключается в том, что он реже дает ошибочные результаты. То есть расшифровка анализа ПЦР значительно реже показывает отсутствие инфекционных микробов, если они есть в организме больного.

Кроме того, почти не бывает, чтобы расшифровка анализа выявляла наличие в организме несуществующей инфекции, то есть давала ложноположительные результаты.Разумеется, стопроцентно правильными результаты ПЦР назвать все же нельзя, поэтому необходимо обязательно дополнять это исследование другими методиками.

ВПЧ скрининг — верный способ выявить и локализовать проблему

Примерно 80% населения планеты по статистике международных организаций сегодня являются носителями вируса папилломы человека. Вместе с тем, не следует считать ВПЧ безопасным. Среди многих его видов есть и такие, которые прямо влияют на развитие онкологических заболеваний.

Поскольку проблема себя не сразу показывает, медики рекомендуют лицам с группы риска систематически сдавать специальный анализ — ВПЧ скрининг.

Типы ВПЧ

Специалисты в области медицины выделяют более 100 разновидностей ВПЧ. Однако далеко не все типы ВПЧ опасны для человека.

Развития раковых опухолей можно ожидать при обнаружении следующих типов: 16, 52, 18, 68, 45, 31, 58, 33, 35, 39, 59. Особенно опасными среди них считаются 18 и 16 тип. Именно при наличии таких наблюдается высокая летальность. Каждый канцерогенный тип вируса может привести к развитию рака:

  • шейки матки;
  • полового члена;
  • заднего прохода;
  • вульвы;
  • гортани;
  • рта.

Низкие шансы заболеть раком в случае выявления типов: 11, 43, 42, 6, 44. Не выявлено до сих ни одного факта заболевания онкологическими болезнями в случае заражения типами: 1, 3, 5, 2, 4.

Особенности вируса папилломы человека такие, что инфицирование одним видом не означает, что человек убережется от других.

Причины заражения вирусом папилломы

Основной причиной распространения вируса являются незащищенные интимные отношения. При этом представительницы прекрасного пола, как показывает статистика, больше подвержены инфицированию. Так, вероятность заразиться у мужчин при половом контакте составляет 25-70%. Риск заражения у женщин достигает 80-90%.

Кроме этого, вирус может передаваться в случаях:

  • переливания крови;
  • при рождении — от матери к ребенку;
  • через бытовые предметы — средства личной гигиены;
  • в результате порезов, ран и тому подобное.

Скрининг — общее обследование

Многих женщин интересует, что такое скрининг ВПЧ. Прежде всего, следует указать, что это качественный анализ, который позволяет выявить рак шейки на ранних стадиях, а также узнать о наличии в организме конкретного человека опасных типов вирусов.

У женщин скрининг ВПЧ делается непосредственно во время гинекологического осмотра. В таком случае врач берет мазок, который впоследствии проверяется в лабораторных условиях. Если в результате папилломавирусная инфекция обнаружена, женщина должна пройти более тщательное обследование, в том числе на предмет выявления патологических изменений тканей.

Активно сегодня используется и несколько других способов установить диагноз ПЧ.

  1. ПЦР. Имеет целью выявить ДНК возбудителя в биологическом материале: крови, моче, выделениях. Следовательно, удается выяснить, какой именно штамп присутствует.
  2. Генотипирование. Помогает выяснить, имеет ли заражение первоначальную форму или хроническую.
  3. Дайджен-тест. Количественный метод, указывает на количество вируса.

Какой именно тест использовать и когда именно делать скрининг на ВПЧ должен решать врач.

Что показывает расширенный скрининг?

Для более полноценного осмотра и диагностики, а также в случае подозрения сразу нескольких типов ВПЧ уместно задавать расширенный ВПЧ скриннинг. Такой содержит информацию по поводу 15 типов вируса. По сути, это количественный метод, дающий возможность выявить ДНК. Главная особенность, которой отличается ВПЧ ВКР скрининг — это стопроцентная специфичность определения.

Получив результаты цепной реакции полимеразной ПЦР, доктор имеет возможность более удачно подобрать схему лечения.

Расширенное тестирование, цервикальный скрининг расшифровывается с использованием специального параметра — контроль взятия материала.

Надежен ли скрининг?

Сегодня трудно найти более надежный и доступный способ выявления вируса ВПЧ, чем скрининг. Всего лишь несколько дней нужно специалистам, чтобы указать на наличие потенциально опасных факторов.

В современных частных клиниках есть вся необходимая аппаратура, индикаторы и средства, которые позволяют провести тест максимально качественно. Для удобства пользования методом ПЦР и легкости интерпретации результатов, происходит перерасчет в единицы Digene. Следовательно, вероятность ошибки очень мала.

Зачем диагностировать заболевание?

Своевременное выявление вируса у женщин или мужчин дает возможность спасти человека от смерти. Выявить наличие канцерогенных типов очень сложно, ведь извне проблема себя может в течении длительного времени никак не проявлять.

Получив точные результаты, врач может выяснить несут ли угрозу кондиломы, приводят ли они к появлению перерожденных новообразований, и стоит ли вообще их удалят.

Своевременная диагностика помогает предупредить развитие рака, а в случае его наличия подобрать наиболее эффективную схему борьбы.

Кто должен проходить скрининг?

Сдавать анализ на выявление ВПЧ должны все женщины после 30 лет. Если канцерогенных типов в них не обнаружено, тогда стоит повторять такой анализ, по крайней мере, раз в 2-3 года.

Сдавать кровь для определения вируса также нужно:

  • при беременности;
  • при сильно пониженном иммунитете;
  • если человек борется с признаками наличия ВПЧ;
  • после незащищенных контактов, переливания крови.

Также такой анализ время от времени должны сдавать все люди, у которых заболевание уже диагностировано.

Что расскажет доктор перед исследованием?

Обратившись к специалисту, клиент получает максимально полную консультацию по поводу скрининга и особенностей его выполнения. Пациент получит исчерпывающую информацию по вопросу как сдавать ВПЧ скриннинг. У женщин забор материала проводится в стационарных условиях. Врач-гинеколог делает соскоба из цервикального канала.

Для пациентов мужского пола ПЦР анализ осуществляется таким же образом.

Некоторые другие методы диагностики вируса предусматривают просто сдать анализ крови.

Что необходимо делать для прохождения исследования?

Не будем удачно проведенным анализ, если пациент использует медикаменты в течение трех последних дней перед забором материала.

Мужчинам запрещено мочится в течение 2-х часов до начала забора материала.

Как оценить результаты ВПЧ теста

Первым фактом, на который обращает внимание врач, является наличие или отсутствие ДНК вируса в биологических материалах человека. В норме его ДНК должны полностью отсутствовать. Вместе с тем, результаты теста используются для определения особенностей течения заболевания.

Так, показатели до цифры 103 указывают на переходящее, то есть малоопасное течение. В этом случае в течение одного года человек повторно сдает еще несколько раз скрининг. Подтверждением транзиторности является уменьшение показателей в несколько раз.

Если результаты указывают на цифру более 103, врач может сделать вывод о хроническом течении заболевания. Вероятность заболеть раком затем очень значительна.

На начало развития рака шейки матки указывают показатели более 105.

Излечима ли папилломавирусная инфекция?

Нет необходимости использовать сильные препараты для борьбы с типами ВПЧ, которые не несут раковой опасности. Врачи могут порекомендовать удаление (в основном хирургическим методом) бородавок и папиллом и использование иммунных препаратов и методов.

Для купирования инфекции врачи предлагают:

  • противовирусные препараты;
  • иммуностимулирующие.

Те же, у кого диагностирован тип 18 или 16 должны быть под контролем врачей и систематически сдавать анализ. Важно понять, что единой схемы для лечения папилломовирусных болезней на сегодня просто не существует.

Читайте также: