Количество т-хелперов при вич инфекции

Обновлено: 24.04.2024

ВИЧ разрушает CD4-Т-лимфоциты (Т-хелперы), поэтому врачи измеряют уровень CD4 для мониторинга прогрессирования ВИЧ и СПИДа.

Вспомогательные Т-клетки имеют решающее значение для функционирования иммунной системы и активируются после столкновения с антигенами болезнетворных микроорганизмов. Антигены — это биологические маркеры, которые идентифицируют микроорганизмы, такие как бактерии и вирусы.

Когда количество CD4 падает ниже определенного уровня, человеку ставят диагноз СПИДа. Лечение, предлагаемое врачом, зависит от того, насколько низок уровень CD4.

Что такое Т-клетки?

Т-клетки растут из стволовых клеток костного мозга. Они представляют собой тип белых кровяных телец. Существует два основных типа Т-клеток: Т-хелперы и Т-киллеры. В конечном счете, именно Т-киллеры атакуют и убивают клетки, инфицированные патогенами.

Т-хелперы

Макрофаги — это еще один тип белых кровяных телец. Они поглощают болезнетворные микроорганизмы или патогены, а затем представляют фрагменты своих антигенов Т-хелперам. Когда Т-хелперы связываются с фрагментом антигена, который они распознают, они активируют и предупреждают другие белые кровяные клетки о патогене.

Т-хелперы имеют на своей клеточной поверхности белки CD4, которые помогают им связываться с фрагментами антигена. Поскольку ВИЧ разрушает Т-хелперы, медицинские работники используют подсчет CD4 для измерения уровня CD4 и прогрессирования ВИЧ.

Т-киллеры

После получения предупреждения Т-киллеры ищут и уничтожают патоген (вирус, бактерии или болезнетворные микроорганизмы). Другие лейкоциты, такие как В-лимфоциты, также активируются и вырабатывают антитела для защиты от угрозы.

Как Т-клетки связаны с ВИЧ и СПИДом?

ВИЧ вводит свою генетическую информацию в Т-хелперы, чтобы сделать копии самого себя. Когда это происходит, Т-хелперы погибают. Это серьезно нарушает иммунный ответ. Низкий уровень Т-хелперов означает, что Т-киллеры и другие лейкоциты не получают столько информации о патогенах в организме. В результате болезнетворные бактерии и вирусы размножаются с минимальным обнаружением.

Когда количество Т-хелперов падает ниже 200 клеток/мм3 (клеток на кубический миллиметр), человеку ставят диагноз СПИД. Но врачи также будут принимать во внимание другие показатели, такие как общее количество лейкоцитов и процент лимфоцитов.

СПИД — это тяжелая стадия ВИЧ. Когда человеку ставят диагноз СПИД, значит его иммунная система сильно ослаблена, и он подвержен риску развития оппортунистических заболеваний. Выживаемость без лечения на этом этапе обычно составляет 3 года.

Отличаются ли Т-клетки CD4 от других Т-клеток?

Т-клетки CD4 являются Т-хелперами. Они экспрессируют или вырабатывают белок CD4 на своей клеточной поверхности, который помогает им связываться с фрагментами антигена. Эти фрагменты антигена принадлежат вирусам, бактериям и другим микроорганизмам, которые могут угрожать здоровью человека. Т-киллеры экспрессируют белок CD8 на своей клеточной поверхности.

При активации Т-хелперы мобилизуют другие лейкоциты, чтобы инициировать полный иммунный ответ. Например, Т-киллеры затем ищут патоген и уничтожают его, высвобождая гранзимы, которые вызывают гибель клеток-источников.

Использование показателя — количество Т-клеток — для диагностики СПИДа

Если у человека Т-хелперов ниже 200 клеток/мм3 , ему скорее всего поставят диагноз СПИДа.

При ВИЧ у пациента берут образец крови, чтобы определить количество CD4. Количество CD4 помогает установить, сколько Т-хелперов у человека. Но при анализе количества CD4 медицинские работники должны учитывать, что:

  • уровень CD4 может быть ниже утром
  • стресс и усталость могут повлиять на уровень CD4
  • уровень кортикостероидов может увеличить или уменьшить уровень CD4

Все люди, у которых количество Т-хелперов ниже 200 клеток/мм3, должны проверять уровень CD4 каждые 3-6 месяцев. Если лечение помогает, пациенту может потребоваться только обследование на CD4 каждые 6-12 месяцев. Подсчет CD4 помогает врачам отслеживать прогрессирование ВИЧ.

Каковы побочные эффекты подсчета Т-лимфоцитов?

Побочные эффекты забора крови могут включать :

  • легкая боль
  • головокружение
  • чувство слабости

Медицинскому работнику потребуется взять только небольшое количество крови, поэтому человек не должен испытывать каких-либо значительных побочных эффектов.

Методы лечения после подсчета Т-клеток

Обычно, когда ставят диагноз ВИЧ, начинают антиретровирусную терапию (АРТ) как можно скорее .

Если человек хорошо реагирует на АРТ, его уровень CD4 может увеличиться на 100-150 клеток/мм3 через 1 год.

Проанализировав количество CD4, врач может определить, работает ли текущий план лечения или необходимо ввести дополнительные методы лечения. Как только уровень CD4 падает ниже 200 клеток/мм3, врач может порекомендовать увеличить АРТ и ввести другие препараты, чтобы укрепить иммунную систему против оппортунистических заболеваний.

Все люди с ВИЧ должны проводить подсчет CD4 каждые 3-6 месяцев, если их уровень CD4 ниже 200 клеток/мм3, так как это указывает на прогрессирование заболевания. Если лечение работает и количество CD4 стабильно, человеку может потребоваться обследование только каждые 6-12 месяцев.

Прогноз

Если человеку вовремя ставят диагноз ВИЧ и быстро начинают АРТ, маловероятно, что его состояние будет прогрессировать до СПИДа. Прием АРТ не только поддерживает высокий объем Т-хелперов, но и снижает вирусную нагрузку (количество вируса в организме).

Если у человека снижается вирусная нагрузка, то вирусы могут не обнаруживаться. Это означает, что если человек продолжает лечение своего состояния, вирус не может передаваться. Наличие неопределяемой вирусной нагрузки также снижает передачу ВИЧ во время родов.

Заключение

Врач запрашивает количество CD4 для мониторинга уровня Т-хелперов. Когда уровень CD4 у человека падает ниже 200 клеток/мм3, то ставят диагноз СПИД. Если человек начинает АРТ сразу после постановки диагноза ВИЧ, его состояние может никогда не прогрессировать до СПИДа.

Т-клетки включают два основных типа: Т-хелперы и Т-киллеры. Т-киллеры экспрессируют на своей клеточной поверхности белок CD4, который помогает им связываться с фрагментами антигена. Эти фрагменты антигена принадлежат болезнетворным вирусам и бактериям. После связывания Т-хелперы сигнализируют другим лейкоцитам уничтожить патоген. Т-киллеры — это еще один тип Т-клеток, которые разрушают патогены, высвобождая гранзимы, которые вызывают гибель клеток.



Учредитель сетевого издания (Medical Insider), главный редактор, автор статей.

Врач ультразвуковой диагностики в СЗЦДМ, травматолог-ортопед, г. Санкт-Петербург

Существует целый ряд дополняющих друг друга механизмов взаимодействия ВИЧ с клетками Т-хелперов. Последние стимулируют работу Т-киллеров и макрофагов, индуцируют продукцию антител В-лимфоцитами. Лимфоциты-носители молекул Т8 (CD8) могут быть либо киллерами, либо супрессорами. Некоторые из механизмов еще спорны, подвергаются изменениям; постоянно появляются новые детали и нюансы влияния ВИЧ на иммунную систему

1-й механизм

При продуктивном процессе состоявшейся репродукции и массированном (несколько тысяч вирионов в генерации одной клетки) выходе из лимфоцитов ВИЧ интенсивно лизирует Т-хелперы. Но даже если вирусы спонтанно отпочковываются от Т-клетки-хелпера (без ее лизиса), клетка не успевает восстанавливать целостность мембран, молекулы цитоплазмы свободно элиминируют из клетки, и Т-хелпер гибнет. Поскольку Т-хелперы составляют порядка 60% циркулирующих Т-клеток, быстрая их гибель приводит к глубоким нарушениям иммунной системы инфицированного человека. СПИД развивается на фоне острой недостаточности CD4-лимфоцитов.

2-й механизм

3-й механизм

Влияние ВИЧ на Т-хелперы

Частицы ВИЧ изменяют реактогенные зоны поверхности Т-хелперов, что приводит к образованию нежизнеспособных синцитиев. Компоненты вирусной оболочки, синтезируемые в процессе репродукции вируса, резко нарушают цитоплазматическую мембрану клетки-хозяина: в результате элиминации протоплазмы клетки сливаются, образуются нежизнеспособные многоядерные структуры

Исследования подтвердили, что вирус резко изменяет мембраны Т-лимфоцитов и приводит к их слиянию в нежизнеспособные многоядерные клетки-монстры. Образование синцитиев возможно по типу гемагглютинирующего эффекта, когда здоровые лимфоциты при соприкосновении с инфицированными в свою оболочку включают поверхностные белки вируса, и взаимодействие рецепторных зон приводит к образованию крупных нежизнеспособных конгломератов.

4-й механизм

ВИЧ не разрушает CD4-лимфоциты, а изменяет и значительно замедляет их рост в периодической культуре, тогда как другие виды Т-клеток продолжают размножаться нормально. Отмечено, что скорость гибели зараженных клеток пропорциональна количеству CD4-рецепторов на их поверхности. Со временем число CD4-клеток становиться меньше, хотя некоторая их часть выживает и сохраняет вирус в латентном состоянии в виде провируса.

5-й механизм

ВИЧ маскирует CD4-маркер. Было показано, что в выживших CD4-лимфоцитах вирус может маскировать CD4-маркер на поверхности клеток или предотвращать его появление там. В результате получается, что число CD4-клеток еще меньше, чем на самом деле. С исчезновением CD4-клеток падает уровень ИЛ-2 и в результате замедляется рост клонов зрелых Т-клеток, индуцируемых этим лимфокином. Из-за ослабления синтеза интерлейкина и интерферона падает активность К-клеток и макрофагов, которые в номе стимулируютя этими белками.

Влияние ВИЧ на Т-хелперы

6-й механизм

В инфицированных CD4-клетках ВИЧ вызывает секрецию растворимого фактора супрессии. Это вещество блокирует иммунные реакции, зависящие от Т-клеток как in vitro, так и in vivo. При этом угнетается образование специфических антител и пролиферация Т-клеток.

Считают, что геном вируса не кодирует последовательность растворимых факторов супрессии, а только индуцирует в CD4-клеткет его синтез. Такой же механизм, возможно, лежит в основе иммуносупрессии при других инфекциях. Интересно было бы сравнить этот супрессивный фактор с иммуносупрессивным фактором продуктов перекисного окисления липидов.

7-й механизм

Проникший в лимфоциты ВИЧ изменяет геном Т-хелперов, в результате чего они лишаются способности к трансформации и нормальному ответу на ИЛ-2.

  • В чем опасность ЗППП
  • Венерические заболевания
  • Группы риска заражения ЗППП
  • Диагностика ЗППП
  • ЗППП - заболевания, передающиеся половым путем
  • Инкубационный период ЗППП
  • Инфекционные заболевания
  • ИППП – инфекции, передающиеся половым путем
  • Легенды и мифы о венерических заболеваниях
  • Лечение ЗППП
  • Подготовка к анализам на инфекции
  • Последствия и осложнения ЗППП
  • Профилактика заболеваний, передающихся половым путем (ЗППП)
  • Профилактика ЗППП
  • Пути передачи ЗППП
  • Симптомы и признаки ЗППП
  • СПИД
    • Анализы на ВИЧ и СПИД
    • Взаимодействие ВИЧ с другими клетками организма
    • Взаимодействие ВИЧ с моноцитами
    • Взаимодействие ВИЧ с Т-супрессорами
    • ВИЧ-2
    • ВИЧ-инфекция
    • Влияние ВИЧ на Т-хелперы
    • Возможности разработки вакцин
    • Гены и белки ВИЧ
    • Диагностика ВИЧ инфекции
    • Заключение
    • Клинические проявления ВИЧ инфекции
    • Ко-факторы ВИЧ-инфекции
    • Лечение ВИЧ и СПИД
    • Лечение ВИЧ инфекции
    • Макрофаги и вич
    • Механизмы взаимодействия ВИЧ с различными звеньями иммунной системы
    • Новые варианты вируса СПИД
    • Оппортунистические инфекции и опухоли
    • Особенности инфицирования и заболевания детей
    • Патогенез и клиника ВИЧ инфекции
    • Передача ВИЧ инфекции
    • Последствия ВИЧ и СПИДа
    • Профилактика СПИДа и ВИЧ-инфекции
    • Пути передачи ВИЧ
    • Регуляция экспрессии вирусных генов
    • Результаты взаимодействия ВИЧ с В-клетками
    • Симптомы ВИЧ
    • Система интерферона при ВИЧ инфекции
    • СПИД-ассоциированный комплекс
    • Строение вирусной частицы ВИЧ
    • Строение генома и экспрессия генов ВИЧ

    До 30 апреля "Знакомство с доктором" на первичный прием врача скидка 20%
    * Подробности уточняйте у администраторов

    Определение основных популяций (Т-клетки, В-клетки, натуральные киллеры) и субпопуляций Т-лимфоцитов (Т-хелперы, Т-ЦТЛ). Для первичного исследования иммунного статуса и выявления выраженных нарушений иммунной системы ВОЗ рекомендовано определение CD3, CD4, CD8, CD19, CD16+56, соотношение CD4/CD8. Исследование позволяет определить относительное и абсолютное количество основных популяций лимфоцитов: Т-клетки – CD3, В-клетки – CD19, натуральные киллеры (NK) – CD3- CD16++56+, субпопуляции Т лимфоцитов (Т-хелперы CD3+ CD4+, Т-цитотоксические CD3+ CD8+ и их соотношение).

    Метод исследования

    Иммунофенотипирование лимфоцитов проводится c использованием моноклональных антител к поверхностным дифференцировочным ангинам на клетках иммунной системы, методом проточной лазерной цитофлуорометрии на проточных цитофлуориметрах.

    Выбор зоны анализа лимфоцитов производится по дополнительному маркеру CD45, который представлен на поверхности всех лейкоцитов.

    Условия взятия и хранения образцов

    Невыполнение этих условий приводит к некорректным результатам.

    Интерпретация результатов

    Т-лимфоциты (CD3+ клетки). Повышенное количество свидетельствует о гиперактивности иммунитета, наблюдается при острых и хронических лимфолейкозах. Увеличение относительного показателя встречается при некоторых вырусных и бактериальных инфекциях в начале заболевания, обострениях хронических заболеваний.

    Снижение абсолютного количества Т-лимфоцитов свидетельствует о недостаточности клеточного иммунитета, а именно о недостаточности клеточно-эффекторного звена иммунитета. Выявляется при воспалениях разнообразной этиологии, злокачественных новообразованиях, после травмы, операций, инфаркта, при курении, приеме цитостатиков. Повышение их числа в динамике заболевания – клинически благоприятный признак.

    В-лимфоциты (CD19+ клетки) Снижение наблюдается при физиологических и врожденных гипогаммаглобулинемиях и агаммаглобулинемиях, при новообразованиях иммунной системы, лечении иммунодепрессантами, острой вирусной и хронической бактериальной инфекциях, состоянии после удаления селезенки.

    Увеличение отмечается при аутоиммунных заболеваниях, хронических заболеваниях печени, циррозе, муковисцедозе, бронхиальной астме, паразитарных и грибковых инфекциях. Характерно в период реконвалесценции после перенесенных острых и хронических вирусных и бактериальных инфекций. Выраженное увеличение наблюдается при хроническом В-лимфолейкозе.

    NK-лимфоциты с фенотипом CD3-CD16++56+ Натуральные киллеры (NK-клетки) – популяция больших гранулярных лимфоцитов. Они способны лизировать клетки-мишени, инфицированные вирусами и другими внутриклеточными антигенами, опухолевые клетки, а также другие клетки аллогенного и ксеногенного происхождения.

    Увеличение количества NK-клеток связано с активацией антитрансплантационного иммунитета, в некоторых случаях отмечается при бронхиальной астме, встречается при вирусных заболеваниях, повышается при злокачественных новообразованиях и лейкозах, в периоде реконвалесценции.

    Снижение наблюдается при врожденных иммунодефицитах, паразитарных инфекциях, аутоиммунных заболеваниях, облучении, лечении цитостатиками и кортикостероидами, стрессе, дефиците цинка.

    Т-лимфоциты хелперы с фенотипом CD3+CD4+ Увеличение абсолютного и относительного количества наблюдается при аутоиммунных заболеваниях, может быть при аллергических реакциях, некоторых инфекционных заболеваниях. Это увеличение свидетельствует о стимуляции иммунной системы на антиген и служит подтверждением гиперреактивных синдромов.

    Снижение абсолютного и относительного количества Т-клеток свидетельствует о гипореактивном синдроме с нарушением регуляторного звена иммунитета, является патогномичным признаком для ВИЧ-инфекции; встречается при хронических заболеваниях (бронхитах, пневмониях и т.д.), солидных опухолях.

    Т-цитотоксические лимфоциты с фенотипом CD3+ CD8+ Повышение выявляется практически при всех хронических инфекциях, вирусных, бактериальных, протозойных инфекциях. Является характерным для ВИЧ-инфекции. Снижение наблюдается при вирусных гепатитах, герпесе, аутоиммунных заболеваниях.

    Соотношение CD4+/CD8+ Исследование соотношения CD4+/CD8+ (CD3, CD4, CD8, CD4/CD8) рекомендовано только для мониторинга ВИЧ-инфекции и контроля эффективности АРВ терапии. Позволяет определить абсолютное и относительное количество Т-лимфоцитов, субпопуляций Т-хелперов, ЦТЛ и их соотношение.

    Диапазон значений – 1,2–2,6. Снижение наблюдается при врожденных иммунодефицитах (синдром Ди-Джоржи, Незелофа, Вискотта-Олдрича), при вирусных и бактериальных инфекциях, хронических процессах, воздействии радиации и токсических химических веществ, множественной миеломе, стрессе, снижается с возрастом, при эндокринных заболеваниях, солидных опухолях. Является патогномичным признаком для ВИЧ-инфекции (менее 0,7).

    Увеличение значения более 3 – при аутоиммунных заболеваниях, остром Т-лимфобластном лейкозе, тимоме, хроническом Т-лейкозе.

    Изменение соотношения может быть связано с количеством хелперов и ЦТЛ у данного пациента. Например, снижение количества CD4+ Т-клеток при острой пневмонии в начале заболевания ведет к снижению индекса, а ЦТЛ при этом могут не измениться.

    Для дополнительного исследования и выявления изменений иммунной системы при патологиях требующих оценки наличия острого или хронического воспалительного процесса и степени его активности, рекомендуется включать подсчет количества активированных Т-лимфоцитов с фенотипом CD3+HLA-DR+ и ТNK–клеток с фенотипом CD3+CD16++56+.

    Т-активированные лимфоциты с фенотипом CD3+HLA-DR+ Маркер поздней активации, показатель гиперреактивности иммунитета. По экспрессии данного маркера можно судить о выраженности и силе иммунного ответа. Появляется на Т-лимфоцитах после 3-го дня острого заболевания. При благоприятном течении заболевания снижается до нормы. Увеличение экспрессии на Т-лимфоцитах может быть при многих заболеваниях, связанных с хроническим воспалением. Отмечено его повышение у пациентов с гепатитом С, пневмониями, ВИЧ-инфекцией, солидными опухолями, аутоиммунными заболеваниями.

    ТNK-лимфоциты с фенотипом CD3+CD16++CD56+ Т-лимфоциты, несущие на своей поверхности маркеры CD16++ CD 56+. Эти клетки имеют свойства как Т-, так и NK-клеток. Исследование рекомендовано как дополнительный маркер при острых и хронических заболеваниях.

    Снижение их в периферической крови может наблюдаться при различных органоспецифических заболеваниях и системных аутоиммунных процессах. Увеличение отмечено при воспалительных заболеваниях разной этиологии, опухолевых процессах.

    Исследование ранних и поздних маркеров активации Т-лимфоцитов (CD3+CD25+, CD3-CD56+, CD95, CD8+CD38+) дополнительно назначают для оценки изменений ИС при острых и хронических заболеваниях, для диагностики, прогноза, мониторинга течения заболевания и проводимой терапии.

    Т-активированные лимфоциты с фенотипом CD3+CD25+, рецeптор к ИЛ2 CD25+ – маркер ранней активации. О функциональном состоянии Т-лимфоцитов (CD3+) свидетельствует количество экспрессирующих рецепторов к ИЛ2 (CD25+). При гиперактивных синдромах количество этих клеток возрастает (острые и хронические лимфолейкозы, тимома, отторжение трансплантата), кроме того, повышение их может свидетельствовать о ранней стадии воспалительного процесса. В периферической крови их можно выявить в первые три дня болезни. Снижение числа этих клеток может наблюдаться при врожденных иммунодефицитах, аутоиммунных процессах, ВИЧ-инфекции, грибковых и бактериальных инфекциях, ионизирующей радиации, старении, отравлении тяжелыми металлами.

    Т-цитотоксические лимфоциты с фенотипом CD8+CD38+ Присутствие CD38+ на ЦТЛ лимфоцитах отмечено у пациентов с разными заболеваниями. Информативный показатель при ВИЧ-инфекции, ожоговой болезни. Увеличение числа ЦТЛ с фенотипом CD8+CD38+ наблюдается при хронических воспалительных процессах, онкологических и некоторых эндокринных заболеваниях. При проведении терапии показатель снижается.

    Субпопуляция натуральных киллеров с фенотипом CD3- CD56+ Молекула CD56 – адгезивная молекула, широко представленная в нервной ткани. Кроме натуральных киллеров, экспрессируется на многих типах клеток, в том число на Т-лимфоцитах.

    Увеличение данного показателя свидетельствуют о расширении активности специфического клона клеток киллеров, которые имеют меньшую цитолитическую активность, чем NK-клетки с фенотипом CD3- CD16+. Количество этой популяции возрастает при гематологических опухолях (ЕК-клеточная или Т-клеточная лимфома, плазмоклеточная миелома, апластическая крупноклеточная лимфома), хронических заболеваниях, некоторых вырусных инфекциях.

    Снижение отмечается при первичных иммунодефицитах, вирусных инфекциях, системных хронических заболеваниях, стрессе, лечении цитостатиками и кортикостероидами.

    Рецептор CD95+ – один из рецепторов апоптоза. Апоптоз – сложный биологический процесс, необходимый для удаления из организма поврежденных, старых и инфицированных клеток. Рецептор CD95 экспрессируется на всех клетках иммунной системы. Он играет важную роль в контроле функционирования иммунной системы, так как является одним из рецепторов апоптоза. Его экспрессия на клетках определяет готовность клеток к апоптозу.

    Снижение доли CD95+-лимфоцитов в крови пациентов свидетельствует о нарушении эффективности последнего этапа выбраковки дефектных и инфицированных собственных клеток, что может привести к рецидиву заболевания, хронизации патологического процесса, развитию аутоиммунных заболеваний и повышению вероятности опухолевой трансформации (к примеру, рака шейки матки при папилломотозной инфекции). Определение экспрессии CD95 имеет прогностическое значение при миело- и лимфопролифератиных заболеваниях.

    Повышение интенсивности апоптоза наблюдается при вирусных заболеваниях, септических состояниях, при употреблении наркотических средств.

    Активированные лимфоциты CD3+CDHLA-DR+, CD8+CD38+, CD3+CD25+, CD95. Тест отражает функциональное состояние Т-лимфоцитов и рекомендован для контроля за течением заболевания и контроля иммунотерапии при воспалительных заболеваниях разной этиологии.

    После постановки диагноза ВИЧ-инфекции в России пациентов ставят на учет в Центре по профилактике и борьбе со СПИДом по месту жительства. При постановке на учет проводится первичное обследование, целью которого является подтверждение диагноза, определение стадии ВИЧ-инфекции, выявление вторичных заболеваний, определение наличия показаний к антиретровирусному (АРВ) лечению, химиопрофилактике и лечению вторичных заболеваний. При первичном обследовании выявляют имеющиеся у больного сопутствующие заболевания, которые могут осложнить течение ВИЧ-инфекции. Из лабораторных показателей при первичном обследовании оценивают:

    • общий анализ крови;
    • биохимический анализ крови;
    • общий анализ мочи;
    • маркеры вирусных гепатитов В и С, сифилиса;
    • количество CD4+ и CD8+ лимфоцитов;
    • концентрацию РНК ВИЧ.

    В дальнейшем проводятся повторные плановые обследования, частота которых зависит от стадии заболевания. Цель планового обследования – своевременное выявление угрозы прогрессирования болезни.

    В основе развития СПИДа лежит, в первую очередь, разрушение Т-лимфоцитовхелперов, несущих CD4-рецепторы. В связи с этим проведение диагностики и наблюдение за прогрессированием заболевания невозможно без контроля субпопуляции Т-хелперов. Количество Т-лимфоцитов – чрезвычайно вариабельный показатель. Достоверно значимым отличием в уровне CD4+ лимфоцитов между двумя исследованиями считают отличие более чем на 30% для абсолютных значений и более чем на 3% для относительных значений. В целом, снижение числа клеток CD4+ (абсолютное и относительное) обнаруживается у лиц, инфицирование которых произошло не менее года назад. С другой стороны, на ранних стадиях инфекции нередко оказывается резко повышенным число CD8+ лимфоцитов (Т-супрессоров) как в периферической крови, так и в увеличенных лимфоузлах.

    При развитии у пациента СПИДа в большинстве случаев наблюдается сниженное общее число CD4+ лимфоцитов, тогда как абсолютное значение содержания CD8+ лимфоцитов остается в пределах нормы. Соответственно, резко снижается соотношение CD4+/CD8+.

    Вирусная нагрузка (чаще всего под этим термином подразумевают концентрацию РНК ВИЧ в плазме крови) до недавнего времени считалась основным лабораторным показателем для оценки вероятности прогрессирования ВИЧ-инфекции. Был накоплен огромный опыт, показывающий четкую зависимость риска прогрессирования заболевания от концентрации РНК ВИЧ в плазме крови. Однако с внедрением высокоэффективных схем АРВ терапии оказалось, что риск развития СПИДа, главным образом, зависит от уровня CD4+ лимфоцитов до начала лечения. Поэтому согласно современным рекомендациям АРВ лечение ВИЧинфицированным пациентам назначают на основании клинических признаков и концентрации CD4+ лимфоцитов. Вирусная нагрузка имеет значение в прогнозе заболевания только в том случае, если ее уровень превышает 100 тыс. копий/мл.

    ГлавнаяHelixbook Оценка состояния Т-клеточного звена иммунитета: T-лимфоциты (CD3+CD19-), T-хелперы (CD3+CD4+CD45+), T-цитотокс. (CD3+CD8+CD45+), T-reg. (CD4+CD25brightCD45+), активированные (CD3+HLA-DR+CD38+)

    Оценка состояния Т‑клеточного звена иммунитета: T‑лимфоциты (CD3+CD19‑), T‑хелперы (CD3+CD4+CD45+), T‑цитотокс. (CD3+CD8+CD45+), T‑reg. (CD4+CD25brightCD45+), активированные (CD3+HLA‑DR+CD38+)

    Исследование включает в себя определение абсолютных и относительных значений субпопуляционного состава Т-лимфоцитов (CD3, CD4, CD8, CD45), количества Т-регуляторных лимфоцитов ( T-reg. Cells) соотношения Т – хелперы/Т – цитотоксические клетки и Т-клеток, несущих на своей поверхности маркеры активации CD38, HLA-DR. Рекомендуется к назначению для контроля показателей клеточного звена иммунной системы в динамике после комплексного иммунологического обследования.

    Синонимы русские

    Иммунофенотипирование, клеточный иммунитет, многоцветный клеточный анализ методом проточной цитометрии, Т-клетки, Т-хелперы, Т-цитотоксические клетки, Т-регуляторных лимфоциты.

    Синонимы английские

    Human Immune System, Immunophenotyping, Multicolor Flow Cytometry Cell Analysis, Human Leukocyte Differentiation Antigens, Human T cells, T helper cells, Cytotoxic T cells, T-reg Cells, Activation markers.

    Метод исследования

    Какой биоматериал можно использовать для исследования?

    Общая информация об исследовании

    Оценка клеточного состава (иммунофенотипирование) лимфоцитов крови человека - основной компонент в оценке иммунного статуса - выполняется методом проточной цитофлуориметрии.

    Иммунофенотипирование - характеристика клеток при помощи моноклональных антител или каких-либо других зондов, позволяющих судить об их типе и функциональном состоянии по наличию того или иного набора клеточных маркеров.

    Иммунофенотипирование лейкоцитов заключается в обнаружении на их поверхности маркеров дифференциации, или CD-антигенов. Лейкоциты экспрессируют ряд поверхностных и цитоплазматических антигенов, уникальных для своей субпопуляции и стадии развития. CD-антигены (англ. cluster of differentiation antigens) - это антигены на поверхности клеток, маркеры, отличающие одни типы клеток от других. Дифференциации этих антигенов изучены и стандартизованы, им присвоены определенные номера. CD могут быть распознаны с помощью соответствующих моноклональных антител. Используя флюоресцентно-меченые моноклональные антитела, связывающиеся с определенными CD, можно с помощью метода проточной цитометрии произвести подсчёт содержания лимфоцитов, относящихся к различным по функции или стадии развития субпопуляциям.

    В основе проточной цитофлуориметрии лежит проведение фотометрических и флюоресцентных измерений отдельных клеток, пересекающих одна за другой вместе с потоком жидкости луч монохроматического света, обычно света лазера.

    СD3

    Этот маркер позволяет идентифицировать зрелые покоящиеся (интактные) Т-клетки и подсчитать общее количество Т-лимфоцитов. Количественная оценка субпопуляции CD3+ лимфоцитов имеет диагностическую значимость в следующих случаях:

    - первичные и вторичные иммунодефициты;

    - острые вирусные инфекции, включая ВИЧ;

    - внутриклеточные бактериальные и паразитарные инфекционные заболевания (например, туберкулез, лепра, лейшманиоз);

    - реакции отторжения трансплантатов и болезни "трансплантат против хозяина";

    - лимфопролиферативные расстройства (острый Т-лимфобластный лейкоз).

    При сахарном диабете довольно часто наблюдается снижение у больных процентного содержания и абсолютного числа СD3+ лимфоцитов.

    СD4

    Использование МКА к CD4 антигену дает возможность количественно охарактеризовать особый клон клеток, получивших название Т-хелперов/индукторов. СD4+ клетки в функциональном отношении делятся на два вида хелперных лимфоцитов: Т-хелперы 1-го порядка (Th1-клетки) и 2-го порядка (Th2-клетки). Различные CD4+ Т-клетки продуцируют разные наборы цитокинов. Th1-клетки (их называют еще клетками гиперчувствительности замедленного типа – ГЗТ) – цитокины для клеточного иммунного ответа: интерлейкин 2 (IL-2), IL-3, g-IFN, TNF-a, TNF-b, - среди которых дискриминантным цитокином является g-IFN. Th2 секретируют набор цитокинов, необходимый для гуморального иммунного ответа: IL-3, 4, 5, 6, 10, 13, TNF-b, - среди которых дискриминантным цитокином является IL-4.

    Определение количества CD4+ клеток имеет значение в диагностике состояний, связанных с дефектами антителопродукции и реакций клеточноопосредованного иммунитета. Показателю числа CD4+ клеток отводится решающая роль для прогноза течения ВИЧ-инфекции.

    Функциональное состояние CD4+ лимфоцитов тестируют по цитокиновому профилю: функциональная полноценность Th1-клеток подтверждается по секреции g-IFN, а Th2-клеток – по секреции IL-4.

    СD8

    Дифференцировочная молекула CD8 представляет собой гликопротеин, обнаруживаемый на поверхности тимоцитов и Т-лимфоцитов и участвующий в распознавании антигенных пептидов в контексте с молекулами главного комплекса гистосовместимости (MHC) класса I.

    Клиническая значимость определения количества СD8+ лимфоцитов:

    При аутоиммунных тиреоидитах, в частности при диффузном токсическом зобе (ДТЗ), в реакциях клеточного иммунитета отмечается снижение субпопуляции CD8+ лимфоцитов и снижение функциональной активности цитотоксических лимфоцитов.

    При сахарном диабете также отмечается уменьшение функциональной активности и количества CD8+ лимфоцитов.

    Снижение фракции СD8+ лимфоцитов наблюдается также у больных с первичной хронической недостаточностью коры надпочечников (болезнь Аддисона).

    Анти-HLA-DR

    Молекула HLA-DR также является маркером активации и принадлежит к МНС II класса. Она представляет собой трансмембранный гликопротеин, состоящий из a- и b-субъединиц, имеющих молекулярный вес 36 и 27 кД. Анти-HLA-DR реагирует только с эпитопом HLA-DR и не имеет перекрестных реакций с молекулами HLA-DQ и HLA-DP. Он экспрессируется на В-лимфоцитах, моноцитах, макрофагах, активированных Т-лимфоцитах.

    Имеются данные о том, что молекула HLA-DR экспрессируется примерно на 10 % Т-лимфоцитах ПК, однако при активации клеток митогеном количество и плотность ее экспрессии резко возрастает. Существует предположение, что молекула HLA-DR на Т-клетках может выступать в качестве рецептора, участвующего в трансдукции сигнала активированными Т-лимфоцитами. Это наводит на мысль о ее возможной роли в качестве "профессиональной" АПК, участвующей в поддержании иммунной памяти.

    HLA-DR также может присутствовать на клетках эпителия тимуса, на клетках В-лимфоцит-зависимых полей селезенки и лимфатических узлов, В-клеточной лимфомы. Этот антиген имеет коэкспрессию с CD1а антигеном на клетках Лангерганса.

    CD25

    Антиген CD25 известен как низкоаффинный рецептор ИЛ2, имеющий молекулярную массу 55 кД.

    Молекула CD25, ассоциированная с b-цепью (CD122) и общей g-цепью (CD132), формирует высокоаффинный комплекс рецептора ИЛ-2. В процессе воспаления может вырабатываться растворимая форма ИЛ-2R. Маркер CD25 присутствует на субпопуляцях Т- и В-лимфоцитов периферической крови, в том числе на активированных макрофагах, НK. Его экспрессия резко возрастает при активации ФГА и КонА на поверхности CD3-активированных Т-лимфоцитов, на Т-клетках из смешанной культуры лимфоцитов, на инфицированных HTLV Т-лимфоцитах лейкемической линии при Т-лимфоцитарной лейкемии.

    Метод позволяет определить количественное соотношение основных популяций Т-лимфоцитов:

    • Т-лимфоциты (CD3 + CD19 - );
    • Т-хелперы/индукторы ( CD3 + CD4 + CD45 + );
    • Т-цитотоксические лимфоциты (Т-ЦТЛ) ( CD3 + CD8 + CD45 + );
    • соотношение Т-хелперы / Т-цитотоксические лимфоциты (CD3 + CD4 + / CD3 + CD8 + ).

    малые клеточные популяции, а также изучить их функциональную активность:

    Когда назначается исследование?

    Являясь реальными супрессорами, Т-регуляторные клетки играют ведущую роль во многих иммунологических процессах: регулируют Т-клеточный гомеостаз, предотвращают аутоиммунные заболевания, аллергии, гиперчувствительность, реакцию "трансплантат против хозяина". Вместе с тем регуляторные Т-клетки снижают противоопухолевый иммунитет и иммунитет к инфекциям.

    Особый интерес представляют исследования, связанные с изучением соотношения аутоактивных клонов В-клеток и регуляторных Т-клеток при различной патологии воспалительного генеза. Так, при осложненном течении ряда патологических воспалительных процессов сохранение высокого уровня Т-reg и В1- клеток к 30-м суткам характеризует сохранение напряженности воспалительного процесса и, возможно, начало формирования дефекта функционирования Т-reg клеток, которое впоследствии может привести к хронизации воспаления и к развитию аутоиммунного процесса.

    Таким образом, наличие и количественные характеристики этой популяции служат важным диагностическим признаком.

    Рекомендовано для комплексного обследования пациентов, входящих в группу риска по четырем основным иммунопатологическим синдромам.

    С инфекционным синдромом:

    • частые ОРВИ, хронические инфекции ЛОР-органов (гнойные синуситы, отиты, периодически встречающиеся лимфадениты, пневмонии с тенденцией к рецидивированию, бронхоплевропневмонии);
    • бактериальные инфекции кожи и подкожной клетчатки (пиодермии, фурункулез, абсцессы, флегмоны, септические гранулемы, рецидивирующий парапроктит у взрослых);
    • урогенитальные инфекции;
    • грибковые поражения кожи и слизистых оболочек, кандидоз, паразитарные инвазии;
    • рецидивирующий герпес различной локализации;
    • гастроэнтеропатия с хронической диареей неясной этиологии, дисбактериозом;
    • длительный субфебрилитет, лихорадка неясной этиологии;
    • генерализованные инфекции (сепсис, гнойные менингиты).

    С аллергическим (атопическим) синдромом:

    • атопический дерматит;
    • нейродермит;
    • экзема с инфекционным компонентом;
    • тяжелая атопическая бронхиальная астма, поллиноз, хронический астматический бронхит.

    С аутоиммунным синдромом:

    • ревматоидный артрит;
    • рассеянный склероз;
    • диффузные заболевания соединительной ткани (системная красная волчанка, склеродермия, дерматомиозит);
    • аутоиммунный тиреоидит;
    • неспецифический язвенный колит;

    С иммунопролиферативным синдромом:

    • опухолевые процессы в иммунной системе (лимфомы, болезнь Ходжкина, острый и хронический лимфолейкоз, саркома Капоши).

    Что означают результаты?

    Изменения различных клеточных популяций лимфоцитов в сторону повышения или понижения развиваются при различных патологических процессах в организме, таких как инфекции, аутоиммунные и онкологические заболевания, иммунодефициты, в постоперационном периоде, при трансплантации органов.

    Ниже представлена таблица с клиническими ситуациями, которые могут приводить к изменениям в субпопуляционном составе лимфоцитов.

    Субпопуляция лимфоцитов

    Повышение показателя

    Снижение показателя

    T-лимфоциты (CD3 + CD19 - )

    • Острые и хронические инфекции;

    • длительный прием лекарственных препаратов (особенно монотерапия);

    • прием биологически активных добавок;

    • интенсивные занятия спортом;

    • Некоторые виды инфекций;

    • алкогольный цирроз печени;

    • прием иммуносупрессивных препаратов.

    Т-хелперы (CD3 + CD4 + CD45 + )

    • Ряд аутоиммунных заболеваний;

    • отдельные Т-клеточные лейкозы;

    • отравление солями бериллия.

    • Иммунодефицитные состояния (основной лабораторный признак вторичного иммунодефицита);

    • алкогольная болезнь печени;

    • прием иммуносупрессивных препаратов или стероидов.

    Т-цитотоксические лимфоциты (CD3 + CD8 + CD45 + )

    • Некоторые вирусные инфекции;

    • ряд Т-клеточных лейкозов;

    • острая фаза аллергии;

    • ряд аутоиммунных патологий.

    • Некоторые виды аутоиммунных, аллергических заболеваний;

    T-reg. (регуляторные Т-клетки (CD4+CD25brightCD45+)

    (сахарный диабет 1-го типа, рассеянный склероз, ревматоидный артрит, аутоиммунный тиреоидит, неспецифический язвенный колит, болезнь Крона, миастения);

    • аллергические заболевания (бронхиальная астма, атопический дерматит, пищевая аллергия).

    Активированные Т-лимфоциты (CD3+HLA-DR+CD45+)

    • алкогольный цирроз печени;

    Не имеют диагностического значения.

    В совокупности с клиническими данными, симптоматикой, другими методами лабораторных исследований вышеуказанные изменения являются диагностическим признаком возникновения этих патологических процессов в организме человека.

    Читайте также: