Лабораторная диагностика инфекций вызываемых neisseria gonorrhoeae

Обновлено: 22.04.2024

ГКБ № 14 им. В.Г. Короленко, Москва

Лабораторная диагностика гонореи: проблемы и пути их решения

Журнал: Клиническая дерматология и венерология. 2014;12(4): 10‑17

Сюч Н.И. Лабораторная диагностика гонореи: проблемы и пути их решения. Клиническая дерматология и венерология. 2014;12(4):10‑17.
Siuch NI. Laboratory diagnosis of gonorrhea: problems and solutions. Klinicheskaya Dermatologiya i Venerologiya. 2014;12(4):10‑17. (In Russ.).

ГКБ № 14 им. В.Г. Короленко, Москва

Гонорея - передаваемое половым путем инфекционное заболевание, вызванное гонококком (Neisseria gonorrhoeae). Род Neisseria представлен несколькими видами: N. canis, N. cinerea, N. denitrificans, N. elongate, N. flavescens, N. gonorrhoeae, N. lactamica, N. macacae, N. meningitides, N. mucosa, N. polysaccharea, N. sicca, N. subflava. Из перечисленных видов только два являются патогенными для человека - N. gonorrhoeae и N. meningitides. Другие представители рода относятся к группе условно-патогенных аэробных и факультативных анаэробных микроорганизмов, возбудителей гнойно-септических и оппортунистических заболеваний. Большинство нейссерий являются комменсалами, обитающими в ротоглотке и носоглотке. Neisseria spp. - нормальная микрофлора уретры, полости рта и ротоглотки, а также носа и кожи. В перечень лабораторных исследований при подозрении на гонококковую инфекцию включены микроскопия окрашенных препаратов и культуральное исследование. Непонимание возможностей метода световой микроскопии - причина конфликта между клиницистами и врачами лаборатории. При световой микроскопии препаратов из урогенитального тракта пациентов с подозрением на гонококковую инфекцию исследователь определяет морфологические характеристики возбудителя и его грам-принадлежность, что позволяет ему предположить наличие гонококковой инфекции, но не констатировать ее. Для видовой идентификации N. gonorrhoeae необходимо культуральное исследование.

ГКБ № 14 им. В.Г. Короленко, Москва

Гонорея - передаваемое половым путем инфекционное заболевание, вызванное гонококком (Neisseria gonorrhoeae). По данным ВОЗ [1, 2], ежегодно в мире регистрируют до 200 млн вновь заболевших гонореей. В России после некоторого снижения заболеваемости в 90-е годы ХХ столетия вновь отмечено увеличение количества больных до 102,2 на 100 тыс. населения [3]. Высокие темпы роста заболеваемости гонореей одновременно были отмечены в Эстонии, Болгарии, Чехии и ряде других стран. По данным литературы [4], в 2009 г. заболеваемость в странах, ведущих регистрацию гонореи, составила: в РФ - 48,1 на 100 тыс. населения, в США - 106 на 100 тыс. населения, в странах ЕС - 9,7 (от 27,6 в Великобритании до 1,0 в Греции) на 100 тыс. населения. В США в год официально регистрируют около 300–350 тыс. новых случаев заболевания[5].

Биоматериалом для лабораторного обследования на гонококковую инфекцию является отделяемое из уретры, влагалища, шейки матки, из прямой кишки, глаз, глотки, секрет предстательной железы, моча, кровь. Прием антибиотиков и местные процедуры прекращают за 10 дней до взятия материала на исследование. У женщин рекомендуется брать материал перед менструацией. Перед взятием материала необходимо воздержаться от мочеиспускания в течение 3-4 ч и половых отношений, а также туалета наружных половых органов и спринцевания. Исследуемый материал не должен содержать примесей крови [8] .

Оптимальным с точки зрения клинициста в лабораторной диагностике гонореи является использование простых отборочных тестов. Метод световой микроскопии наиболее удовлетворяет этим требованиям: клиницистов по причине оперативности получения результата, врачей клинической лабораторной диагностики благодаря простоте выполнения, а больных - из-за доступной стоимости. При этом не учитывается низкая чувствительность метода для биоматериала из цервикального канала (фарингиальные и ректальные пробы не используют для микроскопического исследования), а также в случаях ранней диагностики гонореи, бессимптомной инфекции и для некоторых вариантов гонококков.

Для диагностики гонококковой инфекции применяется несколько вариантов окраски препаратов для световой микроскопии: метиленовым синим (обзорный препарат позволяет выявить признаки воспаления и описать морфотипы бактерий) и по методу Грама, для определения грам-принад­лежности диплококков. Дополнительно к классическим методам окраски при подозрении на гонококковую инфекцию согласно приказу МЗ СССР №936 от 12.07.85 используют окраску эозином с метиленовым синим (для выявления наряду с диплококками, морфологически сходными с гонококками, трихомонад и эозинофилов), а также бриллиантовым зеленым (для выявления трихомонад).


При световой микроскопии все виды рода Neisseria обладают одинаковыми морфологическими характеристиками: форма клеток - кокки, расположение клеток парами (кроме N. elongate, представленной в виде коротких цепочек, часто диплобацилл). Диплококки, морфологически сходные с гонококками, определяются в виде парных кокков, имеющих форму кофейных зерен, обращенных друг к другу вогнутыми сторонами, негативных при окраске по методу Грама. Диплококки располагаются внутриклеточно (внутри сегментоядерных лейкоцитов), в слизи, на эпителиальных клетках. Внутри лейкоцита - парами, группами, под разными углами друг к другу, а на эпителиальных клетках (внеклеточно) - в большом количестве рядами, перпендикулярно друг к другу внутри ряда (рис. 2). Рисунок 2. Грамотрицательные диплококки, морфологически сходные с гонококками, расположенные внеклеточно (ув. ×1000).

Нередко в представлении врачей клинической лабораторной диагностики существует уверенность в том, что морфологическими признаками гонококковой инфекции является исключительно внутриклеточное расположение грамотрицательных диплококков. Так ли это? По данным литературы [9], для возбудителя гонореи характерно внутриклеточное расположение возбудителей в сегментоядерных лейкоцитах на всех стадиях болезни. В период первых клинических проявлений при наличии скудного слизисто-гнойного отделяемого гонококки обнаруживаются преимущественно на поверхности эпителиальных клеток в виде кокков, реже - тетракокков. В разгар заболевания, при обильном гнойном отделяемом, внутриклеточные диплококки доминируют. По мере снижения остроты процесса число внутриклеточных гонококков уменьшается и увеличивается их количество на поверхности эпителиальных клеток. Частота внутри- и внеклеточно расположенных гонококков зависит от периода заболевания. Характерным для гонореи является незавершенная фагоцитарная реакция, при которой микроорганизмы находят благоприятные условия для внутриклеточной персистенции. Кроме полинуклеаров, в фагоцитозе принимают участие макрофаги, эпителиальные клетки, а также лимфоциты. Последние обладают миграционным циклом и способствуют генерализации инфекции.

Следовательно, при световой микроскопии препаратов урогенитального тракта пациентов с подозрением на гонококковую инфекцию исследователь определяет морфологические характеристики возбудителя и его грам-принадлежность, что позволяет предположить наличие гонококковой инфекции, но не констатировать ее. Только три признака - форма (диплококки в форме кофейного зерна), локализация (преимущественно внутри лейкоцитов и на эпителиальных клетках), грам-принадлежность - позволяют предположить наличие гонококковой инфекции [10].

По данным литературы [11], чувствительность метода микроскопии препаратов отделяемого из уретры мужчин при окраске по Граму колеблется от 50 до 75% при бессимптомной инфекции - до 95% при выраженных проявлениях; у женщин - от 20% для материала из уретры до 37-50% для материала из половых путей. Чувствительность первичной микроскопии повышается до 97,3%, а специфичность - до 99,6 % при использовании комбинации метиленового синего и генцианового фиолетового, но только в отношении материала, полученного от мужчин [12]. Для снижения вероятности ложных результатов рекомендуют проведение повторной микроскопии. Микроскопия не рекомендована для материала из ротоглотки. Также метод имеет низкую чувствительность при исследовании ректальных мазков, полученных от женщин без проявления инфекции.

По данным Федеральной системы внешней оценки качества, за период с 2007 по 2010 г. ложноположительные результаты при выявлении возбудителей гонореи в препаратах отделяемого слизистой оболочки урогенитального тракта методом микроскопии наблюдались в 5,7% случаев, ложноотрицательные - в 0,5%. Причинами ошибок на аналитическом этапе являются неудовлетворительное качество мазков (43,4%), связанное с ошибками при фиксации препаратов, неравномерностью их окраски, наличием толстых участков с непрокрашенными клетками, недо- или переобесцвечиванием, а также нарушение методологии, когда часть лабораторий окрашивает препараты только метиленовым синим, хотя данный вид окрашивания не позволяет провести дифференциацию микроорганизмов по тинкториальным свойствам [13].

Согласно лабораторным критериям диагноза гонореи, принятым Европейским союзом (2002 г.), помимо обнаружения грам-отрицательных внутриклеточных диплококков в мазках из уретры мужчин, для постановки диагноза гонореи необходимо выделить N. gonorrhoeae и выявить антиген или нуклеиновую кислоту N. gonorrhoeae в клинических образцах. Для этого применяют культуральное исследование, включающее выделение и идентификацию гонококков в чистых культурах на специальных средах с обязательным проведением цитохромоксидазного теста, изучением сахаролитических свойств возбудителя, определением бета-лактамазной активности и чувствительности к антибиотикам, а согласно клиническим рекомендациям 2012 г., еще и МБМ. При исследовании выросших культур в мазках, окрашенных по модифицированному способу Грама, в случае правильной окраски в центре скоплений из оранжево-красных микроорганизмов наблюдаются группы кокков или отдельные участки мазков, окрашенные в фиолетовый цвет. Необходимо учитывать морфологию, расположение и окраску гонококков. Они представляют собой, главным образом, не парные, а отдельные кокки, собранные в скопления с более плотным центром и как бы беспорядочно рассыпанные по периферии. Наряду с интенсивно окрашенными в оранжево-красный цвет кокками встречаются бледно окрашенные формы, а также особи неправильных округлых очертаний. Полиморфизм гонококков увеличивается по мере старения культуры. Гонококки не образуют в культуре цепочек и гроздей, что свойственно стрептококкам и стафилококкам.

В процессе роста гонококки вырабатывают фермент - цитохромную оксидазу. Колонии гонококка окрашиваются в розовый, а затем в красный цвет и черный цвет уже через несколько минут после воздействия диметилпарафенилендиамина. Окраска происходит даже в тех случаях, когда колонии гонококка находятся под колониями других микроорганизмов.

Гонококковые колонии всегда оксидазоположительные, но оксидазоположительными могут быть и другие бактерии, вырабатывающие в процессе своей жизнедеятельности цитохромную оксидазу. Поэтому такие колонии микроорганизмов обязательно нужно исследовать при окраске по модифицированному способу Грама.

Ошибками на аналитическом этапе при культуральном исследовании являются: сокращение алгоритма идентификации гонококков до определения оксидазной активности и окраски по Граму, а также ферментация глюкозы до кислоты. Несмотря на то что по ряду причин чувствительность однократного посева может не достигать 40%, в России однократный отрицательный ответ при микроскопии и посеве нередко служит основанием для выдачи окончательного отрицательного ответа.

При культуральной диагностике гонококковой инфекции затруднения возникают на этапе выделения штаммов, слабо ферментирующих глюкозу, а также сахарозоотрицательных штаммов N. subflava, N. meningitidis и глюкозоположительных штаммов N. cinerea. Поскольку непатогенные нейссерии, такие как N. cinerea, N. sicca, N. subflava, N. mucosa, напоминают рост N. gonorrhoeae, использование хромогенных сред не помогает в дифференциальной диагностике. Некоторые штаммы N. gonorrhoeae (они получили название ауксотипов), нуждаются в дополнительных веществах при культивировании на питательных средах. На сегодняшний день их известно около 30. Самым распространенным является ауксотип AHU, так как ему требуется аргинин, гипоксантин и урацил. Этот тип характеризуется высокой чувствительностью к пенициллину и часто бывает причиной бессимптомного инфицирования мужчин [6].

Рекомендуемые для диагностики гонореи молекулярно-биологические методы (КР-2012) также имеют ряд ограничений: полимеразную цепную реакцию (ПЦР) для детекции ДНК или рРНК нельзя использовать при исследовании материала из зева и прямой кишки, а также для постановки диагноза у детей и контроля лечения; ложноотрицательный результат дают штаммы с продукцией β-лактамаз. Описаны случаи ложноположительного результата при тестировании образцов, содержащих N. subflava [14].

Тест амплификации нуклеиновых кислот (АНК) превосходит по чувствительности ПЦР и характеризуется одинаково высокой чувствительностью (более 96%) как при наличии симптомов, так и при бессимптомном течении инфекции у мужчин и у женщин [15]. Метод АНК используют для поиска возбудителя, в том числе и в моче, преимущественно у мужчин. Кроме того, доказана его эффективность для одновременной детекции гонококков и хламидий. Для исключения ложноотрицательных результатов из-за присутствия в материале ингибиторов амплификации требуется постановка контролей. Положительный результат теста в экстрагенитальном материале при низком уровне заболеваемости гонореей на территории требует подтверждения другим методом.

Анализ результатов культурального исследования отделяемого урогенитального тракта и материала из зева у пациентов Городской клинической больницы №14 им. В.Г. Короленко за 7 лет показал, что из 18 образцов, в которых были выявлены нейссерии, патогенные штаммы N. gonorrhoeae идентифицированы в 10 случаях (локализация: уретра - 5, цервикальный канал - 2, влагалище - 2, зев - 1), N. menengitidis - в 2 случаях (локализация в уретре). Непатогенные виды нейссерий выявлены в 6 случаях: N. mucosa - 1 (уретра), N. perflava - 3 (уретра), N. flava - 1 (влагалище), N. elongate - 1 (уретра). Следовательно, метод световой микроскопии препаратов, окрашенных по Граму, не может быть использован в качестве единственного для диагностики гонореи, поскольку не дает видовой идентификации микроорганизма.

Данных анамнеза, клинической картины и положительных результатов микроскопии достаточно для установления диагноза гонореи только у мужчин с клиническими симптомами уретрита (Рекомендации Европейского союза, 2002). При исследовании биоматериала от женщин, детей, в случаях сексуального насилия, при исследовании материала из ротоглотки, конъюнктивы, прямой кишки необходимо проведение бактериологического исследования для идентификации N. gonorrhoeae.

Лабораторные критерии диагноза гонореи, принятые Европейским союзом (2002), включают обнаружение грамотрицательных внутриклеточных диплококков в мазках из уретры мужчин, выделение N. gonorrhoeae из клинического образца, выявление антигена или нуклеиновой кислоты N. gonorrhoeae. В случае обнаружения грамотрицательных диплококков препараты сохраняют в течение 3 мес.

Поскольку не существует тестов со 100% чувствительностью и специфичностью, для диагностики гонококковой инфекции необходимо проведение комплексного лабораторного обследования пациентов. Учитывая, что большинство лабораторий используют только бактериоскопию, качество диагностики гонореи находится на низком уровне.

Выводы

1. Для массового скрининга на гонорейную инфекцию на сегодняшний день оптимально использование комбинации лабораторных методов: микроскопии материала с окраской по Граму и культурального исследования при условии проведения внутрилабораторного контроля качества.

2. Световая микроскопия позволяет только предположить наличие Neisseria spp. в исследуемом образце, но не позволяет провести видовую идентификацию N. gonorrhoeae.

3. Выявление диплококков, морфологически сходных с гонококками при световой микроскопии, в сочетании с данными анамнеза и клинической картиной позволяет диагностировать гонорею при наличии клинических симптомов уретрита только у мужчин.

4. Видовая идентификация N. gonorrhoeae возможна только при бактериологическом и молекулярно-биологическом исследовании.

Исследование проводят методом посева на плотные питательные среды. Идентификацию проводят с помощью анализатора Vitek 2, bioMerieux, Франция. Определение чувствительности к антимикробным препаратам проводят диско-диффузионным методом с использованием анализатора ADAGIO, BIO-RAD, Франция.

  • отделяемое половых органов;
  • отделяемое прямой кишки;
  • отделяемое ротоглотки;
  • пункционная жидкость.

Внимание! Стоимость исследования указана для одной локализации. Обращаем внимание на необходимость предварительного приобретения в любом медицинском офисе ИНВИТРО стерильного контейнера с транспортной средой, используемой при взятии мазков.

Гонококковая инфекция – одна из наиболее распространенных инфекций, передаваемых половым путем (ИППП), вызывается гонококками (Neisseria gonorrhoeae) – грамотрицательными диплококками, представляющими собой бобовидной формы, неподвижные, не образующие спор гноеродные бактерии.

У мужчин заболевание чаще всего проявляется острым уретритом, тогда как у женщин гонококковая инфекция в большинстве случаев вызывает эндоцервицит. Бессимптомное течение встречается нередко – у мужчин до 10–20% случаев, a у женщин – до 50%.

Диагноз устанавливается только на основании лабораторного подтверждения наличия Neisseria gonorrhoeae в исследуемом биологическом материале. Согласно данным о профиле резистентности гонококка, в Российской Федерации наблюдаются однонаправленные тенденции роста устойчивости к пенициллинам, тетрациклинам, фторхинолонам, азитромицину и в меньшей степени – к спектиномицину. Лечение гонококковой инфекции препаратами, не вошедшими в клинические рекомендации (пенициллинами, тетрациклинами, фторхинолонами, азитромицином) возможно только при доказанной чувствительности выделенного клинического изолята к ним.

Выделяемые микроорганизмы и возбудители:

Исследование проводят с целью подтверждения этиологии ИППП, в рамках дифференциальной диагностики урогенитальных заболеваний, обусловленных патогенными (T. vaginalis, C. trachomatis, M. genitalium), условно-патогенными микроорганизмами (грибками рода Candida, микроорганизмами, ассоциированными с бактериальным вагинозом) и вирусами (вирусом простого герпеса), а также для подбора АМП, коррекции ранее назначенной антибактериальной терапии и/или оценки эффективности проведенного лечения.

Информацию из данного раздела нельзя использовать для самодиагностики и самолечения. В случае боли или иного обострения заболевания диагностические исследования должен назначать только лечащий врач. Для постановки диагноза и правильного назначения лечения следует обращаться к Вашему лечащему врачу.

Гонорея: причины появления, симптомы, диагностика и способы лечения.

Определение

Гонорея – инфекционное заболевание, вызываемое гонококками. Чаще проявляется поражением органов мочеполовой системы, реже – конъюнктивы глаз, слизистых оболочек носа и рта, глотки и миндалин, прямой кишки. Возможно тяжелое течение заболевания с вовлечением в процесс других внутренних органов и развитием системной воспалительной реакции (сепсиса).

Гонорея с равной частотой встречается как у мужчин, так и у женщин.

Заболеть можно в любом возрасте, но чаще заражение происходит в период половой зрелости, что связано с путем передачи гонококков.

Особенностью течения гонококковой инфекции является то, что у половины заболевших женщин наблюдаются слабые субъективные симптомы, это приводит к позднему обращению к врачу и развитию осложнений. У мужчин клиническая картина яркая.

Причины появления гонореи

Причиной появления гонореи являются гонококки (Neisseria gonorrhoeae) – это гноеродные бактерии, имеющие форму бобов. Источник инфекции – больной человек.

Гноеродные бактерии.jpg

Новорожденные могут инфицироваться при прохождении через родовые пути больной гонореей матери, девочки младшего возраста – контактно-бытовым путем при нарушении санитарных правил и через предметы личной гигиены (мочалки, полотенца, горшки и т.д.).

Классификация заболевания

Гонорея протекает локализовано или с системными проявлениями.

Различают гонококковую инфекцию нижних отделов мочеполовой системы с поражением или без поражения придаточных желез и желез, расположенных вокруг мочеиспускательного канала, гонококковую инфекцию брюшины и органов малого таза, прямой кишки, гонорею глаз, глотки, суставов и других органов.

Выделяют свежую гонорею, давность которой не превышает двух месяцев, хроническую – протекающую дольше двух месяцев или с неизвестным сроком течения, а также скрытую (без клинических проявлений).

Симптомы гонореи

Воспалительный процесс чаще всего начинается с нижних отделов органов мочеполовой системы в виде воспаления мочеиспускательного канала (уретрита), мочевого пузыря (цистита), слизистой оболочки наружных женских половых органов и влагалища (вульвовагинита), шейки матки (цервицита).

Более половины женщин не наблюдают каких-либо симптомов. Некоторых беспокоят гнойные выделения из мочеиспускательного канала (уретры) и/или влагалища, зуд и жжение в области наружных половых органов, болезненность при мочеиспускании и во время полового акта, неприятные ощущения в нижней части живота.

Основные симптомы у мужчин: гнойные выделения из мочеиспускательного канала, учащенные болезненные мочеиспускания, зуд и жжение по ходу мочеиспускательного канала, боль при половом контакте, боль в промежности, которая отдает в прямую кишку.

Симптомы гонореи.jpg

Заболевание может распространиться на железы преддверия влагалища и железы, расположенные около мочеиспускательного канала, с формированием гнойных полостей – абсцессов.

При воспалении желез преддверия влагалища наблюдается отек и болезненность в области больших половых губ и скудные выделения из влагалища.

При поражении желез, расположенных около уретры, и мужчин, и женщин беспокоят гнойные выделения из мочеиспускательного канала, болезненность и дискомфорт в области наружного отверстия уретры, ощущения усиливаются при мочеиспускании и во время полового акта.

При восхождении инфекционного процесса может начаться воспаление других органов и тканей мочеполовой системы: у мужчин – придатков яичек (эпидидимит), яичек (орхит), предстательной железы (простатит), у женщин – внутреннего слоя матки (эндометрит), маточных труб и яичников (сальпингоофорит).

Появляются симптомы интоксикации: слабость, повышенная утомляемость, подъем температуры тела.

У мужчин при воспалении яичка и придатка яичка к симптомам поражения нижних отделов органов мочеполовой системы присоединяется покраснение, болезненность и отек в области мошонки. Боль может распространяться на промежность и паховую область. Простатит характеризуется болью в промежности, нижней части живота, боль отдает в прямую кишку, наблюдаются расстройство мочеиспускания и половая дисфункция.

У женщин при воспалении маточных труб, яичников и внутреннего слоя матки усиливаются гнойные выделения из половых путей, появляются схваткообразные и тянущие боли внизу живота, кровянистые выделения между менструациями.

При пельвиоперитоните и перитоните появляются сильная резкая боль в животе, общая слабость, тошнота, рвота, учащение сердцебиения, поднимается температура.

Гонококковая инфекция прямой кишки и области анального отверстия возникает при переносе бактерий из другой локализации (например, при контакте анального отверстия с выделениями из влагалища у женщин, при формировании отверстия в полость прямой кишки у мужчин с гнойным простатитом) или посредством генитоанального полового контакта.

Больного беспокоят зуд и жжение в области анального отверстия, выделения из прямой кишки гнойного характера (могут быть с примесью крови), боль при дефекации, запоры.

Гонококковое поражение проявляются конъюнктивитом (воспалением ткани, покрывающей глазное яблоко снаружи и веки изнутри) и/или иридоциклитом (воспалением радужки и цилиарного тела, расположенного за ней). Конъюнктивит новорожденных имеет отдельное название - гонококковая офтальмия. Гонококки попадают в глаза из первичного очага инфекции, расположенного в другом органе, чаще при несоблюдении правил личной гигиены, реже с током крови или по лимфатическим путям.

Возникает сильная боль и резь в больном глазу, веко отекает, наблюдается слезотечение, светобоязнь, появляется гнойное отделяемое в углах глаза.

Гонококковый фарингит (воспаление глотки), а также инфицирование других структур ротовой полости – миндалин, язычка, небных дужек, языка и т.д. возникают в результате орогенитального контакта. Наблюдается боль в горле, усиливающаяся при глотании, сухость во рту, осиплость голоса.

Редко, при тяжелом течении заболевания у людей с ослабленным иммунитетом гонококки попадают в кровь и разносятся по организму, развивается системная воспалительная реакция (сепсис). Бактерии могут проникнуть в суставы, кости, мозг и мозговые оболочки, сердце, легкие, вызывая их гнойное воспаление.

Гонорея новорожденных протекает тяжело, с вовлечением в процесс глаз, носа, мочеполовых органов, часто развивается сепсис и менингит (воспаление мозговых оболочек).

Диагностика гонореи

Диагностика гонореи проводится лицам с признаками гонококкового воспаления в органах мочеполовой системы, прямой кишке, ротовой полости, глотке, на слизистой глаз. Параллельно обследуют половых партнеров.

Исследование выполняют тем, кому не удается зачать ребенка, кому предстоит операция любого объема на половых органах и органах малого таза, женщинам при планировании и во время беременности.

Диагноз устанавливают на основании результата следующих лабораторных исследований:

  • микроскопия мазка (метод наиболее достоверен при исследовании выделений из уретры у мужчин с явными симптомами гонореи);
  • посев на гонококк с определением чувствительности к антибиотикам (материалом является соскоб или мазок с пораженного органа);

Материал для исследования: отделяемое половых органов; отделяемое прямой кишки; отделяемое ротоглотки; пункционная жидкость. Внимание! Стоимость исследования указана для одной локализации. Обращаем внимание на необходимость предварительного приобр.

Гонококковая инфекция – инфекционное заболевание человека, вызываемое гонококками (Neisseria gonorrhoeae) - Грам-отрицательными диплококками, представляющими собой бобовидной формы, неподвижные, не образующие спор гноеродные бактерии /1,2/.

А54.0 Гонококковая инфекция нижних отделов мочеполового тракта без абсцедирования периуретральных или придаточных желез (цервицит, цистит, уретрит, вульвовагинит).

А54.1 Гонококковая инфекция нижних отделов мочеполового тракта с абсцедированием периуретральных или придаточных желез.

А54.2 Гонококковый пельвиоперитонит и другая гонококковая инфекция мочеполовых органов (Воспалительные заболевания органов малого таза - ВЗОМТ у женщин, эпидидимит, орхит, простатит).

А54.4 Гонококковая инфекция костно-мышечной системы (артрит, бурсит, остеомиелит, синовит, теносиновит).

А54.8 Другие гонококковые инфекции (абсцесс мозга, эндокардит, менингит, миокардит, перикардит, перитонит, пневмония, сепсис, поражение кожи).

А 54.9 Гонорея неуточненная


Пользователи протокола: дерматовенерологи, гинекологи, урологи, врачи общей практики, педиатры, терапевты.

Классификация

Диагностика

II. МЕТОДЫ, ПОДХОДЫ И ПРОЦЕДУРЫ ДИАГНОСТИКИ И ЛЕЧЕНИЯ

- Общеклиническое исследование урогенитального мазка (окраска метиленовым синим и/или по Граму) на другие ИППП (до начала терапии и после лечения 2 раза);

- Бактериологическое исследование биологического материала на Neisseria gonorrhoeae ручным методом (выделение чистой культуры) (до начала терапии и после лечения 2 раза);

- Бактериологическое исследование биологического материала на Neisseria gonorrhea на анализаторе (до начала терапии и после лечения 2 раза);

Минимальный перечень обследования, который необходимо провести при направлении на плановую госпитализацию: госпитализация не проводится.

Основные (обязательные) диагностические обследования, проводимые на стационарном уровне: госпитализация не проводится.


Дополнительные диагностические обследования, проводимые на стационарном уровне: госпитализация не проводится.

Диагностические мероприятия, проводимые на этапе скорой неотложной помощи: не проводится.

- болезненность при мочеиспускании (диспареуния), болезненность во время половых контактов (дизурия);

- дисфункциональные маточные кровотечения;
У более 50% женщин при поражении нижних отделов мочеполового тракта отмечается бессимптомное течение инфекции.

- учащенное мочеиспускание и ургентные позывы на мочеиспускание (при проксимальном распространении воспалительного процесса);

- болезненность при мочеиспускании (диспареуния), болезненность во время половых контактов (дизурия);


Как у женщин, так и мужчин при диссеминированной инфекции наблюдается симптомы общей интоксикации: повышение температуры тела; общая слабость и утомляемость; петехиальная (пустулезная) сыпь на коже; асиметричная артралгия и тендосиновит. Очень редко наблюдаются менингит или эндокардит.

У более 85% лиц обоего пола отмечается бессимптомное течение проктита, фарингита - у более 90%.

- гиперемия и отечность слизистой оболочки наружного отверстия мочеиспускательного канала, инфильтрация стенок уретры, слизистое или слизисто-гнойное уретральное отделяемое;

- гиперемия слизистой оболочки вульвы, влагалища; слизисто-гнойные выделения в заднем и боковых сводах влагалища и из цервикального канала.

Для детей характерна выраженная клиническая картина и многоочаговость поражения. У младенцев, рожденных инфицированными матерями, возможно инфицирование и развитие конъюнктивита.

- время, прошедшее с момента сексуального контакта (от 1 суток до 1 месяца (в среднем, 2-7 суток) с предполагаемым источником заражения

У женщин при этом поражаются наружные половые органы (половые губы, клитор), слизистая влагалища и шейки матки, полость матки, яичники, маточные трубы;

У мужчин поражается уретра, мочевой пузырь, предстательная железа, семенники, кожа полового члена, внутренний и наружный листок крайней плоти, мошонка, лобок, промежность;

У лиц обоего пола при гонорее инфицируются миндалины, слизистые полости рта, область ануса, прямая кишка.

- гиперемия и отечность слизистой оболочки наружного отверстия мочеиспускательного канала, инфильтрация стенок уретры, слизисто-гнойное или гнойное уретральное отделяемое;

- гиперемия и отечность слизистой оболочки вульвы, влагалища, слизисто-гнойные или гнойные выделения в заднем и боковых сводах влагалища;

- эндоцервикальные язвы, рыхлость и отек шейки матки, слизисто-гнойные или гнойные выделения из цервикального канала;

- гиперемия и отечность слизистой оболочки наружного отверстия мочеиспускательного канала, инфильтрация стенок уретры;

- увеличение и болезненность предстательной железы при пальпации.

- Общеклиническое исследование урогенитального мазка (окраска метиленовым синим и/или по Граму): обнаружение в биологическом материале Neisseria gonorrhea;

- Бактериологическое исследование биологического материала на Neisseria gonorrhoeae ручным методом (выделение чистой культуры): обнаружение в биологическом материале Neisseria gonorrhea;

- Бактериологическое исследование биологического материала на Neisseria gonorrhea на анализаторе: обнаружение в биологическом материале Neisseria gonorrhea;

- Определение гонококка в биологическом материале в реакции иммунофлюоресценции: обнаружение антигена и антител к Neisseria gonorrhea.

- Цистоуретроскопия: обнаружение воспалительной реакции слизистой уретры – эрозии, язвы, инфильтрация, стриктуры;

- Консультация неонатолога, педиатра – с целью уточнения объема и характера дополнительного обследования;

Дифференциальный диагноз


Дифференциальный диагноз проводят с другими специфическими урогенитальными инфекциями, обусловленными патогенными (C. trachomatis, T. vaginalis, M genitallium) и условно-патогенными микроорганизмами (грибы рода Candida, микроорганизмами, ассоциированными с бактериальным вагинозом) и вирусами (вирусом простого герпеса).

Лечение


Таблица 4. Антибактериальная терапия гонококкового уретрита, эндоцервицита, проктита, фарингита, конъюнктивита (взрослые и дети с массой тела > 45 кг)[6,7,8,9,10,11,12]:

Рекомендуемой и общепринятой тактикой лечения неосложненной гонореи нижних отделов мочеполовой системы является назначение АМП непосредственно во время первого визита пациента к врачу. При этом используются основные (выбора) схемы терапии, предусматривающие однократное применение антибиотика. Цефтриаксон в однократной в/м дозе 250 мг обеспечивает высокую и стойкую бактерицидную концентрацию в крови. Цефтриаксон является эффективным и безопасным препаратом для лечения неосложненной гонореи любой локализации (99,2% эффективность в терапии неосложненного уретрита и проктита; 98,9% - в терапии фарингита) [13,14].

Системную антибактериальную терапию можно сочетать с промыванием пораженного глаза стерильным физиологическим раствором [15].

- Цефиксим (таблетки 200, 400 мг);  Спектиномицин (порошок для приготовления суспензии для в/м введения 2000 мг: фл. в компл. с растворителем);
- Цефотаксим (порошок для приготовления р-ра для в/в и в/м введения 500 и 1000 мг во флаконе).

Перечень дополнительных лекарственных средств (менее 100% вероятности применения): нет.

Терапия сопутствующей хламидийной инфекции у больных гонореей Пациенты, инфицированные гонореей, нередко бывают инфицированными C. trachomatis. В случае лабораторного подтверждения C. trachomatis как коинфекции, оправдано назначение азитромицина в терапии неосложненной гонореи в сочетании с неосложненным хламидиозом. Однако предпочтительным все же является назначение цефтриаксона и антибиотика из группы макролидов (препараты выбора) или доксициклина в соответствующих дозах [16,17,18].

Гонококковая инфекция у детей встречается крайне редко. Наиболее частой причиной ее развития у детей, преимущественно в препубертатном и пубертатном возрасте является сексуальное насилие.


Самым распространенным клиническим проявлением N. Gonorrhoeae у девочек доподросткового периода является вагинит. Воспалительные заболевания органов малого таза, вызванные N. Gonorrhoeae у детей встречаются значительно реже, чем у взрослых. У детей, подвергшихся сексуальному насилию, распространенными формами инфекции являются гонококковый проктит и фарингит, которые часто протекают бессимптомно.


Как указывалось ранее, для терапии гонореи у детей с массой тела более 45 кг следует использовать основные и альтернативные схемы терапии, рекомендованные для лечения гонореи у взрослых. Для терапии неосложненного гонококкового вульвовагинита, эндоцервицита, уретрита, фарингита и проктита у детей с массой тела менее 45 кг используют основную схему выбора:


При непереносимости к антибиотикам цефалоспориного ряда в качестве альтернативного антибиотика может использоваться:


В то же время эта схема может оказаться недостаточно эффективной при лечении гонококкового фарингита.

Цефтриаксон является антибиотиком выбора для терапии любых форм гонореи у детей. Другой антибиотик из группы цефалоспоринов третьего поколения цефотаксим может применяться только для лечения гонококкового конъюнктивита.

Все дети должны быть обязательно обследованы на сифилис и хламидийную инфекцию.

Инфекция, вызванная N. Gonorrhoeae у новорожденных возникает в результате контакта новорожденного с гнойным экссудатом шейки матки во время прохождения через родовые пути. Чаще болезнь протекает остро и проявляется клиническими симптомами уже на 2-5 сутки после рождения.

Распространенность гонореи у новорожденных коррелирует с распространенностью гонореи среди беременных, степени охвата их скринингом на инфекцию.

Наиболее тяжелыми проявлениями гонококковой инфекции у новорожденных являются офтальмобленнорея и сепсис, включая такие осложнения как артрит и менингит. К другим, менее тяжелым формам гонореи у новорожденных относятся вагинит, уретрит, ринит.

Несмотря на редкую встречаемость гонококкового конъюнктивита, новорожденных его своевременная терапия является особенно актуальной задачей, поскольку это заболевание может приводить к перфорации роговицы, а в конечном итоге – к полной потере зрения.


Новорожденные, которым не проводилась профилактика конъюнктивита в родильном доме и матери которых во время беременности не проходили медицинское обследование, относятся к группе повышенного риска развития офтальмобленнореи. В данную группу входят также те новорожденные, матери которых имеют в анамнезе ИППП, или злоупотребляют наркотиками.


Предварительный диагноз гонококкового конъюнктивита новорожденных, основанный на обнаружении в мазках отделяемого из конъюнктивы внутриклеточных грамотрицательных диплококков, является основанием для назначения эмпирической терапии. Целесообразность эмпирической терапии должна подтверждаться последующим обязательным выделением N. Gonorrhoeae из соответствующего клинического материала с определением чувствительности выделенных штаммов N. Gonorrhoeae к АМП. Одновременно эти новорожденные должны быть обследованы на C. trachomatis.

Превентивная терапия гонореи может быть рекомендована новорожденным из группы повышенного риска, а также новорожденным с конъюнктивитом, у которых в мазках отделяемого из конъюнктивы не обнаруживаются гонококки.

- Цефтриаксон в/м или в/в из расчета 25-50 мг/кг массы тела однократно. Максимальная доза препарата - 125 мг.


Проведение системной терапии цефтриаксоном у новорожденных с гонококковым конъюнктивитом не требует одновременного использования топического антибиотика, а назначение только местных форм АМП неэффективно.

При отсутствии клинического улучшения необходимо провести лабораторное обследование на наличие сопутствующей инфекции, вызванной C. trachomatis как у новорожденного, так и у его матери. Матери новорожденных больных гонореей, а также их половые партнеры должны пройти обследование, а при необходимости – и лечение в соответствие с рекомендациями по терапии гонореи у взрослых.

Новорожденным при отсутствии у них симптомов гонококковой инфекции, рожденных от матерей, больных гонореей и не получавших специфического лечения, следует провести превентивную терапию.

- Цефтриаксон в/м или в/в из расчета 25-50 мг/кг массы тела однократно. Максимальная доза препарата – 125 мг.


Дополнительного наблюдения за новорожденными, получивших превентивную терапию не требуется. И маму и новорожденного необходимо обследовать на C. trachomatis.

Матери новорожденных, больные гонореей и их половые партнеры должны пройти обследование, а при необходимости – лечение в соответствии с рекомендациями по терапии гонореи у взрослых.

Оптимальным методом профилактики инфекций, вызванных C. trachomatis и N. Gonorrhoeae у новорожденных является своевременное их выявление и лечение у беременных женщин. Новорожденным, родившимся от материей не обследованных на гонорею во время беременности проводятся профилактические мероприятия, включающие обработку очагов.


Каждый из рекомендуемых профилактических режимов позволяет предупредить развитие гонококкового конъюнктивита новорожденных. Рекомендованные средства профилактики:

Следует обработать оба глаза новорожденного сразу после родов. Если профилактика не была произведена в родильном зале, то ее обязательно следует провести в последующем как можно в более ранние сроки. При этом профилактика конъюнктивита осуществляется как детям, родившимся естественным путем, так и детям, родившимся путем кесарева сечения. Наиболее предпочтительным считается использование одноразовых пипеток или ампул.

Другие виды лечения: нет.

Хирургическое вмешательство: не проводится.

- Массовая профилактическая пропаганда, предусматривающая понятие личной и общественной профилактике ИППП через средства массовой информации, памятки и мультимедийные программы;

- Индивидуальные консультации и профилактические беседы с родителями и учащимися старших классов по вопросам межличностных отношений, полноценной информации о сексуальных отношениях, последствий раннего начала половой жизни, нежелательной беременности, разъяснение правил безопасного секса (применение презерватива);

- В кабинетах приема врачей дерматовенерологов, акушер-гинекологов, урологов, кабинетах профилактических осмотров на предприятиях, учебных организациях консультирование по способам предотвращения или снижения риска инфицирования гонококковой инфекцией и другими ИППП;

- Подготовка волонтеров, учащихся образовательных учреждений для проведения бесед о безопасном поведении и распространении литературы информационно-образовательного характера по вопросам профилактики ИППП [1].

- при подтверждении регресса клинических симптомов и отрицательных лабораторных результатах снятие с учета.

Лабораторная диагностика гонореи проводится при помощи бактериоскопического и бактериологического анализа, реже используется серологический и иммуноферментный метод.

Гонорея – инфекционное заболевание, возбудителем которого является гонококк. Впервые гонококки были описаны немецким дерматовенерологом Альбертом Нейссером. Отсюда возбудители гонореи получили название Neisseria gonorrhoeae.

Морфология

Гонококки являются диплококками бобовидной формы и внешне напоминают кофейные зерна. Гонококки - грамотрицательные бактерии, при окрашивании по методу Грама они приобретают красный цвет. Под воздействием внешней среды (химических препаратов, лекарств) гонококки могут менять размеры и форму, становиться грамположительными. Способность гонококков менять свойства часто осложняет диагностику гонореи.

Neisseria gonorrhoeae

Культуральные свойства

Гонококки хорошо размножаются в жидких питательных средах и на плотных средах с рH от 7,2 до7,4 единиц, содержащих нативный человеческий белок (асцитную жидкость, кровь, сыворотку крови). Культивирование гонококков происходит при температуре 37 градусов Цельсия в атмосфере, содержащей 3 – 5 % углекислого газа. При дальнейшем культивировании потребность в углекислом газе отпадает.

Устойчивость во внешней среде

Во внешней среде гонококки малоустойчивы. На них пагубно влияет повышение и понижение температуры, высыхание, прямые солнечные лучи. Бактерии погибают при самых малых концентрациях дезинфицирующих средств. Но во влажной среде, например, в гное, на грязном белье они могут сохранять свою жизнеспособность до 24 часов.

Эпидемиология

Гонорея – антропогенное заболевание, передаётся только от человека к человеку. Гонорея не переносится животными. Инфекция распространяется при половых контактах, очень редко бытовыми способами, например, через грязное белье. Заболеванию подвержены люди, часто меняющие половых партнёров (девиантные, асоциальные слои населения). Заражение начинается с момента полового контакта с носителем инфекции, инкубационный период длится от одного дня до одного месяца, обычно около недели. У 70 % женщин и 10 % мужчин заболевание проходит бессимптомно.

Диагностика гонореи

Своевременная диагностика венерического заболевания позволяет остановить распространение инфекции по организму и безотлагательно начать лечение. В России порядок проведения диагностики гонореи регламентирован приказом Министерства здравоохранения РФ от 20.08.2003 № 415 и заключается в обязательном осуществлении бактериоскопического исследования с последующим бактериологическим подтверждением, которые помогают быстро определить наличие инфекции.

Бактериоскопический анализ

Бактериоскопический анализ применяют с целью изучения морфологических свойств возбудителя. Из клинического материала (например, отделяемого поражённой слизистой оболочки уретры или цервикального канала) готовят мазок, который фиксируют на стекле и окрашивают анилиновыми красителями по методу Грама.

Отдел новых технологий ФБУН НИИ эпидемиологии и микробиологии имени Пастера для проведения бактериоскопического исследования выпускает наборы реагентов для окраски по Граму в трёх разных вариантах.

  1. В состав комплекта № 1 входит фуксин Циля, окрашивающий гонококки в розовый цвет.
  2. В комплекте № 2 фуксин Циля заменен на водный раствор нейтрального красного, в результате чего грамотрицательные бактерии приобретают ярко-оранжевый цвет и хорошо видны на контрасте с фиолетовой окраской грамположительных бактерий.
  3. Наибольшую контрастность получают при применении комплекта № 3, в котором используются в качестве красителей бриллиантовый зеленый и сафранин. Грамположительные микроорганизмы приобретают зеленый цвет, а грамотрицательные – красный.

набор для окраски по Граму

Бактериоскопический метод имеет следующие недостатки:

  1. необходима высокая концентрация бактерий в исследуемом материале, не менее 10 9 КОЕ/мл, в противном случае гонококки могут быть не выявлены;
  2. при ошибках в технике окрашивания бактерии могут повести себя нетипичным образом и окраситься в другие цвета;
  3. гонококки полиморфны – они могут менять размеры и окраску под воздействием различных препаратов.

Бактериологический анализ

Для эффективной диагностики гонореи бактериоскопический анализ дополняют бактериологическим анализом, при котором исследуемый материал высевают на питательные среды для получения чистых культур возбудителя.

Отдел новых технологий ФБУН НИИ эпидемиологии и микробиологии имени Пастера выпускает набор реагентов для выделения гонококков культуральным методом - набор "СВГ". В состав набора входит основа питательной среды и лиофильно высушенная селективная и ростовая добавка. Добавка содержит необходимые для роста гонококков белки, свойственные организму человека, углеводы, аминокислоты, витамины и прочие соединения.

Селективный компонент в виде комплекса антибиотиков подавляет рост посторонней микрофлоры. Благодаря селективному компоненту на питательной среде, выпускаемой Отделом новых технологий, образуются только колонии гонококков, которые очень легко визуально обнаружить.

Бактериологическое исследование завершают проведением бактериоскопии мазков, приготовленных из выросших колоний. Также для контроля морфологии возбудителя проводят тесты для обнаружения цитохромоксидазы (оксидазный тест) и бета-лактомазы – ферментов, продуцируемых гоноккоками.

Отдел новых технологий ФБУН НИИ эпидемиологии и микробиологии имени Пастера выпускает два набора реагентов, которые обнаруживают цитохромоксидазу по методу Эрлиха и по методу Ковача. Из этих реагентов готовят рабочие растворы. Растворами обрабатывают выросшие колонии. При взаимодействии реактива Эрлиха и цитохромоксидазы колонии гонококков окрашиваются в синий цвет, при использовании реактива Ковача – в красный.

Также мы предлагаем наборы реагентов для экспресс-определения бета-лактамазы, продуцируемой гонококками. Обнаружение в исследуемом материале бета-лактамазы свидетельствует о резистентности выделенных гонококков к пенициллинам, к цефалоспоринам.

Преимущества препаратов для диагностики гонореи, выпускаемых Отделом новых технологий ФБУН НИИ эпидемиологии и микробиологии имени Пастера:

Читайте также: