Лабораторная диагностика сифилиса презентация
Обновлено: 19.04.2024
Презентация на тему: " ГБОУ ВПО РНИМУ им. Н. И. Пирогова Кафедра общей патологии МБФ Хронические инфекции СИФИЛИС Куриленко Н. С. МБФ мед. биохимия гр А." — Транскрипт:
1 ГБОУ ВПО РНИМУ им. Н. И. Пирогова Кафедра общей патологии МБФ Хронические инфекции СИФИЛИС Куриленко Н. С. МБФ мед. биохимия гр А
3 Этиология Возбудитель – бледная трепонема, открыта в 1905 г. Ф. Шаудином и Э. Гоффманом семейство Spirochaetaceae род Treponema вид Treponema pallidum подвид T. pallidum pallidum
5 Патологическая анатомия Первичный период Первичный сифилитический комплекс: - твердый шанкр на половых органах, слизистой оболочки полости рта, пальцев рук; - увеличение и уплотнение регионарных лимфатических узлов
6 Вторичный период Сифилиды – множественные воспалительные очаги на коже и слизистых оболочках: -розеолы -папулы -пустулы
7 Третичный период - Хроническое диффузное интерстициальное воспаление в печени, легких, стенке аорты и т.д.; - Образование гумм – очагов сифилитического продуктивно-некротического воспаления
8 Основные морфологические характеристики сифилитической гуммы: Некроз, окруженный соединительно-тканным валом с большим количеством плазматических клеток и лимфоидно-клеточной инфильтрацией; васкулиты в соединительно-тканной оболочке гуммы
9 Висцеральный сифилис Сифилитический мезаортит: в средней оболочке аорты инфильтрат из лимфоидных, плазматических клеток, клеток Пирогова-Лангханса
10 Нейросифилис Выделяют следующие формы поражений: Простая форма – наличие воспалительного инфильтрата в ткани мозга и его оболочках; Сосудистые поражения (облитерирующие эндартериит и эндофлебит) Прогрессивный паралич Спинная сухотка
11 Врожденный сифилис Сифилис мертворожденных недоношенных плодов; Ранний врожденный сифилис новорожденных и грудных детей Поздний врожденный сифилис детей дошкольного и школьного возраста, а также взрослых
12 Ранний врожденный сифилис
13 Поздний врожденный сифилис Триада Гетчинсона: -паренхиматозный кератит -глухота -измененные зубы
Возбудитель сифилиса
Возбудителя сифилиса — бледную трепонему (treponema pallidum) — открыли в
1905 г. Ф.Шаудин и Э. Гофман.
Бледную трепонему можно обнаружить в
отделяемом из твердых шанкров, эрозивных папул,
в лимфатических узлах,
крови больных,
всех экссудатах у больных активным вторичным сифилисом,
спинномозговой жидкости,
молоке кормящих матерей,
миндалинах и слизи пробки канала шейки матки больных скрытым
сифилисом,
в головном мозге у больных прогрессивным параличом и спинном мозге у
больных табесом.
Моча, слезы, пот, слюна бледных трепонем не содержат, но могут инфицироваться
ими в выводящих путях.
Бледная трепонема существует в трех формах: спиралевидной в виде цист и
L-форме.
При заразных формах сифилиса доминирует спиралевидная форма; число
оборотов спирали от 8 до 12, ее завитки равномерны, имеют идентичное строение.
Основным способом размножения бледной трепонемы на стадии активного роста
является поперечное деление.
Возбудитель сифилиса
У спиралевидных микроорганизмов имеются формы устойчивого размножения —
цисты, которые позволяют бледной трепонеме выживать в неблагоприятных условиях.
Возможна L-трансформация микробной клетки. При ней происходит частичная или
полная утрата клеточной стенки бледной трепонемы, снижается метаболизм и
нарушаются процессы клеточного деления.
L-формы бледных трепонем обладают незначительной патогенностью, не вызывают
явных проявлений сифилиса, но могут поддерживать серологическую резистентность.
Когда условия для жизни становятся благоприятными, L-формы реверсируют в
обычные подвижные формы и иногда вызывают рецидив болезни.
Цисты обладают антигенными свойствами, способствуют образованию в организме
человека антител, что выявляется положительными серологическими тестами.
У L-форм антигенные свойства выражены незначительно или отсутствуют, поэтому
лица, в организме которых бледные трепонемы имеют L-формы, являются
серологически негативными или у них при отрицательных стандартных
серологических реакциях могут быть положительные реакции иммобилизации
бледных трепонем (РИБТ) и реакция иммунофлюоресценции (РИФ).
Возбудитель сифилиса
Единственным резервуаром бледных трепонем в природе является больной
человек.
Бледная трепонема быстро погибает при высыхании, но на влажном белье
может жить до 11 ч.
Замороженные бледные трепонемы долго сохраняют жизнеспособность и
вирулентность. Сначала пропадает вирулентность и только потом
подвижность.
В тканях трупов бледные трепонемы могут сохранять подвижность до 48 ч.
Оптимальной температурой для трепонемы является 36,5 — 37,0 °С.
При 55 °С она погибает в течение 15 мин.
Бледная трепонема весьма чувствительна к химическим веществам и
кислороду (является факультативным анаэробом).
Иммунитет при сифилисе
При сифилитической инфекции в организме больного развивается
нестерильный инфекционный иммунитет, который возникает как ответная
реакция организма на наличие в нем возбудителя и существует до тех пор,
пока в организме находится бледная трепонема.
В ответ на присутствие бледной трепонемы (антигена) образуются антитела
— иммуноглобулины.
Гуморальный ответ на внедрение бледной трепонемы в макроорганизм
начинается с выработки специфических антител IgM. Позже нарастает
содержание IgG и IgA. Наличие специфических IgM рассматривается как
признак начала заболевания. Обнаружение трепонемоспецифичных IgM
позволяет диагностировать приобретенную инфекцию в наиболее ранние
сроки, так как эти иммуноглобулины появляются уже через 2 недели после
заражения. Выявление IgM имеет большое значение в инкубационном
периоде и на ранних этапах развития сифилитической инфекции. Доказано
несоответствие диагностической значимости IgM, выявляемых при
ИФА, при диагностике ранних и более поздних форм сифилиса. Метод
малочувствителен для вторичного рецидивного, скрытого раннего и
позднего сифилиса.
Антитела класса G появляются не ранее чем через 4 недели
после заражения.
Уровень IgG преобладает над уровнем IgM при массовой
гематогенной диссеминации бледных трепонем (вторичный
свежий сифилис).
Активация сифилитической инфекции, сопровождающаяся
рецидивом
клинических
проявлений
(вторичный
рецидивный сифилис), характеризуется максимальным
уровнем IgG и минимальным — IgM.
Латентное состояние инфекции, ассоциированное с
отсутствием каких-либо клинических проявлений и
снижением количества бледных трепонем (ранний скрытый
сифилис), вызывает подавление антителообразования.
Синтез IgG и IgM по сравнению с вторичным рецидивным
сифилисом снижается в 1,8 раза.
Ранние антитела IgM и более поздние антитела IgG направлены к
одним и тем же антигенам. По мере снижения выработки антител
IgM продукция IgG продолжается. Совместное исследование
антител, представленных этими классами, более информативно.
Установлена корреляция между содержанием и соотношением
антитрепонемных антител классов IgM и IgG с клинической
формой сифилиса.
По
мере
увеличения
сроков
давности
заболевания
иммунологическая реактивность больного изменяется:
наблюдается
постепенное
снижение
гуморального
иммунитета
повышение клеточной иммунологической реактивности.
Это подтверждается тем, что в период третичного сифилиса
развиваются специфические гранулемы (бугорки и гуммы),
являющиеся типичными проявлениями клеточных реакций
замедленного
типа.
В
этот
период
классические
серологические
реакции
нередко
могут
быть
отрицательными.
На ранних стадиях заболевания наиболее достоверным методом
диагностики сифилитической инфекции является выявление бледных
трепонем.
Наилучшим способом их обнаружения является метод исследования в темном поле
микроскопа, что позволяет увидеть трепонему в живом состоянии со всеми
особенностями ее строения и движения.
Забор материала для исследования проводится в основном с поверхности твердого
шанкра, эрозированных папул и широких кондилом. Возможно выявление трепонемы
в материалах регионарных лимфатических узлов.
Для получения тканевой жидкости поверхность шанкра осторожно очищают от
загрязнений стерильным тампоном, смоченным физиологическим раствором. Затем
инфильтрат захватывают двумя пальцами и слегка сдавливают с боков, а эрозию
осторожно поглаживают микробиологической платиновой петлей до появления
тканевой жидкости. Каплю полученной жидкости переносят петлей на стекло,
предварительно обезжиренное смесью спирта с эфиром. Приготовленный препарат с
живыми трепонемами изучают в светооптическом микроскопе с темнопольным
конденсором.
Если после однократного исследования патогенные трепонемы
не выявлены, сифиломы следует промыть физиологическим
раствором и затем провести повторное исследование.
Однако даже многократный отрицательный результат
исследования на бледную трепонему не может исключить
сифилис.
Серологическая
диагностика
применяется
для
подтверждения клинического диагноза сифилиса, постановки
диагноза скрытого сифилиса и контроля за эффективностью
лечения.
В иммунном ответе организма принимают участие как
клеточные, так и гуморальные механизмы (синтез
специфических антител).
Появление противосифилитических антител происходит в
соответствии с общими закономерностями иммунного ответа:
вначале вырабатываются IgM,
по мере развития болезни начинает преобладать синтез
IgG;
IgA в сыворотке крови присутствуют в сравнительно
небольших количествах.
Специфические IgM к белковым антигенам появляются на
2—4-й неделе после заражения и исчезают у нелеченных
больных примерно через 3—4 мес, при лечении раннего
сифилиса — через 2 — 3 мес.
Специфические IgG возникают обычно на 4-й неделе после
заражения. Антитела этого класса могут сохраняться
длительное время даже после клинического излечения
больного.
В зависимости от характера определяемых антител все серологические
реакции на сифилис подразделяют на:
специфические (трепонемные) и
неспецифические (нетрепонемные).
Современные методы специфической серологической диагностики
сифилиса основаны на выявлении антител разных классов.
Трепонемными реакциями являются РПГА, ИФА и РИФ.
Неспецифические реакции основаны на выявлении в организме больного
преимущественно противолипидных антител (реагины).
Нетрепонемные
реакции
—
с
кардиолипин-лецитинхолестериновым антигеном — VDRL (Veneral Disease Research
Laboratory), экспресс-метод определения сывороточных реагинов RPR
(Rapid Plasma Reagin), реакция микропреципитации (РМП).
К неспецифическим реакциям, имеющим историческое
значение, относится реакция Вассермана, основанная на
реакции связывания комплемента (РСК).
С 2006 г. этот метод выведен из комплекса скрининговых и
диагностических реакций для выявления сифилиса.
Впервые эта реакция была применена в 1906 г. Реакция ставится
с двумя антигенами: кардиолипиновым и трепонемным,
приготовленными из разрушенной ультразвуком трепонемы
Рейтера. Реакция Вассермана становится положительной через 2 —
3 недели после появления твердого шанкра или на 5 —6-й неделе
после заражения.
Реакция Вассермана может давать неспецифические
положительные
результаты
при
бактериальных
инфекциях, системной красной волчанке, у больных со
злокачественными
новообразованиями,
нередко
у
беременных на 8 — 9-м месяце беременности и др.
Наиболее достоверным из нетрепонемных тестов
является реакция микропреципитации (микрореакция).
Этот тест ставится с кардиолипиновым антигеном и в
модификации с кардиолипиновым и трепонемным антигенами.
Микрореакция используется для проведения отборочных
исследований,
так
как
она
обладает
высокой
чувствительностью и специфичностью, особенно при
вторичном (100%) и скрытом (98 %) сифилисе и хорошо
сочетается с подтверждающими диагноз трепонемными
тестами. Данная методика позволяет объективно оценить
эффективность лечения (по скорости снижения титра реагинов)
и сформулировать диагноз серорезистентности.
В основе специфических серологических реакций лежит выявление
антител к бледной трепонеме. Эта группа включает РИФ, РИБТ и
реакцию пассивной гемагглютинации (РИГА).
Принцип реакции иммунофлюоресценции заключается в том, что
исследуемой сывороткой обрабатывается антиген, который представляет
собой бледную трепонему штамма Никольса, полученную из
зараженной сифилисом ткани яичка кролика.
После промывания препарат обрабатывают люминесцентной сывороткой
против глобулинов человека.
Флюоресцирующий
комплекс
связывается
с
человеческим
иммуноглобулином на поверхности бледной трепонемы и может быть
идентифицирован методом люминесцентной микроскопии.
Реакция иммунофлюоресценции становится положительной в начале 3-й
недели после заражения и является методом ранней диагностики
сифилиса. Нередко реакция остается положительной и спустя несколько
лет после полноценного лечения.
Реакция
иммобилизации
бледных
трепонем
заключается в том, что при смешивании сыворотки больного
со взвесью живых патогенных бледных трепонем в
присутствии комплемента утрачивается их подвижность.
Выявляемые в этой реакции иммобилизины относятся к
поздним
антителам;
они
появляются
позже
комплементсвязывающих
антител
и
достигают
максимального титра к 10-й неделе болезни.
Для ранней диагностики сифилиса эта реакция
непригодна.
Для иммуноферментного анализа используются панели, в лунки
которых нанесен трепонемный антиген. В лунки вносят исследуемую
сыворотку. При наличии в сыворотке антител против бледных трепонем
образуется комплекс антиген антитело, связанный с поверхностью
носителя. На следующем этапе в лунки наливают антивидовую (против
глобулинов человека) сыворотку, меченную ферментом (пероксидазой
хрена). Меченые антитела взаимодействуют с комплексом антиген —
антитело, образуя новый комплекс. Для его выявления в лунки наливают
индикатор (тетраметилбензидин). Под действием фермента субстрат
меняет цвет, что указывает на положительный результат реакции.
Реакция пассивной гемагглютинации имеет универсальное
значение и применяется как скрининговый метод исследования и тест
подтверждения наличия сифилиса. Метод заключается в том, что при
соединении сыворотки крови, содержащей специфические антитела, с
эритроцитами, сенсибилизированными соответствующим антигеном,
наблюдается их характерная агглютинация. Реакция становится
положительной с 4 —5-й недели заражения.
Для повышения информативности серологической
диагностики сифилиса перспективно использование
метода иммуноблоттинга, позволяющего выявлять
антитела к отдельным антигенам возбудителя.
Преимуществом этого метода является меньшая доля
неопределенных
результатов,
связанных
с
дифференцировкой
активного
инфекционного
процесса и ≪анамнестических≫ положительных
реакций.
Приказ МЗ России №87 от 26.03. 01
Отборочные тесты: МП(RPR, TRUST,VDRL), РСКкард
Подтверждающие тесты: РПГА, ИФА, РСКтреп, РИФ, РИТ
Контроль эффективности лечения:
МП(RPR, TRUST, VDRL) или РСКкард
Поскольку ИФА и РПГА являются более высокочувствительными,
специфическими и воспроизводимыми тест - системами, которые можно
использовать в качестве отборочных и подтверждающих тестов,
осуществить до 2006 г. замену комплекса серореакций (КСР)
вышеуказанными реакциями при диагностике сифилиса
2006 год
Отборочные тесты:
МП ( RPR, TRUST, DRL), ИФА или РПГА
Подтверждающие тесты: ИФА или РПГА
Контроль эффективности лечения:
МП (RPR, TRUST, VDRL)
Презентация на тему: " Кафедра микробиологии, вирусологии и иммунологии КазНМУ Электронное пособие на тему: Алгоритм лабораторной диагностики сифилиса Подготовлено: Профессором." — Транскрипт:
1 Кафедра микробиологии, вирусологии и иммунологии КазНМУ Электронное пособие на тему: Алгоритм лабораторной диагностики сифилиса Подготовлено: Профессором Акышбаевой К.С.
2 Сифилис- LUES хроническое инфекционное заболевание, вызываемое Treponema pallidum (бледная трепонема), характеризуется полиорганным поражением, и стадийным прогредиентным течением.
3 КЛАССИФИКАЦИЯ: Семейство: Spirochaetaceae Род: Treponema Вид: Treponema pаllidum
5 ТИНКТОРИАЛЬНЫЕ СВОЙСТВА : Плохо окрашиваются анилиновыми красителями По Романовскому-Гимзе - в бледно- розовый цвет При серебрении по Морозову - в черный цвет
6 Эпидемиология Болеет только человек В эксперименте – обезьяны, кролики, хомяки Пути передачи: Половой - основной Контактный- реже (белье, предметы быта) Через плаценту.
7 Заражение T.pallidum ПАТОГЕНЕЗ СИФИЛИСА Бессимптомный период (3-30 лет) *- У нелеченых пациентов через несколько лет возникают разные формы позднего нейросифилиса. Инкубационный период (около 3 нед.) Локальное размножение T.pallidum Диссеминирование по кровотоку Первичный сифилис (2-6 нед) Локальные язвенные поражения Вторичный сифилис (2-6 нед) Заживление дефекта Латентный сифилис Депонирование возб.в тканях вокруг кр.сосудов Высыпания на коже, слиз., поражение ЦНВ Сохранение Т.р. В селезенке, л\узлах Повторное размножение Четвертичный сифилис* Реакция ГЗТПоражения органов и тканей Гуммы кожи, костей, яичка и т.д Кардиоваскулярный сифилис, поражения сердца, апорты Нейросифилис, параличи, спинная сухотка Возможно заражение Здоровых лиц Возможно заражение Здоровых лиц ПЕРИОДЫ СИФИЛИСА
8 Первичный период: твердый шанкр ч/з 7-10 дн – регионарный лимфоаденит (в это время становятся (+) серологические реакции) ч/з 5-6 нед полиаденит генерализованная спирохетемия. вторичный период
9 Диагностика Первичного сифилиса: * абсолютный критерий для диагностики сифилиса ** прямая РИФ- наличие флюоресцирующих трепонем *** обнаружение спец.ДНК трепонем **** модификации РИФ-200 (разведение исслед.сывор. в 200 раз для уменьшения количества ложно (+) результатов); РИФ-ц (с цельной спинномозговой жидкости для выявления специфических поражений ЦНС); РИФ-абс – реакция с абсорбцией (групповые АТ удаляются из исследуемой сыворотки с помощью разрушенных ультразвуком культуральных трепонем, что существенно повышает специфичность реакции). на основании клинической картины и лабораторного подтверждения любым из нижеперечисленных методов: Исследование в темном поле * РИФ-Тр** ПЦР*** Микрореакция РИФ **** ИФА РПГА РВ
10 Диагностика вторичного сифилиса ( фаза генерализованной спирохетемии и поражения внутренних органов) : * проводиться при наличии эрозированных папул **Необходимо учитывать, что в течении 7-14 дней серологические тесты могут быть отрицательными на основании клинической картины и лабораторного подтверждения любым из нижеперечисленных методов: Исследование в темном поле * Микрореакция** РИФ ** ИФА ** РПГА ** РВ
11 Лабораторная диагностика третичного* сифилиса *развивается у недостаточно пролеченных пациентов или больных, вообще не проходивших лечение. РИФ и РИБТ положительны в % поражения соматических систем и органов (ЭКГ, УЗИ сердца и печени, аортография, рентгенография костей, риноскопия и фарингоскопия, гастроскопия, печеночные пробы, рентгенографию легких, люмбальную пункцию с исследованием цереброспинальной жидкости и пр.. РИФ РИБТ
12 Скрининг на сифилис Массовое обследование определенных групп населения: Беременные женщины Доноры крови и органов для трансплантации Некоторые профессиональные контингенты (работники питания,образования,здравоохранения) Военнослужащие Лица,отбывающие наказание в местах лишения свободы Больные,готовящиеся к оперативному хирургическому вмешательству Лица,поступившие на стационарное лечение Для скрининга применяются дешевые, простые и быстрые по исполнению тест системы,основанные на нетрепонемных тестах.
13 АЛГОРИТМ* лабораторного скрининга на СИФИЛИС * Данная схема диагностики позволяет снизить риск получения ложно(+) результатов и повысить чувствительность выявления инфекции. (+) результат в нетрепонемном тесте не может трактоваться как (+) серологический диагноз на сифилис без подтверждения в трепонемном тесте. НЕТРЕПОНЕМНЫЕ СКРИНИНГОВЫЕ ТЕСТЫ (МР, VDRL) (+) ( - ) Трепонемные тесты (РИФ,РСК, РПГА, ИФА,РВ) Нет серологического подтверждения сифилиса Позитивные Сифилис (+) Непозитивные Сифилис (-)
2 Динамика заболеваемости сифилисом в Российской Федерации ( гг.) [на 100 тыс.населения]
3 Динамика заболеваемости сифилисом по федеральным округам РФ ( гг.) [на 100 тыс. населения ]
4 Заболеваемость сифилисом в странах Европы [на населения] 2008 г. Заболеваемость сифилисом в странах Европы [на населения] 2008 г.
6 Серологические исследования являются в настоящее время основным элементом клинической лабораторной диагностики сифилиса. Они решают три задачи: скрининг на сифилис; диагностика сифилиса при наличии подозрений на него; контроль эффективности лечения диагностированного сифилиса
7 Методы диагностики сифилиса Прямые Темнопольная микроскопия Прямая иммуно- флюоресценция ПЦР Непрямые (серологические) Нетрепонемные тесты Трепонемные тесты 8 Окончательный диагноз Предварительный диагноз
8 ПЦР-исследование наT.pallidum Все ПЦР – тесты собственного производства перед использованием должны быть апробированы путем тестирования: Все ПЦР – тесты собственного производства перед использованием должны быть апробированы путем тестирования: не менее 10 образцов от больных сифилисом, положительных в методе ТПМ (образец) с положительными серореакциями (кровь) не менее 10 образцов от больных сифилисом, положительных в методе ТПМ (образец) с положительными серореакциями (кровь) не менее 10 образцов от пациентов, у которых в методе ТПМ (образец)и при серологическом исследовании (кровь) получен отрицательный результат не менее 10 образцов от пациентов, у которых в методе ТПМ (образец)и при серологическом исследовании (кровь) получен отрицательный результат В настоящее время ПЦР для диагностики сифилиса имеет исследовательский статус В настоящее время ПЦР для диагностики сифилиса имеет исследовательский статус
9 тесты Нетрепонемные тесты Сифилис VDRL –тест (Veneral Disease Research Laboratory) Рекомендован к применению ВОЗ Микрофлокуляционный тест на основе кардиолипинового антигена Применение микроскопа с Х100 позволяет рассмотреть микрокомплексы АГ-АТ Исследование образцов cмж редко даёт ложноположительный результат в отличие от исследования инактивированной сыворотки Традиционный диагностический тест для постановки диагноза нейросифилиса Мониторинг эффективности лечения
10 РИФ – реакция иммунофлуоресценции (FTA Fluorescent treponemal antibody) набор реагентов для определения антител к антигенам T.pallidum Сифилис-IgG-РИФ и Сифилис-IgM-РИФ
12 Трепонемные тесты ИФА-Антипаллидум-скрин ИФА-Антипаллидум-одностадийный ИФА-Антипаллидум-IgG (Аналитическая чувствительность методов–0,01- 0,02 МЕ/мл) ИФА-Антипаллидум-IgM Сифилис РПГА-тест (Аналитическая чувствительность метода –0,05МЕ/мл) Все системы контролируются международным стандартом ВОЗ(NIBS, London, UK) для выпуска с одинаковой аналитической чувствительностью всех серий
13 ТТ не могут быть использованы для контроля эффективности проведенной специфической терапии, так как антитрепонемные антитела могут длительно циркулировать в организме больного, перенесшего сифилитическую инфекцию Дают положительные результаты при тропических трепонематозах (фрамбезия - вызывается T.pertenue и пинта - вызывается T.carateum) Могут давать ложные положительные реакции у больных с аутоиммунными заболеваниями, проказой, онкологической и эндокринной патологией, а также и при некоторых других заболеваниях и состояниях Ограничения применения ТТ
14 Лайн-Блот Сифилис Вариант иммуноферментного анализа в формате линейного блота для регистрации антител к наиболее иммуногенным детерминантам Вариант иммуноферментного анализа в формате линейного блота для регистрации антител к наиболее иммуногенным детерминантам
15 Расположение антигенов в Лайн Блот Сифилис Контроли Контроли Антигены TpN47 TpN17 TpN15 TmpA ± Контроль А/г
16 Принцип технологии иммуноблоттинга Иммобилизация на нитроцеллюлозную мембрану рекомбинантных белков - аналогов антигенов Treponema pallidum p17, p 47, p 41, p15 Иммобилизация на нитроцеллюлозную мембрану рекомбинантных белков - аналогов антигенов Treponema pallidum p17, p 47, p 41, p15 Проведение иммуноферментного анализа для Проведение иммуноферментного анализа для одновременного дифференцированного выявления антител к каждому из нанесённых на мембрану антигенов одновременного дифференцированного выявления антител к каждому из нанесённых на мембрану антигенов Антитела к белкам T. pallidum в разной степени Антитела к белкам T. pallidum в разной степени регистрируются на всех стадиях инфекции регистрируются на всех стадиях инфекции Выявлена зависимость появления антител к различным белкам на разных стадиях инфекции Выявлена зависимость появления антител к различным белкам на разных стадиях инфекции
19 Реактивность сыворотки оценивают по каждому антигену отдельно, путём сравнения интенсивности окрашивания полученных полос с окрашиванием трёх калибровочных линий Реактивность сыворотки оценивают по каждому антигену отдельно, путём сравнения интенсивности окрашивания полученных полос с окрашиванием трёх калибровочных линий Отслеживание белкового профиля помогает при уточнении стадии инфекции и в оценке эффективности Отслеживание белкового профиля помогает при уточнении стадии инфекции и в оценке эффективности проведённого лечения проведённого лечения
20 Частота выявления антител к основным иммунореактивным белкам Tr.Pallidum TpN15 – 67,5% TpN15 – 67,5% TpN17 – 98,5% TpN17 – 98,5% TmpA – 95,0% TmpA – 95,0% TpN47 – 92,5% TpN47 – 92,5% За счет высокой степени очистки рекомбинантных антигенов и одновременного выявления антител к наиболее иммуногенным детерминантам возбудителя сифилиса метод обладает высокой чувствительностью ( 99,6-100%) и специфичностью (100%), что позволяет рассматривать его как новый подтверждающий тест на сифилис. За счет высокой степени очистки рекомбинантных антигенов и одновременного выявления антител к наиболее иммуногенным детерминантам возбудителя сифилиса метод обладает высокой чувствительностью ( 99,6-100%) и специфичностью (100%), что позволяет рассматривать его как новый подтверждающий тест на сифилис.
21 Применение метода иммуноблоттинга целесообразно: Для ранней диагностики сифилиса. В возможном инкубационном периоде и при первичном сифилисе Для ранней диагностики сифилиса. В возможном инкубационном периоде и при первичном сифилисе Для подтверждения диагноза скрытого раннего сифилиса ( при противоречивых результатах традиционных серологических методов) Для подтверждения диагноза скрытого раннего сифилиса ( при противоречивых результатах традиционных серологических методов) При необходимости проведения дифференциальной диагностики с л/положительными результатами серологических реакций на сифилис, особенно, при аутоиммунных заболеваниях: ревматизме,СКВ При необходимости проведения дифференциальной диагностики с л/положительными результатами серологических реакций на сифилис, особенно, при аутоиммунных заболеваниях: ревматизме,СКВ В сложных диагностических ситуациях, как референс- метод. В сложных диагностических ситуациях, как референс- метод. При оценке результатов лечения При оценке результатов лечения При необходимости установления ретроспективного диагноза. При необходимости установления ретроспективного диагноза. 21
23 Автоматическая станция ProfiBlot 48 для исследования в иммуноблоттинге
24 Основные направления развития диагностики сифилиса Автоматизация и объективизация выполнения исследований Автоматизация и объективизация выполнения исследований (роботизированные (роботизированные станции, фотометры)
Читайте также: