Молекулярно биологическое исследование крови на вич

Обновлено: 18.04.2024

У каждого есть ВИЧ-статус, только у одних он положительный, а у других — отрицательный. Однако знать его необходимо, особенно в российских реалиях, когда в стране эпидемия, и уже более одного процента населения живет с вирусом.

Для диагностики вируса иммунодефицита человека существует несколько видов тестов, причем их классификация сложна лишь на первый взгляд, на самом деле она весьма логична. Главное — помнить, что, несмотря на высокую точность анализов, ни один тест не найдет вирус сразу после заражения.

Скрининговые (поисковые) тесты

Они помогают заподозрить инфекцию, но их результаты надо подтверждать другими анализами. Для скрининга используют тесты либо на антитела, либо на антигены/антитела.

ИФА (иммуноферментый анализ).

Этот метод служит не для обнаружения самого вируса, а антител, которые наша иммунная система вырабатывает для борьбы с ним.

Существует несколько поколений ИФА:

В первом поколении тестов использовался сам вирус, обработанный ультразвуком, при этом определялись антитела только ВИЧ-1. Анализ обладал невысокой чувствительностью и специфичностью.
ИФА второго поколения научили определять антитела как к ВИЧ-1, так и к ВИЧ-2. Материалом служили синтезированные белки, аналогичные настоящим антигенам вируса. Впрочем, тесты первого и второго поколения давно не используются.
Следом появились тесты третьего поколения, которые позволяют диагностировать длительно текущую (хроническую) ВИЧ-инфекцию с чувствительностью и специфичностью около 100 %. Однако при острой ВИЧ-инфекции (когда антител мало или совсем нет) их точность считается недостаточной.

За счет своей простоты и дешевизны этот метод используется чаще всего, в том числе на его основе работают экспресс-тесты.

Подтверждающие тесты

Как следует из названия, они позволяют наверняка убедиться в наличии или отсутствии вируса иммунодефицита у человека. Их минус в сложности и дороговизне.

Иммуноблоттинг помогает проверить результаты скрининговых анализов и уточнить, каким видом вируса инфицирован человек: ВИЧ-1, ВИЧ-2 или обоими. Этот метод обладает высокой точностью, чувствительностью, но дорог и сложен в исполнении. Он является комбинацией ИФА и электрофореза, что позволяет определить антитела к специфическим антигенам ВИЧ-1 (gp160, gp120, gp41).

ПЦР (полимеразная цепная реакция). Тест способен находить генетический материал ВИЧ (ДНК/РНК), то есть проверяет, есть ли непосредственно вирус в крови. Нуклеиновые кислоты могут обнаруживаться уже на 7-й день после инфицирования (по данным CDC — c 10 по 33 день).

Кроме того, ПЦР бывает качественным и количественным. В последнем случае можно отслеживать вирусную нагрузку (концентрацию вируса в крови и других биологических жидкостях) у людей с ВИЧ, оценивая эффект терапии.

А я могу сдать сразу иммуноблот или ПЦР, чтобы узнать свой ВИЧ-статус?

Иммуноблот используют специальные лаборатории центров по борьбе со СПИДом. Пробы крови направляются туда для перепроверки уже положительных первичных скрининговых анализов. Сразу сдать его не получится, даже в платных клиниках.

ПЦР, наоборот, можно сдать в любой момент, но только обратившись в коммерческую лабораторию. В СПИД-центрах его делают также для перепроверки ранее положительного теста. Да, ПЦР позволяет максимально быстро (в течение 7—10 дней после инфицирования) обнаружить ВИЧ, но и у него есть недостатки:

высокая стоимость;
может обнаружить только ВИЧ-1;
в редких случаях выявление низких уровней РНК ВИЧ (например,

Этот тест имеет смысл делать если:

у человека есть подозрение на острую ВИЧ-инфекцию (высокий риск инфицирования) или в период серологического окна;
донорам крови;
новорожденным от ВИЧ-положительных матерей

Как тогда правильно проверяться на ВИЧ?

Нужно ли повторно тестироваться, если результат анализа отрицательный?

Универсальной рекомендации, увы, нет. Повторные тесты нужны чтобы застраховаться от попадания в период окна, когда в крови еще нет антител и антигенов ВИЧ, а вирус уже проник в организм.

То же самое и с частотой тестирования — она зависит от разных факторов: количества рисков, приема доконтактной (PrEP) и постконтактной (PEP) профилактики, нахождения в группах риска (инъекционные наркопотребители, секс-работники, мужчины, практикующие секс с мужчинами). Однако эксперты рекомендуют проверяться каждые 6—12 месяцев.

Что может влиять на результат теста на ВИЧ?

Анализ на ВИЧ может дать неправильные результаты в следующих случаях:

при наличии системных аутоиммунных заболеваний (коллагенозов, васкулитов) и злокачественных опухолей;
при тестировании в период серологического окна — когда в крови еще не появились антитела к ВИЧ;
из-за ошибки при проведении теста в лаборатории;
после вакцинации от гриппа.

У детей, рожденных от ВИЧ-положительных матерей, до восемнадцатимесячного возраста в крови могут сохраняться материнские антитела, что может приводить к ложноположительным результатам.

Кроме того, прием PrEP и PEP могут влиять на точность анализов, так как антиретровирусные препараты уменьшают количество вируса в крови и антител к нему.

В случае с PEP после окончания курса рекомендуется посоветоваться с врачом и подобрать оптимальные сроки проведения анализов. Первый тест обычно проводят через 4—6 недель после контакта с ВИЧ, затем через 3 месяца, при необходимости — через 6 месяцев.

Считается, что крайне важно сдать анализ на ВИЧ перед началом приема PrEP и затем проверяться каждые 3 месяца, уже находясь на PrEP.

На результаты теста не влияют прием пищи и алкоголя или курение. Специальной подготовки перед сдачей анализов на ВИЧ не требуется.

А что с экспресс-тестами?

Они позволяют провериться на ВИЧ, не посещая лабораторию или поликлинику. По сути, это тесты ИФА третьего поколения, которые определяют антитела к ВИЧ-1 и ВИЧ-2 в слюне, моче или крови.

На рисунке показано, как быстро в крови появляются сам вирус (его генетический материал РНК) антитела и антигены, а также какие системы тестирования можно применить.

Точность большинства экспресс-тестов при хронической (длительно текущей) ВИЧ-инфекции достаточно высока (> 99 % чувствительности и специфичности), но все равно чуть ниже лабораторных анализов.

Сегодня среди них наиболее популярны тесты слюны (или околодесневой жидкости) и крови. Их можно либо купить самому, либо получить бесплатно в ВИЧ-сервисных организациях.

Важно помнить! Если такой тест оказался положительным, результат необходимо как можно быстрее перепроверить более точным методом.

Где я могу сделать тест на ВИЧ анонимно и бесплатно?

Анализ на ВИЧ бесплатный и анонимный, прикрепление к поликлинике и регистрация не требуются. После сдачи теста выдается идентификационный номер, по которому можно будет узнать результат.

Метод определения Количественное определение, ПЦР с детекцией в режиме реального времени (real-time).

Определение РНК ВИЧ типа 1 в плазме крови методом ПЦР с детекцией в режиме реального времени. Исследование выполняется на оборудовании компании Hoffmann-La Roche (Щвейцария) по стандартизованной технологии с автоматизированной пробоподготовкой.

Исследование концентрации в крови РНК ВИЧ типа 1, которое применяют для прогноза и мониторинга эффективности терапии.

Вирус иммунодефицита человека (ВИЧ) является этиологическим агентом синдрома приобретенного иммунодефицита (СПИД). ВИЧ-инфекция может передаваться половым путем, через контаминированную кровь и ее продукты, или от инфицированной матери плоду. В период 3 – 6 недель после инфицирования обычно развивается недлительный острый синдром, для которого характерны гриппоподобные симптомы и высокие уровни виремии в периферической крови. В большинстве случаев после этого развивается ВИЧ-специфичный иммунный ответ и снижение виремии в плазме, обычно в течение 4 – 6 недель после появления симптомов. После сероконверсии (появления специфических антител) наступает клинически стабильная бессимптомная фаза, способная длиться годами. Для бессимптомного периода характерен невысокий уровень персистирующей виремии в плазме и постепенное снижение уровней CD4+ T-лимфоцитов, которое приводит впоследствии к развитию тяжелого иммунодефицита, множественным оппортунистическим инфекциям, онкогенезу и гибели. У лиц с установленной ВИЧ-1 инфекцией количественное измерение уровня РНК ВИЧ-1 в крови используют в целях прогноза и контроля антиретровирусной терапии.

Специальной подготовки к исследованию не требуется. С общими рекомендациями для подготовки к исследованиям можно ознакомиться здесь >>

Тест предназначен для использования при ведении пациентов, инфицированных ВИЧ-1, в комплексе с клиническими данными и другими лабораторными маркерами прогрессирования заболевания. Исследование применяют для прогноза (на основании исходных уровней РНК ВИЧ-1) или для мониторинга эффективности антиретровирусной терапии (на основании определения изменений уровней РНК ВИЧ-1 в плазме на протяжении курса антиретровирусной терапии).

Внимание: тест не предназначен для скрининга на ВИЧ-1 крови и ее продуктов или для подтверждающей диагностики ВИЧ-1-инфекции.

Интерпретация результатов исследований содержит информацию для лечащего врача и не является диагнозом. Информацию из этого раздела нельзя использовать для самодиагностики и самолечения. Точный диагноз ставит врач, используя как результаты данного обследования, так и нужную информацию из других источников: анамнеза, результатов других обследований и т.д.

Единицы измерения: количество выявленной РНК вируса иммунодефицита человека 1 типа, выраженное в C/ml (копии/мл). Одна копия РНК ВИЧ-1 соответствует 1.67 Международных единиц (МЕ) в соответствии в первым международным стандартном ВОЗ для РНК ВИЧ-1 в тестах по выявлению нуклеиновых кислот (NIBSC 97/656).

Обращаем внимание, что сроки выполнения ПЦР-исследований могут быть увеличены при проведении подтверждающих тестов.

Молекулярная биология – наука о механизмах хранения, воспроизведения, передачи и реализации генетической информации, структуре и функциях нерегулярных биополимеров (нуклеиновых кислот и белков).

Полимеразная цепная реакция (ПЦР) – один из основных молекулярно-биологических методов, используемых в клинико-лабораторной диагностике.

Материал для исследования

Любая биологическая жидкость и ткань организма, полученные из места предполагаемой локализации инфекционного процесса, то есть места наибольшей концентрации вируса или микроорганизма.

Цельная кровь
Пунктаты плевральной, спинномозговой, синовиальной жидкости
Мокрота
Соскоб или мазок из урогенитального тракта и др.

ПЦР относится к прямым методам диагностики, выявляющим непосредственную причину патологического процесса.

В исследуемом материале выявляется уникальный, характерный для данного возбудителя фрагмент ДНК. ПЦР помогает обнаружить возбудителей инфекций даже в тех случаях, когда другими видами анализов (бактериологическими, иммунологическими, микроскопическими) это не представляется возможным.

Применение ПЦР очень эффективно в отношении не только острых, но и вялотекущих, скрытых инфекций.

Для диагностики каких заболеваний применяют ПЦР?

Инфекционных
Наследственных
Онкологических
Иммунных

ПЦР-диагностика у онкологических больных

Онкологические больные относятся к группе высокого риска по развитию инфекционных осложнений.

Ранняя диагностика скрытых инфекций является критическим моментом, определяющим эффективность лечения и прогноз жизни.

Какие факторы предрасполагают онкобольных к инфекции?

Нейтропения
Нарушения клеточного и гуморального иммунитета
Повреждение анатомических барьеров, в основном слизистых оболочек и кожи
Опухолевая обструкция
Различные инвазивные манипуляции и др.

Наиболее частые возбудители вирусных инфекций у онкологических больных:

вирусы герпеса (вирус простого герпеса, вирус Varicella-Zoster, цитомегаловирус и др.)
банальные респираторные вирусы (респираторный синтициальный вирус, вирусы гриппа А и В, вирусы парагриппа и др.).

ПЦР-диагностика инфекций, передающихся половым путем

Вирус папилломы человека (ВПЧ, НРV) один из наиболее распространенных возбудителей инфекций, передающихся половым путем (ИППП).

Известно более 80 типов ВПЧ:

неонкогенные (не вызывающие рак);
онкогенные: высокого и низкого канцерогенного риска.

Разные типы ВПЧ могут вызывать различные заболевания, например: обыкновенные бородавки, плоские бородавки, генитальные (кондиломы), ларингеальные папилломы и др.

Папилломатоз, вызванный онкогенными типами ВПЧ, может при прогрессировании привести к злокачественному перерождению тканей - дисплазии шейки матки, раку шейки матки.

В России рак шейки матки занимает первое место среди причин онкологической смертности у женщин моложе 45 лет!

Длительность инкубационного периода при ВПЧ-инфекции зависит от типа ВПЧ и других сопутствующих факторов (снижение иммунитета на фоне частых ОРВИ, стресса, недостаточного питания, вредных привычек, воспалительных заболеваний), может продолжаться месяцы и годы.

Нередко человек является носителем сразу нескольких типов ВПЧ.

Всемирная организация здравоохранения рекомендует повторять скрининговое обследование на ВПЧ при отрицательном результате каждые 3-5 лет!

Сроки выполнения исследования

Результат выдается на следующий день после забора материала.

Преимущества ПЦР-диагностики

Исследование не требует от пациента специальной подготовки

ПЦР – диагностика особенно эффективна при выявлении трудно культивируемых (уреаплазмы, микобактерии и др.) и некультивируемых (вирусы, хламидии и др.) форм микроорганизмов, с которыми часто приходится иметь дело при латентных и хронических инфекциях.

Наши преимущества

Собственный отдел ПЦР-диагностики;
В отделении лабораторной диагностики НМИЦ онкологии им. Н. Н. Петрова отдел ПЦР-диагностики территориально расположен на базе бактериологической лаборатории, что позволяет объединить усилия диагностического поиска и сократить сроки идентификации возбудителя инфекционного процесса.
Материал для ПЦР можно сдать в КДЦ, который расположен в центре города рядом с метро.
Удобный график работы Центра – ежедневно, в том числе и в дни государственных праздников, по будням с 9.00 до 20.00, по выходным до 18.00.
Забор материала проводят опытные и квалифицированные специалисты.

Цены на молекулярно-биологические исследования

Комплекс молекулярно-биологического исследования на Chlamydia trachomatis / Trichomonas vaginalis

Комплекс молекулярно-биологического исследования на Micoplasma hominis / Micoplasma genitalium

Исследование иммунного статуса: 1 параметр

Комплекс молекулярно-биологического исследования на ВГВ/ВГС/ВИЧ ПЦР

Комплекс молекулярно-биологического исследования на ИППП-12

Комплекс молекулярно-биологического исследования ОРВИ-скрин

Молекулярно-биологическое исследование крови на вирусный гепатит B (Hepatitis B virus)

Молекулярно-биологическое исследование крови на вирусный гепатит С (Hepatitis С virus)

Молекулярно-биологическое исследование на Candida albicans / Fungi

Молекулярно-биологическое исследование на MBTC

Молекулярно-биологическое исследование на Toxoplasma gondii

Молекулярно-биологическое исследование на VZV

Молекулярно-биологическое исследование на ВГЧ-6

Молекулярно-биологическое исследование на ВГЧ-8

Молекулярно-биологическое исследование на вирус гриппа A/H1N1

Молекулярно-биологическое исследование на вирусы гриппа A/B

Молекулярно-биологическое исследование на вирусы парагриппа 1,2,3,4.

Молекулярно-биологическое исследование на ВПГ-1,2 (количественный)

Молекулярно-биологическое исследование на ВПЧ высокого канцерогенного риска (скрининг)

Молекулярно-биологическое исследование на ВПЧ высокого канцерогенного риска, генотип (количественный)

Молекулярно-биологическое исследование на ВЭБ (количественный)

Молекулярно-биологическое исследование на ЦМВ (количественный)

Молекулярно-биологическое исследование плазмы крови на РНК вирус иммунодефицита человека ВИЧ (Human immunodeficiency virus HIV)

Ранняя диагностика заболеваний – залог успешного лечения. Ставшее крылатым выражение, особенно актуально для ВИЧ-инфекции. Ведь заболевание неизлечимо полностью, и только своевременная диагностика позволяет взять течение болезни под контроль и выбрать тактику лечения, чтобы жить полноценной жизнью.

Ранний срок диагностики ВИЧ – со 2 недели от предположительного заражения.

Важность клинической диагностики ВИЧ

В понимании многих людей ВИЧ-инфицированный человек выглядит болезненно, изнеможенно. Он кашляет, чихает, чешется, стонет, у него все болит… На самом деле это не так! Проблема в том, что после инфицирования ВИЧ и в последующий инкубационный период симптомы полностью отсутствуют. Затем наступает острая фаза, на протяжении которой присутствуют симптомы, напоминающие ОРВИ или грипп. Но и они вскоре проходят, и наступает, так называемый, латентный период – продолжительный промежуток времени, когда ВИЧ-инфекция себя ничем не выдает. С момента инфицирования и до стадии пред-СПИДа может пройти порядка 10 лет, в течение которых, ни сам пациент, ни его окружение, даже и не подозревают о болезни. А когда она уже на полную мощность заявляет о себе, контролировать ее очень трудно. Сложно противостоять осложнениям ВИЧ, поддерживать практически разрушенную иммунную систему человека.

Очень важно понимать, что, хотя и есть группы риска – гомосексуалисты, наркозависимые и девушки легкого поведения – в основной массе, пациенты с ВИЧ-инфекцией – это обычные люди. Они учатся, ходят на работу, посещают общественные места, знакомятся в интернете – в общем, живут как все. К сожалению, но от ВИЧ никто не застрахован. Незащищенный половой контакт в порыве страсти, заветное тату без соблюдения стерильности, маникюр за полцены у начинающего мастера, уличная драка – все эти и множество других житейских ситуаций могут обернуться инфицированием ВИЧ.

Благоприятные сроки для диагностики ВИЧ

Факт возможного инфицирования и плохое самочувствие без видимых причин – два веских основания для обращения к специалистам. Но отрицательный результат тестирования на антитела не всегда означает, что человек не инфицирован, так как существует период “серонегативного окна” (время между заражением и появлением антител), который составляет около трех месяцев. Поэтому лучше повторить их спустя 3 месяца с момента возможного инфицирования. Если же ответ опять будет отрицательным, но ваша тревога не проходит, и вы уверены в заражении ВИЧ, тогда лабораторную диагностику необходимо повторить спустя 6 месяцев после факта заражения.

Что касается плохого самочувствия, то поводом провериться на ВИЧ может быть сочетание следующих симптомов:

увеличение лимфатических узлов на шее, в паху, в области подмышек;
лихорадка;
мышечные или головные боли;
молочница и грибковые поражения, в том числе кандидоз полости рта;
воспаление слизистой носа, рта или глотки;
ночная потливость;
ломота в суставах;
длительная диарея;
тошнота, рвота;
резкое снижение массы тела;
высыпания на коже.

Современные методы диагностики ВИЧ

В настоящее время в диагностике ВИЧ используется двухуровневый подход – косвенные и прямые тесты. Косвенные тесты позволяют обнаружить в крови пациента специфические антитела к ВИЧ, а прямые тесты помогают выявить собственно сам ВИЧ и определить степень вирусной нагрузки на организм. В России стандартная диагностика ВИЧ включает следующие методы лабораторных исследований:

ИФА (иммуноферментный анализ).
Иммуноблот (иммунный блоттинг).

Также могут быть применены следующие методики:

Экспресс-тест ИХА (иммунохроматография).
ПЦР (полимеразная цепная реакция).

Диагностические принципы лабораторных исследований и степень их достоверности приведены в нижеследующей таблице.

Читайте также: