Набор для окраски по граму для гонококков

Обновлено: 24.04.2024

Комплект реагентов Микро-ГРАМ-НИЦФ предназначен для дифференциально-диагностической окраски микроорганизмов путем последовательной обработки мазка, взятого из биологического материала человека (гной, мокрота, моча и др.), компонентами комплекта.

Один комплект рассчитан на проведение окраски 100 мазков.

Состав Комплект реагентов Микро-ГРАМ-НИЦФ

генциановый фиолетовый карболовый, готов к применению —1 флакон (100 мл.)
фуксин основной карболовый концентрированный—1 флакон (10 мл.)
раствор Люголя, готов к применению— 1 флакон (100 мл)
Приготовление рабочего раствора фуксина

Внести в пробирку вместимостью 15 мл 1,0 мл фуксина основного карболового концентрированного (раствор фуксина ЦИЛЯ), добавить 9,0 мл дистиллированной воды и перемешать.

Полученный рабочий раствор фуксина (раствор фуксина Пфейфера) можно хранить при комнатной температуре(+18 -25°С) не более 24ч.

Проведение окраски

На фиксированный мазок наложить кусочек фильтровальной бумаги, на который налить избыток генцианового фиолетового карболового и выдержать при комнатной температуре (+18 -25°С) в течение 1 — 2 мин.

Снять бумагу, слить краску и, не промывая мазок водой, налить на мазок 0,7 — 1,0 мл раствора Люголя и выдержать мазок при комнатной температуре в течение 1 — 2 мин.

Слить раствор Люголя и, не промывая, погрузить стекло с мазком в стакан со спиртом этиловым 96°, покачивая стекло до тех пор, пока с мазка не перестанут отходить струйки краски (не более 30 сек).

Извлечь стекло с мазком из спирта, ополоснуть мазок дистиллированной водой, залить поверхность мазка раствором фуксина Пфейфера и выдержать мазок при комнатной температуре в течение 30 — 60 сек.

Слить краску со стекла, промыть мазок дистиллированной водой, высушить стекло с помощью фильтровальной бумаги или естественной сушкой в наклонном положении при комнатной температуре и провести микроскопию с использованием иммерсионной системы при увеличении X (900 — 1000).

Грамположительные микроорганизмы окрашиваются в фиолетовый или фиолетовый с синим оттенком цвет, грамотрицательные микроорганизмы — в красный цвет.

Условия хранения и эксплуатации Комплект реагентов Микро-ГРАМ-НИЦФ

Срок годности фуксина Циля — 12 мес, генциан-виолета — 12 мес, раствора Люголя -6 мес.

Рабочий раствор фуксина основного (раствор фуксина Пфейфера) можно хранить при комнатной температуре не более 24 ч.

После вскрытия флакона генциановый фиолетовый и раствор Люголя можно хранить при комнатной температуре не более 6 мес.

Фуксин основной концентрированный (раствор фуксина Циля) после вскрытия флакона можно хранить при комнатной температуре в течение всего срока годности (12 месяцев).

Отдел новых технологий НИИЭМ имени Пастера выпускает набор для окраски по Граму для гонококков. Набор предназначен для определения грампринадлежности бактерий в модификации, когда грамположительная флора имеет зеленую окраску, а грамотрицательная флора – красную. Такое сочетание цветов обеспечивает резкую контрастность при окраске гонококков. Принцип метода основан на разнице в химическом составе клеточной стенки прокариотических микроорганизмов. Грамположительные бактерии способны удерживать комплекс: "основной краситель-протрава" и приобретают зеленую окраску. Грамотрицательные бактерии теряют комплекс: "основной краситель – протрава" и приобретают красную окраску. Набор рассчитан на проведение 500 анализов. Кроме того, выпускаются набор для окраски по Граму и набор для окраски по Граму модифицированный (с нейтральным красным).

Набор дисков для определения чувствительности к противомикробным препаратам - 1 (НД-ПМП-1)

Набор реагентов "Диагностикум эритроцитарный коревой антигенный сухой для реакции пассивной гемагглютинации (РПГА)"

Набор реагентов для определения чувствительности Trichomonas vaginalis к антипротозойным препаратам (СВТ-АЧ)

Набор реагентов для одновременного выявления Ureaplasma urealyticum и Mycoplasma hominis (УРЕА/МИКО-СКРИН-2)

Набор реагентов для одновременного выявления и определения антибиотикочув-
ствительности Ureaplasma urealyticum и Mycoplasma hominis (УРЕА/МИКО-СКРИН-АЧ)

Набор реагентов предназначен для выявления микроорганизмов в мазках крови, мочи, мокроте и других биологических жидкостях, дифференциальной окраски и выявления принадлежности бактерий к грамположительным или к грамотрицательным группам. Набор может применяться в клинико-диагностических и биохимических лабораториях, а так же в научно-исследовательской практике.

Набор реагентов рассчитан на проведение 100 определений при расходе по 1,0 мл рабочего раствора красителей на один анализ.

Прокариотические микроорганизмы различаются химическим составом клеточной стенки. Микроорганизмы, стенки которых способные удерживать комплекс красителей трифенилметанового ряда с йодом при обесцвечивании и окрашиваться при этом в темный сине-фиолетовый цвет называются грамположительными. Микроорганизмы, которые теряют при обесцвечивании этот комплекс, называются грамотрицательными и дополнительно окрашиваются в красный или розово-красный цвет раствором фуксина.

1. Раствор генциана фиолетового (фенол – 10 г/л, кристаллический фиолетовый – 10 г/л, спирт этиловый – 10%), 100 мл – 1 флакона.

3. Раствор фуксина Циля (фенол – 50 г/л, основной фуксин – 10 г/л, спирт этиловый 10%), 10 мл – 1 флакон.

При использовании данного набора грамположительные бактерии окрашиваются в сине-фиолетовый цвет, грамотрицательные – розово-красный.

Раствор генциана фиолетового и раствора фуксина по Цилю содержат в своем составе едкое вещества – фенол. Раствор Люголя содержит раздражающее вещество – йод. В случае попадания этих растворов на кожу и (или) слизистые необходимо сразу же промыть пораженное место большим количеством воды. Пипетирование per os категорически запрещается.

При работе с биологическим материалом человека необходимо соблюдать правила техники безопасности принятые в бактериологической лаборатории, т.к. любые исследуемые образцы биологического материала следует рассматривать как потенциально инфицированные.

Рабочий раствор фуксина (фуксин Пфейфера) готовиться путем разведения раствора фуксина Циля дистиллированной водой в 10 раз.

Предметные стекла перед использованием необходимо тщательно вымыть и обезжирить. Нанести на стекло мазок исследуемой биологической жидкости (крови, мочи и т.д.) и высушить его на воздухе. Мазок зафиксировать химическим или физическим способом. Для химической фиксации мазок опускают с метиловый спирт, ацетон, смесь Никифорова (этиловый 96% спирт и диэтиловый эфир в соотношении 1:1), жидкость Карнуа (этиловый спирт 96%, хлороформ, ледяная уксусная кислота в соотношении 6:3:1). При физической фиксации, предметное стекло с тщательно высушенным мазком, проводят над верхней частью пламенем горелки мазком вверх в течение 2–3 секунд. Для контроля надежности фиксации стекло можно приложить к тыльной части кисти. При правильном прогреве стекло должно быть горячим, но не вызывать ощущения ожога (70–80° С).

1. На фиксированный мазок поместить фильтровальную бумагу и нанести 3–5 капель раствора генциан фиолетового. Выдержать 1–2 минуты.

2. Слить краситель и, не промывая препарат водой, налить на мазок 1 мл раствор Люголя и выдержать 1–2 минуты.

3. Слить раствор Люголя и, не промывая препарат погрузить его в 96% этиловый спирт, периодически покачивая стекло пока от мазка не перестанут отходить облачка краски. В среднем это занимает около 1 минуты. Если воспользоваться ацетон-спиртовой смесью (соотношении 1:1) то время смыва можно сократить до 2–5 секунд.

6. Слить фуксин со стекла, промыть мазок водопроводной водой и высушить от остатков воды фильтровальной бумагой.

При правильном проведении окрашивания грамположительные бактерии имеют сине-фиолетовую окраску, а грамотрицательные – розово-красную.

Набор должен храниться в упаковке предприятия-изготовителя при температуре +2–25° С в течение всего срока годности. Допускается хранение наборов при температуре от -10° С до +35° С не более 5 суток.

Раствор генцианового фиолетового и раствор Люголя после вскрытия можно хранить в плотно закупоренной упаковке предприятия-изготовителя в течение всего срока годности.

Контрольная сыворотка Биоконт-С

Масло иммерсионное для микроскопии

Стабилизированный концентрированный раствор гемоглобина и контрольные материалы на его основе

Читайте также: