Набор иммунохроматографических тест-систем вич
Обновлено: 19.04.2024
Распространение ВИЧ инфекции приобрело характер глобальной катастрофы. Около 33,3 млн. человек в мире инфицировано ВИЧ, среди них 15,9 млн. женщин и 2,5 млн. детей до 15 лет [1]. Своевременное выявление ВИЧ, внедрение новых, усовершенствование существующих методов диагностики остается основным направлением по предотвращению распространения ВИЧ.
При скрининговых обследованиях населения на ВИЧ используют иммуноферментный анализ (ИФА). В тест-системах III и IV поколений рекомбинантные полипептиды используются в составе иммуносорбента (твёрдой фазы) и конъюгата, что позволило выявлять суммарные антитела (АТ) разных классов (IgG, IgM, IgA) и сократило серологическое окно. Тест-системы IV поколения (комбинированные) позволяют выявлять не только специфические АТ, но и антиген р24 ВИЧ-1 (АГ) посредством введения в систему моноклональных антител (МКАТ) к белку р24 ВИЧ-1 [5], что повышает чувствительность тест-системы и позволяет выявлять ВИЧ на ранних сроках, когда АТ к нему отсутствуют.
Тестирования коммерческих ВИЧ-сероконверсионных панелей сывороток производства Boston Biomedica Inc и ZeptoMetrix Corp. (США) различными тест-системами показывает, что чувствительность комбинированных ИФА-тестов приближается к показателю ПЦР анализа.
Широкое использование комбинированных тестов в службе крови делает актуальной задачу их дальнейшего совершенствования. Разработчики и производители постоянно исследуют новые подходы дальнейшего улучшения параметров чувствительности и специфичности комбинированных тестов.
Тест-система DIA-HIV Ag/Ab для одновременного определения АТ к ВИЧ ½ и АГ р24 ВИЧ-1 содержит полноразмерные рекомбинантные белки ВИЧ ½ и укороченные синтетические АГ, а также мощную систему биотин-стрептавидинового усиления с применением полимерной пероксидазы в составе конъюгата. Тест-система разработана российскими и украинскими учёными, выпускается в промышленных объёмах с 2011 года. Тест-система имеет регистрационное удостоверение Федеральной службы по надзору в сфере здравоохранения ФСЗ 2012/1336 от 30 ноября 2012 года.
Для установления достоверности полученных данных использованы показатели среднего арифметического результатов трёх повторов анализа исследуемых образцов в ИФА, стандартной ошибки и среднеквадратичного отклонения.
Тест-система DIA-HIV Ag/Ab, предназначена для скрининговых и подтверждающих исследований сывороток и плазмы крови человека на наличие АГ р24 ВИЧ-1 и суммарных АТ (IgG, IgM, IgA) к ВИЧ-1, ВИЧ-2.
| Стандарт ABI | Стандарт NIBSC | ||||
|---|---|---|---|---|---|
| Концентрация, пкг/мл | ОП | ОП/ГЗ | Концентрация, МЕ | ОП | ОП/ГЗ |
| 40 | 0,804±0,024 | 5,5±0,16 | 8 | 0,531±0,016 | 3,6±0,11 |
| 20 | 0,621±0,018 | 4,2±0,12 | 4 | 0,384±0,011 | 2,6±0,08 |
| 10 | 0,519±0,015 | 3,5±0,1 | 2 | 0,253±0,007 | 1,72±0,05 |
| 5 | 0,263±0,008 | 1,8±0,05 | 1 | 0,148±0,004 | 1,1±0,03 |
| 2,5 | 0,185±0,005 | 1,25±0,04 | 0,5 | 0,083±0,002 | 0,56±0,01 |
Примечание: ОП – оптическая плотность, ОП/ГЗ – соотношение оптической плотности к граничному значению, МЕ – международные единицы.
Аналитическая чувствительность тест-системы по выявлению стандарта р24 ВИЧ-1 ABІ составила 2,5 пкг/мл.
Аналитическая чувствительность тест-системы по выявлению АГ р24 ВИЧ-1 составляет 20 пкг/мл.
| № образца панели | АТ к субтипам и группам ВИЧ | Результаты | |
|---|---|---|---|
| ОП | ОП/ГЗ | ||
| 1 | Анти-ВИЧ-1 субтип А группа М | 3,387±0,10 | 23,0±0,69 |
| 2 | Анти-ВИЧ-1 субтип В группа М | 3,565±0,11 | 24,2±0,72 |
| 3 | Анти-ВИЧ-1 субтип С группа М | 3,319±0,10 | 22,5±0,67 |
| 4 | Анти-ВИЧ-1 субтип Е группа М | 3,233±0,09 | 21,9±0,66 |
| 5 | Анти-ВИЧ-1 группа 0 | 1,098±0,03 | 7,5±0,22 |
| 6 | Анти-ВИЧ-2 | 3,195±0,09 | 21,7±0,65 |
| 7 | Отрицательный контроль | 0,063±0,002 | 0,42±0,012 |
Тест-система выявляет АТ к субтитам А, В, С и Е ВИЧ-1 группы М, АТ к ВИЧ-1 группы О и АТ к ВИЧ-2, причём показатели соотношения ОП/ГЗ достаточно высокие.
| № образца панели | Результаты | № образца панели | Результаты | ||
|---|---|---|---|---|---|
| ОП | ОП/ГЗ | ОП | ОП/ГЗ | ||
| 1 | 3.196±0,096 | 20.2±0,606 | 9 | 3.14±0,094 | 20.1±0,603 |
| 2 | 3.374±0,101 | 21.3±0,639 | 10 | 3.372±0,101 | 21.3±0,639 |
| 3 | 3.476±0,104 | 22.0±0,66 | 11 | 3.418±0,102 | 21.9±0,657 |
| 4 | 3.231±0,096 | 20.8±0,624 | 12 | 3.136±0,094 | 20.0±0,600 |
| 5 | 3.375±0,101 | 21.3±0,639 | 13 | 3.326±0,099 | 21.3±0,639 |
| 6 | 3.399±0,102 | 21.4±0,642 | 14 | 3.344±0,100 | 21.4±0,642 |
| 7 | 3.296±0,099 | 21.2±0,636 | 15 | 3.342±0,100 | 21.4±0,642 |
| 8 | 3.659±0,109 | 23.1±0,693 | 16 | 3.416±0,102 | 21.9±0,657 |
| № образца панели | Тест-системы, ОП/ГЗ | ||||
|---|---|---|---|---|---|
| День забора крови | Abbott HIV1/2 | Organon Teknika HIV | Abbott HIV Ag | DIA-HIV-Ag/Ab | |
| PRB 950-1 | 0 | 0,2 | 0,3 | 0,5 | 0,4±0,012 |
| PRB 950-2 | 18 | 0,2 | 0,3 | 0,7 | 1,2±0,036 |
| PRB 950-3 | 21 | 0,2 | 0,3 | 3,3 | 5,9±0,177 |
| PRB 950-4 | 28 | 15,5 | 0,4 | 4,1 | 6,4±0,192 |
| № образца панели | Тест-системы, ОП/ГЗ | ||||
|---|---|---|---|---|---|
| День забора крови | Abbott HIV1/2 | Organon Teknika HIV | Abbott HIV Ag | DIA-HIV-Ag/Ab | |
| PRB-959-1 | 0 | 0,3 | 0,4 | 0,3 | 0,5±0,015 |
| PRB-959-2 | 7 | >16,7 | 0,8 | 12,5 | 25,1±0,753 |
| PRB-959-3 | 9 | >16,7 | 0,8 | 8,1 | 24,9±0,747 |
| PRB-959-4 | 14 | >16,7 | 5,9 | >12,5 | 8,3±0,249 |
| PRB-959-5 | 19 | >16,7 | 5,6 | >12,5 | 5,4±0,162 |
| PRB-959-6 | 21 | >16,7 | 5,9 | >12,5 | 6,1±0,183 |
| PRB-959-7 | 26 | >16,7 | 5,4 | >12,5 | 6,7±0,201 |
| № образца панели | Тест-системы, ОП/ГЗ | ||||
|---|---|---|---|---|---|
| Abbott Monoclonal HIV Ag | Dupont HIV Ag | Organon Teknik HIV Ag | IVCOMBI.CE 4 th Generation | DIA-HIV-Ag/Ab | |
| PRА203-01 | 4,3 | 5,7 | 16,8 | 2,3 | 2,3±0,069 |
| PRА203-02 | 12,2 | 6,2 | 16,4 | 4,1 | 20,5±0,615 |
| PRА203-03 | 6,0 | 8,7 | 9,3 | 1,4 | 4,2±0,126 |
| PRА203-04 | 3,0 | 3,1 | 4,1 | 1,9 | 3,5±0,106 |
| PRА203-05 | 4,9 | 1,2 | 8,2 | - | 27,9±0,837 |
| PRА203-06 | 1,3 | 1,3 | 1,5 | 1,0 | 25,8±0,774 |
| PRА203-07 | 5,7 | 2,8 | 12,1 | 2,9 | 25,9±0,777 |
| PRА203-08 | 1,5 | 1,0 | 2,0 | 3,0 | 27,5±0,825 |
| PRА203-09 | 0,5 | 0,2 | 0,2 | 0,4 | 0,8±0,024 |
| PRА203-10 | 12,2 | 9,6 | 25,3 | 3,6 | 15,3±0,459 |
| PRА203-11 | 3,1 | 3,9 | 5,8 | 2,4 | 2,8±0,086 |
| PRА203-12 | 3,5 | 2,9 | 6,6 | 1,6 | 24,9±0,747 |
| PRА203-13 | 2,1 | 1,1 | 2,4 | 1,2 | 9,3±0,279 |
| PRА203-14 | 0,9 | 0,7 | 2,5 | 0,4 | 2,5±0,075 |
| PRА203-15 | 2,5 | 2,8 | 5,9 | 3,3 | 2,8±0,084 |
| PRА203-16 | 1,8 | 1,4 | 3,7 | 1,1 | 28,5±0,855 |
| PRА203-17 | 6,3 | 4,0 | 6,1 | 2,5 | 17.5±0,525 |
| PRА203-18 | 2,4 | 0,8 | 2,3 | 1,7 | 24.8±0,744 |
| PRА203-19 | 0,5 | 0,2 | 0,3 | 0,4 | 0.3±0,009 |
| PRА203-20 | 17,0 | 9,1 | 26,4 | 4,6 | 10.7±0,321 |
| № образца панели | Тест-системы, ОП/ГЗ | ||
|---|---|---|---|
| №1 | №2 | DIA-HIV-Ag/Ab | |
| 1 | 7,3 | 11,1 | 25,1±0,753 |
| 2 | 17,6 | 11,2 | 22,0±0,66 |
| 3 | 17,3 | 11,2 | 24,7±0,741 |
| 4 | 17,4 | 11,1 | 23,9±0,717 |
| 5 | 4,8 | 11,6 | 22,8±0,684 |
| 6 | 6,1 | 10,0 | 22,5±0,675 |
| 7 | 7,7 | 10,6 | 22,8±0,684 |
| 8 | 13,4 | 11,4 | 22,2±0,666 |
| 9 | 16,8 | 11,6 | 23,4±0,702 |
| 10 | 17,6 | 11,2 | 22,9±0,687 |
| 11 | 16,3 | 11,2 | 23,3±0,699 |
| 12 | 17,1 | 11,2 | 25,6±0,768 |
| 13 | 17,1 | 11,5 | 23,2±0,696 |
| 14 | 18,7 | 10,2 | 23,8±0,714 |
| 15 | 5,7 | 10,9 | 23,4±0,702 |
| 16 | 9,2 | 11,4 | 24,6±0,738 |
| 17 | 11,3 | 10,4 | 23,7±0,711 |
| 18 | 16,1 | 10,6 | 22,9±0,687 |
| 19 | 17,0 | 0,5 | 22,1± |
| 20 | 15,6 | 0,4 | 21,2± |
| № сыворотки | Тест-системы, ОП/ГЗ | ||
|---|---|---|---|
| №1 | №2 | DIA-HIV-Ag/Ab | |
| 1 | 1,4±0,042 | 4,3±0,126 | 4,3±0,129 |
| 2 | 0,4±0,012 | 1,9±0,042 | 3,3±0,099 |
| 3 | 0,69±0,021 | 1,4±0,042 | 1,6±0,048 |
| 4 | 0,77±0,023 | 9,4±0,282 | 1,4±0,042 |
| 5 | 17,6±0,528 | 11,5±0,345 | 3,1±0,093 |
| 6 | 14,9±0,447 | 10,0±0,30 | 5,0±0,150 |
| 7 | 5,9±0,177 | 5,4±0,162 | 4,4±0,132 |
| 8 | 3,96±0,119 | 3,6±0,108 | 3,7±0,111 |
| 9 | 9,69±0,291 | 4,2±0,126 | 7,4±0,222 |
По результатам анализа донорских сывороток и образцов стандартных панелей специфичность тест-системы составила 100%.
Чувствительность тест-системы при исследовании образцов стандартных панелей и неразведенных сывороток от ВИЧ-инфицированных пациентов составила 100%. Тест-система выявляет АТ к ВИЧ-1 и ВИЧ-2 в низких титрах и с более высокими сигналами, чем коммерческие аналоги ведущих мировых производителей.
Разработанная тест-система способна диагностировать ВИЧ-инфекцию на более ранних этапах заболевания, чем её коммерческие аналоги.
Разработанная тест-система обладает высокой специфичностью: при испытаниях в условиях предприятия - 100% (2519 образцов), в клинических лабораториях - 99,8% (134486 исследований).
Следует отметить высокую стабильность и точность тест-системы: показатель межсерийных различий коэффициента позитивности для 12 выпущенных промышленных серий тест-системы составил 5,87% (CV).
Одностадийный иммунохроматографический тест для определения суммарных антител (IgG, IgM, IgA) к ВИЧ-1/2 в сыворотке и плазме крови с визуальной оценкой результата. Мульти-устройство состоит из 10 соединенных кассет, содержащих мембранный тестовую полоску, 10 шт.в упаковке, на 100 определений. В основе метод ИХА. Представляет собой мембранный стрип, помещенный в кассету с нанесенными цифрами 1, 2 и буквой С, обозначающие, соответственно две тестовые полосы для захвата антител, специфичных к ВИЧ-1 (полоса 1 с рекомбинантными антигенами HIV-1 gp41 и р24), ВИЧ-2 (полоса 2 с рекомбинантным антигеном HIV-2 gp36), и контрольная полоса (С). Если образец не внесен, эти полосы в окне Т не видны. Контроль используется для подтверждения правильности проведения анализа. Конъюгат рекомбинантных антигенов ВИЧ-1/2 (gp41, р24 и gp36), коллоидного золота, а также исследуемый образец, внесенный в окно S, в процессе хроматографии мигрирует вдоль стрипа до тестовой зоны (окно Т), где формируется видимая глазом окрашенная полоса — комплекс антиген-антитело-конъюгат антигена и коллоидного золота
Функциональное назначение
Диагностикум серологический 3-го поколения для быстрого качественного раздельного определения антител к ВИЧ первого и второго типов, отличающийся высокой степенью чувствительности и специфичности (чувствительность теста составляет 100%, специфичность – 99,8 %)
Технические характеристики
ВИЧ1/ВИЧ2 антитела ИВД, набор, иммунохроматографический анализ, экспресс-анализ. Набор реагентов и других связанных с ними материалов, предназначенный для качественного и/или количественного определения антител к вирусу иммунодефицита человека 1 и 2 (ВИЧ-1/ВИЧ-2) (human immunodeficiency virus 1 and 2 (HIV1/HIV2)) в клиническом образце за короткое время по сравнению со стандартными лабораторными процедурами исследований методом иммунохроматографического анализа. Этот тест обычно используется для анализов в лаборатории или вблизи пациента. Может отпускаться без рецепта врача для самотестирования лицами, не имеющими медицинской подготовки, в домашних условиях. Количество выполняемых тестов: ≥ 100 (шт). Тип образца: сыворотка, плазма, цельная кровь. (Возможность использовать имеющийся в распоряжении тип образца). Раздельное определение антител к ВИЧ 1 и ВИЧ 2, возможность определения всех классов иммуноглобулинов IgG, IgM, IgA, возможность определения антител к ВИЧ-1 подтип О (Обеспечивает максимально высокую специфичность тест-системы). Комплектация набора: тестовая мульти-кассета из 10 соединенных тест-кассет, разделяемых на отдельные тест-кассеты, в индивидуальной фольгированной упаковке - 10 шт, буферный раствор – 2 флакона по 8,5 мл (Набор должен содержать все необходимые реагенты и расходные материалы для выполнения анализа). Формат теста позволяет отделить необходимое количество тест-кассет от мульти-кассеты для проведения как групповых, так и одиночных исследований. Условия хранения 1-30 °С (Формат экспресс-диагностики требует возможности хранения в широком диапазоне температур). Требуемое количество образца, не более: 10 мкл – сыворотка или плазма, 20 мкл – цельная кровь (Возможность использования минимального количества биоматериала). Предварительное разведение образцов – не требуется (Снижает затраты времени на проведение анализа). Время анализа – не более 20 мин (Формат экспресс-диагностики требует возможности проведения анализа за минимальное время). Наличие внутреннего контроля правильности проведения процедуры анализа для каждого теста (Наличие внутреннего контроля позволяет исключить ошибки в постановке теста). Чувствительность – не менее 100%, специфичность – не менее 99,8% (Высокая чувствительность и специфичность обеспечивают возможность получения максимально достоверных результатов).
Тест-полоска для быстрого определения антител к ВИЧ 1 и ВИЧ2 (цельная кровь/сыворотка/плазма) — это быстрый иммунохроматографический тест для качественного определения антител к ВИЧ 1 и/или к ВИЧ в цельной крови, сыворотке или плазме.
Резюме
ВИЧ является возбудителем синдрома приобретенного иммунодефицита человека (СПИД). Вирион окружен липидной оболочкой, образованной из мембраны клетки-хозяина. В оболочке находятся несколько вирусных гликопротеинов. Каждый вирус содержит две копии значащей теномной РНК. ВИЧ 1 был выделен ст пациентов со СПИД и СПИД-подобным комплексом заболеваний, и от здоровых людей с высоким по тенциальным риском заболевания СПИД' ВИЧ2 был выделен у больных СПИД из Западной Африки и от серопозитивных пациентов с отсутствием симптомов заболевания? Как ВИЧ 1, так и ВИЧ 2 вызывают иммунный ответ? Выявление антител к ВИЧ в сыворотке, плазме или цельной крови является наиболее эффективным и общепринятым способом определить, подвергался ли пациент воздействию ВИЧ, а также проверить кровь и продукты, получаемые из крови, на наличие ВИЧ. Несмотря на различия в биологических характеристиках, серологических активностях и геномных последовательностях, ВИЧ 1 и ВИЧ 2 проявляют сильно выраженную антигенную перекрестную реактивность.5.6 Большинство положительных сывороток на ВИЧ 2 могуг быть выявлены с использованием серологических тестов для ВИЧ 1.
Тест-полоска для быстрого определения антител к ВИЧ 1 и ВИЧ 2 (цельная кровь сыворотка/плазма) — это тест для качественного определения наличия антител к ВИЧ 1 и ВИЧ2 в цельной крови, сыворотке и плазме крови. В тесте используется латеконый коныюгат и несколько рекомбинантных белков ВИЧ для избирательного выявления антител ВИЧ и ВИЧ 2 в цельной крови, сыворотке или плазме.
ПРИНЦИП ДЕЙСТВИЯ
Тест-полоска для быстрого определения антител к ВИЧ 1 и ВИЧ2 (цельная кровь/сыворотка/плазма) — зто качественный мембранный иммунохроматографический тест для выявления антител к ВИЧ 1 и ВИЧ 2 в цельной крови, сыворотке или плазме. На мембрану предварительно сорбированы рекомбинантные антигены: ВИЧ. При проведении теста образец цельной крови, сыворотки или плазмы реапирут с частицами, покрытыми ВИЧ- антигенами на тест- полоске. Смесь хроматографически мигрирует вверх по мембране под действием капиллярных сил, реагирует с рекомбинантным ВИЧ-антигеном на мембране в области тестовой линии. Если образец содержит антитела к ВИЧ 1 и/или к ВИЧ 2, то в тестовой области полоски появляется окрашенная полоса, указывающая на положительный результат. Ели образец не содержит антител к ВИЧ 1 или к ВИЧ 2, то окрашенная полоса в тестовой области тест-полоски не образуется, указывая на отрицательный результат. В качестве внутреннего контроля процедуры анализа в области контрольной линии всегда появляется окрашенная полоса, указывающая на то, что был внесен надлежащий объем пробы и что произошло достаточное капиллярное увлажнение мембраны.
Условия хранения и стабильность
Храните тест-наборы при комнатной температуре или в холодильнике (при температуре от +2° до +30°©). Тест-полоска стабильна до конца срока годности, напечатанного на индивидуальной герметичной упаковке. Тест-полоска должна оставаться в герметичной упаковке до момента использования. НЕ ЗАМОРАЖИВАТЬ! Не использовать после окончания срока годности.
МЕРЫ ПРЕДОСТОРОЖНОСТИ
- Только для профессиональной диагностики in vitro. Не использовать после окончания срока годности, указанного на упаковке.
- Не употреблять в пищу, не пить и не курить в зоне работы с образцами и тестовыми наборами.
- Обращайтесь со всеми образцами так, как будто они содержат инфекционные материалы. Во время проведения анализа соблюдайте установленные меры предосторожности при риске заражения и следуйте стандартным процедурам для правильной утилизации образцов.
- При анализе образцов надевайте защитную одежду, например, лабораторный халат, а также одноразовые перчатки и используйте защитные устройства для глаз.
- Влажность и температура могут неблагоприятно влиять на результаты анализа.
Забор проб и подготовка к анализу
- Тест-полоску для быстрого определения антител к ВИЧ 1 и ВИЧ2 (цельная кровь/сыворотка/плазма) можно использовать для тестирования цельной крови (венозной или из пальца), сыворотки или плазмы крови.
- Для забора проб цельной крови из пальца:
- Вымойте руку пациента мылом и теплой водой или обработайте спиртовым тампоном. Дайте высохнуть.
- Помассируйте руку, не касаясь места прокола, растирая ее по направлению к кончику среднего или безымянного пальца.
- Проколите кожу стерильным скарификатором. Сотрите первую каплю крови.
- Слегка помасируйте руку от запястья к ладони и пальцу, чтобы сформировалась круглая капля крови на месте прокола.
- Нанесите образец цельной крови из пальца на тест-полоску с помощью капиллярной трубки, для этого:
- Коснитась концом капилляра капли крови, чтобы набралось при близтельно 25 мкл. Избегайте появления воздушных пузырьков.
- Наденьте грушу на противоположный конец капиллярной трубки, сожмите ее, выпустив кровь на "подушечку" для внесения образца тест-полоски.
- Поместите палец пациента так, чтобы капля крови оказалась как раз над "подушечкой" для внесения образца на тест полоске
- Капните 1 каплю цельной крови из пальца в центр "подушечки" для образца на тест-полоске, или двигайте палец пациента так, чтобы висячая капля коснулась центра "подушечки " для образца. Избегайте непосредственного касания пальцем "подушечки для образца.
Материалы
- Тест-полоски
- Одноразовые пипетки для образцов
- Буфер
- Толовые калонки
- Инструкция по применению
Необходимые, но не поставляемые материалы:
- Пробирки для сбора проб
- Скарификаторы (только для цельной крови из пальца)
- Одноразовые капиллярные трубки с гепарином и груша (только для цельной крови из пальца)
- Центрифуга (только для сыворотки плазмы)
- Таймер
Инструкция по применению
Перед тестированием необходимо довести до комнатной температуры (от +15 до +30° ©) тест-полоску, пробу, буфер и/или контрольные образцы
- Извлеките тест-полоску из индивидуальной упаковки и используйте её как можно быстрее. Наилучшие результаты будут получены, если анализ будет проведен в течение одного часа.
- Оторвите ленту с тест-карточки и поместите тест полоску в середину карточки по указанным стрелкам (как показано на рисунке)
Для образца сыворотки. плазмы или цельной крови из вены:
- Держите одноразовую пипетку вертикально и перенесите 1 каплю сыворотки, плазмы или цельной крови из вены (приблизительно 25 мкл) на "подушку" для внесения образца на тест полоске, затем добавьте две капли буфера (приблизительно 80 мкл) и включите таймер. См. рисунок ниже.
Для образца цельной крови из пальца:
- При использовании капиллярной трубки:
- Наполните капиллярную трубку и перенесите примерно 25 мкл образца цельной крови из пальца на подушку для внесения образца на тест- полоске, затем добавьте 2 капли буфера приблизительно 80 мкл) и включите таймер. См. рисунок ниже.
- Поместите палец пациента так, чтобы капля крови оказалась как раз над подушечкой для внесения образца на тест полоске.
- Капните 1 каплю цельной крови из пальца (приблизительно 25 мкл) в центр подушечки для образца на тест- полоске, или двигайте палец пациента так, чтобы висячая капля коснулась центра подушечки для образца, затем добавьте 2 капли буфера (приблизительно 80 мкл) и включит таймер. Си. рисунок ниже.
- Избегайте непосредственного касания пальцем "подушечки" для образца.
- Подождите появления красной линии (линий). Результат необходимо интерпретировать через 15 минут. Не интерпретируте результаты после 20 минут.
Интерпретация результатов
![]()
![Положительный]()
ПОЛОЖИТЕЛЬНЫЙ появляются две красные линии. Одна линия должна быть в области контроля (C), а другая линия — в тестовой области (T)
ПРИМЕЧАНИЕ: интенсивность красного окрашивания в области тестовой линии (Т) может варьировать в зависимости от концентрации антител к ВИЧ в образце. Позтому любая интенсивность красного окрашивания в тестовой области (Т) должна считаться положительным результатом.
![Отрицательный]()
ОТРИЦАТЕЛЬНЫЙ: одна красная линия появляется в области контроля (C). В тестовой области (Т) отчетливой красной или розовой линии не появляется.
![Недостоверный]()
НЕДОСТОВЕРНЫЙ: контрольная линия не появляется. Чаще всего это происходит из-за недостаточного объема пробы или неправильного проведения процедуры анализа. Проверьте соблюдение методики выполнения процедуры анализа и повторите анализ с помощью новой тест-полоски. Если проблема остается, немедленно прекратите пользоваться этим набором и свяжитесь со своим региональным поставщиком.
Контроль качества
Внутренний контроль процедуры анализа включен в тест. Красная линия, появляющаяся в контрольной области (С), является внутренним контролем процедуры анализа. Ее наличие подтверждает внесение достаточного объема пробы и правильность методики выполнения анализа.
Контрольные стандарты не прилагаются к этому набору, однако, в лабораторной практике рекомендуется тестировать заведомо положительные и отрицательные образцы, чтобы проверить правильность постановки анализа.
Ограничения
- Тест-полоски для быстрого определения антител к ВИЧ 1 и ВИЧ 2 (цельная кровь сыворотка/плазма) предназначена только для лабораторной диагностики in vitro. Этот тест может быть использован только для выяаления антител к ВИЧ в цельной крови, сыворотка или плазме крови. Ни количественная оценка, ни степень возрастания концентрации антител к ВИЧ не могуг быть проведены с помощью этого качественного теста.
- Этот тест укажет только на присутствие антител к ВИЧ в образце и не может быть использован в качестве единственного критерия для постановки диагноза.
- Для подтверждения необходимо провести дальнейший анализ образцов такими методами, как ИФА и/или инмуноблоттинг.
- Каки в случае любых других диагностических тестов, все результаты необходимо рассматривать совместно с остальной клинической информацией, доступной врачу.
- Если результат тесла отрицательный, но сохраняются клинические симптомы, предполагается провести дополнительное тестирование с помощью других клинических методов анализа.
Ожидаемые оценки
Тест-полоски для быстрого определения антител к ВИЧ 1 и ВИЧ 2 (цельная кровь/сыворотка/плазма) сравнивнили с ведущим коммерческим тестом HIV EIA. Корреляция между этими двумя системами составила 99.5%.
Технические характеристики
Чувствительность
Наборы (тест-полоски) для быстрого определения антител к ВИЧ 1 и ВИЧ 2 (цельная кров/сыворотка/плазма] были проверены с помощью наборов: анти-ВИЧ 1 с низким титром антител и анти-ВИЧ 1/2 Сотбо (Возлоп Вютейса, 1пс). А также тест-полоски сравнивали с ведущим коммерческим тестом EIA HIV при использовании клинических образцов. Результаты показывают, что тест-‘полоска для быстрого определения антител к ВИЧ Ти ВИЧ 2 (цельная кровь/сыворотка/плазма) очень чувствительна к антителам ВИЧ 1 и/или ВИЧ 2.
Специфичность
Специфичность теста сравнивали со специфичностью ведущего коммерческого теста HIV EIA. Тест- полоска для быстрого определения антител ВИЧ 1и ВИЧ 2 (цельная кровь/сыворотка/плазма) высокоспецифична для анти-ВИЧ 1и/или анти-ВИЧ 2 антител по сравнению с ведущим коммерческим тестом EIA HIV.
![]()
Точность в одном определении
Сходимость результатов была определена путем использования 15 повторов трех образцов: отрицательного, слабоположительного и высокоположительного. Отрицательные, слабоположительные и высокоположительные значения правильно определялись в 99.5% случаях.
Между разными постановками
Сходимость результатов между разными постановками теста определялась путем проведения 15 нозависимых тестирований тех же трех образцов: отрицательного, слабоположительного и высокоположительного. Три разных партии ABON HIV 1/2 (тест-полоски) для быстрого определения антител к ВИЧ 1 и ВИЧ2 (цельная кров/ьсыворотка/плазма) были протестированы с использованием отрицательных,слабоположительных и высокоположительных образцов. Образцы были правильно идентифицированы в 99.5% случаев.
![]()
ФСЗ 2011/09496 от 13 апреля 2011 г.
Подготовка исследуемых образцов
- Экспресс следует проводить с цельной сывороткой, плазмой или цельной кровью человека. Цельную кровь следует использовать для анализа только сразу после забора.
- Сыворотку/плазму можно хранить при температуре от 2 до 8°С в течение 24 часов, а для длительного хранения при температуре минус 20°С. Повторное замораживание плазмы и сыворотки не допускается. Хранение и замораживание цельной крови не допускается.
Проведение анализа
- Реакционный картридж, одноразовую капельницу и флакон с буферным раствором следует извлечь из упаковки.
- Реакционный картридж положить на ровной поверхности лабораторного стола. Каждый картридж промаркировать в соответствии с маркировкой исследуемого образца.
- Одноразовой капельницей или автоматической микропипеткой внести одну каплю (или 50 мкл) сыворотки, плазмы или крови в квадратное окно - порт "А" для внесения исследуемых образцов.
- Одноразовой капельницей или автоматической микропипеткой внести 5 капель буферного раствора для диффузии образцов в круглое окно - порт "В".
- Через 15 минут (максимально — через 30 минут) провести учёт результатов.
Интерпретация результатов
Внимание! В случае получения положительного результата обратитесь в Региональный центр по борьбе со СПИД.
Способ подготовки образцов для анализа экспресс-методом
Для анализа необходимо использовать свежеприготовленные образцы цельной крови, сыворотки или плазмы человека. Цельную кровь следует собирать в пробирку с антикоагулянтом. Допускается исследование цельной кроэи из пальца. Сыворотку или плазму получают общепринятым методом. Образцы сыворотки или плазмы могут содержать осадок, который мешает прохождению реакции - такие образцы следует центрифугировать при 3000 об./мин в течение 30 мин. Исследуемые образцы сыворотки или плазмы следует хранить при температуре от 2 до 8°С не более 5 суток или при температуре минус 20°С не более 1 мес. Не допускается повторное замораживание образцов. Образцы цельной крови человека не подлежат хранению.
При выполнении анализа рекомендуется:
- Перед использованием все компоненты теста (при условии хранения наборов в холодильнике) необходимо довести до комнатной температуры.
- Не смешивать компоненты из разных серий наборов.
Меры предосторожности
Одноразовый тест - полностью биологически безопасен. Однако в цепях гарантирования безопасности персонала при проведении анализа следует соблюдать меры предосторожности. Припятью при работе с потенциально инфекционным материалом, которым являются исследуемые образцы. Все использованные материалы подвергать обработке дезинфицирующим раствором (например, 6 % раствором перекиси водорода - не менее 6 часов). Анализ выполнять в спецодежде, маске и резиновых перчатках.
Предупреждения
При работе с образцами цельной крови, сыворотки, плазмы:
- Нельзя есть или курить;
- Необходимо надевать защитные перчатки, после работы тщательно вымыть руки;
- Избегать разбрызгивания образцов или образования аэрозоля;
- Тщательно очищать поверхность рабочего стопа при помощи соответствующего средства дезинфекции;
- Обезвреживать и утилизировать все исследованные образцы, отработанные картриджи, одноразовые пипетки и другие, потенциально загрязненные материалы методом автоклавирования или обработкой дезсредствами согласно действующей инструкции по работе с материалом, потенциально инфицированным ВИЧ;
- Не использовать реакционные картриджи и другие компоненты набора, если повреждена герметичность упаковки.
Принцип метода
Проведение анализа
Учёт результатов
Положительный результат
Если появляются 2 линии, одна из них контрольная в области маркировки (С) и вторая в области маркировки (Т) - исследуемый образец содержит антитела к ВИЧ -1 и /или к ВИЧ-2 - ВИЧ -1 и/ил и ВИЧ-2- положительный.Неверный результат
Если контрольная полоска (С) не появляется в течение 15 мин. то результат недействителен. Не действительно. Исследование необходимо повторить.Форма выпуска
- комплект № 1 - на одно исследование. В пачку из картона помещают:
- один герметически запаянный фольгарованный пакет, содержащий реакционный картридж, силикагель;
- одна запаянная пластиковая одноразовая пипетка с буферным раствором для диффузии образцов в объёме 1,0 мл;
- одна пластиковая одноразовая пипетка с объёмом капли - 50.0 мкл для внесения образца;
- одна инструкция по применению. - комплект №2 - на десять исследований. В пачку из картона помещают:
- десять герметично запаянных фольгированных пакетов с реакционными картриджами (в каждом пакете силикагель);
- прозрачный пластиковый флакон-капельница с буферным раствором для диффузии образцов в объёме 5.0 мл;
- десять пластиковых одноразовых пипетокс объёмом капли 50.0 мкп для внесения образцов;
- одна инструкция по применению. - комплект № 3 - на пятьдесят исследований. В пачку из картона помещают:
- пятьдесят герметически запаянных фольгированных пакетов с реакционными картриджами (в каждом пакете силикагель);
- два прозрачных пластиковых флакона - капельницы с буферным раствором для диффузии образцов в объёме по 10,0 мл;
- пятьдесят пластиковых одноразовых пипетокс объёмом капли 50,0 мкпдля внесения образцов:
- одна инструкция по применению. - комплект №4 - на сто исследований. В пачку из картона помещают:
- сто герметически запаянных фольгированных пакетов с реакционными картриджами (в каждом пакете - силикагель):
- четыре прозрачных пластиковых флакона - капельницы с буферным раствором для диффузии образцов в объёме по 10,0 мл;
- сто пластиковых одноразовых пипеток с объёмом капли 50,0 мкп для внесения образцов;
- одна инструкция по применению.
Условия хранения и транспортирования
При температуре от 4°С до 30°С. Замораживание не допускается. Хранить в недоступном для детей месте.
Срок годности 24 месяца. Не применять по истечению срока, указанного на упаковке.Условия отпуска
Для лечебно-профилактических и санитарно-профилактических учреждений. Для профессионального применения!
Читайте также:
