Набор реагентов для диагностики урогенитальных инфекций
Обновлено: 24.04.2024
Классический метод выявления урогенитальных микоплазм – культуральный метод, позволяющий не только обнаружить возбудителя, но и оценить их количественное содержание в исследуемом материале [9,31,37]. Для культивирования используют жидкие, полужидкие (0,3 % агар) и плотные (1,3 % агар) питательные среды. В лабораторной диагностике применяют, как правило, первый и третий варианты. Питательную основу сред составляют пептоны и перевары (например, ферментативный перевар из бычьих сердец). Кроме высококачественной белковой основы, среды для микоплазм должны содержать ряд добавок, играющих роль факторов роста. Для всех видов микоплазм и уреаплазм необходимы стеролы (холестерин и его производные) и жирные кислоты. Микоплазмы нуждаются также в фосфолипидах, гликолипидах и фосфогликолипидах. В жидкие питательные среды для выявления M. Hominis добавляют аргинин, для выявления Ureaplasma spp. – мочевину [5,33]. Эти субстраты при внутриклеточной ферментации приводят к образованию аммиака, что защелачивает питательную среду и визуально фиксируется по изменению цвета pH-индикатора. В плотные питательные среды в качестве дифференцирующего субстрата для визуального обнаружения микоплазм включают сульфат марганца. Рост на этих средах сопровождается образованием оксида марганца, окрашивающего колонии Ureaplasma spp. в коричневый цвет, в то время как колонии M. Hominis остаются бесцветными. Количественную оценку концентрации возбудителей осуществляют путем раститровки биологического материала в жидких или плотных питательных средах [26,62].
Набор дисков для определения чувствительности к противомикробным препаратам - 1 (НД-ПМП-1)
Набор реагентов "Диагностикум эритроцитарный коревой антигенный сухой для реакции пассивной гемагглютинации (РПГА)"
Набор реагентов для определения чувствительности Trichomonas vaginalis к антипротозойным препаратам (СВТ-АЧ)
Набор реагентов для одновременного выявления Ureaplasma urealyticum и Mycoplasma hominis (УРЕА/МИКО-СКРИН-2)
Набор реагентов для одновременного выявления и определения антибиотикочув-
ствительности Ureaplasma urealyticum и Mycoplasma hominis (УРЕА/МИКО-СКРИН-АЧ)
Бактериологический анализ урогенитальных инфекций (Ureaplasma urealyticum, Mycoplasma hominis, Mycoplasma genitalium, Trichomonas vaginalis) и определение их чувствительности к антибиотикам (кроме T.vaginalis)
• Возможность комплексного обследования больного по 4 урогенитальным инфекциям, с последующим определением чувствительности к 7 антибиотикам (эритромицин, офлоксацин, левофлоксацин, доксициклин, ципрофлоксацин, азитромицин, кларитромицин) в двух пороговых концентрациях. Возможна замена антибиотиков, указанных в списке, на другие по выбору клиента.
• Возможность комплектовать набор флаконами со средой только для одной инфекции .
• Питательные среды набора селективные, одновременно являются и транспортными, это исключает необходимость дополнительных пересевов.
• Индивидуальная упаковка для 1 анализа (1 флакон - 1 больной);
• проведение анализа не требует дополнительной подготовки флаконов и сред (растворение, розлив и т.д.), что значительно снижает возможность контаминации посторонней микрофлорой, а также уменьшает трудозатраты и время постановки анализа;
• учет результатов не требует дополнительных манипуляций (пересев, микроскопия);
• возможность выявления скрытых и сочетанных форм урогенитальных инфекций;
• сроки и условия хранения питательных сред более оптимальны (6 месяцев, а не 7 суток, при температуре +5. +10°С или 3 месяца при -10°С в случае работы с сублимированными средами);
• набор комплектуется 96-луночным планшетом, сорбированным антибиотиками, а также зондами в количестве 12 шт. для забора материала. От комплектации набора планшетом можно отказаться сообщив об этом в комментарии к заказу.
Среди инфекций органов репродукции выделяют инфекции, передаваемые половым путем (ИППП), инфекции, вызванные эндогенной микрофлорой, и инфекции, вызванные хирургическими вмешательствами. Важно учитывать, что клинические проявления большинства инфекций органов репродукции неспецифичны, во многих случаях симптоматика отсутствует. В связи с этим проведение лабораторных исследований очень важно для постановки верного диагноза.
Согласно ведущим мировым и российским рекомендациям, методы амплификации нуклеиновых кислот (ПЦР и NASBA) являются предпочтительными для диагностики целого ряда ИППП и урогенитальных инфекций.
Одно из преимуществ методов ПЦР и NASBA - универсальность подхода к проведению анализа. Вне зависимости от вида биологического материала и природы возбудителя этапы выполнения анализа будут следующими:
Соответственно, для проведения полного ПЦР-исследования на наличие инфекций органов репродукции требуются следующие реагенты:
Транспортные среды обеспечивают стабильность образцов при транспортировке и хранении биологического материала от мужчин и женщин.
Все транспортные среды АмплиСенс® содержат консервант, препятствующий росту специфической и сторонней микрофлоры, и стабилизатор, предохраняющий клетки человека и бактерий от лизиса и разрушения в процессе хранения и транспортировки.
Любую транспортную среду можно приобрести в готовом к использованию, раскапанном по пробиркам виде или во флаконе для раскапки в любые транспортные пробирки (приобретаются отдельно).
Основные наборы реагентов для экстракции ДНК, которые используются в лаборатории, выполняющей ПЦР-исследования на инфекции органов репродукции:
Амплификация и детекция
Современные клинико-диагностические лаборатории используют наборы реагентов для выявления инфекций органов репродукциии с двумя вариантами детекции продуктов амплификации.
Наиболее совершенный формат исследования – это ПЦР в реальном времени (FRT). Высокая скорость выполнения теста, контаминационная защищенность и возможность проведения все более актуальных в практической медицине количественных исследований – всё это привлекает лабораторию в методе ПЦР в реальном времени.
Метод ПЦР с флуоресцентной детекцией по конечной точке (FEP) взял всё лучшее от ПЦР в реальном времени (скорость, безопасность, автоматическое сохранение результатов в электронном виде), но не позволяет проводить количественные исследования.
Исторически первый метод ПЦР с электрофоретической детекцией всё реже используется в клинико-диагностических лабораториях ввиду того, что в меньшей степени подходит для потоковых исследований, требует больше помещений и трудозатрат для выполнения исследований и поддержания контаминационной безопасности.
Краткое сравнение реагентов для амплификации ДНК/РНК по варианту детекции продуктов амплификации
| Вариант детекции продуктов амплификации | ПЦР/NASBA в реальном времени | ПЦР с флуоресцентной детекцией по конечной точке |
| Обозначение | FRT, NASBA | FEP |
| Необходимое оборудование | амплификатор с детекцией в режиме реального времени | амплификатор; флуоресцентный детектор |
| Возможность количественного анализа | есть | нет |
| Количество одновременно выявляемых мишеней | 1. 4 | 1. 3 |
| Возможность полной автоматизации | есть | нет |
Наборы реагентов для выявления отдельных инфекций органов репродукции
АмплиСенс® предлагает широкую линейку наборов реагентов для выявления отдельных инфекций органов репродукции. Это простые и гибкие инструменты, позволяющие организовать поток анализов по потребностям любой лаборатории.
Подробную информацию об этих наборах реагентов можно найти в каталоге:
Диагностика в формате МУЛЬТИПРАЙМ
С точки зрения оптимизации лабораторных процессов, отдельная ПЦР-пробирка на каждую инфекцию - не самый экономически эффективный вариант. Современное оборудование позволяет выявлять до четырех инфекций в одной ПЦР-пробирке без потери чувствительности и специфичности анализа. Эта возможность реализована в наборах реагентов АмплиСенс® МУЛЬТИПРАЙМ , которые обеспечивают:
- снижение нагрузки на персонал и оборудование
- экономию пластиковых расходных материалов (до 4-х раз)
- снижение вероятности ошибок
- увеличение скорости выполнения анализов
- повышение пропускной способности лаборатории в 2.3-4.8 раза
Наборы реагентов АмплиСенс® МУЛЬТИПРАЙМ идеально подходят для выполнения комплексных исследований на репродуктивно значимые инфекции, позволяя уменьшать количество пробирок, приходящихся на одного пациента, с 6-7 до двух:
Примеры компоновки тестов АмплиСенс® МУЛЬТИПРАЙМ для выполнения комплексных исследований:
В зависимости от источника заражения инфекционно-воспалительные заболевания урогенитального тракта можно разделить на три группы: эндогенные инфекции, инфекции, передающиеся половым путём (ИППП) и внутрибольничные инфекции.
Источник заражения и пути распространения
Типичные примеры
Эндогенные инфекции
Возникают вследствие избыточного роста факультативной и условно-патогенной флоры, присутствующей во влагалище.
Дрожжевая инфекция, бактериальный вагиноз.
Инфекции, передаваемые половым путем (ИППП)
Половой контакт с инфицированным партнером.
Гонорея, хламидиоз, сифилис, трихомониаз, генитальный герпес, генитальный папилломатоз, ВИЧ.
Внутрибольничные инфекции
Медицинские процедуры или осмотры, вмешательства во время беременности, родов или в послеродовой период. Инфекция может быть занесена через шейку матки в верхние отделы половых путей и вызвать серьезные заболевания матки, фаллопиевых труб и других органов малого таза. Инфекция может переноситься через зараженные иглы или другие инструменты (например, маточные зонды) при недостаточном уровне санитарно-гигиенического контроля.
Воспалительные заболевания органов малого таза (ВЗОМТ) после перенесенных абортов или других трансцервикальных процедур, инфекционные осложнения в период беременности и в послеродовом периоде.
Диагностика инфекций урогенитального тракта предполагает комплексный подход, т.е. окончательный диагноз ставится врачом-специалистом на основании:
- осмотра пациента и выявления клинических симптомов;
- анализа результатов лабораторных исследований (микроскопия нативного мазка, культуральный метод, полимеразная цепная реакция (ПЦР), иммуноферментный анализ (ИФА), Digene HPV test, и др.);
- результатов инструментального обследования.
Один из методов лабораторного исследования - Полимеразная цепная реакция (ПЦР)- качественный и количественный (Real-Time-PCR) метод, позволяющий выявить ДНК возбудителя (бактерии, вирусы, простейшие) в биологических образцах. ПЦР - быстрый и достоверный метод диагностики инфекционных заболеваний. Для выявления возбудителей урогенитальных инфекций ПЦР является одним из наиболее эффективных и часто используемых методов диагностики. Метод ПЦР эффективен для обнаружения микроорганизмов, трудно выявляемых бактериологическими методами, атипичных форм бактерий, внутриклеточных паразитов и микроорганизмов, способных длительно существовать в организме хозяина и вызывать хронические заболевания. Благодаря высокой специфичности, метод ПЦР позволяет проводить видовую идентификацию микроорганизмов (например, дифференциация между родственными, но обладающими разной степенью патогенности видами Ureaplasma parvum и Ureaplasma urealiticum), а также типирование вирусов (например, типирование ВПЧ для определения степени онкогенного риска при наличии папилломавирусной инфекции).
Направление на лабораторное исследование осуществляется только врачом-специалистом и только после осмотра пациента. Интерпретация результатов лабораторных исследований должна осуществляться также только врачом-специалистом с учетом выявленных клинических симптомов и результатов инструментальных исследований.
Прайс-лист на наборы реагентов для ПЦР диагностики урогенитальных инфекций
Тест-системы для выявления ДНК в клиническом материале методом полимеразной цепной реакции (ПЦР) с флуоресцентной детекцией в режиме реального времени
N п/п
Набор реагентов для обнаружения ДНК возбудителей протозойных инфекций (Lamblia Intestinalis Giardia, Blastocystis hominis, Dientamoeba fragilis, Isospora belli, Cryptosporidium parvum, Entamoeba histolytica) методом полимеразной цепной реакции (ПЦР) в образцах биоматериала человека
Параметры
| Номер в каталоге | A-3-FRT-Прот-0,2 / A-3-FRT-Прот |
| Номер рег. удостоверения | РЗН 2015/2769 |
| Формат | раскапанный в пробирки 0,2 / нераскапанный |
| Количество тестов | 50 |
| Срок годности | 6 месяцев |
| Используемый метод | ПЦР в реальном времени |
| Приборная база | Приборы планшетного типа: ДТ прайм, ДТ лайт и др., BioRad Приборы роторного типа: Rotor-Gene |
Список выявляемых показателей:
- Lamblia Intestinalis Giardia,
- Blastocystis hominis,
- Dientamoeba fragilis,
- Isospora belli,
- Cryptosporidium parvum,
- Entamoeba histolytica.
Паразитарные заболевания в настоящее время остаются одним из самых распространенных видов патологии и поэтому представляют собой реальную медико-социальную проблему. Наиболее подвержены паразитарным болезням дети.
Набор реагентов предназначен для выявления наиболее часто встречающихся у человека протозойных инвазий (лямблиоза, амебиаза, бластоцистной инвазии, криптоспоридиоза, изоспороза). Перечисленные инфекции имеют общие пути заражения и могут иметь сходные клинические проявления (нарушения функций желудочно-кишечного тракта, аллергические реакции, астенизация и др.), что обуславливает необходимость одновременного скрининга на наличие указанных возбудителей и проведения дифференциальной диагностики, в особенности у пациентов с иммунодефицитными состояниями.
Cимптоматика вяло протекающих паразитарных болезней неспецифична, что заставляет большинство пациентов обращаться к непрофильным специалистам: аллергологу, гастроэнтерологу и т.д., в зависимости от ведущих симптомов заболевания. Кроме того указанные заболевания нередко протекают бессимптомно.
Читайте также: