Наборы сывороток сальмонеллезных о-комплексных и монорецепторных сывороток
Обновлено: 15.04.2024
Примечание: в скобки взяты антигенные фазы, имеющиеся непостоянно.
Для серологической идентификации с целью окончательного установления родовой принадлежности и определения сероварианта используют чистые культуры бактерий, отнесенные по морфологическим, культуральным и ферментативным свойствам к роду сальмонелл. Для этих целей биофабриками выпускаются наборы сывороток сальмонеллезных О-комплексных и монорецепторных О- и Н-агглютинирующих для экспресс-идентификации сальмонелл в РА на стекле. Эти наборы позволяют определить родовую и серовариантную принадлежность 33 групп сальмонелл, наиболее часто выделяемых от животных, из продуктов животного происхождения и объектов внешней среды.
Таблица 11 -Состав наборов сывороток сальмонеллезных О-комплексных и монорецепторных О- и Н-агглютинирующих для идентификации сальмонелл в РА на стекле
Набор № 1
Набор № 2
Монорецепторные сыворотки
Сыворотки выпускают двумя наборами. В набор № 1 входят О-комплексные сыворотки № 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7 и 8. В набор № 2 входят О- и Н-монорецепторные сыворотки.
Таблица 12 - Серогрупповая принадлежность сальмонелл
по результатам РА
| Агглютинируется комплексными сыворотками | Содержит О-антиген | Относится к серогруппе |
| 1 и 2 | 04 | В |
| 1 и 3 | 07 | С1 или С4 |
| 1 и 4 | 08 | С2или Сз |
| 1 и 5 | 09 | D1 или D2 |
| 1 и б | 010 | Е, |
| 1 и 7 | 015 | Е2 или Е3 |
| 1и 8 | 019 | Е4 |
| 2 и 3 | 011 | F |
| 2 и 4 | 016 | I |
| 2 и 5 | 017 | J |
| 2 и 6 | 018 | К |
| 2 и 7 | 021 | L |
| 2 и 8 | 028 | М |
| 3 и 4 | 030 | N |
| 3 и 5 | 035 | О |
| 3 и 6 | 038 | Р |
| 3 и 7 | 039 | Q |
| 3 и 8 | 040 | R |
| 4 и 5 | 041 | S |
| 4 и 6 | 042 | Т |
| 4 и 7 | 043 | U |
| 4 и 8 | 044 | V |
| 5 и 6 | 045 | W |
| 5 и 7 | 047 | X |
| 5 и 8 | 048 | Y |
| 6 и 7 | 050 | Z |
| 6 и 8 | 052 | 52 |
| 7 и 8 | 053 | 53 |
Агглютинирующие адсорбированные O- и H-сыворотки выпускаются согласно серологической классификации бактерий рода сальмонелла наборами и отдельными рецепторами. Кроме монорецепторных O- и H-сывороток производят поливалентную сальмонеллезную O-сыворотку против сальмонелл основных пяти групп (A, B, C, D, E):
Полив Q - f, g; g; m;
g, p; g, p, u, q; s, t, m,
L - 1, 2; 1, 5; 1, 6; 1, 7
Полив A, B, C, D, E
Наборы O- и H-сывороток выпускают двух видов.
Узкий набор состоит из 28 рецепторов, из них O-сыворотки: 1; 2; 3; 10; 4; 5; 6; 7; 8; 9; vi-полив A, B, C, D, E и H-сыворотки a, b, c, d, en, . st, g, eh, i, lv, m, r, x, 1,2; 1,5 и компоненты вторых фаз 2, 5 для идентификации наиболее распространенных бактерий сальмонелла. В наборе 56 мл.
Расширенный набор включает 108 рецепторов. В наборе 216 мл.
Монорецепторные O- и H-сыворотки применяют для идентификации бактерий рода сальмонелла по реакции агглютинации на предметном стекле, поливалентную - для отбора культур из первичных посевов.
Поливалентная сыворотка против сальмонелл основных групп содержит O-агглютинины против антигенов 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 12, 15, 19, 26 и vi.
При агглютинации культуры с O-сывороткой определяют ее групповую принадлежность. Затем при помощи H-сывороток соответствующей группы окончательно устанавливают тип испытуемой культуры.
Поливалентные H-сыворотки Q, , L применяют также в реакции на стекле для упрощенной идентификации сальмонелл - определения антигенных комплексов, включающих родственные H-антигены.
Сухие сыворотки перед употреблением растворяют в стерильном физиологическом растворе из расчета 2 мл на ампулу, что соответствует первоначальному объему сыворотки до высушивания. Растворенные сыворотки используют в реакции агглютинации на стекле без дальнейшего разведения.
Методика. На стекло пипеткой наносят каплю агглютинирующей сыворотки, затем испытуемую культуру после 20-часового выращивания на агаре наносят петлей вблизи края капли и растирают на месте. Далее петлей берут сыворотку из рядом лежащей капли, вносят в бактерийную массу и повторно растирают. Для определения O-антигена культуру берут с верхней части скошенного в пробирке агара, а для определения H-антигена - с нижней.
Диагностические сыворотки консервированы очищенной борной кислотой. В случае дополнительного консервирования рекомендуется применять борную кислоту.
Растворенные сыворотки должны храниться в пробирках под резиновыми пробками, сухие - в прохладном и сухом месте.
Все замечания по качеству агглютинирующих сывороток для идентификации бактерий рода сальмонелла следует направлять в институт, изготовляющий препараты.
Откройте актуальную версию документа прямо сейчас или получите полный доступ к системе ГАРАНТ на 3 дня бесплатно!
Если вы являетесь пользователем интернет-версии системы ГАРАНТ, вы можете открыть этот документ прямо сейчас или запросить по Горячей линии в системе.
Внешний вид упаковки и препарата может отличаться от изображённого на фотографии
Филиал АО НПО "Микроген" в г. Пермь "Пермское НПО "Биомед"" Россия, 614089, Пермский край, г. Пермь, ул. Братская, д. 177
Инструкция по применению
Описание
Предназначены для выявления в сыворотке крови человека антител к О-антигенам сальмонелл в реакции пассивной гемагглютинации.
Форма выпуска
Выпускается в комплекте №1: 1 флакон по 6 мл диагностикум эритроцитарный сальмонеллезный комплексный (1, 2, 3, 4, 6, 7, 8, 9, 10, 12) жидкий; 6 флаконов по 0,1 мл сыворотки диагностические сальмо- неллезные неадсорбированные сухие к отдельным серогруппам A, B, C1, C2, Д, E; 1 флакон по 1 мл 1% взвесь формалинизированных, несенсиби- лизированных эритроцитов барана; 4 флакона по 8 мл 0,9% раствора натрия хлорида; планшет круглодон- ный для иммунологических реакций 2 штуки. В комплекте № 2: 1 флакон по 3 мл диагностикум эритроцитарный сальмонелезный О-антигенный жидкий групповой (серогрупп А (1, 2, 12), В (1, 4, 12), С1 (6, 7), С2 (6, 8), Д (1, 9, 12), Е (3, 10); 1 флакон по 0,1 мл сыворотка диагностическая сальмонеллезная неадсорбированная сухая к одной из серогрупп А, В, С1, С2, Д, Е; 1 флакон по 1 мл 1% взвесь формалинизированных, несенсиби- лизированных эритроцитов барана; 2 флакона по 8 мл 0,9% раствора натрия хлорида; планшет круглодонный для иммунологических реакций 1 штука.
Показания для применения
Предназначены для выявления в сыворотке крови человека антител к О-антигенам сальмонелл в реакции пассивной гемагглютинации.
Режим дозирования и способ применения
Формалинизированный фосфатно - солевой буферный раствор (рН 7,0-7,4): 0,86 г натрия хлорида, 0,56 г натрия фосфорнокислого двузамещенного, предварительно высушенного до постоянной массы, 0,084 г калия фосфорнокислого однозамещенного помещают в мерную колбу вместимостью 1 л, растворяют в 800 мл воды очищенной и доводят тем же растворителем до метки. К полученному раствору прибавляют 0,3 % нейтрального формалина.
Содержимое ампулы с сывороткой диагностической к риккетсиям Провачека, сухой для РНГА регидратируют в 1 мл фосфатно-солевого буферного раствора (рН 7,0-7,4).
Флаконы с диагностикумом и эритроцитами человека непосредственно перед использованием интенсивно встряхивают до полной гомогенизации содержимого. После этого флаконы вскрывают. Для проведения РНГА истощения и инактивации исследуемых сывороток не требуется.
Меры предосторожности при применении
Внешний вид упаковки и препарата может отличаться от изображённого на фотографии
Филиал АО НПО "Микроген" в г. Пермь "Пермское НПО "Биомед"" Россия, 614089, Пермский край, г. Пермь, ул. Братская, д. 177
Инструкция по применению
Описание
Действующим началом диагностикума является Ви-антиген, фиксированный на поверхности эритроцитов. При взаимодействии с сыворотками, содержащими антитела к Ви-антигену, наблюдается феномен агглютинации эритроцитов.
Форма выпуска
Выпускается в наборе 1 флакон с диагностикумом - 3 мл, диагностическая сыворотка сальмонеллезная адсорбированная рецептор Ви Сухая в виде лиофилизата из 0,1 мл 1 флакон; 0,9 % раствор натрия хлорида - 2 флакона по 8 мл; планшет для иммунологических реакций однократного применения - 1 шт.
Состав
Диагностикум эритроцитарный сальмонеллезный Ви-антигенный, который представляет собой 0,75 % взвесь формалинизированных и сенсибили-зированных Ви-антигеном эритроцитов человека О (I) группы крови в фос-фатном буферном растворе (рН- 7,2 ± 0,2; концентрация - 0,06 моль/л). Консервант - формалин. Гомогенная суспензия коричневого цвета без хлопьев; при отстаивании обра¬зуется 2 слоя: плотный коричневый осадок эритроцитов и прозрачная желто¬ватая надосадочная жидкость 1 флакон-3 мл.
Сыворотка диагностическая сальмонеллезная адсорбированная рецептор Ви сухая - гомогенная масса от белого с коричневатым оттенком до бежевого цвета. 1 флакон - из 0,1 мл.
Поддерживающий раствор - 0,9 % раствор натрия хлорида - прозрачная бесцветная жидкость, рН от 6,5 до 7,5. 2 флакона -по 8 мл.
Планшет круглодонный для иммунологических реакций однократного применения - состоит из 8 рядов, каждый из которых включает в себя 12 лунок с прозрачным, бесцветным, круглым дном. 1 шт.
Диагностикум должен агглютинироваться в РПГА сывороткой диагностической сальмонеллезной адсорбированной рецептор Ви сухой в разведении не ниже 1/2 их титра, но не менее, чем 1/160. Диагностикум не должен агглютинироваться сыворотками диагностичесскими сальмонеллезными адсорбированными сухими для РА: О рецептор 9 - в разведении 1:40 и выше, Н рецептор d - в разведении 1:10 и выше.
Показания для применения
Предназначен для выявления в сыворотке крови человека специфических антител к Ви-антигену сальмонелл тифа в реакции пассивной гемагглютинации (РПГА).
Режим дозирования и способ применения
В качестве анализируемых образцов используют образцы сыворотки крови человека.
Анализируемый образец хранят в условиях, предотвращающих бактериальный пророст при температуре от 2 до 8 °С не более 72 часов. Допускается замораживание, замороженные анализируемые образцы перед исследованием разморозить при комнатной температуре.
Анализ образцов с выраженным гемолизом, бактериальным проростом, а также длительно хранившихся без замораживания или повторно замораживаемых не допускается.
ПРОВЕДЕНИЕ АНАЛИЗА
Приготовление растворов для РПГА.
Флаконы с сывороткой диагностической сальмонеллезной адсорбированной рецептор Ви сухой вскрыть и добавить 1 мл прилагаемого 0,9 % раствора натрия хлорида, получив, таким образом, разведение 1:10, являющееся рабочим разведением.
Вскрытый флакон с сывороткой диагностической сальмонеллезной адсорбированной рецептор Ви сухой при разведении 1:10 в закрытом виде можно хранить при температуре от 2 до 8 °С в течение одного месяца.
Диагностикум готов к применению. Перед вскрытием флакон с диагностикумом необходимо осторожно встряхнуть до получения гомогенной суспензии. В ходе работы встряхивание рекомендуется повторять.
Вскрытый флакон с диагностикумом в закрытом виде можно хранить при температуре от 2 до 8 °С в течение одного месяца.
0,9 % раствор натрия хлорида. Готов к применению.
Проведение РПГА.
При контроле любого количества анализируемых сывороток обязательна постановка 1 ряда агглютинации с сывороткой диагностической сальмонеллезной адсорбированной рецептор Ви сухой.
Для постановки РПГА используют планшет для иммунологических реакций одно-кратного применения. Готовят двукратные серийные разведения анализируемых сывороток в 0,05 мл прилагаемого 0,9 % раствора натрия хлорида начиная с 1:10 до 1:2560 и 1 ряд двукратного серийного разведения сыворотки диагностической сальмонеллезной адсорбирован-ной рецептор Ви сухой, начиная с разведения 1:10, до удвоенного титра, указанного на этикетке флаконов данной сыворотки.
В каждую из лунок с разведениями сыворотки прибавляют по 0,025 мл диагностикума.
Обязательными контролями являются:
1. Контроль сыворотки диагностической сальмонеллезной адсорбированной рецептор
Ви сухой и анализированной сыворотки, которые в разведении 1:10 в объеме 0,05 мл вносят
в две контрольные лунки.
2. Проверка отсутствия спонтанной агглютинации диагностикума, для чего в две лунки, содержащие по 0,05 мл 0,9 % раствора натрия хлорида добавляют по 0,025 мл диагностикума.
Планшет встряхивают и помещают на 1,5-2,0 ч в термостат при температуре (37+1) °С.
Меры предосторожности при применении
Объективные результаты анализа гарантируются при выполнении следующих условий:
- хранение всех реагентов набора осуществлять при температуре от 2 до 8 °С;
- не использовать реагенты с истекшим сроком годности;
- не использовать реагенты набора при отсутствии на их упаковке соответствующей маркировки;
- для проведения РПГА использовать реагенты, входящие только в данный набор.
Читайте также: