Напряженность иммунитета против дифтерии

Обновлено: 24.04.2024

3.1.2. ЭПИДЕМИОЛОГИЯ. ПРОФИЛАКТИКА ИНФЕКЦИОННЫХ БОЛЕЗНЕЙ. ИНФЕКЦИИ ДЫХАТЕЛЬНЫХ ПУТЕЙ

Серологические методы диагностики и мониторинга дифтерийной инфекции

1. Разработаны ФБУН "НИИ эпидемиологии и микробиологии имени Пастера" (Г.Я.Ценева, Л.А.Краева); ФБУЗ "Центр гигиены и эпидемиологии в Вологодской области" (Б.В.Лимин, Е.А.Алексеева); ГБОУ ДПО РМАПО Минздрава России (О.А.Бургасова); Федеральной службой по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека (А.А.Мельникова).

2. Утверждены руководителем Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека, Главным государственным санитарным врачом Российской Федерации А.Ю.Поповой 3 ноября 2015 г.

3. Введены впервые.

I. Область применения

1.1. В методических рекомендациях (далее - MP) представлена рациональная и эффективная тактика использования серологических методов диагностики и мониторинга иммунитета к дифтерийной инфекции.

1.2. В настоящих MP описаны используемые в последние годы международные и отечественные методы определения противодифтерийных антител, а также предложен наиболее надежный и перспективный метод иммуноферментного анализа (далее - ИФА) для определения суммарных и высокоавидных антител, его стандартное применение, в том числе предложены надежные критерии оценки защитных уровней, необходимые для выявления среди детей и взрослых групп повышенного риска и оценки напряженности индивидуального и коллективного иммунитета к дифтерийной инфекции.

1.3. Настоящие MP предназначены для врачей-эпидемиологов и микробиологов и носят рекомендательный характер.

II. Введение

2.1. Несмотря на высокие показатели привитости населения от дифтерии в разных регионах России периодически регистрируются случаи заболевания дифтерией или носительства Corynebacterium diphtheria, особенно среди лиц в закрытых коллективах [3, 4, 8].

2.2. В настоящее время, спустя 15 лет после прошедшей эпидемии дифтерии, повсеместно отмечается снижение внимания клиницистов к этой инфекции. Профилактические и диагностические обследования проводятся, но не в полном объеме [12].

2.3. Как известно, защищенность от дифтерии в нашей стране определяется с помощью реакции прямой гемагглютинации (РПГА) [13]. Однако результат реакции, выражаемый в титрах, не позволяет точно определить количество антитоксических антител (АТ-АТ), а, значит, и оценить состояние иммунитета против дифтерии. Разработка и повсеместное внедрение в практику оценочной шкалы защищенности от дифтерии на основании определения количества АТ-АТ позволили контролировать качество вакцинации [14]. Однако информация о количестве вырабатываемых противодифтерийных антител не всегда дает достоверный ответ на вопрос о степени защищенности от дифтерии. Это было продемонстрировано во время последней эпидемии дифтерии в России и после нее, когда у заболевших (до 40% случаев) находили в крови АТ-АТ защитных уровней [9, 10]. Проведенными исследованиями установлена определяющая роль высокоавидных АТ-АТ в защите от дифтерии, которые могут быть определены наряду с количеством суммарных АТ-АТ в иммуноферментном анализе [2, 5, 6, 16]. При этом была показана динамика формирования и утраты АТ-АТ, равно как и показателя их авидности, изучены особенности специфического иммунитета к дифтерии среди различных групп населения [1, 7, 11, 15]. Тем не менее, отсутствие программ и схем исследования при диагностике дифтерии и изучении напряженности иммунитета у населения, содержащих новые аргументированные данные, не позволяют полноценно и качественно проводить бактериологический и иммунологический контроль в отношении защищенности к дифтерии на местах.

0,01 МЕ/мл - минимальная степень защиты,

0,01-0,09 МЕ/мл - некоторая степень защиты,

0,1-0,9 МЕ/мл - защитный уровень антител,

1,0 и > МЕ/мл - стойкая длительная невосприимчивость к дифтерии.

III. Общие положения

3.2. Список оборудования и материалов, необходимых для проведения исследования, представлен в прилож.1.

IV. Группы населения, подлежащие обследованию

4.1. Серологический контроль состояния иммунитета у детей и подростков

4.1.1. Серологический контроль иммунитета в различных группах позволяет представить иммунологическую структуру населения и выявить группы повышенного риска, определить состояние вакцинального иммунитета как в ранние, так и в отдаленные сроки после вакцинации.

4.1.2. Серологический контроль состояния и длительности сохранения вакцинального иммунитета необходимо осуществлять систематически методом выборочного серологического обследования (мониторинга) различных групп населения в городах и сельских районах каждой области, края.

4.1.3. Обследованию подлежат привитые против дифтерии дети и подростки от 3 до 18 лет каждой возрастной группы (3 года, 4 года, 5 лет и т.д., особое внимание следует обратить на детей 9-13 лет).

4.1.4. Серологический контроль следует проводить, начиная с групп детей 3 лет не ранее, чем через 6 месяцев после последней прививки. К этому возрасту должен быть закончен первичный вакцинальный комплекс против дифтерии, включающий вакцинацию и первичную ревакцинацию (V и RV).

4.1.5. В случае отсутствия материально-технических возможностей обследования каждой возрастной группы детей и подростков можно отобрать возрастные группы, подлежащие очередной ревакцинации (4- 5 лет, 9-10 лет, 14-15 лет).

4.1.6. При получении неудовлетворительных иммунологических показателей в этих группах контроль за иммунитетом следует провести в каждой возрастной группе.

4.2. Серологический контроль состояния иммунитета у взрослых

4.2.1. Наиболее подвержены заболеванию дифтерией следующие группы "риска": лица старше 50 лет; рабочие промышленных предприятий, особенно занятые на вредном производстве; лица, страдающие туберкулезом, а также гепатитом С, СПИД, наркоманией и алкоголизмом.

4.2.2. Особое внимание должно уделяться лицам в закрытых коллективах.

V. Описание методов определения антител

5.1. Реакция пассивной гемагглютинации (РПГА)

Для определения уровней сывороточных АТ-АТ в крови здоровых людей в нашей стране используют реакцию пассивной гемагглютинации (РПГА), которая рекомендована методическими указаниями МУК 4.2.3065-13 "Лабораторная диагностика дифтерийной инфекции", утвержденными Главным государственным санитарным врачом Российской Федерации 14 июля 2013 г. Эта реакция имеет свои преимущества, состоящие в простоте постановки, быстроте получения результатов и экономичности.

Для постановки реакции используется диагностикум дифтерийный эритроцитарный антигенный. Поскольку срок годности эритроцитарных диагностикумов составляет 1 год, необходимо перед каждым проведением серологического исследования сывороток проверять активность препарата. Проверка проводится с контрольным антитоксином, приложенным к комплекту, либо используется национальный препарат дифтерийного антитоксина, очищенного ферментолизом и специфической сорбцией, диагностический сухой. Допускается исследование контрольной сыворотки (лабораторный образец) с известным титром дифтерийных антител. Если диагностикум выявляет в сыворотке антитела в концентрации на 2-3 разведения ниже, чем они в ней содержатся, то такой препарат не пригоден для дальнейшего исследования.

А. П. Подаваленко

Оценка динамики формирования иммунитета к дифтерии и столбняку у лиц, привитых по принципу туровой иммунизации

Харьковский институт усовершенствования врачей, кафедра эпидемиологии и медпаразитологии

Расширенная Программа иммунизации /РПИ/ служит основным инструментом управления эпидемическим процессом дифтерии в глобальном масштабе. Для стран Европы ВОЗ установила 95%-й уровень охвата прививками детей, подростков и взрослых, относящихся к категории повышенного риска заражения [2]. Условно состояние иммунопрофилактики /ИП/ оценивают по записи о произведенных прививках и суммированным показателям охвата ими разных групп населения. Такая информация является формальной и не отражает фактической защищенности.

Уже с 60-х годов на территориях республик бывшего СССР проводили выборочные серологические исследования, которые помогли определить динамику формирования противодифтерийного и противостолбнячного иммунитета населения. В дальнейшем были разработаны научно-исследовательские программы по слежению за состоянием коллективного иммунитета населения к инфекциям, управляемым средствами специфической профилактики. Мониторинг результатов выборочного серологического обследования показал, что доля незащищенных в разных группах взрослого населения колеблется в значительных пределах [1]. Выявление антител к дифтерийному и столбнячному компонентам ассоциированных вакцин в защитных и больших титрах должно определять целесообразность
освобождения значительной части населения от необоснованной иммунизации, которая может оказаться и вредной. Известно, что успех иммунопрофилактики дифтерии и столбняка зависит и от качества выполняемых прививок, т. е. вида вакцин, дозы, интервала и техники введения. Такое направление иммунопрофилактики отражено и в рекомендациях ВОЗ по контролю за выполнением РПИ в странах Европы и мира, поставившей задачу достичь 90%-ного уровня иммунности [2].

В связи с вышеизложенным, целью настоящей работы явилось изучение состояния иммунитета к дифтерийному и столбнячному анатоксинам у студентов как одной из наиболее пораженной декретированной категории взрослого населения. Именно в силу повышенного риска заражения и была взята под наблюдение группа студентов в количестве 131 человека. Формирование группы для серологического обследования осуществлялось на основе кластерной выборки. При подборе репрезентативной и контрольной групп руководствовались данными о прививках, внесенных в ф. 63. Лица, не привитые против дифтерии и столбняка, к исследованию не привлекались. Антитоксический противодифтерийный и противостолбнячный иммунитет определяли в РПГА с активностью гемдиагностикума дифтерийного 1:6400, столбнячного 1:1280.

В группу обследованных входили студенты Харьковского авиационного института в возрасте 18—20 лет. Репрезентативную группу составили 90 студентов, которые были обследованы 4 раза. Первое обследование проводили перед туровой иммунизацией, второе — через один месяц после иммунизации АДС-М анатоксином в дозе 0,5 мл, третье — через шесть месяцев и четвертое — через один год. Контрольную группу (41 человек) обследовали один раз. Все студенты, входившие в контрольную группу, последнюю прививку против дифтерии и столбняка получили за 1,5—2 года до обследования (в период туровой иммунизации они не прививались).

Состояние антитоксического иммунитета против дифтерии оценивали по следующим критериям: 0 — отрицательный титр антител; 1:10, 1:20 — не защищены; 1:40 — минимальный защитный титр; 1:80,1:160 — низкие защитные титры; 1:320, 1:640 — средние защитные титры; 1:1280 — высокий защитный титр. Против столбняка: 0 — отрицательный титр антител; 1:10 — не защищены; 1:20, 1:40 — низкие защитные титры; 1:80 и выше — средние и высокие титры антител.

Обследование студентов до и после проведения прививок выявило достоверные различия между уровнями напряженности противодифтерийного иммунитета (табл. 1). Имело место выраженное изменение уровня антител на протяжении года. Так, незащищенных против дифтерии до иммунизации было 2,2%, через месяц после иммунизации — 10,0%, через шесть месяцев — 17,6% и через год — 21,1%. Различия между показателями до иммунизации и через год существенны (t > 2). В течение года несколько увеличилось число лиц с минимальными титрами антител с 10,0% до14,4% через год (t < 2) и уменьшилось с низкими титрами с 45,5% до 40,0% (t < 2). Существенные изменения произошли в динамике средних титров (1:320, 1:640). До иммунизации число лиц с указанными титрами, то есть защищенных против дифтерии, было 42,2%, через месяц стало 16,7% (t >2), через шесть месяцев — 37,8% (t < 2), но через год — 21,2% (t >2). То есть за год число лиц с защитными титрами уменьшилось в два раза. Кроме того, через год после иммунизации появились лица с высокими титрами антител (3,3%), хотя прирост их был незначительным (t < 2).

1 — обследования до иммунизации;
2 — через 1 месяц после иммунизации;
3 — через 6 месяцев после иммунизации;
4 — через 1 год после иммунизации;
K — контрольная группа.

Результаты исследования напряженности иммунитета против столбняка (табл. 2) свидетельствуют, что число лиц, у которых отмечено нарастание титров антител после иммунизации было незначительным — 2,2% до прививки и 3,3% через год. При этом, увеличилось число лиц с титрами 1:20, 1:40 с 1,1% до 9,0% через год. Существенные изменения отмечены также в группе наблюдаемых лиц с титрами 1:80 и выше — до иммунизации в группе их было 96,6%, а через год 87,7% (t > 2).

Исследование содержания в крови антител к возбудителям наиболее распространенных инфекций детского возраста.

Синонимы русские

Иммунитет к детским инфекциям, детские инфекции (комплекс анализов).

Синонимы английские

Assessment of Postvaccine Immunity, Measles, Mumps, Rubella (MMR) Immunity Profile Test, Tetanus Antitoxoid Titer Test, Diphtheria Immunity Test, Varicella Zoster Virus (VZV) IgG Titer Test, Hepatitis B Immunity Status Test.

Какой биоматериал можно использовать для исследования?

Как правильно подготовиться к исследованию?

Не курить в течение 30 минут до исследования.

Общая информация об исследовании

После контакта иммунной системы организма с возбудителем инфекции в результате заболевания или вакцинации вырабатываются специальные защитные белки – антитела, или иммуноглобулины. При этом антитела к конкретному возбудителю способны узнавать его и соединяться только с ним. Это свойство лежит в основе специфичности иммунитета – способности организма защищаться от определенных инфекционных заболеваний. Существует несколько классов антител, они отличаются друг от друга по свойствам и продолжительности циркуляции в крови. Иммуноглобулины класса G появляются через 2-3 недели после контакта с возбудителем и могут сохраняться в течение многих лет. Их выявление в крови свидетельствует о стадии выздоровления от инфекции, перенесенной в прошлом инфекции или поствакцинальном иммунитете. Для определения наличия антител к возбудителям инфекционных заболеваний используют иммунологические методы диагностики – исследования, в основе которых лежит взаимодействие антител с антигенами.

В данное комплексное исследование входит определение наличия в крови антител (суммарных или иммуноглобулинов G) к наиболее распространенным инфекционным заболеваниям детского возраста:

Anti-HBs антитела. Вирусный гепатит В – повсеместно распространенное инфекционное заболевание. Вирус распространяется через поврежденную кожу, при контакте с инфицированной кровью и некоторыми другими биологическими жидкостями, а также при многократном использовании инъекционных игл и шприцов. Также вирус гепатита В может передаваться от матери ребенку в процессе родов. Вирус имеет внешнюю оболочку, на которой расположен поверхностный антиген – HBsAg. HBsAg является первым выявляемым в крови маркером инфекции, однако его уровень снижается по мере развития болезни и затем окончательно исчезает. После исчезновения HBsAg в крови появляются анти-HBs-антитела. Наличие анти-HBs-антител означает длительный приобретенный иммунитет вследствие перенесенного гепатита или вакцинации. Мониторинг уровня анти-HBs-антител необходим для оценки напряженности достигнутого после вакцинации иммунного ответа, продолжительности активной иммунной защиты и сроков ревакцинации. Считается, что концентрация анти-HBs-антител более 10 мМЕ/мл свидетельствует о выздоровлении после заболевания или о достаточном иммунном ответе после вакцинации. Концентрация анти-HBs-антител менее 10 мМЕ/мл означает отсутствие приобретенного иммунитета к гепатиту В.
Bordetella pertussis, IgG. Бактерия В. pertussis является возбудителем коклюша – инфекции, поражающей дыхательную систему. Широкое распространение вакцинации способствовало сокращению заболеваемости коклюшем, однако поствакцинальный иммунитет значительно ослабевает по прошествии 10-15 лет, что делает целесообразным его оценку в этот период для определения необходимости ревакцинации.
Clostridium tetani, антитела. Cl. tetani – возбудитель столбняка – инфекционного заболевания, протекающего с поражением нервной системы. Определение антител к возбудителю столбняка используется для оценки напряженности поствакцинального иммунитета и определения необходимости ревакцинации.
Corynebacterium diphtheriae, антитела. Дифтерия сопровождается воспалением слизистой ротоглотки и носа. Возбудитель инфекции выделяет в кровь токсин, воздействующий на нервную систему, сердце и почки. Антитела к дифтерийному токсину вырабатываются при заболевании либо после вакцинации (в большинстве случаев дети вакцинируются вакциной АКДС после трех месяцев). Определение антител к дифтерийному токсину используется для контроля напряженности иммунитета и определения необходимости ревакцинации.
Mumps Virus, IgG – антитела к возбудителю эпидемического паротита ("свинки"). После вакцинации или перенесенного заболевания иммуноглобулины класса G к возбудителю паротита сохраняются в течение всей жизни, определение их уровня в крови целесообразно проводить для оценки наличия иммунитета при отсутствии сведений о вакцинации либо перенесенном ранее заболевании.
Rubella Virus, IgG (количественно) – количественное определение антител к возбудителю краснухи. Иммуноглобулины G появляются в процессе выздоровления после перенесенного заболевания или после вакцинации и сохраняются в крови до 10 лет и более. Их определение используется для оценки напряженности поствакцинального иммунитета и верификации перенесенной ранее инфекции. Важно отметить, что заболевание краснухой матери во время беременности может привести к инфицированию плода с развитием тяжелого поражения нервной системы, сердца и глаз.
Varicella Zoster Virus, IgG. Данный вирус способен вызывать две формы инфекции – опоясывающий лишай и ветряная оспа ("ветрянка"). Ветрянка является результатом первичного инфицирования вирусом и характерна для детского возраста, опоясывающий лишай – вызван реактивацией вируса, сохраняющегося в нервных ганглиях после первичного инфицирования, и чаще встречается у взрослых. Во время беременности инфекция Varicella Zoster может приводить к появлению пороков развития плода. Иммуноглобулины G, появляющиеся после первичного контакта с вирусом (у переболевших ветрянкой), обеспечивают пожизненный иммунитет к Varicella Zoster.
Вирускори, IgG (Measles Virus, IgG). Корь сопровождается поражением слизистых дыхательных путей и кожи. Иммуноглобулины класса G к вирусу кори появляются в крови после перенесенного заболевания или вакцинации и циркулируют в течение многих лет. Исследование их концентрации в крови проводится для оценки напряженности иммунитета.

Для чего используется исследование?

Для оценки наличия приобретенного специфического иммунитета к возбудителям наиболее распространенных инфекций детского возраста.

Когда назначается исследование?

При необходимости определить напряженность приобретенного иммунитета - детям и взрослым в случаях, когда отсутствуют сведения о проведенной вакцинации и перенесенных ранее инфекционных заболеваниях.

Что означают результаты?

Результат данного исследования содержит титр антител к каждому из возбудителей. Референсные значения и причины изменений по каждому отдельному показателю:

Что может влиять на результат?

Причиной изменения уровня иммуноглобулинов может быть не только поствакцинальный иммунитет, но и иммунная реакция на острое заболевание. При необходимости исследование повторяют через 10-14 дней – нарастание титра антител в 4 раза и более свидетельствует о заболевании.

Серологический анализ крови, в ходе выполнения которого определяется суммарный титр специфических антител к дифтерийному анатоксину, проводится для диагностирования дифтерии и оценивания напряженности иммунитета к ее возбудителю для решения вопроса о необходимости ревакцинации.

Дифтерия является острым инфекционным заболеванием, развитие которого вызывает Corynebacterium diphtheriae – токси-генная корине-бактерия, проникающая в человеческий организм аэрозольным путем. Инфекционно-воспалительный процесс характеризуется интоксикационным синдромом, поражением слизистых покровов верхнего отдела дыхательных путей и внутренних органов. Источник заражения – временный бактерио-носитель или больной дифтерией. Инкубационный период длится не более 4-х дней.

Основной фактор патогенности C. diphtheriae – вырабатываемый ею экзотоксин, с его воздействием на организм человека связаны клинические проявления инфекции и численность смертельных исходов заболевания. Для предотвращения распространенности дифтерии была разработана организованная иммунизация – именно благодаря этой системе удалость значительно снизить количество случаев заражения C. diphtheriae. При инфицировании у не привитых лиц развиваются тяжелые осложнения инфекционного процесса – отек гортани, нарушение функционирования сердечно-сосудистой, дыхательной, мочевыделительной и нервной систем.

Вакцина против дифтерии состоит из модифицированного бактериального токсина – токсоида. В результате его воздействия на человеческий организм, иммунная система производит специфические белки-иммуноглобулины, обеспечивающие защиту от инфекции. Для определения их концентрации в циркулирующей крови используют иммунологическое исследование.

Когда делают анализ крови?

Анализ крови на противодифтерийные антитела необходим при:

клиническом разграничении заболеваний, которые протекают со схожими клиническими признаками – инфекционного мононуклеоза, ангины, пара-тонзиллярного абсцесса, эпи-глотитта, острого ларинготрахеита;
наличии у пациента симптоматики дифтерии;
решении вопроса о целесообразности вакцинации либо ревакцинации;
оценивании эффективности иммунизации против дифтерии.

Правила подготовки к анализу крови

Биологический материал – сыворотка, ее получают путем центрифугирования образца крови из вены. Венепункция производится в утренние часы (с 8.00 до 11.00), натощак. За сутки до процедуры пациенту следует исключить:

Прием лекарственных средств.
Пищевую, эмоциональную и физическую нагрузки.
Распитие алкогольных напитков.

Расшифровка результата анализа

Титр антител, не превышающий 0,01 МЕд/мл свидетельствует о восприимчивости организма пациента к дифтерийной инфекции.

Количество иммуноглобулинов 0,1 МЕд/мл указывает на наличие слабого защитного уровня антител.

Титр суммарных Ig свыше 1,0 МЕд/мл является свидетельством стойкого иммунитета против Corynebacterium diphtheriae.

РПГА с дифтерийным диагностикумом (anti-Corinebacterium diphtheriae)

Подготовка к исследованию:

Анализ проводится утром, натощак
С последнего приема пищи должно пройти не менее 8 часов
Исключить прием алкоголя не менее чем за 24 часа до взятия биоматериала
Не рекомендуется сдавать кровь на серологию после флюорографии, рентгена, физиотерапевтических процедур

Тип биоматериала: венозная кровь

Синонимы (rus): Антитоксические антитела к корино-бактерии

Синонимы (eng): Specific antibodies to the causative agent of diphtheria

Методы исследования: полуколичественная реакция пассивной гемагглютинации

Сроки выполнения: 7-10 дней

Общая информация о дифтерии и ее выявлении

Дифтерия - одна из наиболее тяжелых инфекционных патологий, которую вызывает грамположительная бацилла Леффлера (названная в честь немецкого бактериолога) - Corynebacterium diphtheriae. Бактерия проникает в здоровый организм от больного человека или от бактерионосителя воздушно-капельным или бытовым путем.

Клинические проявления дифтерии характеризуются признаками общей интоксикации организма, воспалением слизистых органов дыхания, поражением кожных покровов. При тяжелом течении инфекции (токсическом) патологический процесс затрагивает центральную нервную систему и сердце. В ответ на внедрение бациллы, иммунная система продуцирует антитела, которые появляются на второй день после заражения и сохраняются в организме в течение нескольких недель.

Для диагностирования дифтерийной инфекции Corynebacterium diphtheriae используют серологическую реакцию пассивной гемагглютинации (РПГА), которая по чувствительности превосходит бактериологические методы диагностики.

Когда специалист может назначить анализ?

Педиатры, оториноларингологи, инфекционисты, терапевты назначают проведение анализа для диагностирования дифтерии и клинического разграничения с заболеваниями (ангина, мононуклеоз, ларинготрахеит, бронхиальная астма, эпиглоттит), имеющими похожие симптомы:

лихорадку;
общую слабость;
болевые ощущения в горле;
сухой кашель;
головную боль;
увеличение лимфоузлов;
сердечную аритмию.

Расшифровка результата анализа

Диагностическим титром считается результат - 1:80, свидетельствует о текущей или перенесенной дифтерийной инфекции, наличие напряженности иммунной защиты к противодифтерийной вакцине. Слабый гуморальный ответ или его отсутствие характеризует давность вакцинации дифтерийным анатоксином или наличие нарушений иммунитета.

Россия, Краснодарский край,
г. Сочи, ул. Старонасыпная, 22.
Размещенная на сайте информация и прейскурант не являются публичной офертой.

Читайте также: