Научные статьи по стафилококкам

Обновлено: 22.04.2024

Как наилучшим образом вести пациента со стафилококковой инфекцией кожи? Как врач общей практики может диагностировать и лечить рожистое воспаление? Какое лечение эффективно при эритразме? B норме кожа человека заселена огромным

Как наилучшим образом вести пациента со стафилококковой инфекцией кожи?
Как врач общей практики может диагностировать и лечить рожистое воспаление?
Какое лечение эффективно при эритразме?

B норме кожа человека заселена огромным количеством бактерий, мирно сосуществующих на ее поверхности или в волосяных фолликулах.

Однако кожа обладает определенными свойствами, защищающими ее от инфицирования патогенами. К ним относятся плотный и сухой ороговевающий слой, практически непроницаемый для микроорганизмов, и клейкое межклеточное вещество — сложная смесь липидов, плотно соединяющая клетки мальпигиевого слоя и также защищающая кожу, закупоривая вход в волосяные фолликулы.

Другие факторы, останавливающие проникновение патогенных микроорганизмов, включают постоянное обновление клеток кожи, кислое значение pH, наличие иммуноглобулинов в составе пота и различные виды кожной флоры.

Кожные инфекции, как правило, развиваются только тогда, когда травма, избыточная гидратация или воспалительные заболевания кожи нарушают эти защитные свойства. Организмы, вызывающие кожные инфекции, могут быть частью постоянной кожной флоры или ближайших слизистых оболочек или происходить из внешних источников, таких как другой человек, окружающая среда или зараженные объекты.

Импетиго — наиболее поверхностная кожная инфекция, вызываемая S. aulreuls и S. pyogenes. Различают два основных клинических варианта: буллезное импетиго, считающееся стафилокковым заболеванием, и небуллезное импетиго, вызываемое S. aulreuls или S. pyogenes либо обоими организмами.

Заболевание встречается у детей гораздо чаще, чем у взрослых, развиваясь на открытых частях тела, лице и конечностях, в местах царапин, ссадин и укусов насекомых.

Вначале появляются красные пятна, которые превращаются в пузырьки и гнойнички, легко вскрывающиеся и образующие толстые, слипшиеся желтовато-коричневые чешуйки на эритематозном основании (см. рис. 1). Они часто многочисленны, могут вызывать зуд, но, как правило, безболезненны.

Рисунок 1. Толстые желтые корки в основании эритемы и поверхностных эрозий у пациента со стрептококковым импетиго

При буллезной форме могут развиваться большие пузырьки и волдыри диаметром 1-2 см. Они вскрываются медленнее и сохраняются в течение двух-трех дней. Возбудители, как правило, определяются культивированием, но в клинически очевидных случаях в этом нет необходимости.

Наиболее серьезным осложнением импетиго является постстрептококковый острый гломерулонефрит, общая заболеваемость которым в последние годы снизилась.

Буллезное импетиго обусловлено исключительно S. aulreuls, который выделяет токсин эксфолиатин, вызывающий расщепление межклеточного вещества в поверхностных слоях эпидермиса. Абсорбируясь в большом количестве в кровоток, этот токсин вызывает стафилококковый синдром обожженной кожи, который в 5% случаев заканчивается летально.

При инфекциях средней тяжести и локализованных формах используют местный антибиотик, например мупироцин или фузидовую кислоту, эффективно также местное применение неомицина и бацитрацина. Очень действенно использование ликацин-геля.

При тяжелых и распространенных формах назначают системный антибиотик. Обычно достаточно эритромицина или цефалоспорина первого поколения, например цефалексина.

Эктима относится к инфекциям, напоминающим импетиго, но затрагивающим более глубокие слои кожи. Она характеризуется формированием толстых слипшихся чешуек (см. рис. 2), покрывающих области изъязвлений кожи, которым предшествует образование гнойничков и пузырьков. Чаще всего поражаются ягодицы, бедра и ноги. Заболевание распространено в тропиках, где его развитию способствуют плохие гигиенические условия и недостаточное питание. Возбудителями могут быть S aulreuls или S pyogenes либо оба микроорганизма, но вызываемые ими изъязвления достигают дермы и заживают рубцеванием, что не свойственно импетиго. Лечение — системные антибиотики, воздействующие на S. aulreuls и S. pyogenes.

Поверхностный фолликулит, фурункулы и карбункулы. Фолликулит (воспаление эпителия волосяных фолликулов) — распространенное дерматологическое заболевание, не всегда первично только инфекционной природы. Физическая или химическая травма, а также связанное с профессиональным занятием воздействие продуктов смолы, применяемых также в лечебных целях, — все это вызывает фолликулит.

При проникновении стафилококков в более глубокие слои волосяных фолликулов воспаление захватывает дерму, вызывая образование фурункулов и карбункулов. Развивается воспалительный пузырек с гнойной головкой (фурункул) или инфекция охватывает несколько близлежащих волосяных фолликулов и образуется воспалительный конгломерат, из которого высвобождается гной (карбункул).

Фурункулы чаще всего встречаются на лице и ногах, а типичная локализация карбункулов — задняя часть шеи; как правило, они сопутствуют сахарному диабету. Крупные фурункулы и карбункулы вскрывают и дренируют, назначая пенициллиназо-устойчивый антибиотик.

Рецидивирующие стафилококковые инфекции кожи. Некоторые пациенты подвержены рецидивам стафилококковых инфекций кожи.

Предрасполагающими факторами здесь служат сахарный диабет, хроническая почечная недостаточность и некоторые иммуннодефицитные состояния, но у большинства пациентов перечисленные выше заболевания отсутствуют: вероятно, эти больные являются хроническими носителями стафилококков, и при мельчайшей травме кожи патогены вызывают инфекцию.

Рецидивы таких инфекций пытаются предотвратить различными способами: путем омывания кожи различными антисептиками, лечения других членов семьи антистафилококковыми антибиотиками и пролонгированной терапии другими местными или системными антибактериальными препаратами. Все эти методы направлены на уничтожение стафилококкового “шлейфа”.

К сожалению, эти меры, как правило, неспецифичны и малоэффективны, так как бактерии появляются вновь вскоре после отмены антимикробного препарата. Поэтому предпочтительнее длительное использование местных антисептиков.

Рожа и целлюлит — это острые, быстро распространяющиеся инфекции кожи и подлежащих тканей.

Отличительной чертой рожистого воспаления является четко очерченный, приподнятый край, отражающий вовлечение более поверхностных (дермальных) слоев (см. рис. 3). Однако целлюлит может располагаться поверхностно, а рожа глубже, так что во многих случаях эти два процесса сосуществуют и различить их практически невозможно.

Считается, что рожистое воспаление вызывается стрептококками, как правило, группы A и иногда — группами G и C. При целлюлите высевается либо только S. aulreuls, либо совместно со стрептококком. H. influlenzae типа b — важный этиологический фактор лицевого целлюлита у детей младше двух лет.

Рожа, в типичном случае поражающая лицо, — болезнь пожилых, развивающаяся без видимых причин или иногда после травмы лица.

Целлюлит поражает нижние конечности, в особенности область икр. Ему часто предшествует травма, язва или другое повреждение кожи, откуда и исходит инфекция.

Как и при рожистом воспалении, целлюлит может сопровождаться или предваряться лихорадкой и ознобом, но у многих пациентов температура не повышается, и они не выглядят серьезно больными.

Кожа красная, горячая и отечная, края воспаленного участка неровные, на поверхности могут развиваться пузырьки и волдыри (см. рис. 4). В редких случаях обнаруживается лимфангит и региональный лимфаденит.

Без лечения могут развиваться такие осложнения, как фасциит, миозит, подкожный абсцесс и септикопиемия. Периорбитальный целлюлит, вызванный обычно травмой, может осложняться тромбозом пещеристого синуса, формированием орбитального, субпериостального или церебрального абсцессов или менингитом.

Пациентов с этими состояниями необходимо госпитализировать.

Описанные здесь стафилококковые и стрептококковые пиодермии составляют большую часть кожных бактериальных инфекций. Нужно уметь различать инфекционные процессы, присущие трем клиническим ситуациям:

инфекция не укладывается в рамки типичной клинической картины пиодермии или не поддается полностью стандартной терапии;
организм пациента ослаблен и не может выдержать борьбу с инфекцией;
в эпидемиологическом анамнезе есть возможность контакта с необычными кожными патогенными микроорганизмами.

Инфекции, вызываемые резидентными коринебактериями

Для эритразмы характерны красно-коричневые шелушащиеся участки кожи, расположенные в паху, в подмышечных впадинах и межпальцевых промежутках (см. рис. 5).

Corynebacteriulm minultissimulm считается этиологическим фактором этого заболевания, протекающего бессимптомно и развивающегося, как правило, у диабетиков, тучных и пожилых людей, а также у тех, кто проживает в тропическом климате.

Благодаря тому что данные микроорганизмы продуцируют порфирины, в ультрафиолетовом свете лампы Вуда пораженные участки флюоресцируют от кораллово-розового до оранжево-красного оттенка, что подтверждает диагноз. Как правило, культивирования не требуется.

Иногда для излечения достаточно интенсивного мытья с мылом. Другой подход — местное лечение эритромицином и клиндамицином или местными азолями, например клотримазолом, которые активны в отношении некоторых грам-положительных бактерий и грибов. При обширных поражениях наиболее эффективен, вероятно, эритромицин.

Оспенный кератолиз — это поверхностная кожная инфекция, очевидно вызываемая штаммами Corynebacteriulm и характеризующаяся наличием оспинок диаметром 1-7 мм на подошвах стоп. Оспинки, сливаясь, могут образовывать поверхностные эрозии.

Заболевание обычно протекает бессимптомно, но иногда пациенты жалуются на зудящую, как от ожога, боль или сырный запах.

Похоже, оспенный кератолиз связан с избыточным увлажнением ног из-за тесной обуви, частых контактов с водой или повышенной потливости.

Лечение гипергидроза вкупе с методами, описанными для эритразмы, как правило, эффективно.

Подмышечный трихомикоз проявляется восковыми узелками, формирующимися в волосах подмышки. Желтые, красные или черные, они образуются большими колониями коринеформных бактерий, покрывающих кутикулу волоса.

Прежде всего заболевание поражает пациентов, которые мало внимания уделяют личной гигиене и страдают избыточным потоотделением.

Для успешного лечения, как правило, достаточно брить волосы и пользоваться дезодорантами для подмышек. Эффективно также местное применение эритромицина и клиндамицина.

Литература

1. Noble W. C. Microbal Skin Disease: its Epidemiology. Arnold, London, 1983.
2. Hoor E. W., Hooton T. M., Horton C. A. et al. Mircroscopic evalulation of cultaneouls cellulitis in adults // Arch. Intern. Med. 1986; 146: 295-297.

Материалы предназначены исключительно для врачей и специалистов с высшим медицинским образованием. Статьи носят информационно-образовательный характер. Самолечение и самодиагностика крайне опасны для здоровья. Автор статей не дает медицинских консультаций: клинический фармаколог — это врач только и исключительно для врачей.

Автор раздела: Трубачева Елена Сергеевна, врач – клинический фармаколог, более 15 лет занимающаяся практическими вопросами лечения и профилактики внутрибольничных инфекций и эпидемиологического надзора. Автор множества печатных работ на указанную тематику.

"Идея "Азбуки антибиотиков" вынашивалась в течение трех лет как способ донести сложные вещи максимально понятным языком для тех, кто только начинает постигать этот действительно сложный раздел практической медицины, и дать импульс к дальнейшему изучению, не продираясь через дебри терминологии и смежных дисциплин, теряя интерес по дороге."

Сегодня мы поговорим не столько о коагулазонегативных стафилококках, сколько о катетер-ассоциированных инфекциях кровотока (КАИК), используя упомянутых стафилококков как повод к разговору.

История применения антибактериальных препаратов переживает определенную цикличность. В доантибиотиковую эру среди возбудителей тяжелых инфекций преобладали Гр(+) возбудители, потом пришли антибиотики, и во время второй мировой основными возбудителями стали Гр(-) возбудители (по принципу «свято место пусто не бывает), но тут Гр(+) опять подняли голову, т.к. выяснилось, что свыше 80% штаммов стафилококков продуцируют пенициллиназу и разрушают бензилпенициллин и аминопенициллины.

Прошло много лет после написания первой статьи, посвященной лечению инфекций, вызванных золотистым стафилококком. За это время автор, будем надеяться, немного помудрела и приобрела кое-какой опыт в более детальной диагностике вышеупомянутых состояний, чем и хотела бы поделиться с многоуважаемой аудиторией в надежде, что, возможно, поможет каждому из вас в рутинной ежедневной работе, так как с этой зверюшкой сталкивается буквально каждый, кто надел белый халат и уж тем более хирургический костюм.

Информация о препаратах, отпускаемых по рецепту, размещенная на сайте, предназначена только для специалистов. Информация, содержащаяся на сайте, не должна использоваться пациентами для принятия самостоятельного решения о применении представленных лекарственных препаратов и не может служить заменой очной консультации врача.

Свидетельство о регистрации средства массовой информации Эл № ФС77-79153 выдано Федеральной службой по надзору в сфере связи, информационных технологий и массовых коммуникаций (Роскомнадзор) 15 сентября 2020 года.

Автор: Трубачева Е.С., врач – клинический фармаколог

Сначала повторим общеизвестные факты: S.aureus относится к грамположительным коккам и являются чуть ли не основной причиной большого количества инфекций кожи и мягких тканей, а так же ведущей причиной послеоперационных раневых инфекций.

Выделяют следующие разновидности золотистого стафилококка:

Дикий S.aureus
MSSA – метициллин-чувствительные стафилококки
MRSA – метициллин-резистентные, которые обладают устойчивостью ко всему бета-лактамному ряду, сохраняя клинически важную чувствительность к ванкомицину, линезолиду и тигециклину
VRSA и VISA – ванкомицин-устойчивые штаммы, к счастью, крайне редко встречающиеся и в основном наблюдающиеся в отделениях онкогематологии научно-исследовательских центров у пациентов, проходящих курс полихимиотерапии с последующей трансплантацией костного мозга

И сейчас обсудим первые три более подробно, так как именно они являются той причиной, ради которой повторно поднята данная тема, в том числе и по просьбам читателей (за что выражаем отдельную признательность).

Первое, что необходимо не просто запомнить, а буквально зазубрить наизусть – золотистый стафилококк, он же S.aureus, является нормальным жителем на неповрежденной коже и слизистых оболочках. Еще раз – нормальным, но только на неповрежденной коже и вне зависимости от антибиотикочувствительности пойманных экземпляров. Если кожа по тем или иным причинам поражается (например, сахарным диабетом) или повреждается, стафилококк тут же из милого соседа превращается в злейшего врага. Все как у людей – стоит дать слабину, и ближайшие соседи начнут добивать с ласковой улыбкой.

Таким образом, когда вы получаете результат микробиологического исследования образца, взятого с кожи (или из носоглотки), и видите там золотистого стафа, то должны понимать, кто перед вами, и насколько этот кто-то имеет отношение к текущему процессу.

Второе: если клиника отсутствует, а стафилококк посеялся, надо сделать что? Правильно, повторить посев еще раз. Золотистый стафилококк – это один из немногих микробов, чье наличие в отделяемом материале надо проверять дважды. Единственное исключение – это кровь, взятая непосредственно из сосудистого русла, чаще всего из вены. Наличие стафилококка в крови является поводом к немедленному назначению антибактериальной терапии, так как прямо указывает на наличие инфекции кровотока, а уж какого она генеза, спонтанного или ятрогенного, разбираться будете позже. Во всех остальных ситуациях проводится пересев с тщательным соблюдением техники забора материала (со стенок раны, а не гной, состоящий из дохлых нейтрофилов и нападавших сверху стафилококков) и правил асептики и антисептики, чтобы собственными стафилококками с кожи вновь забранный материал не контаминировать.

Чтобы понять, друг перед нами или враг, познакомимся со стафилококками более подробно.

Дикий S.aureus, не видавший ни одного антибиотика, выглядит так

И нет, автор не сошла с ума – резистентность к ванкомицину у природных диких золотистых стафилококков – совершенно нормальное явление. Более того, попытка лечить такого возбудителя ванкомицином считается грубейшей ошибкой и закончится полным провалом в силу природной устойчивости к данному препарату. Это третье, о чем помнить необходимо.

Где мы встречаем таких S.aureus чаще всего? В носоглотках грудных младенцев или в их же кале, если придумали посеять. Почему? Потому что это представитель нормальной микрофлоры кожи, и ребенок сглатывает то, что живет в его носоглотке или слизывает с кожи матери. Надо лечить? В данной ситуации – ни в коем случае, иначе побьете нормальную микрофлору кожи и слизистых, и если очень повезет, то для ребенка это пройдет без последствий, но, скорее всего, получим стафилококка, вооруженного пенициллиназами, или MSSA. Повторимся еще раз – только в случае отсутствия клинической картины можно принимать такого рода решения. Во всех иных случаях необходима антибактериальная терапия, причем на длительный (до 28 суток) период времени.

При каких состояниях мы можем увидеть подобных возбудителей?

Практически при всех инфекциях кожи и мягких тканей
При внутрибольничных раневых инфекциях
При диабетической стопе
У внутривенных наркоманов

Типичным для клинической картины будет довольно агрессивное течение заболевания с яркими клиническими проявлениями ввиду того, что именно такой вид стафилококка обладает определенным набором ферментов, очень быстро расплавляющим окружающие ткани с образованием полостей и большим количеством гнойного отделяемого.

на антибиотикограмме будет выглядеть приблизительно так, оксациллин-резистентный, но ванкомицин-чувствительный (хотя при таком значении МПК уже возможны варианты)

Когда встречается? Все многообразие ятрогенных ВБИ к вашим услугам – почти все раневые инфекции и послеоперационные гнойные осложнения вне зависимости от их локализации. Повторимся в очередной раз – руки надо мыть, и мыть правильно. А еще закрывать маской не только рот, но и нос всем, кто хоть как-то касается открытых ран вне зависимости от причин их образования, так как стоит ране появиться, как стафилококк мгновенно превращается в зверя, осложняющего течение любого послеоперационного периода, особенно после операций, связанных с установками импланта. Более подробно о лечении предлагаем почитать в первой статье.

В последнем пункте автор, по идее, должна была бы предложить испугаться самыми страшными ванкомицин-резистентными стафилококками и предложить схватиться за голову, но глядя на следующий набор антибиотикограмм, мы предлагаем посмотреть на то, что обычно сваливается с рук медицинского персонала в раны пациентов или контаминирует их биологический материал, который собран или хранится неправильно. Слава микробиологии, что подобные возбудители для пациентов, которые сохранили хоть какие-то остатки неспецифического иммунитета, не опасны, так как проходя эволюционные пути борьбы с ванкомицином, они почти полностью теряют факторы вирулентности. Но так как такие находки – это будни любой микробиологической лаборатории, то и вы о них тоже должны иметь представление. Уточним еще раз – это результаты посевов при полном отсутствии клинической картины бактериальной инфекции.

А теперь, тихо-тихо прошепчем, что иногда так может выглядеть приболевший микробиологический анализатор, который все, что в него не поставят, может определять как подобную страшную зверюгу. Хотя у вашего анализатора может быть какая-то своя болячка, и эти болячки лучше все-таки знать. Именно такого рода антибиотикограммы, как ничто другое наглядно показывают необходимость развития клинического мышления для умения отличать истинного возбудителя от контаминанта или нормального жителя человеческого организма, а также необходимости понимания, как работают методы микробиологической диагностики и варианты их ограничения.

Подведем краткие итоги нынешнего разговора:

Стафилококк на неповрежденной коже и в носоглотке является нормальным представителем микромира, и лечить его не надо, более того, это может наносить прямой вред (как минимум кошельку)
Существует целый перечень профессий, где носительство стафилококка строго нежелательно, и именно для этого проводятся контролирующие посевы среди медицинского персонала и работников пищевой отрасли
Необходимо уверенно различать не только дикие и внутрибольничные штаммы, но и градацию по MRSA и MSSA, так как это прямо влияет на решение о применении конкретных препаратов при проведении эрадикационной терапии
Антибиотикотерапия стафилококковых инфекций должна быть длительной, а не прерываться через 7-10 дней, даже если пациент демонстрирует положительную динамику. Недобитые золотистые стафилококки умеют метастазировать. Более подробно смотрим предыдущую статью
Так как S.aureus занимает одно из ведущих мест в структуре внутрибольничных инфекций, особенно связанных с установкой имплантов, правила асептики и антисептики при работе с оными должны соблюдаться максимально жестко, иначе можно повторить дело Хабаровского кардиоцентра

Надеемся, что наш сегодняшний разговор был полезен и прояснил наиболее частые вопросы, связанные с микробиологическими особенностями S.aureus.

Клостридии, эшерихии и стафилококки – нормальные обитатели кишечника человека, животных и птиц. Клостридии – облигатные анаэробы, а эшерихии и стафилококки — факультативные.

Клостридии, эшерихии и стафилококки являются полезными микроорганизмами, они синтезируют ряд витаминов — В, К, Е. Эшерихии и стафилококки являются антагонистами клостридий, тем самым уравнивают численность клостридий в организме, чтобы не развилась острая инфекция, в то же время наличие определенного числа клостридий обуславливает иммунизирующую субинфекцию, что необходимо для защиты организма от клостридий, попавших из внешней среды, при ранениях или других повреждениях, тем самым предупреждая развитие инфекции.

Среди множества эшерихий и стафилококков — антагонистов клостридий – окажется несколько десятков клеток E. coli, стафилококков, которые лишены свойства антагонизма, именно они совокупляются с клостридиями.

У эшерихий энергия размножения превышает другие бактерии, обитателей кишечника, что дает им возможность за короткий срок изменить численность в свою пользу, вызывая геморрагическое воспаление слизистой оболочки кишечника, результатом чего является кровавая диарея.

Эшерихии, имеющие свойства токсигенности, являются возбудителями многих других заболеваний — перитонита, менингита, токсиноинфекции и др.

Объекты внешней среды: почва, вода, продукты питания, овощи загрязняются выделениями животных, в которых во множестве содержатся клостридии, эшерихии, стафилококки. Особенно загрязняется почва; если создаются условия, способствующие их сохранению — рН 7,2–7,6, наличие питательных веществ, температура; указанные микроорганизмы начинают развитие и даже размножение.

Попадание этих бактерий в организм человека и животных в большинстве случаев оральное, для клостридиев также характерно попадание через открытые раны; т. к. с частицами земли попадают клостридии, которые находят в ране подходящие условия для развития и размножения — в первую очередь анаэробные условия, во вторую — наличие гликогена, который является обязательным для питания и размножения клостридий.

Спаривание клостридий и эшерихий возможно и в объектах внешней среды, если температура, влажность, рН, питательный субстрат находятся на оптимальном уровне.

Эшерихии никогда не будут патогенными, если не произойдет их скрещивание с клостридиями. При этом клостридии передают эшерихиям токсигенные, гемолитические, антигенные, сахаролитические свойства, устойчивость к антибиотикам; эти же свойства клостридии передают и стафилококкам. Этим мы разрешили вопрос патогенности эшерихий и стафилококков. Все началось с того, что ученые пытались культивировать анаэробные клостридии в аэробных условиях, для того, чтобы было легче изготавливать вакцину.

Известно, что клостридии не синтезируют фермент каталазу, который необходим для разрушения перекиси водорода, накапливающейся в питательной среде, являющегося ядром для анаэробов, которые не продуцируют каталазу, а аэробы и факультативные анаэробы синтезируют данный фермент. Мы задались целью путем скрещивания передать данное свойство клостридиям. Эшерихии не смогли выполнять роль донора, однако они оказались довольно хорошими реципиентами, а клостридии — донорами.

Таким образом была раскрыта суть патогенности эшерихий, клостридий: Cl. oedematiens, Cl. perfringens, Cl. septicum, Cl. chauvoei передавали эшерихиям и стафилококкам токсичность, антигенность, гемолитическую активность, сахаролитические свойства, устойчивость к антибиотикам.

Передачу токсигенных свойств контролировали заражением подопытных животных — кроликов, морских свинок, белых мышей; нейтрализацию токсина — реакцией нейтрализации; антигенные связи устанавливали реакцией агглютинации, с использованием гипериммунной сыворотки; гемолитическую активность — засевом глюкозо-кровяного агара; резистентность к антибиотикам — внесением в питательную среду антибиотиков.

Передачу токсигенных свойств стафилококкам от клостридий устанавливали заражением подопытных животных в брюшную полость (белые мыши, морские свинки) и кроликам введением внутрикожно культур рекомбинантов, также реакцией плазмокоагуляции, гемолитическую активность — засевом в глюкозо-кровяной агар.

В любом случае, как с эшерихиями, так и со стафилококками имела место передача плазмидной ДНК от клостридий. Кроме этих тестов засняли взаимно связанные клетки — клостридий с эшерихиями, клостридий со стафилококками в электронном микроскопе, где очень хорошо видна связь донора (клостридии) с реципиентами (эшерихии, стафилококки), иногда слияние бактериальных оболочек; в любом случае переносится плазмидная ДНК.

Вели также скрещивание клостридий со стафилококками при низкой температуре. При этом нарушается клеточная оболочка, и плазмидная ДНК легко покидает клетку донора и переносится в клетку реципиента с помощью конъюгационного мостика или слиянием клеточных оболочек.

Ниже представлены полученные электронно-микроскопические снимки:

Конъюгация между клетками Cl. perfringens и E. coli. Клетка большего размера Cl. perfringens (донор), меньшего размера — E. coli (реципиент); они связаны между собой конъюгационным мостиком. Этим мостиком переносится плазмидная ДНК Cl. perfringens в клетку E. coli. Соответственно E. coli приобретает патогенные свойства, гемолитическую активность, антигенность, резистентность к антибиотикам и др.

Конъюгация между клетками Cl. septicum и E. coli; клетка меньшего размера (справа) — донор Cl. septicum; они связаны между собой конъюгационным мостиком, с которого переносится в клетку реципиента плазмидная ДНК, соответственно в ней детерминированные признаки — токсигенность, гемолитические свойства и др.

Конъюгация между Cl. oedematiens и E. coli. Клетки меньшего размера, сферической формы — E. coli (реципиент). Между донором (Cl. oedematiens) и реципиентом (E. coli) связывающий мостик, с которого в одном направлении переносится (с донора на реципиент) плазмидная ДНК, вместе с ней — указанные свойства.

Те же микробы Cl. oedematiens и E. coli. Сравнительно меньшего размера — E. coli; они связаны между собой конъюгационным мостиком; также имеет место слияние оболочек. В любом случае осуществляется перенос плазмидной ДНК

Конъюгация между Cl. chauvoei и E. coli. Клетка меньшего размера — E. coli. Хорошо виден соединяющий мостик — происходит перенос ДНК от донора (Cl. chauvoei) к реципиенту (E. coli)

Конъюгация между Cl. chauvoei и E. coli. Клетка меньшего размера — E. coli. (реципиент). Между ними несколько соединительных мостиков, которые переносят разные плазмиды, тем самым различные наследственные признаки (см. выше).

Конъюгация между клетками Cl. perfringens. Связь между ними устанавливается слиянием клеточной оболочки. Мы зафиксировали перенос множественной резистентности к антибиотикам (R -фактор). Донор, несущий R –фактор, по-видимому, клетка, находящаяся сверху. Размножение начинается после того, как между клетками устанавливается связь (слияние клеточных оболочек). По литературным данным известно, что прокариоты размножаются поперечным делением, по всей вероятности, это неверно.

У животных организмов для сохранения потомства и наследственных признаков обязательным условием является установление связи между мужскими и женскими клетками, без этого невозможно размножение. В популяции клеток первоначально осуществляется дача импульса от донора к реципиенту (ДНК донора дает импульс ДНК реципиенту), и только после этого начинается поперечное деление.

Всевышний именно так определил продолжение рода — универсальный закон всего живого.

Конъюгация между Cl. perfringens и стафилококками — донор (Cl. perfringens), реципиент (Staphylocjccus). Их связывает конъюгационный мостик. Вокруг донора несколько клеток реципиента, что указывает на наличие в клетке Cl. perfringens нескольких плазмидных ДНК, которые распределяются в клетках реципиента; переносятся в клетки стафилококков плазмиды, несущие синтез экзотоксинов, гемолитической активности, антигенность, резистентность к антибиотикам, сахаролитические свойства и др.

Клетки сферопластов и протопластов (Cl. perfringens — донор и стафилококки — реципиент) спариваются при низкой температуре. Предварительно мы получали из Cl. perfringens и стафилококков сферопласты и протопласты, затем инкубировали смешанно при низких температурах. Передавалась гемолитическая активность и резистентность к антибиотикам; плазмида, несущая токсигенность, элиминирована.

Неполные протопласты (Cl. perfringens — донор и стафилококки реципиент) спаривались при низкой температуре; передается плазмиднаяДНК и вместе с ней гемолитическая активность и резистентность к антибиотикам.

Донор (Cl. perfringens) полностью лишен клеточной стенки — находится в состоянии протопласта. Стафилококки (несколько клеток) частично сохранили клеточную оболочку (сферопласты). Их спаривание происходит при низкой температуре, при этом переносится с донора на реципиент гемолитическая активность и резистентность к антибиотикам.

Хочу обратить Ваше внимание на следующее — протопласты не изменили свою форму, по литературным данным бактерии в экстремальных условиях изменяют форму, — переходят в оргонтные формы. Например, шаровидные — неверно. Конъюгация между ними идет.

Доноры соединяются с реципиентом конъюгационным мостиком или сливаются безоболочные клетки — донора и реципиента.

В организме человека и животных на бактериальную клетку действуют ферменты, а также низкая температура внешней среды, которые разрушают оболочку. Низкая температура обуславливает разрушение клеточной оболочки, в данном случае у Cl. perfringens. Это в свою очередь вызывает выход цитоплазмы наружу, т. е. в клетку макроорганизма (не всегда), тем самым освобожденная хромосома включается в хромосому макроорганизма, в результате происходит синтез белка с измененными свойствами, что, иногда, вызывает опухолевый рост.

Индукцию опухолевого роста мы получили на белых мышах протопластами и лизитами токсигенных клостридий, также рекомбинантами эшерихий и стафилококков, что представляет, в одном случае, свободную молекулу ДНК, которая находится в лизате, в другом случае — высвобожденную из протопластов и клеток рекомбинантов ДНК.

Таким образом, опухолевый рост находится в причинной связи с токсигенными клостридиями, рекомбинантами эшерихий и стафилококков, которым передается от клостридиев плазмидная ДНК (Дж. Начкебия, Е. Начкебия, К. Начкебия — Известия аграрной науки, 2007, т.5, № 1, с.129–131. Тбилиси).

R-форма колоний Cl. perfringens на глюкозо-кровяном агаре — плоские, шероховатые, морщинистые с зазубренными краями, хорошо выраженным гемолизом. Эти колонии — стрептомицинорезистентные мутанты, лишенные вирулентности, получены путем многократного пассирования на средах с антибиотиком; впоследствии использовались в опытах по трансформации.

R-форма колоний Cl. perfringens на сахарном агаре; здесь колонии плоские, шероховатые, морщинистые с зазубренными краями. Они лишены вирулентности; использовались в опытах по трансформации.

ДНК, выделенная из стрептомицинорезистентного варианта Cl. perfringens. ДНК осаждена этанолом (верхний слой), переносится стеклянной палочкой в жидкость следующего состава: 0,15 М NaCl и 0,015 М цитрат Na; ДНК моментально растворяется.

Исходная культура Cl. perfringens — клетка без воздействия стрептомицина (ультраструктура)

Ультраструктура трансформированного варианта Cl. perfringens. Перенос плазмидной ДНК стрептомицинорезистентности с трансформированного варианта на исходную культуру.

Таким образом, доказана возможность получения гибридных штаммов с полезными свойствами, в результате скрещивания токсигенных анаэробных микроорганизмов с авирулентными эшерихиями, сообщающая при этом патогенные, гемолитические и антигенные свойства, характерные для клостридий. Попутно разработана методика селекционирования рекомбинатов E. coli из организма белых мышей, инфицированных смесью клостридий с эшерихиями; также разработана методика скрещивания анаэробных микроорганизмов с эшерихиями и стафилококками в физиологическом растворе NaCl.

Из рекомбинантных штаммов E. coli изготовлена вакцина и получена гипериммунная сыворотка против клостридиозов и эшерихиозов.

Из эталонных штаммов токсигенных клостридий изготовлена вакцина и получена гипериммунная сыворотка против колибактериоза и анаэробных инфекций.

Полученные нами результаты исследований по вопросам влияния токсигенных анаэробов на патогенные и другие свойства эшерихий и стафилококков позволяют глубже раскрыть механизм появления новых серогрупп E. coli и стафилококков с токсигенными и гемолитическими свойствами, могут способствовать более основательному изучению внутриклеточных процессов, протекающих после включения в них новых детерминант, направленных на получение штаммов с полезными свойствами; способствуют раскрытию механизма взаимодействия разных видов микроорганизмов в ассоциации в естественных средах их обитания и на этой основе появлению патогенных вариантов.

На основе проведенных исследований раскрывается механизм возникновения тяжелых кишечных заболеваний, токсико-септических инфекций, колиэнтеритов, пищевых отравлений и многое другое.

Установление факта передачи токсигенности эшерихиям и стафилококкам от патогенных клостридий внесет коренные изменения в вопросы диагностики, лечения и профилактики колиинфекций и стафилококковых заболеваний; внесет ясность во внехромосомные наследственности эшерихий, стафилококков и анаэробных микроорганизмов, тем самым открывая широкие возможности генетического моделирования при решении теоретических проблем молекулярной биологии.

Результаты исследований коренным образом изменяют имеющиеся до сих пор представления о патогенности эшерихий и стафилококков и дают совершенно новое направление исследованиям в области инфекционной патологии и генетики бактерий.

Основные термины (генерируются автоматически): стафилококк, гемолитическая активность, донор, клетка, меньший размер, реципиент, свойство, ДНК, внешняя среда, клеточная оболочка.

Читайте также: