Оспа овец лабораторная диагностика

Обновлено: 18.04.2024

Инфекционные болезни относятся к основным причинам массового падежа животных. Одним из таких распространенных заболеваний инфекционной этиологии является оспа овец и коз (Variola ovium). Выявление оспы на поздних сроках может привести к огромным экономическим убыткам для животноводческих хозяйств. О важности ранней лабораторной диагностики контагиозного вирусного заболевания мелкого рогатого скота рассказали специалисты Брянской межобластной ветеринарной лаборатории.

Общее угнетенное состояние животного, лихорадка, затрудненное дыхание, отек век, выделения из глаз и носа могут быть признаками заражения животного оспой. Также одним из симптомов является развитие на коже и слизистых оболочках специфической папулезно-пустулезной сыпи. Наиболее восприимчивыми к вирусу являются молодые особи и тонкорунные породы животных, но заразиться может абсолютно всё поголовье мелкого рогатого скота. При тяжелых формах болезни смертность животных достигает 70%. Чем раньше будет поставлен точный диагноз больному животному, тем больше вероятность минимизировать негативные последствия для хозяйствующего субъекта от данного вирусного заболевания мелкого рогатого скота.

Исследования по выявлению различных заболеваний животных –традиционное направление деятельности Брянской межобластной ветеринарной лаборатории. Специалисты учреждения используют современные методы диагностики различных заболеваний животных. Оспа овец и коз – не исключение.

Специалисты управления Россельхознадзора по Брянской, Смоленской и Калужской областям сообщают, что все три подконтрольных региона являются благополучными по оспе овец и коз. Однако в 2020 году на территории Российской Федерации было выявлено 2 вспышки заболевания в Псковской и Ивановской областях, а в 2019 – 13 случаев в Московской, Тверской, Псковской и Воронежской областях.

Поэтому владельцам мелкого рогатого скота необходимо выполнять следующие мероприятия для предотвращения заноса и распространения заболевания:

  • не допускать загрязнения окружающей среды отходами животноводства;
  • обеспечить регулярное наблюдение ветеринарных специалистов за состоянием животных и проведение профилактических вакцинаций;
  • приобретать и реализовывать восприимчивых животных только при наличии полного комплекта ветеринарных сопроводительных документов;
  • незамедлительно информировать специалистов ветеринарной службы обо всех случаях внезапного падежа или заболевания восприимчивых животных;
  • при подозрении на заболевание принимать меры по изоляции восприимчивых животных;
  • соблюдать условия, запреты, ограничения в соответствии с установленным статусом региона.

Своевременная лабораторная диагностика также позволяет предохранить овцеводческие и козоводческие хозяйства от развития вирусной инфекции в настоящую эпидемию, которая может привести к огромным экономическим потерям и падежу целого поголовья овец и коз.

Вирусоскопия.Свежую папулу протирают ватой, смоченной спиртом, срезают (лучше бритвой) и поверхностью среза делают несколько тонких мазков на предметных стеклах. Мазки подсушивают на воздухе и окрашивают методом серебрения (по Морозову). При ви­русоскопических исследованиях пораженных участков кожи обнаруживают характерное расположение вирионов в виде россыпи. Однако отсутствие вирусных частиц в препарате еще не исключает оспу.

ЭМ. ЭМ пораженных участков кожи больных оспой поросят и обнаружение характер­ных вирусных частиц - один из методов экспресс-диагностики оспы. Для этого требуется всего около 30 мин.

Обнаружение специфических телец-включений.Развитие оспенных поражений в коже больных хорошо прослежено гистологическими исследованиями, результаты которых приведены в табл.108.


Обозначения: (+, ++, +++) - выраженность реакции

(-) - отсутствие реакции или внутриклеточных включений

Диагноз на оспу считают положительным при наличии в гистологических препаратах ацидофильных включений и внутриядерных вакуолей в гиперплазированных кератиноцитах эпидермиса кожи. Цитоплазматические включения при ОС относятся к группе Б, т. е. к включениям, материал которых участвует в репродукции вируса.

Серологическая идентификация. Не разработана. Однако при необходимости воз­можна постановка РДП и более чувствительного теста - противоточного электрофореза.

Дифференциальная диагностика. Болезнь у свиней могут вызвать вирусы ОС, оспы коров, осповакцины и, по данным некоторых исследователей, оспы кур. Дифференциацию возбудителя, вызвавшего оспу у свиней, проводят на КЭ, культурах клеток органов и тканей кроликов или поросятах. Для этого используют 2-х поросят, переболевших оспой (подопыт­ные), и 2-х здоровых (контрольные). Им втирают в скарифицированную кожу по 2 капли растворенной сухой осповакцины. Развитие оспенных поражений у подопытных и кон­трольных животных через 5-8 дн после нанесения вируса осповакцины указывает на нали­чие в хозяйстве оспы, вызванной натуральным ВОС. Отсутствие их у подопытных живот­ных при положительной поствакцинальной реакции у контрольных свидетельствует о нали­чии у свиней оспы коров или осповакцины.

Дифференциацию возбудителей, выделенных от больных свиней с клинической карти­ной оспы, проводят на основании данных, приведенных в табл. 109. Более простым спо­собом дифференцирования этих болезней является заражение кролика путем введения ис­следуемого материала в скарифицированную кожу. ВОС не вызывает у этих животных кож­ной реакции, в то время как вирусы осповакцины и оспы коров ее вызывают. Оба последних вируса можно выделить также путем заражения КЭ и культур клеток. Наличие телец-включений вдоль центральной "просветленной" околоядерной зоны в пораженных эпители­альных клетках является патогномоничным для ВОС.

Оспу у свиней следует дифференцировать от экзантем, появляющихся при авитамино­зах, аллергии и нарушении обмена веществ, энзоотической бронхопневмонии, стрептокок­ковом сепсисе, паратифе, чесотке, лишае, ВБС и везикулярной экзантеме. При экзантемах незаразной этиологии обычно не бывает лихорадки и биопроба отрицательная. Экзантема при чесотке, паратифе и других болезнях протекает без стадийного развития, как при оспе, а из патологического материала выделяют соответствующих возбудителей.


Обозначения: + наличие репродукции на ХАО; 0 - отсутствие таковой. ИН - инкубационный период; * - при отсут­ствии осложнений; ДБ - длительность болезни; в/к - внутрикожное заражение; в/в - внутривенное заражение.

Примечание. Свиньи оспой от овец и коз обычно не заражаются. Среди указанных вирусов перекрестный им­мунитет образуется только между вирусами оспы коров и осповакцины; ВН ОС - вирус натуральной оспы свиней.

Инфекционная катаральная лихорадка овец ("синий язык" КЛО) - вирусная трансмис­сивная инфекция, передающаяся кровососущими насекомыми из рода Сulicoides, характери­зующаяся лихорадочным состоянием, воспалительно-некротическими поражениями ротовой полости, особенно языка, пищеварительного тракта, эпителия венчика и основы кожи ко­пыт, а также дегенеративными изменениями скелетных мышц. Регистрируется во многих странах. В Российской Федерации с 1993 г. не­благополучными являются не­которые районы Бурятии.




Диагноз ставят на основании эпизоотологических данных, симптомов болезни, патоморфологических изменений и результатов лабораторных исследований. Для окончательно­го диагноза проводят выделение вируса, его идентификацию и ставят биопробу. Для выде­ления вируса более чувствительны 10-11-дн КЭ, заражаемые на ХАО или внутривенно про­бами испытуемой крови, обработанной ультразвуком. Выделенный вирус идентифицируют в РН, применяя типоспецифические сыворотки. Для быстрого обнаружения вируса рекомен­дуется ИФ в культуре клеток. Показано, что РН по бляшкам более чувствительна, чем РСК и РДП. С помощью РСК удается выявлять АТ в сыворотке крови овец и КРС.

Для выделения вируса КЛО проводят иммобилизацию Сulicoides триэтиламином, которым пропитывают специальные аппликаторы. Через 2-3 мин после воздействия паров пре­парата обездвиженных насекомых микроскопируют и отбирают самок, которых замораживают в жидком азоте. Перед началом проведения вирусологического исследования насекомых размораживают и помещают в среду Игла МЕМ с 10% фетальной сыворотки и антибиотиками, обрабатывают ультразвуком; суспензию осветляют центрифугированием. Для выделения вируса КЛО используют перевиваемую линию клеток С 6/36 , полученную из личинки Аedes оlbapietus. Эта линия высоко чувствительна, пригодна для первичной изоляции вируса КЛО из патологического материала. Линию клеток выращивают при температуре 28°С, создавая оптимальные условия для функционирования РНК-полимеразы вируса. Поскольку в этих условиях ЦПД не проявляется, то его наличие в зараженной суспензии клеток насекомых определяют с помощью ИФ и ИФА. Разработан укороченный метод первичной обработки патологического материла (пулов насекомых). Исследование его в культуре клеток показало высокую чувствительность и пригодность для полевых обследований популяций насекомых на инфицированность вирусом КЛО.

Установлена высокая чувствительность метода выделения вируса в перевиваемой линии культуры клеток ПСКГ в сочетании с методом ИФА. Последний рекомендован для вы­явления АГ вируса блутанга в инфицированных культурах клеток и в суспензии инфициро­ванных комаров Сulicoides variipennis. Высокая чувствительность ИФА позволяет обнару­жить одного инфицированного мокреца в смеси с 92 неинфицированными насекомыми. Разработан непрямой вариант ИФА для серологической диагностики блутанга. Оконча­тельная диагностика КЛО, которая часто протекает субклинически у домашних и диких жи­вотных, может быть проведена только лабораторными методами выделения вируса, выявле­ния АГ, нуклеиновых кислот вируса и АТ. Вирус выделяют из компонентов крови, в основ­ном из эритроцитов, отобранных у животных во время лихорадочной реакции. Исследуемый материал вводят в КЭ и проводят пассаж в культуре клеток (ВНК -21, Vero).

Для идентификации вирусных АГ используют ИФ, РН, ИЭМ с применением монАТ и ИФА. Дня выявления нуклеиновых кислот делают гибридизационный анализ и ПЦР. АТ обнаруживают в РДП в агарозе и в конкурентном ИФА. Последняя реакция с использовани­ем вирусепецифических монАТ является более чувствительным и специфичным методом обнаружения АТ к КЛО. РН в культуре клеток служит наиболее общепринятым методом выявления типоспецифических АТ. Во ВНИИЗЖ также получены монАТ для постанов­ки ингибирования ТФ ИФА.

КЛО необходимо дифференцировать от ящура, контагиозного пустулезного дерматита (эктимы), оспы, везикулярного стоматита, злокачественной катаральной лихорадки, сердеч­ной водянки, болезни Найроби, лихорадки долины Рифт и некробактериоза.

Оспа овец - острая контагиозная болезнь, протекающая с характерными папулезно-улезными поражениями кожи морды и других мест со слабым волосяным покровом (экзантема) и слизистых оболочек. В 1964 г. на XII сессии Генерального Комитета МЭБ оспу овец внесли в список наиболее опасных (конвенционных) болезней животных. Она широко распространена в соседних странах, занимающихся овцеводством. Эпизодически в результате заноса из неблагополучных соседних стран бывают вспышки в южных регионах России.

Диагноз ставят с учетом эпизоотологических данных, результатов клинического обсле­дования, биопробы и вирусоскопии мазков из свежеразвившихся первичных оча­гов поражения или мест инокуляции вируса при постановке биопробы. В этих случаях необ­ходимо найти животных с характерными оспинами гнездно-сетчатого строения с кратерообразными углублениями, чего при других экземах, как правило, не бывает. При типичном течении диагностировать оспу не трудно. При тщательном обследовании овец пораженной отары всегда можно найти отдельных животных с типичными оспинами на разных стадиях формирования. У одного и того же животного оспины образуются не од­новременно, одни находятся в стадии розеол, другие - в стадии папул.

Лабораторная диагностика оспы основана на выделении вируса, вирусоскопии мазков препаратов из срезанного эпителия розеолы, на присутствие элементарных телец, постановке биопробы, РИФ, РДП.

Выделение вируса.Для исследования берут содержимое везикул или пустул, поверх­ность которых предварительно очищают ватным тампоном, смоченным эфиром или спир­том. Для гистологического исследования вырезают измененные участки кожи на границе с неизмененными. Патологический материал для вирусологических исследований следует пе­ресылать в замороженном или охлажденном (до 4-6°С) виде. Обычно при абортивном и не­ясном течении болезни ставят биопробу на неиммунных молодых овцах. Испытуемую сус­пензию, приготовленную общепринятым методом в разведениях 1:20 и 1:200, инокулируют внутрикожно в бесшерстную поверхность хвоста в дозе 0,1-0,15 мл. Наблюдение ведут в те­чение 10 дн. В положительных случаях на месте инъекции развивается местный оспенный процесс (розеола, папула, везикула, пустула, некроз), специфичность которого подтвержда­ют методом вирусоскопии мазков, приготовленных из срезанного эпителия розеолы, на при­сутствие элементарных частиц.

РДП.Для получения сыворотки, годной для использования в РДП, иммунизируют кро­ликов овиной, делают 2-4 внутривенные инъекции в объеме 2; 1; 0,5 и 0,25 мл с интервалом в 5 дн. Через 7 дн после последней инъекции у кроликов берут кровь для получения сыво­ротки. Полученные кроличьи сыворотки необходимо истощить культурой фибробластов эм­бриона овцы. РДП ставят общепринятым методом.

Дифференциальная диагностика.Оспу овец и коз в стадии образования пустул и ко­рок следует дифференцировать от чесотки, пустулезной экземы и контагиозного пус­тулезного дерматита (эктимы) овец и коз.

Оспа млекопитающих и птиц – острая контагиозная болезнь, протекающая с характерными стадийными поражениями кожи различных участков тела и слизистых оболочек.

Особенностью патологических изменений при оспе является их стадийность: розеола (локальное покраснение участка кожи), папула (уплотнение участка кожи за счет клеточной инфильтрации), везикула (наполнение его везикулярной серозной жидкостью), пустула (переход серозного воспаления в гнойное) и круста (появление корочек на месте поражения). У птиц, кроме того, выделяют дифтеритическую форму с фибринозным поражением слизистой оболочки носовой и ротовой полостей.

Возбудителями оспы животных являются вирусы из семейства Poxviridae, подсемейства Chordopoxvirinae различных родов: Orthopoxvirus – возбудители оспы у коров, человека, лошадей, кроликов и др., Avipoxvirus – птиц (прежде всего кур), Capripoxvirus – овец и коз, Suipoxvirus – свиней, Leporipoxvirus – вирусы миксомы и фибромы кроликов, Parapoxvirus – параоспенные вирусы. Вирусы различных родов отличаются по биологическим свойствам, главным из которых является спектр патогенности – первый из названных считается полиэтиологическим, то есть способным вызывать оспу у широкого спектра хозяев.

Все оспенные вирусы являются ДНК-геномными и содержат в составе вириона фермент для собственной транскрипции. В этой связи все вирусы данного семейства, не нуждаясь в клеточных ферментах транскрипции, реплицируются в цитоплазме клеток. Другими отличительными особенностями вирусов оспы является их большой размер, сопоставимый с размерами мельчайших бактерий, и они могут быть обнаружены световой вирусоскопией. Для вирусов оспы характерно наличие сложного типа симметрии, который обусловлен присутствием двух дополнительных структур, входящих в состав вириона. Они представляют собой мембраны, наружная из которых большей толщины и имеющая большое количество полых винтообразных филаментов. Нуклеоид в центре вириона имеет характерную двояковогнутую форму. Все вышеотмеченные особенности строения придают зрелому вириону оспы характерную кирпичеобразную форму (обнаруживается в электронном микроскопе).

Вирусы млекопитающих довольно сложно культивировать в лабораторных условиях: на ХАО развивающихся куриных эмбрионов они с трудом культивируются после предварительной адаптации с образованием характерных оспин, способны репродуцироваться в культурах клеток почек и тестикул эмбриона. Лучшим объектом для культивирования вирусов оспы млекопитающих являются естественно восприимчивые животные.

В антигенном отношении различные вирусы оспы млекопитающих идентичны в пределах родов. В основном вирусы оспы млекопитающих гемагглютинирующими свойствами не обладают; вирусы оспы птиц способны агглютинировать эритроциты кур отдельных пород, однако РТГА и РГА в практике используют очень редко.

Диагноз на оспу ставят клиническим методом, однако для его подтверждения проводят лабораторное исследование.

Отбор патматериала. Для исследования берут содержимое везикул и пустул, поверхность которых предварительно очищают ватным тампоном, смоченным в эфире или спирте. Прокол и отбор везикулярной жидкости проводят с помощью пастеровской пипетки, после чего конец ее запаивают. Папулы соскабливают скальпелем. Патологический материал должен быть доставлен в лабораторию в замороженном или охлажденном (4-6ºС) виде. Также его допускается консервировать в 10%-ном растворе глицерина.

Одновременно с отбором патматериала на месте готовят мазки из везикулярной и пустулезной жидкости для последующего вирусоскопического исследования. Для этого поверхности везикул или пустул осторожно срезают бритвой и внутренней поверхностью среза однократным движением проводят по предметному стеклу. После приготовления мазки высушивают на воздухе.

Также отбирают материал из измененных участков кожи на границе с неизмененной для гистологического исследования, который помещают в 10%-ный раствор формалина.

Подготовка материала заключается в получении суспензии для заражения животных. Готовят 10%-ную суспензию на физиологическом растворе, после чего ее центрифугируют при 2 тыс об/мин в течение 15 мин. Затем к надосадочной жидкости добавляют 500 ЕД/мл пенициллина, 250 мкг/мл стрептомицина, 50 ЕД/мл нистатина и выдерживают 12 часов при 4ºС.




Лабораторная диагностика оспы заключается в:

- обнаружении возбудителя в мазках методом световой микроскопии;

- постановке биопробы на животных (в случае получения отрицательного или сомнительного результата первого метода).

Обнаружение вируса в патматериале осуществляют методом световой вирусоскопии препаратов-отпечатков, окрашенных по Морозову. В положительном случае в мазках из пораженных участков кожи обнаруживают характерно расположенные вирионов в виде россыпи.

Одновременно с обнаружением элементарных телец параллельно проводят гистологическое исследование материала из пораженных участков. При этом обнаруживают цитоплазматические оксифильные (оспа овец и коз) или ацидофильные (оспа свиней) включения, внутриядерные вакуоли, гиперплазию эпидермиса кожи.

Положительный результат вирусоскопического исследования дает основание на постановку окончательного диагноза на оспу. При получении сомнительного или отрицательного результатов вирусоскопии проводят постановку биопробы на естественно восприимчивых животных.

Биопроба в диагностике оспы млекопитающих заключается в заражении естественно восприимчивых животных, причем выбор объекта заражения зависит от вида животных, у которых диагностируют болезнь. В качестве тест- объекта для постановки биопробы используют молодых неиммунных овец и коз, поросят 2-3- месячного возраст или кроликов. Экспериментальных животных заражают внутрикожно в бесшерстную поверхность хвоста в дозе 0,1-0,15 мл (овцы, козы) или путем скарификации надосадочной жидкостью в объеме 0,6 мл в кожу живота (свиньи) или на поверхность роговицы глаза (кролик). Биопробу считают положительной в случае развития на месте введения местного оспенного процесса через 6-8 дней. Специфичность патологического процесса в ходе постановки биопробы подтверждают вирусоскопическим исследованием мазков, приготовленных из срезанного оспенного узелка.

Кроме вирусоскопического метода в практике рекомендовано использование РИД для обнаружения вирусного антигена в патматериале.

Серодиагностику и ретроспективную диагностику оспы проводят редко.

Лабораторная диагностика оспы птиц. Для исследования в лабораторию направляют свежие оспенные поражения с лицевой части головы (гребень, бородки, сережки) или свежие дифтеритические поражения гортани и трахеи. Одновременно с отбором патматериала для вирусологического исследования готовят мазки из пораженных участков для вирусоскопического исследования. Фиксацию мазков проводят на месте, помещая их в смесь спирта и эфира на 3 мин.

Лабораторная диагностика оспы птиц включает:

- обнаружение вирионов в мазках из патматериала;

- выделение вируса на РКЭ и курах с последующей его идентификацией;

- выявление специфических антител в крови переболевшей птицы.

Обнаружение вирионов оспы птиц (элементарные тельца Борреля) проводят при исследовании вирусоскопическим методом мазков, окрашенных по Морозову. Параллельно с обнаружением вирионов оспы исследуют мазки, получаемые путем раздавливания оспенных поражений между двумя стеклами и окрашенные суданом III в течение 10-15 мин. В положительных случаях обнаруживают специфические тельца-включения (тельца Боллингера) в цитоплазме клеток.

Выделение вируса оспы птиц осуществляют путем заражения 10%-ной суспензией, свободной от микрофлоры, развивающихся куриных эмбрионов. Для этого предварительно готовят разведения суспензии (10 -2 и 10 -3 ) и заражают четырех эмбрионов на ХАО в объеме 0,2 мл. Погибшие эмбрионы на 3-е сутки, а также выжившие на 6-е сутки охлаждают и вскрывают. В положительных случаях на ХАО обнаруживают отдельно расположенные или слившиеся оспины.

Выделение вируса оспы птиц также осуществляют путем постановки биопробы на курах 3-4- месячного возраста, которых заражают путем втирания суспензии в скарифицированную поверхность гребня, бородок, а также свободные от перьев фолликулы голени. Специфичность оспенных поражений у экспериментально зараженной птицы подтверждают вирусоскопическим методом.

Идентификацию вируса проводят в РИД или РИФ. Указанные серологические реакции могут также быть использованы для обнаружения и идентификации вируса непосредственно в патматериале.

Серодиагностика и ретроспективная диагностика оспы птиц заключается в обнаружении специфических антител реакцией иммунодиффузии в агаровом геле. Антигеном в реакции служат хорион-аллантоисные оболочки, собранные на 4-5-й день после заражения развивающихся куриных эмбрионов.

Лейкоз крупного рогатого скота - хроническая инфекционная болезнь опухолевой природы, при которой происходит злокачественное размножение клеток кроветворных органов, в результате чего наблюдается диффузная инфильтрация внутренних органов инфицированными клетками. Лейкоз в основном встречается у взрослых животных, наиболее часто в возрасте 5-8 лет. При этом развитие болезни характеризуется стадийностью: инкубационный период, бессимптомная стадия (серологическая), гематологическая и опухолевая. Инкубационный период при лейкозе варьирует в больших временных промежутках. На клеточном уровне представляет собой период инфекции после заражения до появления антител. В этот период происходит инфицирование лимфоцитов и нахождение провируса в интегрированном состоянии.

Серологическая стадия характеризуется выработкой антител со стороны организма и продолжается до момента начала усиленного размножения инфицированных лимфоцитов. При опухолевой стадии происходит инфильтрация внутренних органов инфицированными лимфоцитами – диффузно или локально с появлением опухолей. При этом в патологический процесс может вовлекаться костный мозг или лимфоидная ткань, что дало возможность разделять две группы лейкозов. В связи с тем, что неопластической трансформации подвержены различные популяции лимфоцитов, выделяют несколько форм лейкозов. К первой группе лейкозов (с локализацией патологического процесса в костном мозге) относят лимфоидный, миелоидный, слабодифференцированный и недифференцированный лейкозы. К болезням второй группы (с локализацией патологического процесса в лимфоидной ткани) относят лимфосаркому, ретикулосаркому и лимфогранулематоз.

Возбудителем лейкоза КРС является вирус из семейства Retroviridae рода Deltaretrovirus. Все вирусы, входящие в данное семейство, имеют в составе вириона фермент - обратную транскриптазу - обеспечивающий синтез молекулы ДНК на молекуле РНК. Другой отличительной особенностью ретровирусов является их репликация через стадию образования двунитчатой молекулы ДНК (провирус) на вирусной РНК при участии вышеотмеченного фермента с последующей ее интеграцией в клеточный геном клетки-мишени. Созревание вирионов происходит путем почкования на клеточных мембранах, чаще без разрушения клеток-хозяев.

В жизненном цикле вируса лейкоза КРС (ВЛКРС) выделяют две его формы: эндогенную и экзогенную. Первая из них представляет собой интегрированный вирусный геном в геном клетки (состояние провируса). Распространение эндогенной формы вируса в организме животного происходит при делении инфицированной клетки и представляет собой передачу вирусного генетического материала дочерним клеткам. Данный путь распространения называется вертикальным неинфекционным путем распространения. Экзогенный онковирус представляет собой зрелую вирусную частицу, распространяющуюся горизонтальным путем (от животного к животному) и вертикальным инфекционным, который в отличие от вертикального неинфекционного характеризуется заражением половых клеток или клеток эмбриона от матери.

В составе вириона присутствуют несколько групп белков, наиболее важными из которых в антигенном отношении является внутренний вирионный белок р24, а также наружный структурный гликопротеин gp51. На наличие внутреннего антигена в организме формируются преципитирующие антитела, а поверхностного гликопротеидного антигена – вируснейтрализующие антитела. Клеткой-мишенью для ВЛКРС является В-лимфоцит, реже – Т-лимфоцит, в геном которых одновременно интегрируется около трех копий ДНК-провируса Провирус изменяет экспрессию клеточных генов, в частности onc гена, вблизи которого происходит интеграция вирусной нуклеиновой кислоты. В результате активизации onc гена начинается усиленное размножение лимфоцитов (трансформация). Кроме того, провирус способен длительно персистировать в организме в интегрированном состоянии. В этом виде вирус обычно защищен от действия антител. Защита организма от инфицирования обусловлена выработкой на поверхностные вирионные гликопротеиды (главным образом gp51) вируснейтрализующих антител. Однако даже при их наличии возможно сохранение и размножение вируса в лимфоцитах, инфильтрирующих ткани в местах, не доступных для действия противовирусных антител.

Лабораторная диагностика лейкоза КРС включает в себя серологическое, гематологическое и гистологические исследования.

Отбор патматериала. Для гематологического исследования берут пробы крови из яремной вены, стабилизированные 10%-ным раствором ЭДТА из расчета 0,02 мл (1 капля) на 1 мл крови. Для гематологического исследования отбирают пробы крови от животных старше 2 лет. Не разрешается брать кровь от животных 15 дней до отела и 15 дней после него.

Для серологического исследования отбирают пробы сывороток крови от животных старше 6-месячного возраста. При этом в лабораторию направляют 5-6 мл сыворотки в термосе со льдом. Для гистологического исследования отбирают пробы пораженных органов и посылают в свежем виде в термосе со льдом или консервируют 10%-ным формалином.

Серологический метод заключается в постановке РИД в агаровом геле, с помощью которой выявляются противолейкозные антитела в сыворотке крови. Животных, сыворотки которых дали положительный результат в РИД, считают инфицированными вирусом лейкоза, после чего их дополнительно исследуют гематологическим методом.

Гематологический метод основан на обнаружении в периферической крови повышенного количества лейкоцитов, главным образом, лимфоидного ряда и слабо дифференцированных клеток.

Повышенное количество лейкоцитов устанавливается путем их подсчета в камере Горяева после обработки крови жидкостью Тюрка по обычной методике. При обнаружении лейкоцитоза из этой же пробы крови готовят мазок на стекле, окрашивают одним из методов (по Романовскому-Гимзе, Паппенгейму, Нохту) и выводят лейкограмму. После этого высчитывают абсолютное число лимфоцитов в крови путем умножения количества лейкоцитов на процент лимфоцитов в лейкограмме. Интерпретацию результатов проводят с использованием лейкозного ключа.

Гистологический метод является вспомогательным в диагностике лейкоза и основан на обнаружении инфильтрации внутренних органов лимфоцитами различных популяций. Гистологический метод дает возможность дифференцировать различные формы лейкоза.

Животное считается больным лейкозом при наличии:

- положительного результата однократного гематологического исследования;

- клинических признаков болезни;

- положительного результата гистологического исследования патологического результата.

Диагностика оспы. Лечение. Иммунитет.

Лабораторная диагностика оспы. Включает микроскопическое выявление в патологическом материале элементарных телец, заражение куриных эмбрионов, а в сомнительных случаях — проведение биопроби на чувствительных животных.

В лабораторию для исследования присылают везикулярную жидкость, набранную в капилляры пастеровських пипеток, и целые папулы, вырезанные ножницами на границе с непораженной тканью, которые вмещают в флакон с 50 %-г раствором глицерина. Для вирусоскопии готовят тонкие мазки и мазки-отражения оспенных поражений кожи и пустул, которые после высушивания исследуют в нативному состоянии или окрашивают за методом Морозова ли Пашена. Во время микроскопического исследования окрашенных за Морозов мазков на світло-брунатному фоне препарата вирусные частички имеют вид мелких округлых элементарных телец черного цвета, размещенных поодиночке, попарно, короткими цепочками или сосредоточениями. В окрашенных за Пашеном мазках мелкие округлые элементарные тельца имеют темно-красный цвет.

Для диагностики оспы в Птицы Осуществляют заражение патологическим материалом 10 - 12-дневных куриных эмбрионов. В случае положительных результатов на ХАО погибших (или забитых) вдоль первых

3-6 пор куриных эмбрионов находят размещенные в отдельности мелкие оспинки или собранные вместе значительные ячейки оспенных поражений.

При атиповой форме оспы у Овец Для диагностики применяют биопробу. Исследуемый патологический материал в объеме 0,1 мл вводят внутрикожно в бесшерстную поверхность хвоста неиммунной молодой овцы. В положительных случаях вдоль 10 пор на месте инокуляции развивается специфический местный оспенный процесс, который подтверждается нахождением в мазках элементарных телец. Для диагностики оспы у Свиней Патологический материал вытирают в надрезы кожи на внешней поверхности уха или внутренней поверхности бедра 2 - 3-месячных поросят. В положительных случаях через 6-8 ч на месте надрезов наблюдаются характерные оспенные поражения, специфичность которых подтверждается выявлением в мазках элементарных телец. Идентификацию вируса оспы, что способствовало заболевание свиней, осуществляют на двух переболевших поросятах, которым в свежоскарификованую поверхность кожи на тыльной стороне уха или на внутренней поверхности бедра вытирают вісповакцину. Отсутствие зажигательной реакции на месте введения вакцины свидетельствует про інфікованість свиней вирусом оспы коров или осповакцини. Положительная зажигательная реакция на месте введения вакцины свидетельствует про инфицырованость свиней оригинальным вирусом оспы свиней. Для диагностики оспы Коров Исследовательским патологическим материалом заражают кроликов в роговицу глазу (проба Рафаэля). При гистологическом исследовании пораженных участков роговицы обнаруживаются специфические тельца-включения Гварни-ери. В случае необходимости ставят биопробу на телятах.

Лечение. Специфических средств лечения оспы не предложен. Больных животных изолируют в сухие, чистые, хорошо проветриваемые помещения, обеспечивают мягким питательным кормом. Проводят симптоматичное лечение. Слизистые оболочки сращивают антисептическими и вяжущими жидкостями, оспенные поражения кожи обрабатывают разными мазями (борная, прополисная, цинковая, салициловая), эмульсиями (стрептоцидовая, синтомициновая) и антисептическими жидкостями. Кожные покриви больных свиней через каждые 6-7 пор к отпадению корок смачивают непрочным раствором креолина, лизола или 'едкого луга. При конюнктивитах у коней глаза промывают 1 %-г раствором цинка, 0,5 %-г раствором танину. Для профилактики и лечения осложнений бактериальной микрофлорой применяют антибиотики широкого спектра действия.

Иммунитет. В переболевших на оспу коров, верблюдов и коз формируется стойкий иммунитет на все жизнь, у овец и кур — на 2-3 года, у свиней и коней — на несколько месяцев. Для специфической профилактики применяют гидроксидалюминиеву формолвакцину против оспы овец, сухую культуральну вирус-вакцину против оспы овец и гидроксидалюминиеву формолглицеринову вакцину против оспы коз.

Гидроксидалюминиеву Формолвакцину против оспы овец Применяют с профилактической целью в неблагополучных или угрожающих хозяйствах. Прививают клинически здоровых животных независимо от их физиологического состояния и века. Ягнят, привитых к 2-месячному веку, ревакцинують через 2-3 мес, в дальнейшем их прививают дважды на год. Невосприимчивость у овец наступает на 15-ту пору после вакцинации и сохраняется в течение 6-8 мес.

Вирус-вакцину против оспы овец сухую Культуральну применяют для профилактической иммунизации клинически здоровых овец в епизоотичных ячейках и угрожающих относительно оспы районах. Молодняк вакцинируют из месячного века, ревакцинують в 6-месячном веку. Взрослых овец прививают единовременно через каждые 12 мес. Иммунитет наступает через 4-5 пор после вакцинации и сохраняется в течение 12 мес.

Гидроксидалюминиеву Формолглицериновую вакцину против оспы коз Применяют с профилактической целью во всех неблагополучных хозяйствах без любых ограничений. Молодняк ревакцинируют через 3-4 мес. Иммунитет сохраняется до 6 мес.

Профилактика и мероприятия борьбы. Предусматривают охрану хозяйств от занесения и распространения вируса оспы; защита животных от заражения оспой; своевременное установление диагноза; выявление, изоляцию и лечение больных животных и вакцинацию здоровых; ликвидацию болезни в неблагополучном пункте и предотвращение распространению инфекции в другие хозяйства; уничтожение возбудителя болезни в ячейки инфекции.

Чтобы предотвратить занесению оспы Овец И Коз, Не допускается завозка животных, кормов и инвентаря из неблагополучных относительно оспы хозяйств. Всех новоприбывших овец и коз вдоль 30 пор удерживают на карантине, во время которого за ними устанавливают постоянный ветеринарный надзор. Перед введением к общей отаре овец купают в креолиновых ваннах. За каждой отарой закрепляют постоянные пастбища, водопой и пути перегона. Не допускаются контакты с отарами других хозяйств и индивидуальных собственников; обеспечивается постоянный надзор за состоянием здоровья животных. С целью профилактики оспы все поголовье овец в угрожающей зоне регулярно вакцинируют.

В случае возникновения оспы овец или коз и подтверждение диагноза хозяйство объявляют неблагополучным относительно оспы, вводят карантин, выставляют охранно-карантинный ветеринарно-милицейский пост с круглосуточным дежурством. В неблагополучном пункте запрещается введение и вывод всех видов животных; перегруппировка животных внутри хозяйства, а также выпас, поение и удержание больных овец вместе с здоровыми животными всех видов; вывоз из неблагополучного пункта фуража; использование овечьего молока и полученных из него продуктов в необеззараженном виде; стрижка овец неблагополучных отар к снятию карантина; торговля животными и продуктами животноводства; проведение выставок, ярмарок, базаров; проезд всех видов транспорта по неблагополучной территории. За неблагополучной отарой закрепляют постоянных надсмотрщиков, транспорт, пастбища.

Трупы погибших животных сжигают, запрещается снимать шкуры и использовать шерсть из трупов. Больных и подозреваемых относительно заболевания животных изолируют и лечат. Всех клинически здоровых овец и коз прививают против оспы одной из существующих вакцин в соответствии с действующей инструкцией. Проводят также вакцинацию животных в угрожающих относительно оспы хозяйствах.

Вдоль всего периода карантина через каждые 5 пор осуществляют механическое очищение и дезинфекцию помещений и других мест удержания овец. Карантин снимают через 20 пор после полного выздоровление, гибели или забоя последней больной овцы, а также после проведения окончательной дезинфекции помещений, выгульных дворов и отрядов, где находились больные на оспу овцы. Овец и животных других видов, которые находились в ячейки оспы, в теплую пору года нужно выкупать в 1 %-и эмульсии креолина. После снятия карантина всех овец, которые поступают в хозяйство, в период 30-дневного карантина привмвают против оспы. В дальнейшем на территории неблагополучного в минувшем пункте проводят ежегодную вакцинацию овец против оспы в течение трех следующих лет.

В случае появления оспы овец в местностях, где она не регистрировалась три года и большее, осуществляют немедленный забой всех овец неблагополучной группы на специально оборудованной забойной площадке с соблюдением соответствующих ветеринарно-санитарных правил. После установления диагноза на оспу Свиней Хозяйство объявляют неблагополучным относительно оспы и вводят в нем карантинные ограничения. Больных на оспу свиней изолируют и лечат; здоровых свиней прививают вакциной. Свиней, которые погибли с имеющимися клиническими признаками оспы, утилизируют вместе с шкурой. В ячейки оспы каждые 5 пор проводят дезинфекцию помещений, оснащений, инвентаря. Спецодежда и обуви дезинфицируют каждый день в параформалиновой камере или обрабатывают 3 %-г раствором хлорамина, 3 %-г раствором хлорной извести; руки дезинфицируют 1 %-г раствором хлорамина. Карантинные ограничения из неблагополучного относительно оспы свиней хозяйства снимают через 21 пору после полного выздоровление, гибели или забоя больных на оспу животных, обработки кожных покровов свиней 1-1,5 %-г раствором креолина или лизола, 0,3 %-г раствором едкого луга, а также проведение окончательных мероприятий.

Для дезинфекции помещений и предметов ухода применяют горячие 2-4 %-ой растворы едкого натра и калу; 20 %-ом смесь свежогашеной извести; просветленный раствор хлорной извести, которая содержит не менее чем 2 % активного хлора; горячий 3 %-и раствор сульфатно-карболовой смеси; 2 %-и раствор формальдегида. Гной обеззараживают вдоль Из недель биотермическим методом, гноивку — путем засыпания в гноєзборники негашегого или хлорной извести из расчета 1 часть извести на 5-6 частей гноивки. Одежда и обувь обслуживающего и ветеринарного персонала дезинфицируют в параформалиновой камере.

В случае появления оспы у Большого рогатого скота Больных животных изолируют и лечат. Молоко от больных коров пастеризуют.

Больных на оспу Коней Изолируют и лечат. В ячейках оспы проводят надлежащие ветеринарно-санитарные мероприятия.

Натуральная оспа распространяется путем контактов с клинически больными людьми, а также через одежду, постельное белье, посуда. Инкубационный период длится 12-13 пор. Ранними симптомами болезни есть трясучка, головная боль, состояние прострации. В первые 2-4 поры в 10 % случаев наблюдается появление нестойкого еритематозного или петехиального высыпание на боковых поверхностях живота, в подпахных впадинах, паховому участку. На 3 - 4-ту пору на слизистой оболочке рта и глотки, на коже лица, предплечье и кистях рук появляются оспенные высыпания, температура снижается, состояние больного улучшается. В следующие 5-6 пор высыпания проходят все специфические стадии развития, распространяясь по всему телу. В конце 3-ей недели наступает выздоровление, хотя рубцы остаются на все жизнь.

При злокачественной форме оспы высыпания приобретают сливного характера, в основе пустул развиваются геморагии. Прогноз неблагоприятный. Больную наиболее заразные на 3 - 10-ту пору болезни.

Коровья оспа наблюдается у доярок, рабочих животноводческих ферм, которые обслуживают инфицированный скот, ветеринарных специалистов. Поражение отмечаются на кистях рук, в особенности на пальцах и в первому межпальцевом промежутках, а также на предплечьях, лице. Возможное генерализованое высыпание, которое сопровождается трясучкой, регионарным лимфаденитом. Прогноз благоприятный. Оспенные высыпания проходят все стадии развития и исчезают вдоль 2-4 недель.

Вакцинная оспа есть следствием прививки человека против оспы. Может также возникнуть у лабораторных работников, которые изготовляют вакцину из телячьей лимфы. На 3 - 4-ту пору после заражения появляется небольшая красная папула, которая постепенно увеличивается, на 6 - 7-му пору превращается в везикулу, со временем на пустулу, которая подсыхает и образовывает корочку, которая в течение 3 недель облущивается, оставляя рубец.

Благодаря невероятным усилиям медицинских работников вдоль последнего столетия оспу человека ликвидирован на сегодня почти во всем мире.

Читайте также: