Пцр для диагностики грибковых инфекций

Обновлено: 24.04.2024

Это молекулярно-генетическое исследование, позволяющее выявить генетический материал грибов Candida albicans – возбудителей кандидоза.

Синонимы русские

Дрожжеподобные грибы рода Candida, возбудитель молочницы (кандидоза).

Синонимы английские

C. albicans, NAA (DNA, PCR).

Метод исследования

Полимеразная цепная реакция в режиме реального времени.

Какой биоматериал можно использовать для исследования?

Мазок из зева (ротоглотки), первую порцию утренней мочи, соскоб из прямой кишки, соскоб урогенитальный.

Общая информация об исследовании

Candida albicans – дрожжеподобные микроскопические грибы, распространенные повсеместно. У человека и животных носительство грибов рода C. аlbicans на слизистых ротовой полости встречается в 46-52 % случаев, в фекалиях – в 80 %, на коже – в 9,5 %. На слизистой влагалища дрожжеподобные грибы выявляются у 12 % здоровых женщин и у 30-85 % беременных (в последнем триместре беременности).

Данный микроорганизм относится к условно-патогенным, т. е. в умеренных количествах является нормальной частью микрофлоры и вызывает заболевания только при избытке. Чрезмерному росту этих микроскопических грибов препятствует нормальная бактериальная флора кожи и слизистых, а также защитные факторы организма. Заболевание, вызванное грибами рода Candida, – кандидоз возникает при нарушениях иммунных механизмов защиты.

Причиной возникновения кандидоза может явиться иммуносупрессивная терапия, пересадка донорских органов, лечение кортикостероидами, радиационные поражения, бесконтрольное применение антибиотиков, злокачественные новообразования, длительное применение контрацептивов. Кандидоз часто развивается на фоне сахарного диабета, дисфункции щитовидной и паращитовидных желез. Особое значение имеет кандидоз при ВИЧ-инфекции, он входит в число СПИД-маркерных инфекций – у человека с нормально функционирующим иммунитетом не развивается. 90 % больных СПИДом на той или иной стадии заболевают кандидозом.

Кандидозный вульвовагинит – молочница – очень распространенное заболевание среди женщин детородного возраста: около 75 % всех женщин в течение жизни переносят хотя бы один эпизод острого кандидоза вульвы и влагалища. У мужчин сахарный диабет и/или несоблюдение личной гигиены может привести к развитию кандидозного баланопостита – воспаления головки и крайней плоти полового члена. И, хотя кандидоз не относится к инфекциям, передающимся половым путем, незащищенный половой контакт при остром или хроническом вульвовагините может привести к воспалению полового органа мужчины.

Возможен также кандидоз мочевыводящих путей, который развивается чаще как внутрибольничная инфекция. Факторами риска в данном случае являются сахарный диабет, катетеризация мочевого пузыря, мочекаменная болезнь, длительное применение антибиотиков широкого спектра действия. Пациенты при этом жалуются на частые болезненные мочеиспускания.

Молекулярно-генетический метод позволяет с высокой чувствительностью и специфичностью выявить C. albicans в исследуемом материале. Отрицательный результат теста исключает роль дрожжеподобного гриба C. albicans в воспалительных заболеваниях мочеполовых органов. При положительном результате требуются дополнительные исследования: микроскопия на псевдомицелий гриба и посев материала на грибы рода Candida с определением чувствительности к антимикотическим препаратам. Необходимо также исключать другие вероятные инфекции мочевыводящих путей.

ИФА. В настоящее время уже появились коммерческие наборы для выявления Аг некоторых возбудителей, позволяющие их идентифицировать в течение 5-10 мин. Для выявления Аг на твёрдой фазе сорбируют известные AT и добавляют сыворотку, содержащую Аг; после инкубирования несвязанный Аг декантируют, систему промывают и вносят меченые AT, специфичные к сорбированным AT. Повторяют процедуру инкубирования и отмывания, вносят хромогенный субстрат, положительный результат фиксируют при изменении окраски системы.

Гибридизация ДНК — высокоспецифичный метод, позволяющий идентифицировать геном вируса после его гибридизации комплементарными молекулами ДНК. В качестве маркёра применяют ферменты и изотопы. Метод определяет способность вирусной ДНК гибридизиро-ваться с меченой комплементарной ДНК; специфичность метода прямо пропорциональна длине комплементарной цепочки. Перспективен метод гибридизации нуклеиновых кислот in situ. Для постановки реакции меченую ДНК наносят на биоптаты тканей (в том числе на фиксированные формалином или заключённые в парафиновые блоки) и регистрируют взаимодействие с комплементарной ДНК. Метод используют для выявления вирусов простого герпеса, папилломы человека, Эпстайна-Барр и др.

ПЦР. Метод значительно увеличивает чувствительность метода гибридизации, повышая содержание вирусной ДНК в материале, полученном от больного, а также ускоряет время получения результата.

Методы диагностики микозов ( грибковых заболеваний )

Микроскопия — один из основных методов выявления возбудителей микозов. Позволяет проводить экспресс-диагностику микозов и получать результат в течение 1—2 ч, тогда как для выделении культуры возбудителя необходимы недели. Для экспресс-диагностики препараты часто необходимо окрашивать специальными красителями, так как простая окраска гематоксилином и эозином часто не позволяет выявить клетки грибов.

Неокрашенные препараты грибов

Микроскопия методом висячей или раздавленной капли. Метод позволяет выявить структуры грибов в клинических образцах без предварительного окрашивания.

Обработка 10% едким калием (КОН). Метод используют в первую очередь для визуализации структур возбудителей в фрагментах кожи и её придатках (ногти, волосы), отделяемом очагов поражения и влагалища. В указанных образцах содержится большое количество клеток, в которых КОН разрушает кератин, оставляя неизменёнными клетки грибов.

Окрашенные препараты грибов. Окраска мазка грибов.

• Окраска мазка грибов по Граму. В мазках из клинического материала грибы представлены грамположительными клетками. Клетки Cryptococcus neoformans плохо воспринимают красители, что можно использовать как дифференциально-диагностический признак при микроскопии окрашенных мазков СМЖ.

• Окраска мазка грибов нигрозином или тушью по Бурри мазков СМЖ позволяет выявить капсулированные клетки Cryptococcus neoformans. Для идентификации этого микроорганизма можно использовать муцикармин или конго красный.

• Окраска мазка грибов по Романовскому-Гимзе или Райту мазков крови и костного мозга позволяет выявить дрожжевую форму Histoplasma capsulatum в цитоплазме фагоцитов.

• Окраска мазка грибов метенаминовым серебряным по Гомори. Метод включает предварительную обработку гистологических препаратов хромовой кислотой с последующим нанесением красителя (клетки грибов тёмно-серые или чёрные).

• Окраска мазка грибов по Гридли. Метод включает предварительную обработку препаратов хроматом лейко-фуксина с последующим нанесением фуксинового альдегида и метанилового жёлтого (клетки грибов розово-пурпурные на жёлтом фоне).

• Окрашивание перйодной кислотой и реактивом Шиффа (по Мак-Манусу). 1,2-Гликольные группировки полисахаридов клеточных стенок грибов сначала окисляются перйодной кислотой до альдегидов, реагирующих с сульфитом лейкофуксина реактива Шйффа; клетки окрашиваются в насыщенно розовый или красный цвет.

Иммунофлюоресцентная микроскопия грибов

Наибольшее распространение нашла РИФ. Применяют AT, меченные флюоресцеинами; для выявления грибковых Аг реагент наносят на гистологический препарат, инкубируют и проводят люминесцентную микроскопию.

Информация на сайте подлежит консультации лечащим врачом и не заменяет очной консультации с ним.
См. подробнее в пользовательском соглашении.

Кандидоз является довольно распространенной инфекцией.

Возбудитель может поражать практически все органы, начиная от кожи и слизистых, заканчивая урогенитальным трактом.

Своевременная диагностика заболевания имеет решающее значение, поскольку позволяет вовремя назначить лечение и не допустить распространения процесса.

ПЦР на кандиду — это современный метод, который позволяет обнаружить заболевание на любой стадии.

Точность результатов исследования приближается к 100%.

Возбудитель

Кандида может в небольших количествах присутствовать в организме здорового человека.

В диагностике большое значение имеет определение количества возбудителя.

ПЦР на кандида альбиканс позволяет получить эту информацию.

Возбудителем молочницы является грибок.

В норме он присутствует в организме.

При нарушении баланса нормальной микрофлоры или снижении иммунитета кандида начинает активно размножаться.

Это приводит к появлению клинических признаков заболевания.

Отсутствие своевременного лечения приводит к генерализации процесса.

Методы диагностики молочницы

Для диагностики кандидоза используют такие методы, как посев, микроскопия мазка, серологические тесты, но все они имеют ряд недостатков.

Самым быстрым и точным методом, позволяющим поставить точный диагноз, является ПЦР мазок на кандиду альбиканс.

Эта диагностика дает возможность выявить в биоматериале даже единичных возбудителей и дифференцировать их.

Результат анализа можно получить в день его сдачи, что позволит как можно скорее начать процесс лечения.

ПЦР на кандиду
рассказывает подполковник
медицинской службы, врач
Ленкин Сергей Геннадьевич

Содержание данной статьи проверено и подтверждено на соответствие медицинским
стандартам врачем дерматовенерологом, урологом, к.м.н.

Ленкиным Сергеем Геннадьевичем

Наименование	Срок	Цена
ДНК Candida albicans	1 д.	300.00 руб.

Материал для исследования

Биоматериал для ПЦР диагностики подходит практически любой.

Его выбор зависит от локализации патологического процесса.

При урогенитальном кандидозе это мазок.

У женщин мазок берут из влагалища и канала шейки матки.

Забор материала проводится на гинекологическом кресле.

У мужчин берут мазок из уретры.

Эта процедура не очень приятна, но не вызывает сильных болевых ощущений и производится быстро.

После взятия, мазок должен быть как можно скорее отправлен в лабораторию.

При соблюдении техники забора биоматериала и правильном проведении диагностики точность метода достигает 100%.

Забор материала у женщин не производится во время менструации и в первые два для после ее окончания.

Мужчинам перед сдачей мазка из уретры не рекомендуется опорожнять мочевой пузырь в течение 3 часов.

Нарушение этого правила может стать причиной ложноотрицательного результата.

Какой-либо особой подготовки перед обследованием не требуется.

Суть метода

ПЦР позволяет обнаружить генетический материал кандиды в биоматериале.

Даже если в мазке присутствуют единичные возбудители, то чувствительность метода позволяет их выявить.

Выделенная ДНК сравнивается с эталонами в базе данных, что позволяет с точностью установить вид возбудителя.

Наиболее часто диагностируется такой возбудитель молочницы, как Candida Albicans.

В организме встречаются и другие виды дрожжеподобных грибков.

Поэтому проводится ПЦР на кандида глобрата и ПЦР на кандида крузеи.

ПЦР используют при наличии клинических симптомов, позволяющих заподозрить молочницу и для определения бессимптомного носительства грибка.

ПЦР диагностика кандидоза имеет следующие преимущества перед другими методами:

точность;
высокая специфичность;
возможность выявления даже единичных возбудителей в биоматериале;
быстрое получение результата;
возможность применения на различных стадиях заболевания.

Результат исследования является основанием для окончательного диагноза и назначения лечения.

Ложноотрицательный результат ПЦР можно получить при нарушении техники забора биоматериала.

Другой причиной может быть несвоевременном его направлении в лабораторию, а также при нарушении условий транспортировки.

Бывают случаи, когда грибок находится в организме в небольшом количестве и во взятом биоматериале отсутствует.

Ложноположительный результат возможен при загрязнении биоматериала, а также после лечения.

В последнем случае обнаруживаются фрагменты ДНК погибших возбудителей.

Они через некоторое время удаляются из организма естественным путем и не представляют опасности.

Оценка результатов

При отсутствии возбудителя в исследуемом материале ПЦР будет отрицательной.

При обнаружении возбудителя важно оценить его количество и сопоставить с клиническими проявлениями.

Только врач может грамотно расшифровать анализ и сделать правильные выводы.

ПЦР на молочницу — это современный, точный метод, который позволяет определить концентрацию и тип возбудителя.

Он незаменим при получении сомнительных результатов других методов, и для диагностики случаев бессимптомного носительства грибка.

ПЦР тест на candida: когда назначают

На начальной стадии молочница может никак себя не проявлять.

Человек даже не подозревает о ее наличии.

Разберем, когда необходимо сдать анализы на молочницу.

Это стоит сделать, если появились соответствующие признаки:

При появлении творожистых выделений;
Выделения имеют специфический запах;
В области гениталий возможно покраснение;
Имеется сухость в области половых органов;
В результате сухости могут образовываться трещины.

Анализ методом полимеразной цепной реакции на кандиду назначают, если микроскопия не дала точного результата.

ПЦР на кандиду позволяет получить 100% результат и широко используется для подтверждения диагноза.

Метод доступен в любой современной лаборатории.

Когда лучше сдавать ПЦР на кандиду

Чаще всего ПЦР анализ на кандиду сдают, при появлении белого налета на половых органах, в промежности, в ротовой полости.

Внимание! Кандида передается не только половым путем, но и контактно-бытовым.

Инфицирование партнера произойдет уже на 3-5 день после незащищенной половой близости.

Инкубационного периода у молочницы практически нет.

Все зависит от индивидуальной резистентности организма.

ПЦР анализ на кандиду покажет положительный результат уже через 5 дней.

В случае если инфицирование не произошло, результат будет отрицательный.

Анализ на кандиду у женщин: откуда берется биоматериал

Область, из которой будет произведен забор биоматериала для анализа методом ПЦР, зависит от локации грибкового процесса.

В случае поражения половых органов женщины, для проведения анализа, берется биоматериал из влагалища.

Для проведения исследования берут соскоб из мочеиспускательного канала.

Если кандида поразила ротовую полость – биоматериал получают изо рта.

Чаще всего грибок поражает слизистые пациента.

Когда налет присутствует в анальной области промежности, врач возьмет мазок из ануса.

Анализ на кандиду у мужчин: откуда берется биоматериал

Риск заразиться молочницей при незащищенном половом акте у мужчины, также велик, как и у женщины.

Чаще всего у представителей мужского пола поражается половой член.

Для проведения анализа методом полимеразной цепной реакции, берут мазок с головки члена пациента.

Если у мужчины обнаружено воспаление яичек, врач может назначить ПЦР на кандиду семенной жидкости.

При воспалительном процессе в простате, возможен анализ секрета предстательной железы.

ПЦР на кандиду у детей: особенности

Молочница у детей встречается также часто, как и у взрослых.

Связано это с ослабленным иммунитетом ребенка.

Грибковая инфекция чаще всего поражает слизистую в ротовой полости ребенка.

Для оптимальной диагностики заболевания назначают ПЦР.

Обычно для исследования производится забор биоматериала изо рта.

Анализ на кандиду у беременных

Будущей маме рекомендуется сдать анализы на инфекции в период планирования ребенка.

В случае, когда беременность уже наступила, анализы на инфекции назначит лечащий врач.

ПЦР анализ на грибковые инфекции является плановым анализом.

Для исследования у беременной женщины произведут забор мазка из влагалища.

Врач может взять соскоб из уретры, при наличии показаний.

Когда ПЦР анализ дал положительный результат, гинеколог назначит лечение обоим партнерам.

Чаще всего беременным не назначаются препараты с тератогенным действием.

Проводятся щадящий курс лечения с минимальными воздействиями на плод.

Помните! Когда у беременной женщины обнаружена молочница, ее обязательно нужно лечить.

Во время прохождения по родовым путям, ребенок может инфицироваться от матери.

В этом случае, назначается анализ на кандиду новорожденному.

Чтобы исключить или обнаружить молочницу на ранней стадии.

ПЦР: подготовка

Правильная подготовка к диагностическому исследованию предполагает получение более достоверного результата.

Подготовка к ПЦР заключается в следующем:

Исключить половую близость за 2-3 дня до анализа;
Женщине рекомендуется сдавать анализ либо до менструации, либо через 3 дня по ее завершению;
Исключить спринцевание антибактериальными средствами;
Прием антибиотиков закончить за 2-3 недели до проведения исследования;
Подмываться накануне теплой водой без мыла и геля для душа;
Не мочиться за 2-3 часа до забора биоматериала.

При заборе биоматериала из ротовой полости, необходимо исключить полоскание антибактериальными и противогрибковыми средствами.

Желательно ПЦР анализ на кандиду из ротовой полости сдавать с утра, на голодный желудок.

Рекомендуется даже не чистить зубы.

ПЦР тестирование: расшифровка

Важно! Обычный ПЦР тест при исследовании на грибок дает только количественный результат.

Качественное исследование не проводится, так как кандида присутствует в каждом организме.

Небольшое присутствие грибковой флоры в организме считается нормой.

Положительным исследование ПЦР анализа на кандиду считается, если количество микроорганизма в биоматериале превышает 1000 копий.

Если количественный показатель меньше – молочница отсутствует.

ПЦР на кандиду: контрольный анализ

После пройденного лечения, необходимо сдать повторный ПЦР анализ.

Только в случае, если повторный результат будет отрицательным, можно констатировать выздоровление пациента.

Если ПЦР тест даст положительный результат, необходима новая схема лечения.

Важно! Повторный анализ необходимо сделать минимум, чем через 2 недели, после проведенного курса лечения.

Исследование ПЦР: где сдавать

Муниципальные поликлиники лишены возможности проведения тестирования методом ПЦР.

Это объясняется тем, что для этой методики нужны закупки современного оборудования.

Обычно врачи рекомендуют сдать анализы платно.

При самостоятельном выборе клиники для проведения анализа ПЦР – стоит обратиться в проверенный центр.

Важным фактором является современная лаборатория и квалифицированные врачи.

Опыт врача, порой, имеет решающее значение для расшифровки результатов анализа на кандиду.

При правильной расшифровке результатов ПЦР, назначается эффективное лечение молочницы.

Cколько делается ПЦР тест на candida

Следует отметить, что ПЦР это достаточно быстрый метод диагностики.

В среднем, в клиниках Москвы, ПЦР анализ на кандиду будет готов в течение 1 – 2 сут.

В нашем медицинском центре, результат ПЦР анализа можно получить в день исследования.

Скорость готовности результатов анализа зависит от лаборатории.

При быстром получении результата, вы экономите свое время.

Лечение будет своевременным, и выздоровление наступит достаточно быстро.

ПЦР на кандиду: цена

Цена анализа для определения молочницы варьируется в столичном регионе – от 500 до 1000 рублей.

Чаще всего, клиники в цену проведенного анализа включают:

Местоположение – чем ближе к центру Москвы, тем дороже;
Квалификацию врачей;
Современность лабораторных технологий.

Мы не считаем такую ценовую политику верной и стараемся держать демократичные цены.

В нашем центре посещение венеролога стоит 900 рублей.

Забор биоматериала для проведения ПЦР анализа на кандиду – 300 рублей.

Если вы получите сомнительные результаты на кандидоз, пройдите диагностики ПЦР в нашей клинике.

ПЦР или полимеразная цепная реакция - этот метод исследования основан на анализе структуры ДНК.

Анализ на ПЦР грибка ногтей подходит диагностики для определения множества видов микроорганизмов.

Каждый микроорганизм имеет ДНК или РНК, которое характерно для его вида.

Эта особенность позволяет максимально точно определить разновидность грибка, бактерии или вируса.

ПЦР анализы на 6 видов грибков в нашей клинике стоят 2500 рублей

Стоит ли делать ПЦР тест при грибке ногтей?

ПЦР тест необходим для точного определения вида грибка, как при поражении ногтей, так и при микозе стоп.

Благодаря своевременной и точной диагностике возбудителя грибка, можно излечить недуг в кратчайшие сроки.

После получения анализов, ваш лечащий врач сможет точно поставить диагноз и назначить соответствующее лечение.

Правильное определение возбудителя дает возможность назначить антигрибковый препарат.

Помните: самолечение может нанести вред вашему здоровью.

Бесконтрольное применение противогрибковых кремов и препаратов может привести к проявлению значимых побочных эффектов.

Преимущества проведения ПЦР диагностики грибка ногтей

I. Высокая чувствительность методики;
II. Высокая точность метода ПЦР при определение разных видов грибка;
III. Быстрое выполнение анализа ПЦР позволяет начать лечение незамедлительно;
IV. Доступная цена методики ПЦР;
V. Метод является практически безболезненным;
VI. Для проведения ПЦР теста нет противопоказаний.

Анализ грибок ногтя в Москве Для выявления патогенного грибка и его видовой идентификации, необходимой для последующего назначения эффективного лечения, проводится лабораторное исследование.

О том как сдать ПЦР тест
на грибок ногтей
рассказывает подполковник
медицинской службы, врач
Ленкин Сергей Геннадьевич

Ленкиным Сергеем Геннадьевичем

Наименование	Срок	Цена
посев на возбудителей грибков кожи и ногтей, без определения чувствительности к препаратам	21 д.	2500.00 руб.

Как проводится ПЦР исследование на грибы?

Для проведения ПЦР теста на грибок возможно использование различных сред:

Соскоб участка кожи;
Мазок со слизистой;
Проба мочи;
Анализ крови.

ПЦР тест на грибок показывает не только присутствие вируса, но и его концентрацию.

При грибке ногтя наиболее оптимально выполнить соскоб пораженного ногтя.

Диагностику грибка ногтей ПЦР методом можно делать и путем анализа крови.

Как проводят соскоб для анализа на ПЦР?

В клинике врач микологи или другой специалист специальным инструментом снимает частички ногтя, затронутого грибком.

Полученную пробу помещают в пробирку и отправляют в лабораторию.

Если лаборатория находится в клинике, анализ можно сделать за 20 минут.

Соскоб на грибок это абсолютно безболезненная процедура.

Как подготовиться к выполнению анализа на грибок ногтя методом ПЦР?

Перед проведением соскоба необходимо в течение 7 дней отменить приём системных противогрибковых препаратов.

За 3-4 дня перед проведением ПЦР теста рекомендовано прекратить использование местных средств.

Их применение может повлиять на достоверность результатов.

Перед проведением исследования в лаборатории не желательно распаривать ногти, мыть горячей водой.

По возможности следует ограничиться протиранием ног влажным полотенцем, минуя зону ногтя.

Сколько стоит анализ ПЦР на грибок ногтей, стоп, кожного покрова или волос?

Стоимость ПЦР теста на грибок может быть различной в зависимости от расположения клинии, наличия своей лаборатории.

Например, сдать анализы ПЦР на грибок ногтей в Москве в полном объеме обойдется примерно в 2000 – 2500 рублей

Где выполнить исследование ПЦР на грибок в Москве?

Для диагностирования и терапии грибкового поражения ногтевых пластин, стоп, кожи и волос вы можете обратиться в наш медицинский центр.

В нашей клинике вы можете выполнить ПЦР диагностику следующих грибковых штаммов:

Важно! Применение ПЦР теста при диагностике грибка часто необходимо для подбора эффективного лечения.

По результатам ПЦР диагностики вас проконсультирует врач высшей квалификации.

Врачи клиники имеют опыт работы по специальности более 15 лет.

При подозрении на грибковое заболевание обращайтесь к автору этой статьи – дерматологу, микологу в Москве с 15 летним опытом работы.

Читайте также: