Пцр днк токсоплазмоз не обнаружено

Обновлено: 22.04.2024

Метод ПЦР позволяет идентифицировать в биологическом материале искомый участок генетического материала и обнаружить единичные молекулы ДНК микроорганизма, не выявляемые другими методами. Принцип метода основан на многократном увеличении числа копий, специфичных для данного возбудителя участка ДНК.

С помощью ПЦР-анализа можно диагностировать инфекцию в остром периоде и выявлять случаи носительства.

Токсоплазмоз — это паразитарное заболевание, которое вызывается внутриклеточным паразитом Toxoplasma gondii (токсоплазмой гондии). Токсоплазмоз характеризуется поражением нервной системы, глаз, скелетной мускулатуры и мышцы сердца, а также увеличением лимфоузлов, печени и селезёнки. Склонно к хроническому течению.

Основные переносчики Toxoplasma gondii — домашние или дикие коты, которые заражаются при поедании инфицированных птиц, грызунов или контаминированного сырого мяса. Передача возбудителя может происходить при контактах с животными, а также при употреблении термически недостаточно обработанного мяса.

Токсоплазмозом заболевают лица любого возраста, однако наиболее часто — дети.

Клинические проявления токсоплазмоза
Клинические проявления токсоплазмоза: увеличение лимфатических узлов; мышечная боль, длящаяся в течение месяца или более; поражение глаз и нервной системы; лимфаденопатия, макулопапулёзная сыпь; увеличение печени, селезёнки. Могут развиться признаки энцефалита, менингоэнцефалита и миокардита.

Заболевание у взрослых обычно протекает бессимптомно.

Первичное или повторное заражение т. гондии приводит к выраженным симптомам заболевания у людей с ослабленной иммунной системой, например у больных ВИЧ/СПИДом, проходящих курсы химиотерапии, пациентов после трансплантации органов или принимающих иммунодепрессанты. Могут поражаться глаза и нервная система, что вызывает головные боли, судороги, спутанность сознания, лихорадку, энцефалит, потерю координации и затуманенность зрения.

Токсоплазмоз и беременность
Основную опасность токсоплазмоз представляет для беременных (первичная инфекция во время беременности связана с риском врождённого токсоплазмоза и нарушений развития плода), а также для пациентов с выраженным снижением иммунитета. Если инфицирование происходит в начале беременности, оно может вызывать выкидыши, мёртворождения или приводить к серьёзным осложнениям у новорождённых. Это связано с тем, что инфицированные дети имеют крайне тяжёлые осложнения: задержка умственного развития, судороги, слепоту, увеличение печени или селезёнки, гидроцефалия (водянка головного мозга), микроцефалия (уменьшенные размеры головного мозга). Если пренатальная инфекция протекает в тяжёлой форме, то возможны изменения во многих органах с последующей внутриматочной смертью плода. Многие инфицированные дети, особенно те, кто заразился ближе к появлению на свет, рождаются здоровыми, но спустя несколько лет у них развиваются тяжёлые инфекции глаз, потеря слуха и задержка умственного развития.

Конгенитальный токсоплазмоз, который передается плоду через плаценту встречается достаточно часто. Но нарушения, им порождаемые, во многом зависят от срока диагностики инфекции и даты начала лечения. К осложняющим факторам относятся неонатальная гипоксия (недостаток кислорода) и гипогликемия (снижение уровня глюкозы в крови), глубокие повреждения, повышение внутричерепного давления.

Когда заражается беременная женщина, вероятность того, что инфекция передастся будущему ребёнку, составляет 30–40 %.

  • обследование до и во время беременности;
  • ВИЧ-инфекция, иммунодефицитные состояния;
  • гепатоспленомегалия неясной природы;
  • лихорадка неясной природы;
  • энцефалиты разной степени тяжести;
  • хронические миозиты, лимфоаденопатии в стадии обострения;
  • невынашивание беременности;
  • присутствие в доме кошки.

Забор крови производится в соответствующую пробирку строго до метки.

Молекулярно-генетическое исследование, направленное на выявление активной токсоплазменной инфекции.

Синонимы русские

Токсоплазма гондии, возбудитель токсоплазмоза.

Синонимы английские

Toxoplasmosis, DNA, Toxoplasma gondii Molecular Detection by PCR, T. gondii quantitative real-time PCR.

Метод исследования

Полимеразная цепная реакция в режиме реального времени.

Какой биоматериал можно использовать для исследования?

Амниотическую жидкость, биоптат, венозную кровь, капиллярную кровь, ликвор.

Как правильно подготовиться к исследованию?

  • Не курить в течение 30 минут до исследования.

Общая информация об исследовании

Токсоплазма гондии – это одноклеточный паразитарный микроорганизм, который обнаруживается в земле и в организме некоторых животных и способен вызывать инфекционное заболевание токсоплазмоз.

Токсоплазма очень распространена во всем мире. Инфицированность населения в некоторых странах составляет 95 %. Данный паразит способен поражать млекопитающих, грызунов и птиц. Это одна из так называемых TORCH-инфекций (перевод первых букв латинских названий токсоплазмы, краснухи, цитомегаловируса, герпеса), являющихся опасными для плода.

Путь инфицирования токсоплазмами обычно пероральный. Микроорганизм попадает в организм человека с водой и едой, зараженной паразитами, особенно с сырым или недостаточно термически обработанным мясом. Так как частым переносчиком инфекции являются кошки, заражение возможно при уборке кошачьего туалета инфицированного животного и несоблюдении личной гигиены. Вероятен трансплацентарный путь передачи инфекции – от матери к ребенку. Человек также может заразиться при переливании крови и пересадке донорских органов.

Жизненный цикл микроорганизма проходит со сменой хозяев. Домашний кот, как окончательный хозяин, заражается при поедании грызунов и птиц. В кишечнике котов токсоплазма делится и формирует ооцисты. При активной инфекции миллионы микроскопических ооцист в течение нескольких недель выделяются с кошачьими экскрементами. Ооцисты становятся заразными через 2-3 дня и сохраняют жизнеспособность несколько месяцев. В организме других хозяев, в том числе и людей, токсоплазмы проходят ограниченный период жизненного цикла и формируют неактивные цисты в мышцах, головном мозге и глазах. Иммунная система хозяина способна сохранять цисты в покоящемся состоянии и защищать организм от развития инфекции. Стадия покоя может длиться всю жизнь, пока не возникнет иммунодефицит. У большинства здоровых людей попадание токсоплазмы в их организм может пройти бессимптомно или под видом легкой простуды. Токсоплазменная инфекция играет роль в развитии таких психических заболеваний, как шизофрения, психозы. При токсоплазменном поражении органов зрения возникает хориоретинит.

Впервые возникшая или реактивированная токсоплазменная инфекция может протекать тяжело и вызывать осложнения у пациентов с ослабленной иммунной системой: пациентов с ВИЧ, первичными иммунодефицитами, больных, получающих химиотерапию или иммуносупрессивную терапию после трансплантации органов.

Признаки токсоплазмоза: длительная лихорадка, головная боль, увеличение лимфатических узлов, боль в мышцах, увеличение печени, гепатиты. Внутриутробное инфицирование приводит к слепоте, энцефаломиелиту, задержке роста и даже к гибели новорождённых. У пациентов с иммунодефицитами инфекция вызывает менингит и энцефалит (воспаление головного мозга с нарушением сознания, головной болью, лихорадкой). Ранняя диагностика играет решающую роль в эффективности лечения. Избавиться от паразита при хронической инфекции очень трудно.

При инфицировании во время беременности риск передачи токсоплазмы плоду составляет 30-40 %. Заражение в ранние сроки приводит к выкидышу, мертворождению или серьезным неврологическим нарушениям у новорождённого. У большинства детей, инфицированных в поздние сроки беременности, симптомы токсоплазмоза проявляются только через несколько лет после рождения: потеря слуха, серьезные проблемы с глазами и неврологический дефицит.

Существует несколько способов выявления токсоплазмоза. Выбор методики и материала зависит от клинической картины заболевания. Чтобы обнаружить первичную или вторичную токсоплазменную инфекцию и определить ее активность, измеряют уровень антител IgМ и IgG в сыворотке (серологический метод) и распознают ДНК микроорганизма (ПЦР). Молекулярно-генетический метод обладает высокой чувствительностью и видоспецифичностью – при активной инфекции ДНК токсоплазм можно определить с большой точностью.

Присутствие ДНК т. гондии в крови и моче свидетельствует об активном инфекционном процессе.

Для чего используется исследование?

  • Чтобы определить активность токсоплазменной инфекции у беременных и у пациентов с иммунодефицитами.
  • Чтобы оценить риск заражения плода при беременности.
  • Для дифференциальной диагностики заболеваний, протекающих с лихорадкой, энцефалитом и поражением органов зрения.

Когда назначается исследование?

  • При подозрении на токсоплазмозменную инфекцию (симптомы: лихорадка, головная боль, неврологические нарушения, тяжелые инфекционные поражения органов зрения) или ее носительство и при наличии факторов риска заразиться токсоплазмозом.
  • При подозрении на токсоплазмоз у беременных и пациентов с патологией иммунной системы.
  • При планировании беременности в целях профилактики заражения плода.
  • При положительных результатах теста на антитела к токсоплазме.
  • При обследовании детей, родившихся от матерей с токсоплазмозом.

Что означают результаты?

Референсные значения: отрицательно.

Причины положительного результата

  • Активная форма токсоплазмоза – острая инфекция.

Причины отрицательного результата

  • Отсутствие токсоплазм в организме.
  • Латентная (неактивная) токсоплазменная инфекция – покоящиеся цисты в тканях.
  • Недостаточное количество ДНК микроорганизма в биоматериале.

Важные замечания

Для выявления первичного заражения или хронизации инфекционного процесса необходимо комплексное обследование с учетом уровня специфических IgG и IgM. Результаты ПЦР-диагностики являются основным критерием активности токсоплазменной инфекции, но не могут подтвердить отсутствие токсоплазм в организме.

Токсоплазмоз – паразитарное заболевание, вызываемое представителем простейших токсоплазмой гондии. Наибольшую опасность оно представляет для беременных женщин, так как может привести к аномалиям развития плода и даже к его смерти.

Синонимы русские

Антитела класса IgG к токсоплазме гондии.

Синонимы английские

Antitoxo-IgG, toxoplasma gondii Antibodies, IgG, toxoplasmosis antibodies, IgG.

Метод исследования

Твердофазный хемилюминесцентный иммуноферментный анализ ("сэндвич"-метод).

Единицы измерения

МЕ/мл (международная единица на миллилитр).

Какой биоматериал можно использовать для исследования?

Как правильно подготовиться к исследованию?

Не курить в течение 30 минут до исследования.

Общая информация об исследовании

Т. гондии – это микроскопический паразит, основным хозяином которого является кошка. Также он может быть обнаружен в почве.

У большинства здоровых людей данная инфекция не вызывает никаких проявлений или протекает в форме легких гриппоподобных заболеваний. У плода, заразившегося от матери, или у человека с ослабленной иммунной системой т. гондии может приводить к тяжелым осложнениям.

Т. гондии очень распространена. Она встречается во всем мире, а в некоторых странах инфицировано до 95 % населения. По данным ВОЗ, около 23 % людей старше 12 лет страдают токсоплазмозом. Заражение происходит при употреблении загрязненной пищи (особенно плохо приготовленного мяса) или воды, а также при уборке помета кошки, при передаче инфекции от матери к ребенку и в редких случаях во время трансплантации органов или переливания крови.

Окончательными хозяевами для т. гондии являются дикие и домашние кошки. После того как кошки заражаются, употребляя в пищу инфицированных птиц, грызунов или сырое мясо, т. гондии проходят половой цикл развития, приводящий к образованию яиц, заключенных в защитную оболочку (ооцисту). Во время активности возбудителя у кошки с фекалиями за несколько недель могут выделиться миллионы микроскопических ооцист. Они становятся заразными в течение двух дней и могут оставаться жизнеспособными несколько месяцев. Во всех других хозяевах, включая человека, т. гондии проходят только ограниченную часть своего жизненного цикла, а затем формируют неактивные кисты в мышцах, головном мозгу и глазах. Иммунная система хозяина защищает организм человека от дальнейшего заражения. Скрытый период может длиться в течение всей жизни хозяина, пока иммунитет не снизится.

Первичное или повторное заражение т. гондии приводит к выраженным симптомам заболевания у людей с ослабленной иммунной системой, например у больных ВИЧ/СПИДом, проходящих курсы химиотерапии, пациентов после трансплантации органов или принимающих иммунодепрессанты. Могут поражаться глаза и нервная система, что вызывает головные боли, судороги, спутанность сознания, лихорадку, энцефалит, потерю координации и затуманенность зрения.

Когда заражается беременная женщина, вероятность того, что инфекция передастся будущему ребенку, составляет 30-40 %. Причем, если инфицирование происходит в начале беременности, оно может вызывать выкидыши, мертворождения или приводить к серьезным осложнениям у новорождённых, в том числе умственной отсталости, судорогам, слепоте и увеличению печени или селезенки. Многие инфицированные дети, особенно те, кто заразился ближе к появлению на свет, рождаются здоровыми, но спустя несколько лет у них развиваются тяжелые инфекции глаз, потеря слуха и задержка умственного развития.

Когда происходит контакт человека с т. гондии, его иммунная система реагирует, вырабатывая антитела против паразита. В крови может быть обнаружено два вида антител к токсолплазме: IgM и IgG.

Антитела IgG вырабатываются организмом через несколько недель после первичного инфицирования, чтобы обеспечить долгосрочную защиту. Уровень IgG нарастает во время активности инфекции, а затем стабилизируется, как только заболевание проходит и паразит становится неактивным. Однажды столкнувшись с т. гондии, человек на протяжении всей жизни будет иметь некоторые измеряемые количества антител IgG в крови.

Данный тест может быть использован, наряду с анализом на IgM, чтобы помочь подтвердить наличие острого или прошедшего инфицирования токсоплазмой.

Для чего используется исследование?

  • Чтобы определить, была ли инфицированна т. гондии женщина, планирующая беременность, и есть ли у нее иммунитет к данной инфекции. Во время беременности исследование необходимо, если подозревается возможное заражение.
  • Для выявления инфекции у людей с ослабленным иммунитетом, у которых подозревается токсоплазмоз, или у тех, у кого есть его выраженные симптомы.

Когда назначается исследование?

  • При симптомах токсоплазмоза.
  • Если пациент контактировал с кошачьими экскрементами, сырым (плохо приготовленным) мясом или зараженной водой.
  • Если врач хочет определить, был ли у женщины ранее токсоплазмоз.
  • На этапе подготовки к беременности для определения напряженности иммунитета к данной инфекции.
  • При симптомах гриппоподобных заболеваний у людей с ослабленной иммунной системой.

Что означают результаты?

1 - 3 МЕ/мл (либо равно 3)

Причины положительного результата:

  • активизация скрытой инфекции и/или хронической инфекции,
  • текущая или ранее перенесенная инфекция.

Причины отрицательного результата:

  • отсутствие инфицирования возбудителем в прошлом – если нет симптомов токсоплазмоза.

При подозрении на заражение исследование рекомендуется повторить через 10-14 дней, так как при первичном инфицировании антитела могут просто не успеть выработаться иммунной системой.

Следует внимательно относиться к интерпретации результатов тестирования лиц с иммунодефицитом. В этом случае не всегда развивается сильный иммунный ответ к т. гондии – уровень IgM и IgG тогда окажется ниже, чем ожидалось, при наличии активной формы токсоплазмоза.

Обнаружение ДНК токсоплазмы в крови для диагностики токсоплазмоза.

Этот анализ принимается по сокращённому графику. Это связано с тем, что биоматериал должен попасть в лабораторию в очень короткий срок. Проверьте расписание сокращённого графика приёма на странице вашего отделения. При сдаче вне графика срок выполнения исследования может быть увеличен на 1-3 дня.

Приём и исследование биоматериала

Когда нужно сдавать анализ Токсоплазма, ДНК (Toxoplasma gondii, ПЦР) плазма, кач.?

  1. Подозрение на токсоплазмоз при наличии характерной клинической картины;
  2. Беременность;
  3. Планирование беременности;
  4. Обнаружение антител к Toxoplasma gondii.

Подробное описание исследования

Токсоплазмоз — это инфекция, вызываемая широко распространенным одноклеточным паразитом Toxoplasma gondii. Основным хозяином этого паразита служат представители кошачьих, в их кишечнике обитает и размножается взрослая особь. Яйца (ооцисты) токсоплазмы выделяются в окружающую среду с фекалиями.

Заражение Toxoplasma gondii происходит по одной из следующих причин:

  1. Употребление недостаточно термически обработанного мяса, зараженного паразитом, или моллюсков (устриц, мидий);
  2. Употребление продуктов, загрязненных при использовании ножей, разделочных досок;
  3. Употребление воды, содержащей токсоплазму;
  4. Попадание паразита на руки человека происходит при нарушении гигиены рук после контакта с фекалиями кошек, зараженных токсоплазмой, например, при очистке кошачьего туалета.
  5. Инфекция не проникает через неповрежденный кожный покров. Инфицирование происходит при попадании возбудителя через поврежденный кожный барьер (царапины, раны) и слизистые оболочки вместе со слюной, когда животное лижет хозяина, а также при поглаживании кошки, если она недавно вылизывалась.

Вероятны и другие способы заражения токсоплазмозом:

  1. Случайное проглатывание зараженной почвы с загрязненных рук после садовых работ или употребления немытых овощей, фруктов;
  2. Передача от матери к плоду внутриутробно;
  3. Трансплантация инфицированного органа;
  4. Переливание зараженной токсоплазмой крови.

Симптомы инфекции различны. Большинство людей, инфицированных Toxoplasma gondii, не имеют каких-либо жалоб. Иногда инфицирование токсоплазмозом сопровождается кратковременным ухудшением самочувствия, схожим с состоянием при ОРВИ или мононуклеозе, может отмечаться лихорадка, увеличение шейных лимфоузлов, печени.

В ряде случаев развивается тяжелый токсоплазмоз, вызывающий поражение глаз, головного мозга, других органов. Развитию тяжелого токсоплазмоза подвержены младенцы, рожденные от матерей, которые заразились Toxoplasma gondii во время или непосредственно перед беременностью; лица с тяжелым иммунодефицитом, то есть с ВИЧ-инфекцией в стадии СПИДа%; люди, получающие химиотерапию и перенесшие трансплантацию органов. У многих младенцев, зараженных еще в утробе матери, при рождении симптомы могут не проявляться, а развиться немного позже. У небольшого процента инфицированных при рождении возникают серьезные повреждения глаз, а также возможно поражение головного мозга. Ввиду опасности внутирутробного заражения ребенка, всем беременным женщинам необходимо обследование на выявление иммунитета к Toxoplasma gondii в первом триместре.

Выявление ДНК токсоплазмы важно при наличии антител к паразиту, при подозрении на активнуюинфекцию. Метод ПЦР позволяет быстро и точно выявить данного паразита в крови.

Читайте также: