Пцр днк токсоплазмоз не обнаружено
Обновлено: 22.04.2024
Метод ПЦР позволяет идентифицировать в биологическом материале искомый участок генетического материала и обнаружить единичные молекулы ДНК микроорганизма, не выявляемые другими методами. Принцип метода основан на многократном увеличении числа копий, специфичных для данного возбудителя участка ДНК.
С помощью ПЦР-анализа можно диагностировать инфекцию в остром периоде и выявлять случаи носительства.
Токсоплазмоз — это паразитарное заболевание, которое вызывается внутриклеточным паразитом Toxoplasma gondii (токсоплазмой гондии). Токсоплазмоз характеризуется поражением нервной системы, глаз, скелетной мускулатуры и мышцы сердца, а также увеличением лимфоузлов, печени и селезёнки. Склонно к хроническому течению.
Основные переносчики Toxoplasma gondii — домашние или дикие коты, которые заражаются при поедании инфицированных птиц, грызунов или контаминированного сырого мяса. Передача возбудителя может происходить при контактах с животными, а также при употреблении термически недостаточно обработанного мяса.
Токсоплазмозом заболевают лица любого возраста, однако наиболее часто — дети.
Клинические проявления токсоплазмоза
Клинические проявления токсоплазмоза: увеличение лимфатических узлов; мышечная боль, длящаяся в течение месяца или более; поражение глаз и нервной системы; лимфаденопатия, макулопапулёзная сыпь; увеличение печени, селезёнки. Могут развиться признаки энцефалита, менингоэнцефалита и миокардита.
Заболевание у взрослых обычно протекает бессимптомно.
Первичное или повторное заражение т. гондии приводит к выраженным симптомам заболевания у людей с ослабленной иммунной системой, например у больных ВИЧ/СПИДом, проходящих курсы химиотерапии, пациентов после трансплантации органов или принимающих иммунодепрессанты. Могут поражаться глаза и нервная система, что вызывает головные боли, судороги, спутанность сознания, лихорадку, энцефалит, потерю координации и затуманенность зрения.
Токсоплазмоз и беременность
Основную опасность токсоплазмоз представляет для беременных (первичная инфекция во время беременности связана с риском врождённого токсоплазмоза и нарушений развития плода), а также для пациентов с выраженным снижением иммунитета. Если инфицирование происходит в начале беременности, оно может вызывать выкидыши, мёртворождения или приводить к серьёзным осложнениям у новорождённых. Это связано с тем, что инфицированные дети имеют крайне тяжёлые осложнения: задержка умственного развития, судороги, слепоту, увеличение печени или селезёнки, гидроцефалия (водянка головного мозга), микроцефалия (уменьшенные размеры головного мозга). Если пренатальная инфекция протекает в тяжёлой форме, то возможны изменения во многих органах с последующей внутриматочной смертью плода. Многие инфицированные дети, особенно те, кто заразился ближе к появлению на свет, рождаются здоровыми, но спустя несколько лет у них развиваются тяжёлые инфекции глаз, потеря слуха и задержка умственного развития.
Конгенитальный токсоплазмоз, который передается плоду через плаценту встречается достаточно часто. Но нарушения, им порождаемые, во многом зависят от срока диагностики инфекции и даты начала лечения. К осложняющим факторам относятся неонатальная гипоксия (недостаток кислорода) и гипогликемия (снижение уровня глюкозы в крови), глубокие повреждения, повышение внутричерепного давления.
Когда заражается беременная женщина, вероятность того, что инфекция передастся будущему ребёнку, составляет 30–40 %.
- обследование до и во время беременности;
- ВИЧ-инфекция, иммунодефицитные состояния;
- гепатоспленомегалия неясной природы;
- лихорадка неясной природы;
- энцефалиты разной степени тяжести;
- хронические миозиты, лимфоаденопатии в стадии обострения;
- невынашивание беременности;
- присутствие в доме кошки.
Забор крови производится в соответствующую пробирку строго до метки.
Молекулярно-генетическое исследование, направленное на выявление активной токсоплазменной инфекции.
Синонимы русские
Токсоплазма гондии, возбудитель токсоплазмоза.
Синонимы английские
Toxoplasmosis, DNA, Toxoplasma gondii Molecular Detection by PCR, T. gondii quantitative real-time PCR.
Метод исследования
Полимеразная цепная реакция в режиме реального времени.
Какой биоматериал можно использовать для исследования?
Амниотическую жидкость, биоптат, венозную кровь, капиллярную кровь, ликвор.
Как правильно подготовиться к исследованию?
- Не курить в течение 30 минут до исследования.
Общая информация об исследовании
Токсоплазма гондии – это одноклеточный паразитарный микроорганизм, который обнаруживается в земле и в организме некоторых животных и способен вызывать инфекционное заболевание токсоплазмоз.
Токсоплазма очень распространена во всем мире. Инфицированность населения в некоторых странах составляет 95 %. Данный паразит способен поражать млекопитающих, грызунов и птиц. Это одна из так называемых TORCH-инфекций (перевод первых букв латинских названий токсоплазмы, краснухи, цитомегаловируса, герпеса), являющихся опасными для плода.
Путь инфицирования токсоплазмами обычно пероральный. Микроорганизм попадает в организм человека с водой и едой, зараженной паразитами, особенно с сырым или недостаточно термически обработанным мясом. Так как частым переносчиком инфекции являются кошки, заражение возможно при уборке кошачьего туалета инфицированного животного и несоблюдении личной гигиены. Вероятен трансплацентарный путь передачи инфекции – от матери к ребенку. Человек также может заразиться при переливании крови и пересадке донорских органов.
Жизненный цикл микроорганизма проходит со сменой хозяев. Домашний кот, как окончательный хозяин, заражается при поедании грызунов и птиц. В кишечнике котов токсоплазма делится и формирует ооцисты. При активной инфекции миллионы микроскопических ооцист в течение нескольких недель выделяются с кошачьими экскрементами. Ооцисты становятся заразными через 2-3 дня и сохраняют жизнеспособность несколько месяцев. В организме других хозяев, в том числе и людей, токсоплазмы проходят ограниченный период жизненного цикла и формируют неактивные цисты в мышцах, головном мозге и глазах. Иммунная система хозяина способна сохранять цисты в покоящемся состоянии и защищать организм от развития инфекции. Стадия покоя может длиться всю жизнь, пока не возникнет иммунодефицит. У большинства здоровых людей попадание токсоплазмы в их организм может пройти бессимптомно или под видом легкой простуды. Токсоплазменная инфекция играет роль в развитии таких психических заболеваний, как шизофрения, психозы. При токсоплазменном поражении органов зрения возникает хориоретинит.
Впервые возникшая или реактивированная токсоплазменная инфекция может протекать тяжело и вызывать осложнения у пациентов с ослабленной иммунной системой: пациентов с ВИЧ, первичными иммунодефицитами, больных, получающих химиотерапию или иммуносупрессивную терапию после трансплантации органов.
Признаки токсоплазмоза: длительная лихорадка, головная боль, увеличение лимфатических узлов, боль в мышцах, увеличение печени, гепатиты. Внутриутробное инфицирование приводит к слепоте, энцефаломиелиту, задержке роста и даже к гибели новорождённых. У пациентов с иммунодефицитами инфекция вызывает менингит и энцефалит (воспаление головного мозга с нарушением сознания, головной болью, лихорадкой). Ранняя диагностика играет решающую роль в эффективности лечения. Избавиться от паразита при хронической инфекции очень трудно.
При инфицировании во время беременности риск передачи токсоплазмы плоду составляет 30-40 %. Заражение в ранние сроки приводит к выкидышу, мертворождению или серьезным неврологическим нарушениям у новорождённого. У большинства детей, инфицированных в поздние сроки беременности, симптомы токсоплазмоза проявляются только через несколько лет после рождения: потеря слуха, серьезные проблемы с глазами и неврологический дефицит.
Существует несколько способов выявления токсоплазмоза. Выбор методики и материала зависит от клинической картины заболевания. Чтобы обнаружить первичную или вторичную токсоплазменную инфекцию и определить ее активность, измеряют уровень антител IgМ и IgG в сыворотке (серологический метод) и распознают ДНК микроорганизма (ПЦР). Молекулярно-генетический метод обладает высокой чувствительностью и видоспецифичностью – при активной инфекции ДНК токсоплазм можно определить с большой точностью.
Присутствие ДНК т. гондии в крови и моче свидетельствует об активном инфекционном процессе.
Для чего используется исследование?
- Чтобы определить активность токсоплазменной инфекции у беременных и у пациентов с иммунодефицитами.
- Чтобы оценить риск заражения плода при беременности.
- Для дифференциальной диагностики заболеваний, протекающих с лихорадкой, энцефалитом и поражением органов зрения.
Когда назначается исследование?
- При подозрении на токсоплазмозменную инфекцию (симптомы: лихорадка, головная боль, неврологические нарушения, тяжелые инфекционные поражения органов зрения) или ее носительство и при наличии факторов риска заразиться токсоплазмозом.
- При подозрении на токсоплазмоз у беременных и пациентов с патологией иммунной системы.
- При планировании беременности в целях профилактики заражения плода.
- При положительных результатах теста на антитела к токсоплазме.
- При обследовании детей, родившихся от матерей с токсоплазмозом.
Что означают результаты?
Референсные значения: отрицательно.
Причины положительного результата
- Активная форма токсоплазмоза – острая инфекция.
Причины отрицательного результата
- Отсутствие токсоплазм в организме.
- Латентная (неактивная) токсоплазменная инфекция – покоящиеся цисты в тканях.
- Недостаточное количество ДНК микроорганизма в биоматериале.
Важные замечания
Для выявления первичного заражения или хронизации инфекционного процесса необходимо комплексное обследование с учетом уровня специфических IgG и IgM. Результаты ПЦР-диагностики являются основным критерием активности токсоплазменной инфекции, но не могут подтвердить отсутствие токсоплазм в организме.
Токсоплазмоз – паразитарное заболевание, вызываемое представителем простейших токсоплазмой гондии. Наибольшую опасность оно представляет для беременных женщин, так как может привести к аномалиям развития плода и даже к его смерти.
Синонимы русские
Антитела класса IgG к токсоплазме гондии.
Синонимы английские
Antitoxo-IgG, toxoplasma gondii Antibodies, IgG, toxoplasmosis antibodies, IgG.
Метод исследования
Твердофазный хемилюминесцентный иммуноферментный анализ ("сэндвич"-метод).
Единицы измерения
МЕ/мл (международная единица на миллилитр).
Какой биоматериал можно использовать для исследования?
Как правильно подготовиться к исследованию?
Не курить в течение 30 минут до исследования.
Общая информация об исследовании
Т. гондии – это микроскопический паразит, основным хозяином которого является кошка. Также он может быть обнаружен в почве.
У большинства здоровых людей данная инфекция не вызывает никаких проявлений или протекает в форме легких гриппоподобных заболеваний. У плода, заразившегося от матери, или у человека с ослабленной иммунной системой т. гондии может приводить к тяжелым осложнениям.
Т. гондии очень распространена. Она встречается во всем мире, а в некоторых странах инфицировано до 95 % населения. По данным ВОЗ, около 23 % людей старше 12 лет страдают токсоплазмозом. Заражение происходит при употреблении загрязненной пищи (особенно плохо приготовленного мяса) или воды, а также при уборке помета кошки, при передаче инфекции от матери к ребенку и в редких случаях во время трансплантации органов или переливания крови.
Окончательными хозяевами для т. гондии являются дикие и домашние кошки. После того как кошки заражаются, употребляя в пищу инфицированных птиц, грызунов или сырое мясо, т. гондии проходят половой цикл развития, приводящий к образованию яиц, заключенных в защитную оболочку (ооцисту). Во время активности возбудителя у кошки с фекалиями за несколько недель могут выделиться миллионы микроскопических ооцист. Они становятся заразными в течение двух дней и могут оставаться жизнеспособными несколько месяцев. Во всех других хозяевах, включая человека, т. гондии проходят только ограниченную часть своего жизненного цикла, а затем формируют неактивные кисты в мышцах, головном мозгу и глазах. Иммунная система хозяина защищает организм человека от дальнейшего заражения. Скрытый период может длиться в течение всей жизни хозяина, пока иммунитет не снизится.
Первичное или повторное заражение т. гондии приводит к выраженным симптомам заболевания у людей с ослабленной иммунной системой, например у больных ВИЧ/СПИДом, проходящих курсы химиотерапии, пациентов после трансплантации органов или принимающих иммунодепрессанты. Могут поражаться глаза и нервная система, что вызывает головные боли, судороги, спутанность сознания, лихорадку, энцефалит, потерю координации и затуманенность зрения.
Когда заражается беременная женщина, вероятность того, что инфекция передастся будущему ребенку, составляет 30-40 %. Причем, если инфицирование происходит в начале беременности, оно может вызывать выкидыши, мертворождения или приводить к серьезным осложнениям у новорождённых, в том числе умственной отсталости, судорогам, слепоте и увеличению печени или селезенки. Многие инфицированные дети, особенно те, кто заразился ближе к появлению на свет, рождаются здоровыми, но спустя несколько лет у них развиваются тяжелые инфекции глаз, потеря слуха и задержка умственного развития.
Когда происходит контакт человека с т. гондии, его иммунная система реагирует, вырабатывая антитела против паразита. В крови может быть обнаружено два вида антител к токсолплазме: IgM и IgG.
Антитела IgG вырабатываются организмом через несколько недель после первичного инфицирования, чтобы обеспечить долгосрочную защиту. Уровень IgG нарастает во время активности инфекции, а затем стабилизируется, как только заболевание проходит и паразит становится неактивным. Однажды столкнувшись с т. гондии, человек на протяжении всей жизни будет иметь некоторые измеряемые количества антител IgG в крови.
Данный тест может быть использован, наряду с анализом на IgM, чтобы помочь подтвердить наличие острого или прошедшего инфицирования токсоплазмой.
Для чего используется исследование?
- Чтобы определить, была ли инфицированна т. гондии женщина, планирующая беременность, и есть ли у нее иммунитет к данной инфекции. Во время беременности исследование необходимо, если подозревается возможное заражение.
- Для выявления инфекции у людей с ослабленным иммунитетом, у которых подозревается токсоплазмоз, или у тех, у кого есть его выраженные симптомы.
Когда назначается исследование?
- При симптомах токсоплазмоза.
- Если пациент контактировал с кошачьими экскрементами, сырым (плохо приготовленным) мясом или зараженной водой.
- Если врач хочет определить, был ли у женщины ранее токсоплазмоз.
- На этапе подготовки к беременности для определения напряженности иммунитета к данной инфекции.
- При симптомах гриппоподобных заболеваний у людей с ослабленной иммунной системой.
Что означают результаты?
1 - 3 МЕ/мл (либо равно 3)
Причины положительного результата:
- активизация скрытой инфекции и/или хронической инфекции,
- текущая или ранее перенесенная инфекция.
Причины отрицательного результата:
- отсутствие инфицирования возбудителем в прошлом – если нет симптомов токсоплазмоза.
При подозрении на заражение исследование рекомендуется повторить через 10-14 дней, так как при первичном инфицировании антитела могут просто не успеть выработаться иммунной системой.
Следует внимательно относиться к интерпретации результатов тестирования лиц с иммунодефицитом. В этом случае не всегда развивается сильный иммунный ответ к т. гондии – уровень IgM и IgG тогда окажется ниже, чем ожидалось, при наличии активной формы токсоплазмоза.
Обнаружение ДНК токсоплазмы в крови для диагностики токсоплазмоза.
Этот анализ принимается по сокращённому графику. Это связано с тем, что биоматериал должен попасть в лабораторию в очень короткий срок. Проверьте расписание сокращённого графика приёма на странице вашего отделения. При сдаче вне графика срок выполнения исследования может быть увеличен на 1-3 дня.
Приём и исследование биоматериала
Когда нужно сдавать анализ Токсоплазма, ДНК (Toxoplasma gondii, ПЦР) плазма, кач.?
- Подозрение на токсоплазмоз при наличии характерной клинической картины;
- Беременность;
- Планирование беременности;
- Обнаружение антител к Toxoplasma gondii.
Подробное описание исследования
Токсоплазмоз — это инфекция, вызываемая широко распространенным одноклеточным паразитом Toxoplasma gondii. Основным хозяином этого паразита служат представители кошачьих, в их кишечнике обитает и размножается взрослая особь. Яйца (ооцисты) токсоплазмы выделяются в окружающую среду с фекалиями.
Заражение Toxoplasma gondii происходит по одной из следующих причин:
- Употребление недостаточно термически обработанного мяса, зараженного паразитом, или моллюсков (устриц, мидий);
- Употребление продуктов, загрязненных при использовании ножей, разделочных досок;
- Употребление воды, содержащей токсоплазму;
- Попадание паразита на руки человека происходит при нарушении гигиены рук после контакта с фекалиями кошек, зараженных токсоплазмой, например, при очистке кошачьего туалета.
- Инфекция не проникает через неповрежденный кожный покров. Инфицирование происходит при попадании возбудителя через поврежденный кожный барьер (царапины, раны) и слизистые оболочки вместе со слюной, когда животное лижет хозяина, а также при поглаживании кошки, если она недавно вылизывалась.
Вероятны и другие способы заражения токсоплазмозом:
- Случайное проглатывание зараженной почвы с загрязненных рук после садовых работ или употребления немытых овощей, фруктов;
- Передача от матери к плоду внутриутробно;
- Трансплантация инфицированного органа;
- Переливание зараженной токсоплазмой крови.
Симптомы инфекции различны. Большинство людей, инфицированных Toxoplasma gondii, не имеют каких-либо жалоб. Иногда инфицирование токсоплазмозом сопровождается кратковременным ухудшением самочувствия, схожим с состоянием при ОРВИ или мононуклеозе, может отмечаться лихорадка, увеличение шейных лимфоузлов, печени.
В ряде случаев развивается тяжелый токсоплазмоз, вызывающий поражение глаз, головного мозга, других органов. Развитию тяжелого токсоплазмоза подвержены младенцы, рожденные от матерей, которые заразились Toxoplasma gondii во время или непосредственно перед беременностью; лица с тяжелым иммунодефицитом, то есть с ВИЧ-инфекцией в стадии СПИДа%; люди, получающие химиотерапию и перенесшие трансплантацию органов. У многих младенцев, зараженных еще в утробе матери, при рождении симптомы могут не проявляться, а развиться немного позже. У небольшого процента инфицированных при рождении возникают серьезные повреждения глаз, а также возможно поражение головного мозга. Ввиду опасности внутирутробного заражения ребенка, всем беременным женщинам необходимо обследование на выявление иммунитета к Toxoplasma gondii в первом триместре.
Выявление ДНК токсоплазмы важно при наличии антител к паразиту, при подозрении на активнуюинфекцию. Метод ПЦР позволяет быстро и точно выявить данного паразита в крови.
Читайте также: