Пцр моча иппп инфекции точен или нет при хронических заболеваниях

Обновлено: 19.04.2024

Выявление ДНК вируса простого герпеса 1, 2-го типов в моче используется для подтверждения инфицированности и оценки активности инфекционного процесса, в том числе у беременных и новорожденных.

Выявление ДНК Neisseria gonorrhoeae в моче используется для подтверждения инфицированности при наличии клинических проявлений воспаления урогенитального тракта (в основном у мужчин), для дифференциации гоноккового и негонококкового уретрита, для контроля эффективности антибактериальной терапии.

Выявление ДНК Mycoplasma hominis в моче используется для подтверждения инфицированности при наличии клинических проявлений в нижних отделах мочеполового тракта (цистит, уретрит). Может выявляться у клинически здоровых лиц.

Выявление ДНК Mycoplasma genitalium в моче используется для подтверждения инфицированности при наличии клинических проявлений уретрита, для дифференциальной диагностики урогенитальных инфекций.

Выявление ДНК Ureaplasma urealyticum + parvum в моче используется для подтверждения инфицированности при наличии характерных признаков воспаления мочеполовой системы, при стертой картине воспаления, при планировании беременности, бесплодии. Может выявляться у клинически здоровых лиц.

Выявление ДНК хламидий в моче используется для подтверждения инфицированности (в основном у мужчин) при наличии клинических проявлений воспаления урогенитального тракта, для контроля эффективности антибактериальной терапии.

Выявление ДНК Trichomonas vaginalis в моче используется для подтверждения инфицированности при наличии клинических проявлений трихомониаза (в основном у мужчин), для дифференциальной диагностики урогенитальных инфекций.

скрининговое (первичное) обследование целевых групп взрослого населения при отсутствии симптомов или при наличии незначительных проявлений;
интенсивный воспалительный процесс в уретре, препятствующий взятию урогенитального мазка;
оценка микрофлоры урогенитального тракта.

Инфекции, передаваемые половым путем (ИППП), относятся к самым распространенным. В большинстве случаев эти инфекции протекают бессимптомно, особенно на ранних стадиях, или имеют легкую симптоматику. Без проведения лабораторного исследования определить возбудителя воспалительного процесса сложно, поскольку проявления ИППП очень схожи.

По данным многочисленных международных исследований, наиболее чувствительным и специфичным методом лабораторной диагностики ИППП является метод полимеразной цепной реакции с детекцией в режиме реального времени (ПЦР-РВ).

Предпочтительным биоматериалом для выявления распространенных возбудителей ИППП (Chlamydia trachomatis, Mycoplasma hominis, Neisseria gonorrhoeae, Trichomonas vaginalis, Mycoplasma genitalium, Ureaplasma urealyticum, Ureaplasma parvum, Herpes simplex virus I, II) является первая утренняя порция мочи, что особенно удобно при обследовании мужчин.

Преимущества использования первой утренней порции мочи для анализа по сравнению с урогенитальным мазком у мужчин:

небольшое количество биоматериала, необходимого для исследования. Для анализа достаточно 5-8 мл первой утренней мочи, собранной в стерильный пластиковый контейнер рано утром, не ранее 5-6 часов после предыдущего мочеиспускания;
образец мочи собирается самостоятельно без участия медицинского персонала;
взятие пробы мочи не вызывает последующих неприятных и болезненных ощущений при мочеиспускании;
чувствительность ПЦР-исследования первой утренней порции мочи не уступает аналогичному исследованию урогенитального мазка, секрета простаты и эякулята.

Благодаря простой методике применение метода ПЦР для исследования образца первой утренней порции мочи можно использовать для выявления ИППП как у лиц с симптомами, так и у лиц без симптомов.

Женщинам желательно закладывать гигиенический тампон во влагалище перед сбором биоматериала для предупреждения контаминации мочи отделяемым влагалища.

Контейнер для сбора мочи следует заполнить до метки 5 мл.
Важно собрать мочу, выпущенную вначале, не допуская разбавления последующими порциями.
Если материал набран немного выше метки 5 мл, отливать лишнюю мочу не нужно.
Плотно закрыть контейнер крышкой для предотвращения вытекания мочи.

Сколько времени и в каких условиях можно хранить и транспортировать пробу от момента сбора до момента доставки в медицинский офис

До отправки биоматериал может храниться при комнатной температуре. Материал должен быть доставлен в медицинский офис как можно быстрее в течение нескольких часов. Допускается хранение биоматериала при температуре +2…+25°С не более 6 часов.

К этим недугам относятся заболевания передаваемые половым путем ЗППП (ИППП), бытовым способом или при родах. Особенности таких болезней — длительное бессимптомное протекание и тяжелые осложнения, приводящие к бесплодию, проблемам в интимных отношениях, патологиям у новорожденных. Лечение инфекций, передающихся половым путем, в отличие от инфекционных заболеваний по типу ОРЗ и т.д., всегда сложное и комплексное.

Прием гинеколога, уролога — 1500 — 1700 руб. Консультация по результатам УЗИ, анализов (по желанию) — 500 руб.

Инфекционные заболевания могут нанести серьезный вред половому и репродуктивному здоровью человека вплоть до развития новообразований, бесплодия, удаления полых органов. Именно поэтому нельзя халатно относиться к своему здоровью, а в качестве профилактики следует регулярно сдавать анализы.

Для постановки достоверного диагноза и выявления конкретного возбудителя половой инфекции в медицине, в том числе и в современной клинике Диана применяет лабораторный метод диагностики.

Особенности протекания и диагностики венерических инфекций в наши дни

Если верить старой поговорке, все ИППП происходят от удовольствия. Но, на самом деле, к удовольствию даже сам процесс сексуальных отношений с человеком, от которого можно подхватить половую инфекцию, нельзя. Ещё меньше удовольствия доставляют очень неприятные анализы — мазки из уретры , которые нужно сдавать при подозрении на инфицирование, и сами симптомы ИППП. Зараженного ждут боль, зуд, резь, кожные высыпания, выделения и отвратительный запах из половых органов.

Заражение современными ЗППП стоит не только нервов, но и здоровья а, иногда, и жизни. Поэтому в наши дни так важны диагностика, лечение и профилактика вензаболеваний.

Следствием сексуальной революции, стало резкое увеличение количества половых инфекций. Задумайтесь. По данным ВОЗ ежедневно более миллиона человек заболевают венерическими болезнями.

За последние годы к классическим гонорее, сифилису и трихомонозу добавились уреаплазмоз , гарднереллез , хламидиоз . Появились ВИЧ и ВПЧ (вирус папилломы), приводящие к смерти больных от рака или иммунодефицита. Сейчас в мире насчитываться 290 млн. больных ВПЧ и 35 млн больных ВИЧ. Ежегодно СПИД уносит около 2 млн жизней, а рак половой сферы , вызванный ВПЧ — 7 млн. чел.

Классы половых заболеваний

Все половые инфекции можно разделить на несколько классов по типу возбудителя:

Микробные (бактериальные) , вызываемые микробами. К ним относят гонорею, хламидиоз, сифилис, уреаплазмоз.
Вирусные — ВИЧ, ВПЧ, генитальный герпес. Отличительная черта вирусных болезней — длительный инкубационный период. С момента инфицирования до появления признаков заболевания проходит несколько месяцев, а то и лет. Поэтому источник заражения при вирусных половых инфекциях определить сложно;
Паразитарные — трихомоноз. Это самое распространенное венерическое заболевание, вызываемые влагалищной трихомонадой

Инфекции, не относящиеся к венерическим, но паразитирующие в половой системе

Эти болезни не относятся к ИППП, но их возбудители приводят к проблемам в половых путях:

Гарднереллез, вызываемый микробом гарднереллой, размножающейся при нарушениях влагалищной флоры. Болезнь сопровождается выделениями из половых путей с запахом тухлой рыбы. Гарднереллезом болеют только женщины, но у мужчин со сниженным иммунитетом микробы, попавшие во время коитуса, вызывают уретрит и цистит.

Механизм передачи венерических и бытовых болезней

Как следует из названия, основной путь передачи инфекций — половой. Но люди заражаются и при бытовых контактах, купании на пляже, посещении общественных бань, бассейнов, пользовании общей ванной, чужими полотенцами и постельным бельем. Поэтому пик заболеваемости ЗППП приходится на лето.

И дело тут не только в курортных романах, хотя незащищенный секс на отдыхе — обычное дело. Люди едут в отпуск, ночуют в поездах и гостиницах, моются в съемных квартирах, загорают на грязном пляже. Результат — заражение ЗППП.

Второй пик заболеваемости приходится на новогодний период, когда люди отмечают праздники, не думая о защите от ИППП и улетают на заграничные курорты, вступая в контакт с заграничными красотками и мачо. Из отпуска они привозят не только впечатления, но и инфекции. Особенно опасны тропические венерические болезни, поражающие половую систему и весь организм. Это шанкроид, паховый лимфогранулематоз и другая экзотика.

Половые инфекции передаются и через кровь. Причем болеют ими не только наркоманы и проститутки. Половыми болезнями заражаются и обычные люди, подхватившие болезнь в маникюрном, тату -салоне или на врачебном приеме.

Венерическими болезнями заражаются даже дети. Передача возбудителя от матери ребенку происходит внутриутробно, во время родов или в быту. Поэтому даже отсутствие незащищенных половых актов снижает частоту заболеваемости, но не гарантирует полную защиту. Даже при отсутствии дискомфорта в интимной зоне нужно периодически посещать врача и обследоваться на скрытые инфекции .

Какие симптомы должны насторожить: ИППП — это неприятно!

Вот лишь некоторые из признаков, при которых нужно немедленно обратиться к гинекологу или урологу для лечения инфекций .

Увеличение паховых лимфоузлов и повышение температуры — неблагоприятные признаки, указывающие на распространение и агрессивность инфекции.

Как проявляются наиболее распространенные половые инфекции

Каждое заболевание проявляется по-разному:

Гонорея

Гонорейная инфекция дает первые симптомы уже через 3-4 дня после инфицирования. У мужчин наблюдаются боль и затруднения при мочеиспускании, выделение гноя из уретры. Иногда повышается температура и воспаляются лимфоузлы в паху.

Инфекция часто поражает весь половой аппарат. Воспаляются органы мошонки, головка члена, предстательная железа. Проявления болезни у женщин часто смазаны. Симптомы ограничиваются подострым уретритом и незначительным поражением слизистой влагалища с появлением гнойных выделений. Поэтому дамы очень часто не знают о болезни и заражают партнеров.

Трихомоноз

Трихомониаз проявляется через 2-3 нед. Особенность инфекции — частое скрытое течение. Люди, не зная что заразны, передают ИППП партнерам, поэтому трихомонозом страдает более около 10% населения Земли. У женщин наблюдаются зуд и жжение вульвы и влагалища, дискомфорт при половом акте и обильные пенистые выделения с неприятным запахом. У мужчин болезнь часто протекает бессимптомно или ограничивается подострым уретритом.

Хламидиоз

Возникает через 10-14 дней после попадания возбудителя. У женщин появляются желтоватые выделения из половых путей с гнойным запахом, резь при мочеиспускании, боль при половом акте. Мужчин беспокоят боль в уретре и выделения, раздражающие слизистую головки. Болезненность в пояснице свидетельствует о переходе инфекции на почки.

Сифилис

Имеет несколько стадий развития. Вначале на месте внедрения инфекции появляется безболезненная язвочка ( шанкр) с плотным дном. Вскоре она заживает и возникает следующий период болезни, сопровождающихся различными типами сыпи.

Уреаплазмоз

У женщин проявляется светлыми обильными выделениями, раздражающими слизистую половых органов и неприятными ощущениями внизу живота.. У мужчин наблюдаются подострый уретрит и незначительная боль при мочеиспускании.

Генитальный герпес, ВПЧ

Папиллломавирус (ВПЧ) проявляется остроконечными кондиломами — бородавчатыми наростами в паховой области. Очаги высыпания разрастаются, превращаясь в крупные очаги, мешающие работе мочеполовых органов. Кондиломы высыпают не только снаружи, но и на шейке матки и даже в прямой кишке.

Методы диагностики

Сбор анамнеза . Врач расспрашивает о незащищенных половых связях, возможных бытовых контактах с незнакомыми людьми. Больные, утаивающие неприятные подробности, вредят себе, поскольку мешают врачу поставить правильный диагноз.

Осмотр . Врач выясняет, нет ли у больного подозрительных высыпаний и язвочек на половых органах и теле, патологических выделений из уретры и влагалища.

Анализ крови из вены позволяет обнаружить сифилис и СПИД. Метод не всегда точен. Инфекции, имеющие длительный инкубационный период, обнаружить с его помощью сложно.

Культуральный метод

Это посев мазков на питательные среды, благоприятные для развития микробных колоний. Через несколько дней становится ясно, какие микроорганизмы присутствуют в мазке. Поскольку не все возбудители растут на питательных средах, анализ бывает неточным. Другой его недостаток- длительность проведения.

Существуют методы диагностики ЗППП, выявляющие даже скрытые формы болезней и вирусные инфекции. Для их проведения у пациента берутся кровь, моча, мазок изо рта, заднего прохода и мочеполовых органов.

ПЦР-методика

ИФА-иммуноферментный анализ

ИФА-иммуноферментный анализ иммуноглобулинов IgM, IgG, IgA, показывает не возбудителей ЗППП, а иммунный ответ на их проникновение. Анализ иммуноглобулинов выявляет имеющиеся и перенесенные инфекции.

Вид иммуноглобулина

Спустя длительное время после выздоровления

Обострение хронической инфекции

К сожалению, антитела к некоторым болезням имеют схожую структуру, поэтому анализ может давать ложноположительный результат. Поэтому ИФА применяют вместе с другими методиками.

Реакция иммунофлуоресценции (РИФ, метод Кунса) основана на свечении в лучах УФ-микроскопа комплексов микроб-антиген-антитело или самих микроорганизмов. Для этого образцы анализов наносятся на предметное стекло, подсушиваются и обрабатываются сывороткой с флюорохромом. Вокруг возбудителей образуется зеленоватая или красноватая светящаяся каемка.

Интенсивность люминесцентного свечения оценивается в плюсах (крестах). Чем тем сильнее заражение, тем больше крестов.

При обнаружении ЗППП нужно обследовать полового партнера, чтобы не допустить реинфекции после излечения.

Лечение инфекций — половых (ЗППП) и передающихся при родах

Выявленные заболевания лечат противомикробными, противопаразитарными и противовирусными средствами. Одновременно проводят лечение полового партнера.

После приема лекарств проводят поворотное трехкратное обследование на ЗППП, чтобы убедится в отсутствии других вензаболеваний и определить полноту излечения. Иногда при заражении несколькими инфекциями приходится проводить ни один курс лечения.

Особенно важно тщательное повторное обследование после перенесенного трихомоноза. Эти простейшие скрывают внутри себя других возбудителей ИППП. Поэтому на фоне приема противопротозойных препаратов у больного могут выявиться гонококки или хламидии, выпавшие из уничтоженных простейших.

Что будет если не лечить половые инфекции: осложнения по каждому заболеванию

Нелеченные половые инфекции приводят к опасным последствиям и осложнениям:

Уреаплазмоз у мужчин вызывает снижение активности сперматозоидов и сужение мочеиспускательного канала. У женщин уреаплазма снижает вероятность наступления беременности и влияет на ее течение, вызывая нарушение плацентарного кровотока, приводящее к выкидышам.

Папилломавирусная инфекция (ВПЧ) из-за разрастания кондилом мешает половой жизни и нормальному протеканию родов. Вирус провоцирует рак матки, вульвы, пениса и прямой кишки.

Генитальный герпес опасен присоединением вторичной инфекции и нагноением язвочек. На ранних сроках беременности возбудитель провоцирует выкидыши, а поздних — заражает малыша. Чтобы ребенок не проходил в родах через инфицированные родовые пути, женщине делают кесарево сечение.

Гонорея поражает мочеполовую систему суставы, глаза и другие органы, вызывает заражение крови и менингит. У женщин возникает бесплодие и непроходимость яйцеводов, приводящая к внематочной беременности. У мужчин болезнь снижает жизнеспособность спермиев и нарушает потенцию . Возбудитель заражает новорожденных в родах. У малышей развивается воспаление глаз (гонобленнорея), приводящее к слепоте.

Хламидиоз вызывает мужское и женское бесплодие . Попадание возбудителя в прямую кишку ведет к проктиту. Дефекация становится болезненной, а в кале появляются кровь и гной. Хламидии искажают работу иммунной системы приводя к артритам и конъюнктивитам, вызванными патологическими иммунными реакциями. При заражении в родах у новорожденных развиваются пневмония и воспаление глаз.

Трихомоноз приводит к бесплодию, хроническому простатиту и уретриту, сужению мочеиспускательного канала. Существует теория, что эти простейшие провоцируют развитие рака. У инфицированных новорожденных девочек появляется воспаление вульвы.

Своевременное лечение ЗППП убережет от множества опасных последствий не только взрослых, но и их еще не родившихся детей.

Лабораторная диагностика – первый шаг на пути эффективной терапии инфекций, передающихся половых путем. В медицинском центре Диана пациенты могут сдать анализы на выявление ДНК самых распространенных возбудителей половых болезней: гонококки, трихомонады, хламидии, уреаплазма и т. д. Лабораторный метод диагностирования в нашей клинике включает несколько этапов:

Взятие и исследование биологического материала из уретры, влагалища, мочеиспускательного и цервикального каналов (моча, мазки, соскобы клеток эпителия);
Взятие крови из вены более эффективен при мониторинге терапии того или иного заболевания. Что касается постановки диагноза, то данный анализ менее информативен, поскольку формирование антител к конкретной инфекции в крови может начаться через недели и месяцы, а в случае со СПИДом вообще через полгода;
Бактериальный посев – достаточно длительный, однако очень информативный способ лабораторного исследования. Биологический материал, взятый из половых органов, переносится на благоприятную для инфекции среду, в результате чего возбудитель начинает размножаться. Это позволяет определить конкретный вид инфекции и методику ее лечения;
ДНК-диагностика осуществляется методом цепной полимеразной реакции, которая позволяет выявить наличие конкретного вида инфекционного микроорганизма. Метод ЦПР на сегодняшний день в медицине считается наиболее достоверным, а диагноз, поставленный без учета результатов данного теста, может быть подвергнут сомнению.

Лабораторные исследования в медицинском центре Диана проводятся на новейшем оборудовании с использованием реагентов последнего поколения.

Кроме определения конкретного вида половой инфекции, наши лаборанты также выявляют наличие аллергии и противопоказаний к приему различных лекарств, которые применяются для лечения вензаболеваний. Такой подход позволяет составить максимально эффективную и безопасную схему лечения ИППП.

Анонимное лечение ИППП в СПБ в клинике Диана

Диагностику и лечение половых заболеваний в Санкт-Петербурге в нашей клинике осуществляют урологи, инфекционисты и гинекологи высочайшего класса. Наши профессионалы обеспечат весь комплекс медицинских услуг:

проведут медицинский осмотр половых органов;
назначат необходимые анализы;
осуществят детальную расшифровку лабораторных исследований;
разработают эффективную схему лечения, выбирая препараты с учетом физиологических особенностей пациента.

Кроме того, медицинское сопровождение врача осуществляется на протяжении всего курса лечения вплоть до сдачи контрольных анализов и подтверждения успешности терапии. Лечение половых инфекций у пациента мы осуществляем одновременно с обследованием его полового партнера.

Только комплексный подход — точное определение возбудителя, правильный выбор фармакологической группы препарата, обоюдное лечение – позволяет провести качественную и эффективную терапию инфекций, передающихся половым путем.

Полимеразная цепная реакция (ПЦР) – это современный инструмент диагностики разнообразных инфекций, отличающийся высокой точностью. Анализ ПЦР позволяет определять возбудителей инфекционных заболеваний, опираясь на их генетический материал (РНК или ДНК). Биологическим материалом для исследования может служить кровь, мазок из половых органов, слюна и прочее.

Метод ПЦР был открыт в 1983. Его создатель Кэри Мюллис (США), за это открытие получил Нобелевскую премию в области химии. Уже за первые десять лет методика стала обязательным лабораторным исследованием во всем мире, получив признание ученых и врачей.

Медицинский центр Диана предлагает провести исследование по методике полимеразной цепной реакции в кратчайшие сроки и с высочайшим уровнем точности. Наша диагностическая база соответствует всем международным стандартам и требованиям.

Какие инфекции можно диагностировать методом ПЦР

На диагностику отправляют гинеколог, уролог или дерматолог. Анализ ПЦР дает возможность диагностировать большое число разнообразных инфекций. В эту группу попадают и скрытые, бессимптомные заболевания, находящиеся в инкубационном периоде:

С помощью метода ПЦР можно обнаружить:

гепатит C, B;
уреаплазмоз половых органов;
ИППП – уреаплазмоз, трихомониаз, гарднереллез,;
хламидиоз половых органов и дыхательных путей;
микоплазмоз половых органов и дыхательных путей;
бактериальный вагиноз;
кандидоз половых органов;
инфекционный мононуклеоз;
туберкулез;
сальмонеллез;
туберкулез (легочные и внелегочные формы);
листериоз, клещевые энцефалиты, болезнь Лайма;
цитомегаловирусную, папилломавирусную, герпесную инфекцию;
детские заразные болезни, выявляемые при беременности и до зачатия — краснуху, паротит, дифтерию, корь;
ВИЧ.

При каждом из вышеперечисленных заболеваний, обнаруженным другим методом, желательно делать и ПЦР — исследование. Возбудители многих инфекций имеют несколько типов (штаммов), а более точная диагностика делает лечение эффективнее. Поскольку разные типы возбудителей обладают своими способами передачи инфекции, точное определение возбудителя помогает уберечь от заражения окружающих. Например, гепатитом А можно заразиться через общие предметы и посуду (болезнь грязных рук), а гепатитом С — только через кровь, медицинские инструменты и половые контакты. Это важно для тех, кто находится рядом с больным.

Суть метода полимеразной цепной реакции

Метод основан на выявлении возбудителя по участкам ДНК или РНК. ПЦР напоминает криминалистику, когда преступника находят по частичкам кожи или волосам, оставленным на месте преступления. Поскольку каждый живой организм имеет уникальную структуру ДНК или РНК. Метод позволяет безошибочно идентифицировать микроорганизм, даже если он присутствует в исследуемом материале в минимальных количествах.

ПРЦ подходит для выявления скрытого носительства, нетипичных, стертых и прочих форм заразных заболеваний. Диагностика отличается высокой точностью, поэтому практически не дает ошибок и ложных результатов. Анализ часто назначается, как дополнительное обследование, чтобы выявить конкретный тип вируса или микроба.

Достоинства и недостатки метода ПЦР

Анализ ПЦР – результативный диагностический инструмент, позволяющий врачу не только правильно определить тип инфекционного возбудителя в организме больного, но также и количество микробов. Эта особенность позволяет методу ПЦР эффективно обнаруживать и хронические инфекции, к примеру, вирусный гепатит.

Преимущества методики заключаются в следующих особенностях:

Недостатки ПЦР-диагностики – это необходимость в высокотехнологичном оборудовании и высококвалифицированных специалистах. Для анализа нужен специальный бокс-ламинар, где поддерживается необходимая температура и обеспечивается чистота эксперимента.

Как сдать анализ ПЦР правильно: подготовка

Чтобы понять, как именно следует подготовиться к предстоящему анализу ПЦР, пациент должен обязательно уточнить у своего врача, какой именно биологический материал планируется взять. От этого непосредственно зависит подготовка.

Выделения из половых органов, мазок из шейки матки или мочеиспускательного канала, моча – посредством исследования данных вариантов материала методом ПЦР эффективно диагностируются инфекции половых органов.
Вирусный гепатит C, ВИЧ инфекция требуют взятие крови на анализ ПЦР.
С помощью мазка из зева можно подтвердить или опровергнуть факт наличия инфекционного мононуклеоза.

Мазок у женщин

Для диагностики половых инфекций методом ПЦР у женщин, как правило, берут мазок из влагалища . При беременности действуют стандартные правила подготовки к анализу ПЦР.

За пару дней до проведения ПЦР нужно отказаться от спринцеваний, средств интимной гигиены.
За неделю до анализа на инфекции стоит перестать применять любые виды лекарственных препаратов, разумеется, если они не входят в программу подготовки к анализу ПЦР, прописанную врачом.
За пару дней до обследования нужно начать воздерживаться от полового акта.
Подмывание в день анализа ПЦР не нужно, гигиена половых органов проводится накануне вечером, используется только теплая вода.
За пару часов до сдачи анализа мочиться нельзя.

Мазок у мужчин

Подготовиться к забору мазка из мочеиспускательного канала для проведения ПЦР несложно. Достаточно соблюдать изложенные ниже правила.

За 2 суток до ПЦР обследования нужно начать воздерживаться от сексуальных отношений.
Прием лекарств прекращается приблизительно за 7 дней до проведения анализа, если, конечно же, они не были специально назначены врачом.
Гигиена половых органов должна проводиться накануне вечером, в день анализа ПЦР это делать не стоит.
Рекомендуется не мочиться примерно 2-3 часа перед сдачей анализа.

Анализ крови

Если в процессе ПЦР анализа объектом изучения станет кровь пациента, правила подготовки к нему следующие.

Оптимальное время для сдачи крови – утро, анализ нужно обязательно сдавать натощак (минимум 8 часов отсутствия пищи). Воду можно пить свободно.
Отказ от алкоголя за сутки до ПЦР анализа, отказ от курения за час до него.
Если здоровье допускает такой вариант, от приема лекарственных средств рекомендуется на время отказаться.
Перед сдачей проб крови в обязательном порядке следует отдохнуть около 20 минут.
Накануне ПЦР исследования совершенно исключены эмоциональные и физические перегрузки, они могут сказаться на результатах анализа.

Как проводится тест ПЦР?

Для исследования берется любая среда, в которой может находиться возбудитель, но чаще всего используются:

Кровь сыворотка или плазма – для выявления множества возбудителей – вирусов гепатита B, C, D, G, герпеса, ВИЧ, цитомегаловируса;
Моча и сок простаты – при диагностике ЗППП;
Мокрота, плевральная жидкость, бронхоальвеолярный лаваж – для диагностики легочных и внелёгочных форм туберкулеза;
Спинномозговая жидкость – для диагностики инфекций нервной системы;
Околоплодная жидкость – для определения внутриутробных заражений;
Мазок из зева – для выявления возбудителей инфекционного мононуклеоза и дифтерии;
соскобы и мазки со слизистых для диагностики ЗППП;
клетки слизистой желудка и желудочный сок — для выявления бактерии хеликобактер, вызывающей гастрит и язву.

ПЦР—реакция делает огромное число копий выявленного участка генной информации (репликацию). Важно, что реплицируются только участки ДНК и РНК, необходимые для проведения анализа. Поэтому так важны чистота эксперимента и умение персонала обращаться с аппаратурой и образцами.

Цепная реакция протекает очень быстро, уже через два часа участок ДНК увеличивается в миллионы раз, что позволяет обнаружить и точно идентифицировать инфекцию. Для работы с эталонами пробирки помещают в специальный прибор. При помощи программы задается алгоритм, несколько раз меняющий температуру среды и влияющий на протекание реакции. Результат ПЦР виден сразу после окончания исследования.

Как расшифровать ПЦР анализ

Проведение ПЦР исследования позволяет не просто установить тип инфекции, присутствующий в организме больного, но и оценить его с количественной точки зрения (количество микробов). Расшифровка результатов количественного анализа ПЦР играет важную роль в обнаружении и проверке эффективности лечения большого числа хронических заболеваний, скажем гепатита C.

Результатом анализа ПЦР могут стать положительный и отрицательный ответы.

Отрицательный результат. Следы инфекции не были выявлены в биологическом материале, который являлся объектом исследования в процессе анализа ПЦР. Как правило, на основании отрицательного результата можно полагать, что в организме действительно отсутствует инфекция.
Положительный результат. Такой результат анализа ПЦР свидетельствует о том, что следы инфекционного заболевания присутствуют в биологическом материале пациента. Положительный результат анализа ПЦР характеризуется большой степенью точности.

Иногда инфицирование выявляется на фоне полного здоровья и отсутствия признаков заболевания. Некоторые больные считают, что анализ сделан неправильно, но реальная ситуация другая. Если ПЦР показала, что возбудитель в организме есть, значит, он там действительно находится. Просто инфекционные болезни никогда не начинаются сразу после заражения, имея инкубационный период различной продолжительности.

Скрытый период может продолжаться очень долго, например, при СПИДе – несколько лет, пока какие-то механизмы не подтолкнут вирусы к размножению. Возбудитель определяется в организме носителей и тех, кто не долечился. Очень часто переходят в скрытую (латентную) форму различные ЗППП. В этом случае может понадобиться дополнительная лабораторная диагностика.

Точность расшифровки результатов ПЦР анализа

Метод ПЦР, позволяющий выявлять достаточно большое число инфекций, характеризуется повышенной точностью, чувствительностью и специфичностью. Эти характеристики говорят о том, что с помощью исследования ПЦР можно:

Максимально точно установить отсутствие или присутствие инфекционного возбудителя.
Максимально точно определить конкретную разновидность инфекционного возбудителя (специфичность).
Выявить инфекцию даже в том случае, когда она имеет скрытый характер. Речь идет о низком уровне присутствия в подвергаемом исследованию биологическом материале пациента ДНК микробов (чувствительность).

Преимущества метода ПЦР над иммуноферментным анализом и прочими иммунологическими инструментами выявления инфекции заключается в том, что он реже дает ошибочные результаты. То есть расшифровка анализа ПЦР значительно реже показывает отсутствие инфекционных микробов, если они есть в организме больного.

Кроме того, почти не бывает, чтобы расшифровка анализа выявляла наличие в организме несуществующей инфекции, то есть давала ложноположительные результаты.Разумеется, стопроцентно правильными результаты ПЦР назвать все же нельзя, поэтому необходимо обязательно дополнять это исследование другими методиками.

Информацию из данного раздела нельзя использовать для самодиагностики и самолечения. В случае боли или иного обострения заболевания диагностические исследования должен назначать только лечащий врач. Для постановки диагноза и правильного назначения лечения следует обращаться к Вашему лечащему врачу.

Полимеразную цепную реакцию (ПЦР, PCR) изобрёл в 1983 году Кэри Мюллис (американский учёный). Впоследствии он получил за это изобретение Нобелевскую премию. В настоящее время ПЦР-диагностика является, одним из самых точных и чувствительных методов диагностики инфекционных заболеваний.

Полимеразная цепная реакция (ПЦР) — экспериментальный метод молекулярной биологии, способ значительного увеличения малых концентраций определённых фрагментов нуклеиновой кислоты (ДНК) в биологическом материале (пробе).

В основе метода ПЦР лежит многократное удвоение определённого участка ДНК при помощи ферментов в искусственных условиях (in vitro). В результате нарабатываются количества ДНК, достаточные для визуальной детекции. При этом происходит копирование только того участка, который удовлетворяет заданным условиям, и только в том случае, если он присутствует в исследуемом образце.

Кроме простого увеличения числа копий ДНК (этот процесс называется амплификацией), ПЦР позволяет производить множество других манипуляций с генетическим материалом (введение мутаций, сращивание фрагментов ДНК), и широко используется в биологической и медицинской практике, например, для диагностики заболеваний (наследственных, инфекционных), для установления отцовства, для клонирования генов, введения мутаций, выделения новых генов.

Специфичность и применение

ПЦР позволяет диагностировать наличие долго растущих возбудителей, не прибегая к трудоёмким микробиологическим методам, что особенно актуально в гинекологии и урологии при диагностике урогенитальных инфекций, передающихся половым путем (ИППП).

Исследование урогенитального тракта методом ПЦР на ИППП ;

тест методом ПЦР на коронавирус Covid-19, мазок из носа и зева на определение РНК вируса SARS-CoV-2;

Для проведения исследования в медицинских офисах необходимо предъявить СНИЛС и документ удостоверяющий личность. Запись на исследование В случае получения положительного или сомнительного результата на COVID-19 и при необходимости проведения подтверждающего тестирования обра.

Особенно эффективен метод ПЦР для диагностики трудно культивируемых, некультивируемых и скрыто существующих форм микроорганизмов, с которыми часто приходится сталкиваться при латентных и хронических инфекциях, поскольку этот метод позволяет избежать сложностей, связанных с выращиванием таких микроорганизмов в лабораторных условиях.

Применение ПЦР-диагностики также очень эффективно в отношении возбудителей с высокой антигенной изменчивостью и внутриклеточных паразитов. Методом ПЦР возможно выявление возбудителей не только в клиническом материале, полученном от больного, но и в материале, получаемом из объектов внешней среды (вода, почва и т. д.). В урологической и гинекологической практике - для выявления хламидиоза, уреаплазмоза, гонореи, герпеса, гарднереллёза, микоплазменной инфекции, ВПЧ - вирусов папилломы человека; в пульмонологии - для дифференциальной диагностики вирусных и бактериальных пневмоний, туберкулёза; в гастроэнтерологии - для выявления хеликобактериоза; в клинике инфекционных заболеваний - в качестве экспресс-метода диагностики сальмонеллёза, дифтерии, вирусных гепатитов В, С и G; в гематологии - для выявления цитомегаловирусной инфекции, онковирусов.

Специфичность ПЦР основана на образовании комплементарных комплексов между матрицей и праймерами - короткими синтетическими олигонуклеотидами длиной 18 - 30 букв. Каждый из праймеров сопоставим (комплементарен) с одной из цепей двуцепочечной матрицы, обрамляя начало и конец амплифицируемого участка.

После соединения (гибридизации) матрицы с праймером (отжиг), последний служит затравкой для ДНК-полимеразы при синтезе комплементарной цепи матрицы.

Проведение ПЦР

Для проведения ПЦР в простейшем случае требуются следующие компоненты:

ДНК-матрица, содержащая тот участок ДНК, который требуется амплифицировать;
два праймера, комплементарные концам требуемого фрагмента;
термостабильная ДНК-полимераза;
дезоксинуклеотидтрифосфаты (A, G, C, T);
ионы Mg2+, необходимые для работы полимеразы;
буферный раствор.

ПЦР проводят в амплификаторе — приборе, обеспечивающем периодическое охлаждение и нагревание пробирок, обычно с точностью не менее 0,1°C. Чтобы избежать испарения реакционной смеси, в пробирку добавляют высококипящее масло, например, вазелиновое. Добавление специфичеких ферментов может увеличить выход ПЦР-реакции.

Ход реакции

Обычно при проведении ПЦР выполняется 20 - 35 циклов, каждый из которых состоит из трех стадий. Двухцепочечную ДНК-матрицу нагревают до 94 - 96°C (или до 98°C, если используется особенно термостабильная полимераза) на 0,5 - 2 минуты, чтобы цепи ДНК разошлись. Эта стадия называется денатурацией — разрушаются водородные связи между двумя цепями. Иногда перед первым циклом проводят предварительный прогрев реакционной смеси в течение 2 - 5 минут для полной денатурации матрицы и праймеров.

Когда цепи разошлись, температуру понижают, чтобы праймеры могли связаться с одноцепочечной матрицей. Эта стадия называется отжигом. Температура отжига зависит от праймеров и обычно выбирается на 4 - 5°С ниже их температуры плавления. Время стадии — 0,5 - 2 минут.

ДНК-полимераза реплицирует матричную цепь, используя праймер в качестве затравки. Это — стадия элонгации. Температура элонгации зависит от полимеразы. Часто используемые полимеразы наиболее активны при 72°C. Время элонгации зависит как от типа ДНК-полимеразы, так и от длины амплифицируемого фрагмента. Обычно время элонгации принимают равным одной минуте на каждую тысячу пар оснований. После окончания всех циклов часто проводят дополнительную стадию финальной элонгации, чтобы достроить все одноцепочечные фрагменты. Эта стадия длится 10 - 15 мин.

Подготовка материала к исследованию и транспорт его в лабораторию

Для успешного проведения анализа важно правильно собрать материал у пациента и правильно провести его подготовку. Известно, что в лабораторной диагностике большинство ошибок (до 70%) совершается именно на этапе пробоподготовки. Для взятия крови в лаборатории ИНВИТРО в настоящее время применяются вакуумные системы, которые с одной стороны минимально травмируют пациента, а с другой - позволяют произвести взятие материала таким образом, что он не контактирует ни с персоналом, ни с окружающей средой. Это позволяет избежать контаминации (загрязнения) материала и обеспечивает объективность анализа ПЦР.

ДНК – дезоксирибонуклеиновая кислота - биологический полимер, один из двух типов нуклеиновых кислот, обеспечивающих хранение, передачу из поколения в поколение и реализацию генетической программы развития и функционирования живых организмов. Основная роль ДНК в клетках — долговременное хранение информации о структуре РНК и белков.

РНК– рибонуклеиновая кислота - биологический полимер, близкий по своему химическому строению к ДНК. Молекула РНК построена из тех же мономерных звеньев - нуклеотидов, что и ДНК. В природе РНК, как правило, существует в виде одиночной цепочки. У некоторых вирусов РНК является носителем генетической информации. В клетке играет важную роль при передаче информации от ДНК к белку. РНК синтезируется на ДНК-матрице. Процесс этот называется транскрипцией. В ДНК имеются участки, где содержится информация, ответственная за синтез трех видов РНК, различающихся по выполняемым функциям: информационной или матричной РНК (мРНК), рибосомальной (рРНК) и транспортной (тРНК). Все три вида РНК тем или иным способом участвуют в синтезе белка. Однако информация по синтезу белка содержится только в мРНК.

Нуклеоти́ды - основная повторяющаяся единица в молекулах нуклеиновых кислот, продукт химического соединения азотистого основания, пятиуглеродного сахара (пентозы) и одной или нескольких фосфатных групп. Нуклеотиды, представленные в нуклеиновых кислотах, содержат одну фосфатную группу. Они называются по содержащемуся в них азотистому основанию - адениновый (A), содержащий аденин, гуаниновый (G) - гуанин, цитозиновый (C) - цитозин, тиминовый (Т) - тимин, урациловый (U) - урацил. В состав ДНК входят 4 типа нуклеотидов - A, T, G, C, в состав РНК также 4 типа - A, U, G, C. Сахаром в составе всех нуклеотидов ДНК является дезоксирибоза, РНК - рибоза. При образовании нуклеиновых кислот нуклеотиды, связываясь, образуют сахаро-фосфатный остов молекулы, по одну сторону которого находятся основания.

Праймер – котроткая ДНК, используемая для репликации матричной цепи. Каждый из праймеров комплементарен одной из цепей двуцепочечной матрицы, обрамляя начало и конец амплифицируемого участка.

Читайте также: