Питательная среда для культивирования и выделения гемофильной палочки

Обновлено: 28.03.2024

Диагностический набор реагентов для быстрой идентификации возбудителей гнойных бактериальных менингитов Haemphilus influenza тип b,Streptococcus pneumoniae, Neisseria meningitides типа А, Neisseria meningitides типа В, Neisseria meningitides тип С и Neisseria meningitides тип W 135 в рекции латекс-агглютинации, жидкий

Латексная тест-система ГБМ Оболенск

Инструкция по применению Диагностического набора реагентов для быстрой идентификации возбудителей гнойных бактериальных менингитов – Haemophilus influenzae тип b, Streptococcus pneumoniae, Neisseria meningitidis тип A, Neisseria meningitidis тип B, Neisseria meningitidis тип С и Neisseria meningitidis тип W 135 в реакции латекс-агглютинации, жидкого (Латексная тест-система ГБМ)

Назначение тест-системы

Латексная тест-система ГБМ Оболенск предназначена для быстрой идентификации возбудителей гнойных бактериальных менингитов —Haemophilus influenzae тип b, Streptococcus pneumoniae, Neisseria meningitidis тип A, Neisseria meningitidis тип B, Neisseria meningitidis тип С и Neisseria meningitidis тип W 135 методом латекс-агглютинации при проведении клинических лабораторных исследований.

Латексная тест-система ГБМ обеспечивает типоспецифическое выявление и идентификацию микробных клеток ГБМ непосредственно в образцах спинномозговой жидкости или крови, полученных от больных людей с клиническими симптомами менингита, а также в суспензиях, полученных из колоний микроорганизмов, выращенных на плотных питательных средах.

2.Аналитические и диагностические характеристики тест-системы

Диагностическая чувствительность Латексной тест-системы ГБМ – не менее 80%, диагностическая специфичность – не менее 90%

Латексный тест H. influenzae b (фл. № 1) должен давать реакцию агглютинации латекса (РАЛ) с микробной взвесью H. influenzae тип b, штамм 411 на 3(+)-4(+) в концентрации 10 9 м.к./мл.

Латексный тест H. influenzae b (фл. № 1) не должен давать РАЛ с микробными взвесями: S. pneumoniae, штамм ATCC 49619; N. meningitidis тип A, штамм M4060;

  1. N.meningitidis тип B, штамм M5148; N.meningitidis тип С, штамм M3045 и N.meningitidis тип W135, штамм M7037 в концентрациях 10 9 м.к./мл.

Латексный тест S. pneumoniae (фл. № 2) должен давать РАЛ с микробной взвесью S. pneumoniae штамм ATCC 49619 на 3(+)-4(+) в концентрации 10 9 м.к./мл.

Латексный тест S. pneumoniae (фл. № 2) не должен давать РАЛ с микробными взвесями: H. influenzae тип b, штамм 411; N. meningitidis тип A, штамм M4060;
N. meningitidis
тип B, штамм M5148; N. Meningitidis тип С, штамм M3045 и N. meningitidis тип W 135, штамм M7037 в концентрациях 10 9 м.к./мл.

Латексный тест N.meningitidis A (фл. № 3) должен давать РАЛ с микробной взвесью N. meningitidis тип A, штамм M4060 на 3(+)-4(+) в концентрации 10 9 м.к./мл.

Латексный тест N.meningitidis A (фл. № 3) не должен давать РАЛ с микробными взвесями: H. influenzae тип b, штамм 411; S. pneumoniae, штамм ATCC 49619;
N. meningitidis тип B, штамм M5148; N. meningitidis тип С, штамм M3045 и N. meningitidis тип W 135, штамм M7037 в концентрации 10 9 м.к./мл.

Латексный тест N.meningitidis B (фл. № 4) должен давать РАЛ с микробной взвесью N. meningitidis тип B, штамм M5148 на 3(+)-4(+) в концентрации 10 9 м.к./мл.

Латексный тест N.meningitidis B (фл. № 4) не должен давать РАЛ с микробными взвесями: H. influenzae тип b, штамм 411; S. pneumoniae, штамм ATCC 49619;
N. meningitidis тип A, штамм M4060; N. meningitidis тип С, штамм M3045 и N. meningitidis тип W 135, штамм M7037 в концентрации 10 9 м.к./мл.

Латексный тест N.meningitidis С (фл. № 5) должен давать РАЛ с микробной взвесью N. meningitidis тип С, штамм M3045 на 3(+)-4(+) в концентрации 10 9 м.к./мл.

Латексный тест N.meningitidis С (фл. № 5) не должен давать РАЛ с микробными взвесями: H. influenzae тип b, штамм 411; S. pneumoniae, штамм ATCC 49619;
N. meningitidis тип A, штамм M4060; N. meningitidis тип B, штамм M5148 и N. meningitidis тип W 135, штамм M7037 в концентрации 10 9 м.к./мл.

Латексный тест N.meningitidis W 135 (фл. № 6) должен давать РАЛ с микробной взвесью N. meningitidis тип W 135, штамм M7037 на 3(+)-4(+) в концентрации
10 9 м.к./мл.

Латексный тест N.meningitidis W 135 (фл. № 6) не должен давать РАЛ с микробными взвесями: H. influenzae тип b, штамм 411; S. pneumoniae, штамм ATCC 49619;
N. meningitidis
тип A, штамм, M4060; N. meningitidis тип B, штамм M5148 и N. meningitidis тип С, штамм M3045 в концентрации 10 9 м.к./мл.

Принцип действия Латексная тест-система ГБМ Оболенск

Микробные клетки возбудителей ГБМ, присутствующие в исследуемой пробе, взаимодействуют с латексными частицами, сенсибилизированными антителами против полисахаридных антигенов возбудителей ГБМ с последующим образованием видимых агглютинатов. Специфическими мишенями данного теста являются полисахаридные антигены капсул возбудителей гнойных бактериальных менингитов.

Состав тест-системы

Латексная тест-система ГБМ Оболенск представляет собой набор, состоящий из 13 флаконов:

  • флакон №1 (латексный тест H.influenzaeb), содержит 0,5 % взвеси частиц монодисперсного полистирольного альдегидного латекса диаметром 0,85 мкм, сенсибилизированного иммуноглобулинами G, выделенными из сывороток крови кроликов, содержащих антитела к полисахаридному антигену капсулы тип bHaemophilusinfluenzae тип b (HIb);
  • флакон №2 (латексный тест S.pneumoniae), содержит 0,5 % взвеси частиц монодисперсного полистирольного альдегидного латекса диаметром 0,85 мкм, сенсибилизированного иммуноглобулинами G, выделенными из сывороток крови кроликов, содержащих антитела к полисахаридному антигену Streptococcuspneumoniae;
  • флакон №3 (латексный тест N.meningitidisA), содержит 0,5 % взвеси частиц монодисперсного полистирольного альдегидного латекса диаметром 0,85 мкм, сенсибилизированного иммуноглобулинами G, выделенными из сывороток крови кроликов, содержащих антитела к полисахаридному антигену Neisseriameningitidis тип A;
  • флакон №4 (латексный тест N.meningitidisB), содержит 0,5 % взвеси частиц монодисперсного полистирольного альдегидного латекса диаметром 0,85 мкм, сенсибилизированного иммуноглобулинами G, выделенными из сывороток крови кроликов, содержащих антитела к полисахаридному антигену Neisseriameningitidis тип B;
флакон №5

Меры предосторожности

Потенциальный риск применения Латексной тест-системы ГБМ класс 3 (Приказ МЗ РФ №4н от 06.06.2012г)

Утилизацию неиспользованных тест-систем с истекшим сроком годности проводят любым способом, предотвращающим повторное использование по назначению.

Материалы и оборудование

7.Анализируемые образцы

7.1.Образцы спинномозговой жидкости или крови, полученные от больных людей с подозрением на гнойный бактериальный менингит.

7.2.Колонии микроорганизмов, выделенных из клинического материала, выращенные на плотных питательных средах в микроаэрофильных условиях в течение 24-48 часов при температуре 37 °С.

Примечание – Анализируемые образцы не подвергать автоклавированию.

Извлечь из холодильника Латексную тест-систему ГБМ и выдержать при комнатной температуре 20 минут.

Примечание – перед применением латексный тест тщательно суспендировать до гомогенного состояния.

Латексная тест-система ГБМ Оболенск

9.Проведение анализа

9.1. Анализируемый образец ( по п.7.1.) объемом по 0,02 мл, механическим дозатором 6 раз нанести на предметное стекло в виде капель, затем внести в каждую полученную каплю образца по 0,015 мл одного из специфических латексных тестов из флаконов №1-6 и оба компонента в каждой капле осторожно перемешать стеклянной палочкой (для каждой смеси отдельной палочкой) до получения гомогенной суспензии. Реакционную смесь на стекле инкубировать при комнатной температуре 2 минуты, периодически покачивая, а затем регистрировать результаты реакции.

9.2. Идентификация микробных клеток ГМБ ( по п 7.2.): из колоний, выросших на плотной питательной среде — на предметное стекло нанести 20 мкл физиологического раствора, стеклянной палочкой снять часть колонии тестируемого штамма (исследуемый образец) и растереть в капле физиологического раствора до получения гомогенной суспензии. Далее проводить идентификацию по п.9.1.

9.3. Проверка качества контрольного латексного теста. К 0,02 мл анализируемого образца, нанесенного на предметное стекло, добавить 0,015 мл контрольного латексного теста (флакон №13) и оба компонента осторожно перемешать стеклянной палочкой до получения гомогенной суспензии. Реакционную смесь на стекле инкубировать при комнатной температуре 2 минуты, периодически покачивая, а затем регистрировать результаты реакции.

9.4 Контроль специфичности латексного теста. К 0,02 мл позитивного контроля (флаконы №7-12), нанесенного на предметное стекло, добавить 0,015 мл специфического латексного теста (флаконы № 1-6) и оба компонента осторожно перемешать стеклянной палочкой до получения гомогенной суспензии. Реакционную смесь на стекле инкубировать при комнатной температуре 2 минуты, периодически покачивая, а затем регистрировать результаты реакции.

Учет результатов по п. 9.1;.9.2;.9.3. провести через 2 минуты, руководствуясь таблицей и иллюстрацией.

Таблица 1 – Интерпретация результата (Пример идентификации Haemophilus influenzae тип b)

Наличие видимой четкой окрашенной агглютинации частиц после добавления к позитивному контролю H. influenzae b (флакон №7) латексного теста H. influenzae b (флакон №1).

Условия хранения и эксплуатации латексной тест-системы

Латексную тест-систему ГБМ транспортируют всеми видами транспорта при соблюдении условий хранения или при температуре от 2 до 25 ºС в срок не более 7суток.

Примечание – Не замораживать.

Срок годности – 1 год. Для получения надежных результатов необходимо строгое соблюдение настоящей инструкции по применению.

Питательная среда для культивирования и выделения гемофильной палочки, готовая к применению, стерильная.

Набор реагентов для бактериологических исследований.

— готовая стерильная основа 1фл.;

— стерильная ростовая добавка 1фл.;

— селективная добавка для выделения гемофильной палочки 1фл.

ИНСТРУКЦИЯ по применению набора реагентов для бактериологических исследований ПИТАТЕЛЬНАЯ СРЕДА ДЛЯ КУЛЬТИВИРОВАНИЯ И ВЫДЕЛЕНИЯ ГЕМОФИЛЬНОЙ ПАЛОЧКИ, ГОТОВАЯ К ПРИМЕНЕНИЮ ГЕМОФИЛУС АГАР Оболенск

назначение Гемофилус агар Оболенск

  1. характеристика Гемофилус агар Оболенск

Гемофилус агар Оболенск представляет набор, состоящий из основы среды (далее — Основа) — 1 флакон, ростовой добавки (РД) — 1 флакон и селективной добавки (СД) — 1 флакон.

Основа представляет собой непрозрачный гель темно-коричневого или черного цвета, стерильный, разлитый по 100 мл во флаконы вместимостью 100 мл, РД — пористая масса белого цвета, стерильная, расфасована во флаконы вместимостью 10 мл, СД — порошок белого цвета, расфасован во флаконы вместимостью 10 мл.

Принцип действия Гемофилус агар Оболенск

Основа, содержащая стимулятор роста гемофильных микроорганизмов, обогащена фактором Х (гемин). Другой фактор, необходимый для роста бактерий рода Haemophilus (V-фактор — никотинамидадениндинуклеотид — НАД), содержится в РД. Совокупность компонентов, входящих в состав набора (Основа, РД и СД) обеспечивает рост бактерий рода Haemophilus, образование капсулы у капсульных форм Haemophilus influenzae и ингибирование микробов-ассоциантов.

состав, г/л:

Состав Основы, г/л:

Панкреатический гидролизат казеина…………………………….. 15,0
Стимулятор роста гемофильных микроорганизмов……………… 12,0
Дрожжевой экстракт ……………………………………………….. 5,0
Пептон ………………………………………………………………. 5,0
Калий фосфорнокислый однозамещенный ………………………. 0,8
Натрий хлористый …………….…………………………………… 1,0
Крахмал растворимый …………………………………………….. 1,0
Агар микробиологический ………………………………………… 12,0±2,0
Вода дистиллированная ……………………………………………. 1000 мл

Флакон с РД содержит 0,1 мг НАД.

Флакон с СД содержит 30 мг бацитрацина.

аналитические и диагностические характеристики Гемофилус агар Оболенск

Питательная среда полностью подавляет рост тест-штаммов микробов-ассоциантов: Streptococcus pyogenes Dick-1, Neisseria meningitidis A 208 при посеве 0,1 мл взвеси из разведения 10 -4 через 48 ч инкубации при температуре (37±1) о С. N.meningitidis A-208 культивируют в атмосфере 5-10 % СО2.

меры предосторожности Гемофилус агар Оболенск

— Не использовать компоненты Гемофилус агара по истечении срока годности

— Не использовать флаконы набора Гемофилус агара со следами контаминации.

— После смешивания компонентов Гемофилус агар следует полностью использовать (не плавить повторно!).

оборудование и материалы Гемофилус агар Оболенск

анализируемые образцы Гемофилус агар Оболенск

Клинический материал от больных гнойным бактериальным менингитом и другими заболеваниями инфекционной природы, вызываемыми бактериями рода Haemophilus. Среду можно использовать также при работе с чистыми культурами Haemophilus.

проведение анализа Гемофилус агар Оболенск

9.1. Подготовка к анализу

Подготовка раствора ростовой добавки.

  1. Выдержите флакон с РД до достижения комнатной температуры.
  2. В асептических условиях растворите содержимое флакона с РД в 2 мл стерильной дистиллированной воды.
  3. Перемешайте до полного растворения.

Приготовление чашек со средой.

Посев и инкубация
Учет результатов Гемофилус агар Оболенск

условия хранения и эксплуатации набора Гемофилус агар Оболенск

Флаконы с Основой необходимо хранить в герметично закрытой упаковке в сухом защищенном от света месте при температуре от 2 до 30 С. Флаконы с РД и СД хранить герметично закрытыми при температуре 2-8 °С.

Срок годности — 1 год.

Для получения надежных результатов необходимо строгое соблюдение настоящей инструкции по применению.

Питательная среда для выделения возбудителей гнойных бактериальных мененгитов, готовая к применению, стерильная.

Набор реагентов для бактериологических исследований.

— готовая стерильная основа 4 бут.;

— стерильная ростовая добавка 4фл.;

— селект. добавка для выделения гемофильной палочки 1фл.;

— селект. добавка для выделения пневмококков 1фл.;

— селект. добавка для выделения менингококков 1фл.

Шоколадный агар Оболенск — набор

Левинталя среда или Шоколадный агар Оболенск

Представляет собой непрозрачный гель светло-коричневого цвета.

Состав:

  • Основа: панкреатический гидролизат казеина, стимулятор роста гемофильных микроорганизмов, дрожжевой экстракт, пептон мясной, гемоглобин, натрий хлористый, крахмал растворимый, калий фосфорнокислый двузамещённый, агар, вода дистиллированная.
  • Ростовая Добавка (РД-ША): цистеина гидрохлорид, L-глутамин, аденин, никотинамидадениндинуклеотид, цианокобаламин, тиамина пирофосфат.
  • Селективная Добавка для выделения гемофильной палочки (СД-Г): амфотерицин B, бацитрацин, ванкомицин.
  • Селективная Добавка для выделения пневмококков (СД-П): амфотерицин B, полимиксин B, налидиксовой кислоты натриевая соль.
  • Селективная Добавка для выделения менингококков (СД-М): амфотерицин B, полимиксин B, ванкомицин.

Характеристика:

Основа обогащена фактором Х, необходимым для роста гемофильной палочки. V-фактор, также необходимый для роста бактерий рода Haemophilus содержится в РД-ША в виде никотинамидадениндинуклеотида. Кроме того, РД-ША содержит ряд веществ, стимулирующих рост пневмококков и менингококков. Совокупность компонентов, входящих в состав набора, обеспечивает рост основных возбудителей гнойных бактериальных менингитов и ингибирование микробов-ассоциантов при применении соответствующих селективных добавок.

Подготовка питательной среды.

Подготовка раствора ростовой добавки:

Выдержать флакон с РД-ША до достижения комнатной температуры. В асептических условиях растворить содержимое флакона с РД-ША в 2мл стерильной дистиллированной воды и перемешайте до полного растворения.

Приготовление чашек со средой:

Растворы РД-ША и селективных добавок не хранить, использовать немедленно. Перемешать и разлить в чашки Петри слоем 4-5 мм.

Чашки с готовой средой можно хранить при температуре (6±2)°С не более 7 дней без заметного изменения ростовых свойств.

Проведение анализа:

Учет результатов проводят визуально по наличию характерных колоний через 24-48 ч инкубации при температуре (37±1)°С в микроаэрофильных условиях:

Условия хранения:

Основу хранить в герметично закрытой упаковке в сухом защищенном от света месте при температуре от 2 до 25оС. РД-ША и селективные добавки хранить в герметично закрытой упаковке при температуре (6±2)°С.

Питательная среда для культивирования и выделения гемофильной палочки, готовая к применению (Гемофилус агар) набор.

Питательная среда для культивирования и выделения гемофильной палочки, готовая к применению (Гемофилус агар) набор.

Артикул: О114-К
Производитель: ФБУН ГНЦ ПМБ Оболенск (Россия)
Модель: Гемофилус агар
Срок годности: 1 год
Наличие: Есть в наличии

1629.38 руб.

П редназначена для бактериологических исследований в клинической микробиологии с целью культивирования и выделения бактерий рода Haemophilus.

Состав: панкреатический гидролизат казеина, стимулятор роста гемофильных микроорганизмов, дрожжевой экстракт, пептон ферментативный, калий фосфорнокислый однозамещенный, натрий хлористый, крахмал растворимый, агар, вода дистиллированная. РД – никотинамидадениндинуклеотид, СД – бацитрацин.

основа – непрозрачный гель темно-коричневого или черного цвета, стерильный, разлитый по 100 мл во флакон,

Основа, содержащая стимулятор роста гемофильных микроорганизмов, обогащена фактором Х(гемин). Другой фактор, необходимый для роста бактерий рода Haemophilus (V-фактор – никотинамидадениндинуклеотид – НАД), содержится в РД. Совокупность компонентов, входящих в состав набора обеспечивает рост бактерий рода Haemophilus, образование капсулы у купсульных форм Haemophilus influenzaе и ингибирование микробов-ассоциантов.

Питательная среда с селективной добавкой полностью подавляет рост тест-штаммов микробов-ассоциантов: Streptococcus pyogenes Disk-I, Neisseria meningitidis A 208 при посеве 0,1 мл взвеси из развеленич 10-4 через 48 ч инкубации при температуре (37±1)°С. Neisseria meningitidis A 208 культивируют в атмосфере 5-10% СО2 .

Флаконы с Основой необходимо хранить герметически закрытыми при температуре от2 до 30оС в помещении с относительной влажностью не более 60%. Флаконы с РД и СД хранить герметически закрытыми при температуре 2-8оС.

Питательная среда для культивирования и выделения гемофильной палочки, готовая к применению (Гемофилус агар) набор.

Питательная среда для культивирования и выделения гемофильной палочки, готовая к применению (Гемофилус агар) набор.

Артикул: О114-К
Производитель: ФБУН ГНЦ ПМБ Оболенск (Россия)
Модель: Гемофилус агар
Срок годности: 1 год
Наличие: Есть в наличии

1629.38 руб.

П редназначена для бактериологических исследований в клинической микробиологии с целью культивирования и выделения бактерий рода Haemophilus.

Состав: панкреатический гидролизат казеина, стимулятор роста гемофильных микроорганизмов, дрожжевой экстракт, пептон ферментативный, калий фосфорнокислый однозамещенный, натрий хлористый, крахмал растворимый, агар, вода дистиллированная. РД – никотинамидадениндинуклеотид, СД – бацитрацин.

основа – непрозрачный гель темно-коричневого или черного цвета, стерильный, разлитый по 100 мл во флакон,

Основа, содержащая стимулятор роста гемофильных микроорганизмов, обогащена фактором Х(гемин). Другой фактор, необходимый для роста бактерий рода Haemophilus (V-фактор – никотинамидадениндинуклеотид – НАД), содержится в РД. Совокупность компонентов, входящих в состав набора обеспечивает рост бактерий рода Haemophilus, образование капсулы у купсульных форм Haemophilus influenzaе и ингибирование микробов-ассоциантов.

Питательная среда с селективной добавкой полностью подавляет рост тест-штаммов микробов-ассоциантов: Streptococcus pyogenes Disk-I, Neisseria meningitidis A 208 при посеве 0,1 мл взвеси из развеленич 10-4 через 48 ч инкубации при температуре (37±1)°С. Neisseria meningitidis A 208 культивируют в атмосфере 5-10% СО2 .

Флаконы с Основой необходимо хранить герметически закрытыми при температуре от2 до 30оС в помещении с относительной влажностью не более 60%. Флаконы с РД и СД хранить герметически закрытыми при температуре 2-8оС.

Читайте также: