Питательная среда для культивирования и выделения гемофильной палочки
Обновлено: 28.03.2024
Диагностический набор реагентов для быстрой идентификации возбудителей гнойных бактериальных менингитов Haemphilus influenza тип b,Streptococcus pneumoniae, Neisseria meningitides типа А, Neisseria meningitides типа В, Neisseria meningitides тип С и Neisseria meningitides тип W 135 в рекции латекс-агглютинации, жидкий
Латексная тест-система ГБМ Оболенск
Инструкция по применению Диагностического набора реагентов для быстрой идентификации возбудителей гнойных бактериальных менингитов – Haemophilus influenzae тип b, Streptococcus pneumoniae, Neisseria meningitidis тип A, Neisseria meningitidis тип B, Neisseria meningitidis тип С и Neisseria meningitidis тип W 135 в реакции латекс-агглютинации, жидкого (Латексная тест-система ГБМ)
Назначение тест-системы
Латексная тест-система ГБМ Оболенск предназначена для быстрой идентификации возбудителей гнойных бактериальных менингитов —Haemophilus influenzae тип b, Streptococcus pneumoniae, Neisseria meningitidis тип A, Neisseria meningitidis тип B, Neisseria meningitidis тип С и Neisseria meningitidis тип W 135 методом латекс-агглютинации при проведении клинических лабораторных исследований.
Латексная тест-система ГБМ обеспечивает типоспецифическое выявление и идентификацию микробных клеток ГБМ непосредственно в образцах спинномозговой жидкости или крови, полученных от больных людей с клиническими симптомами менингита, а также в суспензиях, полученных из колоний микроорганизмов, выращенных на плотных питательных средах.
2.Аналитические и диагностические характеристики тест-системы
Диагностическая чувствительность Латексной тест-системы ГБМ – не менее 80%, диагностическая специфичность – не менее 90%
Латексный тест H. influenzae b (фл. № 1) должен давать реакцию агглютинации латекса (РАЛ) с микробной взвесью H. influenzae тип b, штамм 411 на 3(+)-4(+) в концентрации 10 9 м.к./мл.
Латексный тест H. influenzae b (фл. № 1) не должен давать РАЛ с микробными взвесями: S. pneumoniae, штамм ATCC 49619; N. meningitidis тип A, штамм M4060;
- N.meningitidis тип B, штамм M5148; N.meningitidis тип С, штамм M3045 и N.meningitidis тип W135, штамм M7037 в концентрациях 10 9 м.к./мл.
Латексный тест S. pneumoniae (фл. № 2) должен давать РАЛ с микробной взвесью S. pneumoniae штамм ATCC 49619 на 3(+)-4(+) в концентрации 10 9 м.к./мл.
Латексный тест S. pneumoniae (фл. № 2) не должен давать РАЛ с микробными взвесями: H. influenzae тип b, штамм 411; N. meningitidis тип A, штамм M4060;
N. meningitidis тип B, штамм M5148; N. Meningitidis тип С, штамм M3045 и N. meningitidis тип W 135, штамм M7037 в концентрациях 10 9 м.к./мл.
Латексный тест N.meningitidis A (фл. № 3) должен давать РАЛ с микробной взвесью N. meningitidis тип A, штамм M4060 на 3(+)-4(+) в концентрации 10 9 м.к./мл.
Латексный тест N.meningitidis A (фл. № 3) не должен давать РАЛ с микробными взвесями: H. influenzae тип b, штамм 411; S. pneumoniae, штамм ATCC 49619;
N. meningitidis тип B, штамм M5148; N. meningitidis тип С, штамм M3045 и N. meningitidis тип W 135, штамм M7037 в концентрации 10 9 м.к./мл.
Латексный тест N.meningitidis B (фл. № 4) должен давать РАЛ с микробной взвесью N. meningitidis тип B, штамм M5148 на 3(+)-4(+) в концентрации 10 9 м.к./мл.
Латексный тест N.meningitidis B (фл. № 4) не должен давать РАЛ с микробными взвесями: H. influenzae тип b, штамм 411; S. pneumoniae, штамм ATCC 49619;
N. meningitidis тип A, штамм M4060; N. meningitidis тип С, штамм M3045 и N. meningitidis тип W 135, штамм M7037 в концентрации 10 9 м.к./мл.
Латексный тест N.meningitidis С (фл. № 5) должен давать РАЛ с микробной взвесью N. meningitidis тип С, штамм M3045 на 3(+)-4(+) в концентрации 10 9 м.к./мл.
Латексный тест N.meningitidis С (фл. № 5) не должен давать РАЛ с микробными взвесями: H. influenzae тип b, штамм 411; S. pneumoniae, штамм ATCC 49619;
N. meningitidis тип A, штамм M4060; N. meningitidis тип B, штамм M5148 и N. meningitidis тип W 135, штамм M7037 в концентрации 10 9 м.к./мл.
Латексный тест N.meningitidis W 135 (фл. № 6) должен давать РАЛ с микробной взвесью N. meningitidis тип W 135, штамм M7037 на 3(+)-4(+) в концентрации
10 9 м.к./мл.
Латексный тест N.meningitidis W 135 (фл. № 6) не должен давать РАЛ с микробными взвесями: H. influenzae тип b, штамм 411; S. pneumoniae, штамм ATCC 49619;
N. meningitidis тип A, штамм, M4060; N. meningitidis тип B, штамм M5148 и N. meningitidis тип С, штамм M3045 в концентрации 10 9 м.к./мл.
Принцип действия Латексная тест-система ГБМ Оболенск
Микробные клетки возбудителей ГБМ, присутствующие в исследуемой пробе, взаимодействуют с латексными частицами, сенсибилизированными антителами против полисахаридных антигенов возбудителей ГБМ с последующим образованием видимых агглютинатов. Специфическими мишенями данного теста являются полисахаридные антигены капсул возбудителей гнойных бактериальных менингитов.
Состав тест-системы
Латексная тест-система ГБМ Оболенск представляет собой набор, состоящий из 13 флаконов:
- флакон №1 (латексный тест H.influenzaeb), содержит 0,5 % взвеси частиц монодисперсного полистирольного альдегидного латекса диаметром 0,85 мкм, сенсибилизированного иммуноглобулинами G, выделенными из сывороток крови кроликов, содержащих антитела к полисахаридному антигену капсулы тип bHaemophilusinfluenzae тип b (HIb);
- флакон №2 (латексный тест S.pneumoniae), содержит 0,5 % взвеси частиц монодисперсного полистирольного альдегидного латекса диаметром 0,85 мкм, сенсибилизированного иммуноглобулинами G, выделенными из сывороток крови кроликов, содержащих антитела к полисахаридному антигену Streptococcuspneumoniae;
- флакон №3 (латексный тест N.meningitidisA), содержит 0,5 % взвеси частиц монодисперсного полистирольного альдегидного латекса диаметром 0,85 мкм, сенсибилизированного иммуноглобулинами G, выделенными из сывороток крови кроликов, содержащих антитела к полисахаридному антигену Neisseriameningitidis тип A;
- флакон №4 (латексный тест N.meningitidisB), содержит 0,5 % взвеси частиц монодисперсного полистирольного альдегидного латекса диаметром 0,85 мкм, сенсибилизированного иммуноглобулинами G, выделенными из сывороток крови кроликов, содержащих антитела к полисахаридному антигену Neisseriameningitidis тип B;
флакон №5
Меры предосторожности
Потенциальный риск применения Латексной тест-системы ГБМ класс 3 (Приказ МЗ РФ №4н от 06.06.2012г)
Утилизацию неиспользованных тест-систем с истекшим сроком годности проводят любым способом, предотвращающим повторное использование по назначению.
Материалы и оборудование
7.Анализируемые образцы
7.1.Образцы спинномозговой жидкости или крови, полученные от больных людей с подозрением на гнойный бактериальный менингит.
7.2.Колонии микроорганизмов, выделенных из клинического материала, выращенные на плотных питательных средах в микроаэрофильных условиях в течение 24-48 часов при температуре 37 °С.
Примечание – Анализируемые образцы не подвергать автоклавированию.
Извлечь из холодильника Латексную тест-систему ГБМ и выдержать при комнатной температуре 20 минут.
Примечание – перед применением латексный тест тщательно суспендировать до гомогенного состояния.
Латексная тест-система ГБМ Оболенск
9.Проведение анализа
9.1. Анализируемый образец ( по п.7.1.) объемом по 0,02 мл, механическим дозатором 6 раз нанести на предметное стекло в виде капель, затем внести в каждую полученную каплю образца по 0,015 мл одного из специфических латексных тестов из флаконов №1-6 и оба компонента в каждой капле осторожно перемешать стеклянной палочкой (для каждой смеси отдельной палочкой) до получения гомогенной суспензии. Реакционную смесь на стекле инкубировать при комнатной температуре 2 минуты, периодически покачивая, а затем регистрировать результаты реакции.
9.2. Идентификация микробных клеток ГМБ ( по п 7.2.): из колоний, выросших на плотной питательной среде — на предметное стекло нанести 20 мкл физиологического раствора, стеклянной палочкой снять часть колонии тестируемого штамма (исследуемый образец) и растереть в капле физиологического раствора до получения гомогенной суспензии. Далее проводить идентификацию по п.9.1.
9.3. Проверка качества контрольного латексного теста. К 0,02 мл анализируемого образца, нанесенного на предметное стекло, добавить 0,015 мл контрольного латексного теста (флакон №13) и оба компонента осторожно перемешать стеклянной палочкой до получения гомогенной суспензии. Реакционную смесь на стекле инкубировать при комнатной температуре 2 минуты, периодически покачивая, а затем регистрировать результаты реакции.
9.4 Контроль специфичности латексного теста. К 0,02 мл позитивного контроля (флаконы №7-12), нанесенного на предметное стекло, добавить 0,015 мл специфического латексного теста (флаконы № 1-6) и оба компонента осторожно перемешать стеклянной палочкой до получения гомогенной суспензии. Реакционную смесь на стекле инкубировать при комнатной температуре 2 минуты, периодически покачивая, а затем регистрировать результаты реакции.
Учет результатов по п. 9.1;.9.2;.9.3. провести через 2 минуты, руководствуясь таблицей и иллюстрацией.
Таблица 1 – Интерпретация результата (Пример идентификации Haemophilus influenzae тип b)
Наличие видимой четкой окрашенной агглютинации частиц после добавления к позитивному контролю H. influenzae b (флакон №7) латексного теста H. influenzae b (флакон №1).
Условия хранения и эксплуатации латексной тест-системы
Латексную тест-систему ГБМ транспортируют всеми видами транспорта при соблюдении условий хранения или при температуре от 2 до 25 ºС в срок не более 7суток.
Примечание – Не замораживать.
Срок годности – 1 год. Для получения надежных результатов необходимо строгое соблюдение настоящей инструкции по применению.
Питательная среда для культивирования и выделения гемофильной палочки, готовая к применению, стерильная.
Набор реагентов для бактериологических исследований.
— готовая стерильная основа 1фл.;
— стерильная ростовая добавка 1фл.;
— селективная добавка для выделения гемофильной палочки 1фл.
ИНСТРУКЦИЯ по применению набора реагентов для бактериологических исследований ПИТАТЕЛЬНАЯ СРЕДА ДЛЯ КУЛЬТИВИРОВАНИЯ И ВЫДЕЛЕНИЯ ГЕМОФИЛЬНОЙ ПАЛОЧКИ, ГОТОВАЯ К ПРИМЕНЕНИЮ ГЕМОФИЛУС АГАР Оболенск
назначение Гемофилус агар Оболенск
- характеристика Гемофилус агар Оболенск
Гемофилус агар Оболенск представляет набор, состоящий из основы среды (далее — Основа) — 1 флакон, ростовой добавки (РД) — 1 флакон и селективной добавки (СД) — 1 флакон.
Основа представляет собой непрозрачный гель темно-коричневого или черного цвета, стерильный, разлитый по 100 мл во флаконы вместимостью 100 мл, РД — пористая масса белого цвета, стерильная, расфасована во флаконы вместимостью 10 мл, СД — порошок белого цвета, расфасован во флаконы вместимостью 10 мл.
Принцип действия Гемофилус агар Оболенск
Основа, содержащая стимулятор роста гемофильных микроорганизмов, обогащена фактором Х (гемин). Другой фактор, необходимый для роста бактерий рода Haemophilus (V-фактор — никотинамидадениндинуклеотид — НАД), содержится в РД. Совокупность компонентов, входящих в состав набора (Основа, РД и СД) обеспечивает рост бактерий рода Haemophilus, образование капсулы у капсульных форм Haemophilus influenzae и ингибирование микробов-ассоциантов.
состав, г/л:
Состав Основы, г/л:
Панкреатический гидролизат казеина…………………………….. | 15,0 |
Стимулятор роста гемофильных микроорганизмов……………… | 12,0 |
Дрожжевой экстракт ……………………………………………….. | 5,0 |
Пептон ………………………………………………………………. | 5,0 |
Калий фосфорнокислый однозамещенный ………………………. | 0,8 |
Натрий хлористый …………….…………………………………… | 1,0 |
Крахмал растворимый …………………………………………….. | 1,0 |
Агар микробиологический ………………………………………… | 12,0±2,0 |
Вода дистиллированная ……………………………………………. | 1000 мл |
Флакон с РД содержит 0,1 мг НАД.
Флакон с СД содержит 30 мг бацитрацина.
аналитические и диагностические характеристики Гемофилус агар Оболенск
Питательная среда полностью подавляет рост тест-штаммов микробов-ассоциантов: Streptococcus pyogenes Dick-1, Neisseria meningitidis A 208 при посеве 0,1 мл взвеси из разведения 10 -4 через 48 ч инкубации при температуре (37±1) о С. N.meningitidis A-208 культивируют в атмосфере 5-10 % СО2.
меры предосторожности Гемофилус агар Оболенск
— Не использовать компоненты Гемофилус агара по истечении срока годности
— Не использовать флаконы набора Гемофилус агара со следами контаминации.
— После смешивания компонентов Гемофилус агар следует полностью использовать (не плавить повторно!).
оборудование и материалы Гемофилус агар Оболенск
анализируемые образцы Гемофилус агар Оболенск
Клинический материал от больных гнойным бактериальным менингитом и другими заболеваниями инфекционной природы, вызываемыми бактериями рода Haemophilus. Среду можно использовать также при работе с чистыми культурами Haemophilus.
проведение анализа Гемофилус агар Оболенск
9.1. Подготовка к анализу
Подготовка раствора ростовой добавки.
- Выдержите флакон с РД до достижения комнатной температуры.
- В асептических условиях растворите содержимое флакона с РД в 2 мл стерильной дистиллированной воды.
- Перемешайте до полного растворения.
Приготовление чашек со средой.
Посев и инкубация
Учет результатов Гемофилус агар Оболенск
условия хранения и эксплуатации набора Гемофилус агар Оболенск
Флаконы с Основой необходимо хранить в герметично закрытой упаковке в сухом защищенном от света месте при температуре от 2 до 30 С. Флаконы с РД и СД хранить герметично закрытыми при температуре 2-8 °С.
Срок годности — 1 год.
Для получения надежных результатов необходимо строгое соблюдение настоящей инструкции по применению.
Питательная среда для выделения возбудителей гнойных бактериальных мененгитов, готовая к применению, стерильная.
Набор реагентов для бактериологических исследований.
— готовая стерильная основа 4 бут.;
— стерильная ростовая добавка 4фл.;
— селект. добавка для выделения гемофильной палочки 1фл.;
— селект. добавка для выделения пневмококков 1фл.;
— селект. добавка для выделения менингококков 1фл.
Шоколадный агар Оболенск — набор
Левинталя среда или Шоколадный агар Оболенск
Представляет собой непрозрачный гель светло-коричневого цвета.
Состав:
- Основа: панкреатический гидролизат казеина, стимулятор роста гемофильных микроорганизмов, дрожжевой экстракт, пептон мясной, гемоглобин, натрий хлористый, крахмал растворимый, калий фосфорнокислый двузамещённый, агар, вода дистиллированная.
- Ростовая Добавка (РД-ША): цистеина гидрохлорид, L-глутамин, аденин, никотинамидадениндинуклеотид, цианокобаламин, тиамина пирофосфат.
- Селективная Добавка для выделения гемофильной палочки (СД-Г): амфотерицин B, бацитрацин, ванкомицин.
- Селективная Добавка для выделения пневмококков (СД-П): амфотерицин B, полимиксин B, налидиксовой кислоты натриевая соль.
- Селективная Добавка для выделения менингококков (СД-М): амфотерицин B, полимиксин B, ванкомицин.
Характеристика:
Основа обогащена фактором Х, необходимым для роста гемофильной палочки. V-фактор, также необходимый для роста бактерий рода Haemophilus содержится в РД-ША в виде никотинамидадениндинуклеотида. Кроме того, РД-ША содержит ряд веществ, стимулирующих рост пневмококков и менингококков. Совокупность компонентов, входящих в состав набора, обеспечивает рост основных возбудителей гнойных бактериальных менингитов и ингибирование микробов-ассоциантов при применении соответствующих селективных добавок.
Подготовка питательной среды.
Подготовка раствора ростовой добавки:
Выдержать флакон с РД-ША до достижения комнатной температуры. В асептических условиях растворить содержимое флакона с РД-ША в 2мл стерильной дистиллированной воды и перемешайте до полного растворения.
Приготовление чашек со средой:
Растворы РД-ША и селективных добавок не хранить, использовать немедленно. Перемешать и разлить в чашки Петри слоем 4-5 мм.
Чашки с готовой средой можно хранить при температуре (6±2)°С не более 7 дней без заметного изменения ростовых свойств.
Проведение анализа:
Учет результатов проводят визуально по наличию характерных колоний через 24-48 ч инкубации при температуре (37±1)°С в микроаэрофильных условиях:
Условия хранения:
Основу хранить в герметично закрытой упаковке в сухом защищенном от света месте при температуре от 2 до 25оС. РД-ША и селективные добавки хранить в герметично закрытой упаковке при температуре (6±2)°С.
Питательная среда для культивирования и выделения гемофильной палочки, готовая к применению (Гемофилус агар) набор.
Артикул: | О114-К |
Производитель: | ФБУН ГНЦ ПМБ Оболенск (Россия) |
Модель: | Гемофилус агар |
Срок годности: | 1 год |
Наличие: | Есть в наличии |
1629.38 руб.
П редназначена для бактериологических исследований в клинической микробиологии с целью культивирования и выделения бактерий рода Haemophilus.
Состав: панкреатический гидролизат казеина, стимулятор роста гемофильных микроорганизмов, дрожжевой экстракт, пептон ферментативный, калий фосфорнокислый однозамещенный, натрий хлористый, крахмал растворимый, агар, вода дистиллированная. РД – никотинамидадениндинуклеотид, СД – бацитрацин.
основа – непрозрачный гель темно-коричневого или черного цвета, стерильный, разлитый по 100 мл во флакон,
Основа, содержащая стимулятор роста гемофильных микроорганизмов, обогащена фактором Х(гемин). Другой фактор, необходимый для роста бактерий рода Haemophilus (V-фактор – никотинамидадениндинуклеотид – НАД), содержится в РД. Совокупность компонентов, входящих в состав набора обеспечивает рост бактерий рода Haemophilus, образование капсулы у купсульных форм Haemophilus influenzaе и ингибирование микробов-ассоциантов.
Питательная среда с селективной добавкой полностью подавляет рост тест-штаммов микробов-ассоциантов: Streptococcus pyogenes Disk-I, Neisseria meningitidis A 208 при посеве 0,1 мл взвеси из развеленич 10-4 через 48 ч инкубации при температуре (37±1)°С. Neisseria meningitidis A 208 культивируют в атмосфере 5-10% СО2 .
Флаконы с Основой необходимо хранить герметически закрытыми при температуре от2 до 30оС в помещении с относительной влажностью не более 60%. Флаконы с РД и СД хранить герметически закрытыми при температуре 2-8оС.
Питательная среда для культивирования и выделения гемофильной палочки, готовая к применению (Гемофилус агар) набор.
Артикул: | О114-К |
Производитель: | ФБУН ГНЦ ПМБ Оболенск (Россия) |
Модель: | Гемофилус агар |
Срок годности: | 1 год |
Наличие: | Есть в наличии |
1629.38 руб.
П редназначена для бактериологических исследований в клинической микробиологии с целью культивирования и выделения бактерий рода Haemophilus.
Состав: панкреатический гидролизат казеина, стимулятор роста гемофильных микроорганизмов, дрожжевой экстракт, пептон ферментативный, калий фосфорнокислый однозамещенный, натрий хлористый, крахмал растворимый, агар, вода дистиллированная. РД – никотинамидадениндинуклеотид, СД – бацитрацин.
основа – непрозрачный гель темно-коричневого или черного цвета, стерильный, разлитый по 100 мл во флакон,
Основа, содержащая стимулятор роста гемофильных микроорганизмов, обогащена фактором Х(гемин). Другой фактор, необходимый для роста бактерий рода Haemophilus (V-фактор – никотинамидадениндинуклеотид – НАД), содержится в РД. Совокупность компонентов, входящих в состав набора обеспечивает рост бактерий рода Haemophilus, образование капсулы у купсульных форм Haemophilus influenzaе и ингибирование микробов-ассоциантов.
Питательная среда с селективной добавкой полностью подавляет рост тест-штаммов микробов-ассоциантов: Streptococcus pyogenes Disk-I, Neisseria meningitidis A 208 при посеве 0,1 мл взвеси из развеленич 10-4 через 48 ч инкубации при температуре (37±1)°С. Neisseria meningitidis A 208 культивируют в атмосфере 5-10% СО2 .
Флаконы с Основой необходимо хранить герметически закрытыми при температуре от2 до 30оС в помещении с относительной влажностью не более 60%. Флаконы с РД и СД хранить герметически закрытыми при температуре 2-8оС.
Читайте также: