Расшифровать анализ рнк вич количественный

Обновлено: 19.04.2024

Информацию из данного раздела нельзя использовать для самодиагностики и самолечения. В случае боли или иного обострения заболевания диагностические исследования должен назначать только лечащий врач. Для постановки диагноза и правильного назначения лечения следует обращаться к Вашему лечащему врачу.

Напоминаем вам, что самостоятельная интерпретация результатов недопустима, приведенная ниже информация носит исключительно справочный характер.

Антитела к ВИЧ-1/2 и антиген ВИЧ-1/2 (HIV Ag/Ab Combo): показания к назначению, правила подготовки к сдаче анализа, расшифровка результатов и показатели нормы.

ВИЧ-инфекция - инфекционная болезнь, развивающаяся в результате многолетнего персистирования (постоянного пребывания) в лимфоцитах, макрофагах и клетках нервной ткани вируса иммунодефицита человека (далее - ВИЧ), характеризующаяся медленно прогрессирующим дефектом иммунной системы, который приводит к гибели больного от вторичных поражений, описанных как синдром приобретенного иммунодефицита (далее - СПИД).

ВИЧ (Вирус Иммунодефицита Человека) – вирус, относящийся к семейству ретровирусов (семейство РНК-содержащих вирусов, заражающих преимущественно позвоночных), который поражает клетки иммунной системы человека. Через несколько недель с момента заражения начинают вырабатываться антитела к ВИЧ.

вирус.jpg

Показания на проведение исследования

Показаниями для назначения анализа является подготовка к госпитализации и плановому оперативному вмешательству. В профилактических целях следует провести исследование при подозрении на заражение при половом контакте. В первую очередь это касается лиц групп риска: употребляющих наркотики, вводимые внутривенно, часто меняющих половых партнеров и не использующих средств защиты.

Вирус иммунодефицита человека размножается в организме человека достаточно медленно, и количественный результат в отношении антигенов и антител к вирусу можно получить, как правило, не ранее чем через 3-6 недель после инфицирования. При этом клинические симптомы заболевания еще отсутствуют.

прогрессирование.jpg

Через три месяца антигены ВИЧ и антитела к вирусу определяются практически у всех заболевших. Благодаря появлению новых комбинированных тест-систем четвертого поколения получение точного результата качественного анализа на ВИЧ-инфекцию возможно уже через две недели с момента попадания вируса в организм. При этом исследовании выявляют антиген р24 ВИЧ – белок вирусного капсида (внешней оболочки вируса).

Анализ на антитела к ВИЧ 1/2 и антиген ВИЧ 1/2 назначают на этапе планирования и при ведении беременности, когда возможна передача вируса плоду. Анализ проводят и после родов, поскольку ребенок ВИЧ-положительной матери может быть инфицирован во время прохождения через родовые пути и при кормлении грудью.

пути передачи.jpg

Лихорадка, потеря веса без объективных причин, повышенная утомляемость, увеличение регионарных лимфатических узлов, потливость, особенно в ночное время, длительный кашель, диарея – эти устойчивые клинические симптомы неясного происхождения, отмечаемые в течение 2-3 недель, также служат показанием к проведению исследования на антитела к ВИЧ 1/2 и антиген ВИЧ 1/2.

Кожные проявления также могут быть симптомом ВИЧ-инфекции, поскольку развиваются на фоне ослабления иммунитета. К их числу относится рецидивирующая герпетическая сыпь, поражающая обширные участки кожи, полость рта, половые органы. Герпес поражает и глубокие слои кожи с развитием язвенно-некротической формы. Образуются язвы и эрозии с последующим образованием рубцов, которых не бывает при обычном герпесе.

Еще один характерный симптом ВИЧ-инфекции – волосатая лейкоплакия, которая связана с активацией латентной инфекции, вызванной вирусом Эпштейна-Барр (что свидетельствует об иммуносупрессии). Заболевание проявляется нитевидными образованиями белого цвета с дальнейшим ороговением пораженных участков языка и слизистой оболочки рта.

Обширные грибковые поражения (в первую очередь дрожжевыми грибками рода Candida) также служат типичным признаком, сопровождающим ВИЧ-инфекцию. Сначала кандидоз поражает слизистую оболочку рта и пищевода, затем распространяется на слизистые желудочно-кишечного и мочеполового тракта. При этом формируются обширные очаги, характеризующиеся болезненностью и склонностью к изъязвлению.

ВИЧ-инфекция может сопровождаться развитием обширного папилломатоза. У ВИЧ-инфицированных женщин папилломы цервикального канала склонны быстро вызывать рак шейки матки.

СПИД-индикаторным заболеванием служит саркома Капоши – многоочаговая сосудистая опухоль, которая поражает кожные покровы и слизистые оболочки. Ее очаги в виде красноватых или буроватых узелков и бляшек сливаются, быстро распространяясь по всему телу. Со временем они образуют опухолевые поля, которые изъязвляются и нагнаиваются.

К числу патологических состояний, которые почти у всех пациентов сопровождают ВИЧ-инфекцию, относят полиаденопатию (увеличение лимфатических узлов). Как правило, в первую очередь увеличиваются под- и надключичные, подбородочные, околоушные и шейные лимфоузлы. В дальнейшем к ним может присоединяться увеличение паховых и бедренных лимфатических узлов. Они могут быть мягкими или плотными на ощупь, безболезненными и подвижными. Иногда несколько лимфоузлов сливаются, образуя своеобразный конгломерат. Воспаление двух и более групп лимфоузлов считают признаком генерализованной лимфаденопатии. Поражение лимфатических узлов может наблюдаться в течение нескольких лет, при этом периоды обострения сменяются ремиссией.

К легочным заболеваниям, сопровождающим ВИЧ-инфекцию, относят туберкулез и пневмонию.

Анализ на антигены и антитела к ВИЧ рекомендуют сделать, если у пациента выявлены заболевания, передаваемые половым путем (сифилис, хламидиоз, гонорея, генитальный герпес, бактериальный вагиноз).

Как показано в таблице 2.4, у каждой тест-системы свой порог и диапазон чувствительности (J Clin Microbiol 1996; 34:3016; J Med Virol 1996; 50:293; J Clin Microbiol 1996; 34:1058; J Clin Microbiol 1998; 36:3392). Два стандартных отклонения (95% доверительный интервал) для результатов тестов составляют 0,3–0,5 log10 (т. е. результаты могут отличаться в 2–3 раза) (J Infect Dis 1997; 175:247; AIDS 1999; 13:2269). Это значит, что 95% доверительный интервал для значения 10 000 копий/мл составляет от 3 100 до 32 000 копий/мл. Значения вирусной нагрузки, полученные при использовании тест-системы Amplicor 1.5 (Roche) и методом рДНК (Versant 3.0), близки, за исключением нижнего участка линейного диапазона (

Подтипы ВИЧ.

При определении вирусной нагрузки не-В-подтипов ВИЧ наблюдается значительно больший разброс показателей. Метод разветвленной ДНК (Versant 3.0) несколько превосходил остальные методики в отношении определения вирусной нагрузки ВИЧ подтипов A–D, F, G, CRF01_AE и CRF01_AG (межподтиповых рекомбинантных форм) и O; при использовании этого метода 83% результатов различались не более чем на 0,5 log10. При использовании Amplicor Monitor 1.5 этот показатель был 74%, а для NucliSens — 61% (J Clin Microbiol 2005; 43:3860). Результаты других исследований подтверждают эти данные (J Med Virol 2006; 78:883; J Acquir Immune Defic Syndr 2002; 29:330).

Таблица 2.4. Тесты на ВИЧ-1

Половые различия.

Метаанализ 12 публикаций выявил наличие умеренных различий уровня вирусной нагрузки у мужчин и женщин: оказалось, что вирусная нагрузка у женщин в среднем на 0,23 log10 /мл (? в 2 раза) ниже, чем у мужчин (J Acquir Immune Defic Syndr 2002; 31:11). Однако эти различия исчезают при количестве лимфоцитов CD4 -1 и поэтому практически не влияют на решения относительно лечения (J Acquir Immune Defic Syndr 2000; 24:218; J Infect Dis 1999; 180:666; Clin Infect Dis 2002; 35:313; Lancet 1998; 352:1510; N Engl J Med 2001; 344:720).

Показания.

Количественный метод определения РНК ВИЧ используется для диагностики острой ВИЧ-инфекции, прогноза вероятности передачи вируса, прогноза темпа прогрессирования ВИЧ-инфекции, выявления показаний к началу антиретровирусной терапии, а также для наблюдения за эффективностью лечения (Ann Intern Med 1995; 122:573; N Engl J Med 1996; 334:426; J Infect Dis 1997; 175:247; J Infect Dis 2002; 185:905).

Рекомендации
  • Гарантия качества. Вирусную нагрузку рекомендуется измерять на фоне стабильного клинического состояния, не ранее чем через 4 недели после вакцинации или перенесенной инфекции, всегда одним и тем же методом в одной и той же лаборатории.
  • Частота лабораторных обследований при наблюдении за эффективностью терапии. После двукратного измерения исходного уровня вирусной нагрузки контрольные измерения следует проводить регулярно, каждые 3–4 месяца (Clin Infect Dis 2001; 33:1060). В начале лечения и после его коррекции вирусную нагрузку измеряют через 1–4 недели (альфа-спад), затем через 12–16 недель и 16–24 недели. Об эффективности лечения свидетельствует снижение вирусной нагрузки на 0,75–1,0 log10 копий/мл от исходной через 1 неделю (Lancet 2001; 358:1760; J Acquir Immune Defic Syndr 2002; 30:167), снижение на 1,5–2 log10 копий/мл (до Интерпретация результатов. Значимыми считаются изменения уровня РНК ВИЧ на ?50% (на 0,3 log10 копий/мл).
  • На основании уровня вирусной нагрузки в крови нельзя судить о степени повреждения функции иммунной системы, способности популяции лимфоцитов CD4 к восстановлению, чувствительности вируса к антиретровирусным препаратам, вирулентных свойствах вируса, его способности к репликации и к образованию синцития из инфицированных клеток, а также о вирусной нагрузке в других тканях (например, в лимфатических узлах, в ЦНС, в ЖКТ, в выделениях из половых путей).
  • Факторы, повышающие вирусную нагрузку:
    • смена доминирующего штамма ВИЧ, когда вирус, не способный образовывать синцитий (использующий в качестве корецептора хемокиновый рецептор CCR5), вытесняется вирусом, способным образовывать синцитий (использующим в качестве корецептора хемокиновый рецептор CXCR4);
    • прогрессирование ВИЧ-инфекции;
    • неудача антиретровирусного лечения из-за недостаточной противовирусной активности препаратов, недостаточных концентраций препаратов в организме, несоблюдения режима лечения и резистентности вируса;
    • суперинфекция ВИЧ (J Infect Dis 2005; 192:438);
    • острые инфекционные заболевания: на фоне активной формы туберкулеза вирусная нагрузка повышается в 5–160 раз (J Immunol 1996; 157:1271); на фоне пневмококковой пневмонии вирусная нагрузка повышается в 3–5 раз;
    • прививки, в том числе введение противогриппозной вакцины и вакцины Pneumovax (против Streptococcus pneumoniae) (Blood 1995; 86:1082; N Engl J Med 1996; 335:817; N Engl J Med 1996; 334:1222). В этом случае повышение вирусной нагрузки небольшое и сохраняется от 2 до 4 недель.

    Таблица 2.5. Сравнительная характеристика лицензированных FDA тест-систем, основанных на разных методах измерения вирусной нагрузки

    Roche Bayer bioMerieux
    Контактный телефон 800-526-1247 800-434-2447 800-682-2666
    Торговое название Amplicor HIV Monitor 1.5 Versant HIV-1 RNA 3.0 NucliSens HIV-1 QT
    Техника ОТ-ПЦР рДНК NASBA
    Сравнение результатов Результаты, получаемые методом ОТ-ПЦР, сопоставимы с результатами, получаемыми методом рДНК (Versant) с использованием тест-систем 2.0 и 3.0 Результаты, получаемые методом рДНК, сопоставимы с результатами, получаемыми методом ОТ-ПЦР (Amplicor) Результаты, по-видимому, сопоставимы с результатами, получаемыми методами ОТ-ПЦР и рДНК, но пока не получено достаточно данных
    Преимущества и недостатки Меньше ложноположительных результатов у ВИЧ-отрицательных пациентов по сравнению с методом рДНК Выполнение исследования занимает меньше времени у лаборанта. Хороший динамический диапазон, но выше порог определения вирусной нагрузки Может применяться для обнаружения вируса в тканях и биологических жидкостях, например, выделениях половых путей. Самый большой динамический диапазон.
    Динамический диапазон Стандартный (Amplicor 1.5): 400–750 000 копий/мл
    Суперчувствительный (Ultra-Direct 1.5): 50–100 000 копий/мл
    рДНК 3.0: 75–500 000 копий/мл* NucliSens HIV-1 QT: 176–3 500 000 копий/мл; динамический диапазон зависит от объема
    Подтип вируса Тест-система 1.5: от A до G от A до G от A до G
    Необходимый объем материала для исследования Amplicor: 0,2 мл Суперчувствительный: 0,5 мл 1 мл От 10 мкл до 2 мл
    Пробирки ЭДТА (пробирка с сиреневой крышкой) ЭДТА (пробирка с сиреневой крышкой) ЭДТА, гепарин, цельная кровь, любая биологическая жидкость, МКПК, семенная жидкость, ткани и т. д.
    Требования Отделить плазму не позже чем через 6 часов после забора крови, перед транспортировкой заморозить при температуре –20°С или –70°С. Отделить плазму не позже чем через 4 часа после забора крови, перед транспортировкой заморозить при температуре –20°С или –70°С. Отделить сыворотку или плазму не позже чем через 4 часа после забора крови, перед транспортировкой заморозить при температуре –20°С или –70°С.

    * Нижнее пороговое значение вирусной нагрузки, установленное FDA, составляет 75 копий/мл. За пределами США нижнее пороговое значение вирусной нагрузки составляет 50 копий/мл.

    Человечество слишком поздно осознало опасность, которую представляет вирус иммунодефицита человека (ВИЧ).

    Вызываемое им заболевание – синдром приобретенного иммунодефицита (СПИД).

    Правда, на начало XXI века медики научились эффективно бороться с этой инфекцией.

    Никто не станет отрицать, что ведущую роль в этом направлении сыграло совершенствование лабораторных методов выявления инфекции.

    А также исследования показателей крови уже зараженных людей.

    показатели крови при ВИЧ

    Виды анализов

    По своим характеристикам, ВИЧ относится к категории гемотрансмиссивных инфекций.

    Заражение здорового человека происходит при попадании возбудителя в кровеносное русло.

    Там вирус связывается с лимфоцитами и другими мишенями, начинает активную репликацию.

    Зараженные клетки не сразу, но истощаются и погибают.

    За счет этого и возникает иммунодефицит.

    Благодаря компенсаторным способностям человеческого организма, инфекция очень долго (до нескольких лет) протекает бессимптомно.

    В этом и заключается главная опасность инфекции.

    Единственно, что может оказаться информативным в начальных стадиях болезни, это – анализы крови.

    В клинической практике они применяются по разным направлениям:

    • первичная диагностика – это исследования, которые прямо указывают на наличие или отсутствие ВИЧ-инфекции в организме обследуемого человека
    • иммунограмма – направлена на оценку показателей иммунной системы, таких как количество лимфоцитов CD4, которые являются главной мишенью для вирусов
    • вирусная нагрузка – помогает оценить степень активности инфекции и эффективность проводимой антиретровирусной терапии
    • общий анализ крови (ОАК), который проводится инфицированным людям для общей оценки поражения организма вирусом
    • биохимические исследования позволяют оценить функцию основных жизненно важных органов – печени, почек, кроветворной системы и так далее

    Сложность в том, что показатели последних двух пунктов меняются в основном на продвинутых стадиях заболевания.

    Но если человек вовремя прошел диагностику и узнал о своем статусе, он теперь может держать заболевание под полным контролем.

    сдача крови на ВИЧ

    Достаточно лишь стать на учет в специализированном центре и вовремя сдавать необходимые анализы.

    Типичный алгоритм обследования пациента предлагаем рассмотреть в виде следующей таблицы:

    Кровь на ВИЧ

    Экспресс-метод и ИФА при ситуации, рискованной по заражению или при характерных симптомах (лихорадка, увеличение лимфоузлов, частые простуды, диарея, похудание и так далее)

    Повторный анализ

    Положительный ответ первого исследования.

    Клинический анализ крови

    Установление диагноза ВИЧ-инфекции, в дальнейшем – по показаниям

    Биохимический анализ крови

    Установление диагноза ВИЧ-инфекции, в дальнейшем – по показаниям

    Кровь на CD-4 клетки

    Установление диагноза ВИЧ-инфекции, сначала двукратно с периодом в 7 дней, в дальнейшем каждые 6-12 месяцев, при ухудшении здоровья – немедленно

    Вирусная нагрузка

    Установление диагноза ВИЧ-инфекции, перед началом АРТ и дальше – через 3 месяца до получения негативных результатов, в дальнейшем каждые 6 месяцев

    Как и любая патология, ВИЧ-инфекция имеет индивидуальные черты у каждого инфицированного человека.

    Поэтому предложенная таблица – лишь ориентир.

    Точные сроки и перечень необходимых анализов назначаются врачом, который ведет пациента.

    Также меняются сроки проведения мониторинговых обследований после того, как пациент начинает прием препаратов антиретровирусной терапии (АРТ).

    Показатели общего анализа крови при ВИЧ

    На ранних стадиях инфекции, показатели общего анализа крови меняются мало или вообще остаются в переделах нормы.

    общий анализ крови при ВИЧ

    Внимательный врач может связать некоторые граничные колебания лейкоцитов (формулы белой крови) с эпизодами повторных рецидивных простуд и респираторных инфекций.

    В более продвинутых стадиях заболевания, когда компенсаторные возможности организма слабеют, в ОАК возникают такие изменения:

    • Анемия. Снижение количества эритроцитов ниже возрастной и половой нормы связывают с повреждением ВИЧ клеток костного мозга и общим истощением организма. Степень анемии коррелирует с активностью ВИЧ-инфекции: малокровие нарастает при прогрессировании заболевания и наоборот, отступает на фоне АРТ-терапии.


    • Лейко- и лимфопения являются типичными явлениями для ВИЧ. В общем анализе крови можно обнаружить стойкое снижение количества лейкоцитов (ниже 4*10 в 9 степени) и лимфоцитов (ниже 13%), показатели этих клеток помогают врачам составить предварительный прогноз и разработать меры по защите человека от других инфекций (например – назначить профлечение бисептолом).
    • Тромбоцитопения. Падение уровня тромбоцитов ниже нормы (180*10 в 9 степени) весьма характерно для ВИЧ-инфекции, в течение 10 лет, такое явление возникает у 45% инфицированных людей. Вызывают тромбоцитопению два механизма: аутоиммунное повреждение тромбоцитопению и снижение количества их предшественников (мегакариоцитов).

    Для пациента очень важно соблюдать сроки, когда врач рекомендует сдавать ОАК.

    Это поможет вовремя заметить опасные осложнения ВИЧ-инфекции и предотвратить их.

    Кроме того, нельзя забывать о риске развития побочных реакций в ответ на прем препаратов АРТ-терапии.

    Показатель СОЭ

    Очень важными данными ОАК, является скорость оседания эритроцитов или, сокращенно – СОЭ.

    Норма – 4-10 мм в час.

    Когда СОЭ ускоряется, это свидетельствует о нарушении белкового баланса крови.

    снижение количества эритроцитов

    К сожалению, показатель абсолютно неспецифичен: СОЭ возрастает при любой инфекции, травмах, онкологии.

    Для пациентов характерно такое сочетание, когда скорость оседания эритроцитов повышена до 30-40-50 мм в час.

    А человек чувствует себя более-менее нормально.

    Такая картина связана со снижением количества белых кровяных телец.

    В частности, тех лимфоцитов, какие синтезируют белки-иммуноглобулины.

    Уменьшение количества этих иммунных белков влечет за собой относительное повышение белков-альбуминов, что и отражается в росте СОЭ.

    Показатели биохимии крови

    Биохимический анализ крови для пациентов очень важен.

    С его помощью можно оценить функцию почек и, что более важно – печени.

    ВИЧ очень часто соседствует с вирусными гепатитами.

    измерение СОЭ в лаборатории

    Поэтому показатели трансаминаз помогают вовремя сориентироваться и дообследовать пациента.

    Кроме того, контроль за функцией печени и почек позволяет вовремя заметить негативные реакции организма на АРТ-препараты.

    Биохимия – важнейший комплекс анализов.

    Однако из-за многогранности показателей интерпретировать их должен только специалист.

    В этой статье мы просто не сможем осветить все детали таких исследований у пациентов.

    Метод определения в пробах материалов, подвергающихся исследованию, любых ДНК и РНК, в случае неэффективности других методов.

    Суть этого метода звучит в самом названии.

    Поначалу исторический экскурс.

    Автор разработки Кэри Мюллис, заработал Нобелевскую премию за работу 1983 года.

    Первоначально планировалось научное применение метода, но впоследствии он завоевал свое место и в диагностической медицине.

    Этим методом можно определять генетический материал всевозможных инфекций.

    Гинекологические и урологические труднодиагностируемые инфекции выявляются этим методом.

    Очень часто ПЦР используется для диагностики ВИЧ.

    Основы метода, на основании которых работает исследование, основаны на уникальности фрагмента ДНК для каждой инфекции.

    В случае с ВИЧ это РНК.

    И создает большое количество копий этого фрагмента ДНК (или РНК).

    Геометрическая прогрессия определяет число копий в течение цикла ПЦР (около 3-х минут).

    По прошествии нескольких часов число фрагментов – несколько миллиардов.

    Теперь несложно определить и возбудителя инфекции.

    Метод силен своей универсальностью.

    Для определения фрагментов ДНК (или РНК) возбудителя любой инфекции всегда используется одно и то же стандартное оборудование.

    ПЦР на ВИЧ

    ПЦР славится и своей специфичностью (практически 100%).

    Можно использовать один и тот же исследуемый материал для поиска разных возбудителей заболеваний.

    У метода очень высокая чувствительность и оперативность.

    Всего в течение дня, можно узнать, есть ли возбудитель в организме и какой.

    Инкубационный период не мешает проведению исследования.

    Нет еще клиники заболевания и антител в крови, но есть ДНК или РНК конкретного возбудителя в организме подвергающегося исследованию.

    К недостаткам метода нужно отнести высокую квалификацию врача, берущего материал для исследования, и лаборанта, проводящего исследование.

    Также важна высокая чистота помещения, в котором проводят исследование (практически 100%), чтобы результаты исследований были достоверными.

    проведение анализа на ВИЧ методом ПЦР

    Для ИППП существуют специальные комплексные исследования, при которых определяют наличие сразу нескольких возбудителей.

    А теперь поговорим о перспективах ПЦР для диагностики ВИЧ-инфекции.

    Когда делают ПЦР на ВИЧ

    От четырех до четырнадцати дней спустя, после инфицирования, можно обнаружить ВИЧ данным методом.

    Достоверность результата оценивают, когда минуло четырнадцать дней спустя опасной половой связи.

    Наличие отрицательного результата говорит о достоверности проведенного исследования.

    Но для того чтобы получить непререкаемый результат исследования проводят еще и ИФА.

    ПЦР является высокочувствительным методом, в основе которого лежит амплификация (усиление) небольшого участка провирусной ДНК (или РНК) за счёт праймеров.

    Праймеры – это специальные реагенты.

    Желательная (не обязательная) процедура взятия венозной крови на исследование на ВИЧ-инфекцию.

    Проведение ПЦР для диагностики достаточно дорогостоящий анализ.

    Его делают не всегда, а в особых случаях.

    донор сдает кровь

    И если случилась медицинская авария, в которой есть ВИЧ-инфицированные и возможно заразившиеся.

    Спустя четырнадцать дней достоверность на наличие ВИЧ-инфекции порядка 98%.

    По истечении пяти дней после предполагаемого заражения - 80%.

    Анализ ИФА можно делать только тогда, когда появятся антитела к ВИЧ в крови.

    Проходит от одного до трёх месяцев, иногда до года.

    Поэтому если есть озабоченность по поводу ВИЧ инфицирования, лучше не тянуть, а сделать этот дорогостоящий, но такой необходимый анализ.

    Важно знать диагноз как можно раньше.


    ПЦР анализ на ВИЧ
    рассказывает подполковник
    медицинской службы, врач
    Ленкин Сергей Геннадьевич

    Содержание данной статьи проверено и подтверждено на соответствие медицинским
    стандартам врачем дерматовенерологом, урологом, к.м.н.

    Ленкиным Сергеем Геннадьевичем

    Наименование Срок Цена
    Прием венеролога 900.00 руб.
    ДНК ВИЧ (кровь) 5 д. 3450.00 руб.

    Как делают

    Нахождение ВИЧ в пробах крови методом ПЦР выполняется двумя вариантами:

    • исследуется провирус ВИЧ-инфекции, точнее его ДНК
    • исследуется плазма или сыворотка крови на РНК ВИЧ-инфекции

    Периферическая кровь, точнее ее мононуклеарные клетки, исследуются на содержание провируса.

    По причине того, что ИФА дает вероятность выше 98% - 99,9%, ПЦР не является 100% подтверждающим анализом на наличие ВИЧ-инфекции.

    Большой процент ложноположительных срабатываний зависит и от чистоты лаборатории, где проводят исследования, и от квалификации проводящего исследования.

    ПЦР на ВИЧ-инфекцию – единственная диагностика до появления антител к ВИЧ.

    То есть до минимум трёх месяцев с начала инфицирования.

    Прогресс заболевания ВИЧ-инфекцией характеризуется нарастанием количества вируса в крови.

    Проведение ПЦР говорит о стадии заболевания ВИЧ и эффективности антиретровирусной терапии.

    Помимо вышеперечисленных условий, есть обязательные исследования крови на ВИЧ-инфекцию для:

    • новорожденных от ВИЧ-инфицированной матери
    • наблюдения за концентрацией ВИЧ-инфекции

    Все остальные условия являются необязательными.

    Процедура сдачи ПЦР для диагностики наличия ВИЧ-инфекции в организме проста.

    Берется венозная кровь и проводится анализ.

    забор крови на ПЦР ВИЧ

    Нужно воздержаться от употребления любых продуктов около десяти часов.

    Не употреблять алкоголь, ограничить физическую активность, исключить эмоциональные нагрузки.

    Для этого нужна очень чистая лаборатория.

    При получении положительного результата его обязательно перепроверяют.

    Для этого используют референц-лабораторию.

    Там проводят более точный исследовательский способ диагностики.

    К сожалению, универсальность не 100%, и зачастую результат анализа ложноположительный.

    Его используют вспомогательным методом для установления наличия или отсутствия ВИЧ-инфекции в организме.

    Если проводят скрининг на наличие ВИЧ-инфекции или ставят диагноз ВИЧ инфицирования, то используют метод ПЦР.

    Методом проводят и количественную оценку нахождения ВИЧ в организме.

    Так определяется степень и тяжесть патологических изменений в организме.

    Уровень концентрации ВИЧ-инфекции, в организме диагностируемого определяют методом ПЦР.

    концентрация вируса ВИЧ в крови

    До лечения исследуется кровь методом ПЦР и после, и можно оценить правильность проводимого курса лечения.

    Те ли препараты назначают или нужно другие.

    Проводят анализ, и в том случае, если антитела в крови есть, но их наличие не говорит о достоверности наличия ВИЧ-инфекции в организме.

    Результаты анализов

    Есть много поводов для исследования на наличие ВИЧ-инфекции в организме.

    Предстоящая операция, планирование беременности, наличие в анамнезе случайных половых связей и другие похожие причины.

    Есть категории работников (например, медицинские работники, учителя и другие) для которых эта процедура необходима, для допуска работы с людьми.

    Есть определенная тревожная симптоматика, при которой анализ на ВИЧ-инфекцию проводят:

    • при резкой потере веса
    • при длительной диарее (около 3-х недель)
    • при лихорадке невыясненной этиологии
    • при росте лимфоузлов в разных местах
    • при лимфо- и лейкопении
    • при наличии необъяснимой пневмонии, системном кандидозе, туберкулезе, манифестном токсоплазмозе и других серьезных заболеваниях

    Интерпретацией результатов проведенных анализов занимается только лечащий врач.

    пациент у инфекциониста

    Какой бы ни был результат - это не повод заниматься лечением самостоятельно.

    К тому же результат ввиду несовершенства метода может быть как ложноотрицательным, так и ложноположительным.

    Иногда схожие результаты анализов у разных людей свидетельствуют о различной клинике.

    Чаще делают количественный ПЦР-анализ на ВИЧ-инфекцию.

    Этот анализ дает сведения о количестве вируса и отображается единицей копия/мл.

    Расшифровка результатов:

    • РНК вируса отсутствует или его очень мало (около 20 копий/мл)
    • мизерное количество РНК (чуть больше 20 копий/мл)
    • 20 – 10 6 копий/мл
    • более чем 10 6 копий/мл

    Самый опасный третий и четвертый результат.

    Что делать, если результат анализа ПЦР на ВИЧ положительный

    Анализы на ВИЧ-инфекцию делают в несколько этапов.

    Это занимает период от двух до десяти дней.

    Результаты анализов делятся на положительные, отрицательные и сомнительные.

    Если результат сомнительный, то немного позже обязательно делают анализ еще раз.

    Но даже положительный результат не окончательный.

    Пересдача крови на анализ тоже делается.

    На достоверность результата влияние оказывает некоторые заболевания и состояния организма.

    Проведение анализа может быть конфиденциальным или анонимным.

    При конфиденциальном обследовании имя обследуемого человека называется.

    При анонимном обследовании анализ делают по идентификационному номеру.

    Результат анализа может узнать только подвергшийся обследованию человек.

    Даже положительный результат остается тайной.

    Это врачебная тайна, и она не может быть нарушена.

    врачебная тайна

    Но даже подтвержденный положительный результат еще не приговор.

    В современных условиях ВИЧ-инфицированные подвергаются пожизненной антиретровирусной терапии, что позволяет сохранить им жизнь.

    Наоборот, чем раньше обнаружено наличие ВИЧ-инфекции в организме, тем плодотворнее будет лечение.

    Перспективы метода в диагностике ВИЧ-инфекции

    ПЦР относится к молекулярно-биологическим методам исследования.

    Помимо диагностики ВИЧ-инфекции и ИППП, метод зарекомендовал себя в генетических разработках, в ветеринарной науке, сельском хозяйстве.

    Продукты питания исследуют на содержание ГМО с помощью ПЦР.

    Также сфера применения метода судебно-медицинская экспертиза.

    Но все же нас интересуют, в первую очередь, перспективы ПЦР для постановки диагноза наличия ВИЧ-инфекции.

    С помощью ПЦР выявляются даже единицы ВИЧ присутствия в крови.

    Анализ характеризуется очень высокой чувствительностью – от одного до ста единиц ВИЧ.

    Выраженная уникальность происходит за счет того, что идет поиск специфичной ДНК (или РНК) присущий конкретному возбудителю заболевания.

    Реакция протекания операции копирования фрагментов РНК характеризуется высокой специфичностью метода ПЦР.

    Поэтому амплификационная тест-система (ПЦР) выигрывает перед другими тест-системами иммунологического характера (например, ИФА).

    клинико-диагностическая лаборатория

    Еще важна и скорость ПЦР анализа.

    Один рабочий день уходит на проведение ПЦР.

    Но есть у метода и негативные качества.

    Если ВИЧ-инфекция попадет в исследуемую кровь случайно, из воздуха, при ее отсутствии в организме, реакция копирования вируса все равно будет идти.

    Поэтому и нужна такая стерильность в лаборатории, в которой проводиться ПЦР.

    Благодаря большому непостоянству генетического материала ВИЧ уменьшаются диагностические показатели чувствительности.

    Хотя сам метод очень чувствительный.

    Чувствительность метода ПЦР характеризуют 98%. У ИФА этот показатель выше – 99%.

    А за данными статистики или вовремя не продиагностируемые заболевшие или, наоборот, неправильно продиагностируемые о наличии в организме ВИЧ-инфекции.

    Для лабораторий, в которых ПЦР проводиться, разрабатываются специальные системы внутреннего контроля, с целью повышения качества диагностики.

    На основе стандартизированных межлабораторных панелей качества минимализируют ошибки тестирования.

    Если все сделано правильно, без ошибок, то с помощью ПЦР можно определить только один фрагмент провируса на десять тысяч – сто тысяч лимфоцитов.

    Методом определяют и резистентность к препаратам антиретрорвирусной терапии.

    Конечно, метод несовершенный, но у него большие перспективы.

    Особенно на ранних стадиях инфицирования, когда в крови еще нет антигенов.

    Метод хоть и недешевый, но правильно проведенный, с соблюдением всех условий правильной постановки, очень информативный.

    Читайте также: