Рпга с дизентерийным диагностикумом в инвитро

Обновлено: 23.04.2024

Метод определения РПГА (реакция пассивной гемагглютинации с эритроцитарным диагностикумом, содержащим полисахаридные антигены кишечноиерсиниозных бактерий серовара О3).

Исследование антител к Yersinia Enterocolitica серотип О:3 методом РПГА (реакция непрямой гемагглютинации).

Кишечный иерсиниоз - острое инфекционное заболевание, характеризующееся преимущественным поражением желудочно-кишечного тракта, с тенденцией к генерализованному поражению различных органов и систем.

Возбудителем иерсиниоза чаще всего является мелкая грамотрицательная палочка Yersinia Enterocolitica серотипов О3, О8, О9. Y. enterocolitica распространены в природе широко. Они могут присутствовать в органах и фекалиях многих видов млекопитающих, птиц, земноводных, членистоногих, а также на овощах, корнеплодах, в почве, пыли, воде. Частый путь передачи инфекции – алиментарный (с заражённой пищей, молоком, водой). Человек, как правило, источником заражения не является. Частота выявление этого возбудителя в кале больных с поносом, по данным разных исследований, составляет 1-3%.

Клинические формы иерсиниоза разнообразны и до некоторой степени обусловлены возрастом и физическим состоянием больного. У детей старшего возраста и подростков клиническая картина часто напоминает аппендицит, симптомы включают лихорадку и разлитую боль в животе. У взрослых иерсиниоз часто проявляется двумя синдромами – реактивным артритом и узловатой эритемой. Сначала наблюдается понос с лихорадкой и болью в животе, а через 1-2 недели развивается артрит, который обычно проходит через 1-4 месяца. Узловатая эритема как постинфекционный синдром отмечается преимущественно у женщин среднего возраста. Иерсиниоз в грудном возрасте опасен осложнением в виде сепсиса.

Другие предрасполагающие факторы бактериемии включают заболевания печени, гемохроматоз, сахарный диабет, истощение, иммуносупрессивная терапия, передозировка препаратов железа.

Более редкие формы иерсиниоза (атипичная клиника обычно обусловлена серотипами, отличными от Y. enterocolitica О3, О8, О9) – ангина на фоне кишечной симптоматики или без неё, пневмония, абсцесс лёгкого, инфекционный эндокардит, инфекции мочевых путей, абсцессы мягких тканей и конъюнктивит.

Для лабораторного подтверждения иерсиниоза используют микробиологические тесты (см.тест №460 - Посев на иерсинии и определение чувствительности к антибиотикам), серологические исследования - в том числе, РПГА с Y.enterocolitica, выявление антител к факторам вирулентности Y.enterocolitica методом ИФА (см. тесты №№ 238, 239).

Титр антител возрастает через 1 неделю заболевания и достигает пика на 2 неделе. Рекомендовано обследовать больного не менее 2 раз – в начале заболевания и с интервалом в 10-15 дней, диагностически достоверным считают 4-кратный и более прирост титров антител. При отсутствии возможности получения парных сывороток (обследование в боле поздние сроки) допускают использование условно-диагностических титров – при кишечном иерсиниозе для взрослых 1:200-1:400, для детей до 10 лет 1:100-1:200. В сомнительных случаях целесообразно проводить исследование параллельно с постановкой РПГА с Y.pseudotubercelosis, проявляющими иммунологическую общность с Y.enterocolitica. Ценность серодиагностики методом РПГА снижают потенциально возможные перекрёстные реакции (Brucella abortus, Rickettsia spp., Salmonella spp., Morganella morganii).

Литература

Инструкция по применению диагностикума (утверждена Росздравнадзором 12 окт. 2007 г.).
Инфекционные болезни у детей. Ред. Д. Марри. М. Практика, 2006 г., 928 с.

Специальная подготовка не требуется. Рекомендуется взятие крови не ранее чем через 4 часа после последнего приема пищи.

Серологическая диагностика дизентерии - исследование антител к Shigella sonnei методом РПГА (реакция пассивной гемагглютинации). Бактериальную дизентерию (шигеллёз) вызывают бактерии рода Shigella. Этот род включает около 50 серотипов, объединённых по антигенным и биохимическим свойствам в 4 группы: Shigella dysenteriae (A), Shigella flexneri (B) Shigella boydii (C), Shigella sonnei (D). Наиболее высокой патогенностью среди них обладают S. dysenteriae, вырабатывающие цитотоксин Шига (другие виды шигелл его не вырабатывают или почти не вырабатывают). Наибольшее эпидемическое значение для большинства стран имеют S.flexneri и S.sonnei. Дизентерия, вызванная S.sonnei, протекает в целом легче и реже даёт осложнения, чем S. dysenteriae и S.flexneri. Заражение происходит фекально-оральным путём. Инкубационный период от одних до 7 суток (в среднем 2 - 3 суток), но может сокращаться до 12 и даже до 2 часов. Заболевание начинается остро. Возникает общая интоксикация, повышается температура тела, появляются схваткообразные боли в животе (тенезмы), усиливающиеся перед дефекацией. Стул в типичном случае - сначала обильный водянистый, затем частый малыми порциями, обычно с примесью крови и слизи. Диагноз ставят на основании выделения возбудителя из кала (см. тест №457 - Посев на патогенную кишечную группу и определение чувствительности к антибиотикам). Серологические исследования используют в качестве вспомогательного метода в целях подтверждения клинического диагноза при получении отрицательного результата бактериологического обследования; для ретроспективного подтверждения диагноза; при позднем обращения пациента, назначении терапии антибиотиками; затяжном течении заболевания. Антитела в крови в большей части случаев можно выявить через несколько дней от начала заболевания с максимумом через несколько недель, далее снижением и вероятным исчезновением через 2-3 года. Результат серологического исследования не может быть использован в качестве единственного основания для постановки диагноза. По данным производителя, при острой дизентерии антитела методом РПГА выявляют в 70-80% случаев в титрах от 1:400 до 1:6400 (титр - последнее разведение сыворотки, дающее положительный результат). При затяжном же течении дизентерии антитела в РПГА выявляются значительно реже (в 30-40% случаев) и в менее высоких титрах (от 1:100 до 1:400). Исследование рекомендуют проводить в динамике в парных сыворотках больным с клиническим диагнозом острой дизентерии в первые дни заболевания (при поступлении в стационар) и через 7-10 дней после первичного исследования. Диагностически достоверным считают восьмикратное увеличение (или падение) титров специфических антител в динамике наблюдения. Установление этиологического диагноза на основании меньшего изменения титров или высокого (1:200 и выше) результата однократной постановки РПГА в первые дни заболевания может привести к значительному проценту диагностических ошибок. Такие результаты надо оценивать с учётом эпидемиологической обстановки, формы заболевания, сроков взятия сыворотки и пр. Следует принимать во внимание, что результат определения антител может быть положительным после ранее перенесенной инфекции; в некоторых случаях возможны перекрёстные реакции, связанные с кросс-реагирующими антителами к другим патогенам.

Для подтверждения клинического диагноза при получении отрицательного результата бактериологического обследования.
В целях ретроспективного подтверждения диагноза.
При позднем обращении больного, назначении антибактериальной терапии.
Затяжное течение заболевания.
Профилактическое обследование декретированной группы лиц сферы обслуживания.

Интерпретация результатов исследований содержит информацию для лечащего врача и не является диагнозом. Информацию из этого раздела нельзя использовать для самодиагностики и самолечения. Точный диагноз ставит врач, используя как результаты данного обследования, так и нужную информацию из других источников: анамнеза, результатов других обследований и т.д.

Референсные значения: отрицательно. Условно-диагностический титр – 1:200 и более. При наблюдении в динамике, диагностически достоверный признак - более чем 4-кратное повышение (или падение) титров за 7-10 дней.

Для подтверждения клинического диагноза при получении отрицательного результата бактериологического обследования.
В целях ретроспективного подтверждения диагноза.
При позднем обращении больного, назначении антибактериальной терапии.
Затяжное течение заболевания.
Профилактическое обследование декретированной группы лиц сферы обслуживания.

Для подтверждения клинического диагноза при получении отрицательного результата бактериологического обследования.
В целях ретроспективного подтверждения диагноза.
При позднем обращении больного, назначении антибактериальной терапии.
Затяжное течение заболевания.
Профилактическое обследование декретированной группы лиц сферы обслуживания.

Анализ крови на антитела к шигеллам Флекснера (с I-V, VI серотипы) и антитела к шигеллам Зонне с помощью серологической реакции РПГА позволяет выявить иммунный ответ на основные возбудители кишечной инфекции – дизентерия.

В каких случаях обычно назначают антитела к шигеллам?

Дизентерия (шигеллез) – инфекционное заболевание с преимущественным поражением толстого кишечника и ярко выраженными симптомами интоксикации: лихорадка, озноб, спутанность сознания, головная боль. Передается от больного человека через грязные руки, механизм передачи инфекции фекально-оральный. Инкубационный период в среднем 2 дня. Вызывают дизентерию несколько возбудителей рода Шигелла ( Shigella dysenteriae (A), Shigella flexneri (B) Shigella boydii (C), Shigella sonnei (D)), поэтому болеть данной инфекцией можно несколько раз. Но наибольшее эпидемиологическое значение в нашем регионе имеют 2 группы возбудителей: шигелла Зонне и шигелла Флекснера. Со стороны кишечника у больного наблюдается частый жидкий стул с примесью крови, слизи и схваткообразными болями в животе в первые дни болезни, далее частый необильный стул до 20-40 раз с болезненными тенезмами (ложными позывами). Заболевание может затягиваться при острой форме до 3-4 недель, при хронической форме более 3 месяцев. Может сформироваться бактерионосительство дизентерии. Иммунитет к дизентерии, т.е. выработка антител начинается с 3-5 дня заболевания с нарастанием титра антител через 10-14 дней, не зависит от приема антибактериальных препаратов и при излечении от инфекции организм освобождается от антител через 2-4 месяца. Поэтому иммунитет не стойкий, но специфический к разным серотипам и серогруппам возбудителей. Серологический метод обнаружения антител используют как дополнительный метод диагностики дизентерии при:

1. Длительном течении острой кишечной инфекции (более 1 недели)

2. Длительной хронической форме кишечной инфекции более 1 месяца

3. Выявлении бактерионосителей в эпидемиологических целях и при профилактических осмотрах дикретированных групп населения.

4. Для контроля излеченности через 2 месяца после перенесенной инфекции

Что именно определяется в процессе анализа?

Анализ крови на антитела к шигеллам позволяет выявить ответ иммунной системы в виде выработки специфических антител к основным серотипам из 2 групп возбудителей дизентерии.

Что означают результаты теста?

У здорового человека или при другой причине кишечной инфекции результат РПГА отрицательный. Получение титра антител к возбудителям дизентерии является основанием для постановки диагноза дизентерии. Анализ поможет инфекционисту в подтверждении различных форм инфекции. Для подтверждения острого заболевания необходимо два анализа крови на антитела к шигеллам (парные сыворотки) с интервалом в 10-14 дней. При этом количество антител в повторном анализе при остром заболевании повышается в 2-4 раза по сравнению с первым результатом.

Для постановки диагноза также используется анализ на дизентерию с помощью микробиологического посева: Посев на возбудителей кишечной инфекции (сальмонеллы, шигеллы) с определением чувствительности к антибиотикам.

Обычный срок выполнения теста:

Нужна ли специальная подготовка к анализу?

Специальная подготовка не требуется.

Оптимальные сроки взятия сыворотки — через 7–10 дней от первых проявлений болезни и в парной сыворотке через 10-14 дней после первого анализа.

Можно сдавать кровь в течение дня, не ранее, чем через 3 часа после приема пищи или утром натощак. Чистую воду можно пить в обычном режиме.

Читайте также: