Рпга с менингококковым диагностикумом

Обновлено: 24.04.2024

Антитела к возбудителю менингококковой инфекции (Neisseria meningitidis) – это специфические белки-иммуноглобулины, вырабатываемые иммунной системой в ответ на менингококкковую инфекцию и обеспечивающие иммунную защиту.

Синонимы русские

Противоменингококковые антитела, менингококковые антитела.

Синонимы английские

Anti-Neisseria meningitidis antibodies, Neisseria meningitidis antibodies.

Метод исследования

Реакция непрямой гемагглютинации (РНГА).

Какой биоматериал можно использовать для исследования?

Как правильно подготовиться к исследованию?

Не курить в течение 30 минут до исследования.

Общая информация об исследовании

Менингококковая инфекция – это высокозаразное заболевание с воздушно-капельным путем передачи, вызываемое N. Meningitidis. При ней происходит локальное поражение слизистой оболочки носоглотки (назофарингит) с последующей генерализацией инфекции в виде менингита (воспаления мозговых оболочек) и менингококцемии (менингококкового сепсиса).

Инкубационный период длится от 2 до 10 дней. Острый назофарингит характеризуется субфебрильной лихорадкой, головной болью, умеренной интоксикацией, кашлем и насморком со слизисто-гнойными выделениями. Менингит развивается резко, начинаясь внезапной лихорадкой и головной болью. Другие его симптомы: раздражение мозговых оболочек, светобоязнь, тошнота и рвота, психические нарушения, судороги, параличи. Менингококцемия начинается с лихорадки неправильного типа, геморрагической красно-фиолетовой сыпи и с явлений общей интоксикации вплоть до развития инфекционно-токсического шока.

В ответ на инфицирование N. meningitidis иммунной системой вырабатываются специфические антитела: на 2-3 сутки с начала заболевания в плазме крови появляются IgA, несколько позднее – IgG. Антитела класса IgA обеспечивают первичный иммунный ответ и уже через 1,5-2 месяца с момента появления в крови не выявляются, в то время как антитела класса IgG сохраняются пожизненно, сохраняя стойкий антимикробный иммунитет к данному серотипу возбудителя. Бактерионосительство протекает без каких-либо клинических проявлений и сопровождается повышением титра IgG в плазме крови.

Для чего используется исследование?

Для диагностики менингококковой инфекции при бактериальных и серозных менингитах или при подозрении на менингококцемию.
Чтобы выявить бактерионосительство.
Для дифференциальной диагностики заболеваний, протекающих со сходной с менингитом клинической картиной (с болезнью Фабри, субарахноидальным кровоизлиянием или субдуральной эмпиемией, нейролейкемией, карциномой, васкулитами, системной красной волчанкой, саркоидозом, мигренью).
Для определения целесообразности вакцинации против N. Meningitidis.
Чтобы оценить эффективность проведенной вакцинации.

Когда назначается исследование?

При симптомах менингококковой инфекции – на 1-3-й и на 7-10-й день с начала заболевания.
При подозрении на носительство Neisseria meningitidis.
Перед вакцинацией против менингококковой инфекции и через 3-4 недели после нее.

Что означают результаты?

Референсные значения: отрицательно.

Выявление суммарных антител к возбудителю бактериального менингита (N. meningitidis) свидетельствует о текущей менингококковой инфекции, бактерионосительстве или успешно проведенной вакцинации. Диагностический титр антител к менингококку для РНГА (реакции непрямой гемагглютинации) составляет 1:40 (у детей до 1 года – 1:20) и выше. Обычно с 5-6-го дня заболевания титры антител, выявляемых в РНГА, достигают 1:200 и выше. Диагностически значимым также считают не менее чем четырехкратное нарастание титра при парном исследовании сывороток, выполненном с интервалом в 7-10 дней.

Противоменингококковые антитела выявляются в высоких титрах (1:640 и выше) через 3-4 недели после вакцинации. На протяжении последующих 6-8 месяцев титр антител несколько снижается, но сохраняется на повышенном уровне в течение 3 лет.

иммунитет к N. Meningitidis, приобретенный вследствие текущей или недавно перенесенной менингококковой инфекции,
бактерионосительство N. meningitidis (менингококконосительство),
вакцинация против N. meningitidis в предшествующие 3 года.

отсутствие иммунитета к N. meningitidis в связи с отсутствием контакта с возбудителем в прошлом,
слабый иммунный ответ к N. meningitidis или его отсутствие из-за нарушений в иммунной системе.

Важные замечания

Иммунитет после перенесенной менингококковой инфекции нестойкий, возможно повторное заражение, особенно у пациентов из группы риска: без селезенки, с врождёнными анатомическими дефектами, нейрогенными кистами, врождёнными или приобретенными иммунодефицитами. Этим группам лиц обязательно нужно проводить вакцинацию.

Внешний вид упаковки и препарата может отличаться от изображённого на фотографии

Инструкция по применению

Описание

Действующим началом диагностикумов являются антигены серогрупп А, С, фиксированные на поверхности эритроцитов. При взаимодействии с сыворотками, содержащими антитела к указанным антигенам, наблюдается феномен агглютинации эритроцитов.

Состав

Диагностикум эритроцитарный менингококковый полисахаридный группы А или С, жидкий представляют собой 0,75 % взвесь в фосфатном буферном растворе (рН 7,2 ± 0,2) в концентрации 0,06 моль/л формалинизированных эритроцитов человека 0(1) группы крови, сенсибилизированных группоспецифическими полисахаридами N.meningitidis. Гомогенная суспензия коричневого цвета без хлопьев; при отстаивании образуется 2 слоя: плотный коричневый осадок эритроцитов и прозрачная желтоватая надосадочная жидкость 1 флакон – 3 мл.

Сыворотка диагностическая менингококковая серогруппы А или С адсорбированная кроличья сухая – пористая масса кремового цвета. 1 флакон –из 0,1 мл.

Поддерживающий раствор – 0,9 % раствор натрия хлорида – прозрачная бесцветная жидкость, рН от 6,5 до 7,5. 2 флакона – по 8 мл.

Планшет круглодонный для иммунологических реакций однократного применения - состоит из 8 рядов, каждый из которых включает в себя 12 лунок с прозрачным, бесцветным, круглым дном. 1 шт.

Показания для применения

Предназначен для выявления специфических антител к полисахаридным менингококковым антигенам в сыворотках крови человека в реакции пассивной гемагглютинации (РПГА).

Режим дозирования и способ применения

Приготовление растворов для РПГА.
Флакон с гомологичной сывороткой диагностической менингококковой серогрупп А, С адсорбированной кроличьей сухой вскрыть и добавить 1 мл прилагаемого 0,9 % раствора натрия хлорида, получив, таким образом, разведение 1:10, являющееся рабочим разведением.
Вскрытый флакон с гомологичной сывороткой диагностической менингококковой серогрупп А, С адсорбированной кроличьей сухой при разведении 1:10 в закрытом виде можно хранить при температуре от 2 до 8 ºС в течение одного месяца.
Диагностикум готов к применению. Перед вскрытием флакон с диагностикумом необходимо осторожно встряхнуть до получения гомогенной суспензии. В ходе работы встряхивание рекомендуется повторять.
Вскрытый флакон с диагностикумом в закрытом виде можно хранить при температуре от 2 до 8 ºС в течение одного месяца.
0,9 % раствор натрия хлорида. Готов к применению.

Проведение РПГА.
При контроле любого количества анализируемых сывороток обязательна постановка 1 ряда агглютинации с сывороткой гомологичной диагностической менингококковой серогрупп А, С адсорбированной кроличьей сухой.
Для постановки РПГА используют планшет для иммунологических реакций однократного применения. Готовят двукратные серийные разведения анализируемых сывороток в 0,05 мл прилагаемого 0,9 % раствора натрия хлорида начиная с 1:10 до 1:2560 и 1 ряд двукратного серийного разведения гомологичной сыворотки диагностической менингококковой серогрупп А, С адсорбированной кроличьей сухой, начиная с разведения 1:10, до удвоенного титра, указанного на этикетке флакона данной сыворотки.
В каждую из лунок с разведениями сывороток прибавляют по 0,025 мл гомологичного сыворотке диагностикума.

Обязательными контролями являются:

1. Контроль гомологичной сывороткой диагностической менингококковой серогрупп А, С адсорбированной кроличьей сухой и анализируемой сыворотки, которые в разведении 1:10 в объеме 0,05 мл вносят в две контрольные лунки.

2. Контроль на отсутствие спонтанной агглютинации диагностикума, для чего в 2 лунки, содержащие по 0,05 мл 0,9 % раствора хлорида натрия, добавляют по 0,025 мл диагностикума.

Планшет встряхивают и помещают на 1,5-2 ч в термостат при температуре (37 + 1) ºС, после чего проводят учет результатов.

Меры предосторожности при применении

Свойства менингококков. Антигенная структура менингококков. Антигены менингококков. Полисахариды капсулы. Белки клеточной стенки менингококков.

Морфологические, культуральные и биохимические свойства менингококков (исключая способность ферментировать мальтозу) аналогичны таковым у гонококков; сходство подтверждает и то, что ДНК обоих микроорганизмов гомологична на 80%.

Антигенная структура менингококков. Антигены менингококков

N. meningitidis имеет сложную антигенную структуру; некоторые компоненты относят к факторам вирулентности, другие индуцируют выработку защитных AT.

Полисахариды капсулы менингококков. Представлены полимерами аминосахаров и сиаловых кислот. Различия в их строении обусловливают разделение менингококков на серогруппы А, Д С, Д Я, I, К, L, X, Y Д 29E и W-135. Штаммы серогруппы А вызывают эпидемические вспышки, а В, С и Y — спорадические заболевания. Высокая вирулентность представителей серогруппы А связана, по-видимому, с их высокой инвазивностью. Систематизацию менингококков осложняет высокая изменчивость и лабильность Аг. Лабильность поверхностного Аг, характерная для штаммов, обитающих в носоглотке, приводит к выделению у одного и того же индивидуума серологически различных штаммов.

Белки клеточной стенки менингококков

По составу белков клеточной стенки серогруппы В и С подразделяют на серовары. Менингококки серовара 2 входят в состав серогрупп В или С и представляют наиболее распространённые возбудители заболеваний человека. Белки серовара 2 химически и серологически идентичны у бактерий обеих групп и индуцируют образование AT, проявляющих комплементопосредованную бактерицидность.

Группы антигенов менингококков

Родовые антигены менингококков (белки и полисахариды) — общие для всех нейссерий.

Видовые антигены менингококков (по-видимому, белковой природы) до настоящего времени не выделены в чистом виде. Группоспецифичные Аг (гликопротеиновый комплекс) — детерминанта групповой специфичности (определяют соответствующими антисыворотками). Капсульные Аг групп В и С частично идентичны Аг некоторых штаммов Escherichia coli. Типоспецифичные Аг (белки) разграничивают серовары внутри серогрупп В и С. Их специфичность достаточно ограниченна — подобные Аг обнаруживают у представителей различных серогрупп, а также гонококков.

ЛПС клеточной стенки менингококков

По показателям токсичности для лабораторных животных активность ЛПС менингококков сравнима с эндотоксинами энтеробактерий. Они оказывают сенсибилизирующее действие и индуцируют феномен Шварцмана в концентрациях, в 5-10 раз меньших, чем ЛПС грамотрицательной кишечной микрофлоры. Для генерализованных форм менингококковой инфекции характерны кожные высыпания, не отличимые от таковых при феномене Шварцмана.

Информация на сайте подлежит консультации лечащим врачом и не заменяет очной консультации с ним.
См. подробнее в пользовательском соглашении.

Набор реагентов Диагностикум менингококковый Группы А предназначен для выявления специфических антител к полисахаридным менингококковым антигенам групп А, В, С в сыворотке крови человека в реакции пассивной гемагглютинации (РПГА).

ХАРАКТЕРИСТИКА НАБОРА

ПРИНЦИП МЕТОДА

Действующим началом диагностикумов являются менингококковые антигены серогрупп А, В, С, фиксированные на поверхности эритроцитов. При взаимодействии с сыворотками, содержащими антитела к указанным антигенам, наблюдается феномен агглютинации эритроцитов.

СОСТАВ НАБОРА

АНАЛИТИЧЕСКИЕ И ДИАГНОСТИЧЕСКИЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ

Диагностикум эритроцитарный полисахаридный групп А, В или С жидкий должен агглютинироваться в РПГА сывороткой диагностической менингококковой (гомологичной) неадсорбированой в разведении не ниже чем 1:320 (для диагностикумов групп А, С) и не ниже чем 1:80 (для диагностикума группы В).

Уровнем диагностических характеристик сыворотки крови здоровых людей следует считать разведение сыворотки не выше 1:40 с диагностикумом эритроцитарным менингококковым полисахаридным группы А; разведение не выше 1:10 с диагностикумами эритроцитарными полисахардиными серогрупп В и С. У здоровых детей до 5 лет уровень диагностических характеристик в два раза меньше указанных выше.

Время проведения анализа – 2 ч.

Набор реагентов рассчитан на проведение 8 исследований.

МЕРЫ ПРЕДОСТОРОЖНОСТИ

Анализируемые сыворотки, а также находящиеся с ними в контакте реагенты следует рассматривать как потенциально инфицированные, способные длительное время сохранять или передавать ВИЧ, вирус гепатита или любой другой возбудитель вирусной инфекции — обращаться с ними следует осторожно:

работать в резиновых перчатках;
при проведении РПГА необходимо пользоваться дозаторами переменного объема;
при завершении работы анализируемые сыворотки и находящиеся с ними в контакте реагенты, а также инструменты следует подвергать обработке дезинфицирующим раствором;
оборудование до и после работы протирать 70% этиловым спиртом.

Анализируемые сыворотки должны быть инактивированы в течение 30 мин при температуре 56 0 С.

Объективные результаты анализа гарантируются при выполнении следующих условий:

Диагностикум менингококковый Группы С предназначен для выявления специфических антител к полисахаридным менингококковым антигенам групп А, В, С в сыворотке крови человека в реакции пассивной гемагглютинации (РПГА).