Серологические маркеры инфекционных заболеваний что это такое

Обновлено: 24.04.2024

Иммуноферментный анализ (ИФА) — это метод выявления в крови специфических антител, представляющих собой молекулы иммуноглобулинов. Он отличается высокой точностью и чувствительностью, позволяет определить не только качественный, но и количественный состав антигенов и антител в организме. В медицине иммуноферментный анализ применяется для выявления болезней, которые провоцируют микроорганизмы различных классов — от вирусов до паразитов, а также для диагностики аутоиммунных заболеваний.

Особенности анализа ИФА

Иммуноферментный анализ состоит из двух компонентов — иммунной и ферментативной реакции. Иммунная реакция связывает биологические молекулы, элементы клетки или микроорганизма, которые пытаются выявить. Ферментативная реакция позволяет увидеть и измерить результат иммунологической реакции.

ИФА относится к непрямым методам диагностики, так как с ее помощью можно определить наличие антител к патогенному микроорганизму, а не самого возбудителя. Этот анализ рекомендуется выполнять совместно с ПЦР-диагностикой.

Важность иммуноферментного анализа несомненна: его применяют, если требуется определить стадию развития заболевания, провести мониторинг проведенного курса лечения, оценить ответ организма на лечение либо подобрать оптимальную схему терапии.

К преимуществам ИФА относят следующее:

высокая чувствительность (до 90%), позволяющая обнаружить микроорганизмы даже в том случае, если они присутствуют в минимальных концентрациях;
возможность выявить заболевание еще до проявления симптомов;
скорость проведения анализа и получения результатов;
возможность определить примерный срок заражения, а также тип течения инфекции (острая или хроническая);
выявление с высокой степенью достоверности микроорганизмов, которые невозможно определить путем применения других диагностических методов (посева, микроскопии и т.д.).

Показания к проведению иммуноферментного анализа крови

Методика ИФА позволяет выявить в крови любой антиген — не только собственный, но и чужеродный для организма. Ее назначают при подозрении на скрытую инфекцию. Показаниями для проведения этого анализа являются:

выявление различных инфекций (гепатиты, паразитарные инфекции, герпес, хламидии, токсоплазмоз, сальмонеллез, вирус Эпштейн-Барра);
определение содержания гормонов для оценки работы органов эндокринной системы — щитовидной железы, гипофиза, половых желез;
выявление и отслеживание онкомаркеров (ПСА у мужчин, фактор некроза опухоли и т.д.);
диагностика аутоиммунных заболеваний (системный васкулит, ревматоидный артрит, системная красная волчанка, синдром Шегрена).

Также иммуноферментный анализ позволяет определить наличие антител к вирусу у пациента после прививки.

ИФА не оказывает непосредственного воздействия на антиген: этот метод позволяет оценить реакцию организма на присутствие такого антигена.

Чаще всего для проведения иммуноферментного исследования используют сыворотку венозной крови, взятой у пациента натощак. Также для анализа могут использоваться околоплодные воды, спинномозговая жидкость, содержимое стекловидного тела и слизь цервикального канала и уретры.

Подготовка к анализу ИФА

Чтобы снизить риск ошибки при проведении иммуноферментного анализа, пациенту рекомендуют подготовиться к этой процедуре. Речь идет о том, чтобы в течение 7-10 дней до назначенного исследования:

прекратить прием антибиотиков, а также противовирусных и антигистаминных препаратов;
исключить из рациона продукты-аллергены (шоколад, мед, орехи, яйца);
отказаться от жирных, острых, жареных блюд, алкоголя, сладостей;
ограничить физические нагрузки;
избегать сильных эмоциональных потрясений.

За сутки до забора крови нужно прекратить курение.

Интерпретация результатов анализа

При выполнении иммуноферментного анализа выявляют антитела разных типов – иммуноглобулины классов M, A, G (JgM, JgA, JgG). Они появляются в разные промежутки времени.

IgM указывает на то, что инфекция находится на острой стадии развития. Этот иммуноглобулин появляется в крови на 4-5 день после предполагаемого заражения. Если выявляют IgM, то пациент в данный момент является больным.

IgG характеризует хроническую форму инфекционного процесса, а также свидетельствует о наличии стойкого иммунитета к антигену. Выработка этого иммуноглобулина происходит на 20-28 день с момента заражения. IgG может сохраняться в крови долгое время – несколько месяцев и даже лет.

IgA – иммуноглобулины, выявление которых указывает на переход острой формы инфекционного процесса в хроническую. Они вырабатываются на 14-20 день с момента заражения и сохраняются в крови больного около двух месяцев.

Анализ ИФА может демонстрировать разные комбинации этих иммуноглобулинов. В зависимости от сочетания, они указывают на определенный этап в развитии заболевания:

JgM (-), JgG (-), JgA (-). Иммунитет к инфекции отсутствует.
JgM (-), JgG (+), JgA (-). У больного имеется иммунитет, приобретенный после введения вакцины или выполнения прививки.
JgM (+), JgG (-/+), JgA (-/+). У пациента присутствует острая инфекция.
JgM (+), JgG (+), JgA (+). У больного протекает период обострения хронической инфекции.
JgM (-), JgG (+/-), JgA (+/-). У пациента имеется хроническая инфекция.
JgM (-). Пациент был заражен, но сейчас выздоровел.

Если ИФА направлен на исследование гормонов щитовидной железы, то его допустимые границы находятся в таких пределах:

При диагностике аутоиммунных заболеваний у пациента могут выявляться такие антитела:

Антинуклеарные (аутоантитела к антигенам ядра клеток). Они характерны для системных аутоиммунных заболеваний.
Антитела к растворимым нуклеарным антигенам. Такие компоненты проявляются при различных системных аутоиммунных процессах.
Антикардиолипиновые антитела IgG и IgM. Они характерны для антифосфолипидного синдрома.
Антитела к двухспиральной ДНК, которые являются специфичными для системной красной волчанки.
Ревматоидный фактор. Антитела такого типа выявляют при ревматоидном артрите, хотя они не специфичны конкретно для этого заболевания и могут обнаруживаться при других отклонениях, а также у абсолютно здоровых пациентов.

Сейчас ИФА-анализ широко используется для выявления антител к коронавирусной инфекции.

Реакция микропреципитации (РМП) – экспресс-метод диагностики сифилиса. Это исследование позволяет определить в крови пациента наличие или отсутствие возбудителей сифилиса. Сейчас оно проводится вместо реакции Вассермана (RW).

Суть анализа заключается в выявлении антител к кардиолипину — компоненту внутренней мембраны бактерий и митохондрий. Такие антитела формируются на стадии первичного сифилиса, в течение 7–10 дней после образования твердого шанкра. РМП может быть положительным и при других заболеваниях, при которых возможно разрушение тканей. Это связано с присутствием кардиолипина в качестве фосфолипида в различных клеточных мембранах.

Особенности анализа

Сифилис у человека вызывает бледная трепонема. Это одноклеточная бактерия, относящаяся к спирохетам. На ранних стадиях развития возбудитель заболевания активно размножается, но, в результате иммунных реакций, а также действия факторов неспецифического иммунитета, часть трепонем погибает.

Гибель клеток бактерии вызывает появление большого количества липоидных молекул из разрушенных клеточных мембран возбудителя сифилиса. Иммунная система формирует по отношению к ним защитные антитела.

Ткани, которые были повреждены действием бледной трепонемы, разрушаются. Клеточные митохондрии, которые при этом повреждаются, высвобождают фосфолипиды, в числе которых – кардиолипин. Последний представляет собой собственный антиген организма липидного происхождения. Он появляется в организме при разрушении клеток. Антиген схож с липидными антигенами бледной трепонемы.

Реакция микропреципитации – микрореакция крови на кардиолипиновый антиген (экстракт бычьей сердечной мышцы), который по своей природе схож с возбудителем сифилиса. Когда в пробу с кровью пациента вводится антиген, проводится проверка на ответную реакцию. Если в организме человека сформировались антитела к вирусу (защитные белки), то они отреагируют на этот реагент.

Качественная оценка реакции определяется по объему выпавшего осадка и величине хлопьев. Образование осадка оценивают в условных единицах, плюсами (+), от одного до четырех.

Результат РМП получают всего через 10-40 минут.

В отличие от RW, анализ РМП более чувствителен. В то же время он уступает первому по специфичности.

Это исследование позволяет не только выявить наличие инфекции в организме, но и проследить динамику течения заболевания.

Реакция микропреципитации – нетрепонемный тест, который позволяет определить заражение сифилисом через 1–2 недели с момента образования первичной сифиломы (твердого шанкра). Сифилома – клиническое проявление защитных процессов, куда входят местные клеточные и гуморальные специфические реакции, направленные на уничтожение бледных трепонем в месте их изначального внедрения в организм.

Показания к проведению

Анализ РМП назначают при обнаружении у пациента симптомов, характерных для сифилиса. Это:

повышение температуры до 37–38,5 градусов, ее сохранение в течение длительного времени;
общая слабость, сопровождающаяся кашлем и насморком;
регулярные суставные и мышечные боли;
локальное облысение;
образование на месте внедрения шанкра – язвы с твердым основанием и плотными краями;
появление багровых пятен на слизистой оболочке горла;
появление многочисленных пустул с белыми кончиками;
появление бледно-розовых пятен на коже, которые не причиняют боль и дискомфорт;
кондиломы багрового или фиолетового цвета.

На поздних стадиях сифилиса на коже образуются инфекционные бугры и гуммы, которые периодически изъязвляются и оставляют рубцы. Это сочетается с поражением головного мозга, сердечно-сосудистой системы, печени, костей, глаз.

РМП обязательно назначают лицам, которые проходят обследование для получения санитарной книжки. Также анализ показан при:

срочной госпитализации;
подготовке пациента к операции;
наличии ВИЧ;
беременности;
проверке состояния здоровья потенциального донора органов.

Также этот тест назначают пациенту, завершившему курс лечения сифилиса, для оценки его эффективности.

Расшифровка анализа

Качественный анализ на реакцию микропреципитации позволяет получить всего 2 результата: положительный и отрицательный.

Результат РМП может быть ложноположительным. Это бывает у пожилых людей, а также при наличии ряда заболеваний. Это:

СПИД;
туберкулез;
красная волчанка;
ревматоидный артрит;
хламидиоз;
сахарный диабет;
подагра;
лептоспироз;
тиреоидит;
мононуклеоз;
вирусный гепатит;
склеродермия.

При инфаркте миокарда анализ на определение антител к бледной трепонеме также может быть ложноположительным.

Для пациентов со всеми перечисленными заболеваниями и отклонениями РМП не может быть использован в качестве единственного метода определения сифилиса. Дополнительно антитела нужно определять методами ИФА (иммуноферментного анализа) или пассивной гемагглютинации.

Подготовка к анализу

Чтобы получить достоверный результат, к сдаче крови нужно подготовиться. Основные рекомендации:

сдавать натощак, после сна;
утром перед сдачей не завтракать, не пить кофе и чай, а также другие напитки (можно пить воду);
не курить перед анализом в течение двух часов;
в течение двух дней перед забором крови соблюдать щадящий режим питания, исключив жареное, жирное, острое, а также отказаться от спиртного;
за день до анализа ограничить повышенные физические и психоэмоциональные нагрузки.

Анализ РМП не сдают после физиотерапевтических процедур и инструментальных исследований (УЗИ, рентгенография и т.д.).

Оформите заявку на сайте, мы свяжемся с вами в ближайшее время и ответим на все интересующие вопросы.

Доступен анализ на нейтрализующие антитела класса g после вакцинации или перенесенного COVID-19. ( Количественное определение антител класса IgG к RBD-домену спайкового (S) белка SARS-Co-V-2, пре- и поствакцинальные).
АКЦИЯ: все анализы со скидкой 25 %. (переходите по ссылке)

Что за тест анти-RBD и что он показывает?

S белок (spike), или белок-шип;
N белок, или нуклеокапсидный белок:
М белок, или мембранный белок и
Е белок оболочки.

В ответ на заражение организм начинает реагировать выработкой антител различных классов. Именно их обнаружение позволяет установить факт инфицирования даже у бессимптомных пациентов. IgG начинают выявляться в среднем на 3-й неделе заболевания, перемещаясь по сосудистому руслу пациентов длительно время. При лабораторном тестировании возможно определение IgG к различным белкам вируса. Наличие антител класса IgG к нуклеокапсидному белку является показателем перенесенной инфекции.

Выявление IgG к рецептору связывающего домена (RDB) – позволяет судить о наличии защитного иммунитета, который мог сформироваться после перенесенного заболевания, так и после вакцинации. Антитела к рецептору связывающего домена S белка обладают нейтрализующими свойствами и препятствуют связыванию вируса с клетками человека, тем самым обеспечивая важную роль в определении индивидуального протективного (защитного) иммунного ответа к SARS-CoV-2.

Что такое рецептор-связывающий домен (RBD) ?

RBD - рецептор-связывающий домен, отвечающий за соединение коронавируса с клеткой человека, а точнее, с рецептором ACE2, который находится на мембране клеток человека, через который вирус проникает в клетку, где в дальнейшем размножается, вызывает заболевание и, выделяясь в окружающую среду, вызывает появление все новых и новых случаев новой коронавирусной инфекции COVID-19.

Кому показан и когда нужно сдавать тест на наличие антител к S-белку?

В первую очередь анализ на определение нейтрализующих антител класса g ( АНТИ RBD) показан лицам переболевшим новой коронавирусной инфекцией и лицам, после вакцинации препаратом "Спутник V" (Центр Гамалеи), а также другими вакцинами, разрешенными к применению на территории РФ. Рекомендуемый срок сдачи анализа на антитела после вакцины "Спутник V" 35-42 дня с момента постановки первого компонента. Для выявления антител после вакцины ЭпиваКкорона необходимы специальные тест системы "Вектор".

Чувствительность теста в диапазоне 80-99 %, специфичность 95-99%

Какие факторы влияют на уровень выработки антител ?

Иммунный ответ выше у пациентов старше 40 лет.
Лица старшего (60–85 лет) и среднего возраста (40–59 лет) имели значительно более высокие титры нейтрализующих SARS-CoV-2 антител, чем у более молодых пациентов (15–39 лет).
Уровень антител выше у госпитализированных больных. Имеется корреляция со степенью тяжести заболевания.
Уровни антител ниже у женщин.
Нейтрализующая способность антител выше у мужчин.
Уровни антител ниже у курильщиков. ( Курение не защищает от ковид-19 вопреки популярному мнению)
Уровни антител ниже у лиц, получающих противовоспалительные препараты.
Чем больше масса тела, тем выше будут титры антител.

Расшифровка результатов исследования

Меньше 1 BAU – контакта с коронавирусом не было
Меньше 10 BAU – исчезающе-малое количество антител, рекомендована ревакцинация.
10-100 BAU – средняя и слабая степень защиты организма
100-500 BAU – выраженный иммунитет к коронавирусу
Больше 500 BAU – мощное количество антител, высокий уровень иммунной защиты ( Максимальный уровень защиты)

Некоторые регионы планируют выдачу QR-кода при высоком уровне нейтрализующих антител даже у неофициально переболевших лиц ( Лица переболевшие дома с отрицательным тестом ПЦР). Анализ нужно будет сдать в специальных аккредитованных лабораториях.

Образец анализа на антитела к коронавирусу (ABBOT)

Ниже представлен обезличенный результат пациента нашего медицинского центра (Мужчина, 35 лет) после вакцинации "Спутником - V". Анализ сдан через месяц после получения второго компонента. Результат 2510,4 BAU\ml, что соответствует результату 17 678,8 АЕ/ml по технологии Abbot. По результату данного анализа можно констатировать, что у пациента сформировался сверхмаксимальный уровень антител к S-белку новой коронавирусной инфекции.

При каком уровне антител нужно прививаться от коронавируса?

Положительные антитела и опасность для окружающих

По последним данным наблюдений, пациентов с положительными антителами g нельзя приравнивать к лицам, у которых можно полностью исключить вероятность выделения вируса в окружающую среду. То есть, они в данном случае имеют инфекционный статус. Нейтрализующие антитела к вирусу ( АНТИ RBD) не могут полностью блокировать активное выделение вируса и свести к нулю опасность заражения окружающих через выделяемый секрет.

Как долго сохраняются защитные антитела к S-белку? ( АНТИ RBD) ?

Антитела могут сохранятся и определятся в сыворотке в течении 5-7 месяцев после начала заболевания. Уровень антител зависит от нескольких факторов, перечисленных выше. (Вес, пол, влияние вредных факторов, степень тяжести перенесенного заболевания и тд.). Все чаще и чаще высказывается в научных кругах мнение, что в связи с появлением нового штамма "Дельта" ( Индийский штамм) необходим более высокий уровень антител, поэтому рекомендуем периодически сдавать анализ, с целью отслеживания динамики титров антител. В случае снижения титров до низких показателей, следует рассмотреть вопрос о ревакцинации.

Авторы собрали 188 анализов крови у 136 пациентов, у которых заболевание сопровождалось характерными симптомами и протекало в различной форме, от легкой до тяжелой. В качестве контрольной выборки использовали плазму 108 человек с подтвержденным отрицательным ПЦР-тестом.

Ученые измеряли титры анти-S и анти-RBD антител в плазме. Первые специфически направлены на спайковый белок, или S-белок вируса целиком, а вторые — на рецептор-связывающий домен (RBD) S-белка, играющий ключевую роль в связывании вируса с клетками. Известно, что со временем в структуре S-белка и RBD-домена накапливаются мутации, которые снижают нейтрализующую способность антител. Задачей ученых было определить время, в течение которого антитела плазматических клеток сохраняют активность.

Результаты показали, что на пике иммунного ответа у выздоравливающих пациентов уровни анти-RBD иммуноглобулинов IgM и IgG были увеличены на 77 и 85 процентов соответственно, но затем в течение шести-пятнадцати месяцев упали до 4,5 и 11 процентов. Антитела IgM и IgG к S-белку показали значения чуть выше — соответственно 88 и 90 процентов в первые один-три месяца и вполовину меньше через 55-56 дней.

Титры специфических антител IgG к RBD и S-белку у 94 процентов пациентов достигли максимума через 15-28 дней после появления симптомов, потом, после прохождения пика ответа антител, они постепенно уменьшились примерно в четыре раза к концу шестого месяца, а затем оставались стабильными до 15 месяцев. Дольше сохранялся высокий уровень антител у тех, кто переболел COVID-19 в тяжелой форме.

Для сравнения ученые оценили уровень специфических IgG антител в плазме вакцинированных. Оказалось, что через 14-35 дней после введения первой дозы вакцины титры антител были аналогичны таковым у переболевших через шесть месяцев после заражения, а после второй соответствовали максимальному уровню естественного ответа у выздоравливающих пациентов.

Помимо основного штамма SARS-CoV-2, авторы проверили эффективность антител в отношении бета, гамма и дельта-вариантов (мутировавшие штаммы) в течение 15 месяцев после заражения и подтвердили, что нейтрализующая активность антител, хоть и в меньшей степени, сохраняется и для этих вариантов коронавируса.

Кроме того, ученые определяли уровень Т-клеточного ответа, пик которого был отмечен между третьим и шестым месяцами после заражения, за которым последовало значительное снижение через 12-15 месяцев. Однако интенсивность и продолжительность ответа при этом не зависели от тяжести заболевания.
Авторы исследования уточняют, что для оценки длительного иммунитета, сохраняющегося в В-клетках памяти, 15 месяцев, в течение которых проводили исследование, недостаточно, но очевидно, что у большинства перенесших COVID-19 пациентов циркулирующие В- и Т-клетки памяти и нейтрализующие антитела присутствуют в плазме крови до 15 месяцев после заражения.

Несколько слов про новый штамм "Омикрон"

Теперь можно получить COVID-сертификат при наличии антител класса G

Министерство здравоохранения РФ опубликовало приказ №58н о внесении изменений в приложения №3 и №4 к приказу от 12.11.2021 №1053 н, согласно которому с 21.02.2022 можно будет получить COVID-сертификат по уровню имеющихся антител класса G.
Приказ положение по необходимому уровню антител определяет следующим образом: сведения о положительных результатах на наличие антител класса G могут быть получены с помощью любого метода исследования. В основном анализ на антитела выполняется методами ИФА ( полуколичественный метод) и ИХЛА ( количественный метод, результат выдается в формате ВОЗ -BAU/ml).
Мы рекомендуем сдать анализ методом ИХЛА, так как он измеряется в международных (общепризнанных) единицах ВОЗ и срок выполнения 2-4 часа с момента доставки биоматериала в лабораторию.
Приказ не определяет минимально допустимый уровень, необходимый для получения сертификата. Достаточно получить по результатам анализа любое положительное значение.

Срок действия сертификата при наличии антител класса G при наличии положительного ПЦР теста - 1 год, при отсутствии положительного ПЦР теста - 6 месяцев.

Где можно сдать анализ на нейтрализующие антитела к S белку?

С 28.01.2021 года анализ можно сдать в нашем медицинском центре ВИП клиник-М, по адресу ул. Беломорская 11 к.1 (метро Беломорская) и на нашем филиале в Ховрино по адресу ул. Клинская 10 к.1. (ЭлиМед). Наши клиники работают без выходных и праздников. Услуга также доступна также на дому. Срок выдачи результата анализа 4-6 часов с момента постановки в работу.
Просим обратить внимание , что у нас можно сдать более 2000 видов анализов недорого, включая все исследования на COVID-19 , как в наших клиниках, так и на дому. Также у нас на регулярной основе действуют различные акции и скидки на лабораторные исследования и лечебно-диагностические приемы.

Серологический анализ крови – это лабораторное исследование, применяемое в целях диагностики инфекционных заболеваний и определения стадии инфекционного процесса.

Серологический анализ

Серологический анализ основан на том, что любая инфекция, любой чужеродный агент, попадая в организм, вызывает ответную реакцию нашей защитной системы. Обороняясь, иммунная система вырабатывает антитела, предназначенные для уничтожения антигенов - возбудителей инфекции и других чужеродных агентов. Каждому антигену соответствуют свои антитела, по их присутствию в крови можно сделать вывод о разновидности инфекции и её активности в организме.

В процессе исследования серологические реакции используются в двух направлениях:

для подтверждения диагноза в сыворотку добавляется антиген, соответствующий данному заболеванию, а ответная реакция показывает наличие (или отсутствие) антител.
если необходимо определить возбудителя инфекции (антиген не известен), в сыворотку добавляются антитела. Вид антител, вызвавших реакцию, укажет родовую и видовую принадлежность присутствующих микроорганизмов.

Когда назначается серологический анализ крови?

Серологический анализ крови назначается в следующих целях:

для диагностики заболевания, если при установлении диагноза требуется подтверждение наличия возбудителя заболевания;
в целях назначения курса лечения, так как различные возбудители могут по-разному реагировать на различные лекарственные препараты.

Серологический анализ крови – базовое исследование в гинекологии и урологии. Используется для диагностики ToRCH-инфекций и заболеваний, передающихся половым путём, прежде всего, ВИЧ, сифилиса (анализ на RW), герпеса, цитомегаловируса, хламидиоза, токсоплазмоза, краснухи, а также других заболеваний.

В других отраслях медицины серологический анализ используется для выявления вирусного гепатита (В и C), кори, эпидемического паротита, а также причин миокардитов, болезни легионеров, атипичной пневмонии, кишечных инфекций.

Серологический анализ используется также и для диагностики аутоиммунных заболеваний. В этом случае антитела вырабатываются к тканям самого организма и исследование позволяет их обнаружить.

Подготовка к серологическим исследованиям

Кровь на серологический анализ сдаётся натощак. Особой подготовки к исследованию не требуется.

Не занимайтесь самолечением. Обратитесь к нашим специалистам, которые правильно поставят диагноз и назначат лечение.

Читайте также: