Сопроводительная на сибирскую язву

Обновлено: 11.05.2024

Микробиологическая диагностика сибирской язвы. Принципы микробиологической диагностики сибирской язвы. Бактериоскопический, бактериологический, биологический, кожно-аллергический метод диагностики сибирской язвы.

Для микробиологической диагностики сибирской язвы берут содержимое пустулы, гнойное отделяемое из карбункула, кровь, мочу, мокроту, испражнения и рвотные массы. При патологоанатомическом исследовании забирают кусочки органов или целые органы. Все образцы следует помещать в герметичные сосуды и транспортировать закупоренными в опломбированные боксы или деревянные ящики.

Выделение возбудителя сибирской язвы. Проводят окраску материала по Граму и посев на обычные питательные среды. Затем определяют подвижность микроорганизмов из выросших колоний, изучают их биохимические и культуральные свойства. Серологические исследования проводят для распознавания больных и реконвалесцентов. Возбудитель сибирской язвы можно выявлять AT, меченными флюоресцеинами (особенно в смешанных культурах), диффузией в геле, в РСК, РИГА и ИФА.

Кожные пробы применяют для ретроспективной диагностики при эпидемиологических исследованиях. Проводят внутрикожное введение 0,1 мл бактериального аллергена (антраксина).

Реакция термопреципитации по Асколи имеет большое значение, так как позволяет идентифицировать возбудителей сибирской язвы при отрицательных результатах бактериологических исследований. Для прижизненной же диагностики эта реакция не имеет серьёзных преимуществ перед вышеуказанными бактериологическими и серологическими методами.

Биологическая проба при диагностике сибирской язвы. Заражение лабораторных животных проводят одномоментно с посевом на питательные среды. Материал можно вводить белым мышам (по 0,1-0,2 мл в спину), кроликам и морским свинкам (по 0,2-0,5 мл в область живота). Обычно мыши погибают через 1-2 сут, морские свинки и кролики— через 2-4 сут. При выживании животных наблюдение за ними продолжают в течение 10 дней. У павших животных исследуют печень, селезёнку, лимфатические узлы, почки, кровь из полостей сердца и места введения заразного материала. Затем проводят посев исследуемого материала на питательные среды.

Информация на сайте подлежит консультации лечащим врачом и не заменяет очной консультации с ним.
См. подробнее в пользовательском соглашении.

Цель занятия: Составление и оформление сопроводительных документов на отправку в ветеринарную лабораторию.

В Чердаклинскую ветеринарную лабораторию направляется:

патологический материал (ухо и кровь из надреза уха) от павшей коровы для исследования на сибирскую язву;

50 проб крови коров для исследования на бруцеллез;

3 пробы кормов (сена, комбикормов и силоса) для исследования на пригодность в корм крупному рогатому скоту.

Методические указания. На отправляемый в ветеринарную лабораторию материал оформляют сопроводительные документы в соответствии с правилами взятия патологического материала, крови, кормов и пересылки их для лабораторного исследования, утвержденными Главным управлением ветеринарии 24 июня 1971 г.

Сопроводительное письмо на патологический материал содержит следующие сведения: вид, пол, возраст животного, от которого взят материал для исследования; его номер или кличка; число банок с материалом; характер исследования; краткое описание клинических признаков и патологических изменений; какая помощь была оказана животному; какие лекарственные средства применялись.

При направлении проб крови для серологического и гематологического исследования на бруцеллез, лейкоз и другие болезни сопроводительное письмо направляется в лабораторию с приложением описи проб в 2 экземплярах.

При посылке образцов кормов указывают название корма, дату взятия образца, угодье. Если корм получен с комбикормового завода, следует указать, с какого именно.

1.Составить сопроводительный документ к патологическому материалу.

Сопроводительная на патологический материал.

р. п. Чердаклы, ул. Труда, 7.

Корова заболела 24 апреля 2005г., пала 25 апреля 2005г.

Клинические признаки: была в возбужденном состоянии, скрежетала зубами, совершала манежные движения, наблюдались судороги, ускоренное дыхание, цианоз слизистых оболочек, резко повысилась температура — до 42°С; затем наступило нарушение равновесия, появились кровянистые истечения изо рта и носа, выделение кала с примесью темной крови из анального отверстия и темно-красной мочи.

Труп сильно вздут, трупное окоченение слабо выражено, из естественных отверстий сочится пенистая кровянистая жидкость, видимые слизистые оболочки цианотичны, усеяны многочисленными точечными и мелкопятнистыми кровоизлияниями. Труп не вскрыт.

Предположительный диагноз — сибирская язва.

Дата отправки материала — 25 апреля 2005 г.

2.Составить сопроводительный документ к пробам крови.

Сопроводительная

Дата поступления материала — 25 апреля 2005г.

Доставлено проб — 50.

Забраковано проб — нет.

р. п. Чердаклы, ул. Труда, 7.

Условия задания. В Лаишевскую ветеринарную лабораторию направляется:

- патологический материал (ухо и кровь из надреза уха) от павшей коровы для исследования на сибирскую язву;

- 50 проб крови коров для исследования на бруцеллез;

- 3 пробы кормов (сена, комбикормов и силоса) для исследования на пригодность в корм крупному рогатому скоту.

Сопроводительный документ к патологическому материалу

В Лаишевскую районную ветеринарную лабораторию. Адрес: Республика Татарстан, р.п. Лаишево, ул. Речная, 27.

Корова заболела 24 мая 2019 г., пала 25 мая 2019 г.

Клинические признаки: была в возбужденном состоянии, скрежетала зубами, совершала манежные движения, наблюдались судороги, учащенное дыхание, цианоз слизистых оболочек, резко повысилась температура - до 42 0 С; затем наступило нарушение равновесия, появились кровянистые истечения изо рта и носа, выделение кала с примесью темной крови из анального отверстия и темно-красной мочи.

Предположительный диагноз - сибирская язва.

Дата отправки материала - 25 мая 2019 г.

Главный ветеринарный врач

Сопроводительный документ к пробам крови

Отметка лаборатории

Дата поступления материала 25 мая 2019 г.

Доставлено проб - 50.

Забраковано проб - нет.

В Лаишевскую районную ветеринарную лабораторию. Адрес: Республика Татарстан, р.п. Лаишево, ул. Речная, 27.

Дата взятия крови - 25 мая 2019 г.

Список животных, у которых взята кровь для исследования:

Возраст, масть животного

Инвентарный номер (кличка)

Дата отправки материала - 25 мая 2019 г.

Ветврач, направивший пробы, Ветврач, проводивший исследование,

М. М. Ханов Л. И. Иванова

Сопроводительный документ к пробам кормов

В Лаишевскую районную ветеринарную лабораторию. Адрес: Республика Татарстан, р.п. Лаишево, ул. Речная, 27.

сено – 2 по 1 кг

комбикорма - 2 по 1 кг;

силос – 3 по 1 кг.

Лечение с применением внутрь касторового масла, отвара льняного семени и диетическое кормление болтушкой из муки и отрубей оказывают положительное влияние на состояние больных коров.

Считаем целесообразным исследовать сено на наличие ядовитых растений, комбикорма - на микотоксины и силос - на содержание уксусной и масляной кислот.

От подозрительной туши берут селезенку, пораженные л/у, измененные участки ткани и направляют в лаборатория для бак.исследования. При установлении бактериоскопическим исследованием сиб.язвы (Гр+, неподвижная палочка, сафранином окр капсулы) тушу с вн.органами и шкурой уничтожают сжиганием, не дожидаясь бак.исследования. Мазки готовят из неразложившегося материала, окраш. по Грамму, сафранином. В мясе микробы лучше обнаруживаются через 2 ч после смерти. Одновременно – бак.иссл – высевы на косой агар, МПБ, заражают белых мышей. На МПА: серо-белые, шероховатые колонии. МПБ: крупные хлопья, осадок.Для диффер – на гемолит активность, жемчужное ожерелье, сибиреязв фаг. РП: к 0,3 экстракта столько же сыворотки – кольцо преципитации через 5 мин + контроль.

Предубойная и послеубойная диагностика туберкулеза с/х животных. Ветсаноценка продуктов убоя

Хрон. протекающая инф. б-нь, хар-зующаяся образованием в различных органах и тканят специф. узелков – туберкулов, склонных к творожистому распаду или обызвествлению. Возб. – Mycobacteriumtuberculosis– слегка изогнутая, неподвижная, кислотоустойчивая палочка.

Предубойная: завис от локал-ции. При поражении легких – кашель, опорно-двиг.апп. – хромота, вымени – бугристость, хлопья в молоке. Для прижизненной диагностики – туберкулинезацию.

Послеубойная: в паренхим. орг. – творожистые образования в виде бугорков лимфоидного и эпителиоидного происх. Не сод. кров. сосудов – подвержены некрозу и творожистому распаду, обызвествлению (хрустят при разрезе). В остр случ. – сливаются м/собой. Одновр – разрушение тк орг. Нефрит указ на генерализ процесса. У крс – чаще легкие, на разрезе очаги розов-серого цв, творожист массу. Жемчужница – гранулематозные разрастания. Пораж бронхиальные и средостенные л/у – плотные, бугричтые. В селезенке и печени – мелкие гнойные, творожистые или известковые бугорки. Вымя твердое, бугристое. Свиньи – чаще нижнечелюстные, шейные, мезентеральные л/у, реже легкие, селезенка, печень. Кишечник, мышцы - редко. Птиц – кости.

Лабораторная: мазки из очагов красят по Цилю-Нильсону, окраш в красный цв – тонкие длин палочки.

ВСЭ: при генерализ процессе и истощенные – на утилизацию. Средней и высшей Упит-ти при поражении л/у, 1 органе, непораженные – на проварку. Пораженные органы – на утилизацию. Плевру, брюшину – снимают, утилизируют, тушу – на проварку. Внутренний жир вытапливают. Кроме проварки – на консервы, мясной хлеб. Шкуры после посолки – без ограничений. Свиные при наличии пораже в нижнеч л/у – зачищают, голову – на проварку, тушу – без ограничений. При очагах на брыжейке – киш-к утилизируют, туши и внут орг – без ограничений.

Предубойная и послеубойная диагностика бруцеллеза животных. Ветсаноценка продуктов убоя

Инф, хрон б-нь, пораж домаш и некот диких жив. Заражение: контактное, алиментарное. Возбудитель – р Brucella (abortus, suis, melitetnsis) – маленькая, овальная, аэробная бактерия, неподвижная, Гр-, окраш по Козловскому. При 70гр – погибает 5 мин, 5% известь – 2 ч.

Предубойная: крс – аборты на 5-8 мес, задержка последа, эндометриты, маститы, бурситы. Свиней – аборты на 60-90 д, артриты, орхиты, эпидидимиты. Лош – гнойно-восп суставов, в обл холки, свищи.

Послеубойная: крс - бурситы, абсцессы конечностей, орхиты, эпидидимиты, вагиниты, метриты. Л/у увеличены, в печени, почках, селезенке – абсцессы. Мрс – маститы, артриты, узелки под капсулой почек. Свиньи – артриты, орхиты, на слиз матке – гнойнички, в п/к клетчатке, селезенке – инкапсулированные абсцессы.

ВСЭ: выпускают после проварки. При отсут симптомов, но положит реагир – без ограничений. Мясо из неблагопол хоз-в – переработка на вареные колбасы. Мясо мрс – переработка на колбасу. Субпродукты – на проварку, колбасы. Вымя – на проварку. Шкуры – после дезинфекции.

Серологические методы лабораторной диагностики многих инфекционных заболеваний основаны на принципах иммунитета. В понятие-иммунитет входит не только представление о невосприимчивости к повторному заражению после перенесённой болезни, но и представление о наступающих в крови изменениях, которые вызываются реакцией организма на попадающий в него антиген в виде образования соответствующих антител.

Одними из первых изученных антител были агглютинины. Свойство их заключается в следующем: если в животный организм вводить каких-либо микробов, то сыворотка крови получает способность, даже будучи разведённой во много раз, склеивать этих микробов. Такое явление объясняется наличием в сыворотке крови агглютининов. Антиген, вызывающий появление в крови агглютининов, носит название агглютиногена.

Если иммунизировать кролика отмытыми эритроцитами барана или другими клеточными элементами и к разведённой во много раз сыворотке подготовленного таким образом кролика прибавить эритроциты барана, то получится полное растворение этих эритроцитов. Такое свойство обусловливается появлением в крови кролика после обработки его клеточными элементами так называемых гемолизинов—веществ растворяющих эритроциты. Подобные явления получаются при иммунизации животного бактериями: в крови его образуются соответствующие лизины (бактериолизины и т. д.).

Далее, если иммунизировать животное чуждым для него раствором белка животного или растительного происхождения, то сыворотка подготовляемого животного получает особое свойство: если на такую сыворотку наслоить раствор того белка, который получило животное, даже в больших разведениях, то на границе двух соприкасающихся жидкостей получается колечко осадка—преципитат. Появление этого преципитата зависит от наличия в сыворотке так называемого лреципитина. Белок, который вызвал появление преципитииов в организме кроликов, называется преципнтиногеном.

Агглютинины, гемолизины, бактериолизины и другие вещества, образующиеся в крови животного, являются одними из многих веществ, появляющихся в результате соприкосновения организма с инфекционным началом. Наличие их в крови улавливается соответствующими диагностическими реактивами. Некоторые реактивы нашли своё практическое применение при диагностике отдельных инфекционных заболеваний животных.

В настоящем справочнике мы даём описание методов серологических реакций, применяемых в лабораторной практике при диагностике некоторых инфекционных заболеваний.

1. Методика постановки реакции преципитации на сибирскую язву

Реакцию преципитации применяют для диагностики сибирской язвы как при исследовании кожевенного сырья в лабораториях Асколи, так и в диагностических бактериологических лабораториях, как подсобную реакцию при бактериологических исследованиях на сибирскую язву.

Исследование кожевенного сырья на сибирскую язву при помощи реакции преципитации ведут холодным способом после предварительной стерилизации взятых проб. Доставленные в лабораторию пробы стерилизуют в автоклаве при 11/2 атмосферах в течение получаса или при 1 атмосфере в течение одного часа. После стерилизаций пробы охлаждают и затем измельчают. Измельчённые пробы должны быть весом не менее 1 г. Нумерация банок должна соответствовать номерам проб.

Экстрагирование проб производят холодным способом в материальных банках ёмкостью до 50 г.

Пробы от свиных шкур экстрагируют горячим способом в пробирках на водяной бане при кипячении в течение 30 минут.

Экстрагирующая жидкость разливается в отношении 1 : 10. В качестве экстрагирующей жидкости берут физиологический раствор (0,85% очищенной поваренной соли), к которому добавляют 0,3 о/о кристаллической карболовой кислоты для предотвращения роста бактерий и получения легко фильтруемых, прозрачных экстрактов. Лучшая температура для экстрагирования 8—14° С. Добавление карболовой кислоты особенно необходимо при температуре помещения от 14 до 20°С. Продолжительность экстрагирования—от 16 до 20 часов.

Экстракты фильтруют через воронки в укороченные бактериологические пробирки. В качестве фильтра употребляют асбестовую вату (нейтральную). Экстракты после фильтрации должны быть прозрачны. Если полученный фильтрат мутный, то допускается вторичная фильтрация экстрактов. При этом первую порцию второго фильтрата, который может содержать малое количество преципигиногена, выбрасывают.

Порядок применения сыворотки. Перед употреблением сыворотка должна быть проконтролирована посредством стандартного антигена и экстракта из заведомо сибиреязвенного материала (желателен материал такого же рода, как подвергаемый исследованию). Сыворотка должна давать ясно положительную реакцию через 30 секунд (до 1 минуты) со стандартным антигеном и до 5 минут—с экстрактом из заведомо сибиреязвенной кожи.

Лаборатории, применяющие преципитирующую сибиреязвенную сыворотку, должны иметь в своём распоряжении не менее 2—3 различных серий для взаимного контроля. Кожи, давшие положительную или сомнительную реакции на сибирскую язву, должны быть повторно экстрагированы и проверены повторно с двумя—тремя различными сериями сывороток. Сыворотка, употребляемая для реакции, должна быть прозрачной. Из фладсонов, с хорошо отстоявшейся сывороткой, возможно применение её без предварительного филь-трования при условии осторожного насасывания, без взбалтывания осадка на дне флакона. Сыворотки, имеющие муть даже после фильтрования через асбест, не должны применяться. Нельзя также применять сыворотки непосредственно после транспортировки или взбал-тывания их. В таких случаях сыворотке нужно дать отстояться не менее 10—15 дней, так как фильтрование не даёт той прозрачности, какая достигается путём отстоя. Сыворотка должна транспортироваться в тёплое время года (с 1 апреля по 1 ноября). В зимнее время сыворотку следует пережить в условиях, исключающих замораживание (в тёплом вагоне), так как тёплая упаковка

Соединение компонентов. Компоненты при реакции преципитации соединяют наслаиванием профильтрованных прозрачных экстрактов на разлитую и проконтролированную преципитирующую сыворотку. Сыворотку и экстракт для реакции берут по 0,25—0,3 см 3 . Можно наслаивать экстракт на разлитую сыворотку или подслаивать сыворотку под экстракт пастеровской пипеткой. Реакцию учитывают в зависимости от активности преципитирующей сыворотки в течение 10—15 минут. Реакцию с экстрактами из мокросолёного и сухосолёного сырья учитывают в течение 20 минут.

Диагностическую оценку реакции производят при проходящем свете на чёрном фоне. В тех пробирках, где граница между, сывороткой и экстрактами нерезко выражена, реакцию не учитывают и ставят вновь с тем же экстрактом.

Если материал был сибиреязвенным, то на месте соприкосновения экстракта с сывороткой через 1—15 минут появляется различной резкости серовато-белый диск (кольцо).

При сомнительных реакциях исследование повторяют. В тех случаях, когда вторично получается сомнительная реакция, исследуемая кожа считается сибиреязвенной.

Вся посуда для реакции преципитации должна быть чистой, прозрачной. Посуду промывают в тёплой солёной (1—2 о/о поваренной соли) воде при помощи волосяных ершей и щёток с последующим промыванием в чистой воде. Улелгутовские пробирки промывают в дестиллированной воде. После мытья посуду просушивают.

Ежедневно перед началом работы ставят следующие контроли:

а) преципитирующие сыворотки и стандартный антиген или экстракт из заведомо сибиреязвенной кожи (реакция положительная);

б) преципитирующие сыворотки и экстракт из заведомо здоровой кожи (реакция отрицательная);

в) нормальная сыворотка и экстракт из заведомо сибиреязвенной кожи или стандартный антиген (реакция отрицательная);

г) преципитирующая сыворотка и экстрагирующая жидкость (реакция отрицательная).

При исследовании методами преципитации лаборатория должна сообщить о положительных реакциях старшему районному (городскому) ветеринарному врачу, в район, откуда материал поступил на исследование.

Читайте также: