Среды для выделения стрептококков и стафилококков

Обновлено: 27.03.2024

Микробиологическая диагностика стрептококка. Диагностика стрептококковой инфекции. Выявление стрептококка. Выделение стрептококка.

Основу микробиологической диагностики стрептококковой инфекции составляют выделение и идентификация возбудителя. При этом обычно биохимические характеристики изолятов не изучают. Прочие методы диагностики стрептококковой инфекции имеют различные ограничения.

Через 24 ч на КА стрептококки группы А образуют блестящие вязкие колонии (рис. 2, см. цветную вклейку). В жидких средах бактерии дают придонный, иногда поднимающийся вверх рост. Весьма информативные методы раннего выявления стрептококков — определение чувствительности к антимикробным агентам методом дисков.

Наиболее часто их используют для идентификации стрептококков в мазках из зева. Для дифференцировки стрептококков группы А от прочих b-гемолитических стрептококков применяют тест чувствительности к бацитрацину. Более чем в 99% случаев изоляты стрептококков группы А чувствительны к бацитрацину, тогда как представители других серогрупп обычно устойчивы (рис. 12-8). Также можно применить тест чувствительности к триметоприм-сульфаметоксазолу.

Микробиологическая диагностика стрептококка. Диагностика стрептококковой инфекции. Выявление стрептококка

Стрептококки групп А и В обычно чувствительны к действию антимикробного агента.

По сравнению с чувствительностью к бацитрацину более специфичен тест гидролиза пиррол идонил-b-нафтиламида (ПИР-тест). S. pyogenes — единственный стрептококк, дающий положительную реакцию. Для этого в пробирки вносят полоски фильтровальной бумаги, пропитанные ПИР. Под действием бактериальных пептидаз ПИР расщепляется до b-нафтиламида, и после внесения 0,01% раствора p-диметиламиноциннамальальдегида полоски окрашиваются в вишнёво-красный цвет.

Стрептококки группы А легко можно выявить в мазках из зева, используя коммерческие наборы; групповой А-Аг экстрагируют химическими реагентами или ферментами и идентифицируют в реакциях латекс-агглютинации, коагглютинации или ИФА. Для экспресс-диагностики ревматического процесса и гломерулонефрита можно определять AT к стрептолизину О или стрептодорназе; серологические исследования также позволяют выявить носителей. Следует помнить, что AT к стрептолизину О не образуются при кожных инфекциях, вызываемых стрептококками группы А.

Лечение стрептококковой инфекции

Основу лечения стрептококковой инфекции составляет адекватная антибактериальная химиотерапия. Лечение ревматизма проводят пенициллинами короткого действия, профилактику — пенициллинами длительного действия (бициллин-5), причём антибиотикопрофилактику предпочтительно проводить круглогодично.

Информация на сайте подлежит консультации лечащим врачом и не заменяет очной консультации с ним.
См. подробнее в пользовательском соглашении.

является высокопитательной средой, которую применяют для стимуляции роста притязательных кокков и других микроорганизмов при выделении гемокультур и в патогенетических исследованиях.

Эта среда является стандартной неингибирующей средой для дифференциации и подсчета бактерий в молоке.

используется в качестве эффективной основы для приготовления кровяного, шоколадного агаров, а также различных селективных и дифференциальных сред
FD030 *Staph-Strepto Supplement Селективная добавка для выделения стафилококков и стрептококков
FD031 *Strepto Supplement Селективная добавка для выделения стрептококков

Эта среда является средой общего назначения и используется также для культивирования прихотливых микроорганизмов из клинического материала
FD031 *Strepto Supplement Селективная добавка для выделения стрептококков

в качестве селективной дифференциальной среды используют для быстрого выделения стрептококков, вызывающих мастит у крупного рогатого скота

для определения и подтверждения присутствия энтерококков, как индикаторов фекального загрязнения воды и других материалов

Среду рекомендуют в качестве среды общего назначения для культивирования широкого круга микроорганизмов из крови, особенно, стрептококков, а также возбудителя дифтерии.

Эту среду в качестве селективной рекомендуют использовать для подсчета энтерококков в воде поверхностных источников методом мембранных фильтров или при непосредственном посеве на среду в чашке.
FD057 *TTC Solution 1% (pack of 5 vials of 10 ml each) 1%-ный раствор трифенилтетразолия хлорида (5 флакончиков по 10 мл)
FD093 *Brom Cresol Purple Бромкрезоловый пурпурный

для определения и подсчета энтерококков в пробах воды различных категорий, а также для исследования фекалий и других материалов
FD057 *TTC Solution 1% (pack of 5 vials of 10 ml each) 1%-ный раствор трифенилтетразолия хлорида (5 флакончиков по 10 мл)

L.S. Differential Medium Base (Lactobacillus Streptococcus Dif-ferential Medium Base)
Дифференциальная среда L.S. (для молочнокислых бактерий)

для получения обильного роста и дифференциации лактобактерий и стрептококков по культуральным свойствам, восстановлению ТТХ и казеиновой реакции
FD057 *TTC Solution 1% (pack of 5 vials of 10 ml each) 1%-ный раствор трифенилтетразолия хлорида (5 флакончиков по 10 мл)

для выделения из смешанных культур стрептококков, особенно Streptococcus mitis, Streptococcus salivarius, Enterococcus faecalis, которые дают на кровяном агаре альфа-гемолиз или относятся к негемолитическим
FD052 Теллурит калия 1% раствор (5 флакончиков по 10 мл)

в качестве селективной среды используют в диагностических исследованиях для определения энтерококков и их дифференциации от других кокков

Streptococcus Lactis Differential Agar Base
Основа дифференциального агара для молочнокислых стрептококков

для дифференциации утилизирующих и не утилизирующих цитрат вариантов Lactococcus lactis и Lactococcus lactis подвида cremoris

для селективного выделения и подсчета всех вариантов стрептококков, включая b -гемолитические группы А

для селективного выделения и подсчета всех вариантов стрептококков, включая b -гемолитические группы А

Эти среды рекомендуют для селективного выделения и подсчета всех вариантов стрептококков, включая b-гемолитические группы А.

Состав**:

** Состав выверен и доведен до соответствия необходимым параметрам

Приготовление:

Размешать 45,6 г порошка М304 или 30,6 г порошка М303 в 1000 мл дистиллированной воды. Подогреть до кипения для полного растворения частиц. Если предполагается использовать среду в тот же день, автоклавирование не требуется. В противном случае стерилизовать автоклавированием при 0,9 атм (118°С) в течение 15 мин. НЕ ДОПУСКАТЬ ПЕРЕГРЕВАНИЯ СРЕДЫ.

Предупреждение: Азид натрия имеет тенденцию к образованию взрывчатых соединений с металлами, поэтому рекомендуется использовать много воды для удаления остатков среды.

Принцип и оценка результата:

Данные среды основаны на прописи Pike (1) предложенной для селективного выделения стрептококков из различных материалов, особенно обильно контаминированных сопутствующей микрофлорой (2). Другими авторами (3) показана возможность использования этих сред для выделения b-гемолитических стрептококков группы А.

Папаиновый перевар соевой муки, гидролизат казеина, соли и глюкоза служат источником необходимых питательных веществ для роста стрептококков. Азид и сульфит натрия подавляют рост грамположительных палочек, а кристаллический фиолетовый – рост стафилококков. Вместе с тем указанные ингибиторы в данных концентрациях не подавляют рост стрептококков, поэтому среды можно использовать для выделения и культивирования стрептококков в санитарно-эпидемиологических и клинических исследованиях. На этой среде активно подавляется рост колиформных бактерий, протеев, псевдомонад и бацилл, но некоторые стафилококки и пневмококки могут давать на ней рост. Все колонии стрептококков, выросшие на данной среде, нуждаются в дальнейшей идентификации.

Контроль качества:

Внешний вид порошка:

Гомогенный сыпучий желтый порошок.

Плотность готовой среды:

Образуется среда, соответствующая по плотности 1,5%-ному агаровому гелю (М304).

Цвет и прозрачность готовой среды:

Среда имеет светло-янтарную окраску, прозрачна или слегка опалесцирует, если в чашках Петри или пробирках формируется гель.

Кислотность среды:

При 25°С водные растворы М304 (4,56% вес/об) или М303 (3,06% вес/об) имеют рН 7,4 ± 0,2.

для выделения и подсчета коагулазоположительных стафилококков в пищевых продуктах и другом исследуемом материале
FD046 *Egg Yolk Tellurite Emulsion (100 ml per vial)
Эмульсия яичного желтка с теллуритом
FD045 *Egg Yolk Emulsion (100 ml per vial)
Эмульсия яичного желтка (100 мл)
FD047 *Potassium Tellurite 3.5%
Теллурит калия (3,5%) раствор
FD069 *B P Sulpha Supplement
Добавка с сульфаметазином для среды Бэрда-Паркера

для выделения и культивирования (после добавления крови) многих притязательных микроорганизмов, в том числе таких возбудителей инфекций, как стрептококки и нейссерии

является высокопитательной средой, которую применяют для стимуляции роста притязательных кокков и других микроорганизмов при выделении гемокультур и в патогенетических исследованиях.

Эта среда является стандартной неингибирующей средой для дифференциации и подсчета бактерий в молоке.

Среду с добавкой плазмы используют для первичного выделения и дифференциации Staphylococcus spp. из патологического материала или для идентификации чистых культур

Среду с добавкой плазмы используют для одновременного определения ферментации маннита и плазмакоагулазы при дифференциации Staphylococcus spp.

используется в качестве эффективной основы для приготовления кровяного, шоколадного агаров, а также различных селективных и дифференциальных сред
FD030 *Staph-Strepto Supplement Селективная добавка для выделения стафилококков и стрептококков

Эта среда является средой общего назначения и используется также для культивирования прихотливых микроорганизмов из клинического материала

для определения дезоксирибонуклеазной активности у бактерий и грибов, в частности, у клинических штаммов стафилококков
FD051 *Toluidine Blue Толуидиновый синий

Fermentation Medium for Staphy-lococcus and Micrococcus
Дифференциальная среда для стафилококков и микрококков

Этот бульон с добавлением теллурита калия используют для селективного обогащения Staphylococcus aureus в пищевых материалах

для оценки общего количества стафилококков в пищевых материалах
FD045 *Egg Yolk Emulsion (100 ml per vial) Эмульсия яичного желтка (100 мл)

для селективного выделения и идентификации клинически значимых стафилококков по липазной активности и ферментации маннита
FD045 *Egg Yolk Emulsion (100 ml per vial) Эмульсия яичного желтка (100 мл)

MacConkey Agar w/o CV, NaCl w/ Bile Salts 0,5%
Агар МакКонки без кристаллвиолета и NaCl, с 0,5% желчных солей

Является модификацией агара M082 , он содержит соли желчных кислот и уменьшенное количество агар-агара. На этой дифференциальной среде подавляется роение большинства штаммов протеев, что значительно облегчает выделять кишечные бактерии. Она особенно полезна для посевов мочи, так как в ней, наряду с оппортунистическими грамположительными бактериями, может содержаться большое количество протеев.

Для выделения и дифференциации ферментирующих и не ферментирующих лактозу кишечных бактерий; готовят без добавления кристаллвиолета, поэтому она имеет меньшую селективность, по сравнению с оригинальным агаром МакКонки

в качестве селективной среды используют для выделения клинически значимых культур стафилококков
FD045 *Egg Yolk Emulsion (100 ml per vial) Эмульсия яичного желтка (100 мл)

в качестве селективной среды используют для выделения и предварительной идентификации клинически значимых культур стафилококков

Агар является селективной средой, которую используют для выделения таких грамположительных микроорганизмов, как стафилококки и стрептококки.

используют в качестве среды обогащения для выделения стафилококков из обильно контаминированного материала

используют в качестве селективной среды для выделения и тестирования клинически значимых стафилококков

с добавками рекомендуют для выделения и подсчета коагулазоположительных стафилококков из пищевых продуктов
FD045 *Egg Yolk Emulsion (100 ml per vial) Эмульсия яичного желтка (100 мл)
FD052 Теллурит калия 1% раствор (5 флакончиков по 10 мл)

для количественного определения коагулазоположительных стафилококков в пищевых продуктах и другом материале (на коже, слизистых оболочках, в фекалиях, воздухе и почве)
FD052 Теллурит калия 1% раствор (5 флакончиков по 10 мл)

предназначен для оценки стерильности жидкостей, применяемых в фармацевтическом производстве (методом растворения – MFT)

с добавлением теллурита калия позволяет раньше выявлять колонии коагулазо- и маннитположительных Staphylococcus aureus
FD052 Теллурит калия 1% раствор (5 флакончиков по 10 мл)

Роантри и др. Представили среду для выделения бета-гемолитических стрептококков группы А. Среда, обогащенная дрожжевой нуклеиновой кислотой и мальтозой, способствовала увеличению размера колоний и повышению ясности и резкости гемолитических зон, продуцируемых этими организмами. Селективный агар Streptococcus — это селективная среда, рекомендованная для использования при первичной изоляции видов Streptococcus группы A (S. pyogenes ) из оральной культуры и респираторных образцов. Он разработан для подавления грамотрицательных бактерий и стафилококков, что позволяет изолировать, субкультивировать и идентифицировать патогенные стрептококки, включая бета-гемолитические стрептококки и S. pneumoniae .

Состав

Ингредиенты

Грамм / л

Пептический перевар соевой муки

Конечный pH 7,3 +/- 0,2 при 25ºC.

Принцип

Питательный источник органического азота, особенно аминокислот и длинноцепочечных пептидов, необходимых для роста бактерий, обеспечивается комбинацией казеина и соевых пептонов. Эта комбинация делает среду очень питательной. Хлорид натрия поддерживает осмотическое равновесие среды. Рибонуклеиновая кислота и мальтоза усиливают гемолиз. Добавка с овечьей кровью (5%) обеспечивает дополнительные факторы роста для требовательных микроорганизмов и помогает в определении гемолитических реакций. Селективные агенты, такие как неомицин и полимиксин B, добавляются для подавления комменсальной микрофлоры полости рта, включая колиформные бактерии, стафилококки, микрококки, гемофильные бактерии и виды Neisseria .

Приготовление селективного агара для стрептококков

  1. Добавьте компоненты, кроме овечьей крови, раствора мальтозы и антибиотиков, в дистиллированную / деионизированную воду и доведите объем до 930,0 мл.
  2. Тщательно перемешайте.
  3. Слегка нагрейте и доведите до кипения.
  4. Автоклав в течение 15 минут при давлении 15 фунтов на кв. Дюйм – 121 ° C.
  5. Остудить до 45–50 ° C.
  6. Добавьте стерильную овечью кровь, стерильный раствор мальтозы и стерильный ингибитор антибиотиков с соблюдением правил асептики.
  7. Тщательно перемешайте.
  8. Разлить по стерильным чашкам Петри или разлить по стерильным пробиркам.

Результат и интерпретация

  • После 18–48 ч инкубации в атмосфере, обогащенной диоксидом углерода, на чашках видны изолированные колонии в областях с штрихами и сплошной рост в областях с сильным посевом.
  • Стрептококки группы А (S. pyogenes ) выглядят как полупрозрачные или непрозрачные, от белого до серого, небольшие (1-2 мм) колонии, окруженные зоной бета-гемолиза.
  • Точечные или очень маленькие колонии альфа-, негемолитических или других бета-гемолитических стрептококков могут расти в небольшом количестве.
  • Виды Neisseria , стрептококки viridans, стафилококки, грамотрицательные палочки и большинство бета-гемолитических стрептококков, кроме групп A и B, ингибируются в среде.

Использование

  • Селективный агар Streptococcus Selective Agar предназначен для первичной изоляции стрептококков группы A из респираторных источников.
  • Его также можно использовать для изоляции всех видов Streptococcus , включая стрептококки групп A (S. pyogenes ), B (S. agalactiae ), C, D, F, G и S. pneumoniae , особенно из респираторных образцов.

Ограничения

  • Могут встречаться некоторые штаммы стрептококков группы А (S. pyogenes ), которые плохо растут на этой среде; природа образцов и физиологическое состояние организмов могут влиять на восстановление желаемых видов, а также изменять эффекты ингибирующих характеристик этой среды. Следовательно, рекомендуется проводить исследования неселективного контроля и сравнивать их с селективной средой для получения дополнительной информации и обеспечения оптимального восстановления любых потенциальных патогенов.
  • Для окончательного подтверждения рекомендуются дополнительные биохимические тесты и серологические процедуры.
  • Следует понимать, что организмы, обычно чувствительные к антимикробному агенту в селективной среде, могут быть полностью или только частично ингибированы в зависимости от концентрации агента, характеристик штамма микробов и количества организмов в посевном материале. Организмы, которые обычно устойчивы к противомикробным препаратам, не должны подавляться. Следовательно, культуры образцов, выращенных на селективных средах, следует сравнивать с образцами, выращенными на неселективных средах, чтобы получить дополнительную информацию и помочь гарантировать восстановление потенциальных патогенов.
  • Было показано, что на гемолитические реакции некоторых штаммов стрептококков группы D влияют различия в крови животных. Такие штаммы являются бета-гемолитическими на агаре с кровью лошади, человека и кролика и альфа-гемолитиками на агаре с овечьей кровью.
  • Известно, что атмосфера инкубации влияет на гемолитические реакции бета-гемолитических стрептококков. Для оптимальной производительности инкубируйте базовую среду кровяного агара при повышенном уровне CO2 (5–10%) в соответствии с установленными лабораторными процедурами.

Оформите заявку на сайте, мы свяжемся с вами в ближайшее время и ответим на все интересующие вопросы.

Читайте также: