Стафилококк на хью лейфсона
Обновлено: 19.04.2024
Инфекции золотистого стафилококка (Staphylococcus aureus): диагностика, лечение, профилактика
Представители этого рода — неспорообразующие неподвижные грамположительные кокки, формирующие при росте колонии в виде виноградной грозди (кластера) и входящие в состав нормальной микрофлоры кожного покрова животных и человека.
Стафилококки — представители семейства Micrococcaceae. Существует свыше 26 видов стафилококков, но лишь некоторые из них представляют угрозу для здоровья человека. Самым опасным считают золотистый стафилококк (Staphylococcus aureus), отличающийся от остальных наличием фермента коагулазы.
Staphylococcus aureus
Этот вид долгое время считали единственным патогенным микроорганизмом в своём роде. Носительство S. aureus у человека обычно протекает бессимптомно; его обнаруживают у 40% здорового населения.
Обычно он локализуется на слизистой оболочке носа, коже подмышечной области и промежности.
Патогенез инфекции золотистого стафилококка (Staphylococcus aureus)
Коагулаза, продуцируемая Staphylococcus aureus, катализирует реакцию превращения фибриногена в фибрин и помогает микроорганизму образовывать защитный барьер. Кроме того, наличие рецепторов к поверхностным структурам клеток хозяина и матричным белкам (например, фибронектину, коллагену) обусловливает возможность адгезии возбудителя.
Он вырабатывает экстрацеллюлярные лизирующие ферменты (липазу), разрушающие ткани и способствующие инвазии. Некоторые штаммы продуцируют сильнейший экзотоксин, вызывающий синдром токсического шока. Выделяемые бактерией энтеротоксины могут быть причиной диареи.
Клиническая значимость золотистого стафилококка (Staphylococcus aureus)
Staphylococcus aureus вызывает различные заболевания. Кожные инфекции возникают в условиях повышенной температуры и влажности, а также в связи с нарушением целостности кожного покрова при некоторых заболеваниях (экзема и др.), хирургических операциях, инъекциях или внутривенной катетеризации. Даже на здоровой коже может развиться поверхностная пиодермия (импетиго), которая затем передаётся от человека к человеку.
Пневмонию, вызванную S. aureus, наблюдают достаточно редко (в большинстве случаев в качестве осложнения гриппа). Инфекция быстро профессирует (часто наблюдают образование полостей или каверн); характерен высокий уровень смертности. Быстрое течение свойственно и стафилококковому эндокардиту, возникающему при неправильном подборе антибиотиков или вследствие микробной колонизации внутривенных устройств. Заболевание часто приводит к смерти пациента. Кроме того, S. aureus — наиболее распространённая причина остеомиелита и септического артрита.
Лабораторная диагностика золотистого стафилококка (Staphylococcus aureus)
• Бактериологическое исследование: S. aureus — грамположительные кокки, располагающиеся в микропрепарате в виде виноградной грозди. Быстро растут на большинстве питательных сред. Выдерживают высокие концентрации солей, поэтому диагностическая среда может быть приготовлена с учётом этой особенности микроорганизма.
• Изучение биохимических свойств: большинство штаммов S. aureus разлагают маннитол, поэтому добавление его и характерного красителя помогает идентифицировать субкультуру бактерий. Продуцируют коагулазу, ДНКазу, каталазу.
• Типирование S. aureus с помощью набора типовых стафилококковых бактериофагов или методом рестрицирования ДНК.
Чувствительность золотистого стафилококка (Staphylococcus aureus) к антибиотикам
Изменение чувствительности S. aureus к антибиотикам можно считать настоящим пособием по антимикробной химиотерапии. Сначала против золотистого стафилококка был в полной мере эффективен бензилпенициллин, но затем возникли штаммы, способные вырабатывать бета-лактамазы. Со временем они стали преобладать над всеми остальными. С внедрением в клиническую практику метициллина и родственных ему лекарственных средств (флуклоксациллина) именно они стали препаратами выбора и в настоящее время остаются таковыми при наличии чувствительных штаммов.
Позже возникли штаммы золотистого стафилококка, устойчивые к действию метициллина. Их резистентность обусловлена геном тесА+, кодирующим белки со сниженным сродством к пенициллинам. Некоторые из устойчивых штаммов способны вызвать эпидемические вспышки заболевания, для борьбы с которыми применяют ванкомицин и тейкопланин.
В настоящее время обнаруживают всё больше микроорганизмов со средней устойчивостью (или гетерорезистентностью) к гликопептидам. Описаны случаи полной гликопептидной резистентности у некоторых штаммов, обусловленной наличием генов vanA+ и vanB+ заимствованных у энтерококков.
Другими эффективными препаратами считают линезолид, аминогликозиды, эритромицин, клиндамицин, производные фузидовая кислота, хлорамфеникол и тетрациклин.
В отношении метициллинчувствительных штаммов активны цефалоспорины первого и второго поколения. Производные фузидовой кислоты применяют при комбинированной терапии инфекционных заболеваний костей и суставов. Лечение должно сопровождаться обязательным проведением теста на чувствительность к антимикробным препаратам.
Профилактика заболеваний вызванного золотистым стафилококком (Staphylococcus aureus)
Передача инфекций, вызываемых Staphylococcus aureus, происходит посредством аэрозольного и контактного механизма. Носителей или лиц, заражённых штаммами, устойчивыми к метициллину и гликопептидам, необходимо изолировать в отдельные боксы и соблюдать меры предосторожности во избежание раневого или энтерального проникновения бактерий.
Следует помнить, что медперсонал может стать носителем инфекции и способствовать её распространению в лечебном учреждении. Именно поэтому всем работникам больницы рекомендовано применение местных растворов мупироцина и хлоргексидина.
Редактор: Искандер Милевски. Дата обновления публикации: 18.3.2021
Состав среды предложен Hugh и Leifson для дифференциации стафилококков от микрококков по признаку окислительного или ферментативного метаболизма углеводов грамотрицательных кишечных бактерий.
Среда содержит высокую концентрацию углеводов и низкую концентрацию перевара животной ткани, чтобы избежать возможности использования аминокислот аэробными организмами с продукцией кислоты, которая нейтрализует щелочные продукты реакции организмов, окисляющих глюкозу. Низкая концентрация агар-агара позволяет наблюдать подвижность микроорганизмов.
Обе пробирки засевают испытуемой культурой, после чего в одну из них для создания анаэробных условий вносят стерильное вазелиновое масло слоем толщиной около 25 мм и инкубируют обе пробирки при 37ºС. Окислительные организмы вырабатывают кислоты в негерметичной пробирке с небольшим или отсутствием роста, кислоты не образуются в загерметизированной пробирке, в то время как ферментативные организмы производят кислоту в обоих видах пробирок. Образование кислоты в пробирке сопровождается изменением цвета индикатора в среде с лилового на желтый.
Пептический перевар животной ткани и дрожжевой экстракт служат источником органического азота, углерода, витаминов и других важнейших питательных веществ. Высокая концентрация соли придает селективные свойства среде, таким образом она может использоваться для идентификации патогенных и галофильных организмов. Проволочной петлей наносят исследуемую культуру на две пробирки, в одной из них создают анаэробные условия для культивирования. Появление желтого окрашивания будет свидетельствовать о выработке кислоты при расщеплении глюкозы.
Стафилококки закисляют среду ферментативно по всей глубине среды в аэробной негерметичной и анаэробной герметичной пробирках. Микрококки либо не продуцируют кислоту, либо только путем окисления в верхней части аэробной пробирки
Технические характеристики
Hugh Leifson Glucose Medium (Среда Хью-Лейфсона с глюкозой)
Эту среду рекомендуют для дифференциации стафилококков и микрококков по их способности к ферментации глюкозы в анаэробных условиях.
Состав**:
Ингредиенты
грамм/литр
Пептический перевар животной ткани
Конечное значение рН (при 25°С) 7,4 ± 0,2
** Состав выверен и доведен до соответствия необходимым параметрам
Приготовление:
Размешать 45,52 г порошка в 1000 мл дистиллированной воды. Прокипятить для полного растворения частиц. Разлить в две пробирки (для ферментации в аэробных и анаэробных условиях). Стерилизовать автоклавированием при 1,1 атм (121°С) в течение 15 мин. Остудить пробирки в вертикальном положении.
Принцип и оценка результата:
Этот агар готовят согласно рекомендациям FDA (1) и используют для дифференциации стафилококков и микрококков. Обе пробирки засевают испытуемой культурой, после чего в одну из них для создания анаэробных условий вносят стерильное вазелиновое масло слоем толщиной около 25 мм и инкубируют обе пробирки при 37°С. Образование кислоты в пробирке сопровождается изменением цвета индикатора в среде с лилового на желтый.
Пептический перевар животной ткани и дрожжевой экстракт служат источником органического азота, углерода, витаминов и других важнейших питательных веществ. Высокая концентрация соли придает селективные свойства среде. Глюкоза служит ферментируемым субстратом.
Контроль качества:
Внешний вид порошка:
Гомогенный сыпучий зеленовато-желтый порошок.
Плотность готовой среды:
Образуется полужидкая среда, соответствующая по плотности 0,3%-ному агаровому гелю.
Цвет и прозрачность готовой среды:
Готовая среда имеет лиловую окраску, прозрачна или слегка опалесцирует, если в пробирках формируется столбик геля.
Читайте также: