Стафилококки дифференциация патогенных и непатогенных стафилококков
Обновлено: 28.03.2024
Аэробы или факультативные анаэробы. Вызывают: абсцессы, экземы, отиты, маститы, эндометриты, циститы, пневмонии.
В лабораторию отправляют: раневой экссудат, гной абсцессов, ран, молоко при маститах, выделения из половых органов при эндометрите, кровь из яремной вены при септицемии.
Морфология: Гр +, Споры-, Капсула-, Подвижность. Кокки в форме грозди винограда
Рост: солелюбивые – желточно-солевой агар Чистовича, МПБ – обильное помутнение и слизистый осадок. МПА – крупные S-колонии лимонно-желтого цвета за счет каротиноидного пигмента, Кровяной агар – зона β-гемолиза
Биохимические свойства: ферментирует лактозу, сахарозу; выделяет NH4, H2, лецитиназа+(посев на желточную среду), ДНК-зная акт.+, плазмокоагуляция
Биопроба: 1)Дерматонектротическая– кроликам в ухо внутрикожно 0,2мл – 24-48 часов – гибель; 2)На котятах - спаивают 10-15мл фильтрата с молоком – рвота, понос, гибель; 3)Летальная проба-кроликам в/в гибель; 4)Вирулентность для мышей-подкожно, абсцесс, гибель.
Непатогенные: лецитиназа-, плазмокоагуляция-, гемолиз-, манит-, пробы-, фаготипирование-, ДНК-аза-, пигментирование-, у ПАТОГЕННЫХ ВСЕ ЭТИ пункты +
54) Бактериологическая диагностика рожи свиней. Специфическая профилактика заболевания.
Болеют свиньи(3месяца-год), ягнята(3нед и) +человек. Острая септическая форма – сине-красные пятна на коже, при хронической форме – в суставах, на клапанах сердце. Молниеносная форма – удушье, отек легких, гибель через сутки.
В лабораторию: кусочки паренхиматозных органов, трубчатая кость, сердце, сыворотка крови.
Морфология: Гр +, Споры-, Капсула- Подвижность-. Прямые или слегка изогнутые палочки располагаются попарно, одиночно и в виде скоплений. Микроаэрофил.
Рост: МПБ – слабое помутнение, пылевидный осадок “муаровые волны”; МПЖ – ершик, МПА – S-колонии, росинчатые, прозрачные, иногда с сероватым оттенком. Элективная среда – Сент-Иваньи.
Биохимические свойства: глюкозу, лактозу, галактозу – до газа и к-ты, H2S+, Каталаза-, Индол-
Биопроба – мышам в/м 0,1-0,2мл, голубям в/м 0,2-0,3мл, смотрим 6 суток
Серодиагностика: 1)РА на стекле (противорожистая рожистая сыворотка + центрифугированная культура с 1% формальдегида) 2)МФА для выявления возбудителя в мазках из патматериала с люминесцирующей сывороткой.
Профилактика: живая вакцина из штамма (не образующего H2S) ВР-2, ассоциированная вакцина против рожи и чумы свиней.
55) Лабораторная диагностика листериоза: бактериологическая и серологическая. Специфическая профилактика заболевания.
Listeriamonocytogenes.Поражения ЦНС, слепота, вертячка у овец и коз , заболевания половых органов, маститы, аборты, наблюдаются признаки септицемии, протекает остро и хронически.
В лабораторию: труп целиком, голова (для исследования мозга), паренх органы, аборт-плод, плод оболочки, молоко при маститах, истечение из половых органов, кровь.
Морфология: Гр +, Споры-, Капсула-, Подвижность-(+тольков молодой культуре при 20C). Палочки - поодиночке, парами, в виде палисада //// или V. Психрофил
Рост: Жидкие– едва заметное помутнение, слизистый осадок, плотные – S-колонии, росинчатой формы. Печеночные среды, глюкозные, Элективная среда с теллуритом калия и глицерином. Кровяной агар – зона β-гемолиза.
Биохимические свойства: МПЖ не разжижает, Молоко не изменяет, H2S-, Каталаза+, Салицин+, обесцвечивает краски
Биопроба: 1)конъюктивальная проба на морских свинках-развивается кератоконъюктивит; 2)дерматонекротическая проба-кроликам или морским свинкам внутрикожно в ухо-развивается очаговый некроз; 3)На мышатах сосунках-п/к гибел
Серодиагностика: РСК и РА с АГ 1 и 2 серогрупп, идентификация –РА на стекле. Экспресс-МФА
Профилактика – сухая живая вакцина из штамма АУФ (авирулентная ослабленная УФ)
Патогенные стрептококки – возбудители гнойно-воспалительных процессов различной локализации (ангина и скарлатина у человека, мыт лошадей, маститы у животных, стрептококковая септицемия птиц, кроликов, стрептококковый полиартрит), а также смешанных и вторичных инфекций (абсцесс, фурункул, нефрит, пиемия, сепсис и др.). Фекальные стрептококки могут вызвать воспаление кишечника и мочеполовых путей. При накоплении в пищевых продуктах стрептококки вызывают пищевые токсикозы (токсикоинфекции).
КЛАССИФИКАЦИЯСем. Streptococcaceae, Род. Streptococсus, включает 17 серологических групп по Лендсфилд (A,B,C,D,Eи т.д.)
Важнейшие виды:
гр. А. Str.pyogenes(гнойно-воспалительные процессы, ангина)
гр. B.Str. agalactiiae(мастит коров);
гр.С. Str. equi(мыт у лошадей).
гр.DEnterococcusfaecalis(энтероколиты, циститы),
без группы Str. pneumoniae(диплококковая септицемия, пневмонии)
Патогенез и факторы вирулентности:
Многие патогенные стрептококки относятся к нормальной микрофлоре кожи и слизистых оболочек и проявляют свою патогенность при снижении общей резистентности. Образуют экзотоксины – гемолизин, лейкоцидин, летальный некротоксин; продуцируют ферменты вирулентности – гиалуронидазу, фибринолизин, ДНК-азу, РНК-азу, нейрамидазу и др. Образуют термостабильные эндотоксины.
Методы диагностики:
БАКТЕРИОЛОГИЧЕСКИЙ МЕТОД:
Материал для исследования:
при жизни – гной, молоко, слизь, соскобы эпителия, раневой экссудат, моча, кровь, кал; посмертно – пораженные органы.
Биохимические свойства: Стрептококки ферментируют углеводы – глюкозу, сахарозу, маннит и др. (образуют кислоту без газа); не обладают протеолитическими свойствами; на кровяном МПА вызывают бета-гемолиз (прозрачная зона) или альфа-гемолиз (зеленоватая зона).
ДИФФЕРЕНЦИРУЮЩИЕ ТЕСТЫ:
Применяются особые биохимические тесты для дифференциации отдельных видов стрептококков:
для Str.pyogenes– гидролиз гиппурата натрия;
для Str.agalactiae– свёртывание молока иCAMP-тест на скрытую гемолитическую активность;
для Str.equi– отсутствие роста на среде с добавлением мытного анатоксина;
для Str.pneumoniae– лизис 10%-й желчью;
для патогенных энтерококков– редукция(обесцвечивание)метиленового молока, рост после прогревания при 60 о С и т.д.
БИОПРОБА: заражают подкожно или в/б белых мышей, кроликов, наблюдают гибель. Биопроба не всегда показательна.
СЕРОЛОГИЧЕСКИЕ МЕТОДЫ: Реакция преципитации в капиллярах для определения серологической группы по Лендсфилд. РА.
БИОПРЕПАРАТЫ ДЛЯ ЛЕЧЕНИЯ И ПРОФИЛАКТИКИ:
Мытный антивирус для лошадей;
Полужидкая формолвакцина против стрептококкоза;
Поливалентная ассоциированная формолвакцина против сальмонеллёза, пастереллёза и диплококковой септицемии молодняка.
Патогенность. К стафилококкам чувствительны лошади, крупный и мелкий рогатый скот, свиньи, из экспериментальных животных - кролики, белые мыши, котята.
Главный патогенный представитель рода, Staphylococcus aureus, является причиной широкого диапазона больших и малых инфекций человека и животных (табл. 2).
Коагулазо-негативные стафилококки являются комменсалами кожи, но они в настоящее время признаются в качестве важных условно-патогенных возбудителей. Они могут вызвать инфекции, сопутствующие протезам, катетерам и имплантатам (Staph. epidermidis), а также инфекции мочевыводящих путей
Обычно стафилококки также встречаются и у домашних животных, включая животных на фермах, которые используются для производства молока, например - у рогатого скота, овец и коз. Маститы, вызванные Staph. aureus - общее и дорогостоящее осложнение доения. Человек и животные могут заражать пищевые продукты, что нередко приводит к стафилококковым пищевым отравлениям.
Табл.2. стафилококковые инфекции
Септицемия Остеомиелит Пневмония
Синдром обваренной кожи
Пемфигус (пузырчатка новорожденных)
Синдром токсического шока
** - при постоянном амбулаторном перитонеальном диализе
Стафилококки проникают в организм человека через кожные покровы и слизистые оболочки воздушно-капельным и воздушно-пылевым путями. Заражение происходит обычно не одним, а двумя и более разновидностями.
В патогенезе заболеваний, вызываемых стафилококками, определенную роль играют как экзотоксин, так и бактериальные клетки.
В развитии стафилококковых заболеваний имеет значение и состояние аллергии, которая в ряде случаев является причиной очень тяжелых, не поддающихся лечению клинических форм стафилококковой инфекции. Практически все органы и ткани человеческого организма могут быть поражены воспалительными процессами, обусловленными стафилококками.
Патогенные стафилококки у человека вызывают гидроадениты, абсцессы, панариции, блефариты, фурункулез, карбункулез, периоститы, остеомиелиты, фолликулиты, сикозы, дерматиты, экземы, хронические пиодермии, перитониты, менингиты, аппендициты, холециститы, пневмонии, энтероколиты, пиомиозиты, конъюнктивиты и стафилодермию у новорожденных.
Развитию гнойничковых поражений кожи и фурункулеза способствуют сахарный диабет, фенилкетонурия, авитаминозы, алиментарная дистрофия, потливость, мелкие травмы кожи профессионального характера, раздражение ее химическими веществами.
В ряде случаев стафилококки обусловливают вторичные заболевания при оспе, гриппе, раневых инфекциях, а также послеоперационные нагноения. Особенно грозными заболеваниями являются стафилококковый сепсис и стафилококковые пневмонии у детей.
При употреблении пищевых продуктов (сыр, творог, молоко, торты, пирожные, мороженое и др.), обсемененных патогенными стафилококками, возникают токсикоинфекции. Наиболее быстро токсинообразование происходит в молоке, молочной смеси, заварном креме, мясном фарше, рыбных консервах и других продуктах.
Стафилококки играют большую роль при смешанных инфекциях: их обнаруживают вместе со стрептококками при раневых инфекциях, дифтерии, туберкулезе, актиномикозе, ангинах, гриппе, парагриппозных и других острых респираторных заболеваниях.
В связи с широким использованием антибактериальных препаратов и особенно антибиотиков, обусловивших селекцию резистентных штаммов, произошли значительные изменения тяжести и степени распространенности стафилококковых поражений. Во всех странах мира отмечается рост числа этих заболеваний, внутрибольничных заражений в акушерских, хирургических и детских стационарах, увеличение носительства стафилококков среди медицинского персонала и населения. Регистрируются случаи заражения стафилококками детей с развитием у них везикуло-пустулезной стафилодермии, пемфигуса, инфильтратов, абсцессов, конъюнктивитов, назофарингитов, отитов, пневмоний и других заболеваний.
Установлено быстрое образование резистентности стафилококков к химиопрепаратам и антибиотикам, обусловленной распространением среди стафилококков R-плазмид, обладающих трансмиссивностью. Высокая концентрация лекарственных препаратов в организме людей привела к существенному нарушению микрофлоры и формированию устойчивых штаммов, обладающих более выраженной вирулентностью, а также L-форм стафилококков.
Здоровое носительство. Staph. aureus вегетирует на слизистой носа у 30-40 % здоровых людей; обычно колонизирована промежность. Микробы распространяются из этих участков в окружающую среду руками, носовыми платками, одеждой и пылью, состоящей из чешуек кожи и ворсинок одежды. Некоторые носители диссеминируют исключительно большое количество кокков, сопоставимое с количеством, распространяемым больными с большими поверхностными повреждениями или инфекциями дыхательных путей. В течение первого-второго дней жизни большинство младенцев колонизируется стафилококками, приобретенными от их матерей, медсестер или окружающей среды. У младенцев, рожденных в больнице, нос, пупочная культя и влажные области кожи обычно колонизованы Staph. aureus. Микробоносительство в полости носа у младенцев, как и у взрослых, является обычно очень длительным. Когда определенный штамм Staph. aureus колонизирует места носительства, он может персистировать в этих участках в течение многих месяцев или нескольких лет. Довольно часто происходит передача стафилококков от младенцев кормящим матерям, у которых в этих случаях развиваются маститы.
Иммунитет. Невосприимчивость при стафилококковых заболеваниях связана с фагоцитозом, наличием антител (антитоксины, преципитины, опсонины, агглютинины).
Воспалительный процесс обусловливает задержку стафилококков на месте внедрения и затрудняет их распространение по всему организму. В очаге воспаления стафилококки подвергаются фагоцитозу. Нейтрализация стафилококкового токсина антитоксином является важным моментом в общем комплексе иммунитета. Вследствие проницаемости капилляров антитоксин из крови проникает в зону воспаления и нейтрализует образуемый стафилококками токсин. Таким образом, фагоцитарный и гуморальный факторы находятся в тесном единстве их защитного действия.
Характерным для стафилококковых заболеваний считают склонность их к вялому хроническому течению и рецидивированию. Эта особенность позволяет утверждать, что постинфекционный иммунитет при стафилококковых поражениях характеризуется слабой напряженностью и непродолжительностью
Одной из причин низкого уровня иммунитета является наличие в органах и тканях людей общих со стафилококками антигенов (антигены мимикрии). Это обусловливает состояние иммунологической толерантности к стафилококкам и их токсинам, что благоприятствует размножению возбудителя в организме больных.
Лечение. При стафилококковых поражениях применяют антибиотики и сульфаниламидные препараты, противостафилококковый иммуноглобулин или противостафилококовую плазму.
При лечении больных стафилококковыми инфекциями следует учитывать необходимость устранения интоксикации и повышения иммунобиологических защитных сил организма (введение глюкозы, плазмы, переливание крови, сердечные средства).
При хронических нагноительных стафилококковых процессах показана специфическая терапия: стафилококковая поливалентная вакцина, стафилоккковый антифагин, стафилококковый анатоксин, аутовакцина, а также дифаг, содержащий стафилококковый и стрептококковый фаги.
Профилактика. К общим мероприятиям относятся: оздоровление условий труда и быта, устранение витаминной недостаточности, предупреждение травматизма, потливости, строгое соблюдение санитарно-гигиенических требований в родильных домах, хирургических отделениях, детских учреждениях, на производстве, особенно на консервных заводах, содержание в чистоте тела, частое мытье рук теплой водой с мылом.
В больничных помещениях (хирургические отделения, родильные дома) необходимо систематически производить дезинфекцию и бактериологическое обследование персонала на носительство стафилококков.
На промышленных предприятиях для профилактики пиодермии применяют защитные мази и пасты. Для обработки микротравм, кроме спиртовых растворов йода и анилиновые красителей, широко используют жидкости, высыхающие в течение 1-2 мин и образующие эластическую пленку, предохраняющую раневую поверхность от загрязнения и инфицирования. При ожогах больных содержат в мягких (пластических) изоляторах, защищающих поврежденные участки кожи от проникновения в нее микрофлоры внешней среды
В некоторых случаях рекомендуют специфическую профилактику путем иммунизации стафилококковым анатоксином лиц, подвергающихся риску травматизма или инфицированию стафилококками, например, иммунизацию женщин перед родами.
3. Коагулазо-негативные стафилококки
Коагулазо-негативные стафилококки включают большую группу видов, которые обычно обнаруживаются на покровах здоровых людей, у которых они редко являются причиной инфекции, кроме иммунокомпрометированных лиц. Выделяют более 20 видов коагулазо-негативных стафилококков, но только несколько видов обычно связывают с инфекциями у людей. Staph. epidermidis выделяют примерно в 75 % всех клинических изолятов, что, вероятно, отражает его превалирование в микрофлоре здоровой кожи. Большинство остальных идентифицируется как Staph. hominis, Staph.simulans и Staph. haemolyticus Один вид, Staph. saprophyticus, является частой причиной острого цистита у молодых женщин, но редко участвует в инфекционных процессах иной локализации.
Коагулазо-негативные стафилококки морфологически подобны Staph. Aureus, методы их выделения - те же. Колонии обычно не пигментированы, и они могут быть дифференцированы от Staph. aureus не только их неспособностью коагулировать плазму, но по другим признакам. Созданы различные тест-системы для идентификации коагулазо-негативных штаммов стафилококков, но они используются редко.
Поскольку эти микроорганизмы обычно загрязняют клинические образцы и лабораторные культуры, нужно правильно оценивать значение их выделения, особенно из поверхностных участков (так как они могут быть просто колонизующими) и от в норме стерильного исследуемого материала (крови или цереброспинальной жидкости).
Коагулазо-негативные стафилококки - условно-патогенные микроорганизмы, вызывающие инфекции у лиц со сниженной резистентностью, часто при колонизации пластиковых материалов. Они вызывают особые проблемы в кардиохирургии; у пациентов с вентрикуловенозным ликворным шунтом, при непрерывном амбулаторном перитонеальном диализе и у иммунокомпрометированных лиц. Появление коагулазо-негативных стафилококков в качестве самостоятельных возбудителей связано с широким использованием имплантатов типа ликворных шунтов, внутрисосудистых зондов и канюль, сердечных клапанов, кардиостимуляторов, искусственных суставов, сосудистых трансплантаты и мочевых катетеров.
Для дифференциации патогенных и непатогенных стафилококков используют специальную селективную среду. Тест основан на бактериостатическом действии кристаллвиолета: к 1 л 3,5%-ого МПА добавляют 3,3 мл 0,1%-ного кристаллвиолета и сразу разливают асептично в чашки Петри или в пробирки (скошенный агар). Растет патогенный стафилококк, его колонии фиолетового или оранжевого цвета. Непатогенные стафилококки не растут.
Таким образом, заключительный бактериологический диагноз основывается на учете описанных характерных морфологических, тинкториальных, культурально-биохимических и патогенных свойств выделенной из исследуемого патологического материала культуры стафилококка.
Для патогенных стафилококков характерны:
2) ферментация маннита;
3) ДНК-азная активность;
4) рост в среде с добавлением кристаллвиолета;
5) реакция плазмокоагуляции;
6) некротизирующая способность;
7) наличие летального токсина.
Факторы патогенности
Как упоминалось ранее, патогенные стафилококки синтезируют и секретируют высокоактивные экзотоксины и ферменты. Среди экзотоксинов выделяют четыре типа гематоксинов (стафилолизинов), лейкоцидин и энтеротоксины. Эндотоксины стафилококков обладают высокой термостабильностью (при 100°С выживают больше 30 мин) и выраженным энтеротоксическим действием. МПЖ и свернутую сыворотку они разжижают, молоко свертывают и пептонизируют.
К гематоксинам относят альфа-, бета-, гамма- и дельта-гемолизины. Все стафилококковые гемолизины – мембранотоксины: они способны лизировать мембраны клеток эукариотов.
Альфа-гемолизинвызывает лизис эритроцитов овец, свиней, собак, обладает летальным и дерманекротическим действием, разрушает лейкоциты, агрегирует и лизирует тромбоциты.
Бета-гемолизинлизирует эритроциты человека, овец, крупного рогатого скота, летален для кроликов.
Гамма-гемолизинобнаруживают у штаммов, выделенных от человека. Его биологическая активность низка.
Дельта-гемолизинвызывает лизис эритроцитов человека, лошадей, овец, кроликов, разрушает лейкоциты.
Лейкоцидин– негемолитический экзотоксин, вызывает дегрануляцию разрушение лейкоцитов.
Энтеротоксины – термостабильные полипептиды, образуются при размножении энтеротоксигенных штаммов стафилококков в питательных средах, продуктах питания (молоко, творог и др.), кишечнике. Устойчивы к действию пищеварительных ферментов. Известно шесть антигенных вариантов. Энтеротоксины вызывают пищевые токсикозы человека, к ним чувствительны кошки, особенно котята, и щенки собак.
К факторам патогенности стафилококков относят также и выделяемые ими ферменты(коагулаза, гиалуронидаза, фибринолизин, ДНК-аза, лицетовителлаза и др.).
Антигенная структура
У стафилококков лучше всего изучены антигены клеточной стенки: пептидогликан, тейхоевые кислоты и белок А. Пептидогликан – общий видовой для стафилококков антиген. Тейхоевые кислоты – видоспецифические полисахаридные антигены. S. aureusсодержит рибитолтейхоевую кислоту (полисахарид А), S. epidermidisглицеринтейхоевую кислоту, называемую полисахаридом В. Протеин А обнаружен у золотистого стафилококка; представляет собой низкомолекулярный белок, имеющий свойство соединяться сFc-фрагментамиIgGмлекопитающих. Штаммы, продуцирующие большое количество белка А, обладают более высокой резистентностью к фагоцитозу. У мукоидных штаммов золотистого стафилококка выявлен также капсульный полипептидный антиген.
Грамположительные кокки представлены стафилококками и стрептококками — основными возбудителями гнойно-воспалительных поражений у человека.
Отличительные особенности стафилококков и стрептококков:
• отсутствие способности к спорообразованию,
• сферическая форма,
• положительная окраска по Граму.
Стафилококки. Особенности стафилококков. Отличительные особенности стафилококков
Стафилококки относят к отделу Firmicutes, семейству Microсоссасеае, роду Staphylococcus. Стафилококки распространены повсеместно; колонизируют кожные покровы и поверхности слизистых оболочек человека и животных. Первых представителей рода выделили Кох (1878) и Пастер (1880) из очагов гнойных поражений у человека.
Стафилококки представлены неподвижными клетками диаметром 0,5-1,5 мкм (рис. 12-1). В мазках стафилококки расположены одиночно, парами или гроздьями (рис. 12~2).
Свойство стафилококков образовывать скопления, напоминающие гроздья винограда в результате деления во взаимно перпендикулярных плоскостях, определило их название [от греч. staphyle, виноградная гроздь, + kokkos, зерно, ягода].
Основные дифференцировочные признаки стафилококков — характерная морфология и положительная окраска по Граму. Температурный оптимум стафилококков 30-37 °С.
Образующиеся липохромные пигменты защищают бактерии от действия токсических кислородных радикалов. Стафилококки каталаза-положительны; содержат цитохромы, но обычно оксидаза-отрицательны. Стафилококки проявляют высокую биохимическую активность: восстанавливают нитраты, вырабатывают Н2S, разлагают мочевину и ферментируют многие углеводы с образованием кислоты.
Таблица 12-1. Основные инфекционные заболевания человека, вызываемые стафилококками
Антигены стафилокков
У стафилококков выделяют более 50 антигенных субстанций, разделяемых на родовые, видовые и типовые Аг. Многие стафилококки признаны аллергенами. Родовые Аг нередко способны перекрёстно реагировать с изоантигенами клеток организма человека (эритроцитов, почек и др.), что может привести к развитию аутоиммунной патологии. Видоспецифичными Аг стафилококков могут служить тейхоевые кислоты. Для S. aureus видоспецифичным Аг также является белок А. Стафилококки хорошо переносят высушивание, сохраняя вирулентность; погибают при прямом воздействии солнечного света в течение 10—12 ч. Они довольно устойчивы к нагреванию— при 70-80 X погибают за 20-30 мин, при 150 X— за 10 мин; сухой жар убивает их за 2 ч. Бактерии менее устойчивы к действию дезинфицирующих средств, но резистентны к чистому этанолу. По наличию коагулазы все стафилококки разделяют на две группы.
Среди коагулаза-положительных стафилококков поражения у человека вызывает лишь S. aureus; среди коагулаза-отрицательных видов — S. epidermidis и S. saprophyticus.
Информация на сайте подлежит консультации лечащим врачом и не заменяет очной консультации с ним.
См. подробнее в пользовательском соглашении.
Читайте также: